海藻糖的提取与分离实验设计重点讲义资料

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1TPM酵母中海藻糖提取纯化工艺设计_生物工程设备与分离技术课程设计

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吉林工程技术师范学院食品工程学院课程设计课程名称:生物工程设备与分离技术班级:生物工程10411TPM酵母中海藻糖提取纯化工艺设计目录目录 (I)第一章项目总论 (1)1.1海藻糖概述 (1)1.1.1 海藻糖的性质 (1)1.1.2 海藻糖的生理功能 (1)1.1.3 海藻糖的应用前景 (2)1.2 海藻糖的生产工艺 (2)1.2.1 酵母中海藻糖的提取纯化工艺 (3)第二章技术方案 (5)2.1 产品方案 (5)2.2生产工艺流程设计 (5)2.3生产工艺过程说明 (6)2.3.1 乙醇提取 (6)2.3.2 冷却离心 (6)2.3.3 浓缩 (6)2.3.4 活性炭脱色脱蛋白 (6)2.3.5 离子交换 (6)2.3.6 浓缩结晶 (7)2.3.7 过滤干燥 (7)2.4 物料衡算 (7)2.4.1 技术参数 (7)2.4.2 计算 (7)第三章设备选型 (9)3.1 热回流提取罐 (9)3.2 离心机 (9)3.3 浓缩罐 (9)3.4 离子交换设备 (9)3.5 干燥机 (9)第四章防污措施 (11)4.1 车间环境卫生 (111)4.2 废水处理 (11)4.3 废渣处理 (11)第五章结语 (12)参考文献 (13)第一章项目总论1.1 海藻糖概述1.1.1 海藻糖的性质海藻糖叉名茧蜜糖,蘑菇糖,漏芦糖或蕈糖,是在动物、植物、微生物中广泛分布的一种低聚糖。

它是由两分子的吡哺葡萄糖单体以a,a-1,1糖苷键连接而成,其化学式为a—D-吡喃葡萄糖基一a—D一吡喃葡萄糖苷,分子式为C12H22O11·H2O相对分子量为378.33。

其结构式如图1.1图1.1海藻糖是白色晶体,带有两分子结晶水,当加热到130"C时,海藻糖失去结品水,变成无水晶体。

海藻糖溶于水、冰醋酸和热乙醇中。

其水溶液性质稳定,无色无嗅,口感咯带甜昧,它不会焦化。

它对热、酸都十分稳定,是天然双糖中最稳定的糖质。

海藻糖的提取与分离实验设计

海藻糖的提取与分离实验设计

目录海藻糖的提取与分离实验设计------------------------------------------ 2 前言----------------------------------------------------------- 2 关键词--------------------------------------------------------- 21、海藻糖的理化性质--------------------------------------------- 21.1密度----------------------------------------------------- 21.2熔点----------------------------------------------------- 21.3溶解热--------------------------------------------------- 21.4甜度----------------------------------------------------- 21.5溶解性、晶体析出性--------------------------------------- 21.6高玻璃化转变温度----------------------------------------- 31.7低吸湿性和保水性----------------------------------------- 31.8耐热、耐酸性--------------------------------------------- 31.9着色性--------------------------------------------------- 32、海藻糖的功效作用--------------------------------------------- 32.1保护功能------------------------------------------------- 32.2抑制淀粉老化--------------------------------------------- 42.3防止蛋白质变性------------------------------------------- 42.4抑制鱼腥味的产生----------------------------------------- 42.5抑制脂质氧化变质----------------------------------------- 52.6矫味作用------------------------------------------------- 53、海藻糖提取分离的原理和影响因素的预判------------------------- 53.1提取分离原理--------------------------------------------- 53.2海藻糖标准曲线的绘制原理--------------------------------- 63.3粉末活性炭脱色脱蛋白效果的表征--------------------------- 73.4离子交换树脂脱盐脱色效果的表征--------------------------- 73.5相关影响因素--------------------------------------------- 74、海藻糖提取分离的实验设计------------------------------------ 84.1实验原料与器材------------------------------------------- 84.2海藻糖提取与分离工艺流程--------------------------------- 94.2.1实验流程----------------------------------------------- 94.2.2相关因素对海藻糖提取效率的影响------------------------- 94.2.3相关因素对粉末活性炭脱色脱蛋白效率的影响-------------- 114.2.4相关因素对离子交换柱脱盐脱色效率的影响---------------- 155、总结------------------------------------------------------------ 17 参考文献----------------------------------------------------------- 18海藻糖的提取与分离实验设计化学132牟丽慧1301020414前言海藻糖是由两个葡萄糖分子以α,α,1,1-糖苷键构成的非还原性糖,广泛存在于海藻、酵母、霉菌、食用菌、虾、昆虫及生物体内,具有保湿性、抗寒抗旱性、耐热耐酸性等特殊的生物学功能,对生物大分子和生物体均有非特异性的保护作用。

海藻糖的提取与分离实验设计重点讲义资料

海藻糖的提取与分离实验设计重点讲义资料

目录海藻糖的提取与分离实验设计------------------------------------------ 2 前言----------------------------------------------------------- 2 关键词--------------------------------------------------------- 21、海藻糖的理化性质--------------------------------------------- 21.1密度----------------------------------------------------- 21.2熔点----------------------------------------------------- 21.3溶解热--------------------------------------------------- 21.4甜度----------------------------------------------------- 21.5溶解性、晶体析出性--------------------------------------- 21.6高玻璃化转变温度----------------------------------------- 31.7低吸湿性和保水性----------------------------------------- 31.8耐热、耐酸性--------------------------------------------- 31.9着色性--------------------------------------------------- 32、海藻糖的功效作用--------------------------------------------- 32.1保护功能------------------------------------------------- 32.2抑制淀粉老化--------------------------------------------- 42.3防止蛋白质变性------------------------------------------- 42.4抑制鱼腥味的产生----------------------------------------- 42.5抑制脂质氧化变质----------------------------------------- 52.6矫味作用------------------------------------------------- 53、海藻糖提取分离的原理和影响因素的预判------------------------- 53.1提取分离原理--------------------------------------------- 53.2海藻糖标准曲线的绘制原理--------------------------------- 63.3粉末活性炭脱色脱蛋白效果的表征--------------------------- 73.4离子交换树脂脱盐脱色效果的表征--------------------------- 73.5相关影响因素--------------------------------------------- 74、海藻糖提取分离的实验设计------------------------------------ 84.1实验原料与器材------------------------------------------- 84.2海藻糖提取与分离工艺流程--------------------------------- 94.2.1实验流程----------------------------------------------- 94.2.2相关因素对海藻糖提取效率的影响------------------------- 94.2.3相关因素对粉末活性炭脱色脱蛋白效率的影响-------------- 114.2.4相关因素对离子交换柱脱盐脱色效率的影响---------------- 155、总结------------------------------------------------------------ 17 参考文献----------------------------------------------------------- 18海藻糖的提取与分离实验设计化学132牟丽慧1301020414前言海藻糖是由两个葡萄糖分子以α,α,1,1-糖苷键构成的非还原性糖,广泛存在于海藻、酵母、霉菌、食用菌、虾、昆虫及生物体内,具有保湿性、抗寒抗旱性、耐热耐酸性等特殊的生物学功能,对生物大分子和生物体均有非特异性的保护作用。

