病理切片的特殊染色方法
特殊染色和组织化学
⒉粘蛋白
在同一种上皮和腺体内常可同时分泌2种 粘液物质,而在同部位的分泌物中两者 的比例和含量都有所不同。
⒉粘蛋白
粘液物质一般具有下列性质: ①对异染性染料具有异染性; ②对碱性染料具有很强的亲和力; ③除胃粘蛋白外,其他粘液遇醋酸时 都会发生沉淀; ④可溶于弱碱性溶液。
2.在心肌病变及其他心血管疾病的研究 用显示糖原的特殊染色,可以观察到由缺 血缺氧所致急性早期心肌坏死病灶内的糖 原明显减少甚至消失,呈均质的浓染状态, 而病灶周围则出现反应性异常糖原增多; 已愈合的心肌梗死灶周围的心肌纤维内可 有糖原颗粒浸润;心肌的横纹肌瘤也有大 量糖原存在。
3.糖原累积病的诊断及研究 用显示糖原的 特染方法可观察到由先天性遗传缺陷引起的 糖原累积病时,心、肝、肾、骨骼肌、单核 吞噬系统等器官内均有大量的糖原堆积。
1、有学者认为从物理学角度看,染色剂和组织 细胞的结合是“溶解”或“吸收”。例如苏丹类染 色剂使脂质着色,就是利用染色剂在脂质中的溶解 度大于在酒精等溶剂中的溶解度这一特性。有些染 色剂是染色剂分子通过渗透和毛细血管作用而被吸 收或沉淀到组织、细胞的小孔中去而着色的‘这种 机制的染色是很少的。
2、另有学者认为染色是染色剂与组织、细胞之间 的化学性结合。如显示含铁血黄素的普鲁士反 应是最典型的例子。
5)蒸馏水洗涤数次。
6)用Schiff试剂浸染5一 10min,如温度低时 可延长浸染时间。
7)倾去Schiff试剂,直 接流水冲洗10min。
8)用明砚苏木素染液浅 染胞核2—3min,过 染时可用o5%盐酸乙 醇液稍分化。
9)流水冲洗5一l0min。
10)乙醇脱水,二甲苯运 明,中性树胶封固。
注意事项
2、类化学方法 有少数方法的染色反应有特 殊性,但机制不明。
病理学特殊染色技术:Gomori醛品红染色法(弹性纤维、肥大细胞)
病理学特殊染色技术:Gomori醛品红染色法(弹性纤维、肥
大细胞)
Gomori醛品红染色法
(弹性纤维、肥大细胞)
试剂:
①醛品红液:酸性品红0.5克,70%酒精99毫升,三聚乙醛(副醛)1毫升
将酸性品红溶于70%酒精,加入鹴2和三聚乙醛,充分溶解,室温放24 48小时自然成熟,溶液呈紫色,4摄氏度冰箱保存2~3朋
②橘黄G液:橘黄G 0.5克,磷钨酸2克,95%酒精100毫升
③Lugol碘液:碘化钾2克溶于蒸馏水20毫升,再加碘1克,完全溶解后,加蒸馏水80毫升
方法:
⑴石蜡切片常规脱蜡至水
⑵碘液5~10分钟,水洗2~3分钟
⑶5%硫代硫酸钠水溶液5分钟,流水冲洗3~5分钟
⑷70%酒精稍洗
⑸醛品红液5~10分钟
⑹70%酒精洗至弹性纤维清晰,水洗2~3分钟
⑺橘黄G液10~20秒,水洗2~3分钟
⑻各级酒精脱水,二甲苯透明,中性树胶封片
结果:
弹性纤维深紫色;
黏液紫色;
肥大细胞颗粒、胰腺B细胞颗粒、脑垂体腺细胞同时着色;
背景黄色。
病理学技术—特殊染色最最全总结
病理学技术—特殊染色最最全总结病理学技术是医学研究领域中的一个重要分支,它利用各种不同的方法和技术,对组织和细胞进行分析和研究。
其中,特殊染色技术是病理学技术中的一个重要组成部分,通过使用不同的染色剂,有助于观察并区分不同的细胞和组织结构,以辅助诊断和研究。
以下是对特殊染色技术的最全总结。
1. PAS染色(Periodic Acid-Schiff染色):PAS染色可以用于检测细胞和组织中的多糖物质,如糖原、粘多糖和黏多糖等。
PAS染色通过一系列的化学反应,将含有醛基的物质氧化,然后与PAS染料反应生成染色物质。
2. 铁染色:铁染色可用于检测细胞和组织中的铁含量,它可以帮助鉴别铁负荷过多或过少的情况。
常用的铁染色方法包括Perls染色和Prussian blue染色。
3.去脂酸和酶染色:去脂酸和酶染色用于检测细胞和组织中的脂质和酶活性。
去脂酸染色通过将组织切片浸泡在油酸中,然后用溴化黄染色,观察脂质的分布情况。
酶染色通过使用特定的染色剂来观察细胞中的酶活性,如碘化物染色用于检测过氧化物酶活性。
4.免疫组织化学染色:免疫组织化学染色是通过使用特异性抗体来检测细胞和组织中的蛋白质和其他分子。
常见的免疫组织化学染色方法包括免疫荧光染色和酶联免疫组化染色。
