Mallory三色染色试剂盒

特殊染色

结缔组织染色法Mallory三色染色法：胶原和网状纤维蓝色，软骨、淀粉样变物质淡蓝色，神经胶质纤维、肌纤维和酸性颗粒红色，髓鞘和红细胞橘红色。

2.Masson三色染色法：胶原纤维绿色，肌纤维红色，红细胞橘红色。

鉴别胶原纤维和肌纤维最宜采用的方法。

3.三联染色法：胶原纤维红色，网状纤维黑色，弹性纤维绿色，肌肉和红细胞淡黄色。

二.胶原纤维染色1.Van Gieson（V.G）苦味酸-酸性品红法：胶原纤维鲜红色，肌纤维、细胞质和红细胞黄色，胞核蓝褐色。

与胶原纤维染色相比的缺点是：易褪色和对比度差。

2.天狼星红（Sirius Red）苦味酸染色法：胶原纤维红色，细胞核绿色，其他黄色。

在偏光显微镜下可见4种胶原纤维。

三.网状纤维染色：包括：Gomori和James。

Gomori银氨染色法：网状纤维黑色，胶原纤维红色。

鉴别诊断中的应用：1）癌和肉瘤的鉴别。

2)恶性淋巴瘤和组织细胞肉瘤。

3）血管内皮细胞瘤和外皮细胞瘤。

4）黏液纤维瘤和黏液肉瘤。

四.弹性纤维染色：效果最好的固定液是：甲醛生理盐水。

Gomori醛复红染色法：弹力纤维深紫色，黏液紫色（肥大细胞颗粒、胰腺B细胞颗粒、垂体B细胞均能同时着色），背景不同程度的黄色。

1）配制后需在室温静置1-2日。

2）是碱性品红加入三聚乙醛和盐酸配制而成。

3）醛复红所谓的成熟是颜色为深紫色。

3)可使胃主细胞着色。

5）应放置在冰箱内保存。

五.显示弹性、胶原纤维的双重组合染色法：维多利亚蓝+丽春红S：弹性纤维蓝绿色，胶原纤维红色，背景淡黄色。

六.横纹肌组织染色：Mallory磷钨酸苏木精染色法(PTAH)：胞核、纤维、肌肉、神经胶质纤维、横纹肌等均蓝色；胶原、网状纤维、骨基质及骨黄色或玫瑰红色。

1）要在室温下成熟。

2）可使用高锰酸钾促使PATH成熟。

3）乙醇分化时要保存一定的红色。

4）染色后用无水乙醇快速脱水，冷风稍干燥后封固。

七.糖类染色：过碘酸的作用是氧化。

过碘酸-Schiff（PAS）染色法：糖原及其他PAS反应阳性物质红色，细胞核蓝色。

Mallory氏三色染色法

Mallory氏三色染色法
[固定] Zenker氏液及Bouin氏液固定最好。

甲醛固定的组织必须经过二次固定，以重铬酸钾—醋酸液处理15—60分钟。

[试剂]
Lugol氏碘液
Mallory氏苯胺蓝液：
苯胺蓝 0.5g
橘黄G 2.0g
1%磷钨酸水溶液 100ml
配制：苯胺蓝以1%磷钨酸液50ml水浴加热溶解；橘黄G以1%磷钨酸液50ml加热溶解, 冷却后分别过滤后混合.
0.5%酸性复红水溶液
[操作步骤]
1．石蜡切片脱蜡至水。

2．Lugol氏碘液脱汞盐结晶，充分水洗。

3．明矾苏木精常规染色，分化，水洗。

4．0.5%酸性复红水溶液染1—5分钟。

5．自来水洗30秒钟或较长，直至纤维将近无色为止，蒸馏水洗。

6．Mallory氏苯胺蓝液染约20分钟（勿水洗）。

7．直接以95%酒精分化（镜下控制）。

8．无水酒精脱水，二甲苯透明，封固。

[结果]胶原纤维，网状纤维，盐基性颗粒呈深蓝色；软骨，粘液，淀粉样物质呈淡蓝色；纤维素，神经胶质原纤维酸性颗粒呈红色；红细胞，髓鞘呈橘黄至橙红色；细胞核呈紫蓝色。

Masson三色染色试剂盒说明书

Masson三色染色试剂盒说明书Masson 三色染色试剂盒说明书（南京森贝伽生物科技有限公司）【产品介绍】Masson 染液是显示组织中纤维染色的主要方法之一，是胶原纤维染色权威而经典的技术方法。

该法染色原理与阴离子染料分子的大小和组织的渗透有关。

分子的大小由分子量来体现，小分子量易穿透结构致密、渗透性低的组织，而大分子量则只能进入结构疏松的、渗透性高的组织。

淡绿分子量最大。

因此Masson 染色肌纤维红色，胶原纤维绿色，主要用于区分胶原纤维和肌纤维。

【用途】主要用于胶原纤维染色。

【产品特点】①染色稳定；②分化时间短，1～2 分钟；③色彩清晰鲜艳；④适用范围广，适宜于组织的石蜡切片、冰冻切片等染色；⑤所染切片保存时间长且不易褪色。

固定：甲醛升汞或甲醛盐溶液。

切片：所有类型。

【产品组成】编号名SBJ0126（7×50ml）SBJ0126（7×100ml）SBJ0126（7×500ml）Storage试剂（A）A1：苏木素染色液25ml 100ml 500ml RTA2：三氯化铁水溶液25ml 100ml 500ml RT 临用时取A1、A2 等量混合，成为试剂（A），不可预先配制后放置，因染色液的色素根与铁会化合，形成不容性沉淀，等量混合后，一般24h 后失去染色力。