海带多糖的提取及鉴定

海带多糖的提取及鉴定

海带多糖的提取及鉴定1、实验目的及原理海带是褐藻门植物,海带多糖是海带药用价值的最集中体现,海带多糖的种类很多。

本实验的主要目的是掌握海带多糖的提取及测定方法。

对海带多糖的提取方法有很多,碱提取法是其中重要的一种。

多糖中的己糖能与苯酚硫酸试剂发生显色反应,颜色的深浅与己糖含量成正比。

颜色的深浅可通过分光光度计测定,因此,可建立不同浓度的标准己糖与吸光度间的呈线性关系,绘制标准曲线,测定样品的吸光度值,再从表中曲线中查到样品中多糖的含量。

2、实验基本内容和要求(1)掌握碱提取法提取海带多糖(2)掌握利用绘制标准曲线方法测定多糖含量3、实验所用仪器设备和试剂(1)基本仪器:分光光度计,离心机(2)实验材料及试剂:干海带1 %碳酸钠溶液:称取15 g无水碳酸钠加入1500 mL蒸馏水,95%乙醇溶液,氯化钙溶液(2g/100mL)4、实验步骤4.1 海带多糖的提取(1)购买海带后,用自来水将其洗净,晒干,研磨,过60目-80目的筛,收集备用。

称取制备好的2 g海带粉,置于烧杯中,加入28 mL 刚配好的碳酸钠溶液。

(2)在50℃水浴中水浴,趁热用棉纶网进行吊滤,并不断用热水冲洗保持温度,获得的吊滤液于5000 r/min 离心15 min,保留上清液。

上清液经减压浓缩(40℃)后,加入三倍体积95%乙醇,沉淀过夜。

离心后获得海带粗多糖。

二.鉴定Molisch反应(α-萘酚反应)此方法是鉴定糖类最常用的颜色反应。

它的原理是:糖类在浓酸作用下所形成的糠醛及其衍生物可以与α-萘酚作用,形成红紫色复合物。

由于在糖溶液与浓硫酸两液面间出现红紫色的环,因此又称紫环反应。

α-萘酚也可用麝香草酚或其他的苯酚化合物代替,麝香草酚溶液比较稳定,其灵敏度与α-萘酚一样。

除了糖类之外,各种糠醛衍生物、葡萄糖醛酸、丙酮、甲酸、乳酸等都可以呈现近似的阳性反应。

三,硫酸-蒽酮法测定海带多糖含量1.配制硫酸-蒽酮试剂:取2 g蒽酮溶解于1000 mL浓H2SO4中,当日配制使用。

海藻糖制备方法及应用研究概述

海藻糖制备方法及应用研究概述

海藻糖制备方法及应用研究概述周培华,刘 兰,刘 赛*,侯文慧,周 颖,袁列江(湖南省产商品质量检验研究院,湖南长沙 410017)摘 要:海藻糖为一种性质稳定且不具有还原性的功能糖,具有保护生物活性物质的特殊功能,在各行各业中应用广泛,且具有广阔的发展前景。

本文主要综述了目前海藻糖的制备方法和海藻糖的应用研究,探讨了海藻糖的发展动态及应用前景,以供相关人员参考。

关键词:海藻糖;功能糖;制备方法;应用研究Review on Preparation and Application of Trehalose ZHOU Peihua, LIU Lan, LIU Sai*, HOU Wenhui, ZHOU Ying, YUAN Liejiang(Hunan Provincial Institute of Product and Goods Quality Inspection, Changsha 410017, China) Abstract: Trehalose is a stable and non reducing functional sugar with special functions of protecting bioactive substances. It is widely used in various industries and has broad development prospects. In this paper, the preparation methods of trehalose and the application of trehalose were reviewed, and the development trend and application prospect of trehalose were discussed, for reference by relevant personnel.Keywords: trehalose; functional sugar; preparation method; application research海藻糖是由两个葡萄糖分子以α-1,1糖苷键构成的非还原性糖,性质很稳定,属于一种功能性糖,它具有保护生物活性物质的特殊功能,能很好地保护细胞和营养物质的结构,使生物体在极端异常情况下,仍能保持生命活力[1]。

藻类中多糖的提取

藻类中多糖的提取

,Ph=5.0,0.75L/min Ph=5.0,3h,
,L/S=45
L/S=45
SO42-
26.5%
20.8%
分离
分离海藻多糖比较好的方法是萃取法: ①与多糖相互作用时间有选择性,产 品纯度高 ②相比可以根据需要调节,富集倍数 高 ③萃取剂用量少,可循环,成本低 ④易于工程放大,实现连续化,自动 化。
海带破碎浸提硫酸脂多糖
提取方法 提取条件
超声提取
传统100℃提 取
40℃,120W,25min 100 ℃,
,Ph=5.0,0.75L/min Ph=5.0,3h,
,L/S=45
L/S=45
提取率 1.82%
1.81%
提取方法 提取条件
超声提取
传统100℃提 取
40℃,120W,25min 100 ℃,
蒽酮比色法:是一种快速而简便的定 糖方法。蒽酮可以与游离的已糖或多 糖中的已糖基、戊糖基及已糖醛酸起 反应,反应后溶液呈蓝绿色,在620nm 处有最大吸收。
2、海带中提取岩藻聚糖的研究
海带除可食用外还可提取碘、甘露醇、 褐藻酸钠等。 采用0.1mol/L HCl为萃取液,用量为 藻体重量的8倍,萃取时间2h,并用 70% 饱和度乙醇沉淀精制,岩藻聚糖 的提取率约为原料的2.1%。
5、海藻多糖的分离纯化及组成分析
称取适量海藻,剪碎,加2倍体积蒸馏 水,60℃水浴提取8h,浸提3次,提取液 浓缩至1∕3体积,加3.5倍无水乙醇,在 冰箱中静置12h后离心,收集沉淀,冷冻 干燥得海藻粗多糖。
四、结论
破碎 破碎方法
优缺点
机械破碎
难以将细胞有效破碎
化学破碎(酶法破 有化学反应,容易造成
新月 60 240 10 1:25 藻

