2018年生物技术制药习题及答案

细菌。
20.cDNA 获得目的基因的优点是什么?
不含内含子。
21. 有机相酶反应的优点是什么?
①增加疏水性底物或产物的溶解度;②热力学平衡向合成方向移动,如酯合成,肽合成 等; ③可抑制有水参与的副反应,如酸酐的水解等;④酶不溶于有机介质, 易于回收再
利用;⑤ 容易从低沸点的溶剂中分离纯化产物;⑥酶的热稳定性提高, pH 的适应性扩 大;⑦无微生 物污染; ⑧能测定某些在水介质中不能测定的常数; ⑨固定化酶方法简 单, 可以只沉积在载 体表面。
3、比较基因工程疫苗和传统疫苗。
基因工程疫苗:1、 免疫原性良好、 效果持久及交叉免疫防护 2、 可精细设计、 便 于操作、 制备简便 3、 能制备联合疫苗 4、能重复利用 5、可用于免疫治疗。 虽然 基因工程疫
苗拥有传统疫苗所没有的优越性, 但是目前还存在一下不足与缺点:1、 安全性尚不稳 定 2、 免疫效果有待提高 3、抗核酸免疫反应。
二、简答题
1. 简述生物药物与生物技术药物的内涵。
生物药物是指运用生物学、医学、生物化学等的研究成果,综合利用物理学、化学、生 物化 学、生物技术和药学等学科的原理和方法,利用生物体、生物组织、细胞、体液
等制造的一 类用于预防、治疗和诊断的制品。生物药物,包括生物技术药物和原生物 制药。
生物技术药物:是指采用 DNA 重组技术或其他创新生物技术生产的治疗药物。细胞因 子类 药物、 激素类药物、 酶与辅酶类药物、 疫苗、 单克隆抗体药物、 反义核酸 药物、 RNA 干扰 (RNAi)药物、基因治疗药物。
凝胶层析的固定相是惰性的珠状凝胶颗粒, 凝胶颗粒的内部具有立体网状结构, 形成 很多孔 穴。 当含有不同分子大小的组分的样品进入凝胶层析柱后, 各个组分就向固 定相的孔穴内扩 散, 组分的扩散程度取决于孔穴的大小和组分分子大小。 比孔穴孔 径大的分子不能扩散到孔 穴内部, 完全被排阻在孔外, 只能在凝胶颗粒外的空间随
48. 工业用酶的生产方法是什么?
微生物发酵。
49. 某质粒带有 lacz 基因与之匹配的筛选方法是在培养基中加什么?
5-溴 -4-氯 -3-吲哚基 -b-D-半乳糖苷(X-gal ) 。
50. 人工化学和纯的 na 新形成的核苷酸链的方向?形成 5`末端? 3`末端?
人工化学合成 DNA 新形成的核苷酸链的合成方向是 3’→ 5’ ,合成的 DNA5’末端 是磷酸酯 键, 3’末端是 -OH 。
细 胞的永生性,具有无限的生命力。 4、工程细胞系:具有稳定的独特性状的细胞系。 包括 融合细胞系和基因工程细胞系。
9. 采用什么方法获得部分或全部人源治疗用品?
人源化抗体的构建可用全基因合成法或基因定点突变法。
10. 何谓治疗性疫苗。比较治疗性疫苗和预防性疫苗的区别。
2018 年生物技术制药习题及答案
一、选择填空题
1. 酶的主要来源是什么?
微生物生产。
2. 第三代生物技术是什么?
基因组时代。
3. 基因治疗最常用的载体是什么?
质粒载体和 λ 噬菌体载体。
4. 促红细胞生长素基因可在大肠杆菌中表达。 但不能用大肠杆菌工程菌生产人的促 红细胞生 产素为什么?
因为大肠杆菌不能使人的促红细胞生长素糖基化, 人的促红细胞生长素对大肠杆菌有 毒性作 用。
4. 如何控制基因工程药物质量?
基因工程药物的质量控制要点如下。 1 蛋白质含量的测定。 2 蛋白质纯度检测。 3 蛋白质 Mr 测定。 4 蛋白质等电点测定。 5 蛋白质序列分析。 6 内毒素分析, 宿主 蛋白液和酸残留分析。 5. 什么是单克隆抗体?简述制备过程。
经筛选和克隆化的杂交瘤细胞仅能合成及分泌单一抗原表位的特异性抗体,是单克隆 抗体。 单抗的制作过程大体分为抗原的制备,动物的免疫, b 细胞与骨髓瘤细胞融合 形成杂交瘤细 胞,筛选杂交瘤细胞,筛选能产生某种特异性单抗的杂交瘤细胞, 杂交 瘤细胞的克隆化,体 外大规模培养或动物腹腔培养特异性杂交瘤细胞克隆,单抗的纯 化及鉴定。
共价闭合环形 DNA (cccDNA ) 、开环 DNA (ocDNA ) 、线性分子(IDNA ) 。
55. 微生物转化中常用的微生物有哪些?
