微生物学第三章消毒与灭菌
第3章 消毒与灭菌
长。
37
3.温度
温度升高可增强消毒剂的杀菌效果。温度每增高
l0℃，重金属盐类的杀菌作用约增加2～5倍，石炭酸的杀
菌作用约增加5～8倍。
4.酸碱度
消毒剂杀菌作用受pH影响。如新洁尔灭pH 9时
杀菌作用强。同时pH也影响消毒剂的电离度，一般说，未 电离的分子，较易通过细胞壁，杀菌效果好。 5.有机物 6.药物颉抗 7.其他因素 环境中有机物，可降低消毒剂效果。 两种消毒剂合用时，有的能相互颉抗。如阴 湿度、穿透力、表面张力等。
800nm。可见光线只有微弱的杀菌作用。 2.阳光 直射日光有强烈杀菌作用，是天然杀菌因素，紫外线是日光
杀菌作用的主要因素。许多微生物在直射日光下，半小时到数小时即 可死亡。芽抱的抵抗力强，经20h才死亡。
22
3.紫外线 紫外线中波长200-300nm部分具有杀菌作用，其 中以265-266nm段的杀菌力最强，这与DNA吸收光谱范围一 致。常用的紫外线杀菌灯波长为 253.7nm，杀菌力强而稳定。
14
（1）干热灭菌法 包括火焰灭菌和热空气灭菌两类。
火焰灭菌法是以火焰直接烧灼杀死物体中微生物的方 法。分为灼烧和焚烧两种。 热空气灭菌指利用干热灭菌器以干热空气进行灭菌的 方法。用于耐高温物品。灭菌条件：160℃维持 l-2h，才 能杀死所有微生物（芽孢、孢子）。
15
高压蒸汽灭菌法 最有效的灭菌方法 121 ℃ 20~30分钟 煮沸消毒法 水煮100 ℃ 5分钟(繁殖体)~2小时(芽胞) 流通蒸汽消毒法 水蒸汽100 ℃ 15~30分钟(繁殖体) 巴氏消毒法 较低的温度（61 ℃ 30分钟）杀灭致病菌 间歇蒸汽灭菌法 反复多次流动蒸汽间歇加热灭菌
17
巴氏消毒法具体方法有三种
消毒与灭菌
烷化剂
蛋白质、核酸烷基化 环氧乙烷
2019/11/8
16
消毒剂的作用机理
使细胞膜通透性受损；
使菌体蛋白变性和凝固，失去生物活性， 导致细菌死亡；
破坏或改变蛋白质与核酸功能基团，使菌 体酶蛋白失去酶的活性。
2019/11/8
17
二、化学消毒灭菌法
（一）高效消毒剂 （high-level disinfectants） 1.含氯消毒剂；2.过氧化物消毒剂； 3.醛类消毒剂；4.环氧乙烷
2019/11/8
41
生物安全水平分级
生物安全防护水平（biosafety level，BSL）分 为4级，以表示实验室的相应生物安全防护水平。
BSL－1：防护水平最低,普通建筑物即可，每个 实验室应设洗手池。
BSL-2：实验室的门有可视窗。在实验室工作区 域外还应当有供长期使用的存储空间。在实验室 内使用专门的工作服；应戴乳胶手套。配备高压 蒸汽灭菌器，在实验室内配备生物安全柜。
间歇灭菌法
本法是利用反复多次的流通蒸汽灭菌，以达到 灭菌的目的。
只适用于不耐热（100℃以内）的营养物质如 某些培养基的灭菌。
2019/11/8
10
高压蒸汽法 Autoclaving
压力：1.05kg/cm2 温度：121.3℃ 时间：15～30min 效果
杀死一切微生物， 包括芽胞
（二）中效消毒剂 （intermediate-level disinfectants） 1.含碘消毒剂；2.醇类消毒剂
（三）低效消毒剂 （low-level disinfectants） 1.季铵盐类；2.氯已定；3.高锰酸钾
2019/11/8
18
消毒与灭菌技术PPT课件
煮沸消毒法（boiling sterilization）
要求 适用 方法 注意
❖殖❖配可强防❖物❖橡▪▪▪▪经应 有 空 物煮将 的体成提杀锈取 将适如❖浸沸❖❖第品胶轴将腔品消间从间后轴碗应 置5前将消如出，1高菌。▪， ， 当碳用金没二根玻橡～节物导不类及冷为放节、毒用 于%物毒中海 水 延水据璃胶达沸作酸的管品宜于属在次消水入1或盆1时等无 无～0器制物拔 长0器须刷放的品时途毒或，盖不到点用氢～的耐、水水间菌 菌分2皿品品械洗先置高时温时沸打能1刷间加沸消达，钠煮%湿搪；中沸器 容5应用性钟或在干过间水间开重的点m点洗从入毒还1海加时的用纱质、瓷械 器，后带腔净多中为叠再i可地n受0也纱布决干水物拔内盖，将 内效可入浓放5，放耐 、5然重区杀气～低布 包定℃灌的大每入要入物净沸品果去水度高玻后新气1压灭包 好放水容小，，保水，增0品，后，。污中时温璃m压加计裹 ，入影煮器相繁需消证中高增及i全计则n好 待水、低，，应同响的和热时毒物后适时后 水的部算在时煮， 沸时
