食品微生物检验菌落总数测定方法的效果

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平板计数法与纸片法检测食品微生物菌落总数的比较分析

FOODEXPERIMENT平板计数法与纸片法检测食品微生物菌落总数的比较分析■文丨张嬪夭津市工业微生物研究所有限公司、夭津量信检验认证技术有限公司品污染的微生物主要是细菌•通过对食品微生物菌落总数进行检测，能够掌握食品受污染程度。

而平板计数法与纸片法均能够对食品微生物菌落总数进行检测，对二者进行比较分析，能够为菌落计数标准方法的调整提供思路。

一、实验方法比较准备平板计数琼脂培养基和菌落总数测试片，并准备饼干、蛋糕以及两份质控样品。

具体实验如下：1•平板计数法。

（1）培养基的配制。

对培养基进行高压灭菌，再放入恒水温的浴锅中，并按照标准要求将水温保持在46°C O（2）样液的制备将准备好的待测样品原液与质控样品进行10倍稀释.充分混匀后制备为1:10的样品匀液。

（3）质控样品的制备。

吸取4mL的生理盐水水化西林，彻底溶解后将溶液移除，并反复清洗容器内壁，回收的清洗液即是质控样品。

使用微量移液器对其进行吸取，9mL的稀释液应吸取lmL的样品匀液，混合制备为1:100的样品匀液。

（4）使用平板计数法对食品微生物菌落总数进行检测时要保证环境的无菌性，主要步骤是：使用ImL灭菌吸管吸取菌液稀释液，放置在平皿内，加入ImL 的无菌生理盐水，注入平板计数琼脂，再将其摇匀，静置冷却凝固后，将平板翻转，在36°C±1°C的温度下静置培养48h±2h o2.纸片法。

在使用纸片法对食品微生物菌落总数进行检测时，同样需要制备培养基和样液’在对培养基进行制备时，主要将测试纸片静置，直到其恢复常温；在制备样液时，与平板计数法相同，故不作赘述。

使用纸片法对食品微生物菌落总数进行检测的主要步骤是：使用ImL灭菌吸管吸取菌液稀释液，分别放置在测试纸片上.将纸片进行覆盖，以同样的条件对其进行培养。

二、实验结果比较在分别使用平板计数法和纸片法对食品微生物菌落总数开展检测实验后，主要采取SPSS17.0对两种实验结果进行分析，“Z-比分数”对其进行评价。

食品中微生物的菌落计数方法研究

食品中微生物的菌落计数方法研究食品安全一直是人们生活中关注的热点话题，其中一个重要的方面是对食品中微生物的菌落计数方法的研究。

菌落计数方法可用于评估食品中的微生物污染水平，从而保障食品的质量和安全。

本文将介绍一些常见的菌落计数方法，并讨论它们的优劣以及适用范围。

菌落计数方法是一种常见的微生物检测方法，主要用于鉴定和计数食品中的微生物。

最常用的方法之一是表面菌落计数法。

该方法利用菌落在琼脂平板上形成的原理，将食品样品在培养基上划线或刺洞，然后经过恰当的培养条件孵育一段时间，菌落逐渐出现并形成。

通过数菌落的数量，可以推测食品样品中的微生物数量。

这种方法简单易行，成本低廉，因此在实验室和生产现场被广泛使用。

但是，表面菌落计数法只能计数在表面生长的菌落，不能统计深层菌落，因此对于某些食品来说，其准确性可能有所限制。

另外一种常见的菌落计数方法是膜过滤法。

该方法将食品样品通过滤膜，然后将滤膜放置在含有营养物质的琼脂培养基上进行培养。

培养结束后，可以直接计数与滤膜上的菌落数量。

相对于表面菌落计数法，膜过滤法可以更加准确地计数食品样品中的微生物的总数。

这种方法虽然操作稍微复杂一些，但是其他方面的限制相对较少，适用于各种类型的食品。

另外一种新兴的菌落计数方法是分子生物学方法。

与前两种方法不同，分子生物学方法不需要培养微生物，而是通过检测微生物的DNA或RNA来确定其数量。

分子生物学方法具有高灵敏度和高精确度的优点，可以帮助研究人员更准确地评估食品中微生物的污染情况。

但是，分子生物学方法的设备和技术要求较高，成本也相对较高，因此在现实应用中还没有得到广泛应用。

除了这些常见的方法，还有一些其他的菌落计数方法也值得研究和探索。

例如，近年来，一些研究人员提出了利用纳米技术进行菌落计数的方法。

这种方法利用纳米颗粒与微生物相互作用的原理，通过监测纳米颗粒的变化来计数微生物的数量。

这种方法具有高灵敏度、高速度和低成本的特点，可以在短时间内获得准确的菌落计数结果，但是还需要进一步的研究和验证。

食品微生物检验菌落总数测定中纸片法的应用效果评价

食品微生物检验菌落总数测定中纸片法的应用效果评价刘迎（阳谷县疾病预防控制中心，山东聊城 252300）摘要：目的：对食品微生物检验菌落总数测定中纸片法的应用效果进行评价。

方法：选取生猪肉、湿豆腐、散装糕点、散装饼干、纯净水、新鲜牛肉、新鲜鸭肉、新鲜鸡肉、新鲜鱼肉、散装调味料、新鲜水果和牛奶制品各5份，分别采用平板计数法、纸片法检测菌落总数。

