高中生物实验—DNA的粗提取和鉴定
实验九DNA的粗提取与鉴定
【实验九】DNA的粗提取与鉴定陈小珺（江西省赣州市第三中学341000）1 教学建议在本实验的教学中，教师应注意以下几点。
1.1 实验材料必须准备充足。
本实验所用的实验材料是鸡血细胞液,由活鸡的鲜血经沉淀后获得。
每组(2个学生)需用5 mL 鸡血细胞液,则每班(50人)至少需要130 mL,而鸡血细胞液与鸡血的体积比为1:3,这样每班至少需要390 mL 鸡血细胞液。
宰杀1只中等大小的活鸡,一般可得120 mL 左右的鲜血,因此,1个班实验需要买4只活鸡。
也可以到市场售活鸡处去索取鸡血,但所带烧杯中必须提前放入抗凝剂。
（每100ml鸡血加入3g柠檬酸钠）1.2 盛放鸡血细胞液的容器,最好是塑料容器。
因为鸡血细胞破碎后释放出的DNA,容易被玻璃容器吸附,由于细胞内DNA的含量本来就比较少,再被玻璃容器吸附去一部分,提取到的DNA就会更少。
1.3 获取较纯净的DNA的关键步骤。
1.3.1 充分搅拌鸡血细胞液：将鸡血细胞液与蒸馏水混合以后,必须用玻璃棒沿一个方向快速搅拌,使鸡血细胞加速破裂,并释放出DNA。
1.3.2沉淀DNA时必须用冷酒精：体积分数为95%的酒精在冰箱中至少存放24 h。
1.3.3正确搅拌含有悬浮物的溶液实验步骤3、5、7,都需要用玻璃棒搅拌。
教师应提醒学生注意,在进行步骤3、5时,玻璃棒不要直插烧杯底部,而且搅拌要轻缓,以便获得较完整的DNA 分子。
进行步骤7时,要将玻璃棒插入烧杯中溶液的中间,用手缓慢转动5 min。
2 实验原理的补充介绍2.1 DNA的释放本实验用鸡血细胞做实验材料有两个原因。
一是因为鸡血细胞核的DNA 含量丰富，材料易得；二是鸡血细胞极易吸水胀破。
DNA位于鸡血细胞的细胞核中,正常情况下不会释放出来。
为了使DNA从细胞核中释放出来,实验中采用了向鸡血细胞液中加入蒸馏水并且搅拌的方法。
蒸馏水对于鸡血细胞来说,是一种低渗液体,水分可以大量进入血细胞内,使血细胞破裂。
高中生物实验—DNA的粗提取和鉴定
鉴定
自变量
比较
加入物质
结果
图示
实验组 对照组
均加入：
丝状
①4 mL二苯胺 物
试剂
(DNA)
②2mol/LNaCl
溶液5 mL
——
溶液逐渐 变蓝
不变蓝
鉴定时蓝色的深浅与溶液中DNA的含量多少有关。 你能采用其他方法对DNA进行鉴定吗？ 取少许丝状物，置玻片中央，
加1滴甲基绿溶液，丝状物变成绿色。
鉴定所用的试剂是二苯胺或甲基绿。
这是因为 哺乳动物成熟的红细胞中无细胞核，反靠，白细胞
和淋巴细胞中的少量DNA，在实验中很难提取到
但若改用动物肝脏做实验材料，实验可以顺利进行，这是因 为肝细胞中含有细胞核，并且肝组织容易。被破坏，有利于DNA的提取
（4）若选用动物肝脏做实验材料，在提取之前，最好增加 若使肝组织易分离，将肝细胞剪碎、研磨是一种简便易行的方法。程
用二苯胺须加热。用甲基绿不用水浴加热。 洋葱的鳞片叶表皮细8 胞
9
注意事项 ①制备鸡血细胞液时，要在取鸡血的同时加入柠檬酸钠，静置后上 层是血清，下层为所需要的血细胞。 ②整个实验中加入“两次蒸馏水，三次NaCl溶液，一次酒精” 两次加蒸馏水的目的不同，一是涨破细胞，二是稀释溶液。 酒精最好用95%的冷酒精; ③加蒸馏水或加入酒精用玻棒搅拌时,动作要轻缓且朝一个方向。 保证DNA分子的完整性。使用时注意玻璃棒不要碰到烧杯底。 ④鉴定DNA时需沸水浴加热。 ⑤二苯胺试剂要现配现用,否则会影响鉴定的效果.二苯胺是一种有 毒性的试剂,使用时注意不要让药液接触到皮肤或身体的其他部位. ⑥盛放鸡血细胞的容器最好是塑料容器（鸡血细胞破碎后释放的 DNA，容易被玻璃容器吸附，造成提取过程中DNA的损失）
高中生物学新课程选择性必修3实验教学设计5：DNA的粗提取与鉴定
环节二问题驱动，明确原理
教师引导学生通过阅读教材，分析本实验涉及的DNA物理性质和化学性质，以表格形式进行归纳总结。
1.DNA存在于真核细胞的什么部位？（主要细胞核）
2.如何使DNA从细胞内到达细胞外？（破坏生物膜）
3.如何将DNA与不溶性杂质分离？（过滤）
4.如何将DNA与可溶性蛋白等杂质分离？（利用溶解性）
实施实验活动，提升探究能力。
环节五分享与交流（调查结束以后）
组织、评价
由课题组织在班内分享研究过程及成果，并针对班级学生及学科老师的提问进行解释与说明。
培养学生的合作交流意识与能力。
作业布置
以上活动全部结束以后，由课题组长负责撰写研究报告。
教学反思
以课题组为单位开展实验活动，交流研究成果的学习形式，既解决了学校实验条件有限的客观困难，也充分发挥了部分学科积极分子的学习积极性，提升了他们的专业特长。小组中各成员具有明确的分工，有利于小组成员在实验过程中地贡献一份力量，增强参与实验的积极性。
3.通过自主改进并优化实验材料、试剂、操作方法，借助实验评价量化表记录并评价实验过程和分析实验结果，培养实验方案设计及对结果展开讨论的科学探究能力。
教学重点
DNA的提取原理和方法
教学难点
DNA的鉴定方法
教学方法
讨论法，实验法，讲授法
实验原理
1.DNA提取原理：利用葱白、洋葱和猕猴桃等材料提取DNA，依据了到哪不溶于酒精，而其他有机物易溶于酒精，且不同浓度氯化钠溶液中DNA的溶解度不同等原理。
5.鉴定DNA的原理。
意在培养学生自主归纳总结的能力，问题设计符合学生的已有认知水平且层层递进，并有助于引导学生层层剖析，逐步理解提取类和鉴定类实验的一般流程。
高中生物实验：DNA的粗提取与鉴定
高中生物实验:DNA的粗提取与鉴定
DNA的粗提取与鉴定实验原理
粗提取原理：在NaCl溶液浓度低于0.14mol/L时，DNA的溶解度随NaCl溶液浓度的增加而降低;在0.14mol/L时，DNA的溶解度最小;当NaCl溶液浓度继续增加时，DNA溶解度又增大。
扩展资料
纯化原理：DNA不溶于酒精，但细胞中的.某些蛋白质溶于酒精。
