怎样进行一个菌种的保藏
菌种安全保藏方法
菌种安全保藏方法菌种安全保藏方法点击:23食用菌由于生产投入少,经济效益高,近年来在农村兴起了食用菌生产热潮。
生产中食用菌菌丝繁殖快,容易老化,菌种保藏更难。
下面介绍七种简单易行的菌种保藏方法供广大农户参考:蒸馏水法适用于平菇、金针菇、香菇的苗种。
1、保藏平菇、金针菇菌种先将八成熟待保藏试管菌种移入接种箱内灭菌后,用注射器从试管栓内注入蒸馏水,将培养基面全部淹没至管口2厘米为止。
管口用矿蜡封闭,常温下置于阴凉处立放可以保藏1~1.5年。
2、保藏香菇、木耳菌种,用150×15毫米的指型管将培养至7成熟的固体或半固体试管种在接种箱内无菌操作下,放人25×200毫米的大试管内,向大试管内注入蒸馏水至管口1厘米处,封口用橡皮栓包好,并用矿蜡加固密封,置于阴凉处。
木耳可保藏7~8个月,香菇可保藏9~12个月。
此法在自然温度下也可以保藏其他菌种。
尿素暂存法在避光、干燥通风良好的地方放置袋装尿素,将试管菌种主体埋在尿素颗粒中,试管口露在外面,可保藏菌种活力30天之多。
此法在恒定低温环境下即可进行。
液体石蜡保藏法选用化学液体石蜡,高压灭菌后放入40℃恒温箱中数小时或干燥器中数日,用无菌吸管或注射器吸取液体石蜡注入菌种试管。
注入量应高出斜面尖端1厘米左右,管口塞上棉塞并用石蜡封好。
直立保藏在清洁、干燥、凉爽的低温处可以保藏5年。
麸皮保藏法取一定麸皮加水或营养液后拌匀即可备用。
将水麸皮装入试管经高压灭菌后拌入菌种,放在适温下培养,待菌丝体发育好后将试管放入室温下进行干燥。
然后在20℃以下干燥处保藏,可保藏3~5年。
生理盐水保藏法将菌种接入马铃薯培养液中,每250毫升三角瓶装60毫升养液,振动培养液或每天摇动5~10次,培养5~7天,然后将形成的菌丝球吸入装有5毫升无菌生理盐水的试管中,每管约移入4~5个菌丝球,塞上棉塞,用蜡封好管口。
低温可保藏1年。
麦粒保藏法取优质小麦淘洗后浸入20℃水中泡5小时,稍晾干后装管。
菌种保藏方法
菌种保藏方法
菌种保藏方法,如下:
1、传代保藏,传代保藏菌种是微生物保存中最常用的方法之一。
很多微生物在低温或者干燥处理时,会很快死亡,为了保存菌种的活性,就要定期不断的进行菌种转接、培养后再保存。
2、斜面低温保藏,将待保藏的菌种接种在合适的斜面培养基上,在相应的条件下培养至得到充足的菌体或者孢子,随后密封试管置于4℃左右保存,具体保存温度按照保存菌种设定。
保藏时间依微生物的种类从1个月到4个月不等。
3、冷冻干燥保藏,冷冻干燥保藏法为菌种保藏方法中最有效的方法之一,对一般生活力强的微生物及其孢子以及无芽胞菌都适用,这种方法适用于菌种长期保存,一般可保存数年至十余年。
我国大多数生物制品菌种都是采用该法保藏。
4、半固体穿刺保藏,配制半固体培养基,高压湿热灭菌后倒于无菌试管中至约1/3,待培养基凝固,用接种环从平面培养基上挑取单菌落,穿入培养基若干次。
在合适的条件下进行培养至菌体旺盛生长,之后密封试管,根据菌种特点在4 ℃左右或者凉爽干燥处保存。
保存时间至少可以达到
1 年,对于有些菌种甚至能达到20 年之久。
5、液氮超低温保藏,液氮超低温保藏法是菌种长期保藏的最有效最可靠的方法。
液超低温保藏法是把菌种装在含有冷冻保护剂的安瓶瓶内,将该安瓶瓶放人液氮(-196℃)中保藏。
几种食用菌菌种保藏方法
几种食用菌菌种保藏方法食用菌菌种是指用于食用或驯化培养的真菌种类。
在保藏食用菌菌种时,主要有以下几种方法:1.冷冻保藏:将菌种置于-80℃的低温环境中。
首先,将菌种种植在琼脂平板上的单独菌落。
然后,将单独的菌落切下并置于含有30%甘油的琼脂平板上。
最后将含有菌落的琼脂平板置于-80℃的低温冷冻库中进行保存。
这种方法适合于长时间保存,但对设备和电力有一定需求。
2.雪贮法:将菌种置于冷藏室的冷湿源物质上。
首先,将菌种培养在含有菌落的琼脂平板上。
然后,将菌落保留在琼脂平板上并将其置于冷藏室中。
这种方法适用于一般食用菌的保存,在适宜的湿度和温度下,可以保存数月至一年。
3.干燥保藏:将菌种置于干燥环境中。
首先,将菌种培养在含有菌落的琼脂平板上。
然后将菌落切下并置于无菌的滤纸或多孔塑料袋中。
最后将菌种放置于干燥通风良好的地方,等待其自然干燥。
这种方法适用于一些干货类食用菌种,如香菇、平菇等。
4.培养罐保藏:将菌种保藏于培养罐中。
首先,将菌种培养在含有菌落的琼脂平板上。
然后将菌落切下并置于无菌培养罐中,加入适宜的培养基,并密封培养罐。
最后将培养罐保存在适宜的温度和湿度下。
这种方法适用于菌种的短期保藏。
5.低温干燥保藏:将菌种保藏于低温干燥器中。
首先,将菌种培养在含有菌落的琼脂平板上。
然后将菌落切下并置于低温干燥器中,通过低温干燥将其保存起来。
这种方法适用于一些低温耐受性较强的食用菌。
总结起来,以上是几种食用菌菌种保藏的方法。
选择合适的方法可根据菌种的特性、用途和预期保藏时间来确定。
在进行菌种保藏时,要注意无菌操作,避免菌种的污染或变异,并在适宜的环境条件下保存。
这将有助于保持菌种的营养价值和生物特性,以及保证其在后续使用中的质量。
微生物菌种保藏方法
微生物菌种保藏方法微生物菌种保藏方法主要包括冷冻保存、冷冻干燥保存和鉴定保存等多种方式。
以下将逐一介绍这些方法。