细菌、放线菌和霉菌。
56. 生物技术的核心和关键是什么?基础条件是什么?获得最终产物的手段是什么? 基 因工程。细胞工程,发酵工程。
57.PCR 全称是什么?概念。过程。引物。基本操作步骤。
59. 克隆真核基因常用的两种方法?
逆转录法和和学合成法。
60. 抗体转化为酶的途径?
61. 酶固定法中的两种包埋法是什么?
网格型包埋法和微囊型包埋法。
62. 噬菌体抗体库的表达载体系统分为哪些?
λ 噬菌体、单链丝状噬菌体和噬菌粒。
63. 抗体药物的特点是什么?
特异性、重要性、可检测性。
64. 质粒载体的结构包括哪些?
免疫球蛋白。
43. 基因工程的单元操作顺序是什么?
切接转增检。
44.cho 细胞来源于什么动物?
仓鼠。
45. 学会识别 DNA 片段回纹结构。
cccDNA 共价闭合环状 ocDNA 开环 IDNA 线状迁移速率 ccc>I>oc 。
46. 培养的动物细胞需要传代规定。异培体细胞的性质。
47.T4DNA 连接酶是通过形成磷酸二酯键将两个片段连接在一起 ,底物和关键是什么? 5' -OH 和 3' – P 。
33. 应用最广泛的产酶菌是什么?
大肠杆菌。
34. 大肠杆菌中的基因表达系统是什么?
外源基因表达系统 pBV220/pET。
35. 外援基因在动物细胞与大肠杆菌中表达的主要区别是什么?
糖基化。
36. 用于生产阿尔法干扰素的动物细胞是什么?
Namalum Namalwa 淋巴瘤细胞。
37. 基因表达最常用的主宿菌是什么?
5. 菌体生存所需能量已菌有氧代谢所需能量在什么情况下产生代谢产物乙酸?
菌体生长所需能量 (大于) 菌体有氧代谢所能提供的能量时, 菌体往往会产生代谢副 产物乙 酸。
6.cDNA 第一链所合成所需的引物是什么?
cDNA 第一条链合成所需引物为 PolyT 。
7. 基因工程制药在选择基因表达系统时首先考虑什么?
表达产物的功能。
8. 为了减轻工程菌代谢负荷,提高外源基因表达水平可采取什么措施?
将宿主细胞生长和外源基因的表达分成两个阶段。
9. 根据中国生物制品规定要求,疫苗出厂需要经过哪些检验?
理化检定、安全检定、效力检定。
10. 基因工程药物化学本质是什么?
蛋白质。
11.PEG 诱导细胞融合?
PEG 可能与可能与临近膜的水分相结合, 使细胞之间只有微笑空间的水分被 PEG 取 代, 从而 降低了细胞表面的极性,导致双脂层的不稳定,使细胞膜发生融合。
22. 抗体的发展阶段大致可分为什么?
第一代抗血清第二代单克隆抗体药物第三代基因工程抗体药物(多克隆到单克隆到基 因工 程) 。
23. 生产基因工程药物时对生物材料的质控有什么要求?
对目的基因、宿主细胞和表达载体都需要严格检查。
24. 质粒载体必须具备哪三要素?
复制子、选择标记、多克隆位点。
25. 凝胶过滤层析法依据的原理是什么?
51. 进行 PCR 扩增 DNA 时反应体系应加入什么物质?
模板 DNA 、耐高温的 DNA 聚合酶、引物、 PCR 缓冲液、脱氧核苷酸贮备液。
52. 细胞培养基分为哪三大类?
天然培养基、合成培养基和半合成培养基。
53. 理想的质粒载体应具备什么条件?
复制起点、选择性标记、克隆位点。
54. 质粒 DNA 的三种类型是什么?
2. 简述生物技术药物与生物技术制药概念。
生物技术药物是指采用 DNA 重组技术或其他生物技术生产的用于预防、 治疗和诊断疾 病的 药物;生物技术制药是指利用基因工程、细胞工程、发酵工程、酶工程、蛋白质 工程等生物 技术,来研究、开发和生产用于预防、治疗和诊断疾病的药物。 3. 比较 基因工程育苗与传统 疫苗的区别。
流动相向下流动, 它们经历的流程 短,流动速度快,所以首先流出;而较小的分子则可 以完全渗透进入凝胶颗粒内部,经历的 流程长,流动速度慢,所以最后流出。
26. 体外培养动物细胞的三种类型是什么?
