同位素示踪与荧光标记技术
同位素示踪法和同位素标记法
同位素示踪法和同位素标记法
同位素示踪法和同位素标记法都是利用同位素在生物、化学、地球科学等领域中的应用手段。
同位素示踪法指的是通过在样品中添加含放射性同位素的化合物，通过对其衰变方式进行测量，从而追踪样品在化学反应、代谢等过程中的变化。
而同位素标记法是在样品中添加非放射性同位素作为标记，利用这些同位素的特性探究样品在不同反应中物质的行为。
同位素示踪法对于现代化学和生物领域有着非常重要的应用，特别是在生命科学的研究中起着至关重要的作用。
比如说，在病毒研究中，同位素示踪法可以帮助研究人员确定病毒在体内如何复制，从而有助于研发新的治疗方法。
在食品化学中，同位素示踪法也能够用于分析食物成分的代谢途径，从而实现对胰岛素敏感性的评估以及准确评估营养摄入量。
同位素标记法则多用于原子轨道探测及量子物理中，目前主要用于分子生物学、药物研发等领域。
在分子生物学中，同位素标记法可用于研究许多重要的生物学过程。
例如基因表达研究、细胞分裂、DNA修复等等。
在新药研发方面，同位素标记法可以协助科学家确定新型药物在体内耗散的运动方式，从而更加准确地评估其药效。
总的来说，同位素示踪法和同位素标记法具有广泛的应用，尤其是在生命科学、物理化学、地球科学等领域中。
这些技术的应用，不仅为科学家的研究提供了新的手段，也为人类的生活带来了更多的希望和机遇。
同位素示踪技术在生物化学研究中的应用
同位素示踪技术在生物化学研究中的应用同位素示踪技术是什么？同位素示踪技术是一种研究化学反应中物质转化的方法，它利用同位素标记来追踪化学反应中物质的转化过程。
同位素是指原子核中质子数相同、中子数不同的同种元素，这些元素的化学性质相同，但物理性质不同。
利用同位素示踪技术，我们可以了解到物质在生物化学反应中的吸收、转化和排泄的过程。
同位素示踪技术在生物化学研究中的应用1. 生物元素的代谢过程研究同位素示踪技术广泛应用于研究生物元素的代谢过程。
例如，在碳代谢的研究中，人们可以使用13C同位素标记葡萄糖，研究其在体内的代谢过程。
同样的，在研究氮代谢时，我们可以使用15N同位素标记氨基酸，研究其在体内的代谢过程。
2. 美食研究同位素示踪技术在生物化学研究过程中还有另一个应用，那就是研究美食。
例如，在研究一种特殊食材的口感、营养成分时，可以利用同位素示踪技术，将同位素标记加入到这种食材中，通过研究其代谢、吸收来评判其品质，从而开发更为优秀的美食产品。
3. 健康监测和病理研究同位素示踪技术还被应用于健康监测和病理研究中。
例如，在研究骨密度的变化时，通过在体内注入放射性同位素，我们可以测量骨组织中的同位素含量，进而确定骨密度的变化。
同样地，在研究某些疾病时，通过检查患者体内的同位素含量变化，可以及早发现和治疗疾病。
4. 生物质量养护管理同位素示踪技术还被广泛应用于农业和食品工业中。
例如，在生物质量养护研究方面，同位素示踪技术可以用于研究植物中的养分吸收情况，进而设计更为科学合理的肥料使用方案。
另外，在食品加工工业中，同位素示踪技术也被用于研究食品制造中的各种反应过程，以保证生产出更为优质的食品。
总之，同位素示踪技术在生物化学研究和应用中具有广泛的应用前景。
它不仅可以为我们更深入地了解生物元素的代谢过程提供帮助，而且还可以在美食研究、健康监测、生物质量养护以及食品工业中发挥重要作用。
核化学中的同位素标记与追踪
核化学中的同位素标记与追踪同位素标记与追踪是核化学领域中一项重要的技术，它能够在分子、细胞和生物体内标记特定的同位素，从而实现对其在生物学、医学和环境科学等领域的追踪和研究。
本文将介绍同位素标记与追踪的原理、应用以及未来发展方向。
一、同位素标记的原理同位素标记是利用同位素的特殊性质，将其引入目标分子或生物体中，从而实现对其追踪的过程。
同位素是具有相同原子序数但不同质量数的元素，其核内的中子数不同。
同位素标记主要利用了同位素的稳定性和放射性两种性质。
稳定同位素标记是指利用稳定同位素替代目标分子中的常见同位素，例如利用氘代替氢、碳-13代替碳-12等。
这种标记方式适用于分子结构研究、代谢途径追踪等领域，因为稳定同位素不会发生放射性衰变，对生物体无害。
放射性同位素标记则是利用放射性同位素替代目标分子中的常见同位素。
放射性同位素会发生放射性衰变，通过测量其衰变产物的放射性活性，可以追踪目标分子在生物体内的分布和代谢情况。
这种标记方式在核医学、肿瘤治疗和环境监测等领域有着广泛应用。
二、同位素标记的应用同位素标记技术在生物学、医学和环境科学等领域有着广泛的应用。
以下将介绍其中几个典型的应用案例。
1. 生物分子追踪同位素标记技术可以用于追踪生物分子在细胞内的运输和代谢过程。
例如，利用放射性同位素碘-125标记蛋白质，可以通过测量其放射性活性来研究蛋白质在细胞中的合成和降解速率，从而揭示蛋白质代谢的机制。