冷冻保存是一种常用的微生物菌种保藏方法,它的原理是通过将菌种置于低温环境中,减缓细胞新陈代谢和繁殖,使菌株处于休眠状态,从而达到长期保藏的目的。
冷冻保存的步骤包括:培养优良菌株、制备菌种冻存液、冻存及复苏。
制备冻存液时,通常使用亲水性保护剂如甘油、乳糖等,以及抗冻剂如酪蛋白、卵黄等,混合菌株培养物与冻存液,并移液到冻存管中,放置于低温冷冻器中迅速冷冻。
复苏时,将冻存液迅速复苏并接种于适宜的培养基上,培养条件要注意逐步恢复菌株的新陈代谢活力,以避免菌株死亡。
冷冻干燥保存是一种将菌种置于低温和低压条件下脱水处理的保存方法。
冷冻干燥保存的原理是通过脱水将菌株处于休眠状态,并使用适当的干燥保护剂,如蛋白质、糖类等,保护菌株的细胞结构和功能。
制备冷冻干燥菌种的步骤包括:菌株预处理、菌株悬浮液制备、脱水处理、真空干燥、密封保存等。
制备菌株悬浮液时,通常使用含有保护剂的培养基,将菌株培养到对数期,制备含有菌株的悬浮液。
脱水处理时,将菌株悬浮液置于脱水试剂中,使其渐渐减少,最终减至约1%的含水量。
真空干燥时,将脱水后的菌株置于真空干燥器中,利用低温低压的条件下,使菌株中的水分转化为气态水分,实现菌株的干燥。
最后,将干燥的菌株装入密封容器中保存。
鉴定保存是一种将微生物菌株保藏在鉴定标本库中的方法。
该方法适用于那些已经得到准确鉴定和分类的菌株。
鉴定保存的步骤包括:菌株鉴定、鉴定数据记录、鉴定标本制备及识别、存储方法选择和管理等。
菌株鉴定时,通常使用形态学观察、生理生化特性分析以及16S rRNA序列分析等方法,确保菌株的准确性和可重复性。
鉴定数据记录时,要详细记录菌株的相关数据,如菌株来源、鉴定结果、鉴定依据等。
鉴定标本制备及识别时,可以通过制备菌株培养物、制备冻存液等方式保存菌株,并制备鉴定标本。
存储方法选择和管理时,要根据菌株类型和特性选择适当的保存方法,同时要做好菌株信息的管理和查询。
菌种保藏方法_菌种应该怎么保存
菌种保藏方法_菌种应该怎么保存引导语:菌种应该怎么保存呢?以下是小编收集整理的关于菌种保藏方法相关内容,欢迎阅读参考!菌种保藏方法1、传代保存法:有些微生物当遇到冷冻或干燥等处理时,会很快死亡,因此在这种情况下,只能求助于传代培养保存法。
传代培养就是要定期地进行菌种转接、培养后再保存,它是最基本的微生物保存法,例如*奶等常用生产菌种的保存。
传代保存时,培养基的浓度不宜过高,营养成分不宜过于丰富,尤其是碳水化合物的浓度应在可能的范围内尽量降低。
培养温度通常以稍低于最适生长温度为好。
若为产*菌种,则应在培养基中添加少量碳*钙。
一般地,大多数菌种的保藏温度以5℃为好,像厌氧菌、霍乱弧菌及部分病原真菌等微生物菌种则可以使用37℃进行保存,而蕈类等大型食用菌的菌种则可以室温直接保存。
传代培养保存法虽然简便,但其缺点也很明显,如:①菌种管棉塞经常容易发霉;②菌株的遗传*状容易发生变异;③反复传代时,菌株的病原*、形成生理活*物质的能力以及形成孢子的能力等均有降低;④需要定期转种,工作量大;⑤杂菌的污染机会较多。
2、液体石蜡覆盖保存法:该法较前一种方法保存菌种的时间更长,适用于霉菌、酵母菌、放线菌及需氧细菌等的保存。
此法可防止干燥,并通过限制氧的供给而达到削弱微生物代谢作用的目的。
其具有方法简便的优点,同时也适用于不宜冷冻干燥的微生物(如产孢能力低的丝状菌)的保存,而某些细菌如固氮菌、乳*杆菌、明串珠菌、分枝杆菌、红螺菌及沙门氏菌等和一些真菌如卷霉菌、小克银汉霉、毛霉、根霉等不宜采用此法进行保存。
3、载体保存法:即将微生物吸附在适当载体上进行干燥保存的方法。
常用的有方法包括以下几种,如:①土壤保存法:主要用于能形成孢子或孢囊的微生物菌种的保藏。
方法是在灭菌的土壤中加入菌液,立即在室温下进行干燥或使菌体繁殖后再干燥,然后冷藏或在室温下密封保存。
保存用的土壤原则上以肥沃的耕土为宜,土壤需风干、粉碎、过筛和灭菌。
使微生物在土壤中繁殖后进行干燥保存的方法是:取适量土壤(5克),置于塞有棉塞的试管中,加水或加入充分稀释的液体培养基(以含水量为土壤最大持水量的60%为宜),然后高压灭菌。
菌种保藏方法
菌种保藏方法菌种保藏方法菌种保藏是指将某一种菌株或菌种保存在一定的条件下,以便长期保存并用于研究或应用。
菌种保藏的目的是为了防止菌株的变异和降低其性状的丧失,以便在需要的时候能够重新培养出相同或相似的菌株。
下面将介绍几种常见的菌种保藏方法。
一、冷冻保藏法冷冻保藏法是将菌种保存在低温条件下,一般为-80℃或液氮温度。
这种方法比较简单,操作方便,且保存效果较好。
首先,将菌株从培养基上接种到含有10%-15%甘油的液体培养基中,然后用无菌冻存管将菌液分装好,经过冷冻机或液氮罐进行冷冻保存。
在需要使用菌株时,只需将冻存管快速解冻并转移到新的培养基上即可。
二、真菌分生孢子的枯燥保存法真菌的分生孢子经过枯燥保存后,能够在相对湿度较低的条件下长期保存。
这种保存方法主要适用于真菌,特别是产生分生孢子的真菌。
首先,从培养基上接种分生孢子,培养出菌丝后进行枯燥处理。
一般采用短暂的枯燥处理,依靠菌丝中的水分进行干燥。
然后将枯燥的菌丝放置在无菌瓶中密封保存,放在相对湿度低于30%、温度介于10℃和25℃之间的干燥环境中。
三、气干法气干法是将菌株保存在干燥剂中,以保持菌株的活力。
这种方法适用于较短时间的菌种保存。
