唾液淀粉酶活性的测定
最新唾液淀粉酶活性观察实验报告
最新唾液淀粉酶活性观察实验报告
实验目的:
本实验旨在观察并分析唾液淀粉酶对淀粉的催化活性,以及影响该酶活性的可能因素。
通过定量分析,进一步了解唾液淀粉酶的作用机制及其在生物化学领域的应用。
实验方法:
1. 材料准备:收集健康志愿者的唾液样本,准备淀粉溶液作为底物。
2. 酶活性测定:采用DNS法对唾液样本中的淀粉酶活性进行测定。
将固定量的淀粉溶液与唾液混合,分别在不同时间段(0分钟、5分钟、10分钟、15分钟、20分钟、25分钟、30分钟)取样,测定样品中的葡萄糖含量,以计算唾液淀粉酶的活性。
3. 影响因素分析:通过改变pH值、温度等条件,观察这些因素对唾液淀粉酶活性的影响。
实验结果:
1. 唾液淀粉酶活性随反应时间的延长而增强,达到一个峰值后逐渐稳定。
2. 在pH值为7左右时,唾液淀粉酶活性最高,偏酸或偏碱环境均会抑制酶的活性。
3. 温度对唾液淀粉酶活性有显著影响,最适温度为37°C,过高或过低的温度均会导致酶活性下降。
结论:
唾液淀粉酶是一种高效且特异性较强的酶,其活性受pH值和温度的影响显著。
在接近中性的pH值和人体正常体温条件下,唾液淀粉酶表现出最高的催化效率。
本实验结果对于理解唾液淀粉酶在消化过程中的作用具有重要意义,并为相关生物化学研究提供了实验数据支持。
唾液淀粉酶的纯化与活性测定实验研究
唾液淀粉酶的纯化与活性测定实验研究摘要:目的是利用基因工程将淀粉酶 (RSAA)转化为人类唾液,并利用它来代替唾液中的SAA来处理淀粉。
通过热休克法对大肠杆菌DH5进行改造,在含有卡那霉素的LB培养皿中筛选抗逆转录病毒,培养、提取、消化和质粒测序抗逆转录病毒。
重组质粒转化为大肠杆菌BL21。
用含有卡那霉素的LB培养皿筛选抗体b -ps1,培养bl-ps1。
细菌在pH值为6.8的磷酸酶缓冲液中被收集和重新激活。
顶部的浮油通过离心和超声离心来检测其淀粉的活性。
结果是,SAA cDNA的PS1原始细胞核表达载体已经建立。
RSAA可以在主BL21 (DE3)中溶解,RSAA可以有效地溶解淀粉。
结论用RSAA代替唾液中的SAA唾液淀粉是安全、方便和环保的。
关键词:唾液淀粉酶A;pET-28a质粒;淀粉ABSTRACT:The purpose is to use genetic engineering to convert amylase (RSAA) into human saliva and use it to replace SAA in saliva to treat starch. E. coli DH5 was modified by heat shock method. The antiretroviral was screened in LB culture dish containing kanamycin, and the antiretroviral was cultured, extracted, digested and plasmid sequenced. The recombinant plasmid was transformed into E. coli BL21. The antibody b-ps1 was screened by LB culture dish containing kanamycin and bl-ps1 was cultured. Bacteria were collected and reactivated in phosphatase buffer with pH 6.8. The activity of starch was detected by centrifugation and ultrasonic centrifugation. As a result, the PS1 prokaryotic expression vector of SAA cDNA has been established. RSAA can be dissolved in main BL21 (DE3), and RSAA can effectively dissolve starch. Conclusion it is safe, convenient and environmentally friendly to replace SAA salivary starch with RSAA..KEY WORDS:Salivary amylase a; PET-28a plasmid; starch影响酶反应的因素是一个重要的生物化学实验。
酶学实验实验报告唾液
一、实验目的1. 了解唾液淀粉酶的生物学特性及其在消化过程中的作用。
2. 掌握酶活性测定的基本原理和方法。
3. 通过实验观察和分析唾液淀粉酶活性受温度、pH值等因素的影响。
二、实验原理唾液淀粉酶是一种消化酶,主要存在于唾液中,负责将食物中的淀粉分解为麦芽糖,为后续消化提供能量。
酶活性是指酶催化反应的能力,受多种因素的影响,如温度、pH值、底物浓度等。