2. 药物代谢研究同位素标记技术在药物代谢研究中起到了重要的作用。
通过将药物中的特定原子替换为放射性同位素，可以追踪药物在体内的代谢途径和药物代谢产物的生成情况。
这对于药物疗效评估、药物副作用研究等具有重要意义。
3. 环境监测同位素标记技术在环境科学中也有着广泛应用。
例如，利用放射性同位素氚-3标记水分子，可以追踪水分子在地下水中的运动和分布情况，从而评估地下水资源的利用和保护情况。
三、同位素标记与追踪的未来发展随着科学技术的不断进步，同位素标记与追踪技术也在不断发展。
同位素标记和荧光标记
同位素标记和荧光标记⼀、概念：（《必修1》102页）同位素⽤于追踪物质的运⾏和变化规律过程。
⽤⽰踪元素标记的化合物，化学性质不会改变。
⼈们可以根据这种化合物的放射性，对有关的⼀系列化学反应进⾏追踪。
这种科学研究⽅法叫做同位素标记法，也叫同位素⽰踪法。
⼆、应⽤：可⽤于研究细胞内的元素或化合物的来源、组成、分布和去向等，进⽽了解细胞的结构和功能、化学物质的变化、反应机理等。
三、常⽤的⽰踪元素：如3H、14C、15N、18O、32P、35 S（蛋⽩质的特征元素）等。
四、教材中⽤到同位素标记法的地⽅：《必修1》48页“分泌蛋⽩的合成和运输”：⽤3H标记的亮氨酸研究分泌蛋⽩合成和分泌的整个过程。
《必修1》102页“光合作⽤的探究历程”：1939年美国科学家鲁宾和卡门利⽤氧的同位素18O分别标记H2O和CO2，然后通过对⽐实验，证明了光合作⽤释放的氧⽓来⾃⽔。
20世纪40年代，美国科学家卡尔⽂，⽤14C标记的CO2，供⼩球藻进⾏光合作⽤，最终探明了碳在光合作⽤过程中转化成有机物中碳的途径，这⼀途径称为卡尔⽂循环。
《必修2》45页“噬菌体侵染细菌的实验”：1952年赫尔希和蔡斯分别⽤同位素32P和35S 标记的噬菌体，通过实验证明了DNA 才是真正的遗传物质。
《必修2》52页“DNA半保留复制的实验证据”：1958年，科学家⽤同位素15N标记的⼤肠杆菌（⽣物）为实验材料，运⽤同位素⽰踪技术，通过实验证实了DNA复制的⽅式是半保留复制·1。
《选修3》14页“DNA分⼦杂交技术”：⽤放射性同位素标记的含有⽬的基因的DNA⽚段作为探针进⾏⽬的基因的检测。
五、在⽣物学中，和同位素标记法类似的另⼀种⽅法是——荧光标记法。
教材中⽤到荧光标记法的地⽅有：《必修1》67页“细胞融合实验”：这⼀实验很有⼒地证明了细胞膜的结构特点是具有⼀定的流动性。
《必修2》30页“基因在染⾊体上的实验证据”：通过现代分⼦⽣物学技术，运⽤荧光标记的⼿段，可以很直观地观察到某⼀基因在染⾊体上的位置。
【高考生物考前冲刺】综合专题三 高中生物常用科学研究方法归纳
[解析] 孟德尔在观察实验现象时,运用了统计学的方法进行分析,发现F1自交后代 出现3∶1的性状分离比,A正确;
“受精时,雌雄配子的结合是随机的”,这属于孟德尔的假说内容,B正确;
正确的假说不仅能解释已有的实验结果,还能预测另一些实验结果,C正确;
孟德尔所做的测交实验的结果与预期结论相符,证明他的假说是正确的,D错误。
例3 假说—演绎法和类比推理法是遗传学研究中常用的方法,下列说法错误的 是 (C)
A.“豌豆在自然状态下一般为纯种”不属于孟德尔假说的内容 B.运用假说—演绎法进行验证,得到的实验结果不一定与预期相符 C.萨顿利用类比推理法证明了基因在染色体上 D.利用类比推理法得出的推论不具有逻辑的必然性
[解析] “豌豆在自然状态下一般为纯种”这是实验材料的特点,不属于孟德尔假说 的内容,A正确; 运用假说—演绎法验证的实验结果不一定与预期相符,实验结果与预期相同,说 明假说正确,可得出结论,若实验结果与预期不同,需重新设计实验再验证,B正确; 萨顿利用类比推理法提出基因在染色体上的假说,摩尔根利用果蝇杂交实验证明 基因在染色体上,C错误; 利用类比推理法得出的推论不具有逻辑必然性,仅是假说,不一定正确,D正确。
例4 孟德尔利用假说—演绎法发现了分离定律。下列关于假说—演绎法的叙述,
错误的是
( D)
A.孟德尔在观察现象阶段运用了统计学的方法进行分析
B.“受精时,雌雄配子的结合是随机的”,这属于假说内容
C.正确的假说不仅能解释已有的实验结果,还能预测另一些实验结果
D.孟德尔所做的自交实验的结果与预期结论相符,即可证明他的假说是正确的
例8 通过设置两个或两个以上的实验组,对结果进行比较分析,来探究某种因素与
实验对象的关系,这样的实验叫作对比实验。对比实验和对照实验都是科学探究中
标记法在人教版高中生物学必修模块的分布及应用分析
标记法在人教版高中生物学必修模块的分布及应用分析摘要：标记法在生物学研究中发挥着重要的作用，相关内容在人教版（2019）高中生物学必修模块多有涉及，本文重点介绍同位素、同位素标记法及荧光标记法在教材中的分布及应用进行分析。
