I667-01黄曲霉毒素测定法一部检验标准操作规程
黄曲霉毒素国标检测方法
黄曲霉毒素国标检测方法
黄曲霉毒素（AF）是一种由黄曲霉属真菌产生的有毒代谢产物。
它们被广泛分布在食品、饲料和环境中，可能对人类和动物健康造成危害。
因此，对黄曲霉毒素的快速、准确检测成为了保障公众健康的关键。
国家标准委员会制定了黄曲霉毒素国标检测方法，以保证各个检验机构的检测质量和结果一致性。
1. 检测样品的制备
样品制备过程是检测过程的关键步骤。
样品必须被精确称量和混合，以确保最终检测结果的准确性和可重复性。
样品预处理的方法通常包括研磨、切碎、混合和抽样等步骤，具体方法取决于样品的特性，如水分含量、粘度和粒度分布等。
2. 样品提取
样品提取过程中，黄曲霉毒素从样品中被提取到适当的溶剂中。
提取的选择取决于样品的特性和黄曲霉毒素的特性。
一些常见的提取方法包括回收萃取、固相萃取和羧甲基纤维素柱萃取等。
3. 分离和净化
为了获得最终准确的结果，必须分离并净化提取的样品。
对于黄曲霉毒素的分离和纯化方法主要有和阳离子交换树脂和固相萃取等方法。
检测黄曲霉毒素的方法主要包括色谱检测法、酶联免疫检测法、毛细管电泳等方法。
其中酶联免疫检测法已成为广泛使用的检测方法之一。
该方法以特异性抗体为基础，利用抗原抗体相互作用，快速、敏感地检测黄曲霉毒素。
总的来说，黄曲霉毒素国标检测方法是一系列高效准确的方法，可以帮助检验机构检测食品或饲料中的黄曲霉毒素，保证公众健康。
黄曲霉毒素测定法操作规程
分发部门：质量部、中心化验室生效日期：年月日黄曲霉毒素测定法操作规程1目的通过制定黄曲霉毒素测定法操作规程，以确保检验的准确性。
2适用范围适用于中心化验室所有的高效液相色谱法-柱后衍生法对药品的黄曲霉毒素测定。
3职责必须由经过相应知识培训的QC人员方可进行黄曲霉毒素测定法的操作。
4文件内容4.1简述黄曲霉毒素可以由曲霉菌黄曲霉、寄生曲霉、集封曲霉4种真菌产生，是一组化学结构类似的二呋喃香豆素的衍生化合物。
中药在贮藏、制备、运输过程中如保存不当有受潮霉变而污染黄曲霉毒素的可能。
黄曲霉毒素是目前世界上已知的毒性最强电话化合物之一，其致癌性肯定。
对中药中黄曲霉毒素残留量进行严格控制对保证用药安全具有重要意义。
本法的基本原理为样品经有机溶剂提取、免疫亲和柱净化后，利用高效液相色谱分离，柱后衍生-荧光检测器检测进行分析测定。
用于测定药材、饮片及制剂中的黄曲霉毒素（以黄曲霉毒素B1、黄曲霉毒素B2、黄曲霉毒素G1、黄曲霉毒素G2总量计）。
4.2仪器及用具4.2.1 高速匀浆器4.2.2 高效液相色谱仪，配荧光检测器（具360nm激发波长和大于420nm发射波长）4.2.3 柱后衍生系统（碘衍生系统或光化学衍生系统）4.2.4 离心机4.2.5 超纯水处理系统4.2.6 超声波提取器4.2.7 固相萃取装置4.2.8 离心管，具塞锥形瓶，刻度浓缩瓶，移液管，容量瓶等。
4.3试药与试液4.3.1 甲醇、乙腈均为色谱纯。
4.3.2 水为超纯水4.3.3 黄曲霉毒素混合对照品（黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2，标示浓度分别为1.0µg/ml、0.3µg/ml、1.0µg/ml、0.3µg/ml）4.3.4 0.05%的碘溶液：取碘0.5g，加入甲醇100ml使溶解用水稀释至1000ml即得。
4.4色谱条件及系统适用性试验4.4.1 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-乙腈-水（40:18:42）为流动相；柱温：40℃；采用柱后衍生法检测（分为碘衍生法和光化学衍生法）；以荧光检测器检测，激发波长λem=360nm(或365nm)，发射波长λex=450nm。
黄曲霉毒素的检查方法
几种黄曲霉素检测方法的特点
免疫亲和层析净化高效液相色谱法
• 试样经过甲醇一水提取，提取液经过滤、稀释后，滤液经过含有 黄曲霉毒素特异抗体的免疫亲和层析净化，此抗体对黄曲霉毒素B1， B2,G1，G2具有专一性，黄曲霉毒素交联在层析介质中的抗体上。用水 或吐温-20/PBS将免疫亲和柱上杂质除去，以甲醇通过免疫亲和层析 柱洗脱，洗脱液通过带荧光检测器的高效液相色谱仪柱后碘溶液衍生 测定黄曲霉毒素的含量。