首先,将菌株从培养基上接种到含有干燥剂的培养基中,待培养基中的水分被干燥剂吸收后,将菌株封存在密封袋或密封瓶中。
干燥剂一般选择无水硅胶或干燥剂片,确保环境的干燥程度。
四、冷藏法冷藏法是将菌株保存在低温条件下,一般为4℃至10℃之间。
这种方法适用于细菌、酵母和一些真菌的保存。
菌株保存在含有15%-30%甘油的稀释培养基中,然后在低温条件下保存。
需要使用时,只需从低温保存中取出,接种到新的培养基中即可。
总结起来,菌种保藏是一项重要的科研工作,不同的菌种可以采用不同的保藏方法。
冷冻保藏法适用于大部分微生物的保存,真菌的分生孢子的枯燥保存法适用于真菌的保存,气干法适用于较短时间的保存,冷藏法适用于细菌、酵母和一些真菌的保存。
微生物菌种保藏方法
微生物菌种保藏方法1、传代保存法:有些微生物当遇到冷冻或干燥等处理时,会很快死亡,因此在这种情况下,只能求助于传代培养保存法。
传代培养就是要定期地进行菌种转接、培养后再保存,它是最基本的微生物保存法,例如酸奶等常用生产菌种的保存。
传代保存时,培养基的浓度不宜过高,营养成分不宜过于丰富,尤其是碳水化合物的浓度应在可能的范围内尽量降低。
培养温度通常以稍低于最适生长温度为好。
若为产酸菌种,则应在培养基中添加少量碳酸钙。
一般地,大多数菌种的保藏温度以5℃为好,像厌氧菌、霍乱弧菌及部分病原真菌等微生物菌种则可以使用37℃进行保存,而蕈类等大型食用菌的菌种则可以室温直接保存。
传代培养保存法虽然简便,但其缺点也很明显,如:①菌种管棉塞经常容易发霉;②菌株的遗传性状容易发生变异;③反复传代时,菌株的病原性、形成生理活性物质的能力以及形成孢子的能力等均有降低;④需要定期转种,工作量大;⑤杂菌的污染机会较多。
2、液体石蜡覆盖保存法:该法较前一种方法保存菌种的时间更长,适用于霉菌、酵母菌、放线菌及需氧细菌等的保存。
此法可防止干燥,并通过限制氧的供给而达到削弱微生物代谢作用的目的。
其具有方法简便的优点,同时也适用于不宜冷冻干燥的微生物(如产孢能力低的丝状菌)的保存,而某些细菌如固氮菌、乳酸杆菌、明串珠菌、分枝杆菌、红螺菌及沙门氏菌等和一些真菌如卷霉菌、小克银汉霉、毛霉、根霉等不宜采用此法进行保存。
3、载体保存法:即将微生物吸附在适当载体上进行干燥保存的方法。
常用的有方法包括以下几种,如:①土壤保存法:主要用于能形成孢子或孢囊的微生物菌种的保藏。
方法是在灭菌的土壤中加入菌液,立即在室温下进行干燥或使菌体繁殖后再干燥,然后冷藏或在室温下密封保存。
保存用的土壤原则上以肥沃的耕土为宜,土壤需风干、粉碎、过筛和灭菌。
使微生物在土壤中繁殖后进行干燥保存的方法是:取适量土壤(5克)置于塞有棉塞的试管中,加水或加入充分稀释的液体培养基(以含水量为土壤最大持水量的60%为宜),然后高压灭菌。
微生物菌种保藏方法
微生物菌种保藏方法
微生物菌种的保藏是非常重要的,因为这些菌种可能用于各种实验和研究中。
以下是一些常见的微生物菌种保藏方法:
1. 冷冻保存:将菌种在液氮或-80的冰箱中冷冻保存。
这是最常见的保藏方法,能够长期保存菌株并保持其遗传稳定性。
2. 干燥保存:将菌种在无菌室中取出,用无菌纸或吸水纸吸干,然后放入无菌瓶中密封保存。
干燥保存适用于某些孢子或芽孢的微生物,比如放线菌、链霉菌等。
3. 明胶斜培养基保存:将菌种接种在含有明胶的固体培养基上,然后密封保存。
这种方法适用于某些菌株,如革兰氏阳性菌和厌氧菌。
4. 低温保存:将菌种保存在4的冰箱中。
这种保存方式可以在短时间内保持菌株的活性,但不能长期保存。
5. 液氮保存:将菌种在锅内预冷冷冻过的无菌玻璃管中加入10%甘油或蔗糖,然后立即在液氮中保存。
这种方法适用于大多数微生物,并且可以长期保存。
食用菌菌种保藏的方法
食用菌菌种保藏的方法
食用菌是一种广泛使用的食品,如何保存食用菌的菌种是非常重要的。
下面介绍几种常用的菌种保藏方法。
一、冷冻法
冷冻法是将菌种置于低温下,使其处于冷冻状态以达到保藏的目的。
将菌丝均匀地涂于平板上,置于-80℃的低温冷冻柜中冷冻,或将菌丝混入15%甘油溶液中,用液氮冷冻保存。
这种方法保存的菌种质量较好,保藏时间较长。
二、干燥法
将菌丝培养在无菌环境下,培养到菌丝生长至顶部时,用无菌石英砂或无菌滤纸吸干培养皿内的水分,再将石英砂或滤纸中的菌种置于无菌条件下进行干燥,然后密封保存。
这种方法使用简单,保存时间较长,但保存的菌种易受到氧气、温度和湿度等因素的影响。
三、冷藏法
冷藏法是将培养好的菌种置于低温环境下进行保存。
将培养好的菌种涂于平板上,进行初步培养,再将平板用无菌纸包好,置于4℃的冰箱中保存。
这种方法保存的菌种质量较好,但保存时间较短。
四、液氮保存法
将培养好的菌种混入15%甘油溶液中,用液氮冷冻保存。
这种方法保存的菌种质量较好,保存时间长达数年,但需要液氮存储设备。
五、糖分保藏法
将培养好的菌种混入10%蔗糖水溶液中,用常温保存。
这种方法保存的菌种质量较好,保存时间长达数年,但需要注意保藏容器的密封性。
不同的菌种保藏方法适用于不同的情况,我们需要根据实际情况选择合适的方法。
同时,在进行菌种保藏时,需要注意保藏容器的密封性、温度、湿度等因素,以确保保存的菌种质量。
菌种的保藏方法
菌种的保藏方法菌种保藏是微生物学研究中必不可少的一环。
