Waters高效液相色谱仪标准操作规程

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Waters高效液相色谱系统操作规程

Waters高效液相色谱系统操作规程

Waters高效液相色谱系统操作规程1. 目的规范Waters高效液相色谱系统的使用和维护。

2. 范围本规程适用于Waters高效液相色谱系统的使用和维护。

3. 职责质检室仪器分析员负责Waters高效液相色谱系统的日常使用和维护。

4. 系统组成本系统由Waters 600E多溶剂输送系统(有梯度控制器的高压输液泵)、Waters在线脱气机、Rheodyne 7725i 手动进样阀、Waters 2487双通道紫外检测器、Millennium32色谱工作站/电脑等组成,另外还包括打印机、断电保护器和通风柜等辅助设备。

5. 程序5.1. 准备5.1.1. 使用前应根据待检样品的检验方法准备所需的流动相(应足够;流动相必须用0.45μm滤膜过滤)、样品和标准溶液(也可在平衡系统时配制),更换合适的色谱柱(柱进出口位置应与流动相流向一致)和定量环。

5.1.2. 通电前应检查仪器设备之间的电源线、数据线和输液管道是否连接正常。

5.2. 开机和泵操作5.2.1. 开机5.2.1.1. 接通断电保护器的电源,依次打开断电保护器、脱气机、600E泵、2487检测器,待检测器自检结束显示测量状态时,打开打印机、电脑显示器、主机。

5.2.1.2. 打开Millennium32软件,按「Login...」,输入用户名和密码,按「OK」注册进入系统主界面。

在Project档内选择所需的项目,右击『Run Samples』图标,选择色谱系统“600_2487”后打开QuickSet窗口。

5.2.2. 更换溶剂5.2.2.1. 打开600E泵后,转动进口集合管阀手柄(以下简称手柄)至RUN位置;5.2.2.2. 将一塑料烧杯放在参照阀出口管下以收集分流的溶剂,向右打开参照阀(断开柱和进样器);5.2.2.3. 按[Direct]键使其显示直接控制屏幕,设流速为1ml/min(梯度配比阀在0ml/min时不工作);5.2.2.4. 选择欲使用的某一溶剂通道,设其比例为100%,其它为0%;5.2.2.5. 将输液管从原有溶剂瓶中取出,放入一干净的空瓶中;5.2.2.6. 逆时钟转动手柄至DRAW位置,用启动注射器从进口集合管阀的接口抽出约2ml溶剂;5.2.2.7. 再将输液管放入新溶剂瓶内,继续抽吸直到新溶剂出来并无气泡为止;5.2.2.8. 转动手柄至RUN位置,将启动注射器取下并排掉筒内的溶剂。

waters高效液相色谱

waters高效液相色谱

Waters高效液相色谱操作说明一.简介本高效液相色谱实验包括:waters1525泵+waters2487双波长检测器+色谱柱+电脑(breeze 图谱处理软件)+流动相二.操作流程0.准备工作确定色谱实验方法,处理好流动相1,换好流动相,确定色谱柱选择无误1.开机打开泵开关,听到两声“嘀”的响声之后,再打开波长检测器。

检测器进入预热阶段(此时检测器面板进入5min倒计时)这期间打开电脑,进入英文windows操作系统2,待检测器自检完毕(整个自检过程约6~7min),打开电脑桌面的(Breeze软件)。

待程序完全启动,整个开机过程结束。

系统默认进入上次使用的方案。

2.建立新方法和新方案2.1新建方案方案主要用来储存你的各个实验方法,数据等内容,你可以把它理解为一个文件夹。

2.1.1创建步骤选择→单击→单击"next"→在"project name"中输入方案名称(如abc),"comments"中可填注释,也可不填。

→单击"finish"2.1.2打开创建的方案在界面下→单击→在"project"中找到你创建的方案(如abc)→点击"OK",即进入到我们自己的方案中了2.2新建方法在新建的方案中,需要建立不同的试验方法。

试验方法主要设定的包括洗脱方式,检测波长等参数。

2.2.1新建方法步骤单击→单击→单击(Flow选项卡)→在programmed flow中设定你的洗脱方式(此步在2.2.2详述)→单击→单击(channel 1选项卡)→在"wavelength"框内设定你的检测波长(如265nm,280nm,215nm等等)→(设定结束,保存):单击→输入方法名称如(abc 1)→单击"save"32.2.2洗脱方式的设定(重要)在programmed flow中可看到。

waters超高效液相色谱仪操作步骤

waters超高效液相色谱仪操作步骤

第一部分:仪器准备1. 确保waters超高效液相色谱仪处于正常工作状态,检查仪器是否连接电源,是否有故障指示灯显示。

2. 打开色谱仪软件,检查仪器参数设置是否符合实验要求,包括流速、温度、检测波长等。

3. 准备所需的色谱柱、色谱柱连接器、进样器以及其他实验所需的耗材。

第二部分:样品准备1. 准备实验所需的样品,确保样品已经滤过或者处理过以去除杂质。

2. 根据实验要求,将样品溶解在适当的溶剂中,并进行稀释或者稀释。

第三部分:超高效液相色谱仪操作步骤1. 开始操作前,先进行系统平衡。

具体操作步骤为:将色谱柱连接至色谱柱连接器上,然后连接至色谱仪,用洗脱液平衡色谱柱。

2. 设置色谱仪的操作参数,包括流速、温度、检测波长等。

3. 进行样品进样,具体操作步骤为:将进样器连接至色谱仪,将稀释好的样品注入进样器中,设置好进样量。

4. 开始进行实验,监控色谱图谱的变化,记录实验数据。

5. 实验结束后,对色谱柱和色谱仪进行清洗和维护,确保仪器干净、整洁。

第四部分:数据处理和分析1. 对实验获得的数据进行处理和分析,比对标准曲线,计算样品中所含物质的浓度或者纯度。

2. 对实验结果进行统计分析,进行数据呈现,如绘制色谱图谱、制作数据统计图表等。

3. 通过数据处理和分析,得出实验结论,对实验结果进行解释和讨论。

第五部分:实验安全及注意事项1. 在操作过程中,注意个人安全,避免发生化学品溅泼或者接触有害物质。

2. 操作过程中需严格按照实验要求和操作规程进行,如有疑问请及时向实验指导老师或专业人士请教。

3. 实验结束后,及时清理实验台面和仪器设备,妥善存放试剂和耗材。

通过以上步骤的操作,可以保证在使用waters超高效液相色谱仪进行实验时,能够得到准确、可靠的实验结果,为科研工作和学术研究提供有力支持。

第六部分:精密控制与调试1. 在进行实验操作前,要确保色谱仪的各项参数已经精确调试完毕。

这包括流速、温度、压力、检测波长等参数的精准控制。

新waters操作规程

新waters操作规程

目的:建立高效液相色谱仪标准操作规程,规范操作。

范围:Waters高效液相色谱仪职责:操作人员。

规程:一、开机1、依次开启电脑、泵、检测器电源。

1.1 泵(2695)自检完成后出现以下画面:.按右侧按键面板上的Menu/Status 出现以下画面:按会出现选择图片中的3WetPrime点OK以替换系统中的溶剂。

选4PurgeInjector以新流动相替换样品定量环和注射器中的旧流动相。

完成此操作后即可设定流速走流动相。

1.2 紫外检测器(2489)自检完成后检测器面板显示如下:按数字键输入待测波长后按 Enter 即可。

1.3 蒸发光散射检测器(2424)自检完成后检测器面板显示如下:按数字键设定Gain (增益),按箭头键移动光标同法设定 psi (气体压力),每项设定均需按Enter 。