试剂（B）: 盐酸乙醇分化液50ml 100ml 500ml RT 试剂（C）: 氨水水溶液50ml 100ml 500ml RT 试剂（D）: 丽春红酸性品红染色液50ml 100ml 500ml RT 试剂（E）: 乙酸水溶液50ml 100ml 500ml RT 试剂（F）: 磷钼酸水溶液50ml 100ml 500ml RT 试剂（G）: 苯胺蓝染色液50ml 100ml 500ml RT 【参考操作步骤】1、切片脱蜡至水。

2、试剂（A）染色5min～10min。

3、试剂（B）分化、水洗，试剂（C）返蓝、水洗。

Gomori 醛复红染色液说明书

Gomori醛复红染色液说明书
货号M042
原理:
此法发表于1900年,除主要用于显示弹力纤维外,同时还能清晰地显示出粘液物质及肥大细胞、胰岛细胞、脑垂体细胞等，故较为常用。

组织固定：
以甲醛生理盐水液（中性甲醛）固定染色效果最佳。

保存条件:
4℃保存，半年有效。

试剂盒组成:
实验流程：
1.石蜡切片3-5um，脱蜡至水洗；
2.用Lugol氏碘液处理5-10min;
3.充分水洗3-5min；
4.用硫代硫酸钠水溶液脱碘5min；
5.流水冲洗3-5min；
6.用70%酒精稍洗；
7.用醛复红染液染色5-10min；
8.用70%酒精洗去多余染液至胰岛细胞清晰为止；
9.水洗2-3min；
10.用橘黄G染液染色10-20Sec;
11.稍水洗1-2min；
12.用95%酒精及无水酒精脱水，二甲苯透明，中性树胶封固。

染色结果：
弹力纤维呈深紫色，粘液呈紫色（肥大细胞颗粒、胰岛B细胞颗粒、脑垂体B细胞均能同时着色），背景呈不同程度的黄色或者其他复染的颜色。

注意事项：
1.Gomori醛复红染色液是一种进行性染色，染色过程中要注意观察，当颜色到底适宜程
度时应立即终止染色，否则可以通过增加或减少染色时间，控制各种不同的组织成分的色调。

病理学技术—特殊染色最最全总结(均配图)

病理学技术—特殊染色最最全总结(均配图)结缔组织染色法1.1 Mallory三色染色法Mallory三色染色法可用于胶原和网状纤维的染色，其中蓝色代表胶原和网状纤维，淡蓝色代表软骨、粘液和淀粉样变物质，红色代表神经胶原纤维、肌纤维和酸性颗粒，橘红色代表髓鞘和红细胞。

图表A1.1展示了Mallory三色染色法的效果，其中A组排列规则。

1.2 Masson三色染色法Masson三色染色法可用于胶原纤维和肌纤维的染色，其中绿色代表胶原纤维，红色代表肌纤维，橘红色代表红细胞。

图表B1.2和C1.2展示了Masson三色染色法在胃癌组织和血管平滑肌中的应用。

1.3 显示胶原、网状和弹性纤维的三联染色法三联染色法可用于显示胶原、网状和弹性纤维，其中红色代表胶原纤维，黑色代表网状纤维，绿色代表弹性纤维，淡黄色代表肌肉和红细胞。

图表D展示了Weigert间苯二酚法的效果。

胶原纤维染色法2.1 天狼星红苦味酸染色法天狼星红苦味酸染色法可用于胶原纤维的染色，其中红色代表胶原纤维，绿色代表细胞核，黄色代表其他物质。

天狼星红苦味酸染色法在偏光显微镜下观察，Ⅰ型呈强双折光性，呈黄色或红色纤维，Ⅱ型呈弱双折光，呈多种色彩疏网状分布，Ⅲ型呈弱双折光，呈绿色的细纤维，Ⅳ型呈弱双折光的基膜，呈淡黄色。

图表E展示了胶原纤维的染色效果，以及XXX.)苦味酸-酸性品红法在心肌梗塞后2个月的应用。

2.2 Van Gieson（V.G）苦味酸-酸性品红法Van Gieson（V.G）苦味酸-酸性品红法可用于胶原纤维的染色，其中鲜红色代表胶原纤维，黄色代表肌纤维、细胞质和红细胞，蓝褐色代表胞核。

图表E展示了胶原纤维的染色效果，以及XXX.)苦味酸-酸性品红法在心肌梗塞后2个月的应用。

三、网状纤维染色3.1 XXX-Sweets银氨染色法XXX-Sweets银氨染色法可用于网状纤维的染色，其中黑色代表网状纤维，红色代表胞核（核固红复染），黄棕色代表胶原纤维，淡红色代表细胞质（红液复染）。

Masson三色染色液G1006

Masson 三色染色液30ml+20ml*5RT产品简介：由Mallory 三色染色改造，利用两种或三种阴离子染料混合一起或先后作用完成染色，与阴离子染料分子的大小和组织的渗透性有关。