贴壁依赖性细胞、非贴壁依赖性细胞、兼性贴壁细胞。
27. 将液氮罐中的动物细胞复苏的方法?
将冻存的细胞快速融化至 37 摄氏度,使细胞冻存时的冰晶快速融化,避免冰晶缓慢融 化时 进入细胞形成再结晶,对细胞造成伤害。
感受态细胞。
69. 分子提取 DNA 加入酚氯的目的,金属离子的目的, RNASE 的目的,醇的目的。
分子提取 DNA 加入酚氯的目的(使蛋白质变性或水解,除去蛋白质) ,金属离子的目的 (细 胞内有金属离子 , 如 Mg2 , 是酶活性的辅助因子 , 会使 DNA 被 DNase 分解 , 故除去使 DNase 活性的 Mg2 以保护 DNA 不被变性或降解 ) , RNASE 的目的 ( 除去 DNA 沉淀中的 RNA ,是凝 胶电泳检测时条带更明显) ,醇的目的(是 DNA 变性沉淀, 并除去蛋白质、糖类等其他水溶 性杂质,使之分离) 。
大肠杆菌。
38. 筛选杂交瘤细胞选用的培养基是什么?
(HAT )无血清培养基。
39. 采用凝胶过滤法分析单克隆抗体最高峰属于什么?
IgG 。
40. 引选鼠原性的单克隆抗体首要目的是什么?
降低免疫源性。 r41. 鼠源性单克隆抗体改造后得到的小分子抗体常用什么?
Fab 片段抗体。
42. 血清中具有抗体活性的球蛋白属于什么?
65. 蛋白质药物按分子大小分离提取方法有哪些?
凝胶过滤法、膜分离、离心。
66. 核酸药物分为哪六类?
三磷酸腺苷、辅酶 A 、脱氧核苷酸、三氟胸苷、叠氮胸苷、阿糖腺苷。
67. 动物细胞对生长机制的依赖性分为?
贴壁依赖性、非贴壁依赖性、兼性贴壁。
68. 受体细胞通过特殊处理后通透性改变称为什么细胞?
6. 简述基因工程操作流程。
获取目的基因构建表达载体将载体导入受体细胞目的基因的检测与表达
7. 动物细胞大规模培养有哪些操作方式。
主要有。悬浮培养法。微载体培养法。多孔载体培养法。微囊化培养法。中空纤维培 养法。 8. 生产动物细胞的种类。各有什么特点?
1、原代细胞 :不能直接从细胞库获得,只能临时用动物组织制备,费钱费力。 2、传代 细 胞系:有明显的贴壁和接触抑制特性,有正常细胞的核形,无致瘤性 3、 转化细胞系 :
聚合酶链式反应)概念(指在引物指导下由Fra Baidu bibliotek催化的对特定模板(克隆或基因组 DNA ) 的
扩增反应, 是模拟体内 DNA 复制过程, 在体外特异性扩增 DNA 片段的一种技术) 。 过程 (变 性、退火、延伸) 。引物。基本操作步骤。 P12
58.mRNA 两个核糖体结合位点是什么?
SD 序列与起始密码子 AUG 之间的距离。
12. 以大肠杆菌为目的基因表达系统的表达产物,产物位置是什么?
胞内、周质、胞外。
13. 人类第一个基因工程药物是什么?
重组胰岛素。
14. 动物细胞培养的条件是什么?
温度 :哺乳类 37 昆虫 25~28, ph7.2~7.4,通氧量:使 co2 培养箱,不同动物比例不同。 防止 污染, 基本营养物质:三大营养物质 维生素, 激素, 促细胞生长因子, 渗透压:
大多数 260~320。 15. 不属于加工改造抗体的是什么?
单域抗体。
16. 第三代抗体是什么?
利用基因工程技术制备的基因工程抗体。
17. 现代生物技术的标志是什么?
DNA 重组技术。
18. 获得目的基因最常用的方法是什么?
化学合成法、 PCR 法(最常用) 、基因文库法、 cDNA 文库法。
19. 鸟枪法克隆目的基因的战略适用于什么?
28. 能将 IgG 分子水解产生两个抗原结合片段和一个可结晶片段的酶是什么?
木瓜蛋白酶。
29. 单克隆抗体是由哪两个细胞融合而成?
B 细胞与骨髓瘤细胞。
30. 第三代基因工程指什么?
第二代指蛋白质工程。
31. 酶和细胞固定化最常用有效的方法是什么?
包埋法、化学结合法和物理吸附法。
32. 真核基因在大肠杆菌中以融合蛋白的形式表达。