Neb (喷雾器温度),Tube(漂移管温度)设定时需先按键再同前项方法进行设定。

二、检测2.1数据采集Empower工作站点击桌面上的图标出现只有在用户名及密码处输入操作人的用户名及密码才可进入工作站进行样品检测及数据处理先点击配置系统设置泵及将用检测器的连接,如下图设置完成后退出,再点击运行样品进行样品检测,如下选择所要运行的仪器连接及所保存的项目名点确定后出现下图点击创建方法组编辑样品检测方法文件,如下图设定流速,流动相,温度,波长等检测条件并保存方法。

如下图操作示例点击下图中的箭头处选定所设定的方法,并点击设置仪器即按所设方法运行,如想查看基线则点击监视器即可。

柱平衡完成后即可进样,进样可选择单进样,在下图中输入相关项目点击完成进样。

也可编辑样品组进样,点击出现下图按项目编辑完成保存后点击运行样品组即可对样品进行采集。

(样品的所有信息,如名称,批号都可以在“样品名称”项中体现)2.2数据处理访问数据的查看界面在下图中点击浏览项目选择目标项目出现下图点通道即可查看采集完成的样品(如未看到想要查看的样,点即可)使用向导建立处理方法处理方法中的峰宽参数处理方法中的阈值参数处理方法中的时间参数处理方法中的其他参数处理方法中的校正参数2.3数据输出选中所需输出的样品,如下图操作三、关机检测完成后,执行关机程序清洗仪器,全部完成后关闭工作站及仪器电源即可。

Waters超高效液相色谱仪操作规程f

Waters超高效液相色谱仪操作规程f

浙江省制药工程重点实验室超高效液相色谱仪安全操作规程一、自检开主机和二极管阵列检测器(PAD),仪器进入自检阶段,自检完成后打开Empower软件。

二、配置系统管理数据(相当于新建文件夹),鼠标右键选新建,设定项目名(设定后将出现在运行样品中)。

三、运行样品在采集数据项目栏中选定项目(即将此次实验数据选择存放位置)→确定左栏可以设置有关样品的信息(样品名,功能,方法组,样品瓶,进样体积,运行时间)右栏出图,左下栏给出仪器信息,最下栏显示仪器状态。

步骤:创建方法组→选择仪器方法(新建→编辑仪器方法,包括主机和选定的检测器的参数的设置→设置好选另存为保存此仪器方法→关闭)此时上述编辑的仪器方法出现在列表中→下一步→出现“缺省方法项”对话框,点下一步→出现“命名方法组”,设置方法名(与刚才的仪器方法名相同)对话框→完成。

返回“运行样品”对话框,选方法组和仪器方法。

选定好仪器方法后即可监视基线,基线稳定后→中断按钮→仪器空闲后→点运行按钮,出现运行样品组对话框,设置好后点运行。

(运行过程中可以点中断按钮,也可在编辑下拉菜单中选“改变正在测试的样品”)→运行完后点文件中的“退出”。

四、数据处理点开“浏览项目”,选定要要浏览的项目,确定后进入的界面中有如下内容:样品组、进样、通道、方法、结果组、结果等。

“通道”里存的是原始的数据,这些数据要经过处理后才能得到“结果”,有结果才能打印报告。

PDA数据处理点“通道”→双击要处理的原始数据(点查看图标)→进入查看主窗口(此时点窗口中的工具栏可以看到等高图或3D图)→提取光谱图,找到最大吸收波长→提取色谱图→点“处理方法向导”图标→新建处理方法→用建立的处理方法处理→点“方法组”图标,选好后点“文件”下的“另存为”→“方法组”,设定即可。

至此选好处理方法。

注意事项:每隔24至48小时制备一次新鲜的水溶性流动相;样品进样前要用0.2µm的滤膜过滤以充分去除颗粒杂质;如果所使用的流动相中含有缓冲盐,用10倍柱体积的95%乙腈水溶液冲洗柱子;1。

Waters高效液相色谱仪

Waters高效液相色谱仪

1目的规范Waters高效液相色谱仪使用操作。

2适用范围Waters高效液相色谱仪的使用操作。

3责任者质管部QC检验人员。

4内容4.1 系统进入4.1.1 依次开UPS电源、检测器、泵、打印机、电脑主机电源。

4.1.2 电脑进入自检,自检完成后,进入“ Program Ma nager ”窗口。

4.1.3 在“ Program Man ager” 窗口,双击“ Mille nn ium ”图标,进入相应窗口。

4.1.4 在“Millennium ”窗口,双击“ Session Manage” 图标,进入“ Millennium V2.10 ”窗口,进行内存自检。

4.1.5 内存自检完成后,进入“Millennium Login —Version2.10 ”窗口,在“User Name 输入“system”,在“Password”输入“manager”,按“ Login ” 进入“Millinniam Versi on 2.10 —Sessi on Man age—User System” 窗口,双击所选“ Project ”图标,即进入“ Project ”窗口。

4.2 进样4.2.1 在“ Project ”窗口下,按“ Tools ”图标群中“ Quickset ”图标进入“System-open” 窗口,选择“ PCM-410”。

4.2.2 按“OK加以确认,该窗口自动退出,进入自检。

4.2.3 自检完毕,进入“ Quick Set”窗口,按“ Mode'选择“ Quick Start ”进入“ Method Set ”窗口,选择“ Using Exiting Method ”自动进入“ Quick Set Acquisition ”窗口,按“ Set Up Instrument ”,进入仪器安装状态。

4.2.4 安装完毕,按“ Can cel”,退出“ Quick Set Acquisiti on ”窗口,在样品登记表上填写样品名、类别、进样体积、运行时间。

Waters1525-2489高效液相色谱仪操作规程

Waters1525-2489高效液相色谱仪操作规程

编写:审核:批准:日期:日期:日期:生效日期:1.目的:规范Waters1525型高效液相色谱仪的操作,确保检测设备安全稳定的运行。

2.范围:适用于Waters1525型高效液相色谱仪的操作使用。

3.职责:检验员负责本规程的执行。

4.操作步骤4.1开机前检查流动相对应泵单元放置,检查电源线接口连接完好4.2色谱柱的安装安装待测样品所需的色谱柱,注意色谱柱方向。

打开柱温箱电源开关,设置柱温箱温度。

4.3开机4.3.1泵单元打开泵电源,待自检通过后排气泡。

(注:上泵是B泵,一般放置水系流动相;下泵是A泵,一般放置有机系流动相。

)拧开上泵排液(空)阀螺旋,用注射器抽去管道及泵头内气泡,然后立即拧紧排液(空)阀螺旋。

下泵排气泡操作与上泵相同。

4.3.2打开检测器电源等待自检通过,大约5min。

4.3.3打开色谱工作站打开计算机电源,点击桌面图标,进入Breeze2 色谱工作站,用户名输入breeze,点击确定按钮,操作的项目选择“hd”,色谱系统选择“1525/2489”,点击确定。

4.4建立分析方法点击(调用方法组编辑器向导)图标,点击对话框中的“新建”,在电脑下方任务栏中出现(仪器方法编辑器),点开,设置波长等条件,再点击,设置A、B两泵的流速,然后点击保存图标,在对话框中输入此方法的名称,比如“亚麻酸方法”,再点击保存。