海藻糖提取工艺研究

海藻糖提取工艺研究

本 实验通过 葸酮一 硫 酸 法 测 定 海 藻 糖 的 量 。将 提 取
液 按 一定 比例稀 释后 与 蒽 酮硫 酸溶 液 以 1 : 4的 比例 混
合 反应 ,在 5 9 0 n m处测 吸光值 。所 得 的吸光值 即为稀
释 液 中 相 应 的 含 量 ,通 过 计 算 既 能 得 出 酵 母 中 海 藻 糖
表 1 海 藻 糖 标 准 液 的 配 制
有 “ 生 命 之 糖 ”称 号 的海 藻 糖 具 有 非 特 异 性 保 护 功 能 。它 不 仅 可 以作 为 生 物 体 内 的 能量 储 备 ,也 可 以保 护 体 内完 整 细 胞 免 受 外 界 恶 劣 条 件 的 侵 害 ,更 值 得 关 注 的
高 活 性 安 琪 酵母 ( 安琪 股 份 有 限公 司 ) 。
1 . 2 实 验预 处 理
三 氯 乙 酸 、浓 硫 酸 、 乙 醇 、蒽 酮 、海 藻 糖 标 准 品 ( 上 海 恒 信 化学 试 剂 有 限 公 司 ) 。
1 . 3 实 验 仪 器
M ,温 度 为 9 0℃ ,用 量 为 1 2 0 mL,反 应 时 间 为 7 0 mi n,得 率 为 1 8 . 9 %。 关 键 词 :酵母 ;海 藻糖 ;提 取 工 艺 ;三 氯 乙酸 中图 分 类 号 :T S 2 4 4 文 献 标 识 码 :A DOI :1 0 . 1 9 5 4 1 / j . e n k i . i s s n l 0 0 4 — 4 1 0 8 . 2 0 1 7 . 0 3 . 0 2 5
取 一 定 量 的 酵 母 粉 平 铺 于 培 养 皿 中 ,0 . 5 m n l 左 右 的 厚 度 ,放 于 9 0℃的烘 箱 中处 理 6 ~ 8 h ,使 酵 母 的细 胞 壁 破 裂 , 以提 高 提 取 率 。

海藻糖实验初步方案-1

海藻糖实验初步方案-1

海藻糖实验初步工艺一、项目简介海藻糖(Trehalose)是由两分子葡萄糖通过α-1,1糖苷键结合的非还原性双糖,无毒无害,具有非着色性、耐酸、耐热、低吸湿性等特性,具有抗辐射、防止蛋白质变性、稳定组织细胞结构与保鲜效果、抗冷冻保护、稳定物料中超氧化物歧化酶等诸多功能。

当生物细胞处于干燥、高温、高压等恶劣环境,海藻糖对生物和生物大分子有良好的非特异性保护作用,在科学界素有“生命之糖”的美誉。

随着其独特的生物学性质及功能的发现,海藻糖逐渐成为国际上研究热点。

二、海藻糖国内外市场概况海藻糖在食品工业、生命科学、医药、农业、化妆品工业等领域都有着广阔的应用前景。

2000年,美国FDA授予海藻糖GRAS(安全健康食品),联合国粮农组织和世界卫生组织(FAO/WHO)食品添加剂联合专家委员会确认对海藻糖的每日允许摄入量(ADI)不需特别限制;2001年,欧盟批准海藻糖作为新型食品或食品添加剂进入其市场。

海藻糖由此成为热门的产品,掀起了应用研究的高潮,在国际市场上的需求量连年剧增,至今已在欧洲、北美和亚洲国家被广泛应用于上万种商品中。

估计今后几年,海藻糖国际市场的年需求量将达15万吨以上。

国际的海藻糖年产量约5万吨,经调研,国内的海藻糖年产量约4千吨,市场存在着严重的空缺。

海藻糖的市场前景较好。

三、实验材料1、菌株扣囊复膜酵母(Saccharomycopsis fibuligera)的海藻糖高产突变株A11:中国海洋大学实验室分离并保存。

2、培养基和试剂及仪器YPD (Yeast Polypepton Dextrose)培养基:1.0%(w/v)酵母膏,2.0%(w/v) 葡萄糖,2.0%(w/v)蛋白胨。

YPS (Yeast polypepton starch)培养基:1.0%(w/v)酵母膏,2.0%(w/v)可溶性淀粉,2.0%(w/v)蛋白胨。

黄豆饼粉水解液培养基:4.0%(w/v)黄豆饼粉水解液,1.0%(w/v)可溶性淀粉。

实验五 海带多糖的提取及测定

实验五 海带多糖的提取及测定

实验五海带多糖的提取及含量测定(3学时)1、实验目的及原理海带是褐藻门植物,海带多糖是海带药用价值的最集中体现,海带多糖的种类很多。

本实验的主要目的是掌握海带多糖的提取及测定方法。

对海带多糖的提取方法有很多,碱提取法是其中重要的一种。

多糖中的己糖能与苯酚-硫酸试剂发生显色反应,颜色的深浅与己糖含量成正比。

颜色的深浅可通过分光光度计测定,因此,可建立不同浓度的标准己糖与吸光度间的呈线性关系,绘制标准曲线,测定样品的吸光度值,再从表中曲线中查到样品中多糖的含量。

2、实验基本内容和要求(1)掌握碱提取法提取海带多糖(2)掌握利用绘制标准曲线方法测定多糖含量3、实验所用仪器设备和试剂(1)基本仪器:分光光度计,离心机(2)实验材料及试剂:干海带1 %碳酸钠溶液:称取15g无水碳酸钠加入1500ml蒸馏水95%乙醇溶液,氯化钙溶液(2g/100ml),1.0ml 6%的苯酚溶液,98%浓硫酸标准糖溶液:用岩藻糖和半乳糖fuc/gal(3:1)作为标准糖,取其混合物0.1g,其中0.075g的岩藻糖,0.025g的半乳糖,将其溶解到1000ml的水中,制成0.1mg/ml的标准溶液。