特点：紫外线穿透力较弱
紫外线可杀灭多种微生物，包括杆菌、 病毒、真菌、细菌繁殖体等。杀灭繁殖 体需3~5s；杀灭芽孢需10min以上。
杀菌机制
使菌体DNA失去转换能力而死亡； 破坏菌体蛋白质中的氨基酸，使菌体蛋白光解 变性； 降低菌体内氧化酶的活性，使氧化能力丧失； 使空气中的氧电离产生具有极强杀菌作用的臭 氧。
第三章 清洁、消毒与灭菌技术
一、基本概念 二、物品清洁法 三、物理方法 四、化学方法
一 基本概念
洁清消 毒灭菌防 腐
是切清 上清上污抑 与清除 的除的迹制 繁除或 一脂物病,微 殖如或杀 切品等原生尘杀灭 微上微物埃灭物生的生的,物品物油一物生品, 长 以杀灭芽孢为准
微生物的消毒和灭菌技术
微生物的消毒和灭菌技术一、微生物消毒和灭菌的概念消毒:是指杀死病原微生物、但不一定能杀死细菌芽孢的方法。
通常用化学的方法来达到消毒的作用。
用于用于消毒的化学药物叫做消毒剂。
灭菌:是指把物体上所有的微生物(包括细菌芽孢在内全部杀死的方法, 通常用物理方法来达到灭菌的目的。
灭菌方法分为物理灭菌法和化学灭菌法。
防腐:是指防止或抑制微生物生长繁殖的方法。
用于防腐的化学药物叫做防腐剂。
无菌:不含活菌的意思,是灭菌的结果。
防止微生物进入机体或物体的操作技术称为无菌操作二、微生物的消毒方法常用的消毒方法有物理法和化学法。
物理法就是用物理方法杀灭或清除病原微生物和其他有害生物,主要有热消毒法、紫外线消毒法、电离辐射法、微波法等。
最常用的物理消毒方法是热消毒法和紫外线消毒法。
热消毒法(煮沸法 :是最简单有效的消毒方法,不需要特殊设备即可进行。
杀灭繁殖型细菌与病毒效果好, 对芽胞作用较小。
煮沸时间一般为 10~30分钟。
金属器械、棉织品、食具、玻璃制品等可用煮沸消毒。
但毛皮、呢绒和塑料制品等不能煮沸消毒。
热消毒法不适用于芽胞污染的消毒紫外线消毒法就是利用紫外线照射使微生物诱变致死, 达到将被服中的有害微生物除掉的目的。
消毒用紫外线灯管有 15W 、 20W 、 30W 等规则。
瓦数代表灯管在 25~40℃时紫外线输出能量。
灯管寿命一般为 3000~4000小时, 超过此时限效果不可靠。
紫外线对一般细菌、病毒均有杀灭作用。
革兰阴性菌最敏感, 其次为革兰阳生菌。
但结核杆菌却有较强抵抗力。
一般紫外线消毒对细菌芽胞无效。
紫外线广泛用于室内空气消毒, 如手术室、烧伤病房、传染病房、实验室等。
灯管距地面约 2.0~2.5m 高。
每 10~15cm 2面积可设 30W 灯管一个,最好每照射 2小时后,间歇 1小时后再照,以免臭氧浓度过高。
灯管用铝制灯罩作反向或侧向照射,可用于有人在的条件下消毒空气。
对污染表面消毒时, 灯管距表面不超过 1m , 灯管周围 1.5~2cm 处为消毒有效范围。
《医学微生物学》第3章消毒灭菌与病原微生物实验室生物安全练习题及答案
《医学微生物学》第3章消毒灭菌与病原微生物实验室生物安全练习题及答案【知识要点】1.掌握：（1）消毒、灭菌、清洁、防腐、无菌及无菌操作的概念。
（2）消毒灭菌的运用（3）病原微生物实验室的分级2.熟悉：常用的高压蒸气灭菌法、巴氏消毒法等热力杀菌法日光与紫外线杀菌机理及其应用；常用的化学消毒剂的种类及其应用。
实验室感染的控制以及监督和法律责任。
3.了解：热力灭菌法的种类和应用范围；常用化学消毒剂的作用机制及影响作用的因素。
【课程内容】第一节消毒灭菌常用术语第二节消毒灭菌的方法一、物理消毒与灭菌（一）热力灭菌法（二）辐射杀菌法（三）滤过除菌法（四）超声波消毒法（五）干燥与低温抑菌法二、化学消毒灭菌法（一）化学消毒灭菌法的原理（二）消毒剂的主要种类第三节消毒灭菌的运用一、医疗器械物品的消毒灭菌二、室内空气消毒灭菌三、手和皮肤的消毒四、黏膜消毒五、病人排泄物与分泌物的消毒灭菌六、病人污染物品的消毒七、饮水的消毒八、环境的消毒第四节影响消毒灭菌效果的因素一、微生物的种类二、微生物的物理状态三、微生物的数量四、消毒剂的性质、浓度与作用时间五、温度六、酸碱度七、有机物第五节病原微生物实验室生物安全一、病原微生物的分类二、病原微生物实验室的分级实验室感染的控制以及监督和法律责任【应试习题】一、名词解释1．防腐2．高压蒸气灭菌法3．灭菌4．无菌5．消毒6．抑菌7．巴氏消毒法8. 清洁二、填空题1．化学消毒剂杀菌或抑菌的作用机理是_______、_______和。