菌种保藏的目的是保存菌种的遗传信息、保持菌种的稳定性和纯度,为后续的研究提供保障。
本文将介绍几种常见的菌种保藏方法。
1. 冻干法冻干法是一种常用的菌种保藏方法。
将菌株培养在适宜的培养基上,生长到适当的密度后,用无菌的冻干管吸取菌液。
将冻干管放入液氮中,冷冻至-80℃,待冻干后,将管子密封,保存在-80℃的冰箱中。
冻干菌株可以保存多年,但是需要注意菌株的密封性和保存温度。
2. 静态液氮法静态液氮法是一种高效、长期保存菌株的方法。
将菌株培养在适宜的培养基上,生长到适当的密度后,用无菌的冻存管吸取菌液。
将菌液加入等量的甘油(最终甘油浓度为20%),混合均匀后分装到冻存管中。
将冻存管放入液氮中,冷冻至-196℃,保存在液氮罐中。
静态液氮保存的菌株可以保存数十年,但是需要注意菌株的密封性和保存温度。
3. 冷藏法冷藏法是一种简单、易行的菌株保存方法。
将菌株培养在适宜的培养基上,生长到适当的密度后,用无菌的冻存管吸取菌液。
将冻存管放入4℃的冰箱中保存。
冷藏法保存的菌株可以保存数个月,但是需要注意菌株的密封性和保存温度。
4. 活体保存法活体保存法是一种将菌株保存在活体状态下的方法。
将菌株培养在适宜的培养基上,生长到适当的密度后,用无菌的冻存管吸取菌液。
将菌液加入等量的甘油(最终甘油浓度为20%),混合均匀后分装到冻存管中。
将冻存管放入冰箱中,温度为4℃-8℃。
活体保存法可以保存数个月,但是需要注意菌株的密封性和保存温度。
5. 长期培养法长期培养法是一种将菌株保存在活体状态下的方法。
将菌株培养在适宜的培养基上,生长到适当的密度后,用无菌的冻存管吸取菌液。
将菌液加入等量的甘油(最终甘油浓度为20%),混合均匀后分装到冻存管中。
将冻存管放入冰箱中,温度为4℃-8℃。
每隔一段时间,将菌株转移到新的培养基上进行培养,以保持菌株的纯度和稳定性。
总之,菌种保藏是微生物学研究中必不可少的一环。
简述菌种保藏的几种方法及条件。
简述菌种保藏的几种方法及条件。
菌种保藏是重要的生物资源的保护和利用过程,其主要方法有:
一、冷冻法。
冰冻法是最常用的保藏菌株的方法,也是目前最理想的保藏方法之一,其主要原理是将活菌体放入冰冻室,温度由常温降至-80℃,使得菌种活动受到抑制,在-80℃的状态下可以长期保存。
二、液氮法。
液氮法是一种依靠低温和高压技术保存菌种的方法,主要是将活菌体置入液氮容器中,使其处于-195℃的极低温状态。
三、干燥法。
干燥法是将活菌体及高浓度营养培养基同时干燥,使其中的水份完全蒸发而获得半干燥的状态,这种状态下可以防止菌种的增殖。
四、水银法。
水银法是一种利用活菌体对水银的耐受性,将活的菌体悬浮在7%的水银中的保存方法。
保藏菌种的条件:
1、环境温度应该控制在0~4℃,并保持温度稳定。
2、控制保藏过程中的湿度,干燥法中的湿度应在10%~15%之间,而冷冻、液氮保藏则要求保证容器中有足够多的液氮,避免菌种因温度过高而复苏。
3、控制光照,避免菌株遭受接触紫外线的伤害、褪色、衰退和增强其致病性等。
4、控制空气中的致病因子;
5、定期检测样品的质量,确保其始终处于较好的保藏状态。
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菌种保藏的方法
菌种保藏的方法菌种保藏是一种重要的微生物资源保护方式,对于研究、应用和开发微生物具有重要意义。
以下是几种常见的菌种保藏方法及其操作步骤。
一、低温冷冻保藏法低温冷冻是一种常用的微生物保藏方法,适用于大多数真菌、细菌和酵母菌。
其主要原理是将菌株保存在低温下,使其生理活动缓慢,以延长菌种的保藏时间。
操作步骤:1. 选择菌株:选择生长良好、菌株特性完整的菌株进行保藏。
2. 菌株处理:将菌株经过预处理,如鉴定鉴别、菌落孤立等。
3. 制备保存液:根据不同菌株的需要,制备适宜的保存液,常用的保存液有甘油、甘露醇等。
4. 菌种保存:将菌株用保鲜膜包裹,放入保存管中,加入保存液,密封保存管。
5. 冷冻保存:将保存管放入低温冰箱或液氮罐中进行冷冻保存。
二、干燥保藏法干燥保藏法是一种简便、经济的保藏方法,适用于真菌、细菌、放线菌等微生物。
其基本原理是将菌种与干燥剂混合,使其水分含量降低,从而实现微生物的休眠状态。
操作步骤:1. 选择菌株:选择生长良好、菌株特性完整的菌株进行保藏。
2. 菌株处理:将菌株经过预处理,如鉴定鉴别、菌落孤立等。
3. 制备干燥剂:根据不同菌株的需要,选择合适的干燥剂,如硅胶、氧化钙等。
4. 菌种混合:将菌株与干燥剂按照一定比例混合均匀。
5. 干燥保存:将混合物均匀地散布在无菌培养基上,置于通风干燥的环境中进行保存。
三、冷冻冻干保存法冷冻冻干保存法是一种较为复杂的菌株保藏方法,适用于难保存的微生物,如厌氧菌、放线菌等。
其主要原理是将菌株在低温下冻结干燥,从而保护微生物的活力。
操作步骤:1. 选择菌株:选择生长良好、菌株特性完整的菌株进行保藏。
2. 菌株处理:将菌株经过预处理,如鉴定鉴别、菌落孤立等。
3. 制备保存液:根据不同菌株的需要,制备适宜的保存液,如甘油、甘露醇等。
4. 冷冻过程:将菌株加入保存液中,放入冷冻机冷冻至低温(通常为-80℃)。
5. 冻干过程:将冷冻的菌株经过真空排气、结冰降温等步骤进行冻干处理。
保藏菌种的方法
保藏菌种的方法
在微生物研究中,保藏菌种是非常重要的一环。
