食品中八种人工着色剂的测定
肉制品中人工合成着色剂的测定
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肉制品中人工合成着色剂的测定作者:张红芬周刚来源:《科学导报·学术》2019年第21期摘 ;要:目的建立固相萃取高效液相色谱同时测定肉制品中柠檬黄、新红、胭脂红、苋菜红、日落黄、诱惑红、亮蓝、赤藓红8种合成色素。
方法样品采用乙醇-乙腈-甲醇-氨水=30:30:30:10提取,阴离子固相萃取小柱净化,经Inspire C18色谱柱分离,乙腈和 0.02 mol/L 乙酸铵为流动相梯度洗脱,流速1.0mL/min。
采用二极管阵列检测器,采集254nm色谱合成图进行外标法定量,并通过与对照品的光谱比对进行确证。
结果 8种合成色素在30min内可有效分离,平均回收率为80.3%~98.0%,。
结论该方法前处理简单、检测快速、回收率满意且重复性好,可作为肉制品中8种合成色素的检测方法。
关键词:肉制品;固相萃取;色素食用合成着色剂简称合成色素,为增进人们的食欲,保持食品色泽鲜艳而添加的非营养成分,多以煤焦油中提煉出的苯胺染料为原料研制而成,有含R-N=N-R键、苯环或氧杂蒽等结构[1-3]。
合成色素色泽鲜艳、用量少、性质稳定、易着色,且价格相对便宜,但超标、超范围等不规范使用则会造成人体被动的摄入过量的食用合成色素,导致出现嗳气、偏头痛、多种过敏症状以及中毒等症状,更有甚者造成致癌、致畸、致突变等危害。
目前食品合成色素的检测主要参照国标GB/T5009.35-2003《食品中合成着色的测定》[4]、GB/T5009.141-2003《食品中诱惑红的测定》[5]、SN/T1743-2006《食品中的诱惑红、酸性红、亮蓝、日落黄的含量检测》[6]需采用多个液相系统才能完成对8合成色素的检测,且样品前处理较复杂,检测耗时长。
文献报道[7-8]的这些检测方法多是针对这些人工合成色素中的一种或几种,而没有关于这8种人工合成色素在肉制品中同时检测的报道。
并且这些检测方法的样品净化过程一般都采用聚酰胺吸附法或是液液萃取法(赤藓红)等,这些前处理方法具有操作环境差、操作费时繁琐、回收率低等特点。
高效液相色谱法同时测定食品中10种合成着色剂
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高效液相色谱法同时测定食品中10种合成着色剂合成着色剂因其色彩亮丽、性质稳定、价格低廉,成为食品工业常用的添加剂之一。
它们通常是以苯、甲苯、萘等化工原料合成,长期食用对人体健康具有一定的毒性,尤其是对少年儿童。
世界各国对合成着色剂的使用范围和限量都有严格的规定。
我国《食品添加剂使用卫生标准》[1]中规定准许使用的人工合成色素有11种。
GB/T 5009.35[2]规定高效液相色谱法同时测定胭脂红、苋菜红,柠檬黄、日落黄和亮蓝等8种合成着色剂。
GB/T 5009.141[3]则规定采用纸层析-分光光度法测定诱惑红。
喹啉黄尚未有法定的检测方法。
为了对食品中常用的合成着色剂进行更为全面的检测,对食品安全状态进行更有效地监督,本文借鉴国标中合成着色剂的前处理方法,对食品中的10种合成着色剂进行分离检测。
此法简便、灵敏、准确,结果满意。
1 材料和方法1.1 仪器与试剂仪器高效液相色谱仪Aglient LC 1100 DAD检测器:安捷伦公司。
标准品与试剂合成着色剂标液(柠檬黄,苋菜红,胭脂红,日落黄,亮蓝):0.5mg/mL,购自国家标准物质中心;诱惑红(80%):SIGMA-ALDRICH,Inc生产;新红、赤藓红、喹啉黄、靛蓝:Laboratories of Dr.Ehrenstorfer(Germany)生产;聚酰胺:过200目筛;pH6的水,蒸馏水加柠檬酸溶液(20%)调节pH=6;甲醇-甲酸(6+4)液;甲醇60mL,甲酸40mL,混匀;无水乙醇-氨水-水(7+2+1):无水乙醇70mL、氨水20mL、水10mL,混匀;甲醇为液相色谱淋洗剂;水为MilliQ水;其余所用试剂均为分析纯。
1.2 标准溶液的配制及定量方法配制不同浓度的标准物质储备液,分别为:亮蓝0.25mg/mL,柠檬黄、苋菜红、胭脂红、日落黄、靛蓝为0.5mg/mL, 诱惑红0.8mg/mL,赤藓红0.61mg/mL, 新红0.75mg/mL, 喹啉黄0.97mg/mL。
食品中人工合成着色剂检测解决方案
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食品中人工合成着色剂的测定解决方案(参考GB/T 5009.35-2003《食品中合成着色剂的测定》)合成色素以苯、甲苯、萘等化工产品为原料,经过磺化、硝化、卤化、偶氮化等一系列有机反应制成合成着色剂,合成着色剂有一定毒性,过多食用会危害人体健康,但由于人工合成着色剂成本低、色泽鲜艳、着色力强、色调多样,故被广泛使用;合成着色剂有严格的控制使用范围和最大使用量,因此食品中合成色素的准确测定具有重要意义。
对于食品中合成着色剂的检测目前可借鉴国标GB/T 5009.35-2003《食品中合成着色剂的测定》,分别采用高效液相色谱法,薄层色谱法,示波极谱法进行定性定量分析,其中高效液相色谱法前处理采用聚酰胺吸附法或液-液分配法进行色素提取。
迪马科技在参考国标的基础上,推出食品中人工合成着色剂的解决方案,该方案前处理采用聚合物基质亲水亲脂平衡反相固相萃取柱ProElut PLS进行色素的提取,比国标方法更简便易行,提取效率更高,净化效果更好;同时对高效液相色谱检测方法进行了改进,分别采用迪马科技Inspire和Diamonsil两款反相色谱柱,梯度洗脱检测食品中人工合成着色剂,分离效果更优异,增加定性定量的准确性。
该方案特别适用于食品中柠檬黄、苋菜红、胭脂红、日落黄、诱惑红和亮蓝等人工合成着色剂的检测。
以下为迪马科技开发的食品中人工合成着色剂的检测解决方案,供您参考!1 样品准备1.1 可乐样品取1 g可乐(加热超声驱除二氧化碳),40 μL甲酸于试管中,摇匀,作为上样液待净化。
