6、低密度脂蛋白胆固醇标准操作规程(LDL-C)

前言

为使临床检验操作规范化，指导检验人员严格按规程进行正确的常规操作，保证检验质量，特制定本操作规程。本规程的编写遵循了ISO 15189《医学实验室——关于质量和能力的特殊要求》及WS/T 227-2002《临床检验操作规程编写要求》的有关规定并结合产品实际情况制订，作为本产品的标准操作程序。

本规程从2007年5月2日起实施，每2年复审1次。

本规程由浙江伊利康生物技术有限公司编制。

本规程起草单位：伊利康生物技术有限公司技术部。

本规程主要起草人：蒙凯、蔡其浩。

本规程首次起草。

目录

1 检验申请 (3)

2 标本采集与处理 (3)

3 试剂及成份 (4)

4方法原理 (4)

5 仪器 (4)

6 校准液及校准模式 (4)

7质控品与室内质控规则 (4)

8标本检测步骤 (5)

9 结果计算 (5)

10 操作性能 (5)

11试剂使用的注意事项 (5)

12参考范围及医学决定水平 (5)

13检验结果的报告及范围 (5)

14临床意义 (6)

15结果审核分析以及相关项目的联系 (6)

16威胁生命的“紧急值”及报告规定. (6)

17有关引用程序与文件 (6)

18参考文献

附录A XXX型全自动生化分析仪参数

低密度脂蛋白胆固醇测定标准操作规程

1.检验申请

单独检验项目申请：血清低密度脂蛋白胆固醇（Low Density Lipoprotein-Cholesteroll；,缩写LDL-C）测定；组合项目申请：血脂测定。临床医生根据需要提出检验申请。

2.标本采集与处理

2.1 受检者的准备：

采血前2周保持平时的饮食习惯，3d内避免高脂饮食，24h内不饮酒，空腹12h后采集标本。体检对象抽血前应有两周的正常状况记录。注意有无应用影响测试项目的药物。此外，对于体检者，采血的季节都应做相关记录，因为样本中各项目的含量有季节性变动，为了前后比较应在每年同一季节检验。应嘱体检对象在抽血前24小时内不做剧烈运动。

2.2标本采集

2.2.1除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。体位影响水分在血管内外的分布，会影响测试项目的浓度。在采血前至少应静坐5分钟，一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1分钟，穿刺成功后立即松开止血带，不抗凝，置普通试管中。或采用含分离胶的黄色盖子SST真空采血管，如为急诊标本，使用浅绿色盖子PST试管。

2.2.2检验申请单和血标本试管上统一且唯一的标识符。

2.2.3标本采集后，在检验申请单上填写标本采集时间，如为急诊标本，加上急查标识。

2.2.4标本采集后与检验申请单一起及时运送至检验科。专人负责标本的接收并记录标本的状态，对不合格标本予以拒收。

2.2.5下列标本为不合格标本

2.2.5.1标本量不足：少于0.3ml的全血标本，或少于0.1ml的血清或血浆。

2.2.5.2对反应吸光度有干扰的标本，包括严重溶血、黄疸和浑浊的标本。

2.2.5.3对无法确认标本与申请单对应关系的。

2.2.5.4其他如标识涂改、标本试管破裂等。

2.3标本处理

2.3.1接收标本后在30min内将标本离心分离出血清。

2.3.2标本保存时间：室温（15～25℃）下可稳定1d，普通冰箱中（2～8℃）稳定7d。-20℃可保存数月；-70℃至少保存半年；避免反复冻溶。为避免标本中水分挥发使血清浓缩，对保存时间超过1d的标本均加塞密闭或覆盖湿巾。

