ABO血型正反定型不符与交叉配血不合的原因及其处理方法_杨世明

论著文章编号:1007-8738(2011)07-0812-02ABO 血型正反定型不符与交叉配血不合的原因及其处理方法杨世明*,张勇萍,田 榆,徐 宁,王文婷(第四军医大学唐都医院输血科,陕西西安710038)收稿日期:2011-01-18; 接受日期:2011-04-28作者简介:杨世明(1955-),男(苗族),湖北宣恩人,副主任技师T e:l 029-********;E-m ai:l s hxkysh m@f m .cn*Correspond i ng au t hor[摘要] 目的:探讨引起患者ABO 血型正反定型不符与交叉配血不合的原因及其处理方法,确保输血安全。

方法:应用血型血清学检测方法对A BO 血型正反定型不符及交叉配血不合的血标本进行正反定型、不规则抗体筛选及特异性鉴定、吸收放散试验、唾液血型物质测定等系列检测,分析引起血型正反定型不符及交叉配血不合的原因,为患者选择同型及交叉配血相合的血液进行输注。

结果:在输血前的血型血清学检测中发现ABO 血型正反定型不符及交叉配血不合的血标本468例,其中自身冷抗体132例(28.2%),血型不规则抗体96例(20.5%),血型抗原性减弱68例(14.5%),血型抗体效价减弱60例(12.8%),自身抗体阳性54例(11.5%),血浆蛋白异常18例(3.8%),实验方法学原因16例(3.4%),ABO 血型不合的干细胞移植13例(2.8%),肝素影响9例(1.9%),血标本污染2例(0.4%)。

结论:ABO 血型正反定型不符及交叉配血不合的原因大多数是由自身抗体,不规则抗体,血型抗原抗体减弱及血浆蛋白异常等引起的。

因此对ABO 血型正反定型不符及交叉配血不合的血标本,应采用多种血型血清学检测方法进行互相验证,以保证血型鉴定及交叉配血无误,确保临床输血安全。

[关键词]血型鉴定;抗体鉴定;交叉配血;输血安全[中图分类号]R 457.1 [文献标识码]BABO 血型是临床输血和器官移植中最重要的血型系统,在输血前的血型血清学检测中,准确地进行ABO 血型鉴定、不规则抗体筛选及交叉配血试验,为患者选择不含相应抗原的血液进行输注,是确保临床输血安全和有效的重要措施。

但在输血前的血型血清学检测中,常出现AB O 血型正反定型不符及交叉配血不合的现象。

如果误定患者或供血者的ABO 血型,交叉配血未及时发现有临床意义的血型不规则抗体,误输异型血,就会严重威胁患者的生命安全。

现将468例ABO 血型正反定型不符及交叉配血不合的原因进行分析,并对其处理方法及输血对策进行探讨。

1 材料和方法1.1 材料1.1.1 标本来源 2000-01/2010-10期间在我院住院及门诊的患者。

进行血型血清学检测中,出现血型正反定型不符及交叉配血不合患者468例,男213例,女255例,年龄2d~82岁。

1.1.2 试剂仪器 抗A 、抗B 、抗A +B 、抗H 、抗A 1、抗D 、抗C 、抗c 、抗E 、抗e 血型定型试剂、抗人球蛋白试剂、不规则抗体筛选细胞及谱细胞均由上海血液生物医药有限责任公司提供,反定型红细胞悬液由长春博德生物制品研究所提供(部分由本实验室制备),凝聚胺配血试剂由珠海贝索生物技术有限公司提供,微柱凝胶卡、专用离心机、37 孵育器及其配套试剂由达亚美公司提供。

1.2 方法 用微柱凝胶法进行A BO 正反定型及R h 血型鉴定;用凝聚胺法和微柱凝胶法进行血型不规则抗体筛选及特异性鉴定;吸收放散试验及唾液血型物质测定按参考文献[1]操作;用2-M e 处理被患者自身冷抗体凝集的红细胞;用氯喹放散法检测自身抗体掩盖的同种抗体。