保藏菌种可以保证菌种的纯度和活力,并且方便长期保存和传递。
以下是一些常见的保藏菌种的方法:
1. 冷冻保藏法
将菌株培养在适宜的培养基上,待生长到适当的生长期后,用生理盐水或甘油溶液混合菌体,制成菌悬液,然后用干燥冰或液氮冷冻保存。
2. 真空干燥法
将菌株培养在适宜的培养基上,待生长到适当的生长期后,用无菌水将菌体洗净,然后在真空条件下干燥保存。
3. 常温干燥法
将菌株培养在适宜的培养基上,待生长到适当的生长期后,用无菌纸片或无菌土壤将菌体均匀涂抹在上面,然后在阴凉通风处晾干保存。
4. 液氮保藏法
将菌株培养在适宜的培养基上,待生长到适当的生长期后,用无菌水将菌体洗净,然后用液氮冷冻保存。
在保藏菌种过程中,需要注意以下几点:
1. 保证菌株的纯度和活力,避免杂菌和死菌的混入。
2. 在保存菌种前,要对菌株进行鉴定和存档。
3. 在保存过程中,要保证温度、湿度、氧气和光照等环境条件
的稳定和适宜。
4. 定期检查保存的菌种,确保其纯度和活力。
综上所述,保藏菌种是微生物研究中不可或缺的一环。
通过选择合适的保藏方法和严格的管理,可以确保菌种的纯度和活力,方便长期保存和传递。
实验室最常用的五种菌种保藏方法
在现代生物学研究和生物技术应用中,菌种保藏是至关重要的环节。
恰当的菌种保藏方法能够确保菌种的活性、遗传稳定性和可用性,为科学研究的持续开展以及相关产业的发展提供坚实的基础。
本文将重点介绍实验室中最常用的五种菌种保藏方法,深入探讨它们各自的特点、适用范围以及操作要点。
一、低温冷冻保藏法低温冷冻保藏法是目前最为广泛应用且效果较为可靠的菌种保藏方法之一。
其基本原理是将菌种置于超低温环境(通常为液氮温度,即-196℃)下,使菌种细胞处于极度冷冻的状态,从而抑制其代谢活动,达到长期保存的目的。
该方法具有诸多显著优点。
低温能够极大地减缓细胞的生理活动,几乎使其处于完全停滞状态,从而有效地延长菌种的存活时间。
低温冷冻保藏对菌种的遗传稳定性影响较小,经过长期保存后,菌种的特性通常能够较好地保持。
操作相对简单,只需将菌种制备成适宜的冷冻保存液,然后置于液氮罐中即可。
在具体操作时,首先要选择合适的冷冻保存液。
常用的冷冻保存液一般含有一定比例的保护剂,如甘油、二甲基亚砜等,它们能够降低细胞内冰晶的形成对细胞的损伤。
制备好冷冻保存液后,将菌种接种到冷冻保存液中,制成菌悬液。
将菌悬液分装到合适的冷冻管中,迅速放入液氮罐中进行保存。
在液氮罐中,要定期检查液氮的液位,确保菌种始终处于适宜的低温环境中。
低温冷冻保藏法适用于大多数微生物菌种的长期保存,尤其对于那些对温度敏感、容易变异的菌种,如细菌中的一些致病菌、真菌中的丝状真菌等,具有良好的保藏效果。
然而,该方法也存在一些不足之处,例如液氮的成本较高,液氮罐的储存空间有限,以及在取出菌种进行复苏时可能存在一定的风险等。
二、干燥保藏法干燥保藏法是利用菌种在干燥环境下代谢活动受到抑制的原理来实现保藏的方法。
常见的干燥保藏法包括沙土管保藏法、滤纸保藏法等。
沙土管保藏法是将菌种接种到无菌的沙土中,然后将沙土管置于干燥器中进行干燥保存。
该方法具有操作简便、成本低廉的特点。
在干燥过程中,菌种细胞内的水分逐渐散失,代谢活动减缓,从而达到保藏的目的。
菌种保藏方法
一、石蜡油低温保藏法本方法的原理是在长好的斜面菌上覆盖灭菌的液体石蜡,达到菌体与空气隔绝,使菌处于生长和代谢停止状态,同时石蜡油还防止水分蒸发,在低温下达到较长期的保藏菌种的目的。
保藏温度要求在-4~4℃下。
液体石蜡法适用于不产孢子的菌种。
具体操作是:菌种为斜面培养菌种,斜面不宜过长;选择纯净优质石蜡油,置三角烧瓶中经过121℃高压蒸汽灭菌1~2h,将其放烘箱中(160℃左右)干热处理,去除灭菌时渗入的水分,待石蜡油变得清澈透明后冷却即可加入斜面,斜面上不能出现气泡,液蜡添加量以高出斜面顶部约1cm为宜。
二、甘油管冷冻保藏法1.试验方法介绍本法也是利用微生物在甘油中生长和代谢受到抑制的原理达到保藏目的。
其方法是,将80%的甘油高压蒸汽灭菌待用。
将培养好的斜面菌种用无菌水制成高浓度的菌悬液(108~1010/ml)。
取1ml灭菌甘油放入与甘油充分混匀,使甘油浓度约为10%-30%,于-70℃下冻存。
-20℃保存时间较短。
或采用体积比为8:2的甘油-生理盐水,加入新鲜培养的菌体肉汤,混合均匀后至-20℃冰箱保存。
2.效果该法适用于一般细菌的保存,同时也适用于链球菌、弧菌、真菌等需特殊方法保存的菌种,适用范围广,操作简便,效果好,无变异现象发生。
甘油-生理盐水保存液保存菌种优于甘油原液,其原因可能是加入生理盐水适当降低了甘油的高渗作用,且有肉汤培养物适量增加保存液的营养成分,从而更好地保护了待保存的菌株。
三、真空冷冻干燥法1.试验原理真空冷冻干燥保藏法是兼具低温、干燥、除氧三方面菌种保藏的主要因素,除不宜于丝状真菌的菌丝体外,对病毒、细菌、放线菌、酵母及丝状菌孢子等各类微生物都适用,不宜用冻干法保存的微生物不到2%。
冷冻干燥法是在低温下快速将细胞冻结,然后在真空条件下干燥,使微生物的生长和酶活动停止。
为了防止在冷冻和水分升华过程中对细胞的损害,要采用保护剂来制备细胞悬液,使菌在冻结和脱水过程中起到保护作用的溶质,通过氢键和离子键对水和细胞所产生的亲和力来稳定细胞成分的构型。