这些染色技术可以用于确定特定抗原的存在和定位,从而帮助确定疾病的诊断和预后。
5.组织切片染色:组织切片染色是一种常见的特殊染色技术,它可以用于检测细胞和组织中的结构和细胞器。
常用的组织切片染色方法包括伊红染色、苏木素-伊红染色和单色染色等。
6.核酸染色:核酸染色用于检测细胞和组织中的核酸结构和功能,其中最常用的核酸染色方法是荧光原位杂交(FISH)和DAPI染色。
荧光原位杂交可以用来检测染色体异常和基因重排等。
7.肉眼可见染色:肉眼可见染色是一种用于检测显微镜下不易观察到的细胞和组织结构的染色技术。
常见的肉眼可见染色方法包括钙化染色和淀粉样变染色等。
总结以上所述,特殊染色技术在病理学领域中具有重要的应用意义,通过使用不同的染色剂,可以对细胞和组织进行全面和准确的分析和研究。
病理制片技1
病理制片技术——常用特殊染色一、六胺银染色1.第一步准备工作:配制六胺银染液,将10%硝酸银2.5ml倒入干净的染色缸内,加入2%硼砂5ml,液体呈乳白色,再加入3%乌洛托品40ml,染液逐渐呈透明状。
2.第二步染色过程:事先把温箱调至60℃备用,切片经脱蜡至水,用1%过碘酸氧化10 min,水洗,然后切片放人六胺银染液放置60℃温箱1 h,染真菌时间要相对短一些,一般情况下肉眼看到染液变色,切片呈棕色时从温箱取出染色缸,倒掉染液,自来水冲洗1min,用0.25%氯化金调色1 min,水洗后,用3%硫代硫酸钠染5min,水洗,用苏木精染液浅染,水洗、分化、冲水返蓝,伊红染10 s,最后经脱水、透明、封固。
3.图示结果:基底膜与毛细血管间质性物质、真菌呈棕黑色,核呈蓝色。
4.注葸事项(1)掌握染色温度和时间,如60℃染1 h,80℃染30~40 min。
(2)真菌类染色时间相对要短,染色时间过长,切片染色过深,可用分色剂处理。
二、黏液卡红染色1.第一步准备工作:配制黏卡染液,将称好的胭脂1 g、氢氧化铝1 g倒入瓶内,加入5 0%L醇100 rnl混合摇匀,再加入氯化铝0.5g,水浴加温逐渐煮沸并搅动液体,使其充分溶解(注意染液容易外溅),数分钟后,染液由红色变成透明深紫红色,冷却后将液体倒入量筒,再加入50%乙醇至原量,过滤,放人冰箱备用。
2.第二步染色方法:染液使用时原液与蒸馏水比例为1:4稀释.切片厚5 um,脱蜡至水,经苏木精染色2 min、水洗、分化、返蓝后进人黏卡液染色2 h以上,染液可以重复使用多次,但要适当延长染色时间.切片水洗后,脱水、透明、封固。
3.图示结果:黏液为红色,胞核为蓝色.4.注意事项(1)染液使用时比例为1份黏卡原液,4份蒸馏水。
(2)用酶消化对照染色特异性很大,消化时间为20 min。
(3)配制黏卡染液时要防止液体溅出。
三、石碳酸品红染色1.第一步准备工作(1)配制盐基性品红饱和液:盐基性品红溶于乙醇内。
病理切片染色方法
病理切片染色方法
病理切片染色是一种常用的病理学检查方法,可以帮助病理医师观察和诊断疾病。
常用的病理切片染色方法有以下几种:
1. 高尔基染色法:可以染色细胞核为蓝色,细胞质为粉红色,便于观察细胞形态和排列情况。
2. 血液涂片染色:常用的涂片染色方法有吉姆萨染色法、健康那染色法等,可以帮助观察血细胞的类型和数量。
3. 组织切片染色:常用的组织切片染色方法有血红素-伊宁染色法、苏木精-伊宁染色法等,可以染色细胞核和细胞质,以及观察组织结构和病理变化。
4. 免疫组化染色:通过特定抗体与组织中的特定抗原结合,来观察和诊断疾病。
常用的免疫组化染色方法有免疫组织化学染色法、免疫荧光染色法等。
5. 特殊染色:用于染色特定的结构或化合物,例如透明质酸染色、银染色等。
以上是一些常见的病理切片染色方法,根据具体需要和疾病类型,病理医师会选择不同的染色方法来进行诊断和研究。
几种常用特殊染色操作过程中的要点
一、网状纤维染色 ——氢氧化银氨法(Gomori法)
5
(一)网状纤维的形态结构
较细的纤维组织、短、分支多,交织成网状
(与胶原纤维共同为细胞丰富的器官起到支撑作用)
HE呈淡红色,银氨液浸染、甲醛还原后呈黑色
(嗜银性/嗜银纤维:黑色)
主要由Ⅲ型胶原蛋白构成,表面被覆糖蛋白
(PAS染色:淡紫红色)
6