1.2 红薯粉样品(1) 取2 g样品与20 mL提取剂*混合,涡旋2 min,超声提取10 min,6000 rpm 下离心3 min,收集上清液;(2) 将下层残留物依次用10 mL、10 mL提取剂重复提取两次,合并三次提取上清液;(3) 将上清液在45℃水浴条件下,减压蒸馏至6 mL,再加入80 μL甲酸,混匀,待净化。
提取剂*:氨水+70%乙醇(1+99,体积比)。
食品中人工合成着色剂的测定
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食品中人工合成着色剂的测定序列号:DM-P1071、适用范围本方案适用于糕点、果酱、水果罐头、黑芝麻糊、果冻、冰淇淋、乳饮料、糖果和红酒中人工合成着色剂的检测;检出限:亮蓝是1.0 mg /kg,其他的是0.2 mg /kg;2、提取2.1 糕点、果酱(1) 取1.0 g样品,加入20 mL提取液A*,振荡2 min,40℃水浴超声提取10 min,6000 rpm下离心2 min,收集上清液;(2) 取下层残留物,加入10 mL提取液A*,振荡2 min,40℃水浴超声提取15 min,6000 rpm下离心2 min,收集上清液;(3) 将下层残留物用10mL提取液A* 按照步骤(2)重复提取一次,合并三次上清液;(4) 将上清液在40℃水浴条件下,减压蒸至约15 mL,再加入3 mL甲酸混匀,待净化。
2.2 水果罐头、黑芝麻糊(1) 取1.0 g样品,加入20 mL提取液A*,振荡2 min,40℃水浴超声提取10 min,6000 rpm下离心2 min,收集上清液;(2) 取下层残留物,加入10 mL提取液A*,振荡2 min,40℃水浴超声提取15 min,6000 rpm下离心2 min,合并两次上清液;(3) 将上清液在40℃水浴条件下,减压蒸至约15 mL,再加入3 mL甲酸混匀,待净化。
2.3 冰淇淋(1) 取1.0 g样品,加入20 mL提取液A*,振荡2 min,40℃水浴超声提取10 min,6000 rpm下离心2 min,收集上清液;(2) 将上清液在40℃水浴条件下,减压蒸至约7 mL,再加入1.5 mL甲酸混匀,待净化。
2.4 果冻取1.0 g样品,加入10 mL水,40℃水浴超声提取15 min,加入5 mL甲醇和3 mL甲酸混匀,待净化。
2.5 乳饮料、糖果取1.0 g样品,加入10 mL水、5 mL甲醇和3 mL甲酸混匀,待净化。
2.6 红酒取1.0 mL样品,加入0.5 mL甲醇和0.3 mL甲酸混匀,待净化。
食品实验 食品中合成着色剂的测定 4.28
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2. 2 高效液相色谱法 高效液相色谱法(HPLC):是色谱法的
一个重要分支,以液体为流动相,采用高压 输液系统,将具有不同极性的单一溶剂或不 同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装 有固定相的色谱柱,在柱内各成分被分离后, 进入检测器进行检测,从而实现对试样的分 析。
检测器:二极管阵列检测器
高效、高速、高灵敏度、高自动化
现状:超量使用,使用工业色素、染料色素
4
方便、快速、准确地检测食品中合成着色 剂,是对其进行有效管理的必要手段。
测定手段(GB/T 5009.35-2003): 1. 高效液相色谱法 2. 薄层色谱法 3. 示波极谱法 4. 其他:纸上层析、分光光度法
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亮蓝、柠檬黄、日落黄
6
合成着色剂在饮料中的最大使用量
合成着色剂:用人工合成的方法从煤焦油中制取,或以苯、 甲苯、萘等芳香烃化合物为原料合成的有机色素。包括苋 菜红、柠檬黄、亮蓝、日落黄、诱惑红、赤鲜红等等。
3
合成着色剂的潜在危害——致泻性、致癌性
国际:JECFA制定各种合成着色剂的ADI 我国:食品安全国家标准、食品添加剂使用标 准(GB2760-2011)。
PH 4的水(70℃) 水+柠檬酸溶液,调至PH=4, 加热
调PH 洗涤
甲醇-甲酸溶液
60mL甲醇+40mL甲酸
洗涤
无水乙醇-氨水-水 70mL乙醇+20mL氨水+10mL水 解吸附
乙酸铵溶液
合成着色剂标准溶 液
1.54g乙酸铵,纯水定容至 1000mL,乙酸调PH至4
浓度0.05mg/mL
流动相 定量分析
14
3. 除杂质 组装好G3漏斗,将样品倒入漏斗,抽滤; PH4的水(70℃)洗涤3次,每次20mL(洗涤沉淀物); 甲醇-甲酸洗涤3次,每次20mL(洗涤天然色素); 400mL PH4的水洗涤至PH为4。
食品中着色剂之检验方法
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食品中著色劑之檢驗方法101年11月19日署授食字第1011903531號公告1. 適用範圍:本檢驗方法適用於食品中著色劑之檢驗。
2. 檢驗方法:檢體經萃取及毛線染色後,以濾紙層析(paper chromatograph, PC)、薄層層析(thin layer chromatograph, TLC)及高效液相層析儀(high performance liquid chromatograph, HPLC)分析之方法。
2.1. 檢體之調製:2.1.1. 試藥:乙醇、醋酸、乙醚、石油醚、氨水(25%)及氯化鈉均採用試藥級;去離子水(比電阻於25℃可達18 M‧cm以上)。
2.1.2. 試劑之調製:2.1.2.1. 80%乙醇溶液:取乙醇與去離子水,以80:20(v/v)之比例混勻。
2.1.2.2. 70%乙醇溶液:取乙醇與去離子水,以70:30(v/v)之比例混勻。
2.1.2.3. 含1%氨水之70%乙醇溶液:取氨水4 mL,加70%乙醇溶液使成100 mL。
2.1.2.4. 含1%醋酸之70%乙醇溶液:取醋酸1 mL,加70%乙醇溶液使成100 mL。