梯度稀释,用蒸馏水稀释分别配成,0,0.02,0.04,0.06,0.08,0.1mg/ml。

4、实验步骤4.1海带多糖的提取(1)购买海带后,用自来水将其洗净,晒干,研磨,过60目----80目的筛,收集备用。

称取制备好的2g海带粉,置于烧杯中,加入28ml刚配好的碳酸钠溶液。

(2)在50℃水浴中水浴,趁热用棉纶网进行吊滤,并不断用热水冲洗保持温度,获得的吊滤液于5000r/min离心15min,保留上清液。

上清液经减压浓缩(40℃)后,加入三倍体积95%乙醇,沉淀过夜。

离心后获得海带粗多糖。

4.2海带多糖的测定(1)将标准糖配成0.1mg/ml溶液(2)取少量标准糖溶液,用蒸馏水稀释到2.0ml,向其中加入1.0ml 6%的苯酚溶液,振荡器混匀,再加入浓硫酸5.0ml,振荡混匀。

海藻糖实验初步方案-1

海藻糖实验初步方案-1

海藻糖实验初步工艺一、项目简介海藻糖(Trehalose)是由两分子葡萄糖通过α-1,1糖苷键结合的非还原性双糖,无毒无害,具有非着色性、耐酸、耐热、低吸湿性等特性,具有抗辐射、防止蛋白质变性、稳定组织细胞结构与保鲜效果、抗冷冻保护、稳定物料中超氧化物歧化酶等诸多功能。

当生物细胞处于干燥、高温、高压等恶劣环境,海藻糖对生物和生物大分子有良好的非特异性保护作用,在科学界素有“生命之糖”的美誉。

随着其独特的生物学性质及功能的发现,海藻糖逐渐成为国际上研究热点。

二、海藻糖国内外市场概况海藻糖在食品工业、生命科学、医药、农业、化妆品工业等领域都有着广阔的应用前景。

2000年,美国FDA授予海藻糖GRAS(安全健康食品),联合国粮农组织和世界卫生组织(FAO/WHO)食品添加剂联合专家委员会确认对海藻糖的每日允许摄入量(ADI)不需特别限制;2001年,欧盟批准海藻糖作为新型食品或食品添加剂进入其市场。

海藻糖由此成为热门的产品,掀起了应用研究的高潮,在国际市场上的需求量连年剧增,至今已在欧洲、北美和亚洲国家被广泛应用于上万种商品中。

估计今后几年,海藻糖国际市场的年需求量将达15万吨以上。

国际的海藻糖年产量约5万吨,经调研,国内的海藻糖年产量约4千吨,市场存在着严重的空缺。

海藻糖的市场前景较好。

三、实验材料1、菌株扣囊复膜酵母(Saccharomycopsis fibuligera)的海藻糖高产突变株A11:中国海洋大学实验室分离并保存。

2、培养基和试剂及仪器YPD (Yeast Polypepton Dextrose)培养基:1.0%(w/v)酵母膏,2.0%(w/v) 葡萄糖,2.0%(w/v)蛋白胨。

YPS (Yeast polypepton starch)培养基:1.0%(w/v)酵母膏,2.0%(w/v)可溶性淀粉,2.0%(w/v)蛋白胨。

黄豆饼粉水解液培养基:4.0%(w/v)黄豆饼粉水解液,1.0%(w/v)可溶性淀粉。

海藻活性多糖的分离纯化 2 - 副本

海藻活性多糖的分离纯化 2 - 副本

主要仪器
分子筛柱Superdex 200 KK16/ 60
DEAE -Cellulose - 32 阴离子柱
水浴锅
材料和试剂
• • • • • • • • • 1 kg 海藻;蒸馏水 ; 无水乙醇; pH 值7. 2 浓度0. 02 mol/ L 磷酸缓冲液( PBS) 浓度0. 02mol/ L PBS: 摩尔浓度PBS主要是以下一对缓冲液 0.02M PBS配制: A:Na2HPO4·12H2O 14.252g定容至1000ml B:NaH2PO4·2H2O 6.242g定容至1000ml 0.02M PBS(pH7.2)配制 A 36.0ml+B 14.0ml+50ml 水 0-0. 75 mol/ L NaCl 5组
用烧碱调节ph至7.2
实验主要流程
浸提和分离技术分离出海藻粗多糖
DEAE -Cellulose32 阴离子柱
分子筛柱Superdex 200 KK16/ 60
纯多糖
操作流程
一、海藻多糖的提取分离
1.称取1 kg 海藻,剪碎,加2 倍体积蒸馏水,60 ℃水浴提取8 h ,浸提3 次。 2.提取液浓缩至1/ 3 体积,加3. 5 倍无水乙醇,在冰箱中静置12 h。 3.离心,收集沉淀,冷冻干燥得海藻粗多糖
实验目的
实验原理
DEAE纤维素阴离子柱层板分离多糖的原理主要是其可吸附离 子型物质,比如蛋白质、酸性多糖等,而作为大多数的中性多 糖则可顺利流出,从而去粗取精、达到分离的目的。当然, DEAE的细度很细,也可起到分子筛的作用,但其分离效果会和 柱高、洗脱溶剂、粒径的关系很大,效果并不很好,且在大量 水冲的情况下,中性多糖基本均可洗脱下来。
结果
• 得到白色粉末,黄褐色粉末或棕褐色粉末(根据选用的海藻种 类不同,得到的海藻多糖颜色也不同),为海藻多糖。

海藻糖的分离纯化应用膜分离技术分析

海藻糖的分离纯化应用膜分离技术分析

海藻糖的分离纯化应用膜分离技术分析
海藻糖是一种安全、可靠的天然糖类。

市场中海藻糖的需求量大,海藻糖的提取方法随着产品需求量的增大而备受关注。

下面,小编为大家介绍一下海藻糖提取应用的的膜分离技术。

海藻糖纯化工艺
海藻糖与葡萄糖混合液通过填装有色谱树脂的连续色谱分离系统,在树脂罐中,由于色谱树脂对海藻糖与葡萄糖的作用力不同,海藻糖先于葡萄糖流出,而葡萄糖由于色谱树脂中作用力的原因,流动相对较慢,需要用水洗脱,后流出物为葡萄糖,为了进一步提高分离效果,需要把一部分葡萄糖液与初步分离的进料液混合,再经过树脂分离,以便能够收集到比较高纯度的海藻糖液。