2．高压蒸气灭菌法的蒸气压力为_______kg／C㎡，温度达_______℃，维持时间是_______min。
3．紫外线杀菌力最强的波长为_______，常用于无菌室的_______消毒。
4．预防新生儿淋病奈瑟菌感染常用的滴眼剂是_______。
5．消毒手术包常采用的方法是______________________，其温度达到______________，维持时间是_____________________，可去除细菌及___________________。
消毒与灭菌
毒
科
BSL-3
BSL-2
4 Ebola virus
埃博拉 丝 病毒 状
病 毒 科
第 BSL-4 ABSL-4 一 类
BSL-3
BSL-2
运输包装分
类f
无感染性 A/B 材料的操 作e
UN编 号
备注
BSL-1 A UN 2814
BSL-1 A UN 仅培养 2814 物A类
➢应用范围： 手术室、传染病房、细菌实验室空气的消毒，不耐
热物品的表面消毒。
宁夏医科大学
2、电离辐射：
➢高速带电离子、X射线、γ射线等； ➢机制：
破坏核酸及蛋白质等生物大分子； 破坏细胞膜； 并引起酶系统紊乱； 瞬间产生大量自由基，干扰DNA复制。水分子 经辐射后产生H2O2。
宁夏医科大学
➢应用范围： 常用于中药和一次性医用塑料制品的灭菌。
宁夏医科大学
➢滤过除菌：通过机械阻留作用将液体或空气中的细菌等 微生物除去的方法。
滤膜孔径为0.22μm，只能除去细菌，不能除去病毒、
支原体、衣原体、细菌L型等小颗粒。
宁夏医科大学
➢主要用于不耐高温 的营养液、血清、抗 菌素、空气等除菌。
宁夏医科大学
（四）干燥抑菌法
➢作用：干燥环境中微生物因失去水分致新陈代谢障碍， 菌体蛋白变性，逐渐死亡。 ➢用途：常用于保存食品、饲料、谷类、皮张、药材等。 利用高浓度的盐水或糖水保存食品，高渗溶液吸取菌体水 分，造成生理干燥而抑菌。
BSL-1 A UN 2814
宁夏医科大学
二、生物安全实验室的生物防护分级
《病原微生物实验室生物安全管理条例》根据实验室 对病原微生物防护的生物安全水平（biology security level， BSL）及实验微生物国家安全标准，将实验室分为四个等 级：
消毒与灭菌
上,可使被处理物品中的芽胞、繁殖体全部
被杀灭,即达到灭菌目的。 适用于含糖、血清等不耐高温的营养培 养基的灭菌,或用于无高压蒸汽灭菌器而物 品又必须灭菌时。
2.紫外线( ultraviolet ray,U)杀菌法
波长200-300mm的紫外线(包括日光中紫
外线)有杀菌作用,其中波长265-266m作用
下,温度可达121.3℃,维持15-20分钟,可达 到灭菌的目的。
适用于金属器械、敷料、手术衣、生理
盐水、普通培养基等耐高温、耐湿物品的
灭菌,不适用于油类及粉剂。现在还有一种
新型的预真空压力蒸汽灭菌器,灭菌速度快,
省时节能,效果更好。
2)煮沸法:在一个大气压(101.325kPa)下,
水煮沸(温度100℃)经5分钟可杀死细菌繁
消毒效果,故消毒皮肤、器械和衣服时,需先
洗净这些污染物后再消毒； 对痰液、粪便等的消毒,宜选择受有机物影 响小的消毒剂,如漂白粉、生石灰、酚类等。
(4)其他影响
其他影响消毒效果的因素还有温度、湿度、 酸碱度等,如戊二醛溶液中加入碳酸氢钠后 才有杀菌作用。
小结