+蒸馏水,洗涤沉淀(50-100ml蒸馏水) <反复/3次,沉淀不浑浊>
留下沉淀及少许上清液(4ml)
<保留沉淀物质>
逐滴+氢氧化铵(一次1-2滴加入)
<边加摇晃>
至沉淀逐渐完全溶解
<无色溶液>
逐滴+10%硝酸银,至刚出现浑浊 加氢氧化铵一至数滴,使沉淀消失
+蒸馏水至40ml,2-8°C冰箱
<浑浊状态>
2
四、淀粉样物 刚果红法(甲醇刚果红、碱性刚果红)、甲基紫法 五、色素 含铁血黄素(Perls)、黑色素(Masson-Fontana)铜(罗 丹明、红氨酸) 六、糖类物质 糖原(PAS)、黏液物质(AB-PAS、AB) 七、脂内物质 中性脂肪(苏丹Ⅲ、Ⅳ、油红O)
3
八、神经组织 尼氏体(硫瑾、甲苯胺蓝)、神经髓鞘(变色酸2R、砂罗 铬花青) 九、肝脏穿刺 Masson、网状纤维、含铁血黄素、PAS、铜等。 十、肾脏穿刺组织 Masson、六胺银、PAS、刚果红等
1.氧化(KMnO4):使网状纤维内羟基转变为醛基。<选择性> 2.漂白(H2C2O4):棕色变为无色。 3.媒染(铁明矾):增加网状纤维对银氨液的选择性。 4.浸银(氢氧化银氨):银氨液中Ag(NH3)2+被组织吸附后与醛基结合。 5.还原(甲醛):与网状纤维结合的银氨配位化合物还原成黑色的金属 银。
病理制片技术――常用特殊染色
病理制片技术――常用特殊染色1.第一步准备工作:配制六胺银染液,将10%硝酸银2.5ml倒入干净的染色缸内,加入2%硼砂5ml,液体呈乳白色,再加入3%乌洛托品40ml,染液逐渐呈透明状。
2.第二步染色过程:事先把温箱调至60℃备用,切片经脱蜡至水,用1%过碘酸氧化10 min,水洗,然后切片放人六胺银染液放置60℃温箱1 h,染真菌时间要相对短一些,一般情况下肉眼看到染液变色,切片呈棕色时从温箱取出染色缸,倒掉染液,自来水冲洗1min,用0.25%氯化金调色1 min,水洗后,用3%硫代硫酸钠染5 min,水洗,用苏木精染液浅染,水洗、分化、冲水返蓝,伊红染10 s,最后经脱水、透明、封固。
3.图示结果:基底膜与毛细血管间质性物质、真菌呈棕黑色,核呈蓝色。
4.注葸事项(1)掌握染色温度和时间,如60℃染1 h,80℃染30~40 min。
(2)真菌类染色时间相对要短,染色时间过长,切片染色过深,可用分色剂处理。
二、黏液卡红染色1.第一步准备工作:配制黏卡染液,将称好的胭脂1 g、氢氧化铝1 g倒入瓶内,加入50%L醇100 rnl混合摇匀,再加入氯化铝0.5g,水浴加温逐渐煮沸并搅动液体,使其充分溶解(注意染液容易外溅),数分钟后,染液由红色变成透明深紫红色,冷却后将液体倒入量筒,再加入50%乙醇至原量,过滤,放人冰箱备用。
2.第二步染色方法:染液使用时原液与蒸馏水比例为1:4稀释.切片厚5 um,脱蜡至水,经苏木精染色2 min、水洗、分化、返蓝后进人黏卡液染色2 h以上,染液可以重复使用多次,但要适当延长染色时间.切片水洗后,脱水、透明、封固。
3.图示结果:黏液为红色,胞核为蓝色.4.注意事项(1)染液使用时比例为1份黏卡原液,4份蒸馏水。
(2)用酶消化对照染色特异性很大,消化时间为20 min。
(3)配制黏卡染液时要防止液体溅出。
三、石碳酸品红染色1.第一步准备工作(1)配制盐基性品红饱和液:盐基性品红溶于乙醇内。
特殊染色
高碘酸-无色品红法
蒸馏水 偏重亚硫酸钠 170ml 3.96g
活性炭 2.0g(第二天称) 碱性品红(用研钵磨细更佳)加入蒸馏水中溶 解后依次加入盐酸及偏亚硫酸钠,塞住瓶口(锥 形瓶、小口瓶比较好)摇动容器以充分混和(此时 颜色会有明显变化)放置过夜后加入活性炭摇动 数分钟静止1小时后过滤,呈无色或淡稻草黄色 为佳。(不用时冰箱4℃左右保存)
应用:
明确含铁血黄素的存在。如长期的肺郁 血、出血;陈旧性出血灶;肝硬化时慢性脾 郁血的含铁结节;硬化性血管瘤;动脉瘤性 骨囊肿;绒毛色素性滑膜炎等。
胆色素
三氯醋酸三氯化铁(Hall)法:
试剂配制: ㈠Fouchet 液: 甲液:三氯醋酸 25 克 蒸馏水 100 毫升, 乙液:三氯化铁 1克 蒸馏水 10 毫升 两者均宜少量新鲜配制,棕色瓶贮存。 临用时取甲液 30ml 乙液 3ml 等份混合。
Masson 法
•1 切片脱蜡至水.