由于生物传感器具有选择性高，响应快操作简单携 带方便和适合于现场检测等优点，因此各国科研工作者正 积极探索研制新型生物传感器用于检测黄曲霉素。
研
• 试样经过甲醇一水提取，提取液经过滤、稀释后，滤 液经过含有黄曲霉毒素特异抗体的免疫亲和层析净化，此 抗联体在对层黄析曲介霉质毒中素的B抗1，体B上2,G。1，用G2水具将有免专疫一亲性和，柱黄上曲杂霉质毒除素去交 .以甲醇通过免疫亲和层析柱洗脱，加入溴溶液衍生，以 提高测定灵敏度。洗脱液通过荧光光度计测定黄曲霉毒素 (B1+B2+G1+G2)总量。
，经柱层析（它利用吸附剂对不同物质吸附能力的差异，用溶剂将 混合物的组分逐一洗脱分离的一种分离方法）净化后，再在薄板 上展开后分离，利用黄曲霉素的荧光特性,根据荧光斑点 的强弱与标准比较确定其含量，对于一些组分很复杂的试 样要双向展开，才能获得较高的灵敏度
• TLC法设备简单，检测费用低，但操作繁琐费时，萃取和 净化效果不理想，灵敏度差，对操作人员的身体健康存在 较大程度的危害
质，使其被检测到。例如将发色基团或荧光基团键合到样品中去，多极放大检测灵 敏度 柱后衍生系统：有碘衍生化法、溴衍生化法及较为先进的电化学衍生化法和光化学 衍生化法 免疫亲和柱：基于抗原抗体反应，特异性抗体连接在柱体内，选择性吸附样品中的 待检物，杂质不被吸附，流出柱外，柱上结合的目标物再被特定的洗脱液洗下来， 可以用于液相色谱(HPLC)分析或者ELISA含量测定，是一种高效的前处理柱。
黄曲霉素检测法
食品中黄曲霉毒素的测定—免疫亲和层析净化高效液相色谱法和荧光光度法1 范围本标准规定了免疫亲和层析净化—高效液相色谱法和免疫亲和层析净化—荧光光度法测定食品中黄曲霉毒素的条件和详细分析步骤。
本标准适用于玉米、花生及其制品（花生酱、花生仁、花生米）、大米、小麦、植物油脂、酱油、食醋等食品中黄曲霉毒素的测定。
样品中黄曲霉毒素的检出限：免疫亲和层析净化—高效液相色谱法和免疫亲和层析净化—荧光光度法为1mg/kg；免疫亲和层析净化—荧光光度法测定酱油样品中黄曲霉毒素检出限为2.5mg/kg。
2 免疫亲和层析净化高效液相色谱法2.1 方法提要试样经过甲醇-水提取，提取液经过滤、稀释后，滤液经过含有黄曲霉毒素特异抗体的免疫亲和层析净化，此抗体对黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2具有专一性，黄曲霉毒素交联在层析介质中的抗体上。
用水或吐温/PBS将免疫亲和柱上杂质除去，以甲醇通过免疫亲和层析柱洗脱，洗脱液通过带荧光检测器的高效液相色谱仪柱后碘溶液衍生测定黄曲霉毒素的含量。
2.2 试剂和溶液除非另有规定，仅使用分析纯试剂、重蒸馏水。
2.2.1甲醇（CH3OH）：色谱纯2.2.2甲醇-水（7+3）：取70mL甲醇加30mL水2.2.3 甲醇-水（8+2）：取80mL甲醇加20mL水2.2.4甲醇-水（45+55）：取45mL甲醇加55mL水2.2.5 苯：色谱纯2.2.6乙腈：色谱纯2.2.7苯-乙腈（98+2）：取2mL乙腈加98mL苯2.2.8氯化钠（NaCl）2.2.9磷酸氢二钠（Na2HPO4）2.2.10磷酸二氢钾（KH2PO4）GB/T 18979-20032.2.11氯化钾（KCl）2.2.12 PBS缓冲溶液：称取8.0g氯化钠，1.2g磷酸氢二钠，0.2g磷酸二氢钾，0.2g氯化钾，用990mL纯水溶解，然后用浓盐酸调节pH值至7.0，最后用纯水稀释至1000mL。
2.2.13 吐温-20/PBS溶液（0.1%）：取1mL吐温-20，加入PBS缓冲溶液并定容至1000mL。
黄曲霉毒素的测定(精)
取20.00mL甲醇水溶液臵于另一125mL分液漏斗 中，加20mL三氯甲烷，振摇2min、静臵分层， 如出现乳化现象，可滴加甲醇促使分层。放出 三氯甲烷层，经盛有约10g预先用三氯甲烷湿 润的无水硫酸钠的定量慢速滤纸，过滤于 50mL蒸发皿中，再加5mL三氯甲烷于分液漏斗 中，重复振摇提取，三氯甲烷层一并滤于蒸发 皿中，最后用少量三氯甲烷洗过滤器，洗液并 于蒸发皿中。
再用双向展开法展开后，观察样液是否产生与AFTB1标准点重叠
的衍生物。观察时，可将第一板作为样液的衍生物空白板。若样 液AFTB1含量较高时，则将样液稀释后，按单向展开法中(4)做确 认试验 .
