临床检验方法确认与性能验证
临床微生物培养、鉴定和药敏检测系统的性能验证2022

WS/T 807—2022 临床微生物培养、鉴定和药敏检测系统的性能验证1 范围本标准规定了临床微生物形态学检查、培养、鉴定、药敏、分子即时检测等系统性能验证的要求。
本标准适用于开展临床微生物检验的医学实验室。
2 规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本标准必不可少的条款。
其中,注日期的引用文件,仅该日期对应的版本适用于本标准;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本标准。
GB 19489 实验室生物安全通用要求WS/T 442 临床实验室生物安全指南WS/T 639 抗菌药物敏感性试验的技术要求WS/T 640 临床微生物学检验标本的采集和转运3 术语和定义下列术语和定义适用于本标准。
3.1参考方法 reference method一种无系统误差,随机误差可控,且准确清晰地描述了测定一个或多个性能参数的检测方法,可用于评估其他检测方法的性能。
3.2比对方法 comparator method用于评估新系统的方法,包括参考方法或已获得药监局批准的商品化方法。
3.3接种物浓度 inoculum接种于微生物检测系统的菌悬液中微生物的浓度,以每毫升菌落形成单位(colony-forming units per milliliter,CFU/mL)表示。
3.4标准菌株 reference strain由菌种保藏机构保藏,遗传学特性得到确认和保证并可追溯的菌株。
3.5性能验证 verification通过提供客观证据,确认微生物检测系统在用于患者标本及标本分离株检测之前能达到与制造商说明书一致的性能。
3.6能力验证 proficiency testing;PT利用实验室室间比对,按照预先制定的准则评价参加者的能力(ISO/IEC 17043, 3.7)。
注:能力验证活动包括获认可的能力验证提供者的能力验证计划,以及卫生系统权威机构提供的比对(实验室间质量评价)。
3.7准确度 accuracy测量值和真实值之间的一致性接近程度。
性能验证方案(仅供参考)

性能验证(仅供参考)1 生化生化室项目需要验证的参数包括批内精密度,批间精密度,正确度,线性范围、参考区间,可报告区间等。
适用时,还要考虑分析灵敏度(仅对那些在接近0的低值有临床意义的项目有必要进行确定,必要时,可引用说明书中给出的低值)和干扰试验。
1.1 精密度1.1.1 标本准备及要求质控品、已经检测过的病人标本或具有血清基质的定值材料。
每个项目均需选择至少正常和病理两个浓度水平的验证材料进行验证。
所用样本一定要稳定,其基体组成应尽可能相似于实际检测的病人标本,样本中的分析物含量应在该项目的医学决定水平附近。
1.1.2 方案1.1.2.1 方案1:对验证材料每天分析1批次,2个浓度,每个浓度重复测定4次,连续5天。
记录结果并计算均值、标准差和批内精密度(%)。
1.1.2.2 方案2:批内精密度:浓度分别处于正常和病理水平的混合新鲜临床标本,按照临床标本相同的检测方法,同批次内检测混合的新鲜临床标本20次。
记录结果并计算均值(X)、标准差(SD)和批内变异系数CV(%)。
批间精密度:浓度分别处于正常和病理水平的混合新鲜临床标本,按照临床标本相同的检测方法(或将室内质控品按照常规标本的方法一样测定,测定结果在遵照厂商参数不出控的前提下),同批次内检测混合的新鲜临床标本20次,同一批号室内质控品某一时间段(至少20天)的室内质控数据逐步累积最终得出均值、标准差。
1.1.3结果判断从美国临床实验室室间质量评估允许误差表中查阅评价项目的允许误差范围,由实验数据统计的批内不精密度和批间不精密度小于允许误差范围的1/4和1/3作为检测系统不精密度性能的的可接受标准(或用卫生部临检中心的允许总误差、卫生标准等),且又小于厂商提供的精密度性能指标,说明由实验室评价的检测系统的不精密度性能可接受,符合要求。
若大于判断限,检测系统的不精密度是否符合要示,应再进一步做统计学处理作出判断。
1.2 正确度1.2.1 卫生部临检中心室间质评含盖的项目,则以卫生部临床检验中心室间质评结果为准;成绩在80%者即为验证通过。
临床免疫学检验的定性项目性能验证方案