关键词：标记法；同位素标记法；荧光标记法标记法在高中生物学可以分为同位素标记法和荧光标记法，同位素标记法又包含稳定同位素和放射性同位素标记。
在生物学研究中，标记法是一项重要的实验技术，通过标记法可以追踪物质的运输途径，并显示其变化规律。
同位素标记法和荧光标记法在高中生物学教材中多有涉及，本文介绍这些方法在必修教材中的分布及应用分析。
1.同位素及同位素标记法同位素是同一元素的不同原子，其原子具有相同数目的质子，但中子数目却不同。
同位素可分为两类：具有放射性的放射性同位素和不具有放射稳定同位素。
放射性同位素的原子核很不稳定，会不间断发出射线，如3H，14C，35S，32P，131I 等；稳定性同位素极不易发生自行衰变，目前技术手段检测不到其放射性，如18O 和15N。
科学家通过对同位素的追踪，可以揭示化学反应的详细过程，这种科学研究方法叫作同位素标记法，也叫同位素示踪法。
当同位素用于追踪物质运行和变化过程时，就被称为示踪元素。
生物学研究中使用的示踪元素一般是组成生物体的主要元素的同位素，即C，H，O，N，S，P等元素的同位素。
放射性同位素具有原子核不稳定、不断放出特征射线的属性，可用核探测设备对它的数量、位置(体内或体外)及在化学反应中的转变过程等，实现即时追踪。
放射性同位素标记法具有灵敏度高、测量简便、定位准确、定量精准等优点。
稳定性同位素也可作为示踪元素，可以利用它与普通同位素在原子质量、质谱性质等方面的区别，通过质谱仪或气相层析仪等仪器来完成分析。
2.同位素标记法在高中生物学教材中的分布2.1稳定同位素作为示踪元素的经典实验2.1.1人教版必修1第5章第4节“光合作用与能量转换”中“思考·讨论”探索光合作用原理的部分实验，1941年，美国科学家鲁宾(S.Ruben)和卡门(M.Kamen)用同位素示踪的方法，研究了光合作用中氧气的来源。
化学品的同位素示踪和标记方法
化学品的同位素示踪和标记方法化学是一门研究物质变化及其性质的学科，是现代工业和科技的重要基石。
化学品在生产生活中的应用广泛，涉及行业众多，如农业、医药、石油化工等。
而化学品同位素示踪和标记技术是化学领域的一项重要技术，它可以帮助我们更深入地了解化学反应的机理、物质的演化规律等。
一、同位素示踪技术同位素示踪技术是指使用在化学反应中具有同一化学性质，但重量数不同的同位素进行标记，以追踪同位素在反应中的变化和物质的运动过程的技术。
同位素标记可以通过放射性同位素和稳定同位素两种方法实现。
1.放射性同位素示踪技术放射性同位素示踪技术是利用放射性同位素的核衰变过程进行示踪的技术。
放射性同位素具有放射性，它们会自发地发射粒子，从而释放出能量。
通过测量放射性同位素衰变的速率可以追踪同位素在物质中的传递和转换过程。
这种方法常用于医学、生物学等领域。
2.稳定同位素示踪技术稳定同位素示踪技术是利用稳定同位素的质量不同来追踪示踪标记物分子在反应和代谢中的运动过程的技术。
因为各种化学物种中天然含有各种不同的稳定同位素，所以采用稳定同位素标记更加容易，也更加实用。
这种方法可以应用于各种化学领域和生命科学领域。
二、同位素标记技术同位素标记技术是指在化学反应中，用带有同位素的分子替换或追加目标分子中的氢、碳、氮、氧等元素，以追踪反应物或产物中原子的变化情况的技术。
目前，同位素标记技术主要应用于两种场合：一种是对高纯度产品的制备和鉴定，在化学和药学领域被广泛应用；另一种是对某些物质在大气、海洋等自然环境下的转移和迁移规律的研究。
总之，化学品的同位素示踪和标记技术是化学领域的一项重要技术。
通过同位素示踪和标记技术，我们可以更深入地了解化学反应的机理和物质的演化规律，为高纯度产品的制备与鉴定、物质在环境中的分布及迁移等问题提供重要依据。
标记技术在高中生物上的应用
标记技术在高中生物上的应用摘要：新课标高中生物涉及到的标记技术主要是荧光标记和放射性同位素标记，这两种标记技术也是生物学研究上常用的方法之一，该领域许多重大发现的最终定论，以及对一些假说的有力验证，都用到了标记技术。
荧光标记技术和放射性同位素标记技术在基因的定位、物质代谢、物质转化、动态平衡等方面都有广泛应用。
本文综述了两种现代分子生物学技术在高中生物上的应用。
关键词：高中生物；荧光标记；放射性同位素标记一、荧光标记和放射性同位素标记的原理荧光标记是利用自然的，或人工合成的能发荧光的物质，如荧光素、荧光染料等标记待测分子或位点。
不同的荧光物质可以发出不同颜色的荧光，跟踪其特征荧光，用荧光显示系统准确定位被标记物，并观察其动态过程。
生物学上经常用到的放射性同位素有3H、18O、35S、32P、14C、15N等。
用放射性同位素代替普通元素，不会影响其分子或化合物的化学性质。
利用放射性同位素不断发出的特征射线，用放射自显影、核探测器等放射性同位素示踪技术来显示、追踪所标记分子的变化及元素的代谢过程。