本实验通过测定不同条件下唾液淀粉酶对淀粉的分解速率,观察酶活性变化。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:- 新鲜唾液- 淀粉溶液- 碘液- pH试纸- 温度计- 烧杯- 试管- 移液器2. 实验仪器:- 恒温水浴箱- 酶标仪- 移液器四、实验步骤1. 唾液淀粉酶活性测定:(1)取两只试管,分别加入2mL淀粉溶液。
(2)用移液器取1mL唾液,加入第一只试管中,混匀。
(3)将第一只试管放入37℃恒温水浴箱中,观察淀粉分解情况。
(4)每隔5分钟,用移液器取1mL反应液,加入碘液中,观察颜色变化。
(5)记录淀粉分解所需时间。
2. 温度对唾液淀粉酶活性的影响:(1)设置不同温度(如25℃、37℃、50℃、65℃)的水浴箱。
(2)重复步骤1,观察不同温度下淀粉分解所需时间。
3. pH值对唾液淀粉酶活性的影响:(1)用pH试纸测定唾液的pH值。
(2)调整唾液的pH值至不同水平(如4、5、6、7、8、9)。
(3)重复步骤1,观察不同pH值下淀粉分解所需时间。
五、实验结果与分析1. 唾液淀粉酶活性测定:在37℃恒温水浴箱中,淀粉分解所需时间为10分钟。
2. 温度对唾液淀粉酶活性的影响:随着温度升高,淀粉分解所需时间逐渐缩短,说明唾液淀粉酶活性随温度升高而增强。
在50℃时,淀粉分解所需时间最短,说明50℃为唾液淀粉酶的最适温度。
3. pH值对唾液淀粉酶活性的影响:随着pH值升高,淀粉分解所需时间逐渐缩短,说明唾液淀粉酶活性随pH值升高而增强。
在pH值为7时,淀粉分解所需时间最短,说明pH值为7为唾液淀粉酶的最适pH值。
唾液淀粉酶活性的观察实验报告
唾液淀粉酶活性的观察实验报告摘要:唾液淀粉酶是一种能够水解淀粉质的酶,其活性可以被观察到并测量。
本实验对不同浓度淀粉溶液和唾液的淀粉酶活性进行了观察和测量,并将结果图表化。
实验结果表明,唾液对于淀粉的消化具有一定的浓度依赖性。
本实验为淀粉酶活性的研究提供了一定的参考价值。
实验目的:1.观察唾液淀粉酶的活性2.测量不同浓度淀粉溶液中唾液淀粉酶的活性实验原理:唾液中含有淀粉酶,可以将淀粉水解为葡萄糖。
水解反应需要一定的时间,根据反应物的浓度和酶的活性来决定反应的速率。
当反应物浓度大时,酶的饱和度高,反应速率也会增加。
实验步骤:1.准备不同浓度的淀粉溶液,如0.1%,0.5%和1%的淀粉溶液。
2.将淀粉溶液加入至离心管中,注入相应的唾液分别混合,并在室温下保存10分钟。
3.加入2ml的止血液,并室温下放置5分钟后停止反应。
4.将反应液室温下放置1小时,直到淀粉水解反应结束。
5.分别加入2ml的卡球蓝液,并室温下抖动管子,使卡球蓝充分混合后,观察颜色变化。
6.将各离心管中的反应液,吸取至比色皿中,并读取各样品的OD值。
实验结果:样品编号淀粉溶液浓度(%)OD值1 0.1% 0.1272 0.1% 0.1303 0.5% 0.1904 0.5% 0.1925 1% 0.2406 1% 0.241实验分析:通过实验结果可以看出,淀粉溶液浓度越高,唾液淀粉酶的活性也越高,这与理论原理相吻合。
同时,样品1和2以及样品3和4的数据相近,表明了实验具有一定的重复性。
结论:本实验通过测量唾液淀粉酶对于不同浓度淀粉溶液的消化,得出唾液淀粉酶的活性具有一定的浓度依赖性。
这为淀粉酶活性研究提供了参考价值。
自主实验——唾液淀粉酶活力的测定
五、实验操作:
1、取4个50ml的三角瓶,按下表操作: 、取4 50ml的三角瓶,按下表操作:
2、结果计算:
单位定义:1ml唾液中的淀粉酶,在37° 单位定义:1ml唾液中的淀粉酶,在37°、 30min水解淀粉10mg为 30min水解淀粉10mg为1个淀粉酶活力单位 淀粉酶活力(U)= (空白管吸光度淀粉酶活力(U)=【(空白管吸光度-测定 管吸光度)*240】 管吸光度)*240】/空白管吸光度
三、试剂:
0.16%淀粉溶液(在1000ml烧杯加入800ml的蒸 0.16%淀粉溶液(在1000ml烧杯加入800ml的蒸 馏水,加热到沸腾备用。准确称取1.6g淀粉在 馏水,加热到沸腾备用。准确称取1.6g淀粉在 50ml烧杯中,加入20ml蒸馏水调匀,转入沸水中, 50ml烧杯中,加入20ml蒸馏水调匀,转入沸水中, 一分钟后冷却,定容至1000ml。) 一分钟后冷却,定容至1000ml。) 碘液(0.1N碘贮存液:精确称取1.785g碘酸钾, 碘液(0.1N碘贮存液:精确称取1.785g碘酸钾, 碘化钾22.5g,共至于500ml烧杯中,加入蒸馏水 碘化钾22.5g,共至于500ml烧杯中,加入蒸馏水 350ml,并加入HCL4.5ml溶解候混匀,定容 350ml,并加入HCL4.5ml溶解候混匀,定容 500ml,保存在棕色瓶子中以备用。 500ml,保存在棕色瓶子中以备用。 0.1%氯化汞溶液:称取0.1g氯化汞溶于100ml水 0.1%氯化汞溶液:称取0.1g氯化汞溶于100ml水 中即可。
唾液淀粉酶活力的定量测 定
一、实验目的:
掌握定量测定唾液淀粉酶活力的方法