在“新方法组”的对话框中点击图标,选择“亚麻酸方法”,点击两次下一步,再点击完成。

4.5平衡仪器点击(平衡系统/监视基线图标),在对话框中,选择方法如“亚麻酸方法”,点击设置。

等待仪器设置反应,再次点击(平衡系统/监视基线)。

等待基线平衡(一般约30-40min)。

4.6进样与数据采集:基线平衡后(30-40min),点击(中断正在运行的样品组或单进样)图标,结束平衡。

点击(单进样)图标,编辑样品名称、进样体积和运行时间,选择方法组,点击进样即可开始进样。

4.7谱图处理:点击图标,点,再点,双击所要查看的谱图。

Waters液相色谱仪操作规程doc

Waters液相色谱仪操作规程doc

Waters液相色谱仪操作规程1、开机:打开脱气机、泵、检测器和电脑开关(如需控制温度,还要打开柱温箱开关)2、脱气:点击Setup键,—clirect键进入isocratic窗口,拔掉废液出口堵头,接上废液杯,打开排气阀,设定流速5ml/min,调流动相比例,按光标键“▲”至光标出现在A%(甲醇)下方,按数字键,输入输入数字如80,按Enter键,光标出现在B%(水)的下方,按数字键,输入数字如20,按Enter键继续按Enter键,一直到使光标出现在左下角的OFF为止,进行排气(若气泡太多,短时间内排不完就用针管抽气:将旋钮旋至DRAW位,抽气至气泡没有为止,然后将旋钮旋至RUN位),排完气泡后,将流速调至0,关闭排气阀,然后将流速设置为1ml/min。

3、双击桌面上的Empower图标,输入用户名和密码①创建新项目:双击“配置系统”—新项目(选择菜单“文件—新建—项目)—选择父项目(选”项目”文件夹)—“下一步”—表空间100,不选“支持,全面审计追踪”—“下一步”—“下一步”(接受默认选项)—“下一步”(接受默认选项)—“下一步”(接受默认选项)—输入项目名—“完成”②运行样品双击“运行样品”—选“项目名***”—“确定”输入样品名:***功能:方法组:样品瓶:进样体积:进样时间:点击“创建方法组”—“新建”(出现仪器方法编辑器)点击“W600”图标—“流量”—泵模式:等度;流量比例设定—“事件”—启用事件监视—点击“W2998”图标,—点“通用”—启用3D数据设定“采样速度1—2”—“2D通道”—选“通道1”设定波长(编辑完成后保存)击“文件”—“另存为”—输入仪器方法名称—“保存”关闭“仪器方法编辑器”窗口选中所要的“仪器方法”—单击“下一步”—“下一步”—完成在“运行样品”页选中刚建立的“仪器方法”—点“监视器”(观察基线平滑无毛刺)待系统平衡后,即基线平滑无毛刺时,单击“终止监测”图标,(此时屏幕下边显示”系统空闲”),点击“进样图标”,屏幕下部出现“正在设置”—“等待进样”—这是扳动进样阀可以进样—进样后屏幕下边出现“正在运行”③数据处理A 双击“浏览项目”—项目—“确定”B在“通道”中查看,选中要处理的数据C选择“工具”—“查看”—打开(出现“查看”主窗口)D单击菜单中“文件”—“新建”—“处理方法”(出现新处理方法对话框)选使用处理方法向导—“确定”(出现“积分—峰检测1”)—设定“峰宽”—“下一步”(出现“积分—峰检测2”)—设定“阈值”(50)—“下一步”(出现“积分—积分区域”),输入保留时间:“开始时间—结束时间”—“下一步”(出现“积分—剔除峰”)—设定最小面积,最小高度,(或不做任何改动)—“下一步”—“下一步”,选择“否”,在“名称”栏中输入组分的名称(或不改动)—“下一步”—“下一步”输入“方法名”—”完成“。

waters高效液相的标准操作规程(sop)

waters高效液相的标准操作规程(sop)

WATERS高效液相的标准操作规程(SOP)适用于所有使用此仪器者1 流动相的处理1.1 过滤溶剂溶剂在使用前一定要用0.5μm的过滤器过滤,如果使用固体化学试剂(缓冲盐)配制流动相,过滤特别重要,不能让固体微粒污染泵,阻塞进样器和柱头过滤片。

本实验室有水溶性和脂溶性两种过滤膜供选择(反光面朝上),过滤水溶性流动相时(如甲醇/水),先用1-2ml甲醇润湿过滤膜,有助于快速抽滤。

1.2 保持储液瓶的清洁用普通溶剂瓶作流动相储液器应不定期废弃瓶子,最后一次应用HPLC级的水或溶剂清洗,不能在清洗过程中留下污迹。

1.3 保证溶剂的质量一定要用HPLC级的溶剂,水也应达到HPLC级,同样也要使用高纯度的缓冲盐。

1.4 故障及解决方法1.4.1 流动相脱气不充分流动相受热,或者流动相不同组分混合时会有气体产生,气泡进入泵内引起压力波动,增加噪音,色谱图上出现毛刺。

可试用下列方法解决问题:流动相再脱气;采用更有效的脱气方法或两种方法配合使用;改系统内混合为系统外预混合。

1.4.2 流动相供给不畅流动相用完,管道中吸入气体引起泵压力不稳。

应经常观察储液器中流动相的量,加足流动相保证所有的样品分析完毕。

输液管道上装沉子沉至瓶底,储液器盖上留一小孔正好夹住进液管,使其不能上下移动。

过滤器阻塞引起管道和泵腔空化,压力不稳。

过滤器被微粒所阻塞或长霉,去掉过滤器后如果系统运转正常,说明已找出问题,换上新的过滤器则可。

有时候换上新的过滤器仍然不畅,那就需要查查流动相的制备过程,或者换大孔径的过滤器。

不管如何,流动相都需要重新过滤。

流速过高、阻力大,造成空化现象,这是由于过滤器孔径、管道内径、流速和溶剂黏度等引起的。

如果流速大于10ml/min,常会出现这种现象。

使用下列方法解决:(1)使用低流速;(2)换大孔径的过滤器;(3)增加进液管道内径;(4)抬高或加压储液器;(5)不用过滤器,但流动相一定要先过滤;(6)储液器盖子太紧,在储液器内形成真空,打出的流动相不连续。