2.1.2.5. 10%氨水溶液:取氨水40 mL,加去離子水使成100 mL。
2.1.2.6. 25%氯化鈉溶液:稱取氯化鈉25 g ,加去離子水溶解使成100 mL。
2.1.2.7. 6%醋酸溶液:取醋酸6 mL,加去離子水使成100 mL。
2.1.3. 試驗溶液之調製:2.1.3.1. 液狀檢體(酒精飲料、清涼飲料及液狀調味品等):依著色程度稱取檢體20~200 mL,加適量去離子水作為試驗溶液,檢體含乙醇者,先中和呈中性後,置於水浴上去除乙醇,再加去離子水至原容量作為試驗溶液。
2.1.3.2. 糖果、糕餅及農產品:依著色程度稱取檢體20〜200 g ,研碎或切碎,按下列方法製成試驗溶液。
2.1.3.2.1. 糖果等製品:檢體加入約5倍量之熱去離子水,溶解後作為試驗溶液,檢體僅表面著色時,取著色部分調製之。
液相色谱法测定食品中合成着色剂
![液相色谱法测定食品中合成着色剂](https://img.taocdn.com/s3/m/3f0aff6aef06eff9aef8941ea76e58fafbb04578.png)
液相色谱法测定食品中合成着色剂作者:***来源:《食品安全导刊·下》2024年第05期摘要:目的:建立一种液相色谱法测定食品中合成着色剂的方法。
方法:用乙醇氨水溶液提取食品中的合成着色剂,经固相萃取柱净化后,用液相色谱仪(配二極管阵列检测器)测定,外标法定量。
结果:11种合成着色剂在0.2~10.0 μg·mL-1线性关系良好,线性相关系数为0.999 4~1.000 0,加标回收率为94.2%~109.6%,相对标准偏差在0.55%~5.52%。
柠檬黄、喹啉黄、日落黄、胭脂红、新红和赤藓红的检出限均为0.5 mg·kg-1,定量限均为1.5 mg·kg-1;苋菜红、诱惑红、亮蓝、酸性红和靛蓝的检出限均为0.3 mg·kg-1,定量限均为1.0 mg·kg-1。
结论:该方法的重复性好、灵敏度高、实用性强,可以同时测定食品中多种合成着色剂的含量。
关键词:合成着色剂;液相色谱法;固相萃取Determination of Synthetic Colorants in Food by Liquid ChromatographyZHU Xiaolei(Guangdong Dongguan Quality Supervision & Testing Center, Dongguan 523000, China)Abstract: Objective: To establish a method for the determination of synthetic colorants in food by liquid chromatography. Method: The synthetic colorants in food were extracted with ethanol ammonia solution, purified by solid phase extraction column, determined by liquid chromatography ( with diode array detector ), and quantified by external standard method. Result: The linear range of 11 synthetic colorants was 0.2~10.0 μg·mL-1, the linear correlation coefficient was 0.999 4~1.000 0, the recovery rate was 94.2%~109.6%, and the relative standard deviation was 0.55%~5.52%. The detection limits of tartrazine, quinoline yellow, sunset yellow, carmine, new red and erythrosine were 0.5 mg·kg-1, and the limits of quantification were 1.5 mg·kg-1. The limits of detection of amaranth, allura red, brilliant blue, acid red and indigo were 0.3 mg·kg-1, and the limits of quantitation were1.0 mg·kg-1. Conclusion: The method has good repeatability, high sensitivity and strong practicability, and can simultaneously determine the content of various synthetic colorants in food.Keywords: synthetic colorants; liquid chromatography; solid-phase extraction着色剂在食品加工过程中可以改善食品的口感和外观,但过量使用会对人们的健康造成不良影响。
食品中人工着色剂的检测与控制
![食品中人工着色剂的检测与控制](https://img.taocdn.com/s3/m/5373d3723868011ca300a6c30c2259010202f3d2.png)
食品中人工着色剂的检测与控制食品中的人工着色剂一直以来都是消费者和食品监管部门非常关注的问题。
人工着色剂在食品制造过程中的使用,既是为了美观,也是为了增加食品的吸引力和市场竞争力。
然而,人工着色剂对人体健康可能会带来负面影响,因此对食品中的人工着色剂进行检测和控制尤为重要。
目前,食品行业已经建立了一套相对完善的人工着色剂检测机制。
最常用的方法是使用高效液相色谱法(HPLC)和气相色谱法(GC)进行人工着色剂的分离和定量。