两种标记技术所用的标记物不影响大分子的生物活性和代谢过程，具有操作性强、特异性强、目的性强等特点，成为现代分子生物学技术利器，被人们广泛使用和信任。
二、荧光标记在高中生物上的应用1.细胞膜具有流动性的研究1970年，科学家用发绿色荧光的染料标记小鼠细胞表面的蛋白质分子，用发红色荧光的染料标记人细胞表面的蛋白质分子，将小鼠细胞和人细胞融合。
这两种细胞刚融合时，融合细胞的一半发绿色荧光，另一半发红色荧光。
在37℃下经过40min，两种颜色的荧光均匀分布。
这一实验表明了细胞膜具有流动性。
2.端粒学说每条染色体的两端都有一段特殊序列的DNA，称为端粒。
科学家用黄色荧光物质标记端粒，可以跟踪端粒DNA在每次细胞分裂后的变化，以此研究端粒变化与细胞活动的相关性。
3.基因的定位现代分子生物学技术能够用特定的分子，与染色体上的某一个基因结合，这个分子又能被带有荧光标记的物质识别，通过荧光显示，就可以知道基因在染色体上的位置。
细胞生物学中的细胞代谢测定和分析技术
细胞生物学中的细胞代谢测定和分析技术细胞代谢测定和分析技术是现代生物学领域中非常重要的研究手段。
通过这些技术，科学家们可以深入了解细胞内的代谢过程，研究细胞内的生物化学反应以及能量转化等关键过程。
本文将介绍细胞生物学中常见的细胞代谢测定和分析技术。
一、放射性同位素示踪技术放射性同位素示踪技术是一种经典的细胞代谢测定方法。
利用放射性同位素标记特定代谢物，科学家们可以追踪该物质在细胞内的运动、转化和消耗情况。
例如，可以使用放射性碳同位素^14C标记葡萄糖，通过测定^14C的放射性衰变来研究葡萄糖的代谢途径和速率。
二、质谱分析技术质谱分析技术可以用于测定和分析细胞中的代谢产物。
通过将细胞代谢产物离子化，然后通过质谱仪进行检测和分析，科学家们可以准确地确定代谢产物的结构和含量。
质谱分析技术广泛应用于蛋白质、脂质和代谢物等生物大分子的分析研究中。
三、荧光染料技术荧光染料技术是一种常用的细胞代谢测定和分析技术。
通过选择特定的荧光染料，科学家们可以标记特定的细胞代谢物，通过荧光显微镜观察和测量细胞内的代谢反应。
例如，利用荧光染料可以实时观测细胞内酸碱平衡、氧化还原状态、酶活性等关键代谢过程。
四、活细胞成像技术活细胞成像技术是一种非侵入式的细胞代谢测定方法。
通过利用高分辨率显微镜和荧光探针，科学家们可以实时观测和记录活细胞中的代谢反应。
该技术可以提供动态的信息，帮助研究者深入了解细胞内代谢调控的细节和机制。
五、代谢组学技术代谢组学技术是一个综合化的测定和分析细胞代谢的方法。
该技术使用高通量分析平台，将细胞内的代谢产物进行全面测定和分析，并结合生物信息学的方法，通过建立代谢组学数据库来深入挖掘细胞代谢的规律和调控机制。
细胞代谢测定和分析技术在细胞生物学研究中发挥着重要的作用。
通过这些技术，科学家们可以了解细胞内代谢调控的机制，进一步揭示细胞生物学的奥秘。
随着科技的不断进步和创新，相信细胞代谢测定和分析技术将会为细胞生物学领域带来更多的突破和进展。
同位素示踪技术在生物化学中的应用
同位素示踪技术在生物化学中的应用同位素示踪技术是一种应用广泛的生物化学方法，通过标记分子中的同位素来追踪化学反应的过程和生物体内物质的代谢途径。
这项技术在生物化学研究中起着重要的作用，不仅可以揭示生物体内各种代谢途径的动力学过程，还可以帮助科学家们深入了解生物体的生理功能和疾病的发生机制。
同位素示踪技术最早应用于物理学领域，用于研究原子核结构和放射性衰变等现象。
随着科学技术的发展，人们开始意识到同位素示踪技术在生物化学领域的潜力。
例如，放射性同位素碘-131被广泛应用于甲状腺功能检测，通过测量甲状腺摄取和代谢碘的速率，可以判断甲状腺功能的正常与否。
除了放射性同位素，稳定同位素也被广泛应用于生物化学研究中。
稳定同位素不具有放射性，因此对生物体无害，可以安全地用于研究。
稳定同位素示踪技术主要利用同位素的质量差异来追踪分子的转化过程。
例如，氢的两种稳定同位素氘和氢-1在生物体内代谢过程中存在差异。
通过标记氢的分子中的氘或氢-1，可以追踪分子在生物体内的转化过程，揭示代谢途径和反应动力学。
同位素示踪技术在蛋白质研究中也发挥着重要作用。
蛋白质是生物体内最重要的功能分子之一，研究蛋白质的结构和功能对于了解生物体的生理过程至关重要。
同位素标记技术可以用于研究蛋白质的合成、降解和交互作用等过程。
例如，科学家们可以通过标记蛋白质中的氨基酸残基，利用同位素示踪技术来追踪蛋白质的合成和降解过程。
此外，同位素示踪技术还可以用于研究蛋白质的折叠过程和交互作用，揭示蛋白质的结构和功能。
同位素示踪技术在药物研发和临床治疗中也有广泛的应用。
药物的代谢途径和药物在生物体内的转化过程对于药物疗效和安全性具有重要影响。
通过标记药物中的同位素，科学家们可以追踪药物在生物体内的代谢途径和转化速率，了解药物的药代动力学特性。