Waterse高效液相色谱仪操作规程

Waterse高效液相色谱仪操作规程

W a t e r s e2695高效液相色谱仪操作规程1目的指导和规范Waterse2695高效液相色谱仪的操作..2适用范围该操作规程适用于Watere2695高效液相色谱仪的操作..3职责检验员应按操作规程进行仪器操作;质量监督员负责监督该操作规程的正确执行..4操作4.1仪器组成和开机4.1.1仪器组成本仪器由Waterse2695分离单元、Waters2998二极管阵列检测器、WatersELSD2424蒸发光散射检测器、Empower3色谱工作站和打印机组成..Waterse2695分离单元包括四元梯度洗脱的溶剂输送系统;四通道在线真空脱气;可容纳120个样品瓶的自动分离单元;柱温箱;内置的柱塞杆密封垫清洗系统;溶剂瓶托盘;显示器;键盘用户界面..4.1.2开机4.1.2.1依次接通Waterse2695分离单元、检测器、计算机和打印机的电源..4.1.2.2接通Waterse2695分离单元后;约20s仪器开始自检;约3mn内各部件的初始化完成;待主屏幕上方标题区出现“Idle”时;仪器进入待命状态..4.2溶剂管路系统的准备4.2.1流动相脱气确认所有溶剂管路都充满溶剂;按Menu/Status;进入“Status1”屏幕;光标选“Degasser”;按Enter..4.2.2灌注当色谱仪流路没有溶剂或系统中有空气时;需进行干灌注DryPrime;注入流动相..否则;进行湿灌注WetPrime以驱除气泡..干灌注:按主机面板上Menu/Status;进入“Status1”显示;按DirectFunction;选择“DryPrime”;选溶剂通道;如OpenA;选“DurationIIi按数字键输入5分钟;按”COntinue”;待限定时间结束后;重复操作;使所需的溶剂通道注满流动相..湿灌注:进入“Status1”显示;选溶剂通道;输入100%;按Direct Function;选“WetPrime”;按OK;根据面板提示设置流速及时间默认流速为7.5ml/min;一般不用更改;时间可设置为5min;按0K..4.3样品管理系统的准备4.3.1冲洗自动进样器在“status1”;屏幕下;光标选“Composition”;输入流动相的组成..按DirectFunction;光标选“PurgeInjector”;按Enter;显示“PurgeInjector”屏幕;输入“SampleLoopVolumes 6.0”;光标下移“CompressionCheck”;按任意数字键;按OK..4.3.2冲洗进样针在主屏幕下;按Diag;显示“Diagnostics”屏幕;按PrimeNdlWash;显示“PrimeNeedleWash”屏幕;按Start;30s内应见溶剂从废液排放口流出..按Close、Exit..4.3.3冲洗柱塞杆密封垫在主屏幕下;按Diag;显示”Diagnostics”屏幕;按PrimeSealWash;显示“PrimeSealWash”屏幕;按Start;30s内应见溶剂从废液排放口流出..按Close、Exit..待排放口有水流出;按Half、Close、Exit..4.3.4装入样品与转盘打开样品舱门;显示"DoorisOpen"屏幕;将样品盘取出;把样品瓶插入样品盘后;装入样品盘;按Next直至所有样品盘装毕;关好舱门..4.4色谱柱平衡换上检验所需的色谱柱和流动相;进入"Status1”显示;选择流路、设定流速、柱温;按Enter开始注入流动相;通常情况下约15~30分钟色谱柱可达到平衡;可以开始进样;采集数据..5Empower3软件的应用5.1建数据采集方法5.1.1双击电脑屏幕上的"Empower"快捷图标;出现Empower登录界面;输入用户名和密码..5.1.2单击高级键;选择用户类型和QuickStart界面..5.1.3选择QuickStart界面;点击“确定”;然后选择选定的操作项目以及色谱系统仅查看数据可选择色谱系统中的“没有系统”;单击“确定”..5.1.4登录Empower的QuickStarlt界面..5.2编辑仪器方法和方法组以e2695_2998为例..5.2.1.采集栏单击“方法组编辑向导”:5.2.2选择“新建”选项..5.2.3弹出仪器方法编辑器..5.2.4单击“2695”;弹出2695编辑界面..5.2.4.1Aliance系统包括2695、2795和2695D通用编辑页面中;可选择“单次输送体积”;请针对不同的流速选定适当的单次输送体积;以确保最佳的流速精度与准度..5.2.4.2查看脱气选项;确认设置正确..5.2.4.3流量选项中设置“泵模式”、“总流量”以及流动相配比..5.2.5单击2998;弹出2998编辑界面..5.2.5.13D数据采集:在通用栏中选择启用3D数据;输入检测波长的范围;5.2.5.2采集2D数据;点击“2D通道”;最多可同时采集8个不同波长的通道的数据..5.2.6点击“文件”;选择“另存为”:输入仪器方法名称;点击“保存”;点击“文件”;选择“退出”..5.2.7在被选项中选择所需的仪器方法名称;点击“下一步N”..5.2.8在下拉菜单中选择所需的处理方法和报告方法如果没有合适的方法选择“无处理”、“无报告”;点击下一步..5.2.9输入方法组名称;单击“完成”..5.3进样点击进入“平衡系统/监视基线”界面;选择相应的仪器方法;点击“平衡/监视器;在监视窗口监视基线至系统平衡;停止系统监视状态;点击“进样”..5.3.1.单进样:点击;进入“定义单进样参数”编辑界面;输入样品名、功能、方法组等参数;点击“进样”..5.3.2使用向导建立样品组和样品组方法..5.3.2.1选择“运行样品”;然后单击“样品队列”;进入样品列表..5.3.2.2单击“新建样品组向导”;建立样品组..5.3.2.3选择创建样品组方法类型为“Lc或PDA”;然后点击“定义样品板”..5.3.2.4在“选择标准进样在那里开始”中选择合适的选项..检查开始加载样品瓶的位置是否正确;点击“下一步”..5.3.2.5在描述标样中需要设置一下内容:样品组中的标样数:×;每瓶标样进样次数:X;进样体积:x;运行时间:XX;方法组XXX;点击“选项”:输入下一进样延迟时间X;点击下一步..5.3.2.6样品数:X;每瓶样品进样次数:X;进样体积:X;运行时间:X;方法组X;点击选项:输入下一进样延迟时间X;点击下一步..5.3.2.7在识别标准样界面中;输入标样名称;增量后缀使用1.在识别样品界面中;输入样品名称;增量后缀使用a..点击下一步..5.3.2.8运行模式选项中选择“只测试”..查看摘要;点击下一步..注:弹出组分编辑器;输入标样中每个组分的名称内标不需要输入含量..可以直接关闭该窗口;在处理数据的时候再添加..5.3.2.9点击完成;在菜单栏中选择文件..5.3.2.10为方法组命名并保存样品组方法..5.3.2.11单击“样品队列”;打开运行样品窗口;点击运行当前样品组方法键;选择运行..5.3.2.11选择需运行的样品组名称;点击运行..5.3.2.13样品组运行过程中;在“正在运行”栏中正在运行以及运行完毕的样品以红色显示..注:以向导建立的样品组首行功能一般为清除校正;一般在运行样品前删除该行或改为“平衡”..5.4建立数据处理方法5.4.12D数据处理方法5.4.1.1单击“浏览项目”键;在“样品组”中选择目标样品组..5.4.1.2在样品组上点击鼠标右键选择“查看相关→通道”;样品组在单个通道中显示..5.4.1.3选择定最低浓度的标样;点击鼠标右键;选择下拉菜单中的查看;会显示未处理的色谱图形..5.4.1.4点击处理方法向导快捷键;选择创建新处理方法;点击确定..5.4.1.5确认处理类型为LC;积分方式可选择为传统;再点击使用处理方法向导;选择确定..5.4.1.6常按鼠标左键;选择色谱图上最窄峰..注:在色谱图区域方可以放大某个需要监测的峰..点击鼠标右键全视图可以还原色谱图..5.4.1.7在色谱图的积分界面选择一段典型基线作为积分的阈值;点击下一步..5.4.1.8常按鼠标左键;在基线上选取积分的起止时间点..5.4.1.9建议选择最小峰高;选择所要积分的高度最小峰或键入相应数值..小于此峰高90%的峰将不被积分..点击下一步..5.4.1.10定量方法选择面积;组分信息选择含量;校正类型选择线性..点击下一步..5.4.1.11跨通道内标样界面点击否..5.4.1.12因为选择的是标样;点击峰1可以看到一个下拉菜单选择相应的组分名称或者键入运行样品相应的名称..添加组分名称相匹配的标准含量;然后点击下一步..5.4.1.13如果是多点校正样品;跳过添加含量的窗口直接点击下一步..单点校正可在这里添加含量..5.4.1.14选择外标法:5.4.1.15选择单一内标样;需要在下拉菜单中选择或键入内标相应的名称;然后点击下一步..5.4.1.16选择多重内标需要输入所有内标的名称..5.4.1.17为处理方法命名;点击完成..色谱图界面会显示该处理方法应用后的色谱结果;包括积分..5.4.1.18如需为积分方法添加积分事件;鼠标右键点击色谱图窗口;选择添加积分事件..积分事件所示功能会立刻应用于处理方法中..5.4.1.19编辑处理方法的高级功能需要选择快捷键..有任何更改均需再次保存处理方法..5.4.1.20点击峰表底部可预览2D通道和峰..5.4.1.21点击“浏览项目”键;选择“通道”或“样品组”标签栏;右键点击目标样品组或通道并选择处理..5.4.1.22在处理界面;选择使用指定的处理方法;选择相应的处理方法名称;点击清除校正;选择校正并定量..5.4.1.23点击确定;数据处理;产生结果..