•2 苏木素染核(可略)
•3 丽春红酸性品红5分钟
•4 快速水洗.蒸馏水洗
•5 1%磷钼酸滴染1-3分钟 •6 倾去余液直接滴加亮绿液5分钟 •7 快速水洗后烤箱烘干,透明封固 •结果:胶原纤维绿色 肌纤维红色
胶原纤维染色的应用 1. 区别胶原纤维与肌纤维。 2. 观察某些病变组织的纤维化及 程度等。
染色方法: 1 常规切片 、脱蜡至蒸馏水 2 0.5%高碘酸氧化5-10分钟 3 流水冲洗数分钟,蒸馏水洗一次 4 无色品红20分钟 5 水洗 5分钟后苏木素染核 6 常规脱水(或烤箱烘干)透明封固 结果:糖原或中性粘液或霉菌等 鲜红色,核蓝色。
注意事项
•1 配制过程中玻璃器皿要干净,试剂要纯。
病理学技术特殊染色总结
病理学技术特殊染色总结一、结缔组织染色法Mallory三色染色法蓝色:胶原和网状纤维淡蓝色:软骨、粘液、淀粉样变物质红色:神经胶原纤维、肌纤维、酸性颗粒橘红色:髓鞘、红细胞Masson三色染色法绿色:胶原纤维红色:肌纤维蓝褐色:胞核三联染色法红色:胶原纤维黑色:网状纤维绿色:弹性纤维淡黄色:肌肉、红细胞二、胶原纤维染色法Van Gieson(V.G)苦味酸-酸性品红法鲜红色:胶原纤维黄色:肌纤维、细胞质、红细胞蓝褐色:胞核天狼星红(Sirius red)苦味酸染色法红色:胶原纤维绿色:细胞核黄色:其他三、网状纤维染色Gordon-Sweets银氨染色法(梅花开枝图,金色阳光伴树枝)黑色:网状纤维红色:胞核(核固红复染)黄棕色:胶原纤维淡红色:细胞质(伊红复染)四、弹性纤维染色Gomori醛复红染色法*甲醛生理盐水液固定的染色效果最佳紫红色:弹性纤维橘黄色:背景五、弹性、胶原纤维的双重组合染色法蓝绿色:弹性纤维红色:胶原纤维淡黄色:背景六、肌肉组织染色△横纹肌组织染色Mallory磷钨酸苏木精染色法(PTAH)蓝色:胞核、纤维、肌肉、神经胶质纤维、纤维蛋白、横纹肌黄色或玫红色:胶原纤维、网状纤维软骨基质、骨微紫色:粗弹性纤维(有时)紫蓝色或棕黄色:缺血缺氧早期病变的心肌△早期心肌病变组织染色Nagar-Olsen染色法(HBFP)红色:缺氧心肌、红细胞黄色或黄棕色:正常心肌蓝色:细胞核Poley显示缺氧心肌染色法红色:缺氧心肌紫色:胞核绿色:其他组织1七、糖类染色过碘酸-Schiff(PAS)染色法红色:糖原及其他PAS反应阳性物质蓝色:细胞核八、黏液物质(黏多糖)染色Mowry阿尔辛蓝过碘酸雪夫(AB-PAS)染色法红色:中性黏液物质蓝色:酸性黏液物质紫红色:混合性黏液物质阿尔辛蓝(爱先蓝,PH 2.5)法蓝色:含硫酸黏液物质不着色或淡然:强硫酸化黏液物质红色:胞核阿尔辛蓝(爱先蓝,PH 1.0)法蓝色:含硫酸黏液物质不着色:非硫酸化酸性黏液物质红色:胞核(如复染)九、黑色素染色Masson-Fontana黑色素银浸染色法黑色:黑色素及嗜银细胞颗粒红色:胶原纤维浅黄色:背景Lillie硫酸亚铁染色法暗绿色:黑色素浅绿或不着色:背景黄色:肌纤维和背景十、含铁血黄素染色亚铁氰化钾法(Perls blue普鲁士蓝显示三价铁)蓝色:含铁血黄素浅红色:其他组织十一、胆色素染色三氯醋酸染色法绿色:胆色素红色和黄色:其他(复染)十二、脂褐素染色三氯化铁-铁氰化钾法(非特异性)暗蓝色:脂褐素醛品红法(现配现用)深紫色:脂褐素浅黄色:背景十三、脱色素染色通常用来鉴定是否有黑色素存在,3张连续石蜡切片,1张HE,1黑色素染色,1张氧化漂白脱色素十四、纤维蛋白染色Lendrum等MSB染色法*本法的MSB指马休黄猩红蓝法红色:纤维蛋白紫色:陈旧性纤维蛋白蓝色:细胞核黄色:红细胞Gram甲紫染色法蓝黑色:纤维蛋白红色:背景十五、淀粉样物质染色刚果红染色法红色:淀粉样物质蓝色:细胞核Jurgens甲紫染色法红色或紫红色:淀粉样物质蓝色:细胞核十六、真菌染色2Grocott六胺银染色法*真菌均被着色黑褐色:菌丝和孢子红色:细胞核淡绿色:背景高碘酸复红染色法紫红色:真菌浅黄色:红细胞十七、细菌染色一般细菌革兰氏染色(Gram碱性复红结晶紫染色法)蓝色:革兰阳性菌红色:革兰阴性菌红色:细胞核抗酸杆菌Ziehl-Neelsen抗酸杆菌染色法红色:抗酸杆菌灰蓝色:背景胃幽门螺杆菌Warthin-Starry胃幽门螺杆菌染色法棕黑色或黑色:胃幽门螺杆菌淡黄色:背景十八、螺旋体染色硝酸银染色法黑色或棕黑色:梅毒螺旋体、钩端螺旋体淡黄至淡棕色:背景Ryu碳酸钠碱性复红法红色:螺旋体十九、病毒包涵体染色荧光桃红-酒石黄法亮红色:病毒包涵体蓝褐色:细胞核黄色:背景二十、乙型肝炎表面抗原染色Shikata地衣红染色法(现配现用)棕色:HBsAg阳性醛复红改良染色法紫色:HBsAg阳性红色:结缔组织黄色:红细胞及基质维多利亚蓝染色法蓝绿色:乙型肝炎表面抗原物质红色:细胞核二十一、神经组织染色△神经细胞尼氏体染色方法缓冲亚甲蓝法蓝色:尼氏小体及核仁△神经纤维的染色方法Holmes神经纤维染色黑色:神经纤维灰紫色:背景Bielschowsky神经纤维染色黑色:神经纤维紫色:背景Von