根据组织不同的渗透性能，选择分子大小不同的阴离子的染料进行染色，便可把不同组织成分显示出来。

包装内容：产品货号产品名称规格G1006-1重铬酸钾媒染剂30ml G1006-2Weigert 铁苏木素A 液20ml G1006-3Weigert 铁苏木素B 液20ml G1006-4丽春红酸性品红染液20ml G1006-5磷钼酸溶液20ml G1006-6苯胺蓝染液20ml保存条件：室温保存，有效期1年。

操作说明：1、石蜡切片脱蜡至水：依次将切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-无水乙醇Ⅰ5min-无水乙醇Ⅱ5min-75%酒精5min ，自来水洗。

2、重铬酸钾染色：切片入重铬酸钾浸泡过夜，自来水洗。

3、铁苏木素染色：铁苏木素A 液与B 液等比混合成铁苏木素染液，切片入铁苏木素3min ，自来水洗，盐酸酒精溶液分化，自来水冲洗。

4、丽春红酸性品红染色：切片入丽春红酸性品红浸染5-10min ，自来水漂洗。

5、磷钼酸染色：磷钼酸水溶液浸染1-3min 。

6、苯胺蓝染色：磷钼酸之后不用水洗，直接入苯胺蓝染液染3-6min 。

7、分化：切片用1%冰醋酸分化，两缸无水乙醇脱水。

8、透明封片：切片放入第三缸无水乙醇5min ，二甲苯5min 透明，中性树胶封片。

9、显微镜镜检，图像采集分析。

染色结果：胶原纤维、粘液、软骨呈蓝色。

弹力纤维呈棕色。

肌纤维、纤维素和红细胞染红色。

细胞核染蓝黑色。

G 1006注意事项：1、Weigert铁苏木素分A、B两液，临用前将两液等比例混合使用。

不宜预先混合，否则容易氧化沉淀而失去染色力。

2、重铬酸钾染完后水洗要稍快，切片洗干净即可。

3、根据切片的数量对铁苏木素染液进行更换，也可以现配现用；4、丽春红的染色程度要控制好，胶原部分不能是红色或者太红，会影响后续苯胺蓝的着色；5、冰醋酸分化苯胺蓝的过程中，若是分化过度，胶原蓝色太浅，若分化不足，易与丽春红的颜色叠加呈紫蓝色。

河南省2016年上半年执业助理医师《儿科学》：新生儿败血症感染途径考试试题

河南省2016年上半年执业助理医师《儿科学》：新生儿败血症感染途径考试试题一、单项选择题（共23题，每题的备选项中，只有 1 个事最符合题意）1、Mallory三色染色法分别将胶原纤维和网状纤维染成的颜色是A．胶原纤维呈蓝色，网状纤维呈红色B．胶原纤维呈绿色，网状纤维呈黄色C．胶原纤维和网状纤维均呈橘红色D．胶原纤维和网状纤维均呈黄色E．胶原纤维和网状纤维均呈蓝色2、血栓闭塞性脉管炎的特征是A．没有间歇性跛行B．游走性血栓性浅静脉炎C．累及内脏D．肢体皮肤正常E．与酒精中毒有关3、肿物穿刺取材室的基本设施不包括A．室内紫外线消毒设备B．穿刺用器械和器械柜C．石蜡切片机D．用于实施穿刺术的检查床、椅E．穿刺、急救用药物和药品柜4、免疫组织化学染色直接法的特点是A．将荧光素或酶标记在第一抗体上B．将荧光素或酶标记在第二抗体上C．无须标记第一抗体和第二抗体D．敏感性高E．特异性差、非特异染色强5、女性，32岁。

便秘多年，反复发作尿路感染，多次中段尿培养为大肠杆菌生长，夜尿增多。

尿检蛋白(±)，白细胞5～10/HP，红细胞3～5/HP，尿渗透压下降，临床诊断慢性肾盂肾炎，已行正规治疗。

下列哪项最不具有预防复发的意义____A．继续抗菌治疗B．禁用肾毒性抗生素C．保持大便通畅D．多饮水E．注意经期卫生6、肺根部不包括A．气管末端B．主支气管C．淋巴管D．神经E．肺静脉7、医德评价的意义应除外A．医务人员满足自我心理需求的手段B．医务人员行为的监视器和调节器C．维护医德原则的重要保障D．维护医德规范的重要保障E．使医德原则、规范转化为医德行为的中介和桥梁8、复合性溃疡的发病机理主要是A．十二指肠液反流，胃黏膜屏障受损，氢离子回渗所致B．幽门排空障碍引起胃窦部潴留，胃泌素增加所致C．壁细胞总数增加所致D．神经-内分泌系统功能紊乱E．遗传因素9、前列腺增生排尿困难的程度主要决定于A．前列腺的大小B．患者年龄C．增生的部位D．是否癌变E．是否钙化10、青年男性，2天前左耳后区疼痛，午睡后突然口角向右偏斜，查左额纹浅，闭目无力，左鼻唇沟浅，伸舌居中。

病理学技术——特殊染色最全总结

病理学技术——特殊染色最全总结特殊染色是病理学中常用的一种技术手段，用于染色并可视化细胞、组织或病理标本中特定的结构、细胞成分或病理损伤，从而帮助诊断人员更准确地判断疾病类型和病理变化程度。