这些方法凭借其高灵敏度、高分辨率和准确性,已成为行业标准。
此外,还有一些快速检测方法,如近红外光谱法和荧光光谱法,能够有效地检测食品中的人工着色剂。
然而,仅有检测还不足以对人工着色剂进行有效控制。
对于食品制造商来说,最关键的是选择合适的原料和生产工艺,以减少对人工着色剂的依赖。
许多天然食品都具有天然的颜色,比如红色的西瓜、黄色的菊花和紫色的葡萄。
通过运用先进的技术,食品制造商可以利用天然食材来调色,避免使用人工着色剂。
另外,食品监管部门的角色也至关重要。
他们需要严格执行食品安全法规,监督食品制造商是否合规。
如果发现不合格产品,应追责,并及时对市场上的食品进行召回。
此外,食品监管部门应加大对行业的监测力度,随时掌握市场上的食品情况,并定期公布检测结果,以增强消费者购买食品的信心。
此外,消费者在购买食品时也需要保持警惕,在选择食品时要仔细阅读产品标签中的成分列表,并尽量选择无人工着色剂的产品。
在购买食品时,最好选择品牌知名、信誉好的产品,这样可以增加食品安全的保障。
除了监管部门和消费者的参与外,食品企业也应当积极履行社会责任。
他们应该投入更多的资源进行研发,探索新的食物着色技术和替代品,以减少对人工着色剂的依赖。
同时,企业也应积极参与食品安全宣传活动,增强公众对食品安全的意识。
在检测和控制食品中人工着色剂的过程中,各方的合作是至关重要的。
只有监管部门、食品企业和消费者齐心协力,才能够确保食品的品质和安全。
高效液相色谱法同时测定调味料中的8种合成着色剂
![高效液相色谱法同时测定调味料中的8种合成着色剂](https://img.taocdn.com/s3/m/4527e974a26925c52cc5bfa4.png)
9 .%~1 1 5 0 0 %。对 样 品 进 行 6次 重 复 测 定 , 面积 测 定 结 果 的相 对 标 准 偏 差 为 08 %- .1 =) 峰 . 4 35 %(= 。 6
关键词
调味料 ; 合成着 色卉 ; 】 高效液相 色谱 法
文献标识码 : A 文章编号 : 0 8-1 52 1)4 0 4 - 3 1 0- 4 (0 20 - 0 7 0 6
o y t ei o o r o d m e t T e s mp e wa x r c e t eh n l t rs l to f 8 s n h t c l u si c n i n . h a l s e ta t d wi m t a o c n h wa e o u i n.s p r t d o a n i e a ae n Dimo sl —
第2卷, 期 1 第4
21 0 2年 7月
化学 分析 计量
C MI ALA HE C NAL I D T RA YSS AN ME E GE
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Li ui hr q dC om a o r phy tg a
食品中合成着色剂的测定
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食品安全国家标准食品中合成着色剂的测定1范围本标准规定了饮料㊁配制酒㊁硬糖㊁蜜饯㊁淀粉软糖㊁巧克力豆及着色糖衣制品中合成着色剂(不含铝色锭)的测定方法㊂本标准适用于饮料㊁配制酒㊁硬糖㊁蜜饯㊁淀粉软糖㊁巧克力豆及着色糖衣制品中合成着色剂(不含铝色锭)的测定㊂2原理食品中人工合成着色剂用聚酰胺吸附法或液-液分配法提取,制成水溶液,注入高效液相色谱仪,经反相色谱分离,根据保留时间定性和与峰面积比较进行定量㊂3试剂和材料除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯,水为G B/T6682规定的一级水㊂3.1试剂3.1.1甲醇(C H3O H):色谱纯㊂3.1.2正己烷(C6H14)㊂3.1.3盐酸(H C l)㊂3.1.4冰醋酸(C H3C O OH)㊂3.1.5甲酸(H C O O H)㊂3.1.6乙酸铵(C H3C O O N H4)㊂3.1.7柠檬酸(C6H8O7㊃H2O)㊂3.1.8硫酸钠(N a2S O4)㊂3.1.9正丁醇(C4H10O)㊂3.1.10三正辛胺(C24H51N)㊂3.1.11无水乙醇(C H3C H2O H)㊂3.1.12氨水(N H3㊃H2O):含量20%~25%㊂3.1.13聚酰胺粉(尼龙6):过200μm(目)筛㊂3.2试剂配制3.2.1乙酸铵溶液(0.02m o l/L):称取1.54g乙酸铵,加水至1000m L,溶解,经0.45μm微孔滤膜过滤㊂3.2.2氨水溶液:量取氨水2m L,加水至100m L,混匀㊂3.2.3甲醇-甲酸溶液(6+4,体积比):量取甲醇60m L,甲酸40m L,混匀㊂3.2.4柠檬酸溶液:称取20g柠檬酸,加水至100m L,溶解混匀㊂3.2.5无水乙醇-氨水-水溶液(7+2+1,体积比):量取无水乙醇70m L㊁氨水溶液(3.2.2)20m L㊁水10m L,混匀㊂3.2.6三正辛胺-正丁醇溶液(5%):量取三正辛胺5m L,加正丁醇至100m L,混匀㊂3.2.7饱和硫酸钠溶液㊂3.2.8p H6的水:水加柠檬酸溶液调p H到6㊂3.2.9p H4的水:水加柠檬酸溶液调p H到4㊂3.3标准品3.3.1柠檬黄(C A S:1934-21-0)㊂3.3.2新红(C A S:220658-76-4)㊂3.3.3苋菜红(C A S:915-67-3)㊂3.3.4胭脂红(C A S:2611-82-7)㊂3.3.5日落黄(C A S:2783-94-0)㊂3.3.6亮蓝(C A S:3844-45-9)㊂3.3.7赤藓红(C A S:16423-68-0)㊂3.4标准溶液配制3.4.1合成着色剂标准贮备液(1m g/m L):准确称取按其纯度折算为100%质量的柠檬黄㊁日落黄㊁苋菜红㊁胭脂红㊁新红㊁赤藓红㊁亮蓝各0.1g(精确至0.0001g),置100m L容量瓶中,加p