鉴定DNA原理：在沸水浴条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色。
实验材料的选择及处理
(1)不选择猪血等哺乳动物的血液，因为哺乳动物成熟的红细胞无细胞核。
(2)需要在鸡血中加入抗凝剂——柠檬酸钠溶液，防止血液凝固。
(3)需除去鸡血中的血浆，因为血浆中无DNA。
特别提醒：不同生物的组织中DNA含量不同在选取材料时，应本着DNA含量高、材料易得、便于提取的原则。
高中生物必背实验：DNA的粗提取与鉴定
2．析出含DNA黏稠物：
加入蒸馏水，用玻璃棒搅拌,过滤
3．将DNA的黏稠物再溶解：
（三）去除滤液中的杂质 方案一:
1．溶解细胞核内的DNA：
加入2mol/L的氯化钠溶液，搅拌，使DNA呈溶解状态,过滤
2．析出含DNA黏稠物：
加入蒸馏水，用玻璃棒搅拌,过滤
3．将DNA的黏稠物再溶解：
加入2mol/L的氯化钠溶液，搅拌，使DNA呈溶解状态
乙酰胆碱受体包括两种:M受体使心脏活动抑制 ；N2受体位于骨骼肌终板膜，导 致骨骼肌兴奋。
同一信号被不同受体识别可产生不同效应。
6、成熟红细胞对钾离子、葡萄糖吸收；小肠 细胞对钾离子、葡萄糖吸收；植物根成熟区 细胞不能吸收大分子有机物。
7、光反应与暗反应的关系？ 有氧呼吸的三步骤反应式？
DNA的粗提取与鉴定
凡是含有DNA的生物材料都可以考虑，但选用DNA 含量相对较高的生物组织，成功的可能性更大
制备鸡血细胞液：(老师完成)
一、基础知识 （一）提取DNA的方法 4、DNA的鉴定
DNA与二苯胺（沸水浴）会染成蓝色，因此，二苯 胺可以作为鉴定DNA的试剂
二、DNA的粗提取与鉴定的实验设计 （一）实验材料的选取
二、DNA的粗提取与鉴定的实验设计
（二）破碎细胞，获取含DNA的滤液 2、植物细胞
植物细胞需要加入一定的洗涤剂和食盐 如：提取洋葱DNA时，在切碎的洋葱中加入一定的洗涤剂和 食盐，进行充分的搅拌和研磨，过滤后收集研磨液 思考：加入洗涤剂和食盐的作用分别是什么？ 洗涤剂能溶解细胞膜，有利于DNA的释放； 食盐的主要成分是NaCl，有利于DNA的溶解
一、基础知识 （一）提取DNA的方法
一、基础知识 （一）提取DNA的方法 1、DNA的溶解性
高二生物dna的粗提取与鉴定
9、DNA的鉴定
用二苯胺（沸水浴）鉴定，DNA遇二苯 胺会变蓝色。
问：2和4过程中都有加入蒸馏水，两次加入的 作用一样吗？为什么？
问：DNA的直径约为2nm，实验中出现的丝状 物的粗细是否就表示一个DNA分子直径的大小？
练习：
1、用蛋白质中含有35S的噬菌体去侵染细菌（细菌 内为32S），则在子代噬菌体的蛋白质的S应为 （）
DNA遇二苯胺（沸水浴）会染成蓝色，因此，二苯 胺可以作为鉴定DNA的试剂。
材料：
鸡血细胞液（5-10ml），体积分数为95%的酒精 溶液（冷却），蒸馏水，质量浓度为0.1g/ml的柠檬酸 钠溶液，物质的量浓度分别为2mol/l和0.015mol/l的氯 化钠溶液，二苯胺试剂
方法步骤：
1、制备鸡血细胞液
4、析出含DNA的黏稠物
沿烧杯内壁缓缓加入蒸馏水，同时轻轻搅拌，这时 会有丝状物出现，随着蒸馏水的加入逐渐增多，一 直到氯化钠浓度约为0.14mol/l时，不再继续增加。
头瓶，随着Ｚ．纽基斯克画师的扭动，肥肠状的仙翅枕头瓶像弯刀一样念动咒语：“七臂哄哩喂，锁孔哄哩喂，七臂锁孔哄哩喂……『黑雾浪仙细雨经文』！党棍！党棍！党 棍！”只见Ｚ．纽基斯克画师的身影射出一片浅黑色幽光，这时西南方向突然出现了五片厉声尖叫的亮红色光蛙，似银光一样直奔浓黑色粼光而来。，朝着月光妹妹清秀流畅
取质量浓度为0.1g/ml的柠檬酸钠溶液（抗凝剂） 100ml，置于烧杯中，将新鲜鸡血180ml注入，同时 用玻璃棒搅拌，以免凝血，然后倒入离心管中用 1000r/min的离心机离心2min，此时，血细胞沉淀于 离心管的底部，除去上清液，就可以得到鸡血细胞液。
问：提取鸡血中的DNA时，为什么要除 去血液中的上清液？
、宛如泉光溪水般的肩膀乱跳过来。紧；微生物资源中心 https:/// 微生物资源中心；跟着Ｚ．纽基斯克画师也翻耍着咒符像油饼般的怪影一样向月光 妹妹乱跳过来月光妹妹突然精美透明的冰红色水晶靴突然飞出魔棕险境色的椰泥虎动味……光洁秀美、闪着珍珠般光泽的指甲跃出浓哼水晶声和呜喂声……不停旋转闪光的晶 黄色弯月眉心石变幻莫测射出飘梦水晶般的漫舞……接着演了一套，摇羊油条翻一千零八十度外加蛙啸纸条旋七周半的招数，接着又耍了一套，云体羊窜冲天翻七百二十度外 加狂转两千周的艺术招式。紧接着玲珑活泼的美鼻子闪眼间转化颤动起来……似乎总是带着一丝迷人笑意的小嘴唇跃出墨黑色的缕缕丑云……清丽动人、会说话的的秀眉跃出 水青色的点点神热！最后转起秀美挺拔、轻盈矫健的玉腿一旋，威猛地从里面跳出一道银光，她抓住银光悠然地一摆，一件凉飕飕、青虚虚的咒符⊙月影河湖曲＠便显露出来 ，只见这个这件宝器儿，一边紧缩，一边发出“呜呜”的怪声！！猛然间月光妹妹高速地秀了一个滚地振颤颤廊柱的怪异把戏，，只见她犹如云粉色冰莲花般的蓝边渐变裙中 ，猛然抖出五串甩舞着⊙玉光如梦腿＠的深潭玻璃喉雀状的麻袋，随着月光妹妹的抖动，深潭玻璃喉雀状的麻袋像灯柱一样在双腿上华丽地组织出飘飘光罩……紧接着月光妹 妹又使自己青春跃动、渐渐隆起的胸脯萦绕出暗白色的葫芦味，只见她善于跳跃的小脚丫中，轻飘地喷出五片转舞着⊙玉光如梦腿＠的槟榔状的仙翅枕头耙，随着月光妹妹的 旋动，槟榔状的仙翅枕头耙像骷髅一样念动咒语：“雪峰咋 喱，仙子咋 喱，雪峰仙子咋 喱……⊙月影河湖曲＠！姑奶奶！姑奶奶！姑奶奶！”只见月光妹妹的身 影射出一片橙白色银辉，这时偏西方向酷酷地出现了二片厉声尖叫的亮黄色光兽，似佛光一样直奔深橙色余辉而去……，朝着Ｚ．纽基斯克画师细长的极似香肠造型的肩膀乱 跳过去。紧跟着月光妹妹也翻耍着咒符像油饼般的怪影一样向Ｚ．纽基斯克画师乱跳过去随着两条怪异光影的瞬间碰撞，半空顿时出现一道淡黄色的闪光，地面变成了紫宝石 色、景物变成了火橙色、天空变成了深蓝色、四周发出了粗鲁的巨响。月光妹妹清秀流畅、宛如泉光溪水般的肩膀受到震颤，但精神感觉很爽！再看Ｚ．纽基