这对于药物的合理使用和疗效评估具有重要意义。
此外，同位素示踪技术还可以用于研究药物的靶向输送和药物在病灶中的分布情况，为药物研发和个体化治疗提供重要依据。
示踪剂的原理及应用
示踪剂的原理及应用示踪剂是指通过在特定物质中加入具有独特标识的化合物或放射性同位素等，用于追踪物质在环境中的迁移、转化和分布过程的技术方法。
示踪剂的原理主要有生物标记法、同位素示踪法、化学示踪法等。
下面将重点介绍示踪剂的原理及其应用。
1.生物标记法原理：利用具有特定生物活性或易被生物体吸收、转化的化合物作为示踪剂，通过测定物质在生物体内的含量或与其产生的代谢产物来追踪其在生物体内的运动。
生物标记法示踪剂包括生物活性示踪物质和内部标记物质。
生物活性示踪物质能够在生物体内发生变化，通过与目标物质的特异性作用，将目标物质与示踪物质分离或增强测定信号；内部标记物质是指加入到目标物质中，与目标物质没有特异性反应，但通过测定标记物的含量来追踪目标物的分布和转化。
2.同位素示踪法原理：同位素示踪法是通过替代物质中的一些原子核或化学键中的原子核，使其具有独特的放射性或质量差异，来对物质的运动进行追踪。
同位素示踪法主要包括放射性同位素示踪法和稳定同位素示踪法。
放射性同位素示踪法利用放射性同位素放出的射线来测定目标物质的浓度和分布。
稳定同位素示踪法则通过测定同位素含量的比值来追踪物质在环境中的流动和转化。
3.化学示踪法原理：化学示踪法是通过向目标物质中加入标记性元素或分子团，改变目标物质的物理性质或化学性质，从而追踪其在环境中的行为。
化学示踪法常用的标记方法包括氢-氘代替、碳-氧-硫-氮-氟-磷等同位素或放射性核素的标记，以及添加特定的化合物或染料等标记物质。
在环境科学领域，示踪剂的应用非常广泛。
以下是部分示踪剂应用的案例：2.土壤示踪剂：用于研究土壤侵蚀、污染物迁移、农药残留等。
示踪剂包括稳定同位素、放射性核素、荧光染料等。
3.生物示踪剂：用于研究生态系统中物种迁移、食物链关系、生物地球化学过程等。
常用的示踪剂包括饵料标记、同位素标记和DNA标记等。
5.工业示踪剂：用于追踪工业过程中的物质传输和环境污染。
常用的示踪剂包括颜料、染料、放射性核素等。
【高中】同位素标记与荧光标记技术
【高中】同位素标记与荧光标记技术一、什么是同位素标记法？同位素标记法是生物学实验和研究中常用的技术手段之一。
是利用同位素作为示踪剂对研究对象进行标记，用于追踪研究对象的运行和变化规律。
也叫同位素示踪法。
生物学上经常使用的同位素是组成原生质的主要元素，即H、N、C、S、P和O等的同位素。
【原理】具有相同质子数，不同中子数的同一元素的不同核素互为同位素。
同位素可分为稳定同位素和放射性同位素。
1、稳定同位素：稳定同位素是指原子核结构稳定，不发生衰变的同位素，稳定同位素没有放射性，如：1H、2H、15N、18O等。
在实验或研究中如使用稳定同位素，不能采用自显影等技术来追踪同位素的去向，只能利用同位素的质量差，通过测量分子质量或离心技术来区别同位素。
鲁宾和卡门就是用稳定性同位素18O分别标记H2O和CO2来研究光合作用过程中释放的氧气中O的来源。
2、放射性同位素：具有一定的半衰期，是不稳定的同位素。
常用的有：14C、32P、35S、3H等。
利用放射性同位素能不断地放出特征射线的核物理性质，就可以用探测器随时追踪它在体内或体外的位置、数量及其转变等。
放射性同位素和稳定性同位素都可作为示踪剂，但是，稳定性同位素作为示踪剂其灵敏度较低，可获得的种类少，价格较昂贵，其应用范围受到限制；而用放射性同位素作为示踪剂不仅灵敏度，测量方法简便易行，能准确地定量，准确地定位及符合所研究对象的生理条件等特点。
【高中阶段有哪些应用？】1、研究分泌蛋白的合成和分泌研究细胞器在分泌蛋白合成中的作用时，标记某一氨基酸如亮氨酸的3H，在一次性给予放射性标记的氨基酸的前提下，通过观察细胞中放射性物质在不同时间出现的位置，就可以明确地看出细胞器在分泌蛋白合成和运输中的作用。
研究手段：观察放射性在不同细胞器中出现的时间，来观察不同细胞器在分泌蛋白中的作用。
2、研究光合作用中氧气的来源1939年，鲁宾和卡门用18O分别标记H2O和CO2，然后进行两组对比实验：一组提供H2O和C18O2，另一组提供H218O和CO2。
同位素标记其他的研究方法和技术
同位素标记其他的研究方法和技术(1)假说—演绎法——孟德尔两大遗传定律的发现，摩尔根证明基因在染色体上(以白眼雄果蝇为材料)，DNA半保留复制方式的证明，温特生长素的发现实验。
(2)类比推理法——萨顿提出“基因在染色体上”。
(3)创立假说——膜的成分和结构的初步阐明，达尔文提出植物向光性假说。
(4)模型构建法——构建细胞亚显微结构物理模型，构建DNA双螺旋结构物理模型，构建光合作用、种群特征、细胞分裂等概念模型，构建种群增长两种数学模型(公式、“J”型与“S”型曲线)，构建减数分裂、血糖调节过程物理模型。