H6的水到刻度㊂配成水溶液(1.00m g/m L)㊂3.4.2合成着色剂标准使用液(50μg/m L):临用时将标准贮备液加水稀释20倍,经0.45μm微孔滤膜过滤㊂配成每毫升相当50.0μg的合成着色剂㊂4仪器和设备4.1高效液相色谱仪,带二极管阵列或紫外检测器㊂4.2天平:感量为0.001g和0.0001g㊂4.3恒温水浴锅㊂4.4 G3垂融漏斗㊂5分析步骤5.1试样制备5.1.1果汁饮料及果汁㊁果味碳酸饮料等:称取20g~40g(精确至0.001g),放入100m L烧杯中㊂含二氧化碳样品加热或超声驱除二氧化碳㊂5.1.2配制酒类:称取20g~40g(精确至0.001g),放入100m L烧杯中,加小碎瓷片数片,加热驱除乙醇㊂5.1.3硬糖㊁蜜饯类㊁淀粉软糖等:称取5g~10g(精确至0.001g)粉碎样品,放入100m L小烧杯中,加水30m L,温热溶解,若样品溶液p H较高,用柠檬酸溶液调p H到6左右㊂5.1.4巧克力豆及着色糖衣制品:称取5g~10g(精确至0.001g),放入100m L小烧杯中,用水反复洗涤色素,到巧克力豆无色素为止,合并色素漂洗液为样品溶液㊂5.2色素提取5.2.1聚酰胺吸附法:样品溶液加柠檬酸溶液调p H到6,加热至60ħ,将1g聚酰胺粉加少许水调成粥状,倒入样品溶液中,搅拌片刻,以G3垂融漏斗抽滤,用60ħp H为4的水洗涤3次~5次,然后用甲醇-甲酸混合溶液洗涤3次~5次(含赤藓红的样品用5.2.2法处理),再用水洗至中性,用乙醇-氨水-水混合溶液解吸3次~5次,直至色素完全解吸,收集解吸液,加乙酸中和,蒸发至近干,加水溶解,定容至5m L㊂经0.45μm微孔滤膜过滤,进高效液相色谱仪分析㊂5.2.2液-液分配法(适用于含赤藓红的样品):将制备好的样品溶液放入分液漏斗中,加2m L盐酸㊁三正辛胺-正丁醇溶液(5%)10m L~20m L,振摇提取,分取有机相,重复提取,直至有机相无色,合并有机相,用饱和硫酸钠溶液洗2次,每次10m L,分取有机相,放蒸发皿中,水浴加热浓缩至10m L,转移至分液漏斗中,加10m L正己烷,混匀,加氨水溶液提取2次~3次,每次5m L,合并氨水溶液层(含水溶性酸性色素),用正己烷洗2次,氨水层加乙酸调成中性,水浴加热蒸发至近干,加水定容至5m L㊂经0.45μm微孔滤膜过滤,进高效液相色谱仪分析㊂5.3仪器参考条件5.3.1色谱柱:C18柱,4.6mmˑ250mm,5μm㊂5.3.2进样量:10μL㊂5.3.3柱温:35ħ㊂5.3.4二极管阵列检测器波长范围:400n m~800n m,或紫外检测器检测波长:254n m㊂5.3.5梯度洗脱表见表1㊂表1梯度洗脱表时间m i n流速m L/m i n0.02m o l/L乙酸铵溶液%甲醇%01.095531.0653571.00100101.0010010.11.0955211.09555.4测定将样品提取液和合成着色剂标准使用液分别注入高效液相色谱仪,根据保留时间定性,外标峰面积法定量㊂6分析结果的表述试样中着色剂含量按式(1)计算:X=cˑVˑ1000mˑ1000ˑ1000(1)式中:X 试样中着色剂的含量,单位为克每千克(g/k g);c 进样液中着色剂的浓度,单位为微克每毫升(μg/m L);V 试样稀释总体积,单位为毫升(m L);m 试样质量,单位为克(g);1000 换算系数㊂计算结果以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示,结果保留两位有效数字㊂7精密度在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%㊂8其他方法检出限:柠檬黄㊁新红㊁苋菜红㊁胭脂红㊁日落黄均为0.5m g/k g,亮蓝㊁赤藓红均为0.2m g/k g (检测波长254n m时亮蓝检出限为1.0m g/k g,赤藓红检出限为0.5m g/k g)㊂。
食品着色剂含量的测定
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第五,紫外检测器,254nm 波长。
100mL,混匀。
三、食品着色剂含量的测定方法
4.食品着色剂含量的测定方法。
6.氨水—乙酸铵溶液(0.02mol/L 量取
1.样品处理方法。
取相同体积样液和合成着色剂标准
氨水 0.5mL),加乙酸铵溶液(0.02mol/L 至
第一,橘子汁、果昧水、果子露汽水 使用液,分别注入高效液相色谱仪,保留时
第二,流动相。甲醇—乙酸铁溶液
2.甲醇:经 0.5μm 滤膜过滤。
溶液加水稀释 20 倍,经 0.45μm 滤膜过 (pH - 4,0.02mol/L)。
3.聚酰胺粉(尼龙 6):过 200 目筛。 滤,配成每毫升相当于 50.0μg 的合成着
第三,梯度洗脱:甲醇:20% - 35%,
4.乙酸铵 溶液(0.02mol/L):称 取 1.54g 色剂。
难满足日益发展的食品工业的需要;人工 匀。
第三,硬糖、蜜饯类、淀粉软糖等。称
合成的色素,主要来源于煤焦油及其副产
9.无水乙醇—氨水—水(7+2+1)溶液: 5.00g - 10.00g 粉碎样品,放入 100mL 小烧
品,资源十分丰富、稳定性较好、价格可接 量取无水乙醇 70mL、氨水 20mL、水 10mL, 杯中,加水 30mL,温热溶解,如果样品溶液
1000mL),混匀。
等,称取 20.0g~40.0g,放入 100mL 烧杯中, 间定性。
窑窑
(作者单位:勃利县市场监督检验检测中心)
受、使用时方便、应用较为广泛。而人工合 混匀。
pH 较高,用柠檬酸溶液调 pH 到 6 左右。
成色素有一定的毒性,具有较大的安全隐
10.三正辛胺正丁醇溶液(5%)。量取三
食品中人工合成着色剂的快速检测
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引言:
人工 合成着色剂 就是我 们通常所 说的人 工合成色 素 ,它 们的合成 原料往往 以苯、 甲 苯 、萘等化工 材料为主 。其主要优 点是价格 低廉 、着色 能力强、成分 比较稳定 。但是 , 这 些人工合成 色素往往 带有一定 的毒性 ,因 此 使Байду номын сангаас快速检 测方法 来检测人工 合成着色剂 的含量对 保证人 民生命健康 、饮 食安全 有着 很重要的作用。
美 国戴安公司生产 的 U一 3 0 0 0系列,超声波发 生 器 选 用 昆 山 超 声 仪 器 公 司 生 产 的 KQ. 5 0 0 GVDV; 甲 醇选 用 美 国 如 意 化 工 公 司 生产的色谱 纯 ,乙酸锌 溶液 由重 庆 申渝化 学 试剂厂生产 的乙酸锌 ( 分析纯 )2 1 . 9 g + 冰乙酸 3 ml 加水稀释至 1 0 0 ml 制得 , 亚铁氰化钾溶液 由武汉市 江北试剂 厂生产 的亚铁氰化钾 ( 分 析纯 )1 0 . 6 g加水稀释至 1 0 0 ml ;溶剂 乙酸铵 溶液 由 l _ 5 4 g乙酸铵+ 1 0 0 0 ml 水溶解 , 再使用 0 . 4 5 u m滤膜 过滤 制得, 溶剂色谱纯 甲醇 由美 国如意化工 公司生产 ;合成着色剂 柠檬黄 、 日落黄 、亮 蓝、胭脂 红等的标准储 备液为 国 家标物 中心提供 的 0 . 5 mg / mg标准溶液 ,分别 配成每毫升 0 . 5 u 1 u g 、2 g 、5 g 、1 0 g浓度的标准使用液 。 2 .检测过程分析 在对 人工合 成着 色剂做 光谱扫描 时 ,我 们发 现所测 的人 工合成着色 剂不仅 在紫外 区 域存在吸 收现 象 ,而 且在可见光 区域也存 在 吸收 ,通 常紫外 区域 因为存在其 他物质 1 二 扰 易导致 误判 ,可 见光区域着 色荆吸 收受其他 杂质干扰 很小 ,因此检测波 长选择可 见光区 域 的吸收波长 ,根据人工 合成着色 剂的吸收 光谱 图分别选 择柠檬黄检测 波长为 4 2 8 n m、 苋菜 红为 5 2 0 n m、胭 脂红 5 1 0 n m、 日落黄 4 8 0 n m、诱惑红 5 1 l n m、亮蓝 6 2 8 n m。利 用二 极管阵列 检测器对样 品峰进行判 断定性 ,只 有保 留 时间与 标准 峰 差异 ≤ ±5 %、波 长 > 2 2 0 n m、光 谱图与标 准品差异 ≤±5 %时,方 可确 定为人工合 成着色剂 。如不能确 定 ,可 加标准物进行实验辅助判断 。 我 们对不 同比例流动 相对 目标化 合物影 响进 行 了对 比 ,发 现 以 下几 种 情 况 效 果最 好 : ① <1 0 a r i n , 乙酸 铵 溶 液 : 甲醇 : 8 : 2 ;② 1 0 1 3 . 5 mi n, 乙 酸 铵 溶 液 : 甲 醇 = 2 : 8; ③ 1 3 . 5 2 0 ai r n , 乙酸 铵 溶 液 : 甲醇 = 8 : 2 。 根 据 己 总结 的人 工合成着 色剂浓度 范围 ,我们 配置 了标准 溶液系 列,通过液相 色谱测定 绘制 出 浓度 与峰面积 的标 准 曲线 ,通过对标 准 曲线 的分析 , 人工合成着色剂 的线性关系 ≥0 . 9 9 9 ,
食品中着色剂的测定
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食品中着色剂的测定一、目的与要求:1、明确测定各类色素的原理与方法。
2、通过此实验掌握纸层析定性法与提纯色素的定量法。
二、原理:聚酰胺是具有二极性的化合物,水溶性酸性染料在酸性条件下被聚酰胺吸附,而在碱性条件下解吸附,再用纸色谱法或薄层色谱法进行分离后与标准比较定性、定量。
三、试剂:1、聚酰胺粉(尼龙6)2、硫酸1:1 03、甲醇—甲酸溶液:6:44、甲醇5、20%柠檬酸溶液6、10%钨酸钠溶液7、石油醚:沸程60-90℃8、海砂:先用l:10盐酸煮沸15min,用水洗中性,再用5%氢氧化钠溶液煮沸15min,再于105℃干燥,贮于具玻璃塞的瓶中,备用。
9、乙醇-氨溶液:取1毫升氨水,加70%乙醇至100毫升。
10、50%乙醇溶液11、硅胶G。
12、PH6的水:用20%柠檬酸调节至PH 6。
13、盐酸: 1:1014、5%氢氧钠溶液15、碎瓷片:处理方法同海砂16、展开剂a、正丁醇-无水乙醇-1%氨水(6:2:3):供纸色谱用。
b、正丁醇-吡啶-1%氨水(6:3:4):供纸色谱用。
c、甲乙酮-丙酮-水(7:3:3):供纸色谱用。
d、甲醇-乙二胺-氨水(10:3:2):供薄层色谱用。
e、甲醇-氨水-乙醇(5:1:10):供薄层色谱用。
f、2.5%柠檬酸钠-氨水-乙醇(8:1:2)供薄层色谱用。
17、色素标准溶液{以下商品作为标准以100%计。
胭脂红:纯度60%;苋菜红:纯度60%;柠檬黄:纯度60%;靛蓝:纯度40%;日落黄:纯度60%,亮蓝;纯度60%。
精密称取上述色素各0.100克,用PH6的水溶解,移入100毫升容量瓶中并稀释至刻度。
此溶液每毫升相当于1毫克商品色素。
靛蓝溶液需在暗处保存。
18、色素标准使用液:用时吸取色素标准溶液各5.0毫升,分别置于50毫升容量瓶中,加PH6的水稀释至刻度。
此溶液每毫升相当于0.1毫克商品色素。
四、仪器:1、分光光度计2、微量注射器或色素吸管3、展开槽,25 X 6 x 4cm4、层析缸5、滤纸、中速滤纸,纸色谱用6、薄层板:5 X 20em7、电吹风机8、水泵五、操作方法:1、样品处理A、果味水、果子露、汽水:吸取50.0毫升样品于100毫升烧杯中,汽水需加热驱除二氧化碳。
食品中合成着色剂测定色素提取
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3.结果分析
保留时间(定性):根据样品中各物质被 洗脱至检测器的时间差异来进行定性分析;
峰面积(定量):根据样品峰面积与标准 品峰面积的比较来进行定量分析。
二、试剂与器材
试剂
配方
作用
聚酰胺粉
吸附柠檬酸溶液来自20g柠檬酸,100mL水溶解
调PH
PH 4的水(70℃) 水+柠檬酸溶液,调至PH=4, 洗涤 加热