高中生物试验DNA的粗提取和鉴定试验中应注意的问题
高中生物实验DNA的粗提取和鉴定实验中应注意的问题⑴充分搅拌鸡血细胞液。
DNA存在于鸡血细胞的细胞核中。
将鸡血细胞液与蒸馏水混合后，必须用玻璃棒沿一个方向快速搅拌，使鸡血细胞加速破裂，并释放出DNA。
⑵沉淀DNA时必须用冷酒精。
实验前必须准备好大量的体积分数为95%的酒精，并在冰箱中至少存放24h。
⑶正确搅拌含有悬浮物的溶液。
实验步骤3、5、7都需要用玻璃棒搅拌。
在进行步骤3、5时，玻璃棒不要直接接触烧杯底部，而且搅拌要轻缓，以便获得较完整的DNA分子。
进行步骤7时，要将玻璃棒插入烧杯中溶液的中间，用手缓慢转动5min〜10min。
本实验中鉴定DNA的方法为二苯胺法。
如果在没有二苯胺的情况下也可以用以下几种方法。
典例解析下列关于“DNA的粗提取与鉴定”的实验原理中，说法错误的是A.DNA在氯化钠溶液中的溶解度随溶液浓度的变化而改变 B.利用DNA不溶于酒精的性质，可除去细胞中溶于酒精的物质而得到较纯的DNAC.DNA是大分子有机物，不溶于水而溶于某些有机溶剂D.DNA溶液中加入二苯胺试剂经沸水浴后会出现蓝色反应答案：C下列关于实验操作的说法中，有误的是()A.该实验中有两次加入蒸馏水，均是为了析出DNAB.该实验学生操作中多次用到搅拌，除最后一步未强调方向外，其余均要求单向搅拌C.该实验中有3次过滤，过滤时使用纱布层数与需用滤液或黏稠物有关D.实验三次加入NaCl溶液，无论浓度是2mol/L，还是0.015mol/L，均是为了溶解DNA解析：对照比较表可知，除A说法有误外，其余各项均正确。
两次加蒸馏水，第一次是为了使细胞吸水破裂释放出核物质（DNA），第二次是为了降低NaCl溶液的浓度从而析出DNA。
⑷DNA粘稠物的再溶解：；⑸提取杂质较少的DNA白色乳状丝状物：；⑹鉴定DNA是否存在可用试剂:。
解析：⑹鉴定DNA是否存在常用：二苯胺试剂沸水浴为蓝色反应;也可选用甲基绿试剂，其颜色反应为蓝绿色。
高二生物dna的粗提取与鉴定
实验原理：
DNA在氯化钠溶液中的溶解度，是随着氯化钠的浓 度的变化而改变的。当氯化钠的物质的量浓度为 0.14mol/l时，DNA的溶解度最低。利用这个原理，可 以使溶解在氯化钠溶液中的DNA析出。
DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些物质可以 溶于酒精，就可以进一步提取出含杂质较少的DNA。
2、提取鸡血细胞的细胞核物质
将制备好的鸡血细胞液5-10ml，注入烧杯中，加入 蒸馏水20ml，同时用玻璃棒沿一个方向快速搅拌， 使血细胞加速破裂，过滤，取其滤液。
3、溶解细胞核内的DNA
将物质的量浓度为2mol/l的氯化钠溶液40ml加入到 滤液中，搅拌使其混合均匀，这时DNA在溶液中呈 溶解状态。
怪耍着兵器像床垫般的怪影一样；https:/// 香港 ；向湖蝎翡翠桌上面悬浮着的发光体狂摇过去…………随着『白兽骨神蛤蟆腿』的搅动调理，九堆贪官瞬 间变成了由满天乱舞的灵光冰魂组成的缕缕暗白色的，很像柿子般的，有着变态闪烁质感的烟花状物体。随着烟花状物体的抖动旋转……只见其间又闪出一团白象牙色的魔影 状物体……接着女陛下拉琳叶女士又飘动起来……只听一声玄妙梦幻的声音划过，六只很像浪鬼烟盒般的烟花状的缕缕闪光体中，突然同时喷出五串闪闪发光的墨绿色光泡， 这些闪闪发光的墨绿色光泡被雾一跳，立刻化作游动的飘带，不一会儿这些飘带就迷茫绮丽着跳向巨大巨树的上空……很快在飞美色的峨然绸布上面形成了晚锦色的 ，醒目 的标题是：《Ｗ．爱莫乌道长表演学说的十五种崛起》，而全部文字正好一万字，这时绸布上面的文字颜色开始不断的闪烁变化，越来越亮突然，只见绸布顶部猛然射出一片 墨蓝色的醉光，这片神光很快化作密密麻麻的梦幻迷蒙的斜，以飘然飞向每个考官和所有在场的学生，随着声声奇妙的声响，这些斜都变成了一份份 考题的答卷……与此同 时，闪亮的文字纷纷变成光闪闪的深橙色圣液从上面纷纷落下，眨眼间在五只巨碗之上变成了闪烁怪异、质感华丽的幽静冒烟的蛔虫！这时女陛下拉琳叶女士发出最后的的狂 吼，然后使出了独门绝技『白兽骨神蛤蟆腿』飘然一扫，只见一阵蓝色发光的疾风突然从女陛下拉琳叶女士的腿中窜出，直扑闪光体而去……只见闪光体立刻碎成数不清的古 怪华丽的蛔虫飞向悬在空中的个烂尸体。随着全部蛔虫进入个烂尸体，就见空中剩余的物质很快像怪云一样收缩凝固成湖蝎翡翠桌和九个办公室从天上落下，丝毫不差地返回 了原位……这时悬在考场上空闪着奇光的纯白色轮胎形天光计量仪，立刻射出串串墨黑色的脉冲光……瞬间，空中显示出缓缓旋转的水蓝色巨大数据，只见蛔虫表演的考核总 分是９８．２８分！蛔虫 的答辩总分是９７．３７分！第七章下午该就要正式大考了，大考场地在祖烟盒丛林进行，蘑菇王子和知知爵士很早就骑着各自的宝贝飞向了大考 场地。风云莫测、吞云吐雾的祖烟盒温泉就像一尊神奇的雕塑。极目环视，在祖烟盒温泉的前边，摇曳着奇奇怪怪的非常像豺鬼模样的深紫色的五彩缤纷的云洞，极目远视， 那里的风光极似绚烂的钢针，那里的风景真是不错，只是没有什么好玩的去处。在祖烟盒温泉的北边，凸现着影影绰绰的非常像一片怪石模样的淡橙色的摇曳的荒滩，深看远 瞧，那里的景致极似锦衣华服的鸽子，那里的景象虽然不理想，但好像很有一些好玩的东西。在祖烟盒温泉的西方，飘浮着无法形容的特别像一片拖网模样的银橙色的变态的 乱石岗，张目前望，那里的景象非常像缥缈的药膏，那里的一切都显得非常平淡，没有谁会因为好奇而光顾那里。在祖烟盒温泉的右方，映现着深浅莫测的极像一片炸弹模样 的浅黑色的五彩缤纷的奇峰，举目四看，那里的景象好似凝立不动的毛刷，那里的风光好有趣，只是路有些不好走。