临床免疫学检验的定性项目性能验证方案检验程序性能验证是临床实验室质量管理的关键技术要求,是保证实验室检测结果准确的前提。
根据中国合格评定国家认可委员会(CNAS)发布的《CNAS-GL038:临床免疫学定性检验程序性能验证指南》,要求申请认可或已获认可的医学实验室对临床免疫学(定性)检验程序,在新检验程序常规应用前、检验程序分析性能受影响后(如仪器主部件故障、仪器搬迁、环境失控等)、检验程序的任一要素(仪器、试剂、校准品等)变更等,都要对检验程序的性能进行验证或重新验证,通过验证结果来分析评估该检验程序是否符合实验室的质量管理要求并满足临床的诊断需要。
性能验证指标的选择应满足该项目检测的预期用途,临床免疫学定性检验程序的分析性能参数一般包括:符合率、精密度(重复性)、检出限、临界值、抗干扰能力、血清与血浆结果一致性等。
下面将对临床免疫学定性检验程序的符合率、精密度(重复性)、检出限和临界值这4个性能指标的验证方案进行介绍解释。
1符合率验证符合率验证的目的是评估该检验程序所检测结果的正确度,有两种验证方案,一是诊断符合率,采用国家标准血清盘或临床明确诊断的阴阳性样品进行比对;二是方法符合率,即与其他分析方法进行比对,包括用候选方法评估已知能力验证或室间质评的样本以及不同方法学或/和相同方法学在不同实验室之间的比对。
1.1诊断符合率验证选取国家标准血清盘或临床明确诊断的阴性样本20份(包含至少10份其他标志物阳性的样本)、阳性样本20份(包含至少10份浓度在cut-off值和2-4倍cut-off值之间的弱阳性样本,1份极高值阳性样本),随机分组分批检测样本,以国家标准血清盘或临床明确诊断的样本结果为金标准,计算候选检验程序所检测结果的诊断符合率,如表1,表1诊断符合率验证金标准合计+-候选检验程序+a b a+b -c d c+d合计n1n2n 诊断符合率计算:诊断灵敏度=[a/n1]×100%诊断特异性=[d/n2]×100%诊断符合率=[(a+d)/n]×100%验证通过标准:要求计算得出的诊断灵敏度、诊断特异性和诊断符合率不低于厂商检验方法声明。
临床检验方法学性能评价

5 操作过程对样本的污染 6 样本本身的基质效应
如:护手霜、手套粉、血清分离器、采 血管盖,等
如:化学和物理性质不同于理想的新鲜 样本。
测量过程中的干扰因素
不准确度(inaccuracy)又称分析总误差 (total analytical error)主要受三个因素 影响:不精密度、偏倚和样本误差。
北京市部分临床检验项目不精密度建议
肌酸激酶
靶值±21%
6.6
碱性磷酸酶
靶值±27%
4.8
γ‐谷氨酰基转移酶
靶值±20%
6.4
白细胞
靶值±10%
3.9
红细胞
靶值±4%
2.4
血红蛋白
靶值±4.5%
2.1
红细胞压积
靶值±5%
2.1
血小板
靶值±14%
6.8
乙肝表面抗原
3份样本定性均符合
NA
乙肝表面抗体
3份样本定性均符合
准确度
方法学比对 样本数:20
临床准确性
区分不同健康状况的能力; 阳性结果:真阳性和假阳性 阴性结果:真阴性和假阴性 临界值改变:影响灵敏度和特异性
准确度及其评价
回收实验 干扰实验 方法学对比
临床对“准确性”的要求
实验室提供的检验结果或数据,应有助于临 床医生进行疾病诊断、疗效评估和预后判 断。
除了计量学准确性外,实验室还应对检验方 法的临床准确性进行评价。
回收实验
用于评估实验方法正确测定在常规样本中加 入的被测物量的(质量、浓度、活性)能 力;
通过测定比例系统误差,对实验方法的准确 度进行评价。
回收实验的基本要求
使用常规样本基质,如血清或血浆;如果加入的被测物为液 体,应控制体积在10%以内;
定性测定的性能验证

定义
诊断试验:通常用于临床怀疑某种特定疾病或 状况是否存在的诊断性定性试验。例如各种微 生物培养就是用于检查感染情况的诊断试验。 因临床上对治疗的及时的要求,诊断试验应具 有很好的敏感性和特异性。如果诊断试验后还 进行确认试验,那么诊断试验的特异性要求可 以稍微降低。
CLSI EP12-A2 User Protocol for Evaluation of Qualitative Test Performance; Approved Guideline