比较两组方法测定菌落总数的变异系数、结果评价。

结果：纸片法与平板计数法对各样品的菌落总数检出数差异无统计学意义（P＞0.05），纸片法、平板计数法测定菌落总数的变异系数、结果评价基本一致（Z＜2，P＞0.05）。

结论：纸片法应用于食品微生物检验菌落总数测定结果较为满意，值得推广。

关键词：食品；微生物检验；菌落总数；纸片法To Explore the Application Value of the Paper Methodfor Determining the Total Number of Colonies in FoodMicrobiological ExaminationLIU Ying(Yanggu County Center for Disease Control and Prevention Laboratory, Liaocheng 252300, China) Abstract: Objective: To evaluate the application effect of the paper method for determining the total number of bacterial colonies in food microbial examination. Method: Raw pork, wet tofu, bulk pastry, bulk biscuit, pure water, fresh beef, fresh duck, fresh chicken, fresh fish, bulk seasoning, fresh fruit and milk products were selected, and the total number of colonies was detected by plate counting method and paper method, respectively. The coefficient of variation of the total number of colonies measured by the two methods was compared and the results were evaluated. Result: There was no significant difference in the total number of colonies detected by disk method and plate counting method (P＞0.05). The coefficient of variation and result evaluation of the total number of colonies measured by disk method and plate counting method were basically the same (Z＜2, P＞0.05). Conclusion: The application of disk method in the determination of the total number of bacterial colonies in food microbiological inspection is satisfactory and worthy of popularization.Keywords: food; microbiological test; total number of colonies; paper disk method食品中微生物菌落总数是反映食品卫生安全的重要指标，食品在生产、运输、储存等过程中容易受到微生物的污染，对食品微生物进行检验有助于判断食品污染情况，对食品生产、卫生管理等工作具有重要的指导意义。

食品中菌落总数的测定和不确定度分析

食品中菌落总数的测定和不确定度分析为了确保食品安全和卫生，必须对食品中的菌落总数进行测定，并进行不确定度的分析。

食品中的菌落总数是指在特定条件下，通过培养方法检测出的食品中的微生物菌落数量。

食品中菌落总数的测定方法通常采用平板计数法。

该方法主要包括以下步骤：1.准备培养基：选择适宜的培养基，如营养琼脂平板培养基。

将培养基加热溶解，然后冷却至约 45-50℃。

2.样品制备：按照一定比例将食品样品加入到培养基中，使用均匀撒布法或稀释法将菌液平铺在培养基表面。

3.培养：将制备好的培养基进行培养。

培养条件包括培养温度、时间和湿度等，根据食品样品的特性和微生物的生长特点进行合理设置。

4.统计：在菌落出现后，使用显微镜和计数器进行菌落的计数。

根据计数的结果和稀释倍数，计算出食品中的菌落总数。

测定菌落总数时，不确定度的分析是非常重要的。

不确定度是指对测量结果的估计误差。

菌落总数测定的不确定度分析主要包括以下几个方面：1.操作误差：操作人员在样品制备和培养过程中的误差。

可以通过重复测量多次来评估操作误差。

2.测量误差：使用显微镜和计数器进行菌落计数时的误差。

可以通过重复计数多次来评估测量误差。

3.稀释误差：使用稀释法进行样品制备时的误差。

可以通过重复制备多次进行评估。

4.环境误差：温度、湿度和空气质量等环境因素对菌落生长的影响。

可以通过控制环境条件和进行平行实验来评估环境误差。

评估不确定度后，可以使用统计方法来进行分析。

常用的统计方法包括平均数、标准差、方差和置信区间等。

食品中菌落总数的测定和不确定度分析是确保食品安全的重要工作。

通过合理的测定方法和不确定度评估，可以提高菌落总数检测的准确性和可靠性。

探讨食品微生物检验菌落总数测定纸片法的应用价值

World Latest Medicne Information (Electronic Version) 2021 Vo1.21 No.14252投稿邮箱：zuixinyixue@·医学检验·探讨食品微生物检验菌落总数测定纸片法的应用价值张俊（六枝特区疾病预防控制中心，贵州六枝 553400）0　引言民以食为天，食品安全是国家和人民从古自今都十分关心关注的民生问题。

食品微生物检验菌落总数测定是食品检验的最基本的要求之一，其方法的精准程度可以更好地反映食品被微生物污染的程度，市场工作人员可以根据微生物的检验结果判断食品是否满足市场流通的需求[1]。

菌落总数测定纸片法在一定程度上可以帮助研究人员及市场管理人员得到更为精准的食品样本微生物检验结果，提供检验的真实性，为后续的食品管理工作打下基础[2]。

1　资料及方法1.1　一般资料。

选择国家食品监测项目2019年1月至2020年8月的40例食品样本作为检验对象，分别使用菌落总数测定纸片法以及琼脂倾注平皿培养计数法测量食品微生物检验菌落总数。

将菌落总数测定纸片法设置为研究组、琼脂倾注平皿培养计数法设置为参照组。

1.2　方法1.2.1　琼脂倾注平皿培养计数法（参照组）（1）术语和定义：菌落总数是指食品样品经过处理，在一定条件下培养后（如培养基成份、培养温度和时间、PH 值、需氧程度等），所得1 mL （g ）食品检样中所含菌落数。