(5)显微观察法——观察多种多样的细胞、观察线粒体和叶绿体、观察细胞的有丝分裂、减数分裂、观察植物细胞的质壁分离及质壁分离复原、观察染色体变异等。
(6)差速离心法——分离各种细胞器、制备细胞膜等。
(7)对比实验法——设置两个或两个以上的实验组通过对结果的分析比较，探究某种因素对实验结果的影响，如探究酵母菌细胞呼吸的方式、酶作用特性相关的实验。
(8)密度梯度离心法——用15N标记DNA，证明DNA半保留复制(重带、轻带、中带等)。
(9)细胞染色法——活细胞染色(健那绿染色线粒体)；碘染色法，证明光合作用产生淀粉；死细胞染色(醋酸洋红液、龙胆紫溶液、改良苯酚品红染液、吡罗红甲基绿染色剂)。
(10)荧光标记法——细胞融合实验；确定基因在染色体上的实验。
(11)放射性同位素标记法——分泌蛋白的形成；光合作用H218O、C18O2探究O2中放射性；14CO2→14C3→(14CH2O)；噬菌体侵染细菌实验(32P、35S)；基因诊断等。
(12)纸层析法——绿叶中色素的提取与分离。
(13)浓度梯度设置实验——探索生长素类似物促进插条生根的先适浓度，探究影响酶活性的先适温度和先适pH。
(14)样方法——估算植物及活动能力弱、活动范围小的动物(如蚯蚓、蚜虫、昆虫卵)等的种群密度。
(15)标志重捕法——估算活动能力强、活动范围大的动物种群密度。
同位素示踪与荧光标记技术
同位素示踪与荧光标记技术[热考解读]1．同位素示踪法（1）同位素示踪法：用示踪元素标记的化合物, 可以根据这种化合物的放射性，对有关的一系列化学反应进行追踪.这种科学的研究方法叫做同位素示踪法,也叫同位素标记法。
(2）应用：可用于研究细胞内的元素或化合物的来源、组成、分布和去向等,进而了解细胞的结构和功能、化学物质的变化、反应机理等。
还可用于疾病的诊断和治疗，如碘的放射性同位素可以用来治疗甲状腺肿大。
(3)使用注意事项：一次只能使用一种同位素标记2．荧光标记法荧光标记法（Fluorescent Labeling）是利用荧光蛋白或荧光蛋白基因作为标志物对研究对象进行标记的分析方法。
(1)常用的荧光蛋白为绿色和红色两种①绿色荧光蛋白(GFP）常用的是来源于发光水母的一种功能独特的蛋白质,分子量为27 kD,具有238个氨基酸,蓝光或近紫外光照射,发射绿色荧光.②红色荧光蛋白来源于珊瑚虫，是一种与绿色荧光蛋白同源的荧光蛋白，在紫外光的照射下可发射红色荧光，有着广泛的应用前景.（2）人教版教材中用到荧光标记法的地方①《必修1》P66“细胞融合实验"：这一实验很有力地证明了细胞膜的结构特点是具有一定的流动性.②《必修2》P30“基因在染色体上的实验证据"：通过现代分子生物学技术，运用荧光标记的手段，可以很直观地观察到某一基因在染色体上的位置.(3)荧光标记法特别是在免疫学研究中也有重要的作用，例如免疫荧光抗体标记法.将已知的抗体或抗原分子标记上荧光素,当与其相对应的抗原或抗体起反应时，在形成的复合物上就带有一定量的荧光素，在荧光显微镜下就可以看见发出荧光的抗原抗体结合部位，检测出抗原或抗体。
[命题设计]1．(2018·山东青岛一模）同位素标记法常用于追踪物质运行和变化规律的研究，下列相关叙述不正确的是（)A．给小鼠供应18O2，其呼出气体中可能含有C18O2B．用含3H标记的尿嘧啶核糖核苷酸的营养液培养洋葱根尖，只能在分生区细胞中检测到放射性C．用15N标记DNA分子，可用于研究DNA分子的半保留复制D．用32P标记的噬菌体侵染大肠杆菌，保温、搅拌、离心后可检测到沉淀物中放射性很高解析：选B。
微专题三 同位素标记与荧光标记技术
于培养液中培养，如图所示。一段时间后，分别
进行搅拌、离心，并检测沉淀物和悬浮液中的放射性。下列分析错误的是
A．甲组的悬浮液含极少量32P标记的噬菌体DNA，但不产生含32P的子代噬菌体
B．甲组被感染的细菌内含有32P标记的噬菌体DNA，也可产生不含32P的子代噬菌体
C．乙组的悬浮液含极少量35S标记的噬菌体蛋白质，也可产生含35S的子代噬菌体
A．①②④B．②③④C．③④⑤D．①③⑤
5．赫尔希和蔡斯的T2噬菌体侵染大肠杆菌实验证实了DNA是遗传物质，下列关于该实验的叙述正确的是
A．实验中可用15N代替32P标记DNAB．噬菌体外壳蛋白是大肠杆菌编码的
C．噬菌体DNA的合成原料来自大肠杆菌D．实验证明了大肠杆菌的遗传物质是DNA
6．下列关于用不同方法处理与培养小鼠骨髓细胞的叙述，正确的是
A．15N标记脱氧核苷酸，证明DNA的分子结构为规则的双螺旋
B．35S标记蛋白质，证明DNA是一切生物的主要遗传物质
C．18O标记CO2，观察光合作用吸收的CO2中O元素的去向
D．3H标记胸腺嘧啶，证明通过转录过程合成RNA
