白藜芦醇的提取工艺
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白藜芦醇的提取工艺
专业:化学工程与技术学号:2010001220班级:生研1004班姓名:刘珊珊
摘要:从虎杖等植物中提取的白藜芦醇具有抗肿瘤、抗炎、抗菌、保护肝脏、保护心血管等功能,鉴于白藜芦醇的多种重要的应用价值,本文综述了白藜芦醇的提取方法,其中包括有机溶剂提取法、超声波及微波辅助萃取法等。通过对各种方法的综合比较,找出了最佳优化条件。
关键词:白藜芦醇;提取;正交实验
1.1白藜芦醇的理化性质
白藜芦醇分子式是C14H12O3,相对分子质量为228.25,化学名称为3,4,5’—三羟基—1,2—二苯乙烯,是一种蒽醌萜类化合物,熔点为256~257℃。它主要存在于葡萄、虎杖、花生、朝鲜槐等植物中,尤其在种皮中含量较高[1]。白藜芦醇易溶于甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、氯仿等有机溶剂中。其存在形式主要有四种,分别是顺式-白藜芦醇、反式-白藜芦醇、反式-白藜芦醇糖苷及顺式-白藜芦醇糖苷,但只有反式异构体具有生物活性[2]。
图1反式白藜芦醇的结构式
白藜芦醇是一种天然的抗氧化剂,可降低血液粘稠度,抑制血小板凝结和血管舒张,保持血液畅通,可预防癌症的发生及发展,具有抗动脉粥样硬化和冠心病,缺血性心脏病,高血脂的防治作用。抑制肿瘤的作用还具有雌激素样作用,可用于治疗乳腺癌等疾病。它既是肿瘤疾病的化学预防剂,也是对降低血小板聚集,预防、治疗动脉粥样硬化,心脑血管疾病的化学预防剂。20世纪90年代,我国科技工作者对白藜芦醇的研究不断深入,并揭示其药理作用:抑制血小板非正常凝
聚,预防心肌硬塞、脑栓塞,对缺氧心脏有保护作用,对烧伤或失血性休克引起的心输出量下降有效恢复,并能够扩张动脉血管及改善微循环。
1.2白藜芦醇的提取方法
1.2.1溶剂提取法
溶剂法是国内外最广泛应用的提取方法。常用溶剂主要有水、甲醇、乙醇、乙酸乙酯、乙醚等。溶剂法对设备要求简单,产品得率较高,但缺点是成本高,杂质含量也高。常见报道的溶剂法有三种:浸提法、渗漉法、回流法[3]。浸提法对温度要求不高,但费时较长,效率不高;渗漉法由于保持一定的浓度差,所以提取率较高,浸液杂质较少,但费时较长,溶剂用量大,操作麻烦;回流法较前两种方法效率高,速度快,但容易对受热敏感的原料造成破坏,因此根据不同的原料应采取不同的提取方法。
1.2.2碱性水或碱性稀醇提取法
白藜芦醇具有弱酸性,在碱性条件下酚羟基可以被转变成盐而使水溶性显著增加。碱提取法的原理是利用白藜芦醇这一性质,使其在一定条件下和某些无机碱、碱性盐形成酚盐而从体系里溶解出来;再通过调节溶液pH值的方法使之沉淀而得以分离,从而富集提取白藜芦醇。常用的碱性溶液为NaOH、KOH、Na2CO3、NaHCO3 。
1.2.3超声波提取法
超声技术对中药有效成分提取分离有许多优点,如提高提取率、缩短提取时间、需求温度低等。超声波提取是一种物理破碎过程,对媒质主要产生独特的机械振动作用和空化作用,用超声波辅助提取白藜芦醇,有利于保持较高的白藜芦醇的相对含量[4]。
超声波提取的工艺流程:样品处理→加入适量的提取试剂→热水浸提→超声波提取→离心分离样液→浓缩过滤→固相萃取,富集白藜芦醇→提取物样品[5]。
1.2.4酶解法
近年来文献对白藜芦醇的提取工艺报道较多,但白藜芦醇的提取率和提取物中白藜芦醇的含量较低,生产成本高。如果直接提取,白藜芦醇苷不易转化为白藜芦醇;其次白藜芦醇包裹在细胞壁内,若直接用有机溶剂提取,白藜芦醇难以溶出,酶解作用可以使细胞壁疏松、破裂,减小传质阻力,加速有效成分的释放,从而
提高提取率,提高原料的利用价值,成为天然产物提取的新兴技术。有文献报道采用纤维素酶酶解提取法较直接提取法的效果好,可使白藜芦醇的提取率从0.5%上升到0.82%[6-8]。
1.2.5微波辅助萃取法
微波辅助萃取是指利用微波能强化溶剂萃取效率,即利用微波加热来加速溶剂对固体样品中目标萃取物的萃取过程。从1986年起,微波技术开始应用于有机分析中的样品预处理,微波辅助萃取具有快速、高效、省溶剂、环境友好等优点,同时可提高收率和提取物的纯度[9]。
微波提取工艺流程:样品处理→加入适量的提取试剂→热水浸提→微波辅助提取→离心分离样液→浓缩过滤→固相萃取,富集白藜芦醇→提取物样品。
1.2.6超临界萃取法
当一种物质处于其临界温度和临界压力以上的状态下,成为既非液体也非气体的单一相,称为超临界流体。超临界流体的性质介于液相和气相之间,表现出液体与气体的优点,即其密度大,接近于液体;黏度小,扩散系数大,接近于气体,因而具有良好的溶解特点、传递性和化学反应特性。物体在超临界流体中的溶解度,随压力和温度的变化而有明显改变,特别是在临界点附近的区域内,温度和压力的微小变化,都能引起流体密度和黏度的极大改变,从而引起溶解能力很大改变。
1.3白藜芦醇提取的优化条件
由文献查得,提取白藜芦醇的工艺方法有很多种,但一些提取工艺的提取率和纯度都不很高,下表则列举了几种方法的最优条件。
提取方法提取剂料液比pH值温度提取时间
体积分数80%乙醇-丙酮(体积
比1:1)
1:20 75℃6h 溶剂提取
法
体积分数80%乙醇1:10 8 20℃24h
体积分数50%乙醇1:13 70℃4h
碱性水提取法PH值为10氢氧化钠溶液
用盐酸调pH
为3
100℃1h
超声波提取法体积分数80%乙醇-丙酮(体积
比1:1)
1:10 6 30℃50min
1.3.1 酶解法提取工艺的条件
在这几种提取工艺中,酶解法的提取率相对较高,在此深入讨论一下酶解法的工艺条件。
1.3.1.1温度对酶解的影响
称取适量的样品粉末,加入适量水,酶,在pH=5,30、35、40、45、50、55℃下酶解36h。得到图2,从图中可看出,当酶解温度为40℃时,提取率是最高的。
图2酶解温度对提取率的影响
1.3.1.2 时间对酶解的影响
称取适量的样品粉末,加入适量水,酶,在pH=5,在40℃下酶解6、12、24、36、48、72h,得到图3,图中显示当提取时间为36h时,提取率的最高的。
图3酶解时间对提取率的影响