二、实验原理:
唾液淀粉酶酶活性的影响因素及测定方法综述
唾液淀粉酶酶活性的影响因素及测定方法综述摘要:唾液淀粉酶是唾液蛋白的重要组成部分,并且唾液淀粉酶的活性是反映自主神经系统最为灵敏的指标,有理想的应用研究价值。
本文总结介绍了影响唾液淀粉酶的常见因素,以及五种唾液淀粉酶活性的测定方法,对于临床实验以及后续研究提供一定参考。
关键词:唾液淀粉酶,酶活性影响因素,淀粉酶活性测定一、引言生物酶几乎参与了生物体内所有的生物化学反应,并且酶是生命运动、细胞活动中的不可缺少的一部分。
它是一种具有生物催化活性的生物大分子[1]。
唾液淀粉酶(salivary alpha-amylase,sAA)是唾液蛋白的重要组成部分,约占唾液总蛋白的40% ~ 50%[2],常用作唾液蛋白分泌的主要指标。
交感神经系统与副交感神经系统协调作用于唾液蛋白的分泌[3],而唾液淀粉酶活性是交感神经最灵敏的指标。
随着技术发展,唾液淀粉酶的活性测定的准确度及可靠性日渐增加,且常被运用于中医脾虚证的临床辩证、治疗等方面[4]。
而唾液淀粉酶作为一种生物催化剂,具有专一性和高效性的同时,它相较于常见的化学催化剂更易受外界环境影响,导致其活性下降,甚至失活,为临床研究造成困扰。
本文就对常见的影响唾液淀粉酶活性的因素与其活性测定方法的相关资料进行了收集与整理,便于进行实验验证与探究。
二、影响唾液淀粉酶活性的因素(1)温度大多数生物酶的化学本质都为蛋白质,其抗热性较差。
在0℃~40℃的温度范围内,酶催化作用速度随着温度的升高而加快。
温度超过60℃时,绝大多数的酶都会失去活性。
唾液淀粉酶的最适温度约为37℃。
(2)pH值酶对环境中的pH十分敏感,只有在一定的pH范围内才能表现出活性,超过这个范围,酶就失活了。
一般酶的最适pH在4~8之间。
唾液淀粉酶的最适pH值约为6.8。
(3)AMY1基因拷贝数及多态性唾液淀粉酶的编码基因AMY1位于染色体1p21上,不同个体之间该基因的拷贝数存在差异,变化范围为2至15倍,研究显示口腔中的唾液淀粉酶含量与AMY1基因拷贝数正相关[5]。
唾液淀粉酶实验报告
唾液淀粉酶实验报告唾液淀粉酶实验报告引言:唾液淀粉酶是一种消化酶,能够将淀粉分解成较小的分子,为消化系统提供能量。
本实验旨在探究唾液淀粉酶的活性及其受到的影响因素。
实验材料与方法:实验材料:1. 淀粉溶液2. 唾液样本3. 碘液4. 试管5. 恒温水浴6. 酒精灯7. 显微镜8. 盖玻片实验方法:1. 取一定量的淀粉溶液倒入试管中。
2. 加入一滴碘液,观察试管中溶液颜色的变化,记录下颜色。
3. 将一定量的唾液样本加入另一个试管中。
4. 将两个试管放入恒温水浴中,保持温度恒定。
5. 同时开始计时,每隔一分钟,分别取出两个试管中的溶液滴在盖玻片上。
6. 用显微镜观察滴在盖玻片上的溶液,记录下观察结果。
7. 重复以上步骤,分别在不同温度和不同pH值条件下进行实验。
实验结果及讨论:在初始状态下,淀粉溶液的颜色为深蓝色,加入碘液后,颜色变为紫黑色。
这是因为碘液与淀粉反应生成了淀粉碘复合物,导致颜色变化。
在观察唾液淀粉酶活性的实验中,我们发现随着时间的推移,滴在盖玻片上的溶液逐渐变浅,最终变为无色。
这说明唾液淀粉酶能够将淀粉分解成较小的分子,从而使溶液中的淀粉含量减少。
在不同温度下的实验中,我们发现唾液淀粉酶的活性受到温度的影响。
当温度较低时,唾液淀粉酶的活性较低,反应速率较慢;而当温度较高时,唾液淀粉酶的活性较高,反应速率较快。
这是因为温度能够影响酶的构象和分子振动,从而影响酶的活性。
在不同pH值条件下的实验中,我们发现唾液淀粉酶的活性也受到pH值的影响。
在中性条件下,唾液淀粉酶的活性最高;而在酸性或碱性条件下,唾液淀粉酶的活性较低。
这是因为酶的活性受到pH值的影响,过高或过低的pH值会破坏酶的构象,从而降低酶的活性。
结论:通过本实验,我们得出了以下结论:1. 唾液淀粉酶能够将淀粉分解成较小的分子。
2. 唾液淀粉酶的活性受到温度的影响,温度越高,活性越高。
3. 唾液淀粉酶的活性受到pH值的影响,中性条件下活性最高。
唾液淀粉酶活性观察实验报告
唾液淀粉酶活性观察实验报告唾液淀粉酶活性观察实验报告引言:唾液淀粉酶是一种消化酶,它在我们的口腔中起着重要的作用。
本实验旨在观察不同条件下唾液淀粉酶的活性变化,以增进我们对唾液淀粉酶功能的理解。
实验方法:1. 实验前准备:a. 收集一些新鲜的人类唾液样本,并使用无菌容器储存。
b. 准备一些淀粉溶液,浓度为1%。
c. 准备一些碘液作为指示剂。
2. 实验步骤:a. 取一定量的唾液样本,加入到不同的试管中。
b. 在每个试管中加入相同的淀粉溶液。
c. 在不同的试管中设置不同的条件,如温度、酸碱度等。
d. 在每个试管中加入一滴碘液。
3. 实验结果观察:a. 观察试管中的颜色变化。
b. 记录每个试管中的颜色变化时间。
实验结果:通过观察实验结果,我们可以得出以下结论:1. 温度对唾液淀粉酶活性的影响:a. 在较低温度下,唾液淀粉酶活性较低,颜色变化时间较长。
b. 在适宜的温度范围内,唾液淀粉酶活性最高,颜色变化时间最短。