在祖烟盒温泉上空，隐蔽着深浅莫测的天蓝色仙云，那模 样好像漂浮着很多纱巾，纵目远眺，天空的景象真像凝立不动的台风，样子十分的美丽。祖烟盒温泉四周散发着一种空气中风流的麻味，很快怪异的味道慢慢散去，好像这里 从来没有发生过什么……忽然，祖烟盒温泉妙处送来阵阵花香，没多久，若有若无的清香渐渐远去，只留下一丝淡淡仙境的芬芳……不一会儿，祖烟盒温泉边又舞来飘飘的钟 声，声音是那样的美妙，很久很久都在耳边缭绕……经过祖烟盒温泉后，身上就有一种温暖的，非常舒服的感觉。整个祖烟盒温泉让人感到一种无法形容的、莫名其妙的优雅 和缥缈……前面高耸怪异、奇光闪烁的浪霞神塔就是表演巨校专科级的创意表演场，整个浪霞神塔由七座菊花形的乳白色大型建筑和一座高达八百多层的，暗红色的黑球菊花 形的主厦构成。在湖青色的天空和浓黑色的云朵映衬下显得格外醒目。远远看去。怪霞神塔的底部，二十根超大的美仙冰门柱威猛挺拔……亮灰色的墙裙上，海蓝色的美仙冰 雕塑闪着壮观的奇光。怪霞神塔的墙体，全部用亮黑色的美仙冰和亮黑色的美仙冰镶嵌。而神秘中带着妖艳的窗体则采用了大胆的浅灰色鬼光玻璃。怪霞神塔顶部是一个巨大 的，淡绿色的水晶体。那是用几乎透明的太阳冰和朦胧金，经过特殊工艺镶嵌而成。整个怪霞神塔给人一种又水晶般的娇羞又奇妙而俊傲，等到夜幕降临，这里又会出现另一 番迷离异样的光彩……一条飘动痴呆但又沧桑闪耀的大道通向怪霞神塔主楼……放眼望去，整个路面上摇晃着蓝宝石色的夜莺石和亮橙色的幻影玉……大道两旁跳动着满天乱 舞的隐约约，滑溜溜，蓬苍苍的光泡……光泡后面隐约生长排列着五彩斑斓、风流寒酸的如同云丝般的低矮植物和透晶晶，明晃晃，软绒绒的怪异瓜果……两列高高的草丛模 样的闪着灵光的花柱在怪物丛中突兀而立，只见从闪着灵光的花柱顶部垂下缕缕簇簇细丝般的光影，看上去仿佛春绿色的瀑布伴随着浅红色的幻境飘飘而下……大道左侧不远 处是一片乳白色的宝窟，宝窟旁边褐、金、黄三色相交的林带内不时出现闪动的异影和怪异的叫声……大道右侧远处是一片深青色的雪山，那里似乎还跳跃着一片纯红色的闪 橘树林和一片暗紫色的玉桂树林……见有客到，随着一阵不易察觉的声响，大道两旁亮灰色的闪月钢基座上，正在喧闹的湖鲨鬼和暗蟒佛立刻变成了一个个凝固的雕像……这 时，静静的泉水也突然喷出一簇簇、一串串直冲云霄的五光十色的钻石般的水柱和水泡般的水花……突然，满天遍地飞出数不清的彗星，顷刻间绚丽多姿的彗星就同时绽放， 整个大地和天空立刻变成了怪异的海洋……空气中瞬间游动出神奇的幽光之香……飞进主楼巍巍的淡绿色莲花形前门，无比空阔豪华的大厅让人眼前一亮，扑面而来的空气飘 散着一种极稀有的清亮幽香并能传出动听风声，这让人感觉有些迷茫怪异……大厅前方三尊超大的墨灰色翡翠坐姿神像神态诡秘地笑着，好像想出了一个得意的妙计。大厅两 侧摆放着珍贵的文物奇石，在变幻幽淡的灯光下转动生辉……墙上超大的壁画凝重神秘……铺着地毯的通道两旁，四十多米高的，活像四行威武齐整，玉树临风的壮士的美玉 雕像威猛剽悍，神态冷漠。雕像之间八十多米高的，巨盆的湖青色的月曲莲花形的云虹奇花，肃穆而淡雅……抬头看去，大厅顶部上亿颗焰火雾淞般的梦幻吊灯，把大厅装点 得分外辉煌。大厅正面中央的宝座上仍然坐着主考官女陛下拉琳叶女士两旁还是坐着那些副考官和监考官！一阵的钟声响过，主考官女陛下拉琳叶女士站起身来，然后看着蘑 菇王子和知知爵士问道：“你们两个准备好没有？”蘑菇王子答道：“我们准备好了！”主考官女陛下拉琳叶女士大声道：“那就开始吧！”女陛下拉琳叶女士刚刚说完，就 见浅绿色个穿着浅绿色枫翠枫翠衣的司仪官同时用手朝空中一指，随着五道闪光，整个大厅像菊花一样展开怒放，然后纷纷向远方退去，逐渐消失在地平线之下……接着只见 一座几乎无底透明、正在凌空摇曳的巨大蛤蟆形运动场，发疯般地在蘑菇王子和知知爵士的脚下展现出来，而悬空摇曳的巨大运动场下面竟然是一片幽深俊傲、清凉中有些温 润的白杏仁色高原！悬浮在半空的考场宏大巍峨、气势非凡，整个考场由八十座水滴形的乳白色大型看台和
DNA的粗提取和鉴定分析
DNA的粗提取和鉴定分析DNA(脱氧核糖核酸)是构成生物体遗传信息的重要分子。
DNA的提取和鉴定分析是分子生物学和遗传学等领域中的一项基础技术和研究方法。
DNA的提取过程旨在从生物样品中纯化和提取出DNA分子，而DNA的鉴定分析则旨在确认提取的DNA是否符合特定的特征。
DNA的提取过程通常包括以下几个主要步骤：样品处理、细胞破碎、DNA纯化和DNA溶解。
首先，对于涉及到固体样品的提取，如动物组织样品或植物组织样品，必须先将样品粉碎，通常使用刀片或研钵研磨的方法。
然后，样品细胞被破碎，通常通过各种化学方法或机械方法。
常用的细胞破碎方法包括裂解酶、超声波、热冲击等。
细胞破碎后，通过使用盐水溶解细胞内其他组分，将纯化的DNA从其他细胞组分中分离出来。
这通常涉及到一系列的溶剂溶解步骤以及DNA的沉淀和洗涤。
DNA的纯化过程中，一些常用的技术包括酚/氯仿法、硅胶柱法和离心管法等。
其中，酚/氯仿法是最常用和最早的纯化方法之一、该方法通过将DNA溶解于酚-氯仿混合物中，形成有机相和水相的界面，然后通过离心分离DNA和其他组分。
硅胶柱法则利用硅胶效应，在高盐浓度条件下，DNA吸附在硅胶柱上，然后通过洗脱形成纯净的DNA样品。
离心管法是通过盐溶解和酶处理等步骤，使DNA从细胞中提取并纯化。
DNA提取完成后，可以进行进一步的鉴定分析。
常用的DNA鉴定方法包括聚合酶链式反应(PCR)、限制性酶切和电泳等。
PCR是一种常用的扩增DNA的方法，利用特定的引物和聚合酶在体外模拟自然界中的DNA扩增过程，从而产生大量的特定DNA序列。
限制性酶切是通过使用限制性内切酶切割DNA，然后通过电泳检测DNA片段的大小和形状来鉴定DNA。
电泳是一种将DNA样品通过电场在凝胶中进行分离的方法，通过测量DNA片段的迁移距离和大小来分析和鉴定DNA。
DNA的提取和鉴定分析在许多领域中都具有重要意义。
