微生物接种技术

（3）平板涂布法 ）
• 倒培养基，制成平板。 倒培养基，制成平板。 • 凝固后，另取一支吸管吸取相应的菌液0.2mL放 凝固后，另取一支吸管吸取相应的菌液0.2mL放 0.2mL 至平板上。 至平板上。 •用无菌三角玻棒将稀释液在平板表面涂 用无菌三角玻棒将稀释液在平板表面涂 抹均匀。倒置于37℃条件下培养1 2d， 抹均匀。倒置于37℃条件下培养1～2d， 37℃条件下培养 观察菌落形态及计数菌落。 观察菌落形态及计数菌落。
（1）斜面接平板 a.划线法 见平板划线分离法。 划线法： a.划线法：见平板划线分离法。 b.点种法 点种法： b.点种法：一般用于观察霉菌和酵母细 轻轻点在平板的表面即可。 胞，轻轻点在平板的表面即可。 （2）平板接斜面：一般是将经 平板接斜面： 平板分散培养得到的单菌落接 种到斜面， 种到斜面，以便作鉴定或扩大 培养、保存之用。 培养、保存之用。
微生物接种技术
一、实验目的
掌握倒平板、 面接种、 掌握倒平板、斜面接种、液体接 种、穿刺接种、平板接种等各种 穿刺接种、平板接种等各种 微生物接种的基本操作技术。 微生物接种的基本操作技术。
三、实验步骤
倒平板的方法
将培养基加热融化， 将培养基加热融化，待冷却至 55－60 0C时，倒平板。 － 时 倒平板。
将有菌的材料或纯粹的菌种转移到另一 无菌的培养基上，这个过程就称为接种 接种。 无菌的培养基上，这个过程就称为接种。 常用的几种方法如下： 常用的几种方法如下：
斜面接种 液体接种 穿刺接种 平板接种
Байду номын сангаас
1.斜面接种： 1.斜面接种： 斜面接种
从已长好微生物移接到另一斜面管的 方法。此法用于好气性微生物的接种。 方法。此法用于好气性微生物的接种。 左手持菌种管和斜面管， 左手持菌种管和斜面管，使斜面向上 并尽量放平。 ，并尽量放平。用右手先将塞拧转松动 再拿接种环，用右手的小指、 ，再拿接种环，用右手的小指、无名指 和手掌拨下塞并夹紧， 和手掌拨下塞并夹紧，同时将管口在火 焰上燃烧一圈， 焰上燃烧一圈，接种环灼烧灭菌后插入 管内，冷却、挑菌， 管内，冷却、挑菌，立即转入斜面管底 沿斜面划曲线或直线。 部，沿斜面划曲线或直线。
3.穿刺接种： 3.穿刺接种： 穿刺接种 用接种针挑取菌种后， 用接种针挑取菌种后，插入深层固体培养基 ，（不要刺到底部），再沿原路拔出 不要刺到底部），再沿原路拔出， 内，（不要刺到底部），再沿原路拔出，此法 用于厌气性细菌接种、检查细菌的运动能力。 用于厌气性细菌接种、检查细菌的运动能力。
4.平板接种： 4.平板接种： 平板接种 • 将菌种接至培养皿的方法，平板接种的目 将菌种接至培养皿的方法， 的是观察菌落形态、分离纯化菌种， 的是观察菌落形态、分离纯化菌种，活菌 计数以及在平板上进行各种试验时采用的 一种接种方法，可分为下面几种： 一种接种方法，可分为下面几种：
试管斜面接种
1.两支试管呈“ 字形 1.两支试管呈“V”字形 两支试管呈 3.火焰上微烧一周 3.火焰上微烧一周 5.接种、 5.接种、划线 接种
2.拔下试管塞 2.拔下试管塞 4.接种环灼烧、 4.接种环灼烧、冷却 接种环灼烧 6.塞上塞子， 6.塞上塞子，灼烧接种环 塞上塞子
2.液体接种： 2.液体接种： 液体接种
凝 固 后
37℃ ℃ 培养
涂布法流程图
思考题 （1）用接种环接种时有哪些注意事项 ） （2）涂布棒消毒方法有哪些？各应注意什么？ ）涂布棒消毒方法有哪些？各应注意什么？
将菌接种到液体培养基（试管、三角瓶等） 将菌接种到液体培养基（试管、三角瓶等）中 的方法。 的方法。 操作与上法基本一致， 操作与上法基本一致，只是在将接种 环送入液体培养基中时使环在液体与 管壁接触的地方轻轻磨擦， 管壁接触的地方轻轻磨擦，使菌体分 然后塞上棉塞， 散，然后塞上棉塞，再轻轻摇动均匀 即可培养。 ，即可培养。 如果菌种是培养在液体 培养基中时， 培养基中时，一般用移液管或接种环 接种。 接种。