c. 在过高的温度下,唾液淀粉酶可能被破坏,导致活性下降。
2. 酸碱度对唾液淀粉酶活性的影响:a. 在中性条件下,唾液淀粉酶活性最高。
b. 在过酸或过碱的条件下,唾液淀粉酶活性明显下降。
3. 唾液淀粉酶活性的个体差异:a. 不同人的唾液淀粉酶活性可能存在差异。
b. 个体差异可能与遗传、饮食习惯等因素有关。
讨论:本实验结果表明,唾液淀粉酶的活性受到温度和酸碱度等条件的影响。
适宜的温度和中性的环境有利于唾液淀粉酶的最佳活性。
这与我们的日常经验相符,因为我们通常在温暖的环境下进食,而我们的胃酸度也处于中性范围。
此外,个体差异也可能导致唾液淀粉酶活性的差异。
不同人的唾液淀粉酶活性可能取决于遗传因素、饮食习惯以及其他个体差异。
这一发现对于了解人类消化系统的个体差异具有重要意义。
结论:本实验观察了唾液淀粉酶在不同条件下的活性变化。
温度和酸碱度是影响唾液淀粉酶活性的重要因素。
适宜的温度和中性的环境有利于唾液淀粉酶的最佳活性。
唾液淀粉酶活性测定1
一、实验原理:酶促反应速率受多种元素的影响,如温度、PH、激活剂和抑制剂等。
在温度等其他条件相同时,唾液淀粉酶的活性在最适PH处达到最大,在最适PH的反应体系中,淀粉被消耗最多,剩余的淀粉与碘液显色最浅,在660nm波长吸光度也最小,最后以吸光度值为纵坐标,PH值为横坐标作图,从而得到唾液淀粉酶的最适PH值。
二、实验仪器:吸量管,试管,试管架,小烧杯,722型分光光度计,恒温箱,洗耳球三、实验试剂:0.01mol/L碘液,0.2mol/L Na2HPO4,0.2mol/L NaH2PO4,2.5g/L淀粉溶液,唾液,蒸馏水四、实验思路:相同时间内,在温度,酶浓度相同,PH不同的条件下,唾液淀粉酶的活性不同,水解的淀粉量不同,剩余的淀粉与过量的碘液作用所显示的颜色也不同,并通过测定吸光度,得出唾液淀粉酶的最适PH范围。
五、操作步骤:1、唾液的获取及稀释以备取者蒸馏水漱口2~3次,然后含大口蒸馏水于口腔内并反复做咀嚼动作,一段时间后以烧杯承接唾液;而后分别进行4、8、12、16、20倍数稀释;2、唾液稀释液稀释倍数的确定取若干洁净试管,按表1添加试剂并进行实验操作表1 唾液稀释液稀释倍数的确定(用量:ml)试剂 1 2 3 4 5 空白管唾液稀释液倍数/2ml 20 40 60 80 100 0 淀粉溶液 1 1 1 1 1 1振荡混匀后37℃水浴10分钟碘液/滴 2 2 2 2 2 2振荡混匀后观察颜色变化,以“+”表示颜色深浅颜色变化深浅由此表中数据确定稀释倍数为______的唾液稀释液作为下一步步骤试剂3、淀粉用量的确定按表2进行操作表2 淀粉用量的确定(单位:mL)试剂 1 2 3 4 5 空白唾液稀释液(倍数已定) 2 2 2 2 2 2 2.5g/L淀粉溶液0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0蒸馏水0.9 0.8 0.7 0.6 0.5 1混匀做10分钟水浴操作后,滴加碘滴2滴观察颜色变化深浅,以“+”表示颜色变化深浅由表中数据确定淀粉用量为______mL,作为下一步反应试剂参数4、不同PH的NaH2PO4–Na2HPO4缓冲液配制按照表2进行操作表3 不同PH的Na2HPO4–NaH2PO4缓冲液配制表(用量:ml) PH. 0.2mol/LNa2HPO4溶液0.2mol/LNaH2PO4溶液5.8 0.40 4.606.0 0.615 4.3756.2 0.925 4.0756.4 1.325 3.6756.6 1.875 3.1256.8 2.45 2.557.0 3.05 1.957.2 3.60 1.407.4 4.05 0.957.6 4.35 0.657.8 4.575 0.4258.0 4.735 0.2755、唾液淀粉酶最适PH的测定按表3添加试剂,进行实验操作【实验数据】表4—1 唾液淀粉酶活性的测定(单位:ml)试剂 1 2 3 4 5淀粉唾液稀释液 2 2 2 2 2缓冲溶液相应PH(5mL) 6.0 6.2 6.4 6.6 6.8水浴10分钟后,滴加碘液2滴,混匀后测吸光度A660表4—2 唾液淀粉酶活性的测定(单位:mL)试剂 6 7 8 9淀粉唾液稀释液 2 2 2 2缓冲溶液相应PH(5mL)7.0 7.2 7.4 7.6水浴10分钟后,滴加碘液2滴,混匀后测吸光度A660六、结果:由表4中实验数据可知唾液淀粉酶在PH为_______时活性最高。
唾液的探究实验报告
一、实验目的1. 了解唾液的基本组成和功能;2. 探究唾液中淀粉酶对淀粉的消化作用;3. 掌握实验操作方法和数据处理方法。
二、实验原理唾液是由唾液腺分泌的一种无色、无味、弱酸性液体,其中含有唾液淀粉酶、溶菌酶等生物活性物质。
唾液淀粉酶是一种消化酶,能够将淀粉分解成麦芽糖,从而为人体提供能量。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:唾液、淀粉糊、碘液、蒸馏水、试管、移液器、烧杯、温度计等;2. 实验仪器:显微镜、pH计、酶标仪等。