菌种保藏技术
菌种保藏技术概述菌种保藏技术是指将某种菌株保存至较长时间内保持菌株活力的技术。
这项技术在微生物学和生物工程领域中具有重要的应用价值。
通过菌种保藏技术,我们可以确保菌株的长期保存,以便进一步开展研究、生产和应用。
菌种保藏方法菌种保藏方法多种多样,根据不同的菌株特性和研究需求,可以采用不同的保存方法。
常见的菌种保藏方法包括以下几种:冷冻保藏法冷冻保藏法是最常见和简单的菌种保藏方法之一。
它是通过将菌株培养物加入到含有甘露醇、甘油等低温保护剂的液体培养基中,然后暴露在低温环境下保存。
通常采用-80℃的低温保存,也可以使用液氮等更低的温度进行保存。
冷冻保藏法适用于大部分细菌和真菌的保藏。
干燥保藏法干燥保藏法是一种将菌株保存在干燥状态下的方法。
这种方法适用于较为耐干旱的菌种,通过将菌株培养物均匀涂布在无菌耐热材料上,然后置于通风干燥室中,使其自然脱水,最后将干燥的菌株保存在密封的容器中。
干燥保藏法可以延长菌株的保存时间,并且保存过程中不需要低温设备。
明胶培养块保藏法明胶培养块保藏法是一种将菌株保存在明胶基质中的方法。
通过将菌株培养物与明胶混合,制成固态培养块,然后保藏至低温环境中。
这种方法适用于一些不适合冷冻保藏的菌株,可以有效地保护菌株的活力。
液氮冷冻保藏法液氮冷冻保藏法是一种将菌株保存在液氮中的方法。
液氮的温度非常低,可以有效地保持菌株的冷冻状态。
通过将菌株培养物与低温保护剂混合后,加入到液氮中进行冷冻保存。
液氮冷冻保藏法适用于保存较为敏感的菌株,能够保持菌株较长时间内的生存能力。
菌种保藏的重要性菌种保藏技术在微生物学和生物工程领域具有重要的应用意义。
具体有以下几个方面的重要性:科学研究菌种保藏技术使得科学家可以随时随地地保存特定的菌株,从而方便后续的研究。
科学家可以根据需要,随时提取保存的菌株,进行各种实验和研究。
菌种保藏技术的应用,促进了科学研究的发展和进步。
产业应用许多微生物有着重要的产业应用价值,如工业发酵和药物生产等。
实验室最常用的五种菌种保藏方法
实验室最常用的五种菌种保藏方法一、冷冻保存在实验室中,冷冻保存是最常用的菌种保藏方法之一。
这种方法利用低温的环境,将菌种置于-70°C以下的冰柜或液氮罐中进行保存,以减缓菌种的新陈代谢过程,从而延长其保存时间。
冷冻保存不仅适用于常见的细菌菌种,对真菌、酵母菌等微生物也同样适用。
在冷冻保存的过程中,需要注意样品容器的密封性和防潮性,以避免保存过程中的交叉污染和冻结损伤。
二、干燥保存干燥保存是另一种常见的菌种保藏方法。
这种方法通过将菌种置于低温低湿环境中,使其水分蒸发,使菌种变得干燥并进入休眠状态,从而延长其保存时间。
常见的干燥保存方式包括真空冷冻干燥、干燥剂吸附法等。
干燥保存尤其适用于灵敏对湿度敏感的菌种,以及一些难以存活在液体培养基中的微生物。
三、低温保存除了冷冻保存外,低温保存也是常见的菌种保藏方式之一。
在这种方法中,菌种通常被保存在4°C左右的冰箱中,通过控制温度和湿度,延缓菌种的新陈代谢,并保持其生长状态。
这种保存方式不仅适用于微生物的短期保存,也可以用于长期保存对保存温度敏感的微生物。
四、液氮保存液氮保存是一种极低温的保存方式,通过将微生物样品浸没在液氮中进行保存。
这种方法不仅可以有效地防止菌种的新陈代谢和变异,还能够保持菌种的生物特性和遗传信息。
液氮保存适用于需要长期保存的珍贵菌株和难培养的微生物,如土壤中的特殊嗜冷菌和特殊嗜热菌等。
五、冻干保存冻干保存是将微生物样品在冷冻的条件下先冻结,然后通过真空干燥的方式将水分蒸发,最终将样品转变成固态的干燥状态。
这种方法既能保留微生物的生物特性,又能有效地延长样品的保存时间,适用于需要长时间运输和保存的微生物。
总结回顾通过冷冻保存、干燥保存、低温保存、液氮保存和冻干保存等五种菌种保藏方法,可以满足实验室对于微生物样品保存的不同需求。
不同的菌种和实验目的,需要选择合适的保存方式,以确保微生物的品质和可用性。
在进行菌种保存的过程中,需要注意样品的密封性、温度和湿度的控制,以及保存设备的维护和管理。
菌种保藏的要点
菌种保藏的要点
菌种保藏的要点包括以下几点:
1. 菌种的分离与培养:选择合适的方法将所需菌种从样品中分离出来,并进行适当的培养,确保纯净度和菌株的健康状态。
2. 菌种的保存介质:选择适合菌种保存的介质,常见的包括琼脂、液体培养基、冰冻保存液等。
保存介质要符合菌株生长的需求,并具备较长的保存时间。
3. 冷冻保存:将菌种培养物经过适当处理后保存在低温环境中,常见的冷冻方式包括冷冻干燥、液氮冷冻等。
冷冻保存可以有效地延长菌株的保存时间。
4. 恒温保存:将菌种培养物保存在稳定恒温环境中,如恒温培养箱或恒温冰箱。
保存温度要根据菌株的生长特性进行调整,通常为4-8摄氏度。
5. 定期传代:定期传代菌株,避免菌株在长期保存过程中发生遗传变异或失活。
6. 保存记录:建立并及时更新菌株的详细保存记录,包括菌株的来源、保存时间、保存方式、特性描述等信息,以便于菌株的溯源和使用。
7. 双重保存:对于重要的菌种,可以考虑进行双重保存,即同时进行冷冻保存和恒温保存,以增加保存的安全性。
8. 定期检测:定期检测保存的菌株,包括菌株的纯度、生长状况和遗传特性等,确保保存的菌株依然具有所需的特性和活力。