采用膜分离技术提取海藻糖比采用原有的微生物或酶法生产海藻糖的工艺,提取收率可提高85%以上,副产的麦芽糖醇又具有较高的利用价值,因此对降低海藻糖的生产成本和市场价位,增强海藻糖的市场竞争力具有很好的经济意义和社会意义。

酵母抽提物超滤操作,可看作纳滤过程的预处理过程,操作压力和操作时间及料液流速对超滤通量均有很大影响。

纳滤操作起到浓缩和纯化作用,操作压力对纳滤通量产生较大影响,浓缩倍数、操作方式同样影响纳滤膜分离性能,采用循环式较间歇式省时节能。

经过超滤、纳滤操作,再经结晶、干燥处理,得到海藻糖成品,提取率达85.6%,高于传统提取方法。

海藻糖对生物体具有神奇的保护作用,是因为海藻糖在高温、高寒、高渗透压及干燥失水等恶劣环境条件下在细胞表面能形成独特的保护膜,有效地保护蛋白质分子不变性失活,从而维持生命体的生命过程和生物特征。

糖药物之海藻糖PPT课件

糖药物之海藻糖PPT课件

未来研究方向与展望
深入研究海藻糖的生物保护机制
进一步探究海藻糖在生物分子保护方面的作用机制,为开发新型生物 保护剂提供理论支持。
拓展海藻糖在药物载体领域的应用
研究海藻糖与不同药物的结合方式和作用机理,为药物传递系统的研 发提供新的思路和方法。
开发海藻糖在功能性食品和饮料中的应用
研究海藻糖与其他食品成分的相互作用,探索其在功能性食品和饮料 中的更多应用可能性。
海藻糖在糖药物中的优势与局限性
优势
海藻糖具有较好的生物相容性和稳定性,可以作为药物载体 提高药物的疗效和稳定性;同时,海藻糖可以通过修饰和改 造实现药物的靶向治疗,提高药物的疗效和降低副作用。
局限性
海藻糖的生产成本较高,可能会影响其在糖药物领域的应用 ;此外,海藻糖的生物降解性能和安全性也需要进一步研究 和验证。
海藻糖的理化性质
海藻糖是一种非还原性双糖,由两个葡萄糖分子通过半缩醛羟基以α-1,1糖苷键连接 而成。
海藻糖具有较高的热稳定性,熔点为223℃,不易结晶,易溶于水,难溶于乙醇等 有机溶剂。
海藻糖在酸性、中性、碱性环境下均稳定,对热及化学物质的稳定性非常高,具有 较好的抗辐射、抗氧化和抗微生物等特性。
海藻糖能够保护生物分子免受高温、干燥、缺氧 等恶劣环境的影响,具有广泛的生物保护作用。
药物载体
海藻糖可以作为药物载体,通过与药物结合形成 海藻糖药物复合物,提高药物的稳定性和生物利 用度。
功能性食品添加剂
海藻糖具有低热量、稳定性和安全性高的特点, 可作为功能性食品添加剂,改善食品品质和延长 保质期。
药物载体
海藻糖作为药物载体具有较好的应用前景,可提高药物的稳定性、降 低药物的副作用、增强药物的靶向性和提高药物的疗效等。