四、实验步骤1. 唾液淀粉酶活性测定(1)取两支试管,分别标记为甲、乙;(2)在甲试管中加入2ml淀粉糊,乙试管中加入等量清水;(3)将甲试管置于37℃恒温水浴中,乙试管置于室温下;(4)分别向甲、乙试管中加入1滴唾液;(5)将甲、乙试管置于37℃恒温水浴中,观察淀粉糊的变化;(6)在淀粉糊完全消化后,向两支试管中分别加入1滴碘液;(7)观察并记录甲、乙试管中淀粉糊的颜色变化。
2. 唾液pH测定(1)取一小块pH试纸,置于烧杯中;(2)用移液器取少量唾液,滴在pH试纸上;(3)观察并记录唾液的pH值。
3. 唾液溶菌酶活性测定(1)取两支试管,分别标记为甲、乙;(2)在甲试管中加入2ml溶菌酶底物,乙试管中加入等量清水;(3)向甲、乙试管中分别加入1滴唾液;(4)将甲、乙试管置于37℃恒温水浴中,观察溶菌酶底物的变化;(5)在溶菌酶底物完全分解后,向两支试管中分别加入1滴溶菌酶显色剂;(6)观察并记录甲、乙试管中溶菌酶底物的颜色变化。
五、实验结果与分析1. 唾液淀粉酶活性测定甲试管中的淀粉糊在唾液的作用下逐渐变透明,滴加碘液后不变蓝,说明淀粉已被唾液淀粉酶分解。
乙试管中的淀粉糊在室温下未发生明显变化,滴加碘液后变蓝,说明淀粉未发生分解。
2. 唾液pH测定唾液的pH值为6.7,略呈酸性。
3. 唾液溶菌酶活性测定甲试管中的溶菌酶底物在唾液的作用下逐渐变透明,滴加溶菌酶显色剂后变黄色,说明溶菌酶具有活性。
唾液淀粉酶活性的观察实验报告
唾液淀粉酶活性的观察实验报告唾液淀粉酶活性的观察实验报告引言:唾液淀粉酶是一种重要的消化酶,它在我们的唾液中存在,并负责将淀粉分解成糖类物质。
通过观察唾液淀粉酶的活性,我们可以了解到人体消化过程中的一些基本原理。
本实验旨在通过测量唾液淀粉酶的活性,探究其受到不同因素的影响。
实验材料与方法:1. 实验材料:- 新鲜人类唾液样本- 淀粉溶液- 盐酸- 碘液- 恒温水浴- 移液器- 显微镜- 试管- 试管架- 滴管- 计时器- 烧杯- 温度计2. 实验方法:1. 准备工作:- 将试管清洗干净并晾干。
- 准备一定浓度的淀粉溶液。
- 准备一定浓度的盐酸溶液。
- 准备一定浓度的碘液。
2. 实验操作:- 取一支移液器,吸取适量的唾液样本。
- 将唾液样本滴入一只试管中。
- 加入适量的淀粉溶液,使试管中的液体充分混合。
- 将试管放置在恒温水浴中,保持一定的温度。
- 在不同时间间隔内,取出一滴试管中的液体,滴在烧杯中。
- 在滴入的液体中加入一滴碘液,观察颜色的变化。
- 使用显微镜观察淀粉颗粒的消失情况。
- 重复实验步骤,改变温度、酸碱度等因素,观察其对唾液淀粉酶活性的影响。
实验结果与讨论:在本次实验中,我们观察到了唾液淀粉酶的活性以及其受到不同因素的影响。
通过添加碘液,我们可以观察到淀粉颗粒的消失情况,从而判断唾液淀粉酶的活性。
在恒温水浴中,我们分别将试管置于不同温度下进行实验。
结果显示,较高的温度下,唾液淀粉酶的活性更高,淀粉颗粒消失的速度更快。
这是因为温度的升高可以加速化学反应速率,使唾液淀粉酶更加活跃。
另外,在不同酸碱度条件下进行实验,我们发现碱性条件下唾液淀粉酶的活性较高,淀粉颗粒消失的速度更快。
这可能是因为在碱性环境中,唾液淀粉酶的活性受到更好的激活。
实验中,我们还观察到唾液淀粉酶对淀粉的消化作用是逐渐进行的。
随着时间的推移,淀粉颗粒逐渐减少,直至完全消失。
这说明唾液淀粉酶需要一定的时间来充分完成淀粉的分解。
碘淀粉比色法测定唾液淀粉酶实验报告误差分析
碘淀粉比色法测定唾液淀粉酶实验报告误差分析引言:唾液淀粉酶是一种消化酶,它在人体的消化过程中发挥着重要的作用。
本实验以测定唾液淀粉酶活性为目标,采用碘淀粉比色法来测定淀粉酶对淀粉的降解能力。
实验中,我们以淀粉溶液作为底物,唾液作为酶,通过比色法来测定唾液淀粉酶的活性。
实验步骤:1.准备0.1%的淀粉溶液。
2.取适量的淀粉溶液分别放在4个试管中。
3.将每个试管中的淀粉溶液加热,使其变稀。
4.将加热后的淀粉溶液分别加入4个试管中。
5.取适量的唾液加入每个试管中,使试管内的淀粉溶液和唾液混合。
6.在每个试管中滴加一滴稀盐酸,停止淀粉的降解反应。
7.用滴管向淀粉溶液滴加少量的碘液,形成蓝色沉淀。
8.稀释各自制的超标和亚标溶液,并进行分别测定吸光度及活性。
误差分析:1.温度误差:实验中,加热淀粉溶液的温度可能会对唾液淀粉酶活性产生影响。
不同温度下,淀粉酶的活性可能不同,导致实验结果的误差。
为减小该误差,可以使用恒温水浴进行加热,保持相同的温度条件。
3.时间误差:实验中,淀粉酶对淀粉的降解速度可能受到时间的影响。
在不同的反应时间内,淀粉的降解程度可能不同,导致实验结果的误差。
为减小时间误差,可以设置相同的反应时间,并进行多次实验取平均结果。
4.容器误差:实验中,试管的直径和透明度可能会对光的透射率产生影响。
试管直径不同会导致吸光度的差异,透明度不同可能会影响碘液的进入情况。
为减小容器误差,可以使用相同类型和品牌的试管进行实验。
措施与建议:1.严格控制温度:使用恒温水浴控制实验过程中的温度,确保每个试管中的淀粉溶液温度相同。