(5)稀释定量：
若样液中AFTBl含量较高，可按单向展开法中(5)稀释定量操作。 若AFTB1含量较低，稀释倍数小，在定量的纵向展开板上仍有杂质 干扰，影响结果判断，可将样液再做双向展开法测定，以确定含量。 3.2.3 结果计算
(2)展开：
a．横向展开：在展开槽内的长边臵一玻璃支架，加10mL无水 乙醇，将上述点好的薄层板靠标准点的长边，臵于展开槽内展开， 展至板端后，取出挥干。根据情况，需要时，可再重复l～2次。 b．纵向展开：挥干的薄层板以丙酮一三氯甲烷(8：92)展开至 10～12cm为止。丙酮与氯甲烷的比例，根据不同条件自行调节。
黄曲霉毒素属剧毒物质，其毒性比氰化 钾还高，也是目前最强的化学致癌物质。 其中AFT B1的毒性和致癌性最强，帮其 在食品中允许量各国都有严格规定。 AFT主要污染粮油及其制品，如花生、 花生油、玉米、大米、棉籽等被污染严 重。Biblioteka 曲霉毒素允许量标准
食品品种 允许量标准（ppb或10-6） 玉米、花生、花生油 ≤20 玉米及花生制品 ≤20 大米、其他食用油 ≤10 裱花蛋糕、饼干、面包≤5 婴儿代乳食品 不得检出
黄曲霉毒素检验方法
一、目的规范实验室检验方法。
二、内容（一）试验准备1、标定荧光计。
（1）、将仪器后的电源开关打开。
（2）、按SELECTTEST键，直至显示出AflaTest，按ENTER。
（3）、荧光计显示：START CALBRATION…OPEN THE LIDINSERT RED VIAL打开仪器盖，将红色的真菌毒素标定管放入。
一定要确认标定管是否已放到了仪器的底部。
（4）、仪器显示：HIGHCAL 22PPB如果这个值正好是所选分析方法规定的设定值，请按ENTER键。
否则，从键盘上所规定的设定值，确认准确无误后，按ENTER键。
（5）、仪器显示：READING HIGH CAL…SA VING HIGH INENSTTYOPEN THE LIDINSERT GREEN VIAL打开仪器盖取出红色的标定管，插入绿色的真菌毒素标定管。
一定要确认标定管是否已充分插入仪器的底部。
（6）、仪器显示：LOW CAL 1.0PPB如果这个值正好是所选分析方法规定的设定值,请按ENTER键.否则,从键盘上所规定的设定值,确认准确无误后,按ENTER键。
（7）、仪器显示：READING LIW CAL…SA VING HIGH INTENSITJY 接着显示：OPEN THE LIDINSERT GREEN VIAL打开仪器盖取出绿色的标定管。
（8）、仪器显示：VICAM V1.3 READY按SELECT TEST键,仪器显示: AFLATEST, 按ENTER键。
（9）、仪器显示：START RUN TEST OPEN THE LID （10）、插入黄色的真菌毒素标定管，其读数应该在分析方法的测定范围内。
（11）、荧光屏计标定工作完毕，可经进行样品分析了。
荧光计每周需要标定一次。
如果需要重新标定，请按STOP键，再按OPIONS 键，直至仪器显示：CALIBRATE TEST然后按ENTER键，仪器显示：AFLATEST如果不是这样，按SELECT TEST键，直至仪器显示：AFLATEST，按ENTER键。
黄曲霉素检测法
食品中黄曲霉毒素的测定—免疫亲和层析净化高效液相色谱法和荧光光度法1 范围本标准规定了免疫亲和层析净化—高效液相色谱法和免疫亲和层析净化—荧光光度法测定食品中黄曲霉毒素的条件和详细分析步骤。
本标准适用于玉米、花生及其制品（花生酱、花生仁、花生米）、大米、小麦、植物油脂、酱油、食醋等食品中黄曲霉毒素的测定。
样品中黄曲霉毒素的检出限：免疫亲和层析净化—高效液相色谱法和免疫亲和层析净化—荧光光度法为1mg/kg；免疫亲和层析净化—荧光光度法测定酱油样品中黄曲霉毒素检出限为2.5mg/kg。
2 免疫亲和层析净化高效液相色谱法2.1 方法提要试样经过甲醇-水提取，提取液经过滤、稀释后，滤液经过含有黄曲霉毒素特异抗体的免疫亲和层析净化，此抗体对黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2具有专一性，黄曲霉毒素交联在层析介质中的抗体上。
用水或吐温/PBS将免疫亲和柱上杂质除去，以甲醇通过免疫亲和层析柱洗脱，洗脱液通过带荧光检测器的高效液相色谱仪柱后碘溶液衍生测定黄曲霉毒素的含量。
2.2 试剂和溶液除非另有规定，仅使用分析纯试剂、重蒸馏水。