（2）设备和材料：恒温培养箱（36±1℃）、天平、恒温水浴箱（36±1℃）、均质器、无菌吸管及培养皿、放大镜、无菌生理盐水等。

（3）培养基：使用上海康润生物科技有限公司生产的营养琼脂成品，按要求配制、灭菌后备用。

（4）样品处理：取样品25 m L （g ）放入含有225 mL 灭菌磷酸缓冲液稀释液（或生理盐水）的取样罐或均质杯内，制成1:10的样品匀液，必要时用1 mol/LNaOH 或1 mol/L HCl 溶液调节样品匀液pH 至6.6~7.2。

食品中菌落总数的测定和不确定度分析

食品中菌落总数的测定和不确定度分析一、引言食品中菌落总数的测定和不确定度分析是食品卫生检测中的重要一环。

菌落总数是指食品样品中各类菌落的总数，反映了食品样品的卫生质量和微生物状态。

通过对食品中菌落总数的测定和不确定度分析，可以评估食品样品中微生物的数量，并确定分析结果的准确度和可靠性。

二、测定方法食品中菌落总数的测定通常使用平皿计数法。

具体步骤如下：1. 准备样品：取食品样品适量，保持其完整性和天然状态。

2. 消毒处理：将样品进行消毒处理，通常采用酒精灼烧或辐射灭菌等方法，以确保样品中的微生物数量符合测定要求。

3. 取样：采用无菌技术，将样品取适量均匀地涂于含有营养物质的琼脂平板上。

4. 培养：将平板培养基斜放于培养箱中，控制培养环境的温度和湿度，使菌落得以生长。

5. 记录和计数：在培养一定时间后，观察平板上菌落的生长情况，并且根据菌落的形状、颜色、大小等特征进行记录和计数。

6. 计算菌落总数：统计记录的菌落数量，并根据实验过程中相应的计算公式计算出食品中菌落总数。

三、不确定度分析不确定度是对测量结果的可靠性和准确度的度量。

在食品中菌落总数的测定过程中，存在多个可能影响结果的因素，如样品的不均匀性、菌落的形状和大小的主观判断等。

通过不确定度的分析，可以评估测定结果的可靠性，并确保实验数据的准确度。

不确定度的分析可以通过以下步骤进行：1. 确定测定结果的标准偏差：通过进行多次实验测定，计算出测定结果的标准偏差。

标准偏差可以反映出数据的离散程度和测定的精确性。

2. 估计不确定度的类型：根据测定过程中存在的因素和误差来源，估计可能的不确定度类型，如随机误差和系统误差等。

3. 计算不确定度的组成：根据不确定度类型，分别计算出每个不确定度源的贡献度，并进行数值上的组合和求和。

4. 定量表示不确定度：通过数值表示不确定度的大小，常用表示形式包括标准不确定度和扩展不确定度。

5. 不确定度扩展：在测定过程中，不确定度可能会随着操作过程的复杂性而增加。

食品中菌落总数的测定和不确定度分析

食品中菌落总数的测定和不确定度分析食品中细菌总数的测定和不确定度分析是食品科学与技术领域中的重要研究内容之一。

细菌总数的测定可以帮助我们了解食品的卫生状况，评估食品质量，保障公众的食品安全。

不确定度分析则是用来评估测定结果的可靠性和准确性，帮助我们判断测定结果的可信度。

食品中的细菌是以菌落的形式存在的，所以细菌总数的测定方法一般采用菌落计数的方法。

具体的步骤如下：1. 取样：从食品样品中取出适量的物质，一般是取适量食品，加入适量的生理盐水，通过均匀悬浮。

2. 稀释：将取样得到的悬浮液进行适当的稀释，以保证每个培养皿上的菌落数在可计数的范围内。

一般采用十倍的稀释系列进行稀释。

3. 接种：将稀释好的样品取适量，在无菌条件下倒入培养皿中，均匀涂布在培养基上。

4. 培养：将培养皿放入恒温箱温育，通常为30°C，培养时间一般为24-48小时。

5. 计数：培养完成后，通过裸眼或显微镜观察，根据菌落的形态、大小、颜色等特征进行计数，并将计数结果记录下来。

细菌总数的测定结果一般以CFU/g（菌落形成单位/克）为单位表示。

不确定度分析是对测定结果的评估，主要从随机误差和系统误差两方面进行分析。

随机误差是由于测定过程中的种种因素引起的结果的波动性。

在细菌总数的测定中，随机误差可能包括取样不均匀、稀释误差、接种误差等。

通过重复测定可以减小随机误差，并通过统计方法计算出标准偏差来表示测量结果的稳定性。

系统误差是由于测定方法的固有缺陷引起的结果的偏差。

在细菌总数的测定中，系统误差可能包括培养基的选择和准备、温度和湿度的控制、观察的主观判断等。

通过合理选择和优化测定条件，可以减小系统误差。

食品卫生微生物学检验菌落总数测定方法的效果分析