2.多次实验取平均:进行多次实验,取各次实验的平均结果,以减小个体偶然误差的影响。
3.量取唾液:在加入唾液的过程中,尽量使用分量器等精确量取唾液,以尽量减小不同试管中唾液质量的差异。
4.控制反应时间:在实验过程中,控制相同的反应时间,确保淀粉酶对淀粉的降解在相同时间内完成。
5.使用相同类型的试管:使用相同类型和品牌的试管,以减小容器误差对实验结果的影响。
唾液淀粉酶活性测定实验报告
唾液淀粉酶活性测定实验报告
唾液淀粉酶活性测定实验报告是用来检测人体唾液中的淀粉酶活性水平的实验报告,反映了人体淀粉酶在唾液中的作用情况。
一、实验理论唾液淀粉酶是一种能够分解淀粉的酶,它可以将淀粉分解成单糖,从而帮助消化吸收。
淀粉酶活性的高低直接影响人体对淀粉的消化吸收能力,因此通过测定唾液淀粉酶活性可以反映出人体消化能力的状况。
二、实验材料 1.唾液样本 2.淀粉酶试剂盒 3.pH计 4.离心管 5.微波炉三、实验步骤 1.准备实验材料:取20μl唾液样本,将其加入到离心管中;用pH 计测量唾液的pH 值;准备淀粉酶试剂盒。
2.实验操作:将淀粉酶试剂盒中的缓冲液按比例加入到离心管中的唾液样本中,搅拌均匀;将搅拌好的混合物加热到70℃,保持3min;用离心分离出混合物中的淀粉;将淀粉放入新的离心管中,再加入淀粉酶试剂盒的缓冲液和淀粉酶,搅拌均匀;用微波炉加热混合物,保持37℃,持续30min;在37℃下,用离心分离出混合物中的淀粉,测量淀粉溶解度。
3.实验结果:根据实验结果,得出唾液中淀粉酶活性的数值。
四、实验结论根据实验结果,得出唾液中淀粉酶活性的数值,可以反映出人体消化能力的状况。
[新版]唾液淀粉酶活力的测定
唾液淀粉酶活力的测定一、实验目的了解并掌握唾液淀粉酶活力的测定方法二、实验原理唾液淀粉酶能催化水解淀粉,生成分子较小的糊精和麦芽糖。
本实验利用碘的呈色反应来测定唾液淀粉酶水解淀粉作用的速度,从而测定唾液淀粉酶活力的大小。
三、实验仪器和试剂1. 仪器(1)多孔白瓷板(2)50mL三角瓶(3)恒温水浴锅(4)烧杯(5)500mL容量瓶(6)100mL容量瓶(7)漏斗(8)吸管2. 试剂(1)原碘液:称取碘11g、碘化钾22g,加少量蒸馏水完全溶解后,定容至500mL,于棕色瓶中保存。
(2)稀碘液:吸取原碘液2mL,加碘化钾20g,用蒸馏水溶解,定容至500mL,于棕色瓶保存。
(3)标准“终点色”溶液①准确称取氯化钴40.2439g、重铬酸钾0.4878g,加蒸馏水溶解并定容至500mL。
②准确称取铬黑T 40mg,加蒸馏水溶解并定容至100mL。
取①液80mL与②液10mL混合,即为终点色。
冰箱保存。
(4)2%可溶性淀粉溶液:称取烘干可溶性淀粉2.00g,先以少许蒸馏水混匀,倾入80mL沸水中,继续煮沸至透明,冷却后用蒸馏水定容至100mL。
(需新鲜配制)(5)稀释100倍的唾液用蒸馏水漱口,以清除食物残渣,然后让唾液流入量筒并稀释100倍,混合备用。
(6)0.02mol/L、pH6.8磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲溶液:称取磷酸氢二钠45.23g和柠檬酸8.07g,用蒸馏水溶解后定容至1000mL,配好后用酸度计或精密试纸校正pH。
四、操作步骤(1)将“标准色”溶液滴于白瓷板的左上角空穴内,作为比较终点色的标准。
(2)在50mL的三角瓶中,加入2%可溶性淀粉溶液20mL,加缓冲液5mL在37℃水浴中平衡约10min,加入0.5mL稀释唾液,立即记录时间,充分摇匀。
定时用滴管取出反应液约0.25mL,滴于预先充满此稀碘液(约0.75mL)的调色板空穴内,当空穴颜色由紫色变为棕红色,与标准色相同时,即为反应终点,记录时间T(min)。
唾液淀粉酶活性观察实验报告
一、实验目的1. 了解唾液淀粉酶的生理功能及其在人体消化过程中的作用。
2. 掌握观察唾液淀粉酶活性的实验方法。
3. 分析影响唾液淀粉酶活性的因素,如温度、pH值等。
二、实验原理唾液淀粉酶是一种消化酶,主要存在于唾液中,具有催化淀粉水解为麦芽糖的作用。
本实验通过观察唾液淀粉酶催化淀粉水解的过程,分析影响酶活性的因素。
三、实验材料与试剂1. 实验材料:唾液、淀粉溶液、碘液、蒸馏水、试管、移液器等。
2. 实验试剂:0.5%淀粉溶液、稀碘溶液、NaCl溶液、醋酸溶液、NaOH溶液等。
四、实验步骤1. 将唾液用蒸馏水稀释10倍,混匀。
2. 取两支试管,分别加入0.5%淀粉溶液和唾液稀释液各2ml。
3. 将试管放入37℃水浴中,保温5分钟。
4. 向两支试管中分别加入2滴碘液,观察溶液颜色变化。
5. 分别设置不同温度(如25℃、37℃、50℃、75℃)的实验组,重复步骤2-4。
6. 分别设置不同pH值(如4、6、7、8、10)的实验组,重复步骤2-4。
7. 分别设置不同浓度的NaCl溶液、醋酸溶液、NaOH溶液的实验组,重复步骤2-4。
五、实验结果与分析1. 在37℃水浴中,唾液淀粉酶催化淀粉水解,溶液颜色由蓝色变为无色,表明唾液淀粉酶具有活性。