2 结果通过对468例患者血标本进行ABO 正反定型、吸收放散试验、唾液血型物质测定、抗人球蛋白试验、血型不规则抗体筛选及其特异性鉴定等,发现造成ABO 血型正反定型不符及交叉配血不合的主要原因有:自身冷抗体132例(28.2%),血型不规则抗体96例(20.5%),血型抗原性减弱68例(14.5%),血型抗体效价减弱60例(12.8%),自身抗体阳性54例(11.5%),血浆蛋白异常18例(3.8%),实验方法学原因16例(3.4%),A B O 血型不合的干细胞移植13例(2.8%),肝素影响9例(1.9%),血标本细菌污染2例(0.4%)。

3 讨论AB O 血型鉴定和交叉配血可受多种因素的干扰,引起正反定型不符或交叉配血不合。

在进行AB O 血型鉴定和交叉配血时,如果发现正反定型不符及交叉配血不合,应重新抽取血标本并使用质量合格的检测试剂重做一次试验,在排除人为因素和技术原因以后,根据具体情况进行综合分析。

本研究通过正反定型、吸收放散试验、唾液血型物质测定、血型不规则抗体筛选及其特异性鉴定,并在正定型时加做抗AB 、抗A1和抗H 试剂,反定型时加做A1型细胞、A 2型细胞、O 型细胞及自身对照,排除AB O 亚型的干扰,同时在4 、22 及37 孵育,结果表明引起AB O 血型正反定型不符及交叉配血不合的主要原因有:自身冷抗体132例(28.2%),血型不规则抗体96例(20.5%),血型抗原性减弱68例(14.5%),血型抗体效价减弱60例(12.8%),自身抗体阳性54例(11.5%),血浆蛋白异常18例(3.8%),实验方法学原因16例(3.4%),ABO血型不合的干细胞移植13例(2.8%),肝素影响9例(1.9%),血标本细菌污染2例(0.4%)。

本研究根据引起ABO血型正反定型不符及交叉配血不合的原因,采用相应的血型血清学检测方法进行处理。

自身冷抗体:自身冷抗体是影响ABO 血型正反定型不符与交叉配血不合的常见原因。

健康人血清中的冷凝集素效价一般在1 16以下,但在支原体肺炎、传染性单核细胞增多症、自身免疫性溶血性贫血等患者血清中具有高效价的冷凝集素[2]。

可将血清和红细胞分别在37 孵育15m i n,离心观察结果,或用自身红细胞在4 吸收血清后做反定型。

在血标本已凝固的情况下,可用2-M e处理红细胞后再进行ABO正定型。

对一时无法确定AB O血型的患者,如急需输血,可输注交叉配血相合的O 型洗涤红细胞和AB型血浆。

血型不规则抗体:血型不规则抗体的检出率为0.3%~2.0%,是引起交叉配血不合及输血反应的重要原因。

当反定型与O 型细胞出现凝集而自身对照为阴性时,应考虑存在血型不规则抗体的可能性[3],要用筛选细胞和谱细胞进行血型不规则抗体筛选及特异性鉴定,然后选择不含相应抗原的血液进行输注。

血型抗原减弱:白血病、恶性肿瘤等可引起血型抗原性减弱而误定血型[4]。

可加大试剂血清的剂量,在22 或4 延长放置时间再离心观察结果。

或做吸收放散试验、唾液血型物质测定及询问患者以前的血型。

血型抗体减弱:老年人、白血病、骨髓瘤、长期接受免疫抑制剂治疗及丙种球蛋白缺乏症等均可导致患者血型抗体效价减弱或消失,引起反定型困难。

如果只是抗体减弱,反定型时可增加反应时间或加大血清剂量并在4 放置5~10m i n后观察结果。

6个月以内的新生儿血型抗体效价很低,反定型可不凝集或凝集很弱,对新生儿应以正定型为准。

血浆蛋白异常:某些肝脏疾病、多发性骨髓瘤等患者血清中存在大量异常球蛋白[5],某些疾病可引起纤维蛋白增高,右旋糖苷、聚维酮、羟乙基淀粉等易使红细胞发生缗钱状凝集。