-20%~+20%浓度范围只是 用该方法检测,C50+20%的样本检 部 分 地 在 C5-C95 区 间 内 。 测结果一致。浓度-20%的样本用该 (+20%包含了C5-C95区间,方法却不一定能得到一致结果。 但 -20% 浓 度 的 样 本 在 C5C95区间内。)
阳性结果=<35/40(87.5%) 阴性结果>=36/40(90%)
CLSI EP12-A2 User Protocol for Evaluation of Qualitative Test Performance; Approved Guideline
重复性验证:样本浓度
CUT-OFF重复性验证:样本浓度 应接近临界值。不宜用阴性或强阳 性样本。
批内和批间变异验证:高、中和低 三个浓度(与试剂盒说明书中所述 相适应)
样本的采集和保存:采集时间、保存方式等必 须保证一致性。
CLSI EP12-A2 User Protocol for Evaluation of Qualitative Test Performance; Approved Guideline
重复性验证
CUT-OFF的重复性(同时包 含测定下限的验证)
临床检验方法确认与性能验证

概念: 分类:定值质控品
非定值质控品 检测系统配套的控制品 正确度控制品
质控品概念
具有与检测过程相适应的特性,其成份与检 测样本的基质相同或相似。应使用充分均 一 和稳定的质控物, 其瓶间变异 必须小于 监测系统预期的变异,其常规检测应有助于 确认报告范围。
定值质控品
d.总误差 总误差(total error,TE):能影响分析准确度的确定误差的组合【CLSI EP15-A2】,即偏倚和不精密度的和。 基于科学原理的理论或确定值 基于一些国家或组织的实验工作的指定值或认证值 基于科学或工程组织赞助下合作实验工作中的同意值或认证值。 以上三点不能获得时,则用可获得的期望,即规定测量总体的均值。
(二)检验方法分类
决定性方法( definitive method ): 经 详尽研究尚未发现 不准确度或不确定性原 因的方法;
参考方法( reference method ): 经详 尽研究证实其不准确度与不 精密度可以忽 略的方法;
常规方法( routine method ): 可满足 临床或其他目的需要的日常使用的方法。
(五)一些基本术语
准确度 正确度 精密度 溯源性
a.准确度与误差 准确度(accuracy)的完整表达应是检测准确度(accuracy of measurement):检测结果与被测量真值或约定真值
(可接受参照值)之间的一致程度(GB/T3358.1、GB/T6379). 可接受参照值:用来做比较的经协商同意的值,它可以是理论值(真值),赋值,公认值或由程序确定的值。准确度不
(三)方法的选择
足够特异、灵敏、精密度好 校准可溯源 有实验证据(杂志、自) 与其他检验项目相比有点何在
临床检验方法确认与性能验证概要

(三)方法的选择
? 足够特异、灵敏、精密度好 ? 校准可溯源 ? 有实验证据(杂志、自) ? 与其他检验项目相比有点何在
(四)常用物质
? 1.标准物质/参考物质( reference material )
? 2.校准品( calibrator ) ? 3.质控物/控制品( control material )
(二)检验方法分类
? 决定性方法( definitive method ): 经 详尽研究尚未发现 不准确度或不确定性原 因的方法;
? 参考方法( reference method ): 经详 尽研究证实其不准确度与不 精密度可以忽 略的方法;
? 常规方法( routine method ): 可满足 临床或其他目的需要的日常使用的方法。
? 但无论定值或不定值,用户在使用时,须使用自己的检测系统建立自 己的均值和标准差!! 只是定值控制品有一个预期的范围便于用户对 照!!但仅为对照,若两者相似不能说明用户结果准确,不相似也不 说明结果有问题。
? 国内限于条件国产控制品很少,由经销商推出的国外控制品真正属于 定值的也不多,定值控制品因为价格贵,用户不接受,但用户又要求 是定值的控制品,因此不少经销商要求生产厂商提供一个公司自己检 测的值,附在不定值控制品上,变成用户可接受的“定值”控制 品!!!!至于定值所用的检测系统,方法学原理、仪器、试剂盒来 源、操作程序都无可奉告!!!此时如果用户的靶值和“所为定值” 相差甚远,我们应该可以理解,并不是控制品质量有问题造成的!!!