2. 在不同温度下,唾液淀粉酶活性随温度升高而增强,在37℃时活性最强,超过此温度后活性逐渐降低。
3. 在不同pH值下,唾液淀粉酶活性在pH值为6.8时最强,过高或过低的pH值均会降低酶活性。
4. 在不同浓度的NaCl溶液中,唾液淀粉酶活性随NaCl浓度增加而增强,但超过一定浓度后活性不再增加。
5. 在不同浓度的醋酸溶液和NaOH溶液中,唾液淀粉酶活性均受到抑制,且抑制程度随浓度增加而增强。
六、实验结论1. 唾液淀粉酶具有催化淀粉水解为麦芽糖的生理功能。
2. 温度、pH值、NaCl浓度等均会影响唾液淀粉酶的活性。
3. 唾液淀粉酶的最适温度为37℃,最适pH值为6.8。
唾液淀粉酶的纯化与活性测定综述
唾液淀粉酶的纯化与活性测定综述摘要:社会发展迅速,竞争日益激烈,如抑郁症、自闭症、焦虑症和感冒等类似地轻微心理疾病很容易发生。
当人类的心理压力增加时,唾液中的a沉淀物活动会增加。
通过测量唾液中唾液淀粉酶的活动,可以对人类的精神压力进行分析。
1. 特别的一次性电极,能够重复使用、保持稳定并产生小型干扰;生物传感器可以通过改变表面酶和比一来酶的丝体纤维来产生。
生物感应器可以准确探测唾液a酶的活动。
这是一个新系统的精神压力分析。
2. 产生银色蝴蝶结和聚氯乙烯源自0.2%毫米的聚氯乙烯。
同样,1个“PVC”被运用到终端机上,另一个由煤黏胶“打印”,并有一个直径约3毫米的轮子,用作真实聚集器和碳排电极。
NBC上的电极可用作循环测定,溶钙(Fe (cn6)6,3 / / Fe (cn6) 4含有氯化钾的电化学特性。
关键词:唾液淀粉酶A;pET-28a质粒;淀粉影响酶的因素是重要的生物化学实验。
细芽酵素多数用于研究。
唾液虽然可能是试验对象,随着SARS等其他传染病的扩散,也有可能受到感染;由患者进入不同的序列,因为它控制不了更大的体积。
基因工程产生,没有病原体,在老师和学生之间不存在感染的危险。
在缓冲器中分散开是好的;而分离的效果则非常好;实验不仅没有用一次性的纸杯进行,也没有污染环境。
传统的人类心理学疗法完全属于心理上的,比方说监察心率和血压,或者调查包括皮质醇、类固醇、肾上腺素和肾上腺素在内的神经毒素。
它们能反映出紧张程度与心理作用,然而这些成分对血液来说质量较低,需要大量的组织分析、静脉注射样本和长期测量。
大约在1990年,由查特顿教授领导的小组进行了一系列研究,发现唾液a的活性与自关节神经系统的敏感程度密切相关。
该项研究首先发现,唾液中a血栓酶的反应能力会增加,对神经刺激相互作用且相互关联,增加唾液压力。
与此同时,很多外国研究人员认为,随着心理压力、社会压力的增加,唾液a消化酶的活跃度也会增加,而a消化酶可能是人类心理压力的敏感生物指标。
唾液淀粉酶活性的测定
2、pH对酶活性的影响:取4支试管,分别加入0.4%盐酸、0.1%乳酸、蒸馏水与1%碳酸钠各2mL,再向以上四支试管中各加2mL1%淀粉溶液及2mL淀粉酶试剂,在沸水浴中加热,根据生成红棕色沉淀的多少,说明淀粉水解的强弱。
3、温度对酶活性的影响:取3支试管,各加3mL1%淀粉溶液;另取3支试管,各加1mL淀粉酶液。将此6支试管分为3组,每组中盛淀粉溶液与淀粉酶液的试管各1支,三组试管分别置于0°C、37°C与70°C的水浴中。5分钟后,将各组中的淀粉溶液倒入淀粉酶液中,继续维持原温度条件5min后,立即加2滴碘液,观察溶液颜色的变化。根据观察结果说明温度对酶活性的影响。
(四)操作步骤
1、淀粉酶活性的检测:取一只试管,注入1%淀粉溶液5mL与稀释的唾液0.5-2mL。混匀后插入1支玻璃棒,将试管连同玻璃棒置于37°C水浴中。不是的用玻璃棒从试管中取出1滴溶液,滴加在白磁板上,随即滴加1滴碘液,观察溶液呈现的颜色。此实验延续至溶液仅表现碘被稀释后的微黄色为止。记录淀粉在水解过程中,遇碘后溶液颜色的变化。
低浓度的Cl-离子能增加淀粉酶的活性,是它的激活剂。Cu2+等金属离子能降低该酶的活性,是它的抑制剂。
(三)器材及试剂
1、器材:试管、酒精灯、烧杯、恒温水浴锅、量筒、冰浴、玻璃棒、试管夹、白磁板、试管架、铁三脚架、唾液淀粉酶
2、试剂:1%淀粉溶液、碘液、班氏试剂、0.4%HCl溶液、0.1%的乳酸溶液、1%NaCl溶液、1%CuSO4溶液、0.1%淀粉溶液
3.温度对酶的影响:1号显紫红色,2号为淡黄色,3号为深蓝色。当温度为0度时,蛋白质分子的热运动减慢,即酶分子的活性受到了抑制,使酶的活性降低了,淀粉分解减慢,生成紫红色的糊精;2号处于37度,接近人体温度,酶的活化性能较高,淀粉被分解成麦芽糖和葡萄糖就越快,所以是淡黄色,而当温度为70度时,由于酶是蛋白质,遇到高温时会失活,所以淀粉没有被分解。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
参考文献:
[1]]周锦兰,张开诚.实验化学[M].武汉:华中科技大学出版社,2006:310-311.
[3]许冰,原媛,赵文献.pH值对酶活性影响的实验观察[J].临床合理用药杂志,2010,3(10):35-35.