Braunmubl神经纤维、扣结、老年斑染色黑色:神经纤维、扣结、老年斑浅灰色:背景Eager退变神经纤维染色黑色:退变神经纤维浅棕色:背景△神经髓鞘的染色方法Weigert-Pal髓鞘染色蓝黑色:髓鞘淡灰色:背景Weil髓鞘染色(石蜡切片理想)蓝黑色:髓鞘淡灰色:背景Kultshitzky髓鞘染色蓝黑色:髓鞘淡黄色:背景3Luxol fast blue髓鞘染色蓝色:髓鞘紫色:核仁、尼氏体变色酸2R—亮绿髓鞘染色深红色:神经髓鞘绿色:轴索、间质不着色:脱髓鞘纤维Marchi退变髓鞘染色方法黑色:退变髓鞘浅棕色:背景△神经胶质细胞染色方法Cajal星形细胞染色紫黑色:原浆性及纤维性星形胶质细胞Weil及Davenport小胶质细胞及少突胶质细胞黑色:神经胶质细胞、少突胶质细胞黄棕色:背景二十二、神经内分泌细胞染色△亲银反应Lillie-Masson二胺银反应法黑色:亲银颗粒细胞红色:细胞核淡灰黄色:背景Gomori-Burtner六胺银法黑色:亲银细胞浅红色:背景△嗜银反应De Grandi改良硝酸银反应法棕黑色:嗜银细胞颗粒红色:细胞核碱性重氮反应法橘红色至红色:嗜银细胞颗粒蓝色:细胞核黄色:胞质二十三、嗜铬细胞染色Giemsa改良染色法红色至紫红色:嗜铬细胞蓝色:皮质细胞粉红色:红细胞Wiesel染色法黄绿色:嗜铬细胞质红色:细胞核蓝色:其他二十四、肥大细胞染色甲苯胺蓝改良染色法紫红色:肥大细胞颗粒蓝色:细胞核醛复红法深紫色:肥大细胞颗粒橘黄色:红细胞黄色:其他组织二十五、DNA染色酸水解—无色品红法紫红色:DNA绿色:细胞质、其他成分甲基绿—派洛宁法紫红色:细胞质和核仁内RNA 绿色或绿蓝色:核内DNA二十六、脂肪染色苏丹法橘红色:中性脂肪蓝色:细胞核油红O染色法深橙红色:中性脂肪蓝色:细胞核4。
abpas染色实验原理
abpas染色实验原理
AB-PAS染色实验是一种通过染色来检测糖原在细胞和组织中分布和含量的方法。
该实验常用于病理学领域,特别是在肝脏病理学中,用于检测肝细胞内的糖原沉积和分布,从而评估肝脏疾病的类型和严重程度。
实验原理:AB-PAS染色实验是一种组合染色方法,由Alcian Blue和Periodic Acid-Schiff(PAS)染色组成。
Alcian Blue是一种酸性染色剂,主要用于染色酸性多糖,如硫酸肝素和酸性黏多糖。
而PAS染色则是一种选择性染色方法,用于检测组织中存在的糖原。
在AB-PAS染色实验中,细胞或组织切片首先被Alcian Blue染色剂染成蓝色,随后用Periodic Acid-Schiff溶液进行氧化,将细胞或组织中的糖原氧化为醛基。
最后,用Fuchsin染色剂染色,使氧化后的糖原变成颜色暗红色至紫色。
根据Alcian Blue和PAS染色剂的特殊性质,AB-PAS染色实验可以用于检测不同类型的糖原。
例如,肝细胞内的糖原可用AB-PAS染色进行鉴定,来帮助诊断肝脏病变。
总之,AB-PAS染色实验是一种常见的组织染色方法,可用于检测糖原在细胞和组织中的分布和含量,对于病理学研究和诊断具有重要意义。
组织病理学染色方法
组织病理学染色方法
组织病理学染色方法主要包括常规染色、免疫组化染色和原位杂交染色。
常规染色是最基本的病理学染色方法,常用的有血液学染色(如Wright染色和Giemsa染色等)、细胞及组织学染色(如HE染色等)。
这些染色方法可以在显微镜下观察细胞或组织的形态、结构、颜色变化等,并从而确定不同细胞类型和器官组织是否正常,有助于诊断肿瘤、感染和自身免疫性疾病等。
免疫组化染色则是利用抗体与特定蛋白质的结合来标记细胞和组织中的分子结构,以实现检测和定位特定细胞及其产生的分子。
这种方法通常用于确定肿瘤患者的预后,或者在治疗前后监控治疗效果。
其中最常用的包括Immunohistochemistry(IHC)和Flow Cytometry等。
原位杂交染色则是通过DNA或RNA与荧光染料进行配对,从而标记调查特定基因序列在细胞和组织中的分布、amplification和降解等信息。
病理染色方法包括但不限于以上提到的HE染色法、PAS染色法、Masson 染色法等,具体的选择要根据研究目标来定。
建议查阅病理学书籍获取更全面准确的信息。
病理科弹力纤维染色-概述说明以及解释
病理科弹力纤维染色-概述说明以及解释1.引言1.1 概述病理科弹力纤维染色是一种用于观察和评估活体组织样本中弹力纤维的特殊染色技术。
弹力纤维是由弹性蛋白构成的细线状结构,主要存在于皮肤、血管、肺泡壁等组织中,具有重要的生理功能。
通过对弹力纤维的染色,可以更好地了解组织的结构与功能,并为病理学疾病诊断提供重要的参考依据。
病理科弹力纤维染色的原理是利用特定染料对组织切片中的弹力纤维进行选择性染色。