2.2.1甲醇（CH3OH）：色谱纯2.2.2甲醇-水（7+3）：取70mL甲醇加30mL水2.2.3 甲醇-水（8+2）：取80mL甲醇加20mL水2.2.4甲醇-水（45+55）：取45mL甲醇加55mL水2.2.5 苯：色谱纯2.2.6乙腈：色谱纯2.2.7苯-乙腈（98+2）：取2mL乙腈加98mL苯2.2.8氯化钠（NaCl）2.2.9磷酸氢二钠（Na2HPO4）2.2.10磷酸二氢钾（KH2PO4）GB/T 18979-20032.2.11氯化钾（KCl）2.2.12 PBS缓冲溶液：称取8.0g氯化钠，1.2g磷酸氢二钠，0.2g磷酸二氢钾，0.2g氯化钾，用990mL纯水溶解，然后用浓盐酸调节pH值至7.0，最后用纯水稀释至1000mL。
2.2.13 吐温-20/PBS溶液（0.1%）：取1mL吐温-20，加入PBS缓冲溶液并定容至1000mL。
黄曲霉毒素的测定(精)
(2)展开：
a．横向展开：在展开槽内的长边置一玻璃支架，加10mL无水 乙醇，将上述点好的薄层板靠标准点的长边，置于展开槽内展开， 展至板端后，取出挥干。根据情况，需要时，可再重复l～2次。 b．纵向展开：挥干的薄层板以丙酮一三氯甲烷(8：92)展开至 10～12cm为止。丙酮与氯甲烷的比例，根据不同条件自行调节。
仪器
小型粉碎机 样筛
电动振荡器
玻璃浓缩器 玻璃板5cm×20cm、薄层板涂布器 展开槽(25cm×6cm×4cm) 紫外光灯100一125w、波长365nm滤光片、微量注射器(2)
试剂
三氯甲烷、正己烷(沸程30～60℃)或石油 醚(沸程60～90℃)、甲醇、苯、乙腈、无 水乙醚或乙醚经无水硫酸钠脱水、丙酮。 以上试剂在试验前需先进行空白试验， 如不干扰测定即可使用，否则需逐一进 行重蒸。
取20.00mL甲醇水溶液置于另一125mL分液漏斗 中，加20mL三氯甲烷，振摇2min、静置分层， 如出现乳化现象，可滴加甲醇促使分层。放出 三氯甲烷层，经盛有约10g预先用三氯甲烷湿 润的无水硫酸钠的定量慢速滤纸，过滤于 50mL蒸发皿中，再加5mL三氯甲烷于分液漏斗 中，重复振摇提取，三氯甲烷层一并滤于蒸发 皿中，最后用少量三氯甲烷洗过滤器，洗液并 于蒸发皿中。
2、黄曲霉毒素B标准使用液：
I液(1.0ug／mL)：取1mL AFTB标准液(10.0ug／mL)于10mL容 量瓶中，用苯一乙腈混合液稀释、定容。
Ⅱ液(0.2ug／mL)：取I液1mL，按上法定容5mL。
Ⅲ液(0.04ug／mL)：取液Ⅱ1mI。，按上法定容5mI。。
思考：在配制黄曲霉毒素B标准使用液时，为什么需要用贮备 液来稀释而不是直接配制？
本章重点
黄曲霉毒素AFB1检测操作规程
黄曲霉毒素AFB1检测操作规程1 原理AgraQuant® 黄曲霉毒素检测试剂盒应用固相直接竞争酶联免疫吸附原理，用70%甲醇从研磨样品中提取黄曲霉毒素。
样品提取液或黄曲霉毒素标准品与酶-黄曲霉毒素偶合物混匀后加入到抗体包被的微孔中，样品中的黄曲霉毒素或黄曲霉毒素标准品与酶-黄曲霉毒素偶合物中的黄曲霉毒素竞争结合微孔中的特异抗体。
经过洗板去除未参加抗原-抗体反应的的黄曲霉毒素，当酶的底物被加入到微孔中，颜色变为蓝色，且颜色深浅与样品中或标准品中黄曲霉毒素含量成反比。
加入反应终止液终止反应后，反应液颜色应由蓝色转为黄色。
在450nm(OD450)滤镜及630nm示差滤镜下使用酶标仪对微孔板进行吸光度值测量。
利用标准品的吸光度值对标准品浓度制作标准曲线，将样品的吸光度值与标准品的吸光度值进行比较以进行结果的判读。
2 试剂与仪器2.1 单道移液枪（量程：0~200μL、0~1000μL）2.2 八道移液枪（量程：0~300μL）2.3 定时器2.4 吸水纸2.5 试剂槽3个2.6 仪器：酶标仪3 操作步骤3.1样品的准备/萃取3.1.1获取具有代表性的样品，使用研磨机研磨，使至少95%的研磨样品能够通过20目筛网，彻底混合并对样品进行二次取样。
3.1.2称取20g 研磨样品于干净并可密封的广口瓶中。
3.1.3加入100mL 70/30（v/v）甲醇/水萃取溶液并密封广口瓶。
注意：样品与萃取溶液比例应为1:5（w:v）。
3.1.4摇床上振荡混合10分钟。
3.1.5静置样品，用双层滤纸过滤萃取上清液，收集待检滤液（滤液必须澄清）。
3.1.6用提供的分析缓冲液对滤液进行1:2稀释。
例如：将100µL待检滤液加入100µL分析缓冲液中，混匀准备进行随后实验。
3.2 检测步骤3.2.1将绿色的稀释孔条放入微孔板架上，稀释条孔的数目需使每个标准品（0, 2, 5, 20 & 50ppb）或样品能够对应一个稀释孔。
食品中黄曲霉毒素的测定
食品中黄曲霉毒素的测定食品中黄曲霉毒素的测定黄曲霉毒素是一种常见的食品安全问题，对人体健康有潜在危害。
在食品加工、储存和运输的过程中，黄曲霉菌的生长可能会导致食品受到污染，进而产生黄曲霉毒素。