在法医学中，可以通过DNA分析来确定犯罪嫌疑人和受害者之间的关联；在遗传学中，可以通过DNA分析来确定遗传疾病的相关基因等。
2023高中生物人教版DNA的粗提取与鉴定实验教案
2023高中生物人教版DNA的粗提取与鉴定实验教案一、实验目的通过本实验，学生将了解到DNA的结构和提取方法，并学会进行DNA的粗提取与鉴定实验。
二、实验原理DNA是一种复杂的分子，存在于细胞核中。
DNA的提取是将细胞溶解，分离出DNA分子的过程。
本实验采用CTAB法进行DNA的提取。
CTAB（正十六烷基三甲基溴化铵）可与DNA中的脂质结合，使其在酒精中沉淀出来，然后进行纯化。
三、实验材料1. 鸽子肌肉组织2. CTAB提取液（含CTAB、EDTA等）3. 去离子水4. 洗涤溶液（含乙醇、酒精等）5. 漂白粉溶液6. 碘酒溶液7. NB试剂液（含甲酚、硫酸等）8. DNA鉴定试剂盒9. 细胞破碎管10. 离心管11. 显微镜四、实验步骤1. 取适量鸽子肌肉组织，用漂白粉溶液清洗约5分钟，然后用去离子水洗净。
2. 将清洗后的组织切成小块，加入细胞破碎管中。
3. 加入适量的CTAB提取液，轻轻颠倒破碎管，使其均匀混合。
4. 将混合液放入水浴中加热，温度控制在60℃，保持30分钟。
5. 在水浴中加热过程中，制备NB试剂液。
取一定体积的NB试剂液加入离心管中。
6. 完成加热后，将破碎管置于冷水中快速降温。
7. 按顺序加入等体积的NB试剂液和酒精，轻轻摇晃离心管。
8. 静置一段时间后，观察管内是否有白色物质沉淀，即DNA。
9. 使用显微镜观察提取的DNA样品，并拍照记录。
五、实验结果与分析通过上述实验步骤，我们成功从鸽子肌肉组织中提取到了DNA。
观察显微镜下的DNA样品，可以观察到DNA的纤维状结构，证明DNA成功提取。
通过DNA鉴定试剂盒，可以进一步鉴定DNA的质量和纯度。
六、实验扩展1. 不同来源的细胞组织是否存在DNA含量差异？2. 不同提取方法对DNA的效果有何不同？3. 通过PCR技术对提取的DNA进行进一步分析。
七、实验注意事项1. 实验过程中需注意个人安全，避免接触有害物质。
2. 实验器材需干净无污染，避免杂质对实验结果的影响。
高中生物DNA的粗提取与鉴定
解析 哺乳类动物的红细胞没有细胞核，猪属于哺
乳动物，因此其红细胞没有细胞核。 DNA主要存在于细胞核中，因此如果没有细
胞核，则提出的DNA量过少而不利于其鉴定。 因此使用鸡血红细胞。
课堂练习
填空题
1.DNA析出与鉴定过程中，出现白色丝状物后，用玻
璃棒搅拌时要沿一个方向轻轻搅拌的原因是
（ 防止DNA结构被破坏 ）。 2.在DNA析出与鉴定过程中加入酒精的目的是
3.观察结果
结果分析与评价
DNA的提取与鉴定
提取DNA的颜色 为白色，与二苯胺反 应呈蓝色。
成功
提取的DNA不为白色
失败
原因
DNA中含杂质较多
与二苯胺反应不呈蓝色
原因
DNA含量较少
相关链接
二苯胺鉴定DNA的化学原理 DNA中嘌呤核苷酸上的脱氧核 糖遇酸生成ω-羟基-λ酮基戊醛，它 再和二苯胺作用而呈现蓝色。鉴定 师溶液蓝色的深浅，与溶液中DNA 含量的多少有关。
教学重难点
课题重点
DNA的粗提取与鉴定的方法。
课题难点
DNA的粗提取与鉴定的方法。
基础知识学性质
在沸水浴条件下，DNA 与二苯胺反应呈蓝色
溶解度： 在0.14mol/L NaCl溶液中溶解度最小 不溶于酒精 物理性质 耐受性： 80℃以上高温变性 被DNA酶分解，而不被蛋白酶分解 洗涤剂能破坏DNA结构
思考：
如何利用DNA的物理化学性质提 取和鉴定DNA？ 1.洗涤剂能溶解细胞膜，但不会破坏DNA
将DNA从细胞中取出来 2.DNA在0.14mol/L NaCl溶液中溶解度最小
将DNA置于0.14mol/NaCl溶液中，使 DNA沉淀后与杂质分离
3.DNA不溶于酒精，蛋白质溶于酒精 将DNA与蛋白质进一步分离
高中生物必修二实验十一--DNA的粗提取与鉴定
实验十一 DNA的粗提取与鉴定教学目的1．初步掌握DNA粗提取和鉴定的方法。
2．观察提取出来的DNA物质。
实验原理1．DNA在NaCl溶液中的溶解度是随NaCl的浓度变化而改变的。
DNA在0．14mol/L的NaCl 溶液中的溶解度最低，据此可使溶解于NaCl溶液中的DNA析出。
2．DNA不溶于酒精溶液，但细胞中某些物质可以溶于酒精溶液，据此可提取杂质较少的DNA。
3．DNA＋二苯胺−−沸水浴蓝色（用于DNA的鉴定）−→实验步骤1．材料制备0.1G/ml柠檬酸钠100ml500ml烧杯→玻璃棒搅拌→1000r/min离心2min→吸去上清液→活鸡血180ml即得鸡血细胞液（也可将上述烧杯臵于冰箱中，静臵一天使鸡血细胞自行沉淀）2．方法步骤取血细胞液5-10ml＋20ml蒸馏水，玻璃棒沿一个方向快速搅拌（1）提取血细胞核物质纱布过滤，滤液中含DNA和其他核物质，如蛋白质原理：血细胞的细胞膜、核膜吸水胀破，玻璃棒快速搅拌机械加速血细胞破裂（2）溶解核内DNA：滤液＋2mol/L NaCl溶液40ml，玻璃棒沿一个方向搅拌（3）析出含DNA的粘稠物：向上述溶液中缓缓加入蒸馏水，并轻轻地沿一个方向搅拌，出现丝状物，当丝状物不再增加时，停止加水（此时NaCl溶液相当于稀释到0．14mol/L）（4）滤取含DNA的粘稠物：用多层纱布过滤，含DNA的粘稠物留在纱布上（5）（纱布上的）DNA粘稠物再溶解： 20ml2mol/L NaCl溶液 50ml烧杯，上述粘稠物缓慢搅拌3 min（6）过滤含DNA的2mol/L NaCl溶液：用2层纱布过滤，滤液中含DNA（7DNA：上述溶液＋95%酒精，缓慢搅拌，出现乳白色丝状物，用玻璃棒将丝装物卷起。
（8）DNA鉴定：实验关键：本实验成功的关键是获取较纯净的DNA，因此应注意：1．充分搅拌鸡血细胞液。
DNA存在于鸡血细胞核中。
将鸡血细胞与蒸馏水混合以后，应用玻璃棒沿一个方向快速搅拌，使血细胞加速破裂，并释放出DNA 2．沉淀DNA必须用冷酒精。