2.校准品
3.质控品
? 概念: ? 分类:定值质控品
非定值质控品 检测系统配套的控制品 正确度控制品
质控品概念
? 具有与检测过程相适应的特性,其成份与检 测样本的基质相同或相似。应使用充分均 一 和稳定的质控物, 其瓶间变异 必须小于 监测系统预期的变异,其常规检测应有助于 确认报告范围。
临床检验方法确认与性能验证解读

临床检验方法确认与性能验证解读临床检验方法确认和性能验证是临床实验室中的重要环节,用于评估检验方法的准确性、精确性和可靠性。
在临床实验室中进行临床检验方法确认和性能验证有助于确保所提供的检验结果可靠且符合临床需要。
以下是对临床检验方法确认和性能验证的解读。
临床检验方法确认是指评估一些检验方法的准确性和可靠性,以确定其是否适用于临床诊断。
它包括对检验方法的所有重要参数进行评价,如准确性、精密度、限量检测限、可检出范围等。
确认检验方法的目的是评估其与已知准确度标准的一致性,以确保所提供的结果可靠。
临床检验方法的性能验证是评估该方法的可行性和适用性,以确定其是否能够在临床实验室中准确地进行临床诊断。
性能验证包括对检验方法的准确性、精密度、特异性、敏感性、追踪能力等关键指标进行评价。
性能验证的目的是确定检验方法在实际应用中的表现是否符合预期。
1.收集和整理相关资料:包括检验方法的传统指标、参考范围、仪器性能规格等信息,以便评估方法的准确性、精确性和可靠性。
2.开展样本测试:根据方法的特点和实验室的条件,选择合适的样本进行测试。
样本测试应包括标准样品、常见样本和特殊样本,以评估方法在不同样本类型中的可靠性。
3.数据分析和统计:对测试结果进行数据分析和统计,包括测量数据的平均值、标准差、相关系数等指标。
使用合适的统计方法评估方法的准确性和精确性。
4.评估结果的临床意义:根据方法的特点和临床需求,评估结果的临床意义。
结果应与传统指标、参考范围和临床实际需求相匹配。
5.结果解读和报告:结合以上评估结果,对检验方法的准确性、精确性和可靠性进行解读,并撰写验证报告。
报告应包括样本测试的方法、结果和结论,以及可能的限制和建议。
临床检验方法确认和性能验证的解读需要综合考虑临床需求、方法的特点和实验室的条件等因素。
在进行解读时,还应注意结果的稳定性、可重复性和与临床实际应用的一致性。
临床实验室应定期进行临床检验方法的确认和性能验证,以确保提供可靠和准确的检验结果,为临床诊断和治疗提供支持。
检测系统分析性能验证及确认

方法精密度分析方案-结果汇总
仪器名称:
浓度水平① 项目
精密度CV% 允许范围 判定结果 验证值 判定结果 精密度CV% 允许范 围
日立7600-210
浓度水平②
判定结果 验证值 判定结果
CA
CV批内 CV总
0.77% 1.41% 1.20% 1.38% 1.59% 2.56%
•
——(参考WS/T 406-2012《临床血液学检验常规项目分析质量要求》)
临床血液学
• • 日间精密度 试验方案
• 日间精密度以室内质控在控结果的变异系数为评价指标,使用Sysmex配套质
控品(低值、中值、高值)当前批号累积的变异系数,与允许的变异系数进 行比较,判断结果是否接受。 • ——(参考WS/T 406-2012《临床血液学检验常规项目分析质量要求》)
•检测限(detection limit):分析程序具有适当的确定检出的分析物的最小浓度或量。检 测限依赖于空白读数大小。
性能验证的实施过程
对检验程序的性能验证涉及到多方面工作,为了得到可靠结果,实验 室负责人或实验主持人应对此项工作有一个概括了解,先制定一个方案, 包括如下工作:
1、性能验证项目的选择、质量目标确定、性能验证方案制定及实施工 作计划; 2、实验前准备(人员培训、仪器维护及校准、样本留取及制备);
•
EP10 A2. Preliminary Evaluation of Quantitive Clinical of Laboratory Methods; Approved Guideline—Second Edition.