及时准确地测定食品中的黄曲霉毒素含量对于保障食品安全非常重要。
本文将对食品中黄曲霉毒素的测定方法进行全面评估，并探讨该主题的深度和广度。
1. 黄曲霉毒素的定义和分类黄曲霉毒素是一类由黄曲霉菌产生的真菌毒素，常见的有黄曲霉毒素B1、黄曲霉毒素B2、黄曲霉毒素G1和黄曲霉毒素G2等。
它们在食品中的存在可能对人体造成不同程度的危害，其中黄曲霉毒素B1是最为常见和有毒的一种。
2. 食品中黄曲霉毒素的来源和污染途径黄曲霉毒素主要通过两种方式污染食品：一是由于黄曲霉菌的生长和繁殖，导致食品受到直接污染；二是由于霉菌在食品加工、储存和运输等过程中的存在，导致黄曲霉毒素的转移和积累。
3. 黄曲霉毒素的危害和影响黄曲霉毒素对人体健康的危害包括致癌作用、免疫毒性和肝毒性等。
长期摄入过量的黄曲霉毒素可能会导致肝脏损伤、肝癌和免疫系统功能下降等疾病。
4. 食品中黄曲霉毒素的测定方法目前，常用的黄曲霉毒素测定方法主要包括高效液相色谱法(HPLC)、气相色谱法(GC)和免疫学方法等。
每种方法都有其优点和局限性，选择适当的方法需要考虑到样品类型、检测目标、检测灵敏度和准确性等因素。
5. 黄曲霉毒素的监管标准和控制措施为了保护公众健康，各国都制定了相应的黄曲霉毒素监管标准。
食品生产企业和监管部门需要密切关注黄曲霉毒素的检测结果，并采取相应的措施来控制黄曲霉毒素的风险，确保食品安全。
总结：黄曲霉毒素是一种常见的食品安全问题，其在食品中的存在可能对人体健康造成不同程度的危害。
为了保障食品安全，及时准确地测定食品中黄曲霉毒素的含量非常重要。
本文综合评估了食品中黄曲霉毒素的测定方法，并讨论了黄曲霉毒素的来源和污染途径、危害和影响，以及监管标准和控制措施。
黄曲霉毒素M1操作规程
黄曲霉毒素M1操作规程一、样品的前处理将适量的液态奶于12000r/min下离心10min,取下层奶样直接检测即可。
二、溶液的配制1、标品稀释液：用去离子水将AFM1浓缩标品稀释液按1：3体积比进行稀释，即1份AFM1浓缩标品稀释液加3份去离子水。
用于提取样本的稀释，标品稀释液在4℃环境可保存一个月。
2、洗涤工作液：用去离子水将浓缩洗涤液（10×）按1:9体积比进行稀释，即1份浓缩洗涤液（10×）加9份去离子水。
用于酶标板的洗涤，洗涤工作液在4℃环境可保存一个月3、6个不同浓度的标准液：取6个1.5ml离心管，标为1到6号，分别加入995μl,400μl, 400μl,400μl, 400μl, 400μl标品稀释液,按照下表配制标准品。
如取5μl高浓度黄曲霉毒素M1标准品（810ppb）加入1号管，与995μl标品稀释液混匀，制备成4.05ppb黄曲霉毒素M1标准液。
取200μl配好的4.05ppb黄曲霉毒素M1标准液，加入2号管，与400μl标品稀释液混匀，制备成1.35ppb黄曲霉毒素M1标准液。
取200μl配好的1.35ppb黄曲霉毒素M1标准液，加入3号管，与400μl标品稀释液混匀，制备成0.45ppb黄曲霉毒素M1标准液。
依次稀释，制备成1.35ppb、0.45ppb、0.15ppb、0.05ppb、0ppb的标准液，（见下表）。
标准品现配现用。
配制好的标准液请在一周内用完（4℃存放）。
三、检测步骤1.、测前须知：（1）、使用之前将所有试剂和需用板条的温度回升至室温（20~25℃）。
（2）、使用之后立即将所有试剂放回2~8℃。
（3）、黄曲霉毒素M1可致癌，应戴手套操作。
2、操作步骤：（1）、将所需试剂从冷藏环境中取出，置于室温（20~25℃）平衡30min以上，注意每种液体试剂使用前均需摇匀。
（2）、取出需要数量的微孔板，将不用的微孔板放进原锡箔袋中并且与提供的干燥剂一起重新密封，保存于2~8℃。
黄曲霉毒素检测仪安全操作及保养规程
黄曲霉毒素检测仪安全操作及保养规程近年来，由于自然灾害、气候变化等因素的影响，我国农产品中黄曲霉毒素残留的问题逐渐凸显。
而黄曲霉毒素是一种有害物质，对人体健康有着危害。
因此，黄曲霉毒素检测仪作为检测这种有害物质的高效手段被广泛使用。
为确保检测的精确性和安全性，本文将介绍黄曲霉毒素检测仪的安全操作和保养规程。
安全操作规程1. 检测前的操作准备在检测之前，应对仪器进行检查，确保仪器正常工作。
确认仪器工作正常后，需要进行以下操作准备：1.准备好标准物质和样品，标准物质应为已知浓度的黄曲霉毒素，样品需要从正规渠道获取。
2.明确检测的黄曲霉毒素种类，不同种类的黄曲霉毒素检测方法有所不同。
在检测前需确认所需要检测的黄曲霉毒素种类。
3.在检测前，需要按照仪器使用说明书对其进行正确的接线和调试。
2. 检测操作流程在检测过程中，应按照以下操作流程进行：1.打开仪器，根据检测要求进行参数的设定和调试。