以上是常见的菌种保藏要点,可以根据具体的实验需求和菌种特点进行调整和优化。
同时,注意进行合理的菌种管理和使用,以减少菌株的失活和遗传变异,保证科研的可靠性和稳定性。
菌种保藏的几种方法
菌种保藏的几种方法基本原理微生物具有容易变异的特性,因此,在保藏过程中,必须使微生物的代谢处于最不活跃或相对静止的状态,才能在一定的时间内使其不发生变异而又保持生活能力。
低温、干燥和隔绝空气是使微生物代谢能力降低的重要因素,所以,菌种保藏方法虽多,但都是根据这三个因素而设计的。
保藏方法大致可分为以下几种:1.传代培养保藏法又有斜面培养、穿刺培养、疱肉培养基培养等(后者作保藏厌氧细菌用),培养后于4—6℃冰箱内保存。
2.液体石蜡覆盖保藏法是传代培养的变相方法,能够适当延长保藏时间,它是在斜面培养物和穿刺培养物上面覆盖灭菌的液体石蜡,一方面可防止因培养基水分蒸发而引起菌种死亡,另一方面可阻止氧气进入,以减弱代谢作用。
3.载体保藏法是将微生物吸附在适当的载体,如土壤、沙子、硅胶、滤纸上,而后进行干燥的保藏法,例如沙土保藏法和滤纸保藏法应用相当广泛。
4.寄主保藏法用于目前尚不能在人工培养基上生长的微生物,如病毒、立克次氏体、螺旋体等,它们必须在生活的动物、昆虫、鸡胚内感染并传代,此法相当于一般微生物的传代培养保藏法。
病毒等微生物亦可用其他方法如液氮保藏法与冷冻干燥保藏法进行保藏。
5.冷冻保藏法可分低温冰箱(-20—-30℃,-50—-80℃)、干冰酒精快速冻结(约-70℃)和液氮(-196℃)等保藏法。
6.冷冻干燥保藏法先使微生物在极低温度(-70℃左右)下快速冷冻,然后在减压下利用升华现象除去水分(真空干燥)。
有些方法如滤纸保藏法、液氮保藏法和冷冻干燥保藏法等均需使用保护剂来制备细胞悬液,以防止因冷冻或水分不断升华对细胞的损害。
保护性溶质可通过氢和离子键对水和细胞所产生的亲和力来稳定细胞成分的构型。
保护剂有牛乳、血清、糖类、甘油、二甲亚砜等。
三、器材细菌、酵母菌,放线菌和霉菌;肉膏蛋白胨斜面培养基,灭菌脱脂牛乳,灭菌水,化学纯的液体石蜡,甘油,五氧化二磷,河沙,瘦黄土或红土,冰块、食盐,干冰,95%酒精,10%盐酸,无水氯化钙;灭菌吸管,灭菌滴管,灭菌培养皿,管形安瓿管,泪滴形安瓿管(长颈球形底),40目与100目筛子,油纸,滤纸条(0.5×1.2cm),干燥器,真空泵,真空压力表,喷灯,L 形五通管,冰箱,低温冰箱(-30℃),液氮冷冻保藏器。
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一、怎样进行一个菌种的保藏、扩繁以及防止退化措施
(一)菌种的保藏
微生物具有容易变异的特性,因此,在保藏过程中,必须使微生物的代谢处于最不活跃或相对静止的状态,才能在一定的时间内使其不发生变异而又保持生活能力。
低温、干燥和隔绝空气是使微生物代谢能力降低的重要因素,所以,菌种保藏方法虽多,但都是根据这三个因素而设计的。
1、传代培养保藏法
又有斜面培养、穿刺培养、疱肉培养基培养等(后者作保藏厌氧细菌用),培养后于4—6℃冰箱内保存。
1.1斜面低温保藏法
将菌种接种在适宜的固体斜面培养基上,待菌充分生长后,棉塞部分用油纸包扎好,移至2—8℃的冰箱中保藏。
保藏时间依微生物的种类而有不同,霉菌、放线菌及有芽孢的细菌保存2—4个月,移种一次。
酵母菌两个月,细菌最好每月移种一次。
此法为实验室和工厂菌种室常用的保藏法,优点是操作简单,使用方便,不需特殊设备,能随时检查所保藏的菌株是否死亡、变异与污染杂菌等。
缺点是容易变异,因为培养基的物理、化学特性不是严格恒定的,屡次传代会使微生物的代谢改变,而影响微生物的性状;污染杂菌的机会亦较多。
1.2穿刺培养
用接种针拉直了挑菌直接穿到培养基的底层培养,用于厌氧性或兼性厌氧性细菌的培养。
2、液体石蜡覆盖保藏法
是传代培养的变相方法,能够适当延长保藏时间,它是在斜面培养物和穿刺培养物上面覆盖灭菌的液体石蜡,一方面可防止因培养基水分蒸发而引起菌种死亡,另一方面可阻止氧气进入,以减弱代谢作用。
3、载体保藏法
是将微生物吸附在适当的载体,如土壤、沙子、硅胶、滤纸上,而后进行干燥的保藏法,例如沙土保藏法和滤纸保藏法应用相当广泛。
4、寄主保藏法
用于目前尚不能在人工培养基上生长的微生物,如病毒、立克次氏体、螺旋体等,它们必须在生活的动物、昆虫、鸡胚内感染并传代,此法相当于一般微生物的传代培养保藏法。
病毒等微生物亦可用其他方法如液氮保藏法与冷冻干燥保藏法进行保藏。
5、冷冻保藏法
可分低温冰箱(-20—-30℃,-50—-80℃)、干冰酒精快速冻结(约-70℃)和液氮(-196℃)等保藏法。
6、冷冻干燥保藏法
先使微生物在极低温度(-70℃左右)下快速冷冻,然后在减压下利用升华现象除去水分(真空干燥)。
有些方法如滤纸保藏法、液氮保藏法和冷冻干燥保藏法等均需使用保护剂来制备细胞悬液,以防止因冷冻或水分不断升华对细胞的损害。
保护性溶质可通过氢和离子键对水和细胞所产生的亲和力来稳定细胞成分的构型。
保护剂有牛乳、血清、糖类、甘油、二甲亚砜等。
(二)菌种的扩繁
从外地购进或分离获得的母种数量有限,不能满足生产的需要时,要对初次获得的母种进行扩大繁殖,以增加母种数量。
菌种扩大:把接种物移至培养基上。
1、表面培养法:
表面培养法是一种好氧静置培养法。