消毒是指杀灭物体上病原微生物的方法,不一定能杀死非病原微 生物或细菌芽胞。用于消毒的化学制剂称为消毒剂。灭菌是指杀 灭物体上所有微生物的方法,包括杀灭细菌芽胞在内的所有病原微 生物和非病原微生物。无菌是指物体上无活的微生物存在。防腐 是指防止或抑制微生物生长繁殖的方法。防腐不导致微生物死亡, 用于防腐的化学制剂称为防腐剂。无菌操作防止活的微生物侵入 机体或污染物品的操作方法称为无菌操作。无菌操作所用器具和 材料必须先经灭菌处理。物理消毒灭菌方法是利用热力射线、超 声波滤过、干燥、低温等物理因素进行消毒灭菌的方法。焚烧是 一种简单、彻底的灭菌方法,高压蒸汽灭菌法是医疗中最常用、最 有效的灭菌方法。煮沸法是一种简便、实用的消毒方法。紫外线 杀菌法能破坏DNA而导致微生物的变异或死亡。但紫外线穿透力弱, 玻璃、纸张、灰尘、蒸汽等均能阻挡紫外线,所以只适用空气消毒 或不耐热物品表面消毒。紫外线对入体皮肤、眼睛有损伤作用,使 用时应注意防护。化学消毒灭菌法只能外用或用于环境消毒。
4 消毒灭菌
9. 能达到灭菌效果的方法
A．煮沸10分钟 煮沸10分钟 10 干烤160℃ 1～ B．干烤160℃ 1～2小时 C．巴氏消毒法 D．高压蒸汽灭菌 E. 滤菌器滤过除菌
（3）人工紫外线灯原理：将水银放入石 人工紫外线灯原理： 英玻管中通电气化而成。 英玻管中通电气化而成。 （4）紫外线的穿透能力弱，不能通过普 紫外线的穿透能力弱， 通玻璃、尘埃， 通玻璃、尘埃，只能用于消毒物体表面及 空气、手术室、 空气、手术室、无菌操作实验室及烧伤病 亦可用于不耐热物品表面消毒。 房，亦可用于不耐热物品表面消毒。 杀菌波长的紫外线对人体皮肤、 （5）杀菌波长的紫外线对人体皮肤、眼 睛均有损伤作用，使用时应注意防护。 睛均有损伤作用，使用时应注意防护。
第三章 消毒与灭菌
梅 雪
一 基本概念
消毒（Disinfection） 消毒（Disinfection）
杀灭物体上病原微生物的方法。 杀灭物体上病原微生物的方法。用以消毒的 药物称为消毒剂(Disinfectants) (Disinfectants)。 药物称为消毒剂(Disinfectants)。一般消毒剂 在常用浓度下，只对细菌繁殖体有效。 在常用浓度下，只对细菌繁殖体有效。对于芽胞 则需要提高消毒剂的浓度和延长作用的时间。 则需要提高消毒剂的浓度和延长作用的时间。
A． 杀灭物体上所有微生物的方法 B． 杀死物体上病原微生物的方法 C． 抑制微生物生长繁殖的方法 D．杀死细菌芽胞的方法 E. 物体中没有任何活的微生物存在
2．杀灭细菌芽胞最有效的方法是
A． 煮沸法 B． 流动蒸汽消毒法 C． 间歇灭菌法 D． 高压蒸汽灭菌法 E. 巴氏消毒法
第三章 消毒与灭菌
耐热药品、手术敷料等。
手提式高压蒸汽灭菌器
二. 辐 射
辐射：能量通过空间传递的一种物理现象。按辐
射对微生物的灭活作用分：
1.非电离辐射: 可见光、日光、紫外线 2.电离辐射: 、、γ 、χ 射线以及高能质子、 中子等
(一)非电离辐射
1.可见光: 指在红外线和紫外线之间的肉眼可见的光线，
其波长400～800nm。可见光线对微生物一般无多大影 响，但长时间作用也能妨碍微生物的新陈代谢与繁殖，故
4. 何谓细菌素？
5. 毒性噬菌体和温和噬菌体的概念。 6. PFU的概念。
(2)巴氏消毒法 :以较低温度杀灭液态食品中的病原菌或特定微生物，
而又不致严重损害其营养成分和风味的消毒方法 . 1.低温维持巴氏消毒法 63～65℃30min 2.高温瞬时巴氏消毒法 71～72℃15s 3.超高温巴氏消毒法 132℃1～2s
（3）流通蒸汽灭菌法 ：是一种常压蒸汽消毒法，细
菌繁殖体15-30分钟可杀灭，但芽孢不全部被杀灭。
培养细菌和保存菌种，均应置于阴暗之处。
光感作用 :指可见光具有微弱的杀菌作用，若将某些染料 如结晶紫、美蓝、汞溴红、伊红、沙黄等加到培养基或涂 在外伤表面，能增强可见光的杀菌作用 。
2.阳光: 直射日光有强烈的杀菌作用，是天然的杀菌因
素。许多微生物在直射日光的照射下，半小时到数小 时即可死亡。芽胞对日光照射的抵抗力比繁殖体大得 多，往往需经20h才死亡。日光的杀菌效力因地、因
（二）植物杀菌素 ：某些植物中存在的杀菌物质。
如黄连、大蒜、板蓝根等。
（三）细菌素 ：某种细菌产生的一种具有杀菌作用的
蛋白质，只能作用于与它同种不同菌株的细菌 以及与它亲缘关系相近的细菌，如大肠菌素 。
微生物消毒与灭菌
4.When the second cell becomes infected with viruses, the AVP is activated. Active AVP stops viral replication.