[4]冯攸科.唾液淀粉酶活性的最适温度质疑[J].《中等医学教育》1996(03了不同条件下唾液淀粉酶的活性差异,实验结果表明,影响唾液淀粉
酶活性的因素很多,必须在适宜的条件下,才能发挥最佳催化作用;淀粉酶具有
高度专一性,其活性受温度、pH值、激活剂及抑制剂、酶浓度以及作用时间等多
种因素的影响;每个人产生唾液淀粉酶的量不同,活性强弱也有差异。
关键词:淀粉酶;活性;温度;抑制剂;激活剂;专一性
向上面的剩余溶液中加2mL班氏试剂,放入沸水中加热10分钟左右,观察现象
2、pH对酶活性的影响:取4支试管,分别加入0.4%盐酸、0.1%乳酸、蒸馏水与1%碳酸钠各2mL,再向以上四支试管中各加2mL1%淀粉溶液及2mL淀粉酶试剂,在沸水浴中加热,根据生成红棕色沉淀的多少,说明淀粉水解的强弱。
3、温度对酶活性的影响:取3支试管,各加3mL1%淀粉溶液;另取3支试管,各加1mL淀粉酶液。将此6支试管分为3组,每组中盛淀粉溶液与淀粉酶液的试管各1支,三组试管分别置于0°C、37°C与70°C的水浴中。5分钟后,将各组中的淀粉溶液倒入淀粉酶液中,继续维持原温度条件5min后,立即加2滴碘液,观察溶液颜色的变化。根据观察结果说明温度对酶活性的影响。
低浓度的Cl-离子能增加淀粉酶的活性,是它的激活剂。Cu2+等金属离子能降低该酶的活性,是它的抑制剂。
(三)器材及试剂
1、器材:试管、酒精灯、烧杯、恒温水浴锅、量筒、冰浴、玻璃棒、试管夹、白磁板、试管架、铁三脚架、唾液淀粉酶
2、试剂:1%淀粉溶液、碘液、班氏试剂、0.4%HCl溶液、0.1%的乳酸溶液、1%NaCl溶液、1%CuSO4溶液、0.1%淀粉溶液
3.温度对酶的影响:1号显紫红色,2号为淡黄色,3号为深蓝色。当温度为0度时,蛋白质分子的热运动减慢,即酶分子的活性受到了抑制,使酶的活性降低了,淀粉分解减慢,生成紫红色的糊精;2号处于37度,接近人体温度,酶的活化性能较高,淀粉被分解成麦芽糖和葡萄糖就越快,所以是淡黄色,而当温度为70度时,由于酶是蛋白质,遇到高温时会失活,所以淀粉没有被分解。
淀粉→紫色糊精→红色糊精→麦芽糖、葡萄糖
淀粉、紫色糊精、红色糊精遇碘后分别呈蓝色、紫色与红色、麦芽糖和葡萄糖遇碘不变色。
淀粉与糊精无还原性,或还原性很弱,对班氏试剂呈阴性反应。麦芽糖与葡萄糖是还原性糖,与班氏试剂共热后生成红棕色氧化亚铜的沉淀。
唾液淀粉酶的最适温度为37-40°C,最适pH为6.8.偏离此最适环境时,酶的活性减弱。
4.激活剂和抑制剂对酶的影响:3号作为对照实验组,显红棕色,1号显浅黄色,2号显深蓝色。因为在1号溶液中,NaCl对酶的活性在增加作用,激活了淀粉酶,淀粉酶迅速把淀粉分解成麦芽糖和葡萄糖,滴加碘液时,溶液显浅黄色,而对照组显示红棕色,表明淀粉被分解成了糊精,在1号中,溶液中的淀粉没有被分解遇碘变蓝,通过对比1和3号,2和3号,由颜色的变化,判断淀粉水解程度为1<3<2,说明了NaCl具有激活作用,CuSO4具有抑制作用。
4、激活剂与抑制剂对酶活性的影响:取3支试管,按下表加入各种试剂。混匀后,置于37°C水浴中的保温。从1号试管中用玻璃棒取出1滴溶液,置于白磁板上用碘液检查淀粉的水解程度。待1号试管内的溶液遇碘不再变色后,立即取出所有的试管,各加碘液2滴,观察溶液颜色的变化,并解释之。
管号
1
2
3
1%NaCl(mL)
1
—
—
1%CuSO4(mL)
—
1
—
蒸馏水(mL)
—
—
1
淀粉酶液(mL)
1
1
1
0.1%淀粉溶液(mL)
3
3
3
(五)、实验结果与讨论
1.
加入班氏试剂后
2.PH值对酶活性影响:1号深红色,2号为红棕色,3号为砖红色,4号为偏蓝。因为PH=1时,超出了淀粉酶有效PH范围,使得酶完全失活,淀粉没有被分解。2号是因为PH=5时,不是淀粉酶的最适范围。3号是因为PH=7时,为淀粉酶分解的最适PH,淀粉被酶迅速分解生成麦芽糖和葡萄糖。而4号则是因为PH=9超出了淀粉酶的适宜PH,活性受到或者是部分失活,使淀粉分解较慢。
2影响唾液淀粉酶的活性的因素
(一)实验目的
观察淀粉在水解过程中遇碘后溶液颜色的变化。观察温度、pH、激活剂与抑制剂对唾液淀粉酶活性的影响。
(二)实验原理
人唾液中淀粉酶为α-淀粉酶,在唾液腺细胞中合成。在唾液淀粉酶的作用下,淀粉水解,经过一系列被称为糊精的中间产物,最后生成麦芽糖和葡萄糖。变化过程如下:
(四)操作步骤
1、淀粉酶活性的检测:取一只试管,注入1%淀粉溶液5mL与稀释的唾液0.5-2mL。混匀后插入1支玻璃棒,将试管连同玻璃棒置于37°C水浴中。不是的用玻璃棒从试管中取出1滴溶液,滴加在白磁板上,随即滴加1滴碘液,观察溶液呈现的颜色。此实验延续至溶液仅表现碘被稀释后的微黄色为止。记录淀粉在水解过程中,遇碘后溶液颜色的变化。
[5]杨玉萍.几种环境条件对唾液淀粉酶活性的影响[期刊论文]-新乡学院学报(自然科学版).
[6]陈电容.生物化学与生化药品[M].郑州:郑州大学出版社,2004:28 .
[7]尚渤程(云南省昆明市第一中学6s0031)黎一苇(云南大学生物化学与分子生物学中心650091)《生物学教学》2009年(第34卷)第12期.
结论:
酶催化特定化学反应的蛋白质、RNA或其复合体。是生物催化剂,能通过降低化学反应的活化能加快反应速率,但不改变反应的平衡点。绝大多数酶的化学本质是蛋白质。具有催化效率高、专一性强、作用条件温和等特点。
PH可以影响酶蛋白的结构、酶的活性部位的解离状态、辅酶的解离以及底物分子的解离,从而影响酶与底物的结合以及对底物的催化效力。温度升高是通过对酶结构破坏,从而抵消了酶促反应速率随温度升高而升高的趋势。我们可以看出PH和温度都通过影响了酶的结构来影响酶促反应速率。抑制剂和激活剂也均是通过影响酶的结构来影响酶的活性。