可在结果栏中查看..5.4.2建立3D数据处理方法5.4.2.1点击“浏览项目”键;在“样品组”中选择目标样品组..5.4.2.2在样品组上点击鼠标右键选择查看相关通道;样品组中各个数据在单个通道中显示..5.4.2.3选择定量最低浓度的标样;点击鼠标右键;选择下拉菜单中的查看..5.4.2.4在预览界面选择“轮廓线”标签栏;会显示未处理的轮廓图..5.4.2.5从处理或右键下拉菜单中选择提取色谱选项..5.4.2.6键入所需要提取的波长;按回车键;得到该波长的色谱图..5.4.2.7点击处理方法快捷键;选择创建新处理方法;确认处理类型为PDA;积分方式可选择为传统;再点击使用处理方法向导;点击确定..5.4.2.8常按鼠标左键;选择色谱图上最窄峰..注:在色谱图区域内可以放大某个需要监测的峰..点击鼠标右键选择全视图可以还原色谱图..5.4.2.9在色谱图的积分界面选择一段平滑的基线作为积分的阈值;点击下一步..5.4.2.10常按鼠标左键;在基线上选取积分的起止时间点..5.4.2.11建议选择最小峰高;选择所要积分的高度最小峰或键入相应数值..小于此峰高90%的峰将不被积分..点击下一步..5.4.2.12定量方法选择面积;组分信息选择含量;校正类型选择线性..点击下一步..5.4.2.13跨通道内标样界面点击否..5.4.2.14因为选择的是标样;点击峰1可以看到一个下拉菜单选择相应的组分名称或者键入运行样品相应的名称..添加组分名称相匹配的标准含量;然后点击下一步..5.4.2.15如果是多浓度点的一组标样;跳过添加含量的窗口直接点击下一步..单一浓度可以在这里添加含量..5.4.2.16选择外标法:5.4.2.17选择内标法单一内标样校正;需要在下拉菜单中选择或键入内标相应的名称;然后点击下一步..5.4.2.18选择多重内标需要输入所有内标的名称..5.4.2.19PDA纯化及匹配选项:5.4.2.20为处理方法命名;点击完成..色谱图界面会显示该处理方法应用后的色谱结果;包括积分..5.4.2.21在“文件”下拉菜单中选择“另存为”方法组;将该处理方法存入方法组..注:3D数据必须用方法组处理..5.4.2.22如需为积分方法添加积分事件;鼠标右键点击色谱图窗口;选择添加积分事件..积分事件所示功能会立刻应用于处理方法中..5.4.2.23编辑处理方法的高级功能需要选择快捷键..5.4.2.24点击“浏览项目”键;选择“通道”或“样品组”标签栏;右键点击目标样品组或通道并选择处理..5.4.2.25在处理界面;选择使用指定的处理方法;选择相应的处理方法名称;点击清除校正;选择校正并定量..5.4.2.26点击确定;数据处理;产生结果..可在结果栏中查看..6查看结果和视图筛选6.1选择“结果”标签栏;使用视图筛选器从下拉菜单中选择今天..6.2选择需查看的结果;右键点击选择查看..6.3查看结果点击快捷键;查看每个组分的校正曲线..切换至主窗口点击..7预览结果并创建报告方法7.1点击“预览项目”切换回结果表显示状态..7.2选中一个或多个结果;点击鼠标右键选择预览..7.3若选取一个结果;在预览窗口选择使用一下方法:使用缺省单个报告;单击确定..7.4预览报告并查看数据..点击“编辑方法”键修改报告方法..7.5双击色谱图或峰结果表编辑报告属性..7.6点击文件;选择保存;为新建的报告方法命名..点击预览报告..7.7如需将报告保存为PDF格式;点击..8方法组的建立以上讲解了如何建立仪器方法、处理方法和报告方法;组合可以得到一个方法组..8.1监视区单击方法组编辑向导:8.2弹出新方法组:选择仪器方法界面..选择相应的仪器方法;点击下一步..8.3选择缺省方法界面选择相应的处理方法和报告方法;导出方法缺省..点击下一步..8.4命名方法组;点击完成..8.5在运行样品时;方法组/报告方法中调用该方法组;可以自动完成采集、处理、报告数据流程..9数据管理9.1项目的备份9.1.1在QuickStart界面;选择菜单“管理一备份当前项目”..9.1.2出现“项目备份向导”;点击下一步..9.1.3出现“项目备份向导一选择目的地’’通过浏览选择目的地;建议选择在非操作系统安装的硬盘分区内..选择完成;单击“确定”关闭后;回到项目备份窗口;单击“下一步”..9.1.4出现“项目备份向导一备份显示”..确认数据的复制已经成功;再单击“下一步”.. 9.1.5出现备份数据向导一开始界面..点击完成;结束备份..9.2项目的还原9.2.1在QuickStart界面;选择菜单“管理”;下拉菜单中选择“还原项目”..9.2.2出现“还原项目向导”..通过“浏览”选择被还原的项目所在的路径;单击“确定”..9.2.3单击下一步..9.2.4如出现类似以下内容的对话框项目名test已经被使用..请输入另一个项目名;则需为还原的项目另起一个名字..9.2.5在“输入磁盘空间配额’’页中;输入项目名;并注意此处的“表空间配额”应不得小于欲还原的项目原有的配额数据文件大小;然后单击“下一步”..9.2.6如果需要;可以在此页面中;选择该项目是否属于某个父项目..9.2.7在“还原显示’’中;如果出现如下对话框还原的项目需要被更新到下一个版本;单击“确定”..注:当还原由Millennium或Empower的先前版本创建的项目时;需要为该项目选择时区..9.2.8在“还原显示”中;等待数据还原结束后;单击“完成”..注:提示:在重装Empower 软件之后;可以通过还原项目将相关的项目数据进行还原..10项目管理10.1新建项目10.1.1进入到Empower3的QuickStart界面..在菜单中选择“管理一创建新项目”..10.1.2出现“新项目向导”的对话框;选择新建项目的父项目:10.1.3单击“下一步”;弹出“新建项目向导一表空间”;表空间50MB为默认设置;可根据需要增减..10.1.4出现“新建项目向导一选项”页..选择用于本项目的选项;如果无法确定适当的设置;请接受默认选项..单击“下一步”..10.1.5新建项目向导一访问控制:根据需要选择设置对您所创建的项目具有访问权限的用户和用户组;或者接受缺省的选项;然后单击“下一步”..10.1.6新建项目向导一复制所选项:需要选择复制的项目;一般选择Defaults项目..注:此页的复制是指从另一个项目复制现有设置;可以复制项目的“视图筛选器”、“白定义字段”、“方法”和“参数”..所以;一般不允许更改或使用Defaults项目中的任何数据..10.2查看及更改项目属性在建立了新项目以后;可以根据需要在不同的项目之间进行切换..10.2.1进入Empower3的Quick$tart界面;选择菜单“管理一改变系统/项目”..10.2.2改变系统/项目:根据需要进行选择项目或者选择系统如果存在二个或者二个以上的系统..选择完毕后;单击确定..如果选择了“在该窗口切换项目/系统”;当前的项目/系统会被新选中的项目/系统所替代;如果选择了“为项目/系统打开新窗口”;则会为选中的项目重新打开另外一个QuiekStart的界面..10.2.3在新的项目/系统的QuickStart界面内即可进行下一步的操作..10.3系统配置10.3.1在QuickStart界面;选择菜单“视图一系统”;查看系统..10.3.2出现系统信息窗口..在该窗口中;可以在地址栏中查看显示的地址是否与仪器的设置相同..此外;可从“仪器”选项卡里的“正常”一栏中查看仪器状态;在正常状态下;应显示“是”字样..如有仪器在“正常”一栏出现“否”;可单击“扫描仪器”进行检查..如检查后显示“是”;即恢复正常..注:当仪器联机出现错误;或者出现“仪器出错”字样的时候;即可通过采集服务器属性来查看仪器状态;判断可能引起该问题的原因..10.3.3创建或连接到新的色谱系统10.3.3.1在QuickStart界面;选菜单“管理一新建系统”..10.3.3.2出现“新建色谱系统向导一输入类型”页面;选择系统类型为“新建系统”..然后单击“下一步”..出现“新建色谱系统向导一选择系统”页面;在“可用仪器”组中;选中新系统的组件;然后用鼠标拖拽至右侧“新系统仪器”组中..选择完毕;单击“下一步”..如有误选;则如法;将误选的新系统仪器;用鼠标拖拽回“可用仪器”组中..注:可重复使用已配置系统中的仪器;但一次只能有一个使用共享仪器的系统可以在线..出现“新建色谱系统向导一访问控制”页面..注:您创建系统时;您即为系统的所有者..系统创建后;可以修改系统的属性及更改所有者、访问权限和配置等详细信息..11关机11.1使用完毕;按规定用适当的溶剂冲洗色谱柱、系统管路、自动进样器、进样针和柱塞杆密封垫;确保2695分离单元已彻底冲洗干净后;关闭电源开关..11.2数据采集完毕后;关闭所用检测器的电源开关..11.3数据处理并打印报告后;关闭计算机和打印机电源开关..11.4试验结束;在仪器使用记录表上登记;仪器管理人员审核签字..12仪器维护与保养12.1每次使用前后;查看分离单元上各溶剂瓶中溶剂的量;及时补充各瓶中相应的溶剂..12.2每次使用前后;打开分离单元最下面的分离泵的舱门;查看各管路接口;有无缓冲盐析出的情况..如出现白色盐渍;应拆下其所在的部件;先后用水和甲醇超声清洗;并安装好..12.3随时检查仪器的使用记录..12.4如长时间不使用该仪器;则需每半年按照高效液相色谱仪期间核查规程检查一次;并做好维护记录..。