器材: 烧杯、玻棒、吸管、移液管、G3漏斗、抽滤瓶*2、 针筒、温度计、5mL玻璃离心管 电子天平、水浴锅
三、实验步骤
1. 取样、脱气 称取饮料20g,倒入50mL烧杯,碳酸饮料用电炉加热除去
二氧化碳。(已脱气)。
2. 色素吸附 称取聚酰胺3g,用少许PH4的水(70℃)调成糊状,加入待
测样品,搅拌5min。
食品中合成着色剂的测定
——色素提取
2012.4.18
课程目的:
1. 掌握食品中合成着色剂的测定原理; 2. 了解高效液相色谱的工作原理及操作方法。
着色剂:通过使食品着色后改善其感官性状,增进食欲的 一类物质。
天然着色剂:辣椒红、甜菜红、红曲米、胭脂虫红、高粱 红、叶绿素铜钠、姜黄、栀子黄、胡萝卜素、藻蓝素、可 可色素、焦糖色素等等。
理化测定一般步骤:除杂质、收集目标物、 调整浓度、上机
2. 高效液相色谱法
高效液相色谱法(HPLC):是色谱法的 一个重要分支,以液体为流动相,采用高压 输液系统,将具有不同极性的单一溶剂或不 同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装 有固定相的色谱柱,在柱内各成分被分离后, 进入检测器进行检测,从而实现对试样的分 析。
甲醇-甲酸溶液
60mL甲醇+40mL甲酸
食品中合成着色剂的测定方法
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食品中合成着色剂的测定方法食品中合成着色剂的测定方法食品中合成着色剂主要是以人工方法进行化学合成的有机色素类,按其化学结构不同可分为偶氮类色素和非偶氮类色素,偶氮类色素按溶解性不同又可分为油溶性和水溶性两类。
合成类色素中还包括色淀。
食品中合成着色剂的种类很多,国际上允许使用的有30余种,我国允许使用的主要有苋菜红、胭脂红、赤藓红、新红、玫瑰红、柠檬黄、日落黄、亮蓝、靛蓝、牢固绿等。
6.1高效液相色谱法1)原理食品中的合成着色剂经聚酰胺吸附法或液一液分配法提取后,制成水溶液,注入高效液相色谱仪,经反相色谱分离,根据保留时间定性和与峰面积比较进行定量。
利用高效液相色谱法测定食品中合成着色剂的最小检出量为:新红5ng、柠檬黄4ng、苋菜红6ng、胭脂红8ng、日落黄7ng、赤藓红18ng、亮蓝26ng。
当进样量为0.025g样品时,最低检出浓度分别为0.2、0.16、0.24、0.32、0.28、0.72、1.04mg/kg。
2)仪器和试剂(1)仪器高效液相色谱仪,带紫外检测器。
(2)试剂正己烷。
分析纯。
盐酸。
分析纯。
乙酸。
甲醇:经滤膜(0.45μm)过滤。
聚酰胺粉(尼龙6):过200目筛。
乙酸铵溶液(0.02mol/L):称取1.54g乙酸铵,加水至1 000mL,溶解,经滤膜(0.45μm)过滤。
氨水:量取氨水2mL,加水至100mL,混匀。
甲醇一甲酸(6+4)溶液:量取甲醇60mL,甲酸40mL,混匀。
柠檬酸溶液:称取20g柠檬酸(C6H8O7?H2O),加水至100mL,溶解混匀。
无水乙醇一氨水一水(7+2+1)溶液:量取无水乙醇70mL、氨水20mL、水10mL,混匀。
⑴三正辛胺正丁醇溶液(5%):量取三正辛胺5mL,加正丁醇至100mL,混匀。
⑵饱和硫酸钠溶液。
⑶pH6的水:水加柠檬酸溶液调pH到6。
⑷合成着色剂标准溶液:准确称取按其纯度折算为100%质量的柠檬黄、日落黄、苋菜红、胭脂红、新红、赤藓红、亮蓝、靛蓝各0.1000g,置100mL容量瓶中,加pH6的水到刻度。
食品中着色剂含量的测定
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食品中着色剂含量的测定一、实验原理:水溶性酸性合成着色剂在酸性条件下被聚酰胺吸附,而在碱性条件下被解吸附,再用纸色谱或薄层色谱法进行分离后,与标准比较定性定量,最低检出量为5ug,点样量为1g,样品最低检出含量约为50mg/kg。
二、实验原料:果冻三、仪器与试剂:聚酰胺粉(尼龙6),乙醇(50%),乙醇氨溶液,PH=6的水,柠檬酸溶液(200g/L),正丁醇—无水乙醇—氨水(1%)(6+2+3),着色剂混合标准液,烧杯,吸管等四、实验步骤:1、样品处理:称取10g已粉碎的样品,加30ml水,温热溶解,若样液PH较高,用柠檬酸溶液(200g/L)调PH到4左右。
2、吸附分离:将处理后所得的溶液加热到70℃,加入1g聚酰胺粉充分摇匀,用柠檬酸溶液(200g/L)调PH=4。
使着色剂完全被吸附,若溶液还有颜色可再加一些聚酰胺粉。
将吸附着色剂的聚酰胺粉全部转入漏斗中过滤,用PH=4的70℃的水反复洗涤,每次20ml,边洗边搅拌。
若含有天然着色剂,再用甲酸—甲醇溶液洗涤1~3次,每次20ml至溶液无色为止,再用70℃的水多次洗涤至流出液为中性,洗涤过程中必须充分搅拌。
然后用乙醇—氨溶液分3次解吸全部着色剂,收集全部解吸液于水浴上除氨。
将上述溶液置水浴上浓缩至2ml后移入10ml容量瓶中,用乙醇(50%)洗涤容器,洗液转移入容量瓶中并稀释至刻度10ml。
3、定性:取色谱用纸,在距底边2cm起始线上分别点3~10ul样品溶液,1~2ul着色剂标准液分别盛有正丁醇—无水乙醇—氨(1%)和正丁醇—吡啶—氨水(1%)展开剂的层析缸中,用上行洗展开,待溶剂前沿展至15cm处,将滤液取出,于空气中晾干与标准斑比较定性,也可取样0.5ml样液在起始线上从左至右点成条状,纸的左边点着色剂标液,依次展开,晾干后定性,靛蓝在碱性条件下易褪色,可用甲乙酮—丙酮—水作展开剂。
五、思考题:1、为什么在用聚酰胺吸附时要用柠檬酸将PH调至4?2、为什么要用70℃热水流至流出液到中性?。
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食品中八种人工着色剂的测定
作者:张璐璐耿莉张岩岩
来源:《科技与创新》2015年第16期
摘要:采用固相萃取—高效液相色谱法检测了8种人工合成着色剂。
从加标回收率结果来看,本方法符合要求。