2.3.3已完成测试的标本保持完整的识别号，置2～8℃冰箱内保存7d。

2.4标本的注意事项

2.4.1不建议采集抗凝标本，如果必须使用血浆，推荐的抗凝剂是肝素。

2.4.2妊娠后期各项血脂都会增高，应在产后或终止哺乳后3个月查血才能反映基本血脂水平。

2.4.3采血前最好停用影响血脂的药物（如调脂药、避孕药、某些降压药、激素等）数天或数周，否则应记录用药情况。

2.4.4血清标本出现溶血、脂血、黄疸或抗坏血酸的干扰情况参见抗干扰能力。

3.试剂及成份

3.1试剂

本科使用的低密度脂蛋白胆固醇检测试剂盒，由浙江伊利康生物技术有限公司生产，产品货号为:XXX，试剂为液体双试剂，其组份如下：

3.2试剂盒保存及效期

未启封试剂盒在2～8℃保存，可储存至失效期。启封使用的试剂置仪器试剂仓冰箱内稳定28d。开盖后避免污染。当试剂变混浊，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。

3.3试剂盒准备

液态试剂型，即开即用，无特殊准备。

4.方法原理

4.1测定方法：终点法。

4.2原理：样品中的低密度脂蛋白（LDL）与试剂中的聚阴离子结合形成复合物而被遮蔽，而高密度脂蛋白（HDL）、极低密度脂蛋白（VLDL）和乳糜微粒（CM）在特殊表面活性剂作用下与酶试剂发生反应，反应中生成的H2O2在缺乏偶联剂时不显色，对LDL有特异作用的表面活性剂水解LDL，释放出胆固醇，生成的胆固醇再在试剂中胆固醇酯酶（CEH）、胆固醇氧化酶（COD）、过氧化物酶（POD）等物质作用（Trinder 反应）形成紫色醌化合物，从而引起546nm处吸光度的上升。此种变化与样品中LDL-C浓度成正比。

5.仪器

XXXX型号仪器。

6.校准品与校准模式

6.1校准品：使用浙江伊利康生物技术有限公司的LDL-C标准液。

6.2标准类型和校准点数目：线性模式，1个校准点。

6.3校准周期：

全点定标：校准间隔时间为30d。但在:①更换试剂批号或出现质控漂移时；②仪器进行全面保养后；③仪器的重要零件更换后；均须进行一次校准。①更换试剂批号或出现质控漂移时；②仪器进行全面保养后；

③仪器的重要零件更换后；均须需要全点定标。

7.质控品与室内质控规则

7.1质控品采用由XXX公司提供的两个不同水平定值质控血清。

7.2质控液重建方法：用XXX.00mL蒸馏水溶解质控品，轻轻混匀，20min后即可使用。

7.3质控品测定：在每一批标本中测定至少两个水平质控血清各一次。

7.4质控规则：采用Westgard多规则质控规则，由计算机程序进行检索与判断。

7.5如出现失控情况，按室内质控标准操作程序采取各种有效的纠正措施及时纠正，并在确认重新回复到控制状态后开始标本检测。

8.标本检测步骤

装载试剂→进行校准→进行质控→输入标本检测项目→加载标本→标本测定→结果复核→报告。

9.结果计算

样品中LDL-C浓度（mmol/L）= C S×ΔA U/ΔA S

式中：ΔA T 待测样品的吸光度值

ΔA S 校准液的吸光度值

C S 校准液中LDL-C的浓度（mmol/L）

10.操作性能

10.1精密度：批内CV ≤3.0％，批间相对极差CV≤6.0％。

10.2 准确度：测量结果在质控血清靶值±2SD范围内。不同方法学试剂的质控结果之间会存在差异，使用时请确保质控选择与试剂的方法学保持一致。

10.3线性范围：0.05-10mmol/L（血清与试剂用量之比为1:100时）

10.4方法的有限性及干扰因素：

10.4.1当样品中抗坏血酸浓度> 2540μmol/L，胆红素浓度>342 μmol/L，血红蛋白浓度>5.00g/L，甘油三酯浓度>20 mmol/L时对测定结果有干扰。其他脂蛋白无影响。

11.试剂使用的注意事项

11.1本试剂仅应用于体外诊断。

11.2扔弃废物应符合当地的法规要求。

12.参考范围及医学决定水平

合适范围：＜3.12mmol/L