特殊染色的种类繁多，下面将对一些常见的特殊染色进行全面总结。

一、银染色法银染色法是通过化学反应使待染物质与银盐结合，生成黑色或褐色沉淀，并在显微镜下观察变化。

常见的银染色方法有：Reticulin（網狀纖維）染色、Gomori银染色、Grocott-Methenamine银染色。

二、PAS染色PAS染色（Periodic Acid-Schiff染色）是一种常见的特殊染色技术，用于检测糖原以及其他多糖类物质。

通常使用的PAS染色是将待染物标本与过氧化铬酸溶液（Periodic Acid）处理后再使用Schiff试剂进行染色的方法。

PAS染色为酸性物质染成红色，大多为胞浆染色。

常见的应用包括鉴别肝细胞变性、神经纤维、肾小管等结构。

三、 Masson三色染色法Masson三色染色法是一种多彩染色方法，通过染色剂的组合可染出细胞核、胶原纤维和细胞质等不同组织成分。

Masson三色染色方法包括酸性区域以绿色染色显示胶原纤维，细胞核以黑色或暗蓝色染色显示，胞质以红色染色显示。

该染色法在组织纤维化、炎症反应等病变的检测中应用广泛。

四、Mallory三色染色法Mallory三色染色法和Masson三色染色法类似，可以用于显示胶原纤维、细胞核和胞质等组织成分。

其区别在于Mallory三色染色法标本在染色前需用盐酸处理，使染色剂更易于沉积在纤维上，能更清晰地显示组织纤维结构。

五、Giemsa染色Giemsa染色通常用于血液和骨髓涂片的染色，并可以显示细胞核、染色质和胞质等成分。

Giemsa染色法有多种方法，如Giemsa-Eosin染色法、Giemsa-Wright染色法等，可根据需要选用。

六、von Kossa染色法von Kossa染色法用于检测组织中的钙盐沉积，如血管壁的钙化、尿路结石等。

Masson三色染色试剂盒甲苯胺蓝

Masson 三色染色试剂盒（甲苯胺蓝）说明书修订日期：2018.07.31Cat number：KGMST-8004Store at 2-8℃ for 12 monthsFor Research Use Only（科研专用）【适用范围】Masson 三色染色试剂盒主要用于结缔组织染色。

用于判定各种组织、器官的病变程度与修复情况，以不同色调显示与区分某些非结缔组织及物质成分；如显示与区分肌肉及其肿瘤组织的正常或异常成分。

尤适用于软组织肿瘤的鉴别诊断。

【主要成分】【染色步骤】1、切片脱蜡处理至水。

2、滴加 1 滴（50-100µl）苏木素染色液（试剂 A）染色 5-10 分钟。

蒸馏水冲掉染液。

3、蒸馏水或自来水冲洗 2-5 分钟。

4、滴加 1 滴（50-100µl）复合染色液（试剂 B）染色 5 分钟。

5、蒸馏水或自来水冲洗一下（2-3 秒，冲掉染液即可）。

6、滴加 1 滴（50-100µl）磷钼酸（试剂 C）染色 1 分钟。

7、甩干或自然晾干。

8、滴加 1 滴（50-100µl）甲苯胺蓝染色液（试剂 D）染色 5min 左右。

9、蒸馏水或自来水冲洗一下（2-3 秒，冲掉染液即可）。

10、放入烘箱（50－60 摄氏度）烘干。

中性树胶封片。

【结果】胶元纤维、黏液、软骨、神经纤维呈蓝色；肌肉、弹力纤维呈红色；神经轴索呈粉红色；纤维素呈紫红色；红血球呈橘红色。

细胞核呈蓝紫色。

【注意事项】1、不同的固定液或固定时间以及不一样的组织，染色效果可有差异，要根据显微镜下观察来掌握染色或分化时间。

2、染色液必须充分淹盖组织。

3、每次染色宜用阳性切片作对照。

【有效期】12 个月仅供研究、不用于临床诊断。

各种组织染色方法大全主要内容结缔组织多色染色法胶原纤维染色

各种组织染色方法大全主要内容：结缔组织多色染色法胶原纤维染色法网状纤维染色法弹力纤维染色法第一节结缔组织多色染色法一、Mallory三色染色法1. 试剂配制（1）重铬酸钾液重铬酸钾2.5g，醋酸5ml，蒸馏水95ml （2）苯胺蓝桔黄G液苯胺蓝0.5g，桔黄G2g，磷钨酸1g，蒸馏水100ml（3）酸性复红液酸性复红0.5g，蒸馏水100ml2.染色步骤（1）中性甲醛液固定组织，石蜡切片，常规脱蜡至水。

