六霉菌的形态观察与鉴定

4. 操作程序
载玻片培养观察法 1.无菌培养皿的准备
在一洁净干燥的培养皿内，放一铝丝制载玻片架，
再放人分别用纸包好的洁净载玻片1-2片及盖玻片 1-2片，然后盖上皿盖，包扎后灭菌备用。
2.霉菌载玻片培养物的制备 （ 1 ）取约 3ml 经灭菌后的察氏培养基试管，标上
青(毛、根或曲)霉字样。
（2）以无菌操作方式取出无菌培养皿中的载玻片 和盖玻片，打开备用。 （3）取一标好字样的试管培养基，于酒精灯上以 微火融化。
在幼小而活力旺盛时，菌丝体产生大量的分生孢子梗。分生孢子梗顶端膨大成为顶 囊，一般呈球形。项囊表面长满一层或两层辐射状小梗(初生小梗与次生小梗)。最 上层小梗瓶状，顶端着生成串的球形分生孢子。以上几部分结构合称为“孢子穗”。 孢子呈绿、黄、橙、褐、黑等颜色。 ------ 曲霉孢子穗的形态，包括分生孢子梗的长度、顶囊的形状、小梗着生是单轮还 是双轮，分生孢子的形状、大小、表面结构及颜色等，都是菌种鉴定的依据。
Black Mold, Aspergillus variecolor. (SEM x2,315)
曲霉Aspergillus 的分生孢子
毛霉
1.形态特征：菌丝发达，白 色无隔多核。 2.繁殖：孢囊孢子、厚垣孢 子、接合孢子。 3.应用：腐乳：蛋白酶
Mucor sp.
毛霉属（Mucor）：孢囊梗直接从菌丝上长出，孢
四 思考题

青霉、曲霉、根霉、毛霉的形态有哪些异同？ 比较显微镜下放线菌和霉菌的细胞形态和菌落的特 征？
接合孢子
Bread Mold Spores on Fungal Fruiting Structure, Rhizopus sp. (SEM x2,990)
2. 培养基: 马铃薯琼脂平板培养物.
3.器材: 显微镜、培养箱、培养皿、水浴锅、载玻片、
盖玻片、无菌水、接种环、接种钩、解剖针、
酒精灯、火柴、滤纸、玻璃铅笔等。

载玻片培养观察法：用无菌操作将培养基琼脂薄层置于载玻片上， 接种后盖上盖玻片培养，霉菌即在载玻片和盖玻片之间的狭窄空 间内沿盖玻片横向生长。培养一定时间后，将载玻片上的培养物 置于显微镜下观察。这种方法既可以保持霉菌自然生长状态，观 察到它们不同阶段的生长、发育状况，特殊形态构造，如曲霉的 足细胞、分生孢子、顶囊等生长情况。
玻璃培养观察法

透明胶带法
三、实验材料与方法
1.菌种：青霉、黑曲霉、根霉、毛霉。
青霉
1.形态特征：菌丝有隔，基部无足细
胞。具分子孢子梗 ----- 经过多次分枝 ，产生几轮对称或不对称的小梗 ----- 扫 帚状分生孢子头。
2.繁殖：分生孢子
球形、椭圆形或短柱形，光滑或粗 糙，大部分生长时呈蓝绿色
（Penicillium），曲霉属（Asepergillus）；无隔菌丝-----毛霉属 （Mucor），根霉属（Rhizopus））由横格状菌丝隔成许多细胞。
细胞易收缩变形，而且孢子很容易分散。
观察霉菌的形态的常用方法

直接制片观察法：是将培养物置于乳酸石炭酸棉蓝染色液中，制 成霉菌制片镜检。用此染液制成的霉菌制片的特点是：细胞不变 形；具有防腐作用，不易干燥，能保持较长时间；能防止孢子飞 散；染液的蓝色能增强反差。必要时，还可用树胶封固，制成永 久标本长期保存。
3.应用：抗生素
Fungal Mycelium with Spores, Penicillium sp. (SEM x3,220)
Conidiospores of Penicillium
曲霉
1.形态特征：菌丝有隔，具 足细胞、分生孢子梗及膨大 顶囊。
2.繁殖：分生孢子 3.应用：酿造酒、酱，有机 酸、酶制剂。
(3) 霉菌的无性孢子和有性孢子的形态观察
无性孢子：根霉，毛霉------ 孢囊孢子 曲霉，青霉------ 分生孢子 有性孢子：根霉，毛霉------ 接合孢子
二、实验原理
•霉菌为真核微生物，菌丝较粗大（直径：3-10um, 与酵母菌相似， 比细菌或放线菌的细胞约粗10倍）；有分枝或不分枝的。 •菌丝体为无色透明或暗褐色至黑色，或呈现鲜艳的颜色。 在显微镜下观察时，菌丝皆呈管状。在固体培养基上生长， 为绒毛状或棉絮状。 •一些较高等的霉菌丝状管道中皆有横隔（有隔菌丝----- 青霉属
孢囊孢子萌发产生芽管。匐枝 根霉是异宗配合的，当两个不 同交配型的菌株(“十”菌株 和“一”菌株)相遇，从菌丝 上分别产生称作原配子囊的分 枝，以配子囊配合的方式进行 质配，最后发育成黑色、厚壁、 带有瘤状突起的接合孢子。接 合孢子萌发时，一般是形成芽 管，芽管顶端形成孢子囊，孢 子囊中产生有“十’、“一” 分化的孢囊孢子。
囊梗单生，直立、分枝或不分枝。不产生匍匐丝与假 根。引起果实和贮藏器官的腐烂。
根霉
1.形态特征：菌丝发达。具 假根和匍匐菌丝。 2.繁殖：孢囊孢子、厚垣孢 子、接合孢子。
3.应用：糖化菌（淀粉酶）
有假根和匍匐丝，孢囊梗 2-3 根 丛生，不分枝，从匍匐枝上长出， 孢囊梗与假根对生。孢子囊基部有 一个近球形的囊轴。孢子囊球形或 近球形，成熟后呈黑色。孢子囊壁 破裂后，散出大量的孢囊孢子。
实验七 霉菌的形态观察与鉴定
1.豆腐进行霉菌发酵， 表面生长出一层白色茸 毛（即菌丝）的豆腐。 2.不同季节（不同温度、 湿度、发酵时间）根据 菌丝颜色、长度的不同 可分为虎皮毛、鼠毛、 兔毛和棉毛四种，以兔 毛和棉毛为质量最佳。
一、实验目的
(1) 学会霉菌的载玻片培养法
பைடு நூலகம்
(2) 了解青霉、曲霉、根霉及毛霉的形态构造
(4)待融化后的培养基冷却至45t左右时，接入标明菌名的 相应霉菌孢子一环，搅拌均匀，立即取大约3-4环于载玻 片中央，然后迅速盖上无菌盖玻片，并于载玻片右上角 标明菌名。 (5)往培养皿中倒人约3ml的无菌水。 (6)将上述制备好的载玻片置于培养皿中的玻片架上，盖 上皿盖，置于28℃培养箱中培养48-72h，取出，置于显 微镜下观察霉菌的形态。