干扰素抗病毒作用特点
1. 抗病毒作用生物活性高 2. 抗病毒作用具有广谱性 3. 选择性作用病毒感染的细胞 4. 抗病毒作用具有种属特异性 5. 无直接灭活病毒的作用
影响消毒灭菌效果的因素
1. 消毒剂的性质、浓度与作用时间。 2. 微生物的种类与数量。 3. 温度：温度升高，可提高消毒效果。 4. 酸碱度：酸碱度不同会影响消毒剂的浓度。 5. 有机物：消毒环境中存在有机物，可减弱消毒效果。
免疫预防（Immunoprophilaxis）
通过给人或动物接种生物制品，达到 预防感染性疾病的目的。
微生物感染的控制措施
Measures for Control of Microbial Infection
二 零 一 一 年 二 月
消毒与灭菌基本概念
消毒（disinfection）： 杀灭物体上病原微生物的方法，但不一定包括
细菌芽胞在内。
灭菌（sterilization）： 杀灭物体上包括细菌芽胞和病毒在内的所有微
Edward Jenner
人工主动免疫（ Artificial active immunization ）
用人工接种的方法给机体注射抗原性物质，使机体免疫系统 因受抗原刺激而产生体液和（或）细胞免疫应答的过程。
人工被动免疫（ Artificial passive immunization ）
给机体注射含有特异性抗体的免疫血清或纯化的免疫球蛋白 抗体，使机体迅速获得特异性免疫力的过程。
医学微生物学 消毒灭菌
很少引起严重疾病，并且具备有效治疗和预防措施的微
生物。肝炎病毒、CMV、EBV 第四类 是指在通常情况下不会引起人或动物疾病的微生物。 如小鼠白血病病毒等。 第一类、第二类统称为高致病性病原微生物。
二、病原微生物实验室的分级
级别 处理对象 一级 对人体、动植物或环境危害较低，不具有对健康成人、 动植物致病的致病因子。 对人体、动植物或环境具有中等危害或具有潜在危险的 二级 致病因子，对健康成人、动植物和环境不会造成严重危 害，具有有效的预防和治疗措施。 对人体、动植物或环境具有高度危险性，主要通过气溶 三级 胶使人类传染上严重的甚至是致命的疾病，或对动植物 和环境具有高度危害的致病因子。通常有预防治疗措施。 对人体、动植物或环境具有高度危险性，通过气溶胶途 四级 径传播或传播途径不明或未知的危险的致病因子。没有 预防治疗措施。
二、化学消毒灭菌法
化学消毒剂的作用机制
消毒剂的主要种类 消毒剂的应用
消毒剂杀菌机理：
1. 使菌体蛋白变性和凝固 ：
酚、醇、酸硷、醛类、 重金属盐类（高浓度）
2 . 干扰细菌的酶系统（酶失活）：
氧化剂、重金属盐类（低浓度）
3. 损伤细菌细胞膜 ：
酚类（低浓度）、表面活性剂
按杀菌能力又可将消毒剂可分
高压蒸气灭菌器 103.4Kpa 121.3º C×15-20 分 钟
品
灭菌
消毒
医疗器械
煮沸法
湿
饮水和食具
耐高温 耐湿物
灭菌
热
法
品
种类 巴氏消 毒法
方法
效果
用途
牛奶，酒类
湿
巴斯德创用，61.1消毒（杀死病 62.8℃×30分钟， 原菌，不破坏 71.7 ℃ ×30秒钟 营养成分） （常用）
03第三章 消毒与灭菌
第二类：高温瞬时巴氏消毒法，在71-72℃保持15s。
第三类：超高温巴氏消毒法，在132℃ 保持1-2s。
加热消毒后需迅速冷却至10 ℃以下，称为冷击。
3）流通蒸汽灭菌法 ：利用蒸汽在蒸笼或 流通蒸汽灭菌器内进行灭菌的方法，也称 间歇灭菌法。灭菌后需保温过夜再灭菌， 以达到完全灭菌的目的。
髓、尾鞘、尾板、尾刺、尾丝组成。
不同的噬菌体示意图
（二）抗原性及抵抗力 1、抗原性：能刺激机体产生特异性抗体。
特性：该抗体能抑制相应噬菌体侵袭敏感 细菌，但对已吸附或已进入宿主菌的噬菌体 不起作用。 2、抵抗力：对理化因素的抵抗力较强，较 耐热、耐低温和冰冻，但对紫外线和Ｘ射线 敏感；大多数能抵抗乙醚、氯仿和乙醇，在 0.5%升汞或苯酚中经3—7天不丧失活性。在 饱和NaCl溶液中保持活力数年。
可见光线对微生物一般无多大影响，但长时 间作用也能妨碍微生物的新陈代谢与繁殖，故培 养细菌和保存菌种，均应置于阴暗处。 （二）阳光：直射日光有强烈的杀菌作用，紫外 线是日光杀菌作用的主要因素。
（三）紫外线：紫外线中波长200-300nm部分具有 杀菌作用，以265-266nm波长段的杀菌力最强。一 般实验室常用253.7nm，杀菌力强而稳定，照射1015min即可。 特点：穿透力很差，即使是很薄的玻璃也不能透 过。 适用范围：常用于微生物实验室、无菌室、手术室、 传染病房、种蛋室等的空气消毒，或用于不能用高 温或化学药品消毒的物品表面消毒。