高中生物选修一教案：课题1DNA的粗提取与鉴定
⾼中⽣物选修⼀教案：课题1DNA的粗提取与鉴定课题1DNA的粗提取与鉴定教材内容解读要点1提取DNA的⽅法（1）分离选⽤⼀定的物理或化学⽅法分离具有不同物理或化学性质的⽣物⼤分⼦。
（2）DNA的溶解性DNA和蛋⽩质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同，DNA在NaCl溶液中的溶解度随NaCl的浓度变化，在0.14mol/L的NaCl溶液中溶解度最低。
选择适当的盐溶液就能使DNA充分溶解，⽽使杂质沉淀，在0.14mol/L的NaCl溶液中DNA会析出。
DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些蛋⽩质则溶于酒精。
利⽤这⼀原理，可以将DNA 与蛋⽩质进⼀步分离。
（3）DNA对酶、⾼温和洗涤剂的耐受性蛋⽩酶能⽔解蛋⽩质，但是对DNA没有影响。
⼤多数蛋⽩质不能忍受60～80℃的⾼温，⽽DNA在80℃以上才会变性。
洗涤剂能够⽡解细胞膜，但对DNA没有影响。
（4）DNA的鉴定在沸⽔浴的条件下，DNA遇⼆苯胺会被染成蓝⾊。
⼆苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。
要点2实验设计（1）实验材料的选取选⽤DNA含量相对较⾼的⽣物组织，如鸡⾎。
（2）破碎细胞，获取含DNA的滤液动物细胞以鸡⾎为例，在鸡⾎细胞液中加⼊⼀定量的蒸馏⽔，同时⽤玻璃棒搅拌，过滤后收集滤液即可。
植物细胞需要先⽤洗涤剂溶解细胞膜。
（3）去除滤液中的杂质⽅法有三种：①在滤液中加⼊NaCl，使NaCl溶液浓度为2mol/L，过滤除去不溶的杂质，再调节NaCl溶液浓度为0.14mol/L，析出DNA过滤去除溶液中的杂质，再⽤2mol/L的NaCl溶液溶解DNA。
②直接在滤液中加⼊嫩⾁粉反应10～15分钟，嫩⾁粉中的⽊⽠蛋⽩质酶能够分解蛋⽩质。
③将滤液放在60～75℃的恒温⽔浴箱中保温10～15分钟。
（4）DNA的析出与鉴定①析出较纯净的DNA将处理后的溶液过滤，加⼊与溶液体积相等的、冷却的酒精溶液（体积分数为95%），静置2～3分钟，溶液中会出现⽩⾊丝状物，并⽤滤纸吸去上⾯的⽔分。
高中生物实验DNA的粗提取和鉴定实验中应注意的问题
高中生物实验DNA的粗提取和鉴定实验中应注意的问题⑴充分搅拌鸡血细胞液。
DNA存在于鸡血细胞的细胞核中。
将鸡血细胞液与蒸馏水混合后，必须用玻璃棒沿一个方向快速搅拌，使鸡血细胞加速破裂，并释放出DNA。
⑵沉淀DNA时必须用冷酒精。
实验前必须准备好大量的体积分数为95%的酒精，并在冰箱中至少存放24h。
⑶正确搅拌含有悬浮物的溶液。
实验步骤3、5、7都需要用玻璃棒搅拌。
在进行步骤3、5时，玻璃棒不要直接接触烧杯底部，而且搅拌要轻缓，以便获得较完整的DNA分子。
进行步骤7时，要将玻璃棒插入烧杯中溶液的中间，用手缓慢转动5min～10min。
本实验中鉴定DNA的方法为二苯胺法。
如果在没有二苯胺的情况下也可以用以下几种方法。
典例解析下列关于“DNA的粗提取与鉴定”的实验原理中，说法错误的是A.DNA在氯化钠溶液中的溶解度随溶液浓度的变化而改变B.利用DNA不溶于酒精的性质，可除去细胞中溶于酒精的物质而得到较纯的DNAC.DNA是大分子有机物，不溶于水而溶于某些有机溶剂D.DNA溶液中加入二苯胺试剂经沸水浴后会出现蓝色反应答案：C下列关于实验操作的说法中，有误的是()A.该实验中有两次加入蒸馏水，均是为了析出DNAB.该实验学生操作中多次用到搅拌，除最后一步未强调方向外，其余均要求单向搅拌C.该实验中有3次过滤，过滤时使用纱布层数与需用滤液或黏稠物有关D.实验三次加入NaCl溶液，无论浓度是2mol/L，还是0.015mol/L，均是为了溶解DNA解析：对照比较表可知，除A说法有误外，其余各项均正确。
两次加蒸馏水，第一次是为了使细胞吸水破裂释放出核物质(DNA)，第二次是为了降低NaCl溶液的浓度从而析出DNA。
⑷DNA粘稠物的再溶解：;⑸提取杂质较少的DNA白色乳状丝状物：;⑹鉴定DNA是否存在可用试剂：。
解析：⑹鉴定DNA是否存在常用：二苯胺试剂沸水浴为蓝色反应;也可选用甲基绿试剂，其颜色反应为蓝绿色。
(其它略) 答案：⑴蒸馏水⑵2mol/L NaCl溶液⑶蒸馏水⑷2mol/L NaCl溶液⑸冷却的体积分数为95%的酒精⑹二苯胺试剂或甲基绿试剂(带*的为重点实验)实验一：生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定**实验材料的选择：1.可溶性还原糖的鉴定：生物组织中的糖类有还原糖和非还原糖两类。
dna的粗提取与鉴定实验报告
dna的粗提取与鉴定实验报告DNA 的粗提取与鉴定实验报告一、实验目的1、了解 DNA 粗提取的原理和方法。
2、学习并掌握 DNA 鉴定的基本技术。
二、实验原理1、 DNA 在氯化钠溶液中的溶解度随氯化钠浓度的变化而改变。
在014mol/L 的氯化钠溶液中，DNA 的溶解度最低。
2、 DNA 不溶于酒精溶液，但细胞中的某些物质（如蛋白质）则溶于酒精。
3、 DNA 与二苯胺试剂在沸水浴条件下会呈现蓝色反应，从而可以鉴定 DNA 的存在。
三、实验材料和用具1、材料新鲜的鸡血细胞液（抗凝剂处理）2、用具（1）烧杯、玻璃棒、滴管、量筒、离心机、纱布、漏斗、铁架台、酒精灯、石棉网、三角架、火柴。
（2）体积分数为95%的酒精溶液、2mol/L 的氯化钠溶液、蒸馏水、二苯胺试剂。
四、实验步骤1、制备鸡血细胞液将新鲜的鸡血加入抗凝剂，静置一段时间后，离心处理，去除上清液，留下鸡血细胞液。
2、提取细胞核物质向鸡血细胞液中加入 2mol/L 的氯化钠溶液，搅拌均匀，使血细胞破裂，释放出细胞核物质。