（2）重铬酸钾液10min。

（3）蒸馏水冲洗2min，蒸馏水2次。

（4）酸性复红液2min，蒸馏稍洗。

（5）苯胺蓝液20min，95%乙醇快速分化。

（6）直接用无水乙醇脱水，二甲苯透明，中性树胶封固。

3.结果胶原和网状纤维呈蓝色，软骨、粘液、淀粉样变物质呈淡蓝色，神经胶质纤维、肌纤维和酸性颗粒呈红色，髓鞘和红色呈桔红色。

4.注意事项（1）酸性复红液易溶解于水，肉眼观察切片上保留一定的红色。

（2）苯胺蓝液染色后，用95%乙醇分化时，须用显微镜观察掌握。

（3）对陈旧的固定标本，其染色效果较差，可增加染色时间。

（4）另张切片，可同时作胶原纤维对照染色而进行鉴别组织成分。

二、Masson三色染色法1.试剂配制（1）Masson复合染色液酸性复红1g，丽春红2g，桔黄G2g，0.25%醋酸300ml。

（2）亮绿染色液高绿SF0.1g，0.2%醋酸100ml。

2.染色步骤中性甲醛液固定组织，石蜡切片，常规脱蜡至水。

（1）Masson复合染色液5min。

（2）0.2%醋酸水溶液稍洗。

（3）5%磷钨酸5-10min。

（4）0.2%醋酸水溶液浸洗2次。

（5）亮绿染色液5min，0.2%醋酸水洗2次。

（6）无水乙醇脱水，二甲苯透明，中性树胶封固。

3.结果胶原纤维呈绿色，肌纤维呈红色，红细胞呈桔红色。

4.注意事项（1）Masson复合染色液，经磷钨酸分化时须用显微镜控制肌纤维清晰为止。

（2）亮绿染料可用苯胺蓝替换，可用来作为对比观察染色的效果。

三色染色实验服务安全操作及保养规程

三色染色实验服务安全操作及保养规程简介三色染色实验是一种常见的细胞学实验，用于染色细胞的染色体和细胞器，进一步观察细胞结构的变化和功能的活动。

在进行三色染色实验时，需要特别注意实验过程中的化学品及设备的安全操作，以及实验后的设备保养工作。

本文档旨在为实验人员提供三色染色实验安全操作以及设备保养规程，以确保实验过程的安全性和设备的使用寿命。

三色染色实验安全操作规程1. 实验前准备在进行三色染色实验之前，需要进行一系列的准备工作，包括试剂的准备、设备的调试、试剂品质的检测等。

1.1 试剂准备根据实验方案所需的试剂及其浓度，准备相应试剂和稀释液。

同时需检查试剂是否过期，有无变质或污染。

1.2 设备调试检查三色染色实验设备的工作状态和功能是否正常，调试并确认设备参数符合实验要求，如温度、压力等。

1.3 试剂品质检测采用内标法对所采购到的每批试剂进行品质检测并留有记录，严格按照实验方案规定的试剂用量和比例进行混合以避免试剂污染。

2. 实验中的安全操作在进行三色染色实验的过程中，需要注意化学品的安全操作，以保障实验人员的身体健康和实验的顺利进行。

2.1 试剂使用在使用试剂时，需要佩戴手套以避免皮肤接触化学品，同时在处理液体时要注意避免产生气溶胶，避免吸入有害气体，同时注意放置和处理化学垃圾，避免污染环境。

2.2 设备操作在进行三色染色实验时，需要根据设备使用手册操作设备，严格按照实验方案场景参数要求操作设备，同时避免设备损坏，提高设备的使用寿命。

3. 实验后的安全操作在完成三色染色实验后，需要进行一些后续的安全操作，以确保化学品对环境和实验人员的影响降到最低。

3.1 试剂处置在实验完成后，要按照相关规定进行试剂的处理，避免化学品的污染和环境的污染。

3.2 设备保养及时对设备进行维护和保养，避免设备因为未及时保养而损坏，为设备换配件时遵照厂家原配件规格进行更换，维护设备的使用寿命并保证实验的精度和稳定性。

三色染色设备的保养规程在保证实验安全操作后，设备的保养工作必不可少，以下是三色染色设备保养规程：1. 清洗消毒三色染色实验设备在使用过程中，需要经常清洗消毒，以确保设备内部和外部环境的干净和卫生。

改良Gomori三色染色液使用说明书

改良Gomori三色染色液使用说明书货号：G3510规格：4×50ml/4×100ml保存：RT避光，6个月有效。

产品内容：名称4×50ml4×100ml Storage试剂(A):Weigert铁苏木素A1:Weigert染液A25ml50ml RT避光A2:Weigert染液B25ml50ml RT避光临用前，取A1、A2等量混合即为Weigert铁苏木素染色液，不宜提前配制。

试剂(B):酸性分化液50ml100ml RT试剂(C):Gomori染色液50ml100ml RT避光试剂(D):Gomori分化液50ml100ml RT产品简介：Masson三色染色又称马松染色，是结缔组织染色中最经典的一种方法，是胶原纤维染色权威而经典的技术方法。

所谓三色染色通常是指染胞核和能选择性的显示胶原纤维和肌纤维。

该法染色原理与阴离子染料分子的大小和组织的渗透有关：分子的大小由分子量来体现，小分子量易穿透结构致密、渗透性低的组织；而大分子量则只能进入结构疏松的、渗透性高的组织。