解析：选C。15N标记DNA分子，证明了DNA分子的复制方式是半保留复制，A错误；噬菌体的DNA中不含S元素，但其蛋白质外壳中含有S元素，因此本实验只能说明噬菌体侵染细菌时蛋白质外壳没有进入细菌内，B错误；18O标记CO2，可以用于观察光合作用吸收的CO2中O元素的去向，C正确；转录过程利用的原料是四种核糖核苷酸，不会利用胸腺嘧啶，D错误。
放射性同位素
放射性同位素示踪和放射自显影技术
放射性同位素示踪所利用的放射性核素及它们的化合物，与自然界存在的相应普通元素及其化合物之间的化学性质和生物学性质是相同的，只是具有不同的核物理性质。
因此，就可以用同位素作为一种标记，制成含有同位素的标记化合物代替相应的非标记化合物。
在一个典型实验中，把要追踪的分子的放射性前体（或原料）加到细胞中，使其与已存在的前体分子混合，这样细胞就以同样的方式对其产生反应。
放射性分子存在的部位或化学形式的变化，可以用时间为函数进行示踪。
利用放射性同位素不断地放出特征射线的核物理性质，就可以用核探测器随时追踪它在体内或体外的位置、数量及其转变等。
放射性测定不受其他非放射性物质的干扰，可以省略许多复杂的物质分离步骤。
在生物学中经典的测定方法是放射自显影技术。
它可确定放射性化合物在细胞和组织中的部位。
进行测定时，固定细胞和组织，把细胞或组织切片置于载玻片上，在暗处把感光乳胶或感光薄膜覆盖在细胞和组织上，并在暗处保持一段时间。
在这段时间内，由于放射性同位素衰变使感光胶片曝光，再进行显影、定影处理。
通过银粒的部位，可检测出放射性化合物在细胞和组织中的分布。
例如利用3H标记的氨基酸作为原料可以追踪蛋白质的合成和加工转运途径。
利用3H标记的胸苷可以追踪DNA，或者利用14C尿苷可以追踪RNA等。
几种常见的抗体标记方法-酶标记、荧光素标记、同位素标记、生物素标记
几种常见的抗体标记方法-酶标记、荧光素标记、同位素标记、生物素标记抗体标记主要有酶标记、荧光素标记、同位素标记、生物素标记等，还有一些其他的标记方法例如金标记，本文主要讲述了这些抗体标记的基本原理、操作步骤。
一、酶标记1、辣根过氧化物酶(HRP)标记辣根过氧化物酶(HRP)标记单抗和多克隆抗体的常用方法是过碘酸钠法。
其原理是HRP的糖基用过碘酸钠氧化成醛基，加入抗体IgG 后该醛基与IgG氨基结合，形成Schiff氏碱。
为了防止HRP 中糖的醛基与其自身蛋白氨基发生偶合，在用过碘酸钠氧化前先用二硝基氟苯阻断氨基。
氧化反应末了，用硼氢化钠稳定Schiff氏碱。
这里介绍两种程序。
程序一：(1)将5mg HRP溶于0.5ml 0.1mol/L NaHCO3溶液中;加0.5ml 10mmol/LNaIO4溶液，混匀，盖紧瓶塞，室温避光作用2小时。
(2)加0.75ml 0.1mol/L Na2CO3混匀。
(3)加入0.75ml小鼠已处理的腹水，或纯化单抗等(15mg/ml)，混匀。
(4)称取SephadexG25干粉0.3g，加入一支下口垫玻璃棉的5ml注射器外筒内;随后将上述交联物移入注射器外套;盖紧，室温作用(避光)3小时或4℃过夜。
(5)用少许PBS将交联物全部洗出，收集洗出液，加1/20V体积新鲜配制的5mg/mlNaBH4溶液，混匀，室温作用30分钟;再加入3/20V NaBH4溶液，混匀，室温作用1小时(或4℃过夜)。
(6)将交联物过Sephadex g200或Sepharose6B(2.6×50cm)层析纯化，分管收集第一峰。
(7)酶结合物质量鉴定：克分子比值测定酶量(mg/ml)=OD403×0.4IgG量(mg/ml)=(OD280-OD403×0.3)×0.62克分子比值(E/P)=酶量×4/IgG量，一般在1-2之间。
酶结合率=酶量×体积/抗体，标记率一般为0.3-0.6，即1-2个HRP分子结合在一个抗体分子上，标记率可大于0.6，0.8，0.9;OD403/OD280等于0.4时，E/P约为1。
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同位素示踪与荧光标记技术
[热考解读]
1．同位素示踪法
(1)同位素示踪法：用示踪元素标记的化合物，可以根据这种化合物的放射性，对有关的一系列化学反应进行追踪。
这种科学的研究方法叫做同位素示踪法，也叫同位素标记法。
(2)应用：可用于研究细胞内的元素或化合物的来源、组成、分布和去向等，进而了解细胞的结构和功能、化学物质的变化、反应机理等。
还可用于疾病的诊断和治疗，如碘的放射性同位素可以用来治疗甲状腺肿大。
(3)使用注意事项：一次只能使用一种同位素标记
2．荧光标记法
荧光标记法(Fluorescent Labeling)是利用荧光蛋白或荧光蛋白基因作为标志物对研究对象进行标记的分析方法。
(1)常用的荧光蛋白为绿色和红色两种
①绿色荧光蛋白(GFP)常用的是来源于发光水母的一种功能独特的蛋白质，分子量为27 kD，具有238个氨基酸，蓝光或近紫外光照射，发射绿色荧光。