海藻糖 色谱分离

海藻糖 色谱分离

海藻糖色谱分离海藻糖(trehalose)是一种具有重要生理功能的二糖,它可以通过色谱技术进行分离和分析。

常用的色谱分离方法包括高效液相色谱(HPLC)和气相色谱(GC)。

下面分别介绍这两种方法的操作步骤:1. 高效液相色谱(HPLC)分离海藻糖:a. 准备HPLC分析仪器和色谱柱(常用的是C18反相柱)。

b. 准备样品溶液:将待分离的海藻糖溶于适当的溶剂中,并过滤以去除杂质。

c. 设置HPLC系统的流动相和流速。

流动相可以是水、甲醇、醋酸等不同的组合,具体根据需要来设定。

流速一般在0.5-1.5 mL/min之间。

d. 注入样品溶液到色谱柱中,并开始分离。

分离时可利用梯度洗脱方法,即逐渐改变流动相的组成,以实现对不同物质的分离。

e. 通过检测器(如紫外检测器)检测目标化合物的吸收峰,根据峰的形状和峰面积来定量和鉴定海藻糖。

2. 气相色谱(GC)分离海藻糖:a. 准备GC分析仪器和色谱柱(常用的是毛细管柱)。

b. 准备样品溶液:将待分离的海藻糖溶于适当的溶剂中,并通过蒸发浓缩的方式进行样品前处理。

c. 设置GC系统的流动相和流速。

流动相可以是惰性气体(如氮气、氦气等),流速一般在1-3 mL/min之间。

d. 将样品溶液注入气相色谱仪中,并开始分离。

分离时可利用升温程序,逐渐提高炉温以实现对不同物质的分离。

e. 通过检测器(如质谱检测器)检测目标化合物的质谱图,根据峰的形状和峰面积来定量和鉴定海藻糖。

需要注意的是,无论是HPLC还是GC分离海藻糖,都需要合适的标准品进行定量和鉴定。

同时,在样品前处理和柱温、流动相等实验条件的选择上,也需要进行优化和验证,以获得准确和可靠的结果。

海藻多糖提取

海藻多糖提取

海藻多糖提取一、海藻多糖的概述海藻多糖是一种天然高分子化合物,广泛存在于海洋中的各种藻类中。

它们具有多种生物活性,如抗氧化、抗肿瘤、免疫调节、抗菌等作用。

因此,海藻多糖已成为近年来研究的热点之一。

二、海藻多糖提取方法1. 热水提取法将干制的海藻粉末加入适量的水中,经过高温高压处理后,使得其中的海藻多糖溶解在水中。

然后通过离心等手段分离出溶液中的海藻多糖。

2. 酸碱法提取法将干制的海藻粉末先用酸或碱处理,并经过再次中和后,使得其中的海藻多糖溶解在水中。

然后通过离心等手段分离出溶液中的海藻多糖。

3. 酶解法提取法将干制的海藻粉末加入适量酶解液(如纤维素酶),经过反应后,使得其中的海藻多糖溶解在水中。

然后通过离心等手段分离出溶液中的海藻多糖。

三、海藻多糖提取的影响因素1. 海藻品种:不同的海藻品种中含有的海藻多糖种类和含量不同,因此会影响提取效果。

2. 提取方法:不同的提取方法对于海藻多糖的提取效果也有影响,需要根据实际情况选择合适的方法。

3. 提取条件:如温度、时间、酸碱度等条件也会影响海藻多糖的提取效果。

四、海藻多糖应用领域1. 医药领域:由于其抗氧化、抗肿瘤、免疫调节等作用,海藻多糖已经成为医药领域中广泛应用的一种天然药物。

2. 食品工业:海藻多糖可以作为食品添加剂,增加食品营养价值和口感,并且具有保湿和保鲜作用。

3. 化妆品工业:由于其保湿和抗氧化作用,海藻多糖被广泛应用于化妆品工业中,如乳液、面霜等产品中。

五、海藻多糖提取技术的发展趋势1. 绿色环保:未来的海藻多糖提取技术将更加注重环保,采用更加环保的方法和材料进行提取。

2. 高效性:未来的海藻多糖提取技术将更加高效,能够在较短时间内提取出更多的海藻多糖。

3. 应用广泛性:未来的海藻多糖提取技术将更加注重应用广泛性,能够适应不同领域和不同需求的要求。

海藻多糖的提取及其生物活性研究

海藻多糖的提取及其生物活性研究

海藻多糖的提取及其生物活性研究海洋是一个广阔的宝藏,其中的资源非常丰富。

海洋中的海藻是我们广泛研究的一种资源,海藻中的多糖在医学、食品等多个领域都有着很广泛的应用。

本文将介绍海藻多糖的提取和生物活性研究。

一、海藻多糖的提取海藻多糖是指由海藻中提取得到的碳水化合物,包括海藻酸、半乳糖、甘露糖、葡萄糖等多种不同的糖类。

在提取海藻多糖之前,需要先选择适合的海藻种类和提取方法。

目前,在提取海藻多糖的方法中,常见的有酸碱法、酶法和微波辅助提取法。

酸碱法是利用酸碱性溶液来提取海藻多糖,优点是操作简单、效果较好,但缺点是容易对环境和提取物质造成损害。

酶法是利用特定的酶来分解海藻细胞壁,以便提取多糖,其优点是提取效率高、成本低、对环境无污染。

微波辅助提取法是利用微波辐射技术,辅助实现多糖的提取和分离,具有快速、高效的优点,但是需要考虑微波对热敏性物质的影响。

提取海藻多糖的方法选择取决于所需考虑的因素,包括效率、成本、安全性等因素。

一旦选择了提取方法,就可以开始提取海藻多糖。

提取海藻多糖的主要步骤包括制备海藻粉末、浸提、澄清、酸沉淀、纯化等。

二、海藻多糖的生物活性研究海藻多糖在医学和食品工业中有着广泛的应用。

目前已经知道,海藻多糖具有抗肿瘤、抗病毒、降血压、降血脂等多种生物活性。

因此,对海藻多糖的生物活性研究非常重要。

海藻多糖对抗病毒的作用是其中的一种生物活性。

多项研究表明,海藻多糖具有较强的抗病毒活性,可以对多种病毒进行抑制。

比如,利用海藻多糖对HIV-1进行抗病毒研究,得到了很好的效果。

海藻多糖亦可降低血糖,保护肝脏,提高免疫力等等。

在海藻多糖的生物活性研究中,还需要考虑海藻多糖的分子结构和活性成分。

目前,利用光谱分析和色谱分析等技术,已经可以对海藻多糖的分子结构进行梳理和识别。

对于海藻多糖的活性成分研究,则需要更加精细的试验方法和技术手段。

结语:在海洋中的海藻多糖有着很广泛的应用,但其提取和生物活性研究仍在不断发展中。

藻类中多糖的提取

藻类中多糖的提取
保护细胞免受氧化损伤
藻类多糖可以保护细胞免受氧化损伤,减少脂质过氧化产 物的生成,维护细胞膜的完整性和稳定性。
免疫调节作用研究
激活免疫细胞
藻类多糖能够激活机体内的免疫 细胞,如巨噬细胞、T淋巴细胞、 B淋巴细胞等,促进免疫细胞的增
殖和分化。
调节免疫因子分泌
藻类多糖可以调节机体内免疫因子 的分泌,如促进干扰素、白细胞介 素等细胞因子的产生,从而增强机 体的免疫功能。
06
藻类多糖提取技术挑战与 展望
提取效率提高途径探讨
优化提取工艺参数
01
通过调整温度、时间、pH值等参数,提高多糖的溶解度和扩散
系数,从而提高提取效率。
采用复合酶解法
02
利用多种酶的协同作用,破坏藻类细胞壁结构,加速多糖的释
放。
超声波/微波辅助提取
03
利用超声波或微波产生的空化效应和机械振动,增加藻类细胞
04
藻类多糖结构鉴定与性质 分析
化学方法鉴定结构
1 2
酸水解法
通过特定的酸对多糖进行水解,得到单糖组成信 息。
甲基化分析
将多糖中的羟基甲基化,通过GC-MS等方法分 析甲基化产物,推断多糖的连接方式和分支结构。
3
高碘酸氧化和Smith降解
利用高碘酸将多糖氧化成醛或酮,再通过Smith 降解得到小分子化合物,从而推断多糖的结构。
农业领域
藻类多糖可作为土壤改良剂、 植物生长调节剂等,促进农作
物生长和提高产量。
THANKS
感谢观看
抗肿瘤作用
藻类多糖能够通过激活免疫细胞、 调节免疫因子分泌等途径发挥抗肿 瘤作用,抑制肿瘤细胞的生长和扩 散。
降血糖、降血脂作用研究
降低血糖

48.海藻糖的提取与应用开发

48.海藻糖的提取与应用开发

48.海藻糖的提取与应用开发(1)项目简介海藻糖是2分子葡萄糖以1,1糖苷键结合的非还原性二糖,不但具有分子结构简单、惰性、无毒、低甜味的特性,而且具有非还原性、保湿性、耐冻性、干燥性等特点,特别是具有非常奇特的生物功能,即在干态下保护细胞膜、蛋白质等生物活性,使物质免遭破坏。