针对容器内培养基物态又分为液态表面培养和固体表面培养。
相对于容器内培养基体积而言,表面积越大,越易促进氧气由气液界面向培养基内传递。
这种方法菌的生长速度与培养基的深度有关,单位体积的表面积越大,生长速度越快。
2、固体培养法:
固体培养又分为浅盘固体培养和深层固体培养,统称为曲法培养。
它起源于我国酿造生产特有的传统制曲技术。
其最大特点是固体曲的酶活力高。
3、液体深层培养:
液体深层种子罐从罐底部通气,送入的空气由搅拌桨叶分散成微小气泡以促进氧的溶解。
这种由罐底部通气搅拌的培养方法,相对于由气液界面靠自然扩散使氧溶解的表面培养法来讲,称为深层培养法。
其特点是容易按照生产菌种对于代谢的营养要求以及不同生理时期的通气、搅拌、温度与培养基中氢离子浓度等条件,选择最佳培养条件。
3.1几种深层培养法
①控制培养法根据罐内部的变化情况,掌握短暂时间内状态变量的变化以及可能测定的环境因子对微生物代谢活动的影响,并以此为基础进行控制培养,以达到产物的最优培养条件。
为此,用测定状态变量的传感器取得数据,经电子计算机进行综合分析,再将其结果作为反馈调节的信号,将环境(培养条件)控制于给定的基准内。
这就叫做电子计算机控制培养。
目前已大量用于露天大罐啤酒发酵。
②载体培养法载体培养法脱胎于曲法培养,同时又吸收了液体培养的优点,是近年来新发展的一种培养方法。
特征是以天然或人工合成的多孔材料代替麸皮之类的固体基质作为微生物的载体,营养成分可以严格控制。
发酵结束,只要将菌体和培养基挤压出来进行抽提,载体又可以重新使用。
③两步法在酶制剂的两步法液体深层培养中,每一步菌体相同而培养条件不同,因为微生物生长与产酶的最适条件有很大的差异。
例如往培养基中添加葡萄糖能大大增加菌体或菌丝的生长,然而却严重阻碍许多种酶的合成。
加强培养液的通气虽然能促进微生物的生长,可是在多数场合下反而抑制酶的合成。
为了取得最大的高活力酶,必须制定一种调节方法,既要求细胞的单位酶活力高,又要求细胞数量多,也就是说,给菌体在各种生理时期创造不同的条件。
两步法液体深层培养就是实现这种调节的具体措施之一。
酶制剂生产两步法的特点是将菌体生长条件(生长期)与产酶条件(生产期)区分开来。
菌体先在丰富的培养基上大量繁殖,然后收集菌体浓缩物,洗涤后再转入添加诱导物的产酶培养基,在此期间,菌体积累大量的酶,一般不再繁殖,营养成分或诱导物得到充分的利用。
(三)菌种防止退化措施
要防止菌种衰退,应该作好保藏工作,使菌种优良的特性得以保存,尽量减少传代次数。
⑴菌种的分离菌种发生衰退的同时,并不是所有的菌种都衰退,其中未衰退的菌体往往是经过环境条件考验的、具有更强生命力的菌体。
因此,采用单细胞菌株分离的措施,即用稀释平板法或用平板划线法,以取得单细胞所长成的菌落,再通过菌落和菌体的特征分析和性能测定,就可获得具有原来性状的菌株,甚至性能更好的菌株。
如对芽孢杆菌,可先将菌液用沸水处理几分钟,再用平板进行分离,从所剩下的孢子中挑选出最优的菌体。
如果遇到某些菌株即使进行单
细胞分离仍不能达到复壮的效果,则可改变培养条件,达到复壮的目的。
如
AT3.942栖土曲霉的产孢子能力下降,可适当提高培养温度,恢复其能力。
同时通过实验选择一种有利于高产菌株而不利于低产菌株的培养条件。
菌种分离方法如下:
①配合一定的培养条件,对退化菌株进行单菌落或单细胞分离,淘汰退化的个体,保留纯化菌种。
②将芽孢杆菌的悬液加热至90 ℃处理数分钟,杀灭已退化的菌体,保留芽孢;再将芽孢或孢子进行传代,以淘汰退化的个体。
③提供特殊的培养条件,使环境有利于优良性状菌株的生长而不利于退化菌株的生长,从而淘汰已退化的菌株个体。
④将分离后得到的初筛菌株先保藏,再进行复筛考察,从中选出稳定性较好的菌种。
⑤同时应用上述方法中的两种或两种以上的方法,会收到更好的复壮效果。
⑵菌种的复壮菌种的复壮有狭义的复壮和广义的复壮。
狭义的复壮指的是菌种已经发生衰退后,再通过纯种分离和性能测定等方法,从衰退的群体中找出尚未衰退的少数个体,以达到恢复该菌种原有典型性状的一种措施。
而广义的复壮应该是一种积极的措施,即在菌种的生产性能尚未衰退前就经常有意识地进行纯种分离和生产性能的测定工作,使菌种的生产性能逐步提高,所以,这实际上是一种利用自发突变(正突变)从生产中不断进行选种的工作。
⑶提供良好的环境条件进行合理的传代,减少传代次数可防止由于菌种的遗传稳定性变化而引起的自发突变,以及由于环境条件变化导致的退化。
菌种允许使用的传代次数必须通过传代的稳定性试验确定。
发酵生产上一般只用三代内的菌种。
采用合适的传代条件使培养条件有利于高产菌的生长,而不利于低产菌的生长,减少突变的发生。
⑷用优良的保藏方法尽可能采用诸如斜面冰箱保藏法、砂土管保藏法、真空冷冻干燥保藏法以及采用干孢子保藏等优越的保藏方法保藏菌种,以防止菌种的衰退。
⑸定期纯化菌种对菌种进行定期的分离纯化,可减少其中共存的自发突变菌或“突变不完全”产生的退休型菌株的增殖机会,保持原来的优良特性。
诸如对营养缺陷型菌种在纯化过程中提供足够的营养物,以保持菌株的优势,避免回
复突变体的竞争。
同样在进行抗性突变的菌种纯化时在培养基中加入对应于抗性的药物,可保持菌株的抗性优势,避免产生无抗性的回复突变体。
采用遗传性稳定的菌体作为菌种、合适的培养基传代等可减少和防止菌种的自身突变。