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中国农村卫生２０１６年１２月第２４期总第１０２期Ｃｈｉｎａ＇ｓｒｕｒａｌｈｅａｌｔｈ，Ｄｅｃｅｍｂｅｒ２０１６，Ｎｏ．２４，Ｔｏｔａ１Ｎ。１０２
食品卫生微生物学检验菌落总数测定方法的效果分析
【关键词】食品卫生；微生物检验；菌落总数；方法ＡｎａｌｙｓｉｓｏｎｔｈｅｅｆｆｅｃｔｏｆｔｈｅｍｅｔｈｏｄｆｏｒｔｈｅｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｔｏｔａｌｂａｃｔｅｒｉａｌｃｏｕｎｔｉｎｆｏｏｄｈｙｇｉｅｎｅＭｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙＧａｏＣｈａｎｇｆｅｎｇ（ＧａｏｙｏｕＭｕｎｉｃｉｐａｌＣｅｎｔｅｒｆｏｒＤｉｓｅａｓｅＣｏｎｔｒｏｌａｎｄｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ，Ｊｉａｎｇｓｕ２２５６００）［Ａｂｓｔｒａｃｔ］Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：ｔｏａｎａｌｙｚｅｔｈｅｍｅｔｈｏｄａｎｄｅｆｆｅｃｔｏｆｔｈｅｔｏｔａｌｎｕｍｂｅｒｏｆｂａｃｔｅｒｉａｌｃｏｌｏｎｉｅｓｉｎｆｏｏｄ．Ｍｅｔｈｏｄｓ：ｄｅｔｅｃｔｉｏｎｏｆ１２Ｏｓａｍｐｌｅｓａｓｔｈｅｒｅｓｅａｒｃｈｏｂｊｅｃｔ，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ，ａｎｄｔｈｅａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｏｆｐｌａｔｅｃｏｌｏｎｙｃｏｕｎｔｉｎｇｍｅｔｈｏｄ，ｔｈｅｔｏｔａｌｎｕｍｂｅｒｏｆｃｏｌｏｎｉｅｓｔｅｓｔｄｅ —

食品中菌落总数计数人员比对的实验方法和结果分析

检测认证食品中菌落总数计数人员比对的实验方法和结果分析■ 张乾徐爱民任靖（菏泽市食品药品检验检测研究院）摘要：菌落总数反映了食品的污染状况。

本文依据GB 4789.2-2022《食品安全国家标准食品微生物学检验菌落总数测定》，采用测试片的方法对定量质控菌株进行检测。

使用复现性作为质控指标，对两位检测人员的结果进行分析。

人员比对结果为满意，为测试片法在实验室中的内部质控提供了可靠的参考数据。

关键词：菌落总数，质量控制，人员比对DOI编码：10.3969/j.issn.1002-5944.2023.16.029Experimental Method and Result Analysis of Personnel Comparison ofAerobic Plate Count in FoodZHANG Qian XU Ai-min REN Jing（Heze Institute for Food and Drug Control）Abstract:The total number of bacterial colonies reﬂ ects the contamination of food. According to GB 4789.2-2022, National food safety standards - Microbiological testing of food - Determination of total bacterial count, this paper uses the method of test piece to detect the quantitative quality control strains, and analyzes the results of two testers using reproducibility as a quality control index. The results of personnel comparison are satisfactory and provide reliable reference data for the internal quality control of the test piece method in the laboratory.Keywords: aerobic plate count, quality control, personnel comparison0 引言随着人民生活水平的不断提高，食品的安全与卫生受到越来越多人的重视，这就对食品检验提出了更高的要求。