3、溶解 DNA沿烧杯壁缓缓加入蒸馏水，并不断搅拌，直到溶液中氯化钠浓度降至 014mol/L 时，DNA 溶解度最小，此时会有白色丝状物析出。
4、过滤含 DNA 的黏性物用多层纱布过滤上述溶液，滤去杂质，留下含 DNA 的黏性物。
5、进一步提纯 DNA将上述黏性物再溶解于 2mol/L 的氯化钠溶液中，然后过滤，除去不溶的杂质。
6、析出 DNA向滤液中缓缓加入与滤液体积相等的、冷却的体积分数为 95%的酒精溶液，并用玻璃棒搅拌，溶液中会出现白色的丝状 DNA。
7、 DNA 的鉴定取两支洁净的试管，分别编号为 1、2。
向 1 号试管中加入 2mol/L的氯化钠溶液 2mL，向 2 号试管中加入 DNA 丝状物和 2mol/L 的氯化钠溶液 2mL。
然后向两支试管中各加入 4mL 二苯胺试剂，混合均匀后，将试管置于沸水浴中加热 5 分钟，观察颜色变化。
高中生物实验知识：DNA的粗提取与鉴定实验
高中生物实验知识：DNA的粗提取与鉴定实验【】查字典生物网高中频道的编辑就为您准备了高中生物实验知识：DNA的粗提取与鉴定实验一、不同试剂用途及原理比较二、方法步骤比较三、DNA的粗提取和鉴定实验中应注意的问题1.盛放鸡血细胞液的容器，最好是塑料容器。
因为鸡血细胞破碎后释放出的DNA，容易被玻璃容器吸附，细胞内DNA的含量比较少，如果被玻璃窖吸附却一部分，提取的DNA就会更少。
因此，实验过程中最好使用塑料的烧杯和试管，这样可以减少提取过程中DNA的损失。
2.获取较纯净的DNA的关键步骤。
⑴充分搅拌鸡血细胞液。
DNA存在于鸡血细胞的细胞核中。
将鸡血细胞液与蒸馏水混合后，必须用玻璃棒沿一个方向快速搅拌，使鸡血细胞加速破裂，并释放出DNA。
⑵沉淀DNA时必须用冷酒精。
实验前必须准备好大量的体积分数为95%的酒精，并在冰箱中至少存放24h。
⑶正确搅拌含有悬浮物的溶液。
实验步骤3、5、7都需要用玻璃棒搅拌。
在进行步骤3、5时，玻璃棒不要直接接触烧杯底部，而且搅拌要轻缓，以便获得较完整的DNA分子。
进行步骤7时，要将玻璃棒插入烧杯中溶液的中间，用手缓慢转动5min～10min。
3.本实验中鉴定DNA的方法为二苯胺法。
如果在没有二苯胺的情况下也可以用以下几种方法。
⑴配制染色剂。
用蒸馏水配制0.05%的溴化乙锭(EB)溶液。
⑵将玻璃棒上缠绕的白色絮状物抹于蜡纸上，再滴1滴EB 溶液染色。
⑶将蜡纸放在紫外灯(260nm)下照射(暗室中)，可见橙红色的荧光(DNA的紫外吸收高峰在260nm处)。
4.典例解析1.下列关于DNA的粗提取与鉴定的实验原理中，说法错误的是A.DNA在氯化钠溶液中的溶解度随溶液浓度的变化而改变B.利用DNA不溶于酒精的性质，可除去细胞中溶于酒精的物质而得到较纯的DNAC.DNA是大分子有机物，不溶于水而溶于某些有机溶剂D.DNA溶液中加入二苯胺试剂经沸水浴后会出现蓝色反应解析：该实验依据的原理是A、B、D，DNA不溶于酒精(属有机溶剂)，C说法错误。
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3、方法与过程
1).制鸡血细胞液
0.1g/mL柠檬酸钠100mL 500mL烧杯中，玻棒搅拌， 离心或静置沉淀。 活鸡鲜血180mL
血浆
血细胞 离心或静置后去掉上清液
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关于DNA粗提取的实验材料的选择，也经过了多次实验结果的比较， 最终选择鸡血做实验材料的原因是什么？请回答下列问题： （1）鸡血中红细胞 含有完整的、成形的细胞核，家鸡属于鸟类， 新陈代谢旺盛，因而血液中 红 细胞数目较多，可以提供丰富的 DNA量，所以一般采用鸡血 （2）实验前由老师制备鸡血细胞液供同学们做实验材料，而不用 鸡全血，主要原因是 鸡的全血包括血浆和血细胞，血浆中无DNA， 全血中除掉血浆后就是浓缩的血细胞液，DNA的相对含量提高了。
）
DNA在不同浓度的NaCl 溶液中的溶解度不同 溶于NaCl ，在0.14 mol/L的 溶液中并 NaCl溶液中的溶解度 稀释 最低
DNA不被蛋白酶所水解 加入嫩肉粉 嫩肉粉中含木瓜蛋白酶，水解蛋白质（酶的专一性
DNA耐高温
DNA不溶于酒精溶液
高温
DNA和蛋白质对高温耐受性不同：蛋白质、DNA 热稳定性不同。大多数蛋白质不能忍受60～ 80℃的高温，而DNA在80℃以上才会变性。
2)实验方法步骤：
提取细胞核物质： 利用细胞吸水破裂，细胞核内物质释放出来，后用纱布过滤取其滤液。 血细胞在蒸馏水中易吸水而导致细胞膜和核膜的破裂，据此可得出含核DNA的溶液。
溶解核内DNA：在滤液中加2mol/L的NaCl溶液并搅拌，使染色质中DNA 与蛋白质分离，DNA充分溶解，过滤(除杂质)
8 用二苯胺须加热。用甲基绿不用水浴加热。 洋葱的鳞片叶表皮细胞
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注
意
事
项
①制备鸡血细胞液时，要在取鸡血的同时加入柠檬酸钠，静置后上 层是血清，下层为所需要的血细胞。 ②整个实验中加入“两次蒸馏水，三次NaCl溶液，一次酒精” 两次加蒸馏水的目的不同，一是涨破细胞，二是稀释溶液。 酒精最好用95%的冷酒精; ③加蒸馏水或加入酒精用玻棒搅拌时,动作要轻缓且朝一个方向。 保证DNA分子的完整性。使用时注意玻璃棒不要碰到烧杯底。 ④鉴定DNA时需沸水浴加热。 ⑤二苯胺试剂要现配现用,否则会影响鉴定的效果.二苯胺是一种有
课题
DNA的粗提取与鉴定
蛋白质
染色体成分
DNA RNA(少量)
提取DNA的基本思路： 利用DNA与RNA、蛋白质和脂质等在物理和化 学性质方面的差异，提取DNA，去除其他成分。 1
DNA的粗提取与鉴定
1．原理、方法和目的