Gomori染色液采用媒染剂和促染剂同时染色，可使结缔组织中的多种成分着色。

改良Gomori三色染色液可将胶原纤维染成绿色，肌纤维染成红色，细胞核染成蓝色。

操作步骤(仅供参考)：1、新鲜肌肉组织取材后立即进行冰冻切片，切片厚度为10-15µm。

2、用配制好的Weigert铁苏木素染色5-10min。

水洗。

3、流水冲洗5-10min，镜下观察。

如果染色过深，可用酸性分化液分化数秒（镜下观察）。

4、水洗返蓝，蒸馏水洗2-3次。

5、加入Gomori染色液染色20-40min，流水冲洗。

6、在上述操作过程中按蒸馏水：Gomori分化液=4:1比例配制Gomori分化工作液。

7、用Gomori分化工作液洗30s-90s，以镜下观察适当为宜，流水冲洗。

8、95%乙醇快速脱水，无水乙醇脱水3次，每次5-10s。

病理学技术—特殊染色最最全总结(均配图)

结缔组织染色法1.1 Mallory三色染色法蓝色：胶原和网状纤维淡蓝色：软骨、粘液、淀粉样变物质红色：神经胶原纤维、肌纤维、酸性颗粒橘红色：髓鞘、红细胞图表 A 1.1.Mallory染色，显示胶原纤维，A组排列规则1.2. Masson三色染色法绿色：胶原纤维红色：肌纤维橘红色：红细胞图表 B 1.2 Mssson三色法图表 C 1.2.Masson三色染色胃癌组织中血管平滑肌1.3. 显示胶原、网状和弹性纤维的三联染色法红色：胶原纤维黑色：网状纤维绿色：弹性纤维淡黄色：肌肉、红细胞图表 D 4.Weigert间苯二酚法二、胶原纤维染色法2.2. Van Gieson（V.G）苦味酸-酸性品红法鲜红色：胶原纤维黄色：肌纤维、细胞质、红细胞蓝褐色：胞核图表E 2.胶原纤维，Van Gieson(V.G.)苦味酸-酸性品红法图心肌梗塞myocardial infarction：心肌梗塞后2个月，van Gieson 染色, 坏死心肌被染成红色的纤维组织所代替，黄色区域为残留的心肌纤维。

2.1 天狼星红（Sirius red）苦味酸染色法(参照上图) 红色：胶原纤维绿色：细胞核黄色：其他3.1 Gordon-Sweets银氨染色法（梅花开枝图，金色阳光伴树枝）黑色：网状纤维红色：胞核（核固红复染）黄棕色：胶原纤维淡红色：细胞质（红液复染）图表 F 3.Gordon-Sweets氢氧化银氨液浸染法3.2 Gomori氏银氨液配制法图表G Gomori氏银氨液配制法Gomori醛复红染色法*甲醛生理盐水液固定的染色效果最佳图表H 4.GOMORI醛复红染色法五、显示弹性、胶原纤维的双重组合染色法蓝绿色：弹性纤维红色：胶原纤维黄色：背景图表I 4.Weigert间苯二酚法六、肌肉组织染色△横纹肌组织染色Mallory磷钨酸苏木精染色法（PTAH）蓝色：胞核、纤维、肌肉、神经胶质纤维、纤维蛋白、横纹肌黄色或枚红色：胶原纤维、网状纤维软骨基质、骨微紫色：粗弹性纤维（有时）紫蓝色或棕黄色：缺血缺氧早期病变的心肌图表J 6.1.磷钨酸苏木素法图表K 6.1.磷钨酸苏木素染色液△早期心肌病变组织染色1.Nagar-Olsen染色法（1974年）红色：缺氧心肌、红细胞黄色或黄棕色：正常心肌蓝色：细胞核图各组小鼠心肌组织Nagar-Olsen染色（光学显微镜, ×200）2.Poley显示缺氧心肌染色法（1964年）红色：缺氧心肌紫色：胞核绿色：其他组织七、糖类染色过碘酸-Schiff（PAS）染色法红色：糖原及其他PAS反应阳性物质蓝色：细胞核图表L 7.胃贲门腺体胞浆呈PAS阳性八、黏液物质（黏多糖）染色1.Mowry阿尔辛蓝过碘酸雪夫（ABPAS）染色法（1956）红色：中性黏液物质蓝色：酸性黏液物质紫红色：混合性黏液物质图表M 8.1.AB-PAS染色结肠粘膜图表N 8.1.胃粘膜组织AB-PAS染色40×：2.爱先蓝（PH2.5）法蓝色：唾液酸、弱硫酸化黏液物质、一般粘液红色：胞核不着色：强硫酸化黏液物质图表O 8.2.爱先蓝（PH2.5）染色液图表P 8.2.爱先蓝法图表Q 8.2.爱先蓝法—3、爱先蓝（PH1.0）法蓝色：含硫酸黏液物质不着色：非硫酸化酸性黏液物质红色：复染后的胞核九、黑色素染色1.Masson-Fontana黑色素银浸染色法黑色：黑色素及嗜银细胞颗粒红色：胶原纤维浅黄色：背景图表R 9.1.Melanin pigment in cells of9.1. malignant melanoma, Fontana-Masson stain.2.Lillie亚铁染色法暗绿色：黑色素浅绿或不着色：背景黄色：肌纤维和背景十、含铁血黄素染色Perls blue（普鲁士蓝）反应显示三价铁蓝色：含铁血黄素浅红色：其他组织图表S 10.普鲁士蓝染色肝脏普鲁士蓝染色呈蓝色的含铁血黄素颗粒大量沉着在肝实质细胞和库普弗细胞内。

