木麻黄鞣质提取工艺的初步研究

木麻黄鞣质提取工艺的初步研究

（作者:___________单位: ___________邮编: ___________）

作者：王彬，黄守良，李小平，张艳秋

【摘要】目的：研究木麻黄鞣质的提取工艺，为其开发应用提供理论依据。方法：分别采用不同溶剂对木麻黄鞣质进行提取及纯化。结果：以60%丙酮为溶剂进行提取，以乙酸乙酯为溶剂进行纯化，鞣质纯度可达到75%左右，且重复性较好。结论:本提取工艺鞣质提取率及纯度均达到一定水平。

【关键词】木麻黄;鞣质;提取工艺;药物分析

Preliminarily study on the extraction and purification process of the tannin of CasuarinaWANG Bin， HUANG Shou liang，LI Xiao ping， ZHANG Yan qiu(Pharmaceutical Institute of Hainan Province, Haikou 570216, China)[ABSTRACT] Objective:To study the extraction and purification process of tannins from casuarina in order to provided theory basis for further application. Methods: Different solvents were apllied to extracte and purify tannins from casuarina. Results: The purity of tannins can be as high as reach 75% when it’s extracted with

60% acetone and purified with ethyl acetate, and the process has good reproducibility. Conclusion: The extraction rate and purity of tannins are both high using the above mentioned technique.

[KEY WORDS] Casuarina;Tannin;Extraction;Pharmaceutical analysis

木麻黄(Casuarina equisetifolia L.)为木麻黄科木麻黄属常绿乔木，别名为马尾树《中国种子植物分类学》、短枝木麻黄、驳骨松(广州)，原产澳大利亚、太平洋诸岛，在我国引种约有80多年历史，因木麻黄根系具根瘤菌，故能在瘦瘠沙土上能速生，主要分布于海南、广东、广西、福建等沿海地区，在本省种栽培种植较多。木麻黄的枝叶具有温寒行气，止咳化痰的功效[1]。常用于疝气、寒湿泄泻，慢性咳嗽等病症的治疗[2]，成分制剂有复方木麻黄片等，临床疗效较佳。据报道其枝及叶中鞣质含量较高，有报道鞣质类化合物呈现广谱抗菌特性，并具有抗耐药菌作用的。本实验主要采用络合滴定法对木麻黄中鞣质含量进行测定，并对海南木麻黄鞣质的提取方法进行研究，制定最佳提取工艺，为其下一步开发应用提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 仪器、试剂与材料

AEG120G岛津万分之一电子天平, 产地:日本;SHH.W21.420型三用电热恒温箱,产地:天津。麻黄药材分别采自海口西海岸、琼海市、儋州市，由本所鉴定，阴干备用;所用试剂均为分析纯试剂，水为自

制纯化水。

1.2 方法

1.2.1 含量测定方法的选择鞣质含量测定方法有多种，其中最常用的有皮粉法、高锰酸钾法、干酪素法、络合滴定法、比色法和分光光度法[3]。参考文献[46]，络合滴定法具有准确度和精确度高的特点，且方法简便。因此，拟采用该种方法对木麻黄中鞣质进行定量分析。络合滴定法是利用鞣质分子中多个邻位酚羟基可作为多基配体与一个中心离子络合，形成环状螯合物，在不同pH值下发生沉淀反应，通过用EDTA反滴定过量金属离子来确定总鞣质的含量。

1.2.2 标准溶液的制备及滴定液的标定 1 M的醋酸锌溶液：取21.95 g的醋酸锌加水使溶解并定容于100 mL容量瓶中氨氯化铵缓冲液(pH=10):取5.4 g NH4Cl和10.5 mL 氨水加水溶解至100 mL 容量瓶中定容。

乙二胺四醋酸二钠滴定液(0.05 mol/L)的标定：称取19 g EDTA2Na于1 000 mL锥形瓶中，加蒸馏水1 000 mL溶解，摇匀，备用。精密称取干燥至恒重的基准氧化锌0.12 g，加入3 mL稀盐酸使溶解，再加水25 mL，滴入1滴0.025%甲基红乙醇溶液，再滴加氨试液至溶液显微黄色。加水25 mL，氨-氯化铵缓冲液(pH=10)10 mL，铬黑T指示剂少许。用EDTA-2Na滴定至溶液由紫色变为纯蓝色，并将滴定结果用空白校正。每毫升0.05 mol/L EDTA2Na标准液相当于4.069 mg氧化锌。

1.2.3 不同产地木麻黄鞣质的含量测定 (1)药材:分别采自海

口、琼海、儋州的三批木麻黄药材，晾干，并粉碎成细粉。

(2)药材提取方法：取木麻黄药材粉末 5 g，精密称定，置于锥形瓶中，加入60%丙酮50 mL，加热回流1 h，挥去丙酮，浓缩并加水至约50 mL，作为药材提取液备用。

(3)含量测定方法:①样品液的制备：精密吸取1 M的醋酸锌溶液10 mL于250 mL容量瓶中，加7 mL氨水，摇匀至白色沉淀完全溶解。在提取液加入去离子水至200 mL，在(35±2) ℃的水浴温热5 min，完全移入容量瓶中与醋酸锌溶液反应，并置于(35±2) ℃的水浴中反应30 min，边反应边振荡，使反应充分进行。然后取出容量瓶冷却至室温，滴加去离子水至250 mL，滤过，取续滤液。②含量测定：精密吸取样品液20 mL，加去离子水至150 mL，在滴入12.5 mL氨

氯化铵缓冲液(pH=10)，振荡，使白色浑浊液变澄清，加入铬黑T指示剂少许，用0.05的乙二胺四乙酸二钠(ETDA)标准液滴定，溶液由紫红色变蓝色，即为滴定终点，并以下式进行结果计算：鞣质含量=(0.155 6 V/W)×100%，其中V=10MZn-12.5ME×Q

式中：0.155 6为由试验求得的比例常数

MZn：醋酸锌标准液的摩尔分子浓度

Q：乙二胺四乙酸二钠标准溶液滴定消耗量(mL)

ME：乙二胺四乙酸二钠标准溶液的摩尔分子浓度

V： IM醋酸锌标准溶液络合消耗量(mL)

W：样品重量(g)

1.2.4 不同提取方法木麻黄鞣质的含量测定根据参考文献[6，