性能验证相关的基本概念
临床检测系统的方法学性能验证ppt

第二十七页,共四十三页。
阳性结(Jie)果的可靠性(预示值):即测定为阳性的标 本实际上为阳性的可能性。 =[真阳性/(真阳性+假阳性)]×100%
阴性结果的可靠性(预示值): 则为一份给出阴性结
果的样本实际上为阴性的可靠性。
= [真阴性/(真阴性+假阴性)]×100%
分析特异性(包括干扰物质)( EP7-P)
第五页,共四十三页。
定量试验方法的验证和(He)确认试验
一.未更改检测系统的验证 1、精密度(批内、批间) 2、准确度(标准物质、标准方法、方法
学比对) 3、可报告范围(验证最大稀释倍(Bei)数) 4、参考区间(检测20个正常样本验证)
第六页,共四十三页。
3.总精密度评价:用2个样品每天测定2批,批间测定间隔不得少于2h,每批平行测 定2份,至少共测定20天,80个数据。每对结果间的差(共40个)代表批内差;2批 均值之间的差(共20个)代表批间差;每天4个结果的均值(共20个)代表日间差。 每批测定至少做一个质控。
第十三页,共四十三页。
(二)正确度(Du)评价试验
准确度是测量结果中系统误差(正确度)与随机 误差(精密度)的综合。
第四页,共四十三页。
定量试验(Yan)方法的验(Yan)证和确认试验(Yan)
二.更改检测系统的确认试验
准确度(EP9)
精密度(EP5)
可报告范围(EP6-P2) 参考区间(C28-A2)
分析灵敏度( EP17-A) 线性(Xing)范围(EP6-A)
第三十三页,共四十三页。
选取40份(20份)样本,最好阴阳性各半 ↓
随机每8(4)份分成一组 ↓
临床检验方法确认与性能验证

临床检验方法确认与性能验证一、临床检验方法的确认1.方法原理验证:验证该方法的检验原理是否准确、可靠,并与已有方法进行对比研究。
2.方法的测量范围验证:确定该方法可测量的范围,包括上下限、灵敏度、线性范围等参数。
3.方法的精密度验证:通过重复测量同一样本,评估该方法的重复性和精密度。
4.方法的准确度验证:比较该方法测量结果与参考方法或金标准方法的差异,评估其准确度。
5.方法的干扰验证:研究和评估该方法可能存在的干扰因素,如其他物质的交叉反应、药物干扰等。
二、临床检验方法的性能验证1.方法的特异性验证:通过分析真实样本,验证该方法的特异性和能够分辨其他类似物质的能力。
2.方法的灵敏度验证:通过测量低浓度样本或对稀释样本进行测定,评估该方法的灵敏度。
3.相关性分析验证:将该方法测量结果与其他相关检测指标进行相关性分析,评估其与其他指标的相关性。
5.临床应用验证:通过与临床诊断结果的对比研究,评估该方法在临床应用中的准确性和可靠性。
三、临床检验方法确认与性能验证的重要性1.保证临床诊断的准确性和可靠性:临床检验方法的确认与性能验证能够确保该方法在临床上的准确性和可靠性,避免误诊和漏诊的发生。
2.提高诊断效率和质量:确认和验证该方法的性能能够提高临床诊断的效率和质量,有效地指导临床决策和治疗方案的制定。
3.改善实验室管理和运行:方法的确认和性能验证有助于改善实验室管理和运行,提高实验室质量控制的水平,保证实验室的正常运转和质量控制的有效实施。
4.符合国际质量标准和认证要求:临床检验方法的确认和性能验证是国际质量控制体系和认证要求的基础,能够提高实验室的国际竞争力和认可度。
综上所述,临床检验方法的确认与性能验证是确保该方法在临床实践中可靠、准确、可重复的过程。
它通过验证该方法的适用性和有效性,保证临床诊断的准确性和可靠性,提高诊断效率和质量,改善实验室管理和运行,符合国际质量标准和认证要求。
临床实验室检测系统方法确认与性能验证标准操作

验证实验设计
样本选择
01
选择具有代表性的样本,包括正常值和异常值,以全面评估检
测系统的性能。
实验条件
02