Masson三色染色液染色步骤及注意事项

Masson三色染色液染色步骤及注意事项步骤一：预处理1. 切片：将需要染色的组织标本切成厚度约为5um的切片，将切片均匀地放置在已经预先烘干和标记好的玻片上。

2.固定：用10%中性缓冲福尔马林固定切片，固定时间约为24小时。

步骤二：染色1. 染色剂的准备：将Masson三色染色液购买回来后，根据品牌推荐比例稀释至适当浓度。

不同品牌染色液稀释比例可能有所不同，因此以具体品牌的说明为准。

2.染色操作：(1)将切片放入染色盒中，并将染色盒放入水浴中加热，温度为60-70摄氏度，时间为20-30分钟。

(2)将加热后的染色盒取出，用水冲洗2-3分钟，直至明显的污染物被冲走。

(3)将切片置于70%酒精中，时间为5分钟。

(4)在20%盐酸酒精中浸泡1-2秒钟，然后立即将切片漂洗至酸性的第一盐酸酒精。

(5)在酸性的第一盐酸酒精中浸泡30秒至1分钟，然后漂洗至酸性的第二盐酸酒精中。

(6)在酸性的第二盐酸酒精中浸泡30秒至1分钟，然后漂洗至蒸馏水中。

(7)转移到可溶性亮蓝GR中染色5分钟。

(8)快速漂洗后，放入蒸馏水中清洗1-2分钟。

(9)再次转移到1%醋酸中染色1分钟。

(10)最后，在6%石蜡溶液中浸泡5-10分钟。

步骤三：封片1.脱水：将切片放入95%乙醇中，时间为1-2分钟，然后放入绝对乙醇脱水2-3分钟。

2.渗透：将切片放入二氯甲烷中，时间为5分钟，再在房温下放置3-5分钟以充分渗透。

3. 封片：将切片放入500-1000ml锡兰红封片剂中，时间为1-2分钟，然后将切片转到盖玻片上，将封片剂挤满，盖上玻片，压平后放在60摄氏度的烘箱中加热2-3小时。

注意事项：1.操作中应注意个人防护，佩戴手套和口罩，避免接触有害物质。

2.染色过程中要严格控制温度和时间，避免染色过程中出现偏差。

3.在脱水和封片过程中要注意将切片完全浸透，防止切片变形或脱落。

4.染色溶液和液体处理过程中，应注意防止溅溢和污染，保持操作环境清洁。

Mallory染色详细步骤

Mallory 三色染色
一、实验原理
三色染色通常是指染胞核和能选择性的显示胶原纤维和肌纤维。

该染色原理与阴离子染料分子的大小和组织渗透有关：分子的大小由分子量来体现，小分子量易穿透结构致密、渗透性低的组织；而大分子量则只能进入结构疏松的、渗透性高的组织。

二、实验材料
Mallory 试剂盒厂家货号索莱宝G1355
产品组成：
试剂（A）:Mallory染色液A 50ml RT 避光
试剂（B）:Mallory染色液B 50ml RT 避光
试剂（C）:Mallory染色液C 50ml RT 避光
自备材料： 95%乙醇
无水乙醇
二甲苯
中性树脂
操作步骤（仅供参考）：1、石蜡切片常规脱蜡复水。

2、切片入Mallory染色液A染色1-3 min。

3、切片用Mallory染色液B染色2min。

4、切片入Mallory染色液C染色15min。

5、95%酒精分化10-15s(镜下控制)。

6、无水乙醇脱水，二甲苯透明，中性树脂封片。

染色结果：
细胞核、肌纤维呈红色
胶原纤维呈蓝色
红细胞呈橘黄色
注意事项：
1、染色过程中2/3/4步之后均不需水洗，直接进入下一步操作。

2、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

组织细胞特殊染色

1.De Grandi改良硝酸银反应：嗜银细胞颗粒呈棕黑色，胞核呈红色
2.碱性重氮反应：嗜银细胞颗粒呈橘红色至红色，胞核呈蓝色，胞质呈黄色。显示小肠和类癌颗粒
嗜铬细胞染色
1.Giemsa改良染色
嗜铬细胞呈红色至紫红色，皮质细胞呈蓝色，红细胞呈粉红色
2.Wiesel染色法
嗜铬细胞呈黄绿色，胞核呈红色，其他均染成蓝色。
2、地衣红染色法
3、弹性和胶原纤维的双重染色法
弹性纤维呈蓝绿色、胶原纤维呈红色，背景呈淡黄色
肌肉染色
1、（横纹肌）Mallory磷钨酸苏木精染色
细胞核、纤维、肌肉、神经胶质纤维、纤维蛋白、横纹肌等均呈蓝色：胶原纤维、网状纤维软骨基质及骨呈黄色或玫瑰红色：粗弹性纤维有时被染成微紫色，有缺血缺氧早期的心肌呈紫蓝色或棕黄色
2.Weil及Davenport小胶质细胞及少突胶质细胞染色：神经胶质细胞及少突胶质细胞呈黑色，背景呈黄棕色
神经内分泌细胞染色
1.亲银反应：
1：Lillie-Masson二胺银：亲银颗粒细胞呈黑色，胞核呈红色，背景呈淡灰黄色
2.Gomori-Burtner六氨银：亲银细胞呈黑色，背景浅红色
2.嗜银反应
3.Kultshitzky：髓鞘呈蓝色，背景淡黄色
4.Luxol fast blue：髓鞘呈蓝色，核仁紫色，尼氏体呈紫色
5.变色酸2R-亮绿髓鞘染色：髓鞘呈深红色：轴索和间质呈绿色，脱髓鞘纤维不着色
6.Marchui退变髓鞘染色：退变髓鞘呈黑色，背景淡棕色
4.神经胶质细胞染色
1.Cajia星形胶质细胞：原浆性及纤维性星形胶质细胞呈紫黑色
中性甲醛固定
胶原纤维染色
1、（V.G)苦味酸-酸性品红法
胶原纤维呈鲜红色，肌纤维、细胞质和红细胞呈黄色，细胞核呈蓝褐色