二、消毒剂的种类及其应用
消毒剂的种类很多，一般可根据用途与消毒剂特点选择使用。 理想的消毒剂 杀菌力强、无腐蚀性、能长期保存、对动 物毒性很小、无残留污染、价格低等。 消毒剂的分类 （1）使菌体蛋白质变性 如酚类、醇类、重金属盐类、酸碱类、 醛类； （2）损伤胞浆膜 如酚类(低浓度)、表面活性剂、醇类等脂 溶剂；
消毒与灭菌知识点总结
消毒与灭菌知识点总结一、概念与分类消毒与灭菌是指利用化学、物理或其他方法杀灭或去除细菌、病毒、真菌、寄生虫等病原微生物的过程。
消毒主要针对可见的病原微生物，而灭菌则包括对细菌、病毒、真菌等更小的微生物。
根据不同的消毒、灭菌目的以及方法，消毒与灭菌可以分为多种类型，主要包括物理消毒、化学消毒、生物消毒等。
二、消毒与灭菌的方法1. 物理消毒物理消毒方法主要包括高温消毒、辐射消毒和过滤消毒。
高温消毒通过加热杀灭微生物，可以使用湿热、干热和高温气体消毒。
辐射消毒则是利用紫外线、X射线和γ射线等辐射杀灭细菌病毒。
过滤消毒则是通过对空气和水进行过滤来去除微生物。
2. 化学消毒化学消毒方法主要包括气体消毒、液体消毒和固体消毒。
其中气体消毒主要通过使用氯气、乙烯氧化物和过氧乙酸等气体来灭菌。
液体消毒则是利用酒精、碘伏、高锰酸钾等液体来进行消毒。
固体消毒则是通过使用过氧化物、次氯酸钠和双氧水等固体材料来消毒。
3. 生物消毒生物消毒是指利用生物学方法来消灭微生物，主要包括利用细菌、酵母菌和真菌等微生物来进行消毒。
三、选择合适的消毒与灭菌方法在实际生产、生活和医疗过程中，选择合适的消毒与灭菌方法是非常重要的。
根据不同的场合和要求，需要选择适合的消毒与灭菌方法。
比如，在医疗器械消毒和医疗场所消毒中，常用的方法包括高压蒸汽灭菌、乙烯氧化物消毒和紫外线消毒等。
在食品加工和餐饮场所，常用的方法包括高温杀菌、过氧化氢消毒和次氯酸钠消毒等。
四、消毒与灭菌的注意事项在进行消毒与灭菌时，需要注意以下几点：1. 选择合适的消毒与灭菌方法，根据不同的场合和要求进行选择；2. 控制消毒与灭菌的时间与温度，确保杀灭微生物的效果；3. 根据需要对消毒与灭菌的效果进行监测和验证；4. 严格执行消毒与灭菌操作规程，确保操作的安全与卫生；5. 对消毒与灭菌后的物品进行储存与封存，以免再次被污染。
五、消毒与灭菌的重要性消毒与灭菌在现代社会中扮演着非常重要的角色，它关系到人们的生活健康和生产安全。
兽医微生物学 第三章 消毒与灭菌
第三章消毒与灭菌第一节物理因素对微生物的影响第二节化学因素对微生物的影响第三节生物因素对微生物的影响1、灭菌（sterilization）指杀死物体中所有微生物的过程。
经灭菌后物体内外不含有任何活的微生物及其细菌的芽胞、霉菌孢子等。
2、消毒（disinfection）指杀灭物体中的病原微生物的过程。
消毒只要求达到消除传染性的目的，而对非病原微生物及其细菌的芽胞、霉菌孢子等不做要求。
3、防腐（antisepsis）指阻止或抑制微生物生长繁殖。
4、无菌（asepsis）指没有活的微生物的状态。
采取防止或杜绝任何微生物进入动物机体或其它物体的方法，称为无菌法。
以无菌法进行的操作称为无菌操作。
无菌操作（如下图）第一节物理因素对微生物的影响一、温度(一)低温大多数微生物对低温具有很强的抵抗力。
低温下，代谢活动降低到最低水平，生长繁殖停止，但仍可长时间保持活力。
意义：保存菌种、毒种、疫苗等(二)高温：高温对微生物具有明显的致死作用热力灭菌法：干热灭菌和湿热灭菌两种方法。
二者比较：在同一温度下，后者效力比前者为大。
原因：（1）湿热中细菌菌体蛋白较易凝固，蛋白质的含水量与凝固所需的温度成反比；（2）湿热的穿透力比干热强；（3）湿热的蒸汽遇物体放出潜热进一步提高物体的温度。
1、干热灭菌法(1)火焰灭菌法: 分为灼烧和焚烧两种，灼烧主要用于耐烧物品，直接在火焰上烧灼，如接种针（环）、金属器具、试管口等的灭菌；焚烧常用于烧毁的物品，直接点燃或在焚烧炉内焚烧，如传染病畜禽及实验感染动物的尸体、病畜禽的垫料以其他污染的废弃物等的灭菌(2)热空气灭菌法干热灭菌器适用于高温下不损坏、不变质的物品，如玻璃器皿、瓷器等的灭菌。
灭菌温度需160-170℃维持1.5-2 h 。
2、湿热灭菌法(1)煮沸消毒法:煮沸10～20 min可杀死所有细菌的繁殖体，芽胞常需煮沸1～2 h 才被杀死。