2.进行空白对比检测，此过程为了和样品检测的结果作对比，判断样品的可靠性。
3.根据样品检测要求，添加相应的试剂。
4.检测过程中需保持干净整洁，防止杂物降低检测精度，对检测操作区域进行消毒。
3. 检测后的操作1.关闭仪器，按照使用说明书对仪器进行定期维护和保养。
2.对于检测过程中产生的废弃物，应按照正确的方法进行处置。
3.检测结果报告产生后，对报告进行保留和管理。
保养规程1. 仪器的日常保养1.在仪器运行之前，需先对仪器进行清洁。
应使用软布、干燥的毛刷、吸尘器等设备对检测仪进行清洁，清除仪器表面附着的灰尘和杂物。
2.定期对仪器进行维护保养。
应按照使用说明书对仪器进行定期的检查和维护，先检查所有接线是否紧固，检查有无脱落或损坏的部件，并更换故障部件。
3.对仪器存放环境进行控制。
检测仪应存放在干燥、通风、无腐蚀气体和无振动的环境中，防止仪器受潮或受到其他有害影响。
2. 仪器的定期维护1.检测仪每日应进行清洗和消毒处理。
清洗和消毒前应关闭检测仪电源，防止发生意外事故。
黄曲霉毒素检测方法国标
黄曲霉毒素检测方法国标
黄曲霉毒素检测方法国标是指按照中国国家标准制定的黄曲霉毒素检测方法。
目前，中国国家标准中规定的黄曲霉毒素检测方法主要有两种：液相色谱-质谱联用法和酶联免疫吸附测定法。
这两种方法都是目前应用较广泛且效果较好的检测方法。
液相色谱-质谱联用法是一种高灵敏度、高选择性的方法，能够同时检测多种黄曲霉毒素，包括黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2等。
该方法通过液相色谱分离，再通过质谱联用技术进行鉴定和定量，具有高精确度和准确性。
酶联免疫吸附测定法是一种简便快速的检测方法，该方法通过将黄曲霉毒素与特异性抗体结合，然后通过酶标记的二抗或底物发生染色反应来检测黄曲霉毒素的存在。
该方法速度快、操作简便，适用于快速筛查和初步定量。
需要强调的是，具体的黄曲霉毒素检测方法国标可能会因地区和标准的变化而有所差异，建议使用时查阅当地的相关标准或咨询专业机构进行确定。
黄曲霉毒素检测仪操作规程
一、仪器使用准备方式（一）用户需设置年月日时分进行实测样品。
1. 用户开机前，要检查电源插座是否按照规定L接火线，N接零线，接大地。
仪器使用时，应避免强光照射。
2. 启动电源开关，仪器显示E888b”.3. 按“CE”键，仪器显示“YEA”进入年份设置。
4. 年份射致，按数字键，输入对应的年份，再按功能键，输入成功，仪器显示“MON”表示进入月份设置。
5. 月份设置，按数字键，输入对应的月份，再按功能键，输入成功，仪器显示：“DA”表示进入日期设置。
6. 日期设置，按数字键，输入对应的日期，再按功能键，输入成功，仪器显示“HOU”表示进入小时设置。
7. 小时设置，按数字键，输入对应的小时，再按功能键，输入成功，仪器显示“MIN”表示进入分钟设置。
8. 分钟设置，按数字键，输入对应的分钟，再按功能键，输入成功，仪器进入时间显示模式。
9. 过二十分钟，待机器热平衡后，再进入试样测定可得到准确的数值。
方式（二）若用户不需设置年月日时分，即进入工作状态，可采用以下方式1. 开机，仪器显示“E888b”2. 按“CE”键仪器显示“YEA”3. 按调零键，仪器显示“00—00”，表示仪器进入计时状态，时间从200年1月1日0时0分开始。
4. 按功能键，仪器显示τ(T)状态。
注意：在时间输入中，年份范围为00—99，月份01—12。
日期01—31，小时00—23，分钟00—59。
不在这些数字的范围，输入无效，需再次输入。
数值输入的过程中，如果按错数字，可按“CE”键，然后再次输入。
时间一经输入不可更改，除非关机再开机重新设置。
二、仪器基本使用方法1. 开启仪器电源开关，预热20-30分钟。
2. 在微孔板对应孔位内放入参比（空白）液及被测样品，并盖好样品池盖板。
3. 在方式（一）或方式（二）情况下将参比试样进入光路，按功能键，使显示τ (T)状态或A状态。
4. 按满度τ键，至显示“T100.０”或“A0.000”。
黄曲霉毒素检测方法国标
黄曲霉毒素检测方法国标【原创实用版3篇】目录（篇1）1.黄曲霉毒素的危害性2.黄曲霉毒素的检测方法2.1 薄层分析法2.2 酶联免疫法2.3 液相色谱法2.4 生物鉴定法2.5 试剂盒法正文（篇1）黄曲霉毒素是一种致癌物质，长期接触可使人的抵抗力下降，急性中毒可引起恶心、呕吐，发烧、黄疸等肝炎症状，长期接触可引起致癌、致畸。
致癌的话主要导致消化道肿瘤，比如食道癌、胆管癌。
因此，对黄曲霉毒素的检测显得尤为重要。