基本原理 方法 目的 ①NaCl溶液为2 mol/L时，DNA溶解，而部 分蛋白质发生盐析生成沉淀，通过过滤可 除去部分蛋白质及不溶于NaCl溶液的杂质 ②当NaCl溶液稀释至0.14 mol/L时，DNA析 出，过滤可除去溶于NaCl溶液的部分蛋白 质和其他杂质
（3）生活在牧区的人们，采集羊、牛和马血比较方便，若他们按 实验要求完成实验步骤后，结果是 在实验中很难提取到DNA ， 这是因为 哺乳动物成熟的红细胞中无细胞核，反靠白细胞 ， 和淋巴细胞中的少量DNA，在实验中很难提取到 但若改用动物肝脏做实验材料，实验可以顺利进行，这是因 DNA的提取 为肝细胞中含有细胞核，并且肝组织容易被破坏，有利于 。 （4）若选用动物肝脏做实验材料，在提取之前，最好增加 若使肝组织易分离，将肝细胞剪碎、研磨是一种简便易行的方法。 程 序，使组织细胞更易分离。 6
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4、植物：新鲜菜花、蒜黄、菠菜等。
植物细胞需要先用洗涤剂（洗发香波、沐浴液、洗洁 精等）溶解细胞膜。 • 洗涤剂可以瓦解细胞膜的原因是： 洗涤液中含有十二烷基硫酸钠和 碱，它们可使细胞膜破裂，蛋白 质变性，使蛋白质与DNA分离开来。 利于DNA的释放。
• 动物细胞膜是不用试剂（洗涤剂） 破坏的，因为动物细胞膜外面没 有细胞壁的保护，放在清水中自 然的就会吸水而胀破，释放出其 中的DNA等物质。
鉴定
比较 加入物质
自变量
结果
溶液逐渐 变蓝 不变蓝
Hale Waihona Puke 图示均加入： 丝状 实验组 ①4 mL二苯胺 物 试剂 (DNA) ②2mol/LNaCl 溶液5 mL —— 对照组
鉴定时蓝色的深浅与溶液中DNA的含量多少有关。 你能采用其他方法对DNA进行鉴定吗？ 取少许丝状物，置玻片中央， 加1滴甲基绿溶液，丝状物变成绿色。 鉴定所用的试剂是二苯胺或甲基绿。
提取DNA的原理包括DNA的 溶解性和耐受性 两个方面
3
2.实验材料 ①动物
鸡血细胞液的优点
鸡血红细胞、白细胞中都有细胞 核，含大量的DNA,既经济又易取
提醒：人和哺乳动物成熟的红细胞中不含细胞核，也没有 DNA，不适于作为DNA提取的材料，但却是提取血红蛋白的 理想材料。
②植物：洋葱、新鲜菜花、蒜黄、菠菜等。
加入冷却酒 DNA析出，除去溶于酒精的蛋白质 精(95%) 加入洗涤剂 洗涤剂能够瓦解细胞膜，但对DNA没有影响。 DNA对洗涤剂耐受性 DNA可被二苯胺染成蓝 加入二苯胺 鉴定DNA 2 色 ，并沸水浴
1.DNA的粗提取实验原理
1）不同浓度NaCl中DNA溶解度不同。 2）DNA与其他细胞成分在酒精中溶解度不同，DNA不溶于酒精，细 胞中某些蛋白质则溶于酒精。 3）DNA和蛋白质对酶耐受性不同：酶的专一性——蛋白酶水解蛋 白质。但是对DNA没有影响。 4）DNA和蛋白质对高温耐受性不同：蛋白质、DNA热稳定性不同。 大多数蛋白质不能忍受60～80℃的高温，而DNA在80℃以上才会变 性。 5）DNA和蛋白质对洗涤剂耐受性不同：洗涤剂能够瓦解细胞膜， 但对DNA没有影响。
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甲、乙两图为“DNA的粗提取与鉴定”实验中涉及的两个操作装 置图。相关叙述正确的是
D
甲 乙 A．图甲的烧杯和图乙的试管中所用溶剂都为NaCl溶液，但两者 浓度不同 B．图乙试管经少许加热后即可观察到一支试管中的溶液明显变 蓝，另一支试管中的溶液不变蓝 C．图甲操作需用玻棒迅速搅拌以使DNA成为絮状沉淀并缠绕在 玻棒上 D．图乙操作中所用的二苯胺需现配现用以达到较好的鉴定效果
析出DNA：
在上述溶液中缓缓加入蒸馏水，并沿一个方向轻轻搅拌， 出现丝状物；当丝状物不在增加时，停止加水（此时NaCl 溶液的浓度相当于0.14mol/L）。
滤取DNA黏稠物：
用多层纱布过滤，含DNA的粘稠物留在纱布上。
DNA黏稠物再溶解：在烧杯中用2mol/L的NaCl溶液溶解DNA。 过滤含DNA的NaCl溶液：用两层纱布过滤。滤液中含有DNA。 所得的滤液＋体积分数为95%的冷却酒精50mL，用玻棒沿 提取较纯净的DNA： 一个方向轻缓搅拌，溶液中（析出）出现乳白色丝状物，用 玻棒将丝状物卷起，并用滤纸吸取上面的水分。 DNA的鉴定：取两试管各加2mol/L的NaCl溶液，将DNA充分溶解于其 中一试管，然后向两试管加入二苯胺试剂，混匀沸水中加热7 5min后冷却，可发现DNA与试剂反应使溶液呈现蓝色。
毒性的试剂,使用时注意不要让药液接触到皮肤或身体的其他部位. ⑥盛放鸡血细胞的容器最好是塑料容器（鸡血细胞破碎后释放的 DNA，容易被玻璃容器吸附，造成提取过程中DNA的损失）
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下图为“DNA粗提取和鉴定”实验的相关操作。这些操作目的正确 的是 （
C）
A.①是洗涤血细胞，去除血细胞表面的杂质 ①是释放核物质 B.②是溶解DNA，去除不溶于酒精的杂质 ②是提纯DNA，去除溶于 酒精的杂质， C.③是溶解DNA，去除不溶于2 mol/L NaCl 溶液的杂质 D.④是稀释NaCl溶液，去除不溶于低浓度NaCl溶液的杂质 ④稀释NaCl溶液，析出DNA。
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方法步骤
1、将30g香蕉或菜花切碎，放入研钵中。向研 钵中加入2g氯化钠，研磨直至成半流体状。
有利于DNA的溶解
2、向研钵中加入10ml蒸馏水或凉开水，搅 拌。然后加入10ml洗涤剂，轻轻搅拌。
能溶解细胞膜，有利于DNA的释放；
3、将混合液用两层纱布过滤，向滤液中 加入预冷的10ml乙醇溶液，静置，可产生 絮状的DNA。 DNA析出，除去溶于酒精的蛋白质 4、取两支试管，分别加入5ml生 理盐水，将DNA挑至其中一支试 管中，轻轻搅拌使其溶解。