WATERS高效液相色谱仪操作规程

WATERS高效液相色谱仪操作规程

建立W ATERS高效液相色谱仪的使用操作规程,保证检验人员使用仪器的规范化、标准化,保证企业产品质量。

2.依据中华人民共和国药典(2010年版附录)3.范围适用于W ATERS高效液相色谱仪使用。

4.责任QC科化验员。

5.内容5.1仪器的组成和一般要求:5.1.1仪器的组成:高压输液泵;色谱柱;柱温箱;紫外检测器;蒸发光散射检测器。

5.1.2对仪器的一般要求:所用的仪器为高效液相色谱仪。

色谱柱的填充剂和流动相的组分应按各品种项下的规定。

除另有规定外,柱温为室温,检测器为紫外吸收检测器。

在用紫外吸收检测器时,所用流动相应符合紫外分光光度法(药典2010年版附录IV A)项下对溶剂的要求。

正文中各品种项下规定的条件除固定相种类、流动相组分、检测器类型不得任意改变外,其余如色谱柱内径、长度、固定相牌号、载体粒度、流动相流速、混合流动相各组分的比例、柱温、进样量、检测器的灵敏度等,均可适当改变,以适应具体品种并达到系统适用性试验的要求。

5.2.操作方法5.2.1.首先制备新鲜流动相,清洗液以及样品5.2.1.1.对流动相的要求有机溶剂要求用色谱纯,经0.45μm微孔滤膜(有机膜)过滤;水或缓冲盐溶液要用纯化水(当天制备),经0.45μm微孔滤膜(水膜)过滤;超声波脱气约2分钟。

5.2.1.2.对样品的要求经0.45μm微孔滤膜(有机膜)过滤5.2.2.打开计算机电源,进入电脑操作系统5.2.3.打开仪器硬件电源蒸发光散射检测器还需打开气源。

5.2.4.进行仪器的操作5.2.4.1.打开泵抽液阀,逆时针转一到两圈,用注射器抽出液体8到10ml。

切记完成后将抽液阀关闭;5.2.4.2.设定流速如果用缓冲盐流动相,需要先用10%甲醇溶液(或乙腈)冲洗色谱柱至少15分钟,再用方法平衡系统约30分钟;如果不用缓冲盐做流动相,只是用水和甲醇或者乙腈做流动相,就可以直接调用方法平衡系统30分钟。

等待系统压力稳定后就可以进样。

Waters高效液相的标准操作规程(SOP)

Waters高效液相的标准操作规程(SOP)

Waters高效液相的标准操作规程(SOP)一、操作前准备1. 流动相准备:流动相所用试剂必须是色谱纯。

必须经过滤,脱气。

2. 检查色谱柱的链接:色谱柱出入口不能颠倒,出口螺帽必须拧紧防漏液。

二、色谱仪的启动、设置和应用操作流程图图1.开机进入breeze系统:依次打开泵以及检测器、柱温箱的电源,等到检测器自检完毕后,打开计算机登录windows,并进入breeze软件。

2.选择系统:在“选择项目和系统”对话框中,选择所需的项目和色谱系统,然后单击“确定”。

(色谱系统2489为紫外检测器;2414为示差折光检测器)3.创建方法:(1):管理→项目→创建项目→defaults→输入自建的项目名称和注释名→确定→项目创建完毕(2):切换系统:在窗口下切换系统→系统名称空白→确定管理→切换系统→系统名称(选择要用的检测器)→确定。

(可通过节点属性来检查和确定目标检测器是否处于在线状态)(3):调用方法组编辑器→新建→单击PCM泵按钮→高压限制:4000→泵模式(等度/梯度)→(设置各流动相流速)(C18反相柱总流速限定在2mL/min以内)单击TCM柱温箱按钮→区域1:设定柱温单击W2489:→设定波长(紫外可见光波长)→模式(单/双波长)→采样速率(1-2)文件→另存为→名称→保存。

新方法组→请选择用使用该方法组的数据有关的仪器方法→自建方法→下一步→完成。

4.灌注、清洗泵、清除系统、平衡系统4.1灌注和清除泵:1.在灌注和清洗泵之前的准备工作•如果泵处于干燥状态,在继续操作前应进行干灌注。

•将泵的参比阀旋钮向右旋转 1/2 圈,确保洗脱液流(绕过泵下游的所有连接组件)引至废液。

2.在“选择项目和系统”对话框中,确认色谱系统已完成配置并在线。

•确保已在“节点属性”中正确配置泵。

•将系统设置为在线。

3.在“运行样品”窗口中,单击“开始流量”图标,然后为泵流量和梯度设置输入适当的值。

提示:要快速灌注和清除以下型号的泵•对于 1525 泵,将流量设置为 4.0 毫升/分,并将梯度设置为 50% A、 50% B。

waters高效液相操作规程

waters高效液相操作规程

Waters 高效液相操作规程1. 简介高效液相色谱(High-performance liquid chromatography,HPLC)是一种广泛应用于化学、生物、医药等领域的分析技术。

Waters 公司是高效液相色谱仪器和耗材的主要供应商之一,本文将介绍 Waters 高效液相操作规程,以确保用户能正确、高效地操作 Waters 高效液相色谱仪器。