严格控制实验条件,如温度、湿度、仪器状态等,确保实验结
果的稳定性和可靠性。
重复实验
03
对同一样本进行多次重复实验,以评估检测系统的精密度和稳
定性。
验证结果分析与评价
数据处理
对实验数据进行整理、统计和分析,计算各项指标如准确度、精 密度、线性相关系数等。
提高实验室质量管理水平
方法确认和性能验证是实验室质量管理的重要环节,通过规范操作和标准流程,提高实验室 整体质量管理水平。
适应医学发展和临床需求
随着医学技术的不断发展和临床需求的不断提高,实验室检测系统需要不断更新和完善,方 法确认和性能验证是确保系统更新和完善的重要手段。
适用范围和对象
适用范围
本标准操作适用于临床实验室中所有检测系统的方法确认和性能验证,包括生化分析、免疫分析、血液分析、尿液 分析等各类检测系统。
案例一:生化分析仪方法确认与性能验证
方法确认
包括仪器安装、调试、操作培训, 以及方法学比对实验设计、实施 和结果分析等步骤,确保生化分 析仪的准确性和可靠性。
性能验证
通过重复性实验、线性范围实验、 干扰实验等,对生化分析仪的性 能指标进行全面评估,确保其满 足临床需求。
注意事项
在方法确认和性能验证过程中, 应注意样本的保存和处理,避免 样本变质或污染对实验结果的影 响。
新仪器设备等,并跟踪验证措施的有效性。
改进措施制定与实施
对发现的问题进行深入分析,找出根本原因, 为制定有效的改进措施提供依据。
经验总结与分享
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(三)方法的选择
足够特异、灵敏、精密度好 校准可溯源 有实验证据(杂志、自) 与其他检验项目相比有点何在
(四)常用物质
1.标准物质/参考物质( reference material ) 2.校准品( calibrator ) 3.质控物/控制品( control material )
3.基于生物学变异的规范。
用法
CVA<1/2CVI BA<1/4(CVI2+CVG2)1/2 CV仪器之间<1/3CVI TE<1.65CVA+BA(α<0.05) TE<2.33CVA+BA(α<0.01) 不精密度CV: 用于室内质控精密度分析 用于方法学性能验证:1.与客观比较 2.与厂家比较 偏差Bias:用于方法学比较,即考核真实度。 允许总误差Tea:用于EQA
方法验证
除应验证仪器的安装和检验程序的操作外 对于定量方法
应验证:测量精密度:包括重复性和再现性、患者结果与以前方法 或参考程序之间的一致性、在整个分析测量范围内被测量的回收、 高浓度的携带污染、干扰或非特异性(溶血、脂血、黄疸、容器 添加剂、药物)、参考区间。
对于定性方法
应验证阳性和阴性及临界值上和下标本的再现性和重复性、患者结 果的一致性、携带污染、干扰或非特异性。
5.已发表专业推荐
6.基于法规和EQA的质量规范
(七)具体操作
内容 常用的方案 具体方案
方法确认
内容: 总是包括可报告范围、精密度、准确度和参 考区间。某些研究还应包括检出限(或灵敏 度)、特异度、干扰和回收以及校准品确认。 CLIA规则规定对不同复杂程度分类的方法 需要确认不同的特征。对不太复杂的方法, 要求很少的研究。对于自建检测系统或实验 室修改的方法需要更多的实验。
1.标准物质