目前，黄曲霉毒素的检测方法主要有以下几种：1.薄层分析法：此方法操作简单、费用低廉，是国内外用的最多的一种测量方法。
2.酶联免疫法：这是近年来研发出了一种新颖的测量方法。
3.液相色谱法：可准确分离黄曲霉素的各种毒素，检测准确度高。
4.生物鉴定法：其特点是待检样品不需很纯，主要用于定性，共有 10 种。
5.试剂盒法：现在检测粮食，饲料里面霉菌毒素主要就是试剂盒（ELISA) 法。
目录（篇2）1.黄曲霉毒素的危害性2.黄曲霉毒素的检测方法2.1 薄层分析法2.2 酶联免疫法2.3 液相色谱法2.4 生物鉴定法2.5 试剂盒法正文（篇2）黄曲霉毒素是一种致癌物质，长期接触可以使人的抵抗力下降，急性中毒可引起恶心、呕吐，发烧、黄疸等肝炎症状，长期接触可引起致癌、致畸。
致癌的话主要导致消化道肿瘤，比如食道癌、胆管癌。
因此，对黄曲霉毒素的检测显得尤为重要。
目前，黄曲霉毒素的检测方法主要有以下几种：1.薄层分析法：此方法操作简单、费用低廉，是国内外用的最多的一种测量方法。
2.酶联免疫法：这是近年来研发出了一种新颖的测量方法。
3.液相色谱法：可准确分离黄曲霉素的各种毒素，检测准确度高。
4.生物鉴定法：其特点是待检样品不需很纯，主要用于定性，共有 10 种。
5.试剂盒法：这是目前检测粮食，饲料里面霉菌毒素主要采用的方法。
目录（篇3）1.黄曲霉毒素的危害性2.黄曲霉毒素的检测方法2.1 薄层分析法2.2 酶联免疫法2.3 液相色谱法2.4 生物鉴定法2.5 试剂盒法3.检测黄曲霉毒素的重要性正文（篇3）黄曲霉毒素是一种致癌物质，长期接触可以使人的抵抗力下降，急性中毒可引起恶心、呕吐，发烧、黄疸等肝炎症状，长期接触可引起致癌、致畸。
黄曲霉毒素B1检测的操作规程
1 适用范围本方法适用于测定全价饲料及脂肪含量小的固体原料（如玉米、玉米副产物等）。
2 操作方法1 样品处理：称取5.0g粉碎后的样品于具塞三角瓶中，准确加入25.0毫升甲醇水（1+1）溶液，（现配现用）。
振摇15分钟过滤，收集试样滤液，此液为样品提取液。
根据样品的国家标准允许量标准，用A试剂（样品稀释液）将样品提取液进行适当稀释，玉米一般将提取液稀释10倍（取滤液50uL+450uLA试剂），全价料滤液一般稀释4倍（取滤液50uL+150uLA试剂）稀释后放在混匀器上混匀，即为待测样液。
2、试剂的配制：每瓶C试剂准确加入1.5毫升D试剂（用移液枪移两个750uL）。
配成实验用酶标抗原溶液；取一瓶E试剂（浓缩洗涤液）加入300毫升蒸馏水中，配成洗涤液待用，均在2—8℃保存。
3、试剂平衡：将测试盒于室温中放置15分钟以上，平衡至室温。
4、小孔编号：根据实验需要截取相当孔数放置反应板框架上，设定一号孔为仪器调零孔（空白孔），2号孔为阴性对照孔，3号孔为阳性对照孔，其余孔为样品孔。
5、洗板（激活抗原）：每孔加入250uL洗涤液，洗涤液不得溢出，放置1分钟后，甩掉洗涤液，在吸水纸上拍干（注意：不能在同一张纸上重复多次拍打），重复洗板一次，放置、甩掉、拍干。
6、加样：第1步：第一个孔加50uLA稀释剂，第二个加50uLB试剂（0.1AFB1标准溶液），第三个孔加50 uLB试剂（1 AFB1标准溶液），其余孔加入相应待测样液。
第2步：1号孔加入50uLD试剂，从第2个孔开始加50uLC试剂，加完轻轻摇下，在37℃培养箱中培养半个小时，最好用书包着避光。
半个小时后，洗板，甩掉反应液，拍干。
每孔加入250洗涤液后，放置两分钟，甩掉洗涤液，在吸水纸上拍干，再重复洗涤4次。
第3步：显色：每孔分别加入50uL F试剂（显色液）和50uL G试剂（显色液），摇匀，将反应板放入37℃恒温培养箱中显色15分钟（可以F和G混合加100uL，现用现配）。
黄曲霉毒素B1检测试剂盒操作方法
黄曲霉毒素B1检测试剂盒操作方法2/50 ppb一、样品的准备/萃取1. 获取具有代表性的样品,使用Romer 系列II型研磨机研磨，使至少95%的研磨样品能够通过20目筛网，彻底混合并对样品进行二次取样。
2. 称取4g 研磨样品于干净并可密封的广口瓶中。
加入20mL 70/30（v/v）甲醇/水萃取溶液并密封广口瓶.注意：样品与萃取溶液比例应为1:5（w:v），振荡或均质3分钟。
3. 静置样品，用滤纸过滤萃取上清液，收集待检滤液。
4。
用提供的分析缓冲液对滤液进行1:2稀释。
例如，将50μL待检滤液加入50μL分析缓冲液中，混匀准备进行随后检测.二、检测步骤1．将适量的标记颜色的稀释孔条放入微孔板架上，稀释条孔的数目需使每个标准品（0，2, 5，20 & 50ppb)或样品能够对应一个稀释孔。
2．将等量的有抗体包被的微孔条放入微孔板架上，未使用的有抗体包被的微孔条需放回装有干燥剂的原铝箔袋内并密封保存。