食品中菌落总数的测定和不确定度分析

食品中菌落总数的测定和不确定度分析一、引言食品安全是人们生活中不可忽视的一个重要问题，食品安全直接关系到人们的身体健康。

而食品中的微生物污染是导致食品安全问题的重要原因之一。

在食品生产和加工过程中，微生物总数是一个重要的指标，可以反映出食品中微生物的污染情况。

对食品中微生物总数的测定和不确定度分析具有重要的意义。

二、食品中微生物总数的测定方法测定食品中微生物总数的常用方法有两种：一种是菌落计数法，另一种是细菌总数法。

菌落计数法是指通过分次稀释的方法，将食品样品接种在富含营养物质的琼脂平板上，培养一段时间后，观察和计算形成的菌落数，从而推算出原始食品样品中的微生物总数。

这种方法简单易行，不需要高端的设备，因此在实际的食品检测中应用较为广泛。

而细菌总数法则是通过显微镜观察食品样品中的微生物数量，计算出微生物总数。

这种方法相对复杂，需要一定的实验技术和显微镜设备，因此在实际应用中较为少见。

由于菌落计数法简单易行，并且结果可靠，因此在食品中微生物总数的测定中常常采用菌落计数法。

下面将对菌落计数法的步骤进行详细介绍。

菌落计数法的步骤如下：1. 准备琼脂平板，将琼脂平板装入培养皿中，待琼脂凝固后，将培养皿反面标上编号，以便于后续操作。

2. 将食品样品加入适量的生理盐水中，制成稀释液。

3. 取适量的稀释液，通过分次稀释的方法，制成不同浓度的稀释液。

4. 取适量的每种浓度的稀释液，将其分别加入琼脂平板上，用灭菌的玻璃棒均匀涂抹。

5. 将培养皿反面朝上，置于恒温箱内进行培养。

6. 培养一定时间后，观察培养皿上的菌落情况，根据不同浓度的稀释液，选择菌落数较适宜计算的培养皿。

7. 使用计算器计算出原始食品样品中的微生物总数。

通过上述步骤，即可完成对食品中微生物总数的测定工作。

三、菌落计数法的不确定度分析菌落计数法是一种间接测定方法，因此在测定的过程中难免会产生一定的误差。

为了能够更加准确地反映出食品中微生物总数的真实情况，需要对菌落计数法的不确定度进行分析和评价。

食品中菌落总数与大肠菌群测定能力验证结果与分析

食品中菌落总数与大肠菌群测定能力验证结果与分析陈新颜，喻喜华*（国药控股星鲨制药（厦门）有限公司，厦门市母婴健康营养产品重点实验室，福建厦门 361026）摘　要：为了提高实验室菌落总数与大肠菌群检测能力，参加了2023年中国检验检疫科学研究院测试评价中心与一般财团法人日本食品检查协会联合组织的ACAS-PT1578（2023）中日联合微生物检测技能考核。

依据《食品安全国家标准食品微生物学检验菌落总数测定》（GB 4789.2—2022）、《食品安全国家标准食品微生物学检验大肠菌群计数》（GB 4789.3—2016）以及能力验证作业指导书要求进行样品检测，并采用不同方法进行结果比对。

本次能力验证两项测定结果均为满意。

其中，菌落总数测定|Z|值为0，大肠菌群计数|Z|值为0.2。

通过参加能力验证为实验室出具数据结果的可靠性和有效性提供了客观证据，提升了检验人员的检测水平。

关键词：能力验证；平板计数法；菌落总数；大肠菌群Analysis of the Validation Results of the Total Bacterial Count and Coliform Group Determination Ability in FoodCHEN Xinyan, YU Xihua*(Xiamen Key Laboratory of Maternal and Infant Health and Nutrition Products, Sinopharm Xingsha Pharmaceuticals(Xiamen) Co., Ltd., Xiamen 361026, China)Abstract: In order to improve the total number of bacterial colonies and coliform bacteria detection ability in the laboratory, we participated in the ACAS-PT1578 (2023) China-Japan joint microbial detection skills assessment jointly organized by the Test and Evaluation Center of the Chinese Academy of Inspection and Quarantine and the Japan Food Inspection Association. The samples were tested according to GB 4789.2—2022, GB 4789.3—2016 and the requirements of the capability verification operation instructions, and the results were compared by different methods. The results of both tests were satisfactory. Among them, the total number of colonies |Z| was 0, and the coliform count |Z| was 0.2. The participation ability verification provides objective evidence for the reliability and validity of data results issued by the laboratory, and improves the testing level of inspectors.Keywords: capability verification; plate counting method; total number of bacterial colonies; coliform group能力验证是利用实验室间比对，按照预先制定的准则评价参加者的测量或检测能力[1]。

食品微生物检验菌落总数测定方法的效果分析

Ｔ１８９７—２００７标准、美国ＡＯＡＣ０．取磷酸缓冲液作对照接种，在（３６＋１）℃条件培养（４８±２）
ＭＡ标准：９８６．３３、９８９．１０、９９０．１２）、计数用琼脂培养基ｈ后，参照ＧＢ４７８９．１－２０１０规定进行菌落计数、换算。
ＡｎａｌｙｓｉｓｏｆｔｈｅＥｆｌｆｅｃｔ０ｆＤｉｆｆｅｒｅｎｔＤｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎＭｅｔｈｏｄｉｎｆｏｏｄＭｉｃｒｏｂｉｏ．１ｏｇｉｃａｌＴｅｓｔｉｎｇ
ＬＩＧｕａｎｇ－ｚｅＹｕｎｎａｎＰｕｅｒＭｕｎｉｃｉｐａｌＣｅｎｔｅｒｆｏｒＤｉｓｅａｓｅＣｏｎｔｒｏｌａｎｄＰｒｅｖｅｎｔｉｏｎ，Ｐｕｅｒ，ＹｕｎｎａｎＰｒｏｖｉｎｃｅ，６６５０００Ｃｈｉｎａ
作为食品卫生检验的独立性指标，为了比较ＴＰ、ＣＡＰ、
（１）ＣＡＰ：测定前对试验所用吸管、容器、耗材进行
１ＴｒＣ３种总菌落数计数方法的检验效果．特进行该研究。消毒处理，保证无菌，制作琼脂培养基，取待测样本加人
确的微生物检验方法、制定安全、可靠的食品检验标准内使用。（３）检验样本：所有样品由５个食品厂企业提
是保障饮食安全的重要手段和基本措施。总菌落数可反供。
映加工食品的整体卫生情况，且检验快速、准确性高，可１．２方法
ｔｈｅｃｏｌｏｎｉｅｓ，ｂｅｔｔｅｒｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ，ｅｔａ１．
［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｔｅｓｔｉｎｇ；ＴＰ；ＣＡＰ；ＴＦＣ