(2)应用范围①食品领域主要作为防腐保鲜剂,如对香蕉、草莓、芒果、鳄梨、苹果等干果泥,甚至炒鸡蛋,复水后仍保持原有的色泽、风味、质地和香气。

在此领域可广泛开发应用。

②医药领域主要作为试剂和诊断药的稳定剂。

用其干燥的抗体、血小板、酶、病毒、淋巴细胞等生物活性物质无需冷冻,复水后均能恢复活力。

可代替血浆作为生物制品的稳定剂。

本品不仅能在常温下保存生物制品,还可防止因血源污染而引起的乙肝、艾滋病等传染性疾病的传播,保证了生物制品的质量和安全性。

③化妆品领域主要是用海藻糖的衍生物,用在护肤品,如洗面奶等化妆品中,具有抑制皮肤干燥的作用,可在唇膏、口腔清凉剂、口腔香味剂等产品中用作甜味剂、橙味改良剂和稳定剂。

另外,无水海藻糖可用于护肤霜等产品中,作为磷脂和酶的脱水剂。

④其他领域应用基因技术,可将转合成海藻糖的基因用于植物中,它不仅可提高植物的抗旱能力,而且能使农作物在收获加工后更新鲜,风味更佳。

用在动物饲料中,可提高其食欲。

(3)开发前景目前,由于市场出售的该品价格为200-300美元/公斤,对它的研究偏重于医学和生物分子学方面。

在日本已相继开发了几条工业化路线,预计价格为50美元/公斤。

我校在该品的提取过程中,采用了新的提取技术,生产成本大大降低。

所以随着进一步研究开发,在食品工业以及其他领域中一定会广泛应用。

(4)经济分析生产总成本6万元/吨,市场销售价 160万元 /吨,利税154万元/吨。

(5)生产规模与投资如果工厂具有厂房、设备与水、电、气供应,建成生产海藻糖的生产线约需投资50至70万元,按年产10吨海藻糖计算,每年获利税1540万元。

海藻多糖的分离纯化和组成分析

海藻多糖的分离纯化和组成分析
4
- S- a, 高效液相色谱法测定其多糖的分子量为 6. 8 10 , 气相色谱分析其单糖组成为鼠李糖、 葡萄糖和半乳糖, 其摩尔比依次 为: 4. 30 1. 00 1. 88。 关键词 海藻; 多糖 ; 分离纯化; 组分 文献标识码 A 文章编号 0517- 6611( 2003) 05- 0710- 01 中图分类号 S555+ . 6
TA Purifier 10 快 速纯 化系 统 ( 瑞 典 Pharmacia) ; Ultrospec 3100 pro 紫外可见分光光度计( 瑞典 Pharmacia) ; GC- 16A 气相色谱仪( 日本 Shimadzu) ; PE1730 傅立叶变换红外光谱仪 ( 美国 Perkin Elmer) ; Alpha 1- 2 冷冻干燥机 ( 德国 Christ) 。 标准葡聚糖 Dxetran T- 500、 T- 70、 T- 40、 T- 10、 Superdex 200 为 Pharmacia 产品, DEAE- Cellulose 52 为 Whatman 产品, 其他 试剂和标准单糖均为进口或国产分析纯。 1. 2 海藻多糖的提取分离 称取1 kg 海藻, 剪碎, 加 2 倍 体积蒸馏水, 60 水浴提取 8 h, 浸提 3 次, 提取液浓缩至 1/ 3 体积, 加 3. 5 倍无水乙醇, 在冰箱中静置 12 h 后离心, 收集沉淀, 冷冻干燥得海藻粗多糖。将粗多糖溶于 pH 值 7. 2、 浓度 0. 02 mol/ L 磷酸缓 冲液( PBS) 中, 通过 DEAECellulose- 32 阴离 子 柱 ( 3. 5 cm 50 cm ) , 用 浓 度 0. 02 mol/ L PBS、 0~ 0. 75 mol/ L NaCl 梯度 洗脱, 流速为 0. 8 ml/ min、 4 ml/ tube, 苯酚- 硫酸法检测收集糖峰。透析冷冻干
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目录海藻糖的提取与分离实验设计------------------------------------------ 2 前言----------------------------------------------------------- 2 关键词--------------------------------------------------------- 21、海藻糖的理化性质--------------------------------------------- 21.1密度----------------------------------------------------- 21.2熔点----------------------------------------------------- 21.3溶解热--------------------------------------------------- 21.4甜度----------------------------------------------------- 21.5溶解性、晶体析出性--------------------------------------- 21.6高玻璃化转变温度----------------------------------------- 31.7低吸湿性和保水性----------------------------------------- 31.8耐热、耐酸性--------------------------------------------- 31.9着色性--------------------------------------------------- 32、海藻糖的功效作用--------------------------------------------- 32.1保护功能------------------------------------------------- 32.2抑制淀粉老化--------------------------------------------- 42.3防止蛋白质变性------------------------------------------- 42.4抑制鱼腥味的产生----------------------------------------- 42.5抑制脂质氧化变质----------------------------------------- 52.6矫味作用------------------------------------------------- 53、海藻糖提取分离的原理和影响因素的预判------------------------- 53.1提取分离原理--------------------------------------------- 53.2海藻糖标准曲线的绘制原理--------------------------------- 63.3粉末活性炭脱色脱蛋白效果的表征--------------------------- 73.4离子交换树脂脱盐脱色效果的表征--------------------------- 73.5相关影响因素--------------------------------------------- 74、海藻糖提取分离的实验设计------------------------------------ 84.1实验原料与器材------------------------------------------- 84.2海藻糖提取与分离工艺流程--------------------------------- 94.2.1实验流程----------------------------------------------- 94.2.2相关因素对海藻糖提取效率的影响------------------------- 94.2.3相关因素对粉末活性炭脱色脱蛋白效率的影响-------------- 114.2.4相关因素对离子交换柱脱盐脱色效率的影响---------------- 155、总结------------------------------------------------------------ 17 参考文献----------------------------------------------------------- 18海藻糖的提取与分离实验设计化学132牟丽慧1301020414前言海藻糖是由两个葡萄糖分子以α,α,1,1-糖苷键构成的非还原性糖,广泛存在于海藻、酵母、霉菌、食用菌、虾、昆虫及生物体内,具有保湿性、抗寒抗旱性、耐热耐酸性等特殊的生物学功能,对生物大分子和生物体均有非特异性的保护作用。