用于饮水、一般手术器械如刀剪、注射器、针头的消毒。
实验3 消毒与灭菌
实验三消毒与灭菌一、实验目的：掌握微生物消毒与灭菌的方法二、实验原理灭菌是用物理或化学的方法来杀死或除去物品上或环境中的所有微生物。
消毒是用物理或化学的方法杀死物体上绝大部分微生物(主要是病原微生物和有害微生物)。
消毒实际上是部分灭菌。
灭菌原理：高压蒸汽灭菌是将待灭菌的物品放在一个密闭的加压灭菌锅内，通过加热，使灭菌锅隔套间的水沸腾而产生蒸汽。
待水蒸汽急剧地将锅内的冷空气从排气阀中驱尽，然后关闭排气阀，继续加热，此时由于蒸汽不能溢出，而增加了灭菌器内的压力，从而使沸点增高，得到高于100℃的温度。
导致菌体蛋白质凝固变性而达到灭菌的目的。
适用于一般培养基、玻璃器皿、无菌水、金属用具。
一般培养基在121．3℃灭菌20分钟即可。
干热灭菌是利用高温使微生物细胞内的蛋白质凝固变性而达到灭菌的目的。
细胞内的蛋白质凝固性与其本身的含水量有关，在菌体受热时，当环境和细胞内含水量越大，则蛋白质凝固就越快，反之含水量越小，凝固缓慢。
因此，与湿热灭菌相比，干热灭菌所需温度高（160—170℃），时间长（1—2小时）。
但干热灭菌温度不能超过180℃，否则，包器皿的纸或棉塞就会烤焦，甚至引起燃烧，因而一般塑料制品不能用干热灭菌。
三、实验仪器高压蒸汽灭菌锅、电热烘箱、四、实验内容消毒与灭菌的方法很多，一般可分为加热、过滤、照射和使用化学药品等方法。
（一）加热法加热法又分干热灭菌和湿热灭菌两类。
1.干热灭菌有火焰烧灼灭菌和热空气灭菌两种。
火焰烧灼灭菌适用于接种环、接种针和金属用具如镊子等，无菌操作时的试管口和瓶口也在火焰上作短暂烧灼灭菌。
通常所说的干热灭菌是在电烘箱内灭菌，此法适用于玻璃器皿如吸管和培养皿等的灭菌，在热空气160℃-170℃下保温2小时进行灭菌。
2.湿热灭菌（1）高压蒸汽灭菌法此法是将物品放在高压蒸汽灭菌锅内1.05kg／cm2(15磅/英寸2)，121.3℃保持15-30分钟进行灭菌。
时间的长短可根据灭菌物品种类和数量的不同而有所变化、以达到彻底灭菌为准。
第三章 消毒与灭菌
3. 流动蒸气消毒法又称常压蒸气消毒法，是利用一个大气压下100℃的水蒸气进行消毒。细菌繁殖体经15～30min可被杀灭，但芽胞常不被全部杀灭。该法常用的器具是Arnold消毒器，我国的蒸笼具有相同的原理。
三、滤过除菌法
滤过除菌法（filtration）是用物理阻留的方法将液体或空气中的细菌除去，以达到无菌目的。所用的器具是滤菌器（filter），滤菌器含有微细小孔，只允许液体或气体通过，而大于孔径的细菌等颗粒不能通过。滤过法主要用于一些不耐高温灭菌的血清、毒素、抗生素以及空气等的除菌。滤菌器的除菌性能，与滤器材料的特性、滤孔大小、静电作用等因素有关。滤菌器的种类很多，目前常用的有薄膜滤菌器、素陶瓷滤菌器、石棉滤菌器（亦称Seitz滤菌器）、烧结玻璃滤菌器等。
二、消毒剂的应用
病人排泄物与分泌物 粪、尿、脓、痰等，一般多用等量的20％漂白粉、5％石炭酸或2％来苏，搅拌均匀，作用2h再倾去。
皮肤2.5%碘酒、70％乙醇、2％红汞均可应用。
粘膜新生儿预防淋病奈瑟菌性眼结膜炎可用1％硝酸银或2％蛋白银滴眼；口腔粘膜消毒可用3％过氧化氢；冲洗尿道、阴道、膀胱等可用0.01%～0.1%洗必泰或0.1％高锰酸钾。
表面活性剂又称去污剂，易溶于水，能减低液体的表面张力，使物品表面油脂乳化易于除去，故具清洁作用。并能吸附于细菌表面，改变胞壁通透性，使菌体内的酶、辅酶、代谢中间产物逸出，呈现杀菌作用。表面活性剂有阳离子型、阴离子型和非离子型三类。因细菌带阴电，故阳离子型杀菌作用较强。阴离子型如烷苯磺酸盐与十二烷基硫酸钠解离后带阴电，对革兰阳性菌也有杀菌作用。非离子型对细菌无毒性，有些反而有利于细菌的生长，例如吐温80（tween 80）对结核分枝杆菌有刺激生长、并有使菌分散的作用。常用于消毒的表面活性剂有新洁尔灭、杜灭芬等。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
精选课件
29
可见光线的影响
长时间暴露于光线中，其代谢与繁殖均可受 影响而递增。
光感作用（photosensitization）:某些染 料能增强可见光的杀菌作用。
一般在有氧条件下才出现光感作用；
G+菌比G-菌对光感作用敏感；
伊红、美兰和汞溴红只作用于G+菌，沙黄只 作用于G-菌.