②红色荧光蛋白来源于珊瑚虫，是一种与绿色荧光蛋白同源的荧光蛋白，在紫外光的照射下可发射红色荧光，有着广泛的应用前景。
(2)人教版教材中用到荧光标记法的地方
①《必修1》P66“细胞融合实验”：这一实验很有力地证明了细胞膜的结构特点是具有一定的流动性。
②《必修2》P30“基因在染色体上的实验证据”：通过现代分子生物学技术，运用荧光标记的手段，可以很直观地观察到某一基因在染色体上的位置。
(3)荧光标记法特别是在免疫学研究中也有重要的作用，例如免疫荧光抗体标记法。
将已知的抗体或抗原分子标记上荧光素，当与其相对应的抗原或抗体起反应时，在形成的复合物上就带有一定量的荧光素，在荧光显微镜下就可以看见发出荧光的抗原抗体结合部位，检测出抗原或抗体。
[命题设计]
1．(2018·山东青岛一模)同位素标记法常用于追踪物质运行和变化规律的研究，下列相关叙述不正确的是()
A．给小鼠供应18O2，其呼出气体中可能含有C18O2
B．用含3H标记的尿嘧啶核糖核苷酸的营养液培养洋葱根尖，只能在分生区细胞中检测到放射性
C．用15N标记DNA分子，可用于研究DNA分子的半保留复制
D．用32P标记的噬菌体侵染大肠杆菌，保温、搅拌、离心后可检测到沉淀物中放射性很高
解析：选B。
给小鼠供应18O2，参与有氧呼吸的第三阶段生成H182O，H182O再参与有氧呼吸的第二阶段生成C18O2，因此其呼出气体中可能含有C18O2，A正确；3H标记的尿嘧啶核糖核苷酸是合成RNA的原料，由于所有细胞都能合成RNA，因此用含3H标记的尿嘧啶核糖核苷酸的营养液培养洋葱根尖，不仅能在分生区细胞中检测到放射性，在其他细胞中也能检测到放射性，B错误；用15N标记DNA分子，可用于研究DNA分子的半保留复制，C正确；32P标记的是噬菌体的DNA，噬菌体侵染细菌时，只有DNA进入细菌并随着细菌离心到沉淀物中，因此用32P标记的噬菌体侵染大肠杆菌，保温、搅拌、离心后可检测到沉淀物中放射性很高，D正确。
2．下列生物学研究中，应用同位素标记法能实现研究目的的是()
A．15N标记脱氧核苷酸，证明DNA的分子结构为规则的双螺旋
B．35S标记蛋白质，证明DNA是一切生物的主要遗传物质
C．18O标记CO2，观察光合作用吸收的CO2中O元素的去向
D．3H标记胸腺嘧啶，证明通过转录过程合成RNA
解析：选C。
15N标记DNA分子，证明了DNA分子的复制方式是半保留复制，A错误；噬菌体的DNA中不含S元素，但其蛋白质外壳中含有S元素，因此本实验只能说明噬菌体侵染细菌时蛋白质外壳没有进入细菌内，B错误；18O标记CO2，可以用于观察光合作用吸收的CO2中O元素的去向，C正确；转录过程利用的原料是四种核糖核苷酸，不会利用胸腺嘧啶，D错误。
3．荧光显微技术是用荧光显微镜观察被荧光染料处理的生物样品，由于能观察细胞内动态变化，且效果良好，现在得到了广泛的应用。
请回答下列问题：
(1)1970年，科学家分别用绿色和红色荧光染料，标记小鼠和人体细胞膜上的蛋白质，然后将人、鼠细胞融合，并分为两组。
开始时，融合细胞的一半发红色荧光，另一半发绿色荧光，将其中一组置于37 ℃下处理40 min，两种颜色的荧光均匀分布；将另一组置于0 ℃下处理40 min，融合细胞仍一半发红色荧光，一半发绿色荧光。
该实验说明，细胞膜具有流动性，且流动性的大小与________有关。
(2)如果用黄色荧光染料标记染色体上的端粒，在细胞分裂的分裂期(分裂未完成)，一个果蝇体细胞中共有________个黄色荧光点，一个大肠杆菌细胞中共有________个黄色荧光点。
(3)如果在一对同源染色体上，用相同颜色的荧光染料标记相同或等位基因，用不同颜色的荧光染料标记非等位基因，在四分体时期，一个初级精母细胞中相同颜色的荧光点有________个，并可观察到不同颜色的荧光点在染色体上呈________排列，从而用现代分子生物学技术
证明了基因位于染色体上。
解析：(1)在两种细胞刚融合时，融合细胞一半发红色荧光，一半发绿色荧光，其中一组经37 ℃处理40 min后两种颜色的荧光均匀分布，这说明细胞膜具有流动性；而另一组经0 ℃处理40 min后，融合细胞仍是一半发红色荧光，一半发绿色荧光，说明细胞膜的流动性与温度有关。
(2)端粒是每条染色体两端的一段特殊序列的DNA。
未复制的染色体有2个端粒，则已复制的染色体有4个端粒，一个果蝇体细胞中共有8条染色体，所以该细胞在分裂期(分裂未完成)共有32个端粒。
大肠杆菌为原核生物，原核细胞中没有染色体，DNA呈环状，没有端粒。
(3)在四分体时期，染色体已复制，一对同源染色体上的相同或等位基因有4个，故该初级精母细胞中相同颜色的荧光点有4个。
因基因在染色体上呈线性排列，所以可观察到不同颜色的荧光点在染色体上呈线性排列。
答案：(1)温度(2)320(3)4线性。