可加1滴盐水混匀,假凝集即可消失,如果加盐水后仍不消失,可做抗人球蛋白试验排除假凝集。

自身抗体阳性:自身免疫性血型抗体,是指人体受到自身血型抗原刺激所产生的免疫性抗体,常在自身免疫性溶血性贫血患者的血液中检出,系非特异性自身免疫性血型抗体,可使任何血型的红细胞发生凝集,该抗体既有I g M性质的,也有Ig G 性质的,并有冷抗体和温抗体之分。

I g M性质的冷抗体多存在于冷凝素综合征患者的血液中,I gG性质的冷抗体在阵发性睡眠性血红蛋白尿症患者的血液中多见,I gG性质的温抗体多存在于温型自身免疫性贫血患者的血液中[6]。

可采用抗人球蛋白法,取多个献血员与患者进行交叉配血,选择凝集较弱的洗涤红细胞进行输注。

异基因干细胞移植:ABO血型次侧不合或主次侧均不合的干细胞移植,患者血型抗原转变为供者血型后,血清中未检出相应的抗体,引起ABO血型正反定型不符[7]。

对干细胞移植后AB O血型正反定型不符的患者,应以正定型的结果确定血型,输血时应选择不被患者血清中抗体所凝集的不含相应抗原的红细胞,以及供血者血清中不含相应抗体的血小板或血浆进行输注。

实验方法学的原因:微柱凝胶法是利用微柱凝胶的过滤作用和免疫化学抗原抗体特异性反应,在应用微柱凝胶法检测AB O血型及不规则抗体时,如果血标本抗凝效果不佳,离心时间不够,血标本的中纤维蛋白含量过高,可出现 凝块 而造成假阳性结果。

应采用离心方法去除血标本中的纤维蛋白,再进行检测可排除因纤维蛋白所引起的假阳性。

凝聚胺是带有正电荷的大分子物质,能中和红细胞表面唾液酸组成的负电荷,减少细胞之间的静电斥力,使细胞间距缩短而发生凝集反应。

而肝素在水溶液中具有较强的负电荷,对凝聚胺法交叉配血结果造成干扰[8]。

对用肝素治疗的患者进行交叉配血时,应多加几滴凝聚胺试剂以中和肝素的影响。

血标本污染:血标本受细菌污染,红细胞上的T抗原被激活后与供血者血清中抗T抗体发生凝集反应,引起假阳性结果。

换用干净的试管及生理盐水,抽取新鲜的血标本进行血型鉴定及交叉配血。

参考文献:[1]肖星甫.吸收放散试验及唾液中AB H血型物质的测定.输血技术手册[M].成都:四川科学技术出版社,1992:502-504.[2]杨世明,张勇萍,潘晓莉.冷凝集素综合征的血清学特性及检测方法探讨[J].细胞与分子免疫学杂志,2006,22(4):541-543.[3]杨世明,潘晓莉,张勇萍,等.红细胞血型不规则抗体筛选及其特异性鉴定[J].细胞与分子免疫学杂志,2010,26(4):396-397. [4]屈 林,李景和,刘凤霞.ABO血型抗原减弱所致疑难血型的原因分析及鉴定方法[J].中国输血杂志,2010,23(9):706-708.[5]张勇萍,杨世明,田 榆,等.ABO血型鉴定不相符的影响因素及其预防方法[J].细胞与分子免疫学杂志,2010,26(2):190-191. [6]汪传喜,田兆嵩.AI HA病人的输血前检查和成分输血[J].中国输血杂志,2000,13(1):61-65.[7]杨世明,张勇萍,谢 霞,等.异基因外周血干细胞移植后ABO血型抗原抗体效价的变化[J].细胞与分子免疫学杂志,2010,26(9):933-934.[8]邓丹菲,愈 勇,毛宁舜.30例临床疑难配血原因分析[J].临床血液学杂志(输血与检验),2010,23(6):348-349.。