2. 仪器准备在进行高效液相色谱操作之前,首先需要准备好仪器。

以下是准备步骤:2.1 仪器检查检查仪器是否处于正常工作状态,确保所有液体泵、进样器、检测器等部件均正常联通。

2.2 操作软件启动启动 Waters 高效液相色谱仪器的操作软件,并连接仪器。

确保软件能够正常与仪器通讯。

2.3 样品准备根据分析目的,准备好待测样品溶液,并根据需要进行适当稀释或前处理。

3. 方法设置3.1 选择方法根据分析目的选择合适的方法。

在 Waters 高效液相色谱仪器操作软件中,点击“Method”(方法)选项卡,选择已有方法或新建方法。

3.2 参数设置根据分析需求设置方法参数,包括流速、柱温、分析时间等。

在操作软件的方法设置界面中进行参数设置。

3.3 样品进样选择进样器类型(自动或手动),设置进样体积和进样方式。

将样品溶液注入进样器,并进行相关设置。

4. 色谱柱操作4.1 切换柱根据需要,选择合适的色谱柱,并确保柱已经连通到色谱系统中。

4.2 柱平衡对于新柱,需要首先进行柱平衡。

在操作软件中选择柱平衡功能,根据提示进行操作。

5. 运行实验5.1 实验开始确认实验条件设置正确后,点击操作软件中的“Run”按钮,开始实验运行。

5.2 监控运行在实验运行过程中,密切监控柱压、流速和检测器信号等参数,确保实验正常进行。

5.3 数据记录实验运行结束后,保存实验数据。

点击操作软件中的“Save”按钮,选择保存路径和文件名。

6. 仪器关闭6.1 实验结束实验完成后,点击操作软件中的“Stop”按钮,停止实验运行。

高效液相色谱仪标准操作规程

高效液相色谱仪标准操作规程

高效液相色谱仪标准操作规程1目的建立高效液相色谱仪(Waters2695-2996Allianee)标准操作规程,为了使操作者操作高效液相色谱仪(Waters2695-2996Allianee)更规范,保证结果更精确。

2范围适用于高效液相色谱仪(Waters2695-2996Allianee)标准操作规程。

3职责操作者。

4程序4.1开机4.1.1打开Allianee电源开关,仪器进入自检状态。

4.1.2打开检测器,“STATUS”闪烁,4分钟后“LAMP”亮,仪器正常。

4.1.3点击menu/Status进入“STATUS”界面,按direactfunction,选择dryprime后,选择“A/B/C/D”四个泵,点击“Enter”,管道快速充满液体。

4.1.4打开电脑,点击“Empower”登陆,输入帐户“system”,密码“manage”,进入“EmpowerPro”。

4.1.5在配置系统中新建一项目。

4.1.6点击“运行样品”,选择“项目”,3分钟后仪器进入运行界面。

4.2样品检测4.2.1点击“编辑”,编辑仪器方法并保存方法名。

4.2.2点击“新建方法组”,编辑方法组名。

(要求方法组与仪器方法同名)4.2.3标识样品名、进样品/进标准品、样品位置、进样体积、运行时间后,于“file”中保存参数4.2.4点击“准备”,仪器显示“准备进样”后,点击进样。

4.2.5点击鼠标右键,选择“波长”和“正好运行时间”,保存参数4.3数据处理4.3.1点击“浏览项目”,于“进样”栏中双击所选的样品名,进入“通道”栏,双击所选的样品名,进入样品数据主窗口4.3.2选择波长,点击“提取色谱”后,积分或以处理方法向导处理数据,保存处理方法后,于“file”“保存”中保存“全部”。

4.4打印报告4.4.1于所选“浏览项目”结果栏中,选择已处理好的数据(如果没有,点击更新),点击右键,选择预览报告。

4.4.2选择报告方法,确定后,进入报告预览状态。

waters-2695-高效液相色谱仪操作规程(汇编)

waters-2695-高效液相色谱仪操作规程(汇编)

Waters Alliance 高效液相色谱仪操作规程一、概述1.设备使用范围:主要用于样品中食品添加剂、农药残留、兽药残留、毒素、污染物、非法添加物测定。

2.设备主要技术/性能指标:四元溶剂混合支持等度和梯度应用,具有11个独特的梯度曲线。

自动混合持术能够以任何比例混合四种溶剂。

先进的溶剂分配功能。

串联流路具有无脉冲溶剂分配,无需使用湿润器。

在线溶剂脱气和溶剂自动压缩实现准确的流路。

集成的密封清洗实现稳定操作,并且所有溶剂类型均符合规格。

检测器包括光电二极管阵列、示差折光检测器。

二、使用要求1.存放环境温度10~30℃,湿度≤80%,电压220V。

2.流动相和纯水应用微孔滤膜过滤(纯有机相或含一定比例有机相的用有机系的滤膜,水相或缓冲盐的用水系滤膜)。

一次制得的纯水或缓冲盐流动相应在连续24小时内使用完,如未使用完也应弃去不用,并重新配制新鲜的流动相。

如需使用,应重新过滤。

流动相的pH值应在色谱柱填料允许的范围内。

该泵带有真空脱气机,可不超声,但要在泵电源开启后,等脱气机停止工作后(约需5分钟)再进行泵的其它操作。

3.流动相禁止使用氯仿、三氯(代)苯、亚甲基氯、四氢呋喃、甲苯等;慎重使用四氯化碳、乙醚、异丙醚、酮、甲基环己胺等,以免造成对柱塞密封圈的腐蚀。

三、操作程序A:开机步骤1.打开计算机,进入Windows界面。

2.打开仪器电源,待仪器各部分自检完成。

3.将2695泵密封垫清洗管路、洗针管路以及ABCD管路分别放入适当的溶剂。

4.Prime seal wash:按2695面板Diag键,选择Prime SealWash,清洗泵头,直至出口管有液滴流出,按Halt,停止Prime,再按close关闭界面。

5.Prime needle wash:再选择Prime NdlWash,清洗进样针1-2次,直至黄管有液体喷出。

Close并Exit,退出Diag界面。

6.Dry Prime:按2695面板Menu/Status键,再按Direct Function键做Dry Prime (注:此操作仅在管路中没有液体时执行,否则直接进入步骤6)。

(完整)Waters高效液相色谱仪标准操作规程

(完整)Waters高效液相色谱仪标准操作规程

1.目的描述 Waters 高效液相色谱仪标准操作规程。

2.适用范围化验室3.责任者化验员应严格遵照该操作规程 , QC 主管负责监督本规程的实施。

4.定义HPLC High Performance Liquid Chromatography , 高效液相色谱仪。

5.安全注意事项5.1有机溶媒有害健康,各溶剂瓶口应封严。

5.2注意检查废液桶中废液应避光,防止废液桶满外溢。

6.规程6.1.Waters HPLC的组成:贮液器输液泵自动进样器分离柱 (柱温箱 )紫外检测器控制及数据处理系统 (Millennium 32化学工作站 )。

6.2. HPLC系统的打开及关闭顺序6.2.1打开顺序•对于分体式:请按泵、进样器、柱温箱、检测器的顺序打开开关,待各部分分别显示初始化完毕后,最后打开M i l l e nn i um32化学工作站。

泵与色谱工作站的连接:对于 510 泵,因为此泵与色谱工作站是单向联系,如要使泵在 Remote 状态下由工作站控制,首先要在泵的键盘上按 Menu 键,待显示屏切换至 Mode 状态下,其状态是Loca ,按 Edit/Enter 键,在 Local 的L 前有闪动的光标显示,按键,Local 转换成Rem,再按Edit/Enter 键,此命令已输入进去, 最后按Stop/Run 键,使泵处于Run 状态这时泵和工作站的连接即告成功。

泵的任何动作都可由工作站来控制。

还应注意这一步工作在每次开机时都要进行。

对于 Alliance 2690 系统:先打开 Alliance 2690 主机、检测器电源开关,待初始化完毕后,再进入 Millennium 32化学工作站。

对于流动相的要求:对于液体试剂应尽量采用色谱纯试剂;对于所用到的固体试剂应采用分析纯试剂;对于水,应采用经纯水机处理过的超纯水;流动相在使用前一定要经 0.45m 的滤膜(滤膜分为水相膜与有机相膜,确保使用正确的滤膜,参见附表 ) 过滤、超声真空脱气方可使用,严禁含盐的流动相未经过滤直接使用。