精选课件
表面、G— 菌（敏感）、葡萄球菌和链球菌 （抵抗力大，5~10倍）、芽胞（病毒抵抗力 大）
精选课件
32
紫外线对微生物的作用机理：
DNA分子吸收260nm左右的紫外光，同一 股DNA链上相邻的胸腺嘧啶通过共价链结 合形成胸腺嘧啶二聚体，影响DNA复制与 转录时的正常碱基配对，引起致死性突变 而死亡。
无菌操作：是指防止或杜绝任何微生物进入动物机体 或其他物体的方法。
精选课件
3
方法
精选课件
4
第一节 物理消毒灭菌法
精选课件
5
控制温度（高温、低温） 干燥 渗透压 辅射 微波 声波 滤过
精选课件
6
一、温度与热力灭菌法
温度是微生物生长繁殖的重要因素。 最适温度：微生物繁殖最快、最盛，并能将它
第三天：100℃-30分钟，杀死所有微生物。
精选课件
15
巴氏消毒法
常用于牛乳及一些饮料
最大限度地消灭病原体，尽可 能少地损害食品的营养物质
•低温维持巴氏消毒法（LTH)：
•63～65℃-30分钟；
•高温短时间巴氏消毒法(HTST):
•71～72℃-15秒，
•超高温巴氏消毒法(UHT):
•132℃-1～2秒
第三章 消毒与灭菌
精选课件
1
微生物有比其他生物更大的表面积，极高的 代谢率，惊人的繁殖速度和明显的适应能力。
用控制微生物的生长的方法来减少它们对营 养资源的破坏。如食物的腐烂、人与动物的 疾病等。
物理
化学
生物
精选课件
2
概念
灭菌（Sterilization）：杀死物体上所有微生物的方 法，包括杀灭所有细菌芽孢、霉菌孢子在内的全部病 原微生物和非病原微生物。
消毒（Disinfection）：杀灭物体上的病原微生物的 方法，叫消毒。消毒只要求达到消灭传染性的目的， 而对非病原微生物及其芽孢、孢子并不严格要求全部
Байду номын сангаас杀死。
防腐(Antisepsis)或抑菌：指阻止或抑制物品上微生 物生长繁殖的方法，微生物不一定死亡。
无菌（asepsis）：指没有活的微生物的状态。
精选课件
22
温度对一种嗜中温菌存活力的影响
精选课件
23
细菌的浓度
浓度越大，杀死最后一个细菌所需时间愈长。
精选课件
24
介质的性质
细菌在非水介质中，比水作介质时对热 的抵抗力大
水分、2~4℃石炭酸、油类、干焦空气
精选课件
25
不同介质对微生物抗热力的影响
精选课件
26
2、低温抑菌法
低温可降低微生物代谢的速度。 大多数微生物对低温有很强的抵抗力 一般的：4-10℃ 淋球菌、脑膜炎球菌、流行感冒杆菌敏感，
的生活机能充分地表现出来的温度。 最高温度：能够生长的最高温度。 最低温度：能够生长的最低温度。
细菌休眠
细菌生长繁殖
细菌死亡
最低温度
最适温度
最高温度
精选课件
7
根据微生物对温度的适应性可分为：
嗜冷菌 嗜温菌 嗜热菌
精选课件
8
生长温度范围
精选课件
9
1、热力灭菌法
高温杀菌原理：高温可引起菌体蛋白质、核酸 酶系统破坏
30
日光的影响
直射阳光有强烈的杀菌作用，是天然的 杀菌因素。
细菌：0.5-几个小时 炭疽杆菌芽胞：20小时
精选课件
31
紫外线的影响
紫外线波长：13.6-400nm ；
杀菌波长： 200-300nm ；
265-266nm杀菌力最强 ；
紫外线杀菌灯253.7nm； 紫外线穿透力较弱，只适用于空气及表面杀菌
精选课件
33
光复活作用：细菌受致死量的紫外线照射后，3h
精选课件
16
高压蒸气灭菌法
121.3℃ (15磅压力/英寸2 ) 20-30分
115℃ (10磅压力/英寸2 ) 20-30分（含葡萄糖培养基）
精选课件
17
影响高温杀菌作用的因素
微生物的类型 菌龄及发育时温度 加热的温度和时间 细菌的浓度 介质的性质
精选课件
18
几种细菌的致死温度及时间
蛋白质受热变性→氢键破坏→失去生物活性
精选课件
10
热力灭菌法
干热灭菌法
•火焰灭菌法 •热空气灭菌法
湿热灭菌法
•煮沸灭菌 •流通蒸气灭菌法 •巴氏消毒法 •高压蒸气灭菌法
精选课件
11
干热灭菌法
火焰灭菌法
以火焰直接灼烧杀死 物体中的全部微生物 的方法。
灼烧 焚烧
精选课件
酒精灯
12
热空气灭菌法
精选课件
19
几种细菌芽胞的致死温度及时间
精选课件
20
菌龄及发育时温度
对数生长期比老龄菌抵抗力低， 芽胞最适形成比最高时抵抗力大。
精选课件
21
加热的温度和时间
60℃
30分 ；
70℃
10~15分；
80~100℃→立即、几分钟
热毙点：是指一定时间内杀死某菌所需的温度。 热毙时：是指一定温度下杀死某菌所需的时间。
伤寒杆菌、白喉杆菌耐低温 冷冻干燥：采用迅速冷冻和抽真空除水。
精选课件
27
为什么低温保存微生物时必须迅速冷冻， 原因是： （1）冰结晶扰乱胞浆胶体状态； （2）刺伤菌体胞膜、胞壁； （3）迅速冰冻，水分形成均匀的玻璃样状态；
精选课件
28
二、辅射灭菌法
可见光线的影响 日光的影响 紫外线的影响 电离辐射的影响 放射性同位素对微生物的影响 红外线 微波
适用于高温下不损坏、 不变质的物品，需在 160℃维持1－2小时， 才能达到杀死所有微 生物及其芽孢、孢子 的目的。
精选课件
干烤箱 13
湿热灭菌法
煮沸灭菌
100℃，煮沸10～20分钟，可杀死所有细 菌繁殖体，芽孢常需煮沸1－2h才能杀死。
水中加入2%碳酸钠或2～5%石炭酸增强 灭菌效果）
精选课件
14
流通蒸气灭菌
利用蒸汽在蒸笼或流通蒸汽灭菌器内杀死细菌的方 法。
100℃-30分钟，杀死细菌繁殖体。 间歇灭菌法 ：（含糖培养基；血清培养基）
第 一 天 ： 100℃-30 分 钟 ， 杀 死 细 菌 繁 殖 体 ， 37℃过夜培养，芽孢发芽为繁殖体；
第 二 天 ： 100℃-30 分 钟 ， 杀 死 细 菌 繁 殖 体 ， 37℃过夜培养，残余的芽孢发芽为繁殖体；