采用高效液相色谱法同时检测8种人工合成着色剂,有利于节约检测时间和检测资源,为基层检测部门日常的合成着色剂检测提供参考条件。
关键词:高效液相色谱法;着色剂;色素;固相萃取
中图分类号:TS202.3 文献标识码:A DOI:10.15913/ki.kjycx.2015.16.095
人工合成着色剂又称人工合成色素,常以苯、甲苯等为原料,先制备色素中间体,再将一种或两种中间体进行磺化、偶合、缩合和偶氮化等化学反应而制成。
现有的检测标准有《食品中合成着色剂的测定》(GB/T 5009.35—2003),使用高效液相色谱仪检测新红、柠檬黄、苋菜红、胭脂红、日落黄、赤藓红、亮蓝。
按照《食品中诱惑红的测定》(GB/T 5009.141—2003)规定,使用纸色谱法测定食品中的诱惑红。
按照《食品中的诱惑红、酸性红、亮蓝、日落黄的含量测定高效液相色谱法》(SN/T 1743—2006)规定,使用高效液相色谱法检测诱惑红、酸性红、亮蓝、日落黄。
《水果罐头中合成着色剂的测定高效液相色谱法》(GB/T 21916—2008)规定,使用高效液相色谱检测罐头中柠檬黄、苋菜红、靛蓝、胭脂红、日落黄、诱惑红、亮蓝、赤藓红。
不同标准共涉及柠檬黄、新红、酸性红、诱惑红、靛蓝、赤藓红、日落黄、胭脂红、苋菜红、亮蓝10种人工合成色素,而且以上四种标准的检测条件各不相同,这就给检测工作带来了巨大的不便,不但浪费了我们宝贵的检测时间,还要购置大批实验设备,造成极大的浪费。
下面主要是结合以上四个标准,使用高效液相色谱和紫外检测器在一种仪器条件下同时检测10种人工合成色素。
1 实验部分
1.1 仪器与试剂
安捷伦1260高效液相色谱DZKW-4型电子恒温水浴锅;人工合成色素标准品(暂时购买到8种),包括柠檬黄、苋菜红、靛蓝、胭脂红、日落黄、诱惑红、亮蓝、赤藓红;色谱甲醇和色谱乙酸铵。
然后分析纯甲醇、乙醇、氨水、甲酸和柠檬酸。
1.2 样品溶液的配置
样品溶液的配置如下。
乙酸铵溶液(0.02 mol/L):称取1.54 g乙酸铵,加水溶解并稀释至1 000 mL。
甲醇/甲酸(6+4)溶液:量取甲醇60 mL,甲酸40 mL,混匀。
柠檬酸溶液:称取20 g柠檬酸,加水至100 mL溶解,混匀。
无水乙醇—氨水溶液—水:量取无水乙醇70 mL、氨水20 mL、水10 mL,混匀。
水(pH=6.0):水加柠檬酸溶液调节pH=6.0.
1.3 样品的提取
对于样品的提取,本文主要介绍液体样品。
饮料类样品:称取10 g样品放入100 mL烧杯中,加热含二氧化碳的样品,以除去二氧化碳。
配制酒类:称取10 g样品放入100 mL烧杯中,加热除去乙醇。
液体调味料:称取10 g样品放入100 mL烧杯中,如果pH偏高,就用柠檬酸水溶液将pH 值调至6左右。
1.4 样品净化
在样品净化方面,我们采取不同于SN/T 1743—2006这一标准的方法,使用固相萃取柱净化,这样有利于大批样品的处理和方法的自动化移植。
使用SPE小柱PWAX(150 mg/6 mL)对以上样品进行净化。
净化步骤:①准备6 mL甲醇、6 mL水(pH值为6~7);②加样10 mL,用6 mL水(pH=4)、6 mL甲醇—甲酸
(6∶4)、6 mL水(pH值为6~7)淋洗;③通入空气吹干小柱,用6 mL质量浓度为2%的氨化甲醇洗脱并接收,收集液于50 ℃氮气吹干,用1 mL 水定容,过0.45 um水系针式虑头过滤,待测。
1.5 实验条件
实验条件如下。
色谱柱:迪马砖石1代柱C185 um,4.6 mm×250 mm。
流速:1.0 mL/min。
进样量:10 uL。
波长:254 nm(不同于GB/T 21916—2008这一标准)。
梯度如表1所示。
2 结果和讨论
2.1 实验结果
通过对不同基质样品的加标实验,对上述检测方法进行验证,结果如表2所示。
2.2 讨论
本实验采用高效液相色谱法结合固相萃取法同时检测食品(液体)中的8种合成着色剂,从加标回收的结果来看,符合GB/T 27404—2008要求。
本方法主要依据现行检测标准和液相检测的发展对着色剂的测定方法进行了整合和优化,节约了检测时间,节省了检测设备,可以为基层检测部门的日常检测提供参照。
但是,也由于个人认识和实验的局限性,在以后的检测过程中请大家批评指正。
参考文献
[1]沈阳产品质量监督检验院,国家加工食品及添加剂质量监督检验中心.GB/T 21916—2008 水果罐头中合成着色剂的测定高效液相色谱法[S].北京:中国标准出版社,2008.
[2]全国认证认可标准化技术委员会.GB/T 27404—2008 实验室质量控制规范食品理化检测[S].北京:中国标准出版社,2008.
〔编辑:王霞〕
Abstract: The detection of 8 kinds of synthetic colorants by solid phase extraction and high performance liquid chromatography. From the results of the recovery rate of the standard, the method meets the requirements. Simultaneous determination of 8 kinds of synthetic colorants by high performance liquid chromatography is conducive to saving time and resources for detection and detection departments at the grass-roots level daily synthetic colorants detection provide reference conditions.
Key words: high performance liquid chromatography; colorant; pigment; solid phase extraction。