常用的染料有奥尔西红染、维氏染色和伊红染等。
这些染料能与弹性纤维特异性结合,通过染色反应来显示出弹力纤维的位置、形态和数量。
染色方法通常包括以下步骤:组织切片预处理、染色溶液制备、切片染色、显微镜下观察和结果分析。
预处理步骤可以包括脱脂、脱水和除蜡等处理,以保证组织样本的质量。
染色溶液的配制需根据染料的要求和实验室的需求进行调配。
切片染色是关键的步骤,需要掌握好染料的浓度和染色时间,以保证染色效果的准确性和稳定性。
最后,在显微镜下观察和分析染色切片,通过比对正常组织和病变组织的染色结果,可以得出结论。
弹力纤维染色在病理科中有着广泛的应用。
它可以帮助病理学家判断组织中弹力纤维的形态和分布情况,从而诊断和评估多种疾病,如弹力纤维异常增生、退变和破坏等。
此外,弹力纤维染色还可以用于研究组织的生理和病理过程,探索疾病的发生机制和病变的发展规律。
然而,弹力纤维染色也有其局限性。
由于弹性蛋白的结构特殊性,染色方法相对复杂,操作难度较大。
同时,染色结果的解读需要经验丰富的病理学家进行判断,存在一定的主观性和复杂性。
此外,由于组织切片的质量和保存条件会对染色结果产生影响,因此在实验过程中需要严格控制和管理。
总之,病理科弹力纤维染色作为一种重要的组织学技术,可以提供丰富的信息和可靠的依据,用于研究和诊断多种疾病。
然而,仍需要进一步完善和发展该技术,以提高染色效果和可靠性,促进其在临床实践中的应用。
1.2 文章结构文章结构部分的内容可以如下所示:文章结构:本文分为引言、正文和结论三个部分。
HE染色和巴氏染色法
HE染色和巴氏染色法普通染色又称常规染色或HE(Haematoxylin and eosin)染色。
它是病理技术中最常用的一种方法,通过它可以做出病理诊断和发现寻求别的辅助方法,以达到准确,完整的病理诊断。
一、染色目的病理学的所有切片,都必须通过一种以上的染料,通过各种不同的方法,将切片中各种不同的物质,在不同染液的作用下,将其显示出来,使之在光学显微镜下,能够完全的观看各种结构。
例如,HE染色,好质量的切片可以清晰地显示出许多不同的结构,细胞核着蓝黑色,细胞浆着粉红色,软骨着蓝色等。
清晰的结构为诊断提供可靠的依据,因此,染色技术也是病理技术中的重要组成部分,必须不断地总结,方能提高。
如果染色不好,切片染色一团糟,红蓝不分,结构不清,层次不明,影响了镜下的观察,直接影响了临床诊断,染色结果的好坏直接关系到诊断的准确性。
二、染色的作用1.化学作用:所有的染色液中,可把它们分为两种类型,一种为酸性,另一种为碱性。
酸性染料中有染色作用的为阴离子;碱性染料中有染色作用的为阳离子,每个细胞也存在着两种物质,细胞核含的是酸性物质,细胞浆含的是碱性物质。
在染色时,细胞核中的酸性物质与苏木素染液中的阳离子发生作用,细胞浆中的碱性物质与伊红染液中的阴离子发生作用,由于反应的部位不同,结果着色有异。
2.物理作用:在染色过程中,染液中的色素微粒子浸入到被染组织的粒子间隙内,此时,因受分子的引力作用,色素微粒子被吸附而着色。
由于各种组织有不同的吸附能力和不同的吸附程度,因此就可显出来不同的颜色来。
一般来说,染色的学说还有许多,但说服力强的仅有上述两种。
但不管怎么样解释,实际上完成的每一种染色,都与上述两种学说分不开,它们的作用是相辅相成,同时存在的。
三、染色方法及步骤1.人工苏木素,伊红染色法(HE法)(1)切片浸入二甲苯中5-10min;(2)切片浸入二甲苯中5-10min;(3)100%酒精1min。
(4)100%酒精1min。
特殊染色名词解释
特殊染色名词解释随着科技的不断进步,染色技术也在不断地发展和创新。
特殊染色技术是一种高级的染色技术,可以为细胞、组织和生物分子等提供非常详细的信息。
在这篇文章中,我们将介绍几种常见的特殊染色技术和它们的应用。
1. 免疫组化染色免疫组化染色是一种利用抗体与特定抗原结合的染色技术。
这种技术可以用来检测细胞和组织中的特定蛋白质,从而帮助诊断和治疗疾病。
免疫组化染色可以用来检测癌细胞、细菌、病毒等,因此在肿瘤学、微生物学和免疫学等领域有广泛的应用。
2. 原位杂交染色原位杂交染色是一种用来检测DNA或RNA序列的染色技术。
这种技术可以用来检测基因突变、染色体重排和基因表达等。
原位杂交染色可以用来诊断遗传性疾病、肿瘤和病毒感染等,因此在医学和生物学领域有重要的应用。
3. 荧光染色荧光染色是一种利用荧光染料与细胞或分子结合的染色技术。
这种技术可以用来检测细胞和分子的位置、数量和活性等。
荧光染色可以用来检测细胞分裂、DNA复制、蛋白质交互作用等,因此在生物学和医学领域有广泛的应用。
4. 电镜染色电镜染色是一种利用染料和金属膜结合的染色技术。
这种技术可以用来增强电镜图像的对比度和清晰度。
电镜染色可以用来检测细胞内部结构、病毒和细菌等,因此在微生物学和细胞生物学等领域有广泛的应用。