概念:又称参考物质( reference material ),是一类充分均匀,并具有一 个(或多个)确定的特性值的材料或物质,标准物质的定值结果一般表示为: 标准值 ± 总不确定度。 “ 标准物质证书“是介绍标准物质的技术文件,是 研制单位向用户提出的质量保证书和使用说明。附有证书的标准物质称为有证 标准物质( certified reference material, CRM ),其特性值由建立了溯 源性的程序确定,可溯源至准确复现该特性值的计量单位,且每个标准值都附 有给定置信水平的不确定度。 作用:校准仪器设备、评价测量方法,或给其它物质赋值 分类:一级标准物质( primary reference material ):稳定、均一,采 用高度准确、可靠的若干方法定值,可用于校准决定性方法及为二级标准物质 定值。在我国,一级标准物质是测量准确度达到国内最高水平的有证标准物质, 由国家技术监督局批准、颁布并授权生产。如: 人血清无机成分分析标准物 质( GBW09135 )和血清胆固醇标准物质( GBW 09138 )。二级标准物 质( secondary reference material ):用一级标准物质校准,参考方法 定值。如: 红细胞微粒标准物质 — GBW ( E ) 090001 、胆红素标准物 质 — GBW ( E ) 090002 、氰化高铁血红蛋白溶液标准物质 — GBW ( E ) 090004 和纯化血红蛋白标准物质 — GBW ( E ) 090011 。
溯源性
通过一条连续的比较连,使FPS检测结果 与国际或国家的参考系统(在参考实验室, 使用参考方法,参考品得到的结果)联系起 来的特性
(六)质量规范
质量规范简史 1963年加拿大临床化学家David Tonks建 议用参考区间的宽度1/4表示允许误差。 1968年临床化学家Roy Barnett博士提出 标准差表示允许误差。 1976年CAP举办的分析目标讨论会议, Westgard提出了以“允许总误差”作为规 定质量的最佳形式,一直沿用至今。
验证(verification)
实验室按厂商说明的方法能否得到预期结果 验证的手段可以是下述活动,如:变换方法 进行计算;将新设计规范与已证实的类似设 计规范进行比较;进行试验和演示;发布文 件前的评审。
ISO15189的概念
确认(validation) 通过提供客观证据对特定 的预期用途或应用要求已得到满足的认定。 注:①“已确认”一词用于表示相应的状态。②确 认所使用的条件可以是实际的或是模拟的。 验证(verification) 通过提供客观证据对规定 要求已得到满足的认定 注:① “已验证”一词用于表示相应的状态。②认定 可包括下述活动,如:变换方法进行计算;将新设 计规范与已证实的类似设计规范进行比较;进行试 验和演示;发布文件前的评审。
1999年斯德哥尔摩协商大会汇集了临床检验领域的许多专家协商一致 的“建立全球分析质量规范”,其结果提出了“质量规范(quality specifications)”的层次结构:
1.评价在特定情况下分析性能对临床结果的影响 2.评价在一般情况下分析性能对临床决策的影响 3.基于生物学变异的规范 4.基于临床医生观点的分析 5.已发表专业推荐 来自国家和国际的专家组 来自地方组织或某个国家 6.基于法规和EQA的质量规范 法规机构 能力验证(PT)和(或)室间质评计划(EQAS)组织者 7.基于当前分析技术的目标 有时间质量质量评价或能力验证计划数据证实 由当前发表方法学性能文章
常用的方案
1.相关机构:NCCLA/CLSI、CLIA 2.具体方案 定量实验室方法的初步评价: CLSI EP10 定性测试性能评估:CLSI EP12 基质效应的评价:CLSI EP14 精密度和正确度性能的用户验证:CLSI EP15-A 使用ROC曲线实验室试验临床准确度评价:CLSI GP10 总误差估计 :CLSI EP21-A:临床实验方法总分析误差的估计 精密度评价: EP5-A,临床化学设备精密性能的评价 准确度评价:方法比较试验EP9-A,使用病人样本进行方法比较和偏倚估计 回收实验 干扰试验EP7-P,临床化学干扰试验 总误差估计 :CLSI EP21-A:临床实验方法总分析误差的估计 患者结果可报告范围(即线性范围)的验证:EP6-A:定量分析方法线性的评价 临床可报告范围的确立 参考范围 :NCCLS/CLSI C28-A :临床实验室如何定义和确定参照区间 交叉污染:NCCLS/CLSI EP10-A 分析灵敏度:CLSI EP17-A:检出限和定量下限确定方案 分析特异性:NCCLA/CLSI EP7-A: 临床化学干扰试验