现如今,海藻糖已在生物制剂、化妆品、烘焙产品、水产畜产加工、米面制品、饮料和糖果以及农林种植等各个行业广泛使用。

因此对于海藻糖的提取与分离的研究格外重要,本文将介绍海藻糖的理化性质、功效作用以及应用现状,并阐述对酵母中海藻糖的提取与分离工艺的实验设计。

关键词酵母、海藻糖、性质、功能、提取分离1、海藻糖的理化性质1.1密度:结晶海藻糖1.512cm3/g。

1.2熔点:结晶海藻糖97℃,于130℃失水;无水海藻糖210.5℃。

1.3溶解热:结晶海藻糖57.8KJ/mol,无水海藻糖53.4KJ/mol。

1.4甜度:相当于蔗糖的45%,是一种甜味柔和的优质糖质。

其温和的甜味比砂糖更为持久,可改善高砂糖含量食品的甜腻感,与其他的甜味料配合,能将食品素材特有的味感提升出来。

1.5溶解性、晶体析出性:海藻糖易溶于水、热乙醇、冰醋酸,不溶于乙醚、丙酮。

海藻糖在水中的溶解度随温度变化较为明显。

低温时在水中的溶解度比砂糖低,与麦芽糖相同。

此外,海藻糖易于结晶,结晶性能良好。

1.6高玻璃化转变温度:海藻糖具有双糖中最高的玻璃化转变温度,高达115℃,因而把海藻糖加入到其他的食品中时,能有效地提高其玻璃化转变温度,更容易形成玻璃化状态,可以发挥保持玻璃化,保持新鲜度的作用。

1.7低吸湿性和保水性:二水结晶海藻糖在相对湿度92%以下无吸湿性,而无水海藻糖在相对湿度30%以上有吸湿性。

这一性质使其既具有低吸湿性,又具有高保湿性功能。

1.8耐热、耐酸性:于100℃加热24h海藻糖仍可保存99%以上。

这种特殊的分子结构赋予了海藻糖分子极强的稳定性,是天然二糖中最稳定的分子。

1.9着色性:海藻糖不会引起美拉德反应。

和甘氨酸于100℃反应90min不呈色,和聚蛋白胨120℃反应90min不呈色,有利于保持食品色泽,适合于须加热处理或高温保存的食品、饮料等[1]。

2、海藻糖的功效作用2.1保护功能海藻糖的功能最特别的地方是其生物学特性,在很多生物体内海藻糖不仅以游离糖的成分存在,还是各种糖脂的重要组成部分。

常年生活热带沙漠中的一些植物和昆虫,在阳光暴晒之下几乎完全脱水,但是仍然保持着生物活性,以极低的新陈代谢长期保持生存状态,一旦遇水就能恢复正常生命活动,就是因为体内存在着较高浓度的海藻糖。

研究表明,许多物种在极端条件下,比如高温、高压、冷冻等条件下,可以通过调节体内海藻糖来抵御外界的影响。

此外海藻糖还具有酒精耐受性,并具有较强的抗辐射的功效。

海藻糖除了具有出色的生活学功效之外,在食品应用中也具有众多的功效,比如抑制淀粉老化、防止蛋白质变性、抑制鱼腥味的产生、抑制脂质氧化变质、矫味作用等。

2.2抑制淀粉老化海藻糖在抑制淀粉老化方面比蔗糖以及麦芽糖等要有明显的优势。

研究发现在含有淀粉和白砂糖的溶液中,用海藻糖部分替代白砂糖,能有效延缓淀粉老化的进程。

2.3防止蛋白质变性牛奶、豆制品、蛋类以及鱼虾等海鲜类产品,在产品加工过程中,由于加热、冷冻或者干燥等工序的影响,化学性质会发生变化,产生沉淀现象,就是所谓的蛋白变性。

实验证明,一些富含蛋白质的食品在添加海藻糖之后,有明显的防止蛋白变性的效果。

2.4抑制鱼腥味的产生在鱼类食品加工过程,尤其是在加热处理时会产生三甲胺,这就是鱼类食品令人不快的腥味的主要成分,在加热前加入海藻糖能抑制三甲胺的生成,降低不快臭味的产生,添加海藻糖,也能减轻鸡、鸭、鹅肉等怪味。

2.5抑制脂质氧化变质脂类物质氧化会产生过氧化物和挥发性醛等,使食品风味变差甚至失去食用价值,海藻糖对油脂构成成分中的脂肪酸分解具有很好的抑制作用。

2.6矫味作用少量添加一些物质调整食品口味和香味,这种现象叫做矫味、矫香作用。

若把海藻糖少量添加在食品材料里,就可起到广泛的矫味、矫香作用。

3、海藻糖提取分离的原理和影响因素的预判3.1提取分离原理从活性干酵母中提取海藻糖的原理是在高温和乙醇或水的共同作用下使酵母细胞破碎,海藻糖从破碎的细胞中释放出来。

同时,酵母细胞内的蛋白质、色素等杂质也释放出来,分散在提取剂中,因此需要对提取液进行脱色脱蛋白质处理。

本实验设计选用粉末活性炭直接处理提取液,脱色脱蛋白同步完成,操作条件水浴振荡。

pH、温度、活性炭用量、脱色脱蛋白时间、搅拌速度、是影响活性炭脱色脱蛋白质的因素。

经活性炭处理过后的海藻糖提取液中含有大量的的盐类及少量色素,因此可以用离子交换树脂进一步处理以除去盐类及少量色素。

离子交换树脂有很强的离子交换能力,它能除去溶液中的阴阳离子杂质以及离子型的色素,尤其是大孔型离子交换树脂,不但能吸附离子型的杂质,还能吸附各种非离子型杂质,因此本实验设计选用大孔离子交换树脂并组成离子交换柱对海藻糖提取液进行脱盐脱色精制。

3.2海藻糖标准曲线的绘制原理[2]要想比较不同条件下海藻糖提取的效率,必须要找到一个可以测出海藻糖含量的方法,本实验设计引用蒽酮法和海藻糖标准曲线来测海藻糖含量。

(1)称取海藻糖标准样品l0mL,加蒸馏水定容至100mL得到标准液。

分别取0.5mL,1mL,2mL,3mL,4mL,5mL, 6mL, 7mL, 8mL标准液置于己编号的l0mL容量瓶中,加蒸馏水定容。

(2)称取葱酮固体25mg加50mL浓硫酸配制成硫酸蕙酮溶液置于烧杯中(用时配制)。

(3)分别从上述l0mL容量瓶中各取1mL海藻糖溶液置于编号的试管中,各加4mL蕙酮溶液,另外取一个试管加1mL蒸馏水和4mL蕙酮溶液作为参比液。

将它们混合均匀后放入冷水中,然后置于沸水浴中煮l0min后立即取出放入冷水中迅速冷却,等到各管溶液达室温后,用lcm厚度的比色皿,以参比液为空白,迅速测定其余各管的光吸收值。

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