菌落计数法在食品微生物检测中的应用

菌落计数法在食品微生物检测中的应用第一章：绪论随着科技的发展和消费者对食品安全要求的不断提高，食品微生物检测越来越受到重视。

其中，菌落计数法是最常用的方法之一。

本文将从菌落计数法的定义、原理、实验流程、优缺点以及应用等方面对其在食品微生物检测中的应用进行探讨。

第二章：菌落计数法的原理菌落计数法是通过诱导微生物在固体培养基上形成单一的菌落进行检测的。

其核心原理是利用微生物在生长过程中分裂成独立的细胞，最后形成菌落的特性。

通过观察菌落的形态、大小和色泽等特征，可以初步鉴定微生物种类。

计数过程中，一般采用加入稀释液和加入无菌稀释液两种方法。

前者主要适用于高浓度菌液，后者适用于低密度菌液。

通过逐级稀释并接种，最后能够获取适宜数目的菌落进行计数。

第三章：菌落计数法的实验流程菌落计数法实验流程主要包括样品制备、稀释液配制、平板制备、加菌、孵育、计数等步骤。

1. 样品制备样品制备要求样品具有代表性且可重复性。

根据样品类型不同可选择不同的样品处理方法，例如直接菌落计数、过滤膜取样等。

同时样品必须保持无菌状态，操作过程中需采取一定的消毒措施，减少外部污染。

2. 稀释液配制稀释液一般分为可直接计数的1倍和2倍稀释液和稀释倍数更高的无菌稀释液。

其中，1倍和2倍稀释液适用于高浓度样品，无菌稀释液适用于低浓度样品。

3. 平板制备制备平板时，需先将培养基融化和均匀分配于平板中，然后等其凝固。

在实验过程中，需注意避免气泡和液体不均匀等情况的出现。

4. 加菌加菌时需注意无菌操作，将适当稀释后的菌液均匀地滴在平板表面，并用无菌的铲子或镊子轻轻抹匀。

5. 孵育孵育的条件包括温度、湿度和孵育时间等，不同的菌株需要不同的条件。

孵育时间一般为24-48小时。

6. 计数计数时，需对菌落数量进行统计，根据稀释倍数和计数平板数确定原样品中的菌落总数。

第四章：菌落计数法的优缺点1. 优点菌落计数法是目前最常用的微生物计数法之一，其优点主要包括：可以提供菌落图像，易于初步识别微生物种类；实验操作简单易行，不需要复杂昂贵的器材；适用于多种微生物和多种样品类型，具有较高的适应性；仅需24-48小时即可得到结果，速度较快。

23235424_食品微生物检验菌落总数测定方法的效果探讨

Tlogy科技分析与检测从食物菌落总数定义可以看出，其主要是利用一定培养方式，最终在实验结束后得到的菌落总量[1]。

而这个总量对于食品而言具有十分关键的意义，能为食品检验提供一定支撑，保障人们的食品安全。

因此，展开讨论食品微生物检验菌落总数测定效果，具有现实而积极的意义。

1　食品微生物检验菌落总数的意义从食品微生物检测流程和最终目的可以看出，其具有以下意义：①在检测总量基础上，为食品卫生安全评价提供一定的数据依据；②对比食物的菌群总量，可发现食物是否过期，营养构架是否正常有序，及是否拥有食用价值等；③可对食物划定食物保质期，确定食物可正常食用的时间，进而提升食物的食用安全性[2]。

综上，检定食物的菌群总量具有十分重要的意义，因此需对其予以相应重视。

但应注意，在检定过程中除了要依据相关标准，还应在检定对象基础上选择相应的检定方式，以提升检定数据的准确性和适用性。

2　相关材料和统计工具检测材料：生乳样品；检测工具：TTC 检测工具、1 mL 与10 mL 灭菌试管、水浴箱等；其他工具：培养皿、灭菌吸管、营养琼脂、测定瓶、温箱、试管架等。

统计工具：统计工具以SPSS13.0为主，采用t 检验对比两种方法，P ＜0.05为差异有统计学意义。

3　食品微生物学检验菌落总数测定方式与效果分析3.1　平板计数法此类菌落总量检定方式的原理为：按照一定比例稀释样品，然后对适当稀释比例的样品在培养基上进行培养一段时间，对培养后的菌落进行计数的方法即为平板计数法[3]。

多种标准中均涉及该检定方式，如GB/T 8538—1995、GB/T 5750.12—200、GB/T 4789.2—2003及GB 4789.2—2010等，不同规范中对温度和时间的具体要求都有所差异。

以120例食品为检定对象，标准以GB 4789.2—2010为基础，进行食物微生物群菌落检定，其中选取样品25 g，置于生理盐水（225 mL）中；利用灭菌后的吸管，取适量稀释液，利用生理盐水将其稀释1 000倍和 10 000倍，然后选择适量的稀释液，将其滴入直径为8～9 cm 的无菌平皿中。

