月季的花药培养详解

花药（在卡诺氏固定液中处理20min）→取出，置于载玻片上 →焙花青－铬矾溶液染色→盖上盖玻片→镜检（花粉粒的细胞核 被染成蓝黑色）
月季花药培养时的花粉粒最好是（ C）
A、四分体时期
B、Baidu Nhomakorabea核或三核花粉粒
C、单核期
（二）材料的消毒
1、花蕾用体积分数为70%的酒精浸泡30秒 2、无菌水清洗
3、无菌吸水纸吸干花蕾表面的水分
4、放入质量分数为0.1%的氯化汞溶液中2～4分钟 （质量分数为1%的次氯酸钙溶液或饱和漂白粉溶液）
5、无菌水冲洗3～5次
花药的外面有花萼、花瓣保护，通常处于无菌状态
为什么花瓣松动会给 为什么花瓣松动会给 材料的消毒带来困难？ 材料的消毒带来困难？
答：花瓣松动后，微 生物就可能侵入到花药， 给材料的消毒带来困难。
一般经过20-30天培养后，会发现花药开裂，长出造愈成伤的组织 或释放出胚状体。将愈伤组织及时转移到分化培养基上，以便 进一步分化出再生植株。
4 进一步鉴定和筛选：常常会出现染色体倍性的变化
植物组织培养技术与花药培养技术的比较
1 、离体培养的外植体 为体细胞。
双核期等阶段 • D、花粉粒在发育过程中，核先位于细胞一侧，再移到
细胞中央
注：花粉母细胞经减数分裂形成4个单核花粉粒，每个花粉粒的 细胞核进行一次有丝分裂形成1个花粉管细胞核和1个生殖细胞 核，每个生殖细胞核再进行一次有丝分裂生成2个精子。
雌蕊 的结构
（二）产生花粉植株的两种途径
花药中 脱分化 ① 的花粉
例题1：两个精子和花粉管细胞核的基因型相同？
③
减数分裂
1花粉母细胞
4个小孢子
有丝分裂
4个花粉管细胞核 N
2N
N
4个生殖细胞核
有丝分裂
N 8个精子
• 1、关于被子植物花粉发育的说法，不正确的是（BD） • A、花粉粒是在花药中的花粉囊里形成的 • B、被子植物精子的形成是直接减数分裂的结果 • C、被子植物的花粉的发育要经历四分体时期、单核期、
（三）接种和培养
1 灭菌后花蕾，要在无菌条件 下除去萼片和花瓣， 并立即将花药接种到培养基上。
2 在剥离花药时，要尽量不损伤花药（否则接种后， 容易从受伤部位产生二倍体的愈伤组织），同时还要彻 底 去除花丝，因为与花丝相连的花药不利于愈伤组织或 胚状体的形成。
3 通常每瓶接种花药 7-10个，温度控制在主花要粉25原管℃因核左是和 右，不需要光照。幼小植株形成后才 需要光照生。殖核融合
知识回顾
• 单倍体育种的过程？
正常植株（2N）
花药离体培养（N） 单倍体植株（N）
植株（2N）
秋水仙素处理， 使染色体翻倍
特点：1 明显缩短育种年限
2 后代植株都为纯合子。
花的结构
花托 花萼 花瓣 雄蕊
雌蕊
花药
花丝 柱头 花柱 子房
一、基础知识
（一）被子植物的花粉发育
1 雄蕊
花丝 花药：囊状结构，内有很多花粉
小孢子时期（n）
4×2个精子(n) 有丝分裂
4个生殖细胞（n） 4个营养细胞（n）
四分体时期（n） 单核期（n）
4个生殖细胞核（n） 4 个 花 粉管细 胞 核 （n ）
有丝分裂
双核期
注意：
①二核花粉粒：成熟的花粉粒中，只含花粉管细胞核和生殖细 胞核。（精子在花粉管中形成）
②三核花粉粒：有些植物的花粉，在成熟前，生殖细胞进行一 次有丝分裂，形成两个精子，这样的花粉在成熟时，含有一个 花粉管细胞核和两个精子。
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花中皇后月季又称“月月红”，自然花期5至11月 ，开花连续不断 ，通常扦插就可以成活。
课题2 月季的花药培养
【课题目标】
Ø1.识记被子植物花粉发育的过程。 Ø2.通过学习花药培养的基本技术， 培养设计试验、动手操作、分析解 释实验现象的能力。
接种在平板上的水稻花药
部分花药产生愈伤组织
愈伤组织转接种到再生培养基
愈伤组织分化形成再生植株
(三注)、意影：响选择花最药合培适养的的花主粉要发因育素时期:
• 1、材料的选择 单核期
• 不同①植不物选的择诱单导核成功期率之不前同花. 药原因：
•
花同药一质植物地的幼不嫩同，生容理易状破况碎也对；诱导成功率有 直接的②影不响选. 择（一单般核选期月季之的后初花花药期）原因：
2 花粉的概念:由花粉母细胞经过减数分裂形成
的单倍体的生殖细胞.
被子植物花粉的发育过程
小孢子母细胞
减数分裂
4个小孢子
(小孢子四分体时期)
小孢子(单核居中期)
小孢子(单核靠边期)
小孢子 有丝分裂 生殖细胞核+花粉管细胞核 （花粉粒的双核期）
生殖细胞将再进行一次有丝分裂，形成两个精子
小孢子母细胞（2n） 减数分裂
• 花合瓣适开的花始粉松发动育，期给（材单核料居消中毒期带与靠来边困期之间）
• 2长、难调培困节③养激难挑素基；选）的单组成核（期花MS培药养方基法+不：同应比例当的选植物生
•此择易外完消，植全毒株未。生开长条放件的、花材蕾料低，温微预生处理物、少接，种密度等
实验操作
一、材料的选取 二、材料的消毒 三、接种和培养
（一）材料选取
1、从花药看：月季的初花期 从花粉看：单核期 从花蕾看：完全未开放的
2、通过镜检来确定是否处于适宜的发育期。 方法：醋酸洋红法(将染色体染成红色)
花药（载玻片上）→1%的醋酸洋红1滴→用镊柄将花药捣碎， 盖上盖玻片→镜检（花粉粒的细胞核被染成红色）
焙花青-铬矾法(花粉细胞核染成蓝黑色)。
分化
胚状体
丛芽
②
花药中 的花粉
脱分化
再分化
愈伤组织
丛芽
诱导
体 变细为胞与胚合（子胚发状育体成）的：胚在非组常织相培似养的移过结程构栽中，，发某育些过细程胞亦在与形合生态子根上胚转类
似
原因：培养基中的激素种类及浓度配比
胚状体发育途径 烟草花药培养
部分花药通过胚状体途径形成小植株
愈伤组织发育途径 水稻花药培养
【课题重点】
Ø1.被子植物花粉发育过程。 2.花药离体培养过程。
【课题难点】 Ø花药离体培养过程。
【导学案反馈】
v 1.优点：书写认真，整体完成情况较好。
v 2.不足： ①探究能力有待提高 。 ②解决实际问题的能力较弱。 ③部分同学预习不充分，答题欠思考。
v 3.改进措施：认真研读课本，理清思路，注重分析， 养成好的自学习惯。