067Waters高效液相色谱仪标准操作程序

067Waters高效液相色谱仪标准操作程序

067Waters高效液相色谱仪标准操作程序SOP 浙江巨泰药业有限公司标准操作程序印数编号第份题目:Waters2695(Alliance) .Waters2489DET.液相色谱仪标准操作程序文件编码:SOP QC9-067-01 颁发部门:质量部起草人:年月日分发部门:质量部⑵、存档审核人:年月日QA审核:年月日批准人:年月日生效日期:年月日印数:3份共6页,第1页1 目的建立Waters2695(Alliance). Waters2489DET. 液相色谱仪使用维护保养规程,保证正确操作。

2 适用范围适用于Waters2695(Alliance). Waters2489DET液相色谱仪使用维护保养。

3 责任人QC员、QC主任。

4 程序4.1 基本操作规程4.1.1准备工作按流动相配制要求配好流动相,过滤,超声脱气,将吸滤头放入相应通道的流动相中。

4.1.2 仪器的启动打开Waters2695(Alliance).Waters2489DET.以及柱温箱的开关。

4.1.2.1 非Empower3软件的仪器启动程序依次打开电脑、Waters2695、Waters2489DET的开关。

波长的设置:在检测器自检完毕显示初始屏幕时,按▲或▼键,在λnm处输入所需波长值,再次按Enter键确认。

按▲或▼键在AUFS处输入所需的灵敏度。

其他设置参见2489检文件编码:SOP QC9-067-01 共6页,第2页测器说明书;2695系统的设置:系统初始化结束后,主屏幕上方标题区出现“Idle”时,仪器进入待命状态。

在初始屏幕按Menu/status键,进入status界面,在Flow : ML/MIN处设置流量;用▲或▼、或键上下左右移动,在A、B、C、D各通道处设置各通道的比例。

在sample处set ℃处设置样品室温度,在col Htr/clr set ℃处设置柱温。

在Degasser处按Enter键选择on打开脱气机。

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XXXXXXXXXX部仪器设备标准操作规程
1 目的:建立Waters高效液相色谱仪标准操作规程。

2 范围:Waters高效液相色谱仪。

3 责任:化验室操作者。

4 规程:
4.1 型号与主要性能指标
4.1.1 型号
4.1.1.1 主机Waters2695分离单元、Waters2489紫外/可见光检测器。

4.1.1.2 工作站Empower2。

4.2 主要技术指标:
4.2.1 泵流量设定:0.000和0.010到10.000毫升/分,增量为0.001毫升/分。

流量准确度:±1%或10μL/分,取其中的较大值(0.200到5.000毫升/分),反压为600psi下的脱气甲醇。

4.2.2 检测器:光源:氘灯。

波长范围:190~700nm
波长精度:±1nm
4.2.3 柱温箱:温度设定范围:20~60℃,间隔:1℃
控温精度:±5℃
4.2.4 工作站计算机:Dell OPTIPLEX330(操作系统Windows XP)。

4.2.5 打印机:HP LaserJet P1008打印机。

5 操作条件:
5.1 电源要求:950VA(最大值)
线电压:85到132Vac或180到250Vac
频率:47到63Hz
5.2 环境条件:温度:4~40℃,相对湿度:20~80%。

5.3 机房内应清洁无尘,无易燃、易爆和腐蚀性气体,室内排风良好。

5.4 仪器应平稳放置在工作台面上,便于操作,周围无强烈的机械震动和电磁干扰,仪器接地应良好。

6 操作前准备:
6.1 配制所需流动相。

6.2 配制和制备所需的对照品溶液和供试品溶液。

6.3 将色谱柱连接到色谱仪管路系统上。

7 操作步骤:
7.1 打开交流稳压电源开关,稳压电源上电压表指示并稳定至220V。

7.2 将“2695分离单元”电源开关(位于左侧面板的面板顶部)推到(开)I 位置即可启动“2695分离单元”, 启动诊断程序将启动。

启动诊断程序的初始部分成功后,前面板上将显示Main(主)屏幕。

启动诊断程序将继续执行,将初始化:针头、注射器和阀门;样品转盘托架;溶剂管理系统。

诊断运行时,Main(主)屏幕的标题区内将显示这些机械诊断测试的状态。

如果启动诊断程序不成功,则排除故障。

当启动诊断程序完成后,“分离单元”将进入“空闲”模式。

仪器开始自检(4-5分钟),待屏幕上方出现“idle”字样表示自检成功。

7.3 将输液泵上的烧结不锈钢过滤器及吸液管放入流动相中,使导管内充满溶剂。

打开在线脱气,使其伪on,设定柱温,一般为35℃,清洗柱塞杆1~2分钟(Prime seal wash),将每一个会用到的管道进行排气一次(Wet prime),注射器排气泡及清洗(Purge injector),清洗注射针(Prime needle wash)。

7.4 打开“2489紫外/可见光检测器”电源开关至ON(1)的位置,画面即刻出现自我诊断检查字样:Startup Diagnostics, 注意是否有任何故障讯息出现。

接着出现Waters 2487 Dual λAbsorbance Detector, 并开始执行“热机”检查,出现Warmup Time倒数时间画面。

待“热机”检查完毕无误,画面之上排显示吸收讯号数字,下两排显示前一次关机时之波长与AUFS设定值。

欲设定使用之波长λ,将游标移至λ位置,输入波长数字,Enter即可。

等系统平衡稳定后,于注入检体前,按一下Autozero键,使检测器自动归零,再开始进样做分析检测。

7.5 打开计算机电源,在计算机上运行液相色谱工作站软件Empower,双击电脑桌面上的Empower图标,或点击“开始﹥Empower﹥Empower”,出现Empower 登录窗口。

输入用户名和密码,单击确定,出现Empower Pro界面窗口。

单击Pro界面的“运行样品”窗口,即可进入“运行样品”界面。

在左侧选择项目,右侧选择对应的色谱系统,然后单击“确定”,进入“运行样品”窗口。

选择“创建方法组”,调用方法组编辑器向导,分别设定流量、检测波长、柱温箱温度等,保存仪器方法,然后在“仪器方法”中选择刚建立的仪器方法,并点击“监视器”,平衡系统,观察基线。

等系统达到平衡状态,终止观察基线,系统空闲后,写入样品名称,选择对应的方法组,确定运行时间,然后选择菜单“进样-进样”,或者单击“单进样”,开始采集数据。

如果需要在采集数据的同时,放大查看数据,可单击“传送数据到查看”来进行具体的查看,乃至于数据的处理。

7.6 分析结束后,打印色谱分析报告。

8 关机:
8.1 分析完毕后,应先退出色谱工作站软件,以断开计算机与系统控制器的连接通道。

然后关闭检测器、分离单元电源。

8.2 关闭计算机,再关闭稳压电源开关。

9 注意事项:
9.1每次开机自检一定要等到界面上出现“idle”时方可进行下一步的操作。

每天
开机后必须进行溶剂系统前处理。

9.2 高效液相色谱仪具有自诊断故障功能,在开机或运行中出现故障,会出现相应的错误信息提示,根据出现的错误信息作相应的处理。

9.3 建议做分析检测前,至少须让检测器或D2灯源“热机”30分钟以上。

9.4 各流动相需经脱气并过滤,特别是当有离子对试剂时,必须要进行过滤。

换流动相的时候,应对滤头进行清洗,以免两种流动相发生混淆,影响实验。

9.5流动相中含有无机盐,分析工作结束后应先用水清洗整个管路系统中的无机盐成分,然后再用有机溶剂(如甲醇等)替换管路系统中的水。

盛放各种溶液的瓶子需隔一段时间进行清洗,且每次开机之前观察各瓶的滤头是否在溶液液面一下,如不在应将其置于液面之下。

9.6 对照品溶液和供试品溶液须经0.45μm或更小孔径的滤膜过滤。

9.7 仪器设备长时间不使用,应每周开机一次,每次两小时,并用甲醇或异丙醇清洗管路系统。

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