5. 石蜡切片染色石蜡切片染色是一种利用染料和石蜡组织切片结合的染色技术。
这种技术可以用来检测组织和细胞的结构、形态和病理变化等。
石蜡切片染色可以用来诊断肿瘤、炎症和感染等,因此在病理学和生物学领域有广泛的应用。
总结特殊染色技术是一种高级的染色技术,可以为细胞、组织和生物分子等提供非常详细的信息。
免疫组化染色、原位杂交染色、荧光染色、电镜染色和石蜡切片染色是几种常见的特殊染色技术,它们在医学和生物学领域有广泛的应用。
特殊染色技术的不断发展和创新将为人类的健康和生命科学研究带来更多的帮助和突破。
病理切片染色方法
病理切片染色方法病理切片染色是病理学中常用的一种技术,通过对组织切片进行染色,可以观察和分析组织结构、细胞形态和病理变化,从而对疾病进行诊断和鉴定。
本文将介绍常见的病理切片染色方法,包括常规染色、特殊染色和免疫组织化学染色。
一、常规染色常规染色是最常用的病理切片染色方法之一,主要包括血液染色和组织染色。
1. 血液染色血液染色常用的染色剂有偏碱性染料和酸性染料。
偏碱性染料如伊红、结晶紫和新蓝等,可用于染色细胞核和嗜酸性颗粒;酸性染料如朗格汉斯染剂、伊红B和伊红O等,可用于染色细胞质和嗜碱性颗粒。
2. 组织染色组织染色主要是为了观察细胞核、细胞质和细胞间质的结构,常用的染色剂有苏木精-伊红、伊红-酸性品红和伊红-伊红B等。
二、特殊染色特殊染色是指用于特定目的的染色方法,常用于观察特定组织结构、细胞器和病理变化。
1. 酶组织化学染色酶组织化学染色是利用酶的催化作用来观察组织和细胞中的特定物质。
常见的酶包括过氧化物酶、碱性磷酸酶和酸性磷酸酶等。
2. 共聚焦显微镜染色共聚焦显微镜染色是一种高分辨率的显微镜技术,可以观察细胞内的亚细胞结构和分子分布。
常用的染色剂有荧光染料如DAPI、荧光素和罗丹明B等。
三、免疫组织化学染色免疫组织化学染色是利用抗体与抗原的特异性反应来观察组织和细胞中的蛋白质分布和表达情况。
免疫组织化学染色常用的标记物有酶标记物和荧光标记物,常用的抗体有单克隆抗体和多克隆抗体。
四、染色结果的评价染色结果的评价是病理切片染色中的重要步骤,可以通过显微镜观察染色结果的颜色、强度和分布情况,进而判断组织和细胞的状态和病变程度。
总结:病理切片染色方法是病理学中常用的一种技术,通过染色可以观察和分析组织结构、细胞形态和病理变化,为疾病的诊断和鉴定提供重要依据。
常规染色、特殊染色和免疫组织化学染色是常见的病理切片染色方法,每种方法都有其特定的应用范围和适用对象。
在进行染色时,我们需要注意染色剂的选择、染色时间的控制和染色结果的评价,以保证染色结果的准确性和可靠性。
细胞色素c氧化还原 特殊染色病理
细胞色素c氧化还原特殊染色病理
细胞色素c氧化还原特殊染色是一种用于检测细胞色素c氧化还原状态的特殊染色技术。
细胞色素c是一种存在于线粒体中的蛋白质,它在细胞呼吸和能量产生过程中起着关键作用。
通过这种染色技术,可以直观地观察和分析细胞色素c的氧化还原状态,从而帮助研究者了解细胞呼吸功能和能量代谢的状况。
这种特殊染色技术通常涉及将含有染料的溶液应用于组织切片或细胞样本,然后通过显微镜观察染料与细胞色素c的反应。
根据染料与细胞色素c结合的程度和方式,可以在显微镜下区分出氧化态和还原态的细胞色素c,从而反映出细胞在特定生理或病理条件下的能量代谢状态。
例如,在某些疾病或病理状态下,如缺氧、中毒或某些类型的肿瘤,细胞色素c的氧化还原状态可能会发生改变。
通过这种特殊染色技术,研究者可以观察到这些变化,并进一步分析其可能的生物学意义。
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1.Van Gieson苦味酸和酸性品红法
【染色方法】
(1)中性甲醛固定组织,石蜡切片;
(2)组织切片脱蜡至水;
(3)用Van Gieson液染1~5分钟;
(4)倾去染液,直接用95%乙醇分化和脱水;
(5)无水乙醇脱水,二甲苯透明,中性树胶封固。
【结果】胶原纤维呈红色,肌纤维、胞质及红细胞呈黄色。
2.Masson氏结缔组织三合染色法
【染色方法】
(1)石蜡切片厚6μm,脱蜡至水;
(2)0.2%冰醋酸水溶液浸泡片刻;
(3)Masson氏染色液中5分钟或更长时间;
(4)0.2%冰醋酸水溶液浸泡片刻;
(5)5%磷钨酸水溶液2~3分钟,再入0.2%冰醋酸水溶液浸洗(6)投入淡绿、冰醋酸水溶液浸染5分钟或更长时间;
(7)再入0.2%冰醋酸水溶液浸洗片刻;
(8)脱水、透明和封固。
【结果】胞浆和神经胶质纤维染红色,胶原纤维染绿色。
【染色方法】
(1)石蜡切片、脱蜡至水;
(2)0.25%高锰酸钾液3分钟;
(3)蒸馏水洗2次;
(4)1%草酸漂白即可;
(5)蒸馏水洗2次;
(6)2.5%铁明矾水溶液媒染5~10分钟,蒸馏水洗多次;(7)二氨氢氧化银浸染1分钟,蒸馏水洗3次;