3．按照240 μL/孔或2 mL/条的体积计算所需的酶联偶合物用量。
从绿色瓶盖的瓶中量取所需用量的酶联偶合物至一个酶联偶合物试剂槽中（如多道移液器所用的试剂槽）。
使用8道移液枪移取100μL酶联偶合物至每个稀释孔中。
4．使用单道移液枪，移取50μL标准品和样品至已装有100μL酶联偶合物的稀释孔中.用移液枪反复吸送3次以充分混合孔中液体.每当移取一个标准品或样品时，单道移液枪必需更换上新吸头。
注意确保最后将吸头中的液体排空。
5．使用换有全新吸头的8道移液枪,快速移取每个稀释孔中的液体各100μL至相应的有抗体包被的微孔中。
室温下放置15分钟。
注意不要摇动微孔板去混匀孔中液体，以免引起孔与孔之间的污染。
6．将孔中的液体甩入水槽中,用去离子水或蒸馏水冲洗每个孔,然后将微孔中的水甩入水槽中。
如此方式反复冲洗5次。
注意在冲洗过程中不要将微孔条从微孔板架上取下,每条微孔条带应被固定在微孔板架上.7．冲洗完毕后，将几张吸水纸巾放置在平整的桌面上，使微孔板倒置扣击纸面，以尽可能地将残留的水分排出.用干布或纸巾擦干微孔板底反面的水珠。
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1.目的：建立黄曲霉毒素测定法(一部)检验标准操作规程，并按规程进行检验，保证检验操作规范化。
2.依据：
2.1. 《中华人民共和国药典》2010年版一部。
3.范围：适用于所有用黄曲霉毒素测定法(一部)测定的供试品。
4.责任：检验员、质量控制科主任、质量管理部经理对本规程负责。
5.正文：
5.1. 本法系用高效液相色谱法（附录Ⅵ D）测定药材、饮片及制剂中的黄曲霉
毒素（以黄曲霉毒素B
1、黄曲霉毒素B
2
、黄曲霉毒素G
1
和黄曲霉毒素G
2
总量计），
除另有规定外，按下列方法测定。
5.1.1. 色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-乙腈-水（40：18：42）为流动相，流速每分钟0.8ml；采用柱后衍生法检测，衍生溶液为0.05%的碘溶液（取碘0.5g，加入甲醇100ml使溶解，用水稀释至1000ml制成），衍生化泵流速每分钟0.3ml，衍生化温度70℃；以荧光检测器检
测，激发波长γ
ex =360nm（或365nm），发射波长γ
em
=450nm。
两个相邻色谱峰的
分离度应大于1.5。
5.1.2. 混合对照品溶液的制备：精密量取黄曲霉毒素混合标准品（黄曲霉毒素
B 1、黄曲霉毒素B
2
、黄曲霉毒素G
1、
黄曲霉毒素G
2
标示浓度分别为1.0μg/ml、
0.3μg/ml、1.0μg/ml、0.3μg/ml）0.5ml，置10ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，作为储备液。
精密量取储备液1ml，置25ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，即得。
5.1.3. 供试品溶液的制备：取供试品粉末约15g（过二号筛），精密称定，加入氯化钠3g，置于均质瓶中，精密加入70%甲醇溶液75ml，高速搅拌2分钟（搅拌速度大于11000转/分钟），离心5分钟（离心速度2500转/分钟），精密量取上清液15ml，置50ml量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜（0.45μm）滤过，量取续滤液20.0ml，通过免疫亲和柱（AflaT-est@P），流速每分钟3ml，用水20ml洗脱，洗脱液弃去，使空气进入柱子，将水挤出柱子，再用适量甲醇洗脱，收集洗脱液，置2ml量瓶中，并用甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。
5.1.4. 测定法：分别精密量取上述混合对照品溶液5μl、10μl、15μl、20μl、25μl，注入液相色谱仪，测定峰面积，以峰面积为纵坐标，进样量为横坐标，绘制标准曲线。
另精密量取上述供试品溶液20～25μl，注入液相色谱仪，测定
峰面积，从标准曲线上读出供试品中相当于黄曲霉毒素B
1、黄曲霉毒素B
2
、黄曲
霉毒素G
1、黄曲霉毒素G
2
的量，计算，即得。
5.2. 【附注】。
5.2.1. 本实验应有相应的安全、防护措施，并不得污染环境。
5.2.2. 残留有黄曲霉毒素的废液或废渣的玻璃器皿，应置于专用贮存容器（装有10%次氯酸钠溶液）内，浸泡24小时以上，再用清水将玻璃器皿冲洗干净。
（注：本资料素材和资料部分来自网络，仅供参考。
请预览后才下载，期待你的好评与关注！）。