物质特染方法结果结缔组织染色法Mallory三色染色法胶原和网状

Perls blue（普鲁士蓝）反应显示三价铁
含铁血黄素蓝色，其他组织浅红色。
胆色素染色
三氯醋酸染色法
胆色素绿色，其他呈复染的红色和黄色。
纤维蛋白染色
MSB染色法
纤维蛋白红色，陈旧性纤维蛋白紫色，细胞核蓝色，红细胞黄色。
Gram甲紫染色法
纤维蛋白蓝黑色，背景红色。
淀粉样物质染色
刚果红染色法
淀粉样物质红色，细胞核蓝色。
Warthin-starry胃幽门螺杆菌染色法
棕黑色或黑色，背景淡黄色。
螺旋体染色
Gimesa染色法
螺旋体及细菌蓝到淡紫色，细胞质蓝色，红细胞橘黄色。
Ryu碳酸钠碱性复红法
螺旋体红色
病毒包涵体染色
Macchiavello包涵体染色法
包涵体红色，其余组织蓝色。
乙肝表面抗原染色
Shikata地衣红染色法
Jurgens甲紫染色法
淀粉样物质红色或紫红色，细胞核蓝色。
真菌染色
Crocott六胺银染色法
真菌黑褐色，细胞核红色，背景淡绿色。
高碘酸复红染色法
真菌紫红色，红细胞浅黄色。
细菌染色
Gram碱性复红结晶紫染色法
革兰阳性菌蓝色，阴性菌红色，细胞核红色。
Ziehl-Neelsen抗酸杆菌染色法
抗酸杆菌红色，背景灰蓝色。
Van Gieson（V.G）苦味酸-酸性品红法
胶原纤维鲜红色，肌纤维、细胞质和红细胞黄色，胞核蓝褐色。
天狼星红（Sirius Red）苦味酸染色法
胶原纤维红色，细胞核绿色，其他黄色。
网状纤维染色
Gomori银氨染色法
网状纤维黑色，胶原纤维红色。
弹性纤维染色
Gomori醛复红染色法

Ge免疫组织化学染色技术

Mallory三色染色法：染料试剂：苯胺蓝、橘黄G、酸性复红、重铬酸钾、磷钨酸、醋酸免疫组织化学的要紧染色方式第一篇概述免疫组织化学染色法：免疫组织化学染色法是指在抗体上结合萤光或可呈色的化学物质，利用免疫学原理中抗原和抗体间专一性的结合反映，检测细胞或组织中是不是有目标抗原的存在，此方式不只能够用来测知抗原的表现量也可观看抗原所表现的位置。

只若是能够让抗体结合的物质，也确实是具有抗原性的物质包括蛋白质、核酸、多糖、病原体等都可侦测。

染色注意事项：一、直接法二、间接法三、未标记抗体法抗体和酶、荧光素结合后，或多或少的降低了抗体与抗原的结合能力。

有酶桥法和PAP法，但前者短处较多。

PAP法（Peroxidase Antiperoxidase. PAP)PAP复合物（二分子抗体，三分子酶），体积小，稳固，穿透性好特点：较间接法灵敏20~100倍，较前几种方式非特异性染色轻。

四、ABC 法（Avidin-Biotin-Complex Method）Avidin——卵白素，有四个亚单位，每一个亚单位有138个氨基酸，分子两68kD。

一个卵白素分子能与4个分子的生物素结合，大体上不可逆，比抗原抗体结合力大1000000倍，只有在的条件下才能将其分离。

Biotin——生物素，一分子的抗体可结合150个生物素分子，和多种酶结合后，不阻碍催化活性。

四、LAB法（ Labeled Avidin-Biotin）特点：1.灵敏性较PAP法提高20~40倍；2.非特异性染色几乎没有；3.可用于IHC，核酸杂交等五、免疫组织化学染色方式的选择原那么五个“S”原那么特异性间叶组织，上皮组织恶性肿瘤，多克隆抗角蛋白抗体，特异性广鳞状上皮或腺上皮，单克隆抗角蛋白抗体，特异性高；灵敏性灵敏性高，特异性下降，假阳性增加；灵敏性低，特异性高，假阴性增加；简便性选用方式愈简便愈好；平安性(time and money)第二篇：免疫组织化学要紧方式举例步骤取材：要紧来源于活检标本、手术切除标本及尸身解剖标本。