(8)10%甲醛液还原2分钟,蒸馏水洗3次;
(9)0.2%氯化金液调色1~2分钟,蒸馏水洗3次;
(10)5%硫代硫酸钠固定5分钟;
(11)蒸馏水洗,需要时复染;
(12)水洗、脱水、透明和封固。
【结果】网状维呈黑色,其他组织呈复染的颜色。
显示弹性、胶原纤维的双重组合染色法
【染色方法】
(1)中性甲醛液固定组织,石蜡切片,常规脱蜡至水;
(2)切片入70%乙醇中洗2分钟;
(3)将切片浸入盛有维多利亚蓝液中染0.5~2小时;
(4)直接入95%乙醇中分色数秒钟;
(5)浸入蒸馏水洗2分钟;
(6)用丽春红S液滴染切片5分钟;
(7)直接用无水乙醇冲洗多余染色液2次;
(8)将切片在空气中或冷风干燥;
(9)二甲苯透明,中性树胶封固。
【结果】弹性纤维呈蓝绿色,胶原纤维呈红色,背景呈淡黄色。
【染色方法】
(1)冰冻切片厚度8~15μm;
(2)Harris苏木素,染约1分钟;
(3)自来水洗后,用0.5%盐酸乙醇分化,再水洗直至胞核返蓝为止;
(4)蒸馏水洗后移入70%乙醇内浸洗一下;
(5)浸入苏丹III染液中约30分钟或更长时间(如果置于56℃温箱中可适当缩短时间);
(6)在70%乙醇分化数秒钟;
(7)待切片在空气中稍凉干或用冷风机吹干;
(8)及时用明胶甘油封片。
【结果】脂肪呈橘红色,脂肪酸不着色,胞核淡蓝色。
高碘酸-Schiff(Periodic acid Schiff,PAS)染色法
【染色方法】
(1)切片脱蜡至蒸馏水;
(2)浸入高碘酸氧化液中10~20分钟;
(3)蒸馏水洗2次;
(4)Schiff液染色10~30分钟;
(5)流水冲洗5分钟;
(6)用苏木素染细胞核3~5分钟;
(7)在盐酸酒精中分化,自来水洗至细胞核变蓝为止;
(8)脱水、透明和封固。
【结果】糖原和粘蛋白呈紫红色,细胞核染蓝色,霉菌也呈紫红色等。
【染色方法】
(1)切片入二甲苯,后递次向下直到入水;
(2)3%冰醋酸溶液3分钟;
(3)在奥辛兰溶液中染5分钟;
(4)入3%冰醋酸3分钟,蒸馏水洗(3次);
(5)用1%过碘酸处理10分钟,蒸馏水洗;
(6)入Schiff液10~30分钟;
(7)流动自来水洗10分钟;
(8)逐级酒精脱水,二甲苯透明;
(9)中性树胶封固。
【结果】酸性粘多糖染兰色;中性粘蛋白染品红色;中性和酸性粘蛋白混合物染紫色。
Mallory磷钨酸-苏木素染色法PTAH
【染色方法】
(1)切片脱蜡至水;
(2)在酸性高锰酸钾液中氧化5~10分钟;
(3)自来水充分洗,蒸馏水洗2次;
(4)用1%草酸液漂白2分钟;
(5)自来水洗,蒸馏水洗2次;
(6)浸入MalloryPTAH液中12~48小时;
(7)直接用95%乙醇分化;
(8)无水乙醇急速脱水,二甲苯透明和树胶封固。
【结果】胞核、纤维、肌肉、神经胶质纤维、纤维素、横纹肌等均呈蓝色;胶质纤维、网状纤维、软骨基质及骨呈黄色或玫瑰红色;粗弹力纤维有时被染成微紫色;有缺血缺氧早期病变的心肌呈紫蓝色或棕黄色。
【染色方法】
(1)石蜡切片,脱蜡至水;
(2)在1%刚果红水溶液中1小时或更长时间;
(3)投入饱和碳酸锂水溶液中15秒钟;
(4)用80%酒精分化,直至无多余燃料溜下为止;
(5)水洗后用苏木素进行核染色;
(6)等干后进行二甲苯透明和树胶封固。
【结果】淀粉样物质呈红色,细胞核呈兰色。
【染色方法】
(1)中性甲醛固定组织,石蜡切片,常规脱蜡至水;
(2)0.2mol/L醋酸缓冲液洗2次;
(3)将切片置入1%硝酸银液内1小时左右(温箱56℃);
(4)直接把切片取出,立即浸入显影液内2~3分钟;
(5)将切片浸入56℃蒸馏水中洗1~2分钟;
(6)蒸馏水洗1次;
(7)无水乙醇脱水,二甲苯透明和中性树胶封固。
【结果】胃幽门弯曲菌呈棕黑色或黑色,背景呈淡黄色。
【染色方法】
(1)石蜡切片厚6μm,脱蜡至水;
(2)用1%甲苯胺蓝水溶液置于50~60℃温箱内浸染20~40分钟;
(3)蒸馏水稍洗;
(4)95%乙醇迅速分化;
(5)无水乙醇脱水,二甲笨透明,中性树胶封固。
【结果】尼氏小体紫蓝色,胞核棕红色。
【染色方法】
(1)石蜡切片厚6μm,脱蜡至水;
(2)投入新鲜配置的20%盐酸和10%亚铁氰化钾等量混合液(用前过滤)中30分钟,必要时可延长时间;
(3)蒸馏水洗;
(4)在0.5%的碱性品红(溶剂为50%酒精)进行1分钟对比染色;
(5)在95%酒精中分化后晾干,透明,封固。
【结果】含铁血黄素呈蓝色,血棕色素呈红色。
【染色方法】
(1)石蜡切片,脱蜡至水;
(2)投入硝酸银染色液中,并置于暗处12~18小时;(3)蒸馏水洗2分钟;
(4)以0.2%氯化金水溶液增色5-10分钟;
(5)蒸馏水洗;
(6)投入5%硫代硫酸钠水溶液2分钟;
(7)自来水洗;
(8)如需复染,可用苏木素-伊红染色法;
(9)酒精脱水,二甲苯透明,树胶封固。
【结果】黑色素呈黑色。