微生物菌落计数技术在食品质量检测中的应用

微生物菌落计数技术在食品质量检测中的应用随着食品加工以及配送的不断发展，食品安全问题愈发引起人们的关注。

其中，微生物是食品安全问题中不可忽视的因素。

可能感染人体的微生物，如大肠杆菌、沙门氏菌等可以通过食物污染而传播。

同时，食物也是微生物的理想生长环境。

因此，为了保护消费者的健康，微生物菌落计数技术在食品质量检测中得到广泛的应用。

什么是微生物菌落计数技术？微生物菌落计数技术是一种用于检测食品中微生物水平的方法。

这种技术根据食物中微生物数量的多少来评估其对人体的潜在风险。

在一定程度上，它可以判断食品是否达到国家或地区规定的标准。

微生物菌落计数技术的原理是将食品样品放在富含基础培养物的指定培养基（例如营养琼脂）上，然后将其放在特定条件下进行培养。

通常，这种技术需要在30°C至37°C下进行一段时间的培养，或者根据不同的指标选择不同的生长条件。

在培养期结束后，使用显微镜或肉眼等方法观察有多少微生物在培养基上形成了菌落，然后通过计数来确定样品中微生物的数量。

微生物菌落计数技术可以用于检测食品中的各种微生物。

例如，在检测乳制品时，可以用它来检测乳酸菌和霉菌等微生物；在检测肉制品时，可以检测大肠杆菌和沙门氏菌等致病微生物等。

此外，微生物菌落计数技术还可以检测食品中的细菌、真菌、酵母和其他微生物。

这些都是常见的、可能导致人体感染的微生物。

在食品工业过程中，微生物菌落计数技术也发挥了重要作用。

每当进行生产过程、消毒或包装时，都需要测试样本以确保其达到标准并且不可能传播病原体。

与其他食品安全测试方法相比，微生物菌落计数技术可以为食品生产和质量控制提供迅速、可靠的结果。

它能够发现涉及感染的问题，并且可以检测到食品中微生物超出法定限制的情况，从而判断出食品是否受到污染。

微生物菌落计数技术不仅具有高度灵敏度，而且具有较低的误报率。

需要注意的是，微生物菌落计数技术的使用需要进行严格的质量控制。

必须严格遵守规定的培养条件，并将样品发送到受认可的实验室进行测试。

食品卫生微生物学检验菌落数测定方法的效果分析

食品卫生微生物学检验菌落数测定方法的效果分析发表时间：2016-01-26T09:34:21.427Z 来源：《健康世界》2015年24期供稿作者：籍永霞[导读] 吉林省白山市江源区疾病预防控制中心不同检测方法的样本检测合格率无差别，但不同检测方法菌落培养时间有所差别。

吉林省白山市江源区疾病预防控制中心134700 摘要:目的：探讨不同食品卫生微生物学检验菌落数测定方法的检测效果。

方法：选取174份食品检测样品作为本文研究对象，分别采用平板菌落计数法、TTC培养基及菌落总数测试片三种方法检测食品标本中的菌落总数，比较三种检测方法不同培养时间的菌落生长情况及样本检测合格率。

结果：三种检测方法培养6h后均肉眼可见菌落生长，培养12h后菌落生长清晰可见，培养48h后各种检测方法的菌落生长均达峰值，其中平板菌落计数法在培养24h后菌落生长即达峰值，明显短于其他检测方法(P<0.05)。

三种检测方法合格率分别为89.7%、85.9%及84.6%，三者检测合格率无显著差异(P>0.05)。

结论：不同检测方法的样本检测合格率无差别，但不同检测方法菌落培养时间有所差别。

关键词:食品卫生；微生物检验；菌落数测定菌落数是指食品标本经一定条件培养后一定重量或体积内的含菌数量，含量数量越高说明食品受污染的机率越高，因此食品中菌落总数大小是判断食品安全和卫生情况的标准，食品中菌落总数常见的检查方法包括平板计数法、滤膜法、纸片法等，不同检测方法培养条件及时间有所差异，对检测合格率亦有一定影响，为此本文将三种不同检测方法应用于食品标本的检测中，现将应用结果汇报如下。

1材料与方法1.1材料样品为食品企业中随机抽取的174份标本，平板培养基为广东东盛生物生产的PCA琼脂及0.05%的TTC，细菌总数测试片为美国3M公司生产，生化培养箱为江苏金坛大野设备公司生产的AHP-250型培养箱。

1.2样品处理食品标本用无菌生理盐水进行初步水化，待水化完成后再用少量无菌生理盐水进行混匀，完全混匀后再用适量无菌生理盐水进行溶解，确保检测标本原液的PH值处于中性，标本处理完成后按照各种检测方法进行培养。

食品微生物检验菌落总数测定方法的效果分析

Aug. 2020 CHINA FOOD SAFETY119分析与检测目前，我国食品安全问题日益严峻，对食品安全的监管力度日益增强，其中食品微生物检验能够有效保证食品安全。

以往主要采取测试纸片法以及技术琼脂培养法，然而在具体应用当中，容易引发细菌菌落混淆的现象，对其总数检测较为不利，极有可能出现较大偏差[1]。

1　资料与方法1.1　一般资料选取本疾控中心接收的食品样品，一共有220份。

1.2　方法1.2.1　平板菌落计数法在无菌状态之下取出食品样品25 g，装入到含有225 mL 生理盐水的锥形瓶当中，充分摇晃均匀，得到1∶10的样品菌液，采取无菌吸管抽取1∶10样品均液1 mL 缓慢注入到含有9 mL 的生理盐水试管当中，同时采取以上方法制取并抽取1∶1 000以及1∶10 000的样品均液，分别注入到两个无菌平皿当中，并且抽取 1 mL 空白稀释液做对照，之后将 15 mL46 ℃的琼脂培养基注入到平皿当中，充分摇晃均匀，等到凝固以后将其翻转，放到恒温培养箱中培养48 h。