二.目的
结果互认 医院实验室管理办法 CLIA’88 CNAS-CL02
三.具体操作
(一)统计学基础知识 (二)检验方法分类 (三)方法的选择 (四)常用物质 (五)一些基本术语 (六)质量规范 (七)具体操作
(一)统计学基础知识
概述 临床检验结果质量检验数据的分类 统计方法的分类 随机变量及其分布 正态分布 抽样分布 大数定律和中心极限定律 平均数与标准差 均数的抽样误差与t分布 两均数差别的统计学意义检验 方差分析 直线回归与相关 观察值一致性
2.校准品
3.质控品
概念: 分类:定值质控品 非定值质控品 检测系统配套的控制品 正确度控制品
质控品概念
具有与检测过程相适应的特性,其成份与检 测样本的基质相同或相似。应使用充分均 一 和稳定的质控物, 其瓶间变异 必须小于 监测系统预期的变异,其常规检测应有助于 确认报告范围。
(五)一些基本术语
准确度 正确度 精密度 溯源性
a.准确度与误差 准确度(accuracy)的完整表达应是检测准确度(accuracy of measurement):检测结果与被测量真值或约定真值 (可接受参照值)之间的一致程度(GB/T3358.1、GB/T6379). 可接受参照值:用来做比较的经协商同意的值,它可以是理论值(真值),赋值,公认值或由程序确定的值。准确度不 能直接得出,只能用偏离(deviation)也就是误差从反面衡量 误差:测量值与真值之间的偏离,包括RE和SE。误差是用来度量不准确度的。 这样对于检测结果只做一次时,结果的偏离 即不准确度=分析过程的不正确度+分析过程的不精密度 也即不准确度=总误差=分析过程的随机误差+分析过程的系统误差 b.正确度与偏倚 正确度(trunees)即真实度,完整表达检测真实度:大量检测结果得到的均值与可接受参考值之间的一致程度 (GB/T6379),用偏倚(bias)来表示,即测试结果的期望与真值(可接受参考值)之差。(GB/T6379) 系统误差:在可重复的条件下,大量检测结果的均值与真值之差 偏倚表示的是一种系统误差。 c.精密度和标准差 精密度(precision),完整表达检测精密度:在规定条件下独立测试结果之间一致程度(GB/T6379)。用标准差或变 异系数来表示。分为两种,“重复性(repeatability)”相同条件下执行连续测量结果之间的一致性程度,又称为序列 内精密度和批内精密度。“再现性(reproducibility)”在改变测量条件下执行测量结果之间的一致性程度。 随机误差(random error):在可重复的条件下,对相同的被测量无数次检测结果的均值,与检测结果的差异。用标 准差和变异系数度量。 d.总误差 总误差(total error,TE):能影响分析准确度的确定误差的组合【CLSI EP15-A2】,即偏倚和不精密度的和。 基于科学原理的理论或确定值 基于一些国家或组织的实验工作的指定值或认证值 基于科学或工程组织赞助下合作实验工作中的同意值或认证值。 以上三点不能获得时,则用可获得的期望,即规定测量总体的均值。
(二)检验方法分类
决定性方法( definitive method ): 经 详尽研究尚未发现 不准确度或不确定性原 因的方法; 参考方法( reference method ): 经详 尽研究证实其不准确度与不 精密度可以忽 略的方法; 常规方法( routine method ): 可满足 临床或其他目的需要的日常使用的方法。