1.2.2　菌落总数测定方法将测试片放在水平台面上，将测试片当中的包膜去除，采取1.2.1中的方法制作不同稀释程度的样品液放置在测试片中央位置，分别取1 mL 食品样品，将盖膜覆盖好，培养基凝固以后，将纸片压紧，让样品均匀分布在试纸上，每个稀释度样品各接种2片，放在36 ℃下培养48 h。

1.2.3　TCT 培养法吸取1 mL 浓度在0.5%的TCT 溶液滴至琼脂培养基当中（100 mL），制备TCT 琼脂培养基浓度，接种以及培养方法与上述方法相同。

1.3　判定标准对于3种计数方法测定的总菌落数，与国家标准GB 4789.1-2010中的相关规定进行对比，判定样品合格与否。

1.4　统计学方法将实验数据纳入SPSS20.0软件，P ＜0.05，则差异具有存在统计学意义。

2　结果与分析平板菌落计数法的不合格率为9.1%，菌落总数测定法的不合格率为8.2%，TCT 培养基法的不合格率为10%，3种检测方法结果之间的差异不具有统计学意义（P ＞0.05），见表1。

食品卫生微生物学检验菌落总数测定方法的效果分析

食品卫生微生物学检验菌落总数测定方法的效果分析目的比较分析在食品微生物学中检验菌落总数时用到的平板菌落计数法、菌落总数测试片法检验方法以及TTC培养基3种测定方法的检测效果，以达到提高食品菌落总数检验的检出率和灵敏度的目的。

方法对需要测定的153个样品，按照国家相关标准采用标准平板菌落计数法、菌落总数测试片法检验方法和TTC培养基法进行培养，培养一段时间后记录菌落检出数。

结果在测定的153个样品中，标准平板菌落计数法、菌落总数测试片法和TTC培养基法三种测定法中合格的份数分别为137、129、126，三中测定方法之间无显著性差异（P＞0.05）。

结论三种测定方法进行食品微生物学检验，得到的效果相当，但是TTC 培养基法的检出率和灵敏度要明显优于其他两种测定方法。

标签：菌落总数检验；标准平板菌落计数法；菌落总数测试片法检验方法；TTC培养基法对食品中的细菌总数进行微生物学检验，目前常采用的方法主要有两种，一种是测试纸片法，另一种是计数琼脂倾注皿培养计数法[1]。

然而在实际的检测工作中，送检样品中常出现含有一些体积较小的沉渣和颗粒等物质，它们不容易被乳化，在倾倒琼脂时常随着培养基一起注于培养皿中，并夹杂在琼脂深层，形态与细菌菌落类似，因此容易与细菌菌落发生混淆从而不利于准确检测样品中的菌落总数，对检测结果造成一定影响。

因此，在本研究中选取了标准平板菌落计数法、菌落总数测试片法检验方法和TTC培养基法（在计数培养基中加入0.5%的氯化三苯四氮唑，即TTC，作为染色剂，对菌落进行染色）3种方法对送检的153个样品进行细菌总数测定，比较3中方法的检出效果，现报道如下。

1资料与方法1.1测定材料1.1.1平板计数琼脂选用国内某厂家生产的处于有效期内的平板计数琼脂培养基。

1.1.2菌落总数测试片选用国内某厂家生产的处于有效期内的菌落总数测试片。

1.1.3 TTC琼脂按照体积比100:1的比例在琼脂中加0.5%的氯化三苯四氮唑（TTC），的琼脂中的TTC浓度为0.005%。

食品中菌落总数纸片法的方法验证及结果分析

食品中菌落总数纸片法的方法验证及结果分析
洪嘉敏;张琼丹;黄慧思
【期刊名称】《广东化工》
【年(卷),期】2024(51)7
【摘要】目的:探究三种厂家的测试片的纸片法在食品菌落总数测定中的一致性,分析比较不同厂家测试片的实际应用效果,为食品检测机构提供参考依据。

方法:采用GB 4789.2-2022《食品安全国家标准食品微生物学检验菌落总数测定》对三种厂家的菌落总数测试片,通过纸片法和倾注法对标准菌株菌悬液、人工污染样品进行菌落总数检测,运用统计学分析确定两种方法之间检测结果的显著性和相关性。

结果经统计学分析,两种方法在标准菌株菌悬液和人工污染样品检测结果之间无显著性差异(P>0.05),两种方法的检测结果相关性非常好(R2>0.996)。

结论:三种厂家的菌落总数测试片法与倾注法的检测结果一致,菌落总数测试片更加快速、简便,减少检测流程,提高检测效率。

不同厂家的测试片存在一定差异,实验室可根据样品特性选择合适的测试片。

【总页数】4页(P151-154)
【作者】洪嘉敏;张琼丹;黄慧思
【作者单位】东莞市食品药品检验所
【正文语种】中文
【中图分类】TQ
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