医院清洁、消毒及灭菌与环境卫生学监测

七、灭菌质量的监测
压力蒸汽灭菌器
（三）生物监测： 标准菌株：嗜热脂肪杆菌芽胞ATCC7953
干燥菌片 生物指示剂 只有生物监测才能全面考核灭菌效果，属于裁 定性监测
七、灭菌质量的监测
压力蒸汽灭菌器
1、监测方法： 将标准生物测试包置于灭菌器排气口的上方或生 产厂家建议的灭菌器内最难灭菌的部位。经一个 灭菌周期后，生物指示物经56℃±2℃培养7d，观 察培养结果。
监测注意事项
1、采样时应严格执行无菌技术操作规程，避免污 染，保证采样的真实性和结果的准确性；谁采样， 谁负责。
2、采取的样本要有代表性及足够的样本数量。 3、被采样本面积＜100cm2取全部表面，被采样本表
面积≥100cm2取100cm2。 4、若消毒因子为化学消毒剂，采样液中应加入相
应的中和剂。
外科手消毒监测采样
二、手卫生效果的监测方法
（三）结果判断： 《医务人员手卫生规范》4.4——手消毒效果应 达到如下相应要求：
卫生手清毒，监测的细菌菌落总数应≤10cfu/㎝2 外科手消毒，监测的细菌菌落总数应≤5cfu/㎝2
三、物品表面消毒效果监测
（一）采样时间： 在消毒处理后进行采样。
（二）采样面积： 被采面积＜100cｍ2取全部表面； 采样面积≥100cｍ2，取100cｍ2
生物指示菌 生物监测周期
压力蒸汽灭菌 干热灭菌
嗜热脂肪杆菌芽孢 ACTT7953）
枯草杆菌黑色变种芽孢 （ACTT9372）
每周一次 每周一次
环氧乙烷
枯草杆菌黑色变种芽孢 每灭菌批次 （ACTT9372）
过氧化氢等离子体 嗜热脂肪杆菌芽孢 （ACTT7953）
每天至少一次
七、灭菌质量的监测
注意：
1、灭菌器新安装、移位、大修后应进行物理、化学 监测，通过后生物监测空载连续三次，合格后方可 使用。 2、监测所用化学和生物指示物必须经国家计生委批 准，并在有效期内使用。 3、采用新的包装材料和方法进行灭菌时应进行生物 监测。 4、生物监测不合格时，应尽快召回上次生物监测合 格以来所有的尚未使用的灭菌物品，重新处理，并 分析不合格原因，改进后，生物监测连续三次合格 方可使用
（四）结果判断： 透析用水、透析液：细菌总数≤100cfu/ml，并不得
检出致病性微生物。 （五）采样周期：每月一次 （六）内毒素检测：每3个月检测一次，内毒素含量 ≤0.25EU/ml，干预限度为0.125EU/ml
七、灭菌质量的监测
压力蒸汽灭菌器
（一）物理监测法： 每锅进行。每次灭菌应连 续监测并记录灭菌时的温度、压力和时间等灭菌 参数。
七、灭菌质量的监测
压力蒸汽灭菌器 2、采用快速压力蒸汽灭菌程序灭菌时，应直 接将一支生物指示物，置于空载的灭菌器内， 经一个灭菌周期后取出，规定条件下培养，观 察结果。 3、监测周期：生物监测应每周监测一次。
七、灭菌质量的监测
（四）结果判断
阳性——培养液颜色由紫变黄，说明有菌生长， 灭菌不合格 阴性——பைடு நூலகம்养液不变色，仍为紫色，说明灭菌合 格，但阳性对照必须有菌生长
硫代硫酸钠（0.1%) 甘氨酸（1%）
醇类消毒剂
硫代硫酸钠（0.1%)
（
五、内镜消毒灭菌效果监测
消毒内镜包括胃镜、肠镜、耳镜、鼻镜、 喉镜、十二指肠镜、纤支镜、纤维喉镜、 食道超声 灭菌内镜包括胆道镜
五、内镜消毒灭菌效果监测
（一）采样时间：在消毒灭菌后，使用前进行。 （二）采样方法：监测采样部位为内镜的内腔面。 用无菌注射器抽取50ml含相应中和剂的缓冲液， 从待检内镜活检口注入，用50ml无菌收集容器从 活检出口收集，及时送检。
三、物品表面消毒效果监测
（1）采样方法：在25cm2规格板内横竖往返均匀涂 抹各5次，连续采4个规格板面积
注：洁净手术部、其他洁净场所，非洁净手术 部（室）、非洁净骨髓移植病房、产房、导管 室、新生儿室、器官移植病房、烧伤病房、重 症监护病房、血液病病区等；物体表面细菌菌 落总数≤5 cfu/cm2。
注：非洁净手术部（室）、产房、介入导管室、重 症监护病房（RICU、NICU、EICU）、消毒供应中心、 血液病病区等。
一、空气消毒效果监测
洁净手术室静态空气净化效果的监测
1、采样时间：洁净手术间清洁并擦拭消毒后， 使净化空调系统达到自净时间并处于开启状态， 然后进行测试，室内应无工作人员。 2、监测人员要求：穿洁净衣服，戴帽子、口罩， 手卫生。动作轻缓，避免产生二次污染。
灭菌剂每月监测一次。 化学监测：如含氯消毒剂、过氧乙酸等应每日监测。 用于内镜消毒或灭菌的2%碱性戊二醛应每日或使用 前进行监测,并有记录。
四、使用中消毒液染菌量测定
（一）采样时间： 采取更换前使用中的消毒剂与灭菌剂（无菌
器械保存液）
（二）采样量及方法： 在无菌条件下，用无菌吸管吸取1.0ml被检样 液，加入9.0ml含相应中和剂的采样管内混匀
（二）化学监测法： 每包进行。应进行包外、 包内化学指示物监测。
化学指示物放在包裹的设备中央, 而不是在上面
硬质容器内放 两个化学指示 物放于对角
七、灭菌质量的监测
压力蒸汽灭菌器
（三）生物监测： 每周进行 1、采用嗜热脂肪杆菌芽胞对灭菌器的灭菌效 果进行生物监测，生物监测包放在排气口的 上方，并设阳性和阴性对照。
一、空气消毒效果监测
非洁净区域空气消毒效果监测 （一）采样时间：消毒处理后、进行医疗活动前 （二）采样方法：
平板暴露法和微生物采样器法。
一、空气消毒效果监测
1、平板暴露法：是利用微生物在空气中的自然沉 降原理，也是最简便，最常用的一种方法 布点方法 （1）室内面积≤30m2，设内、中、外对角线3个 点，即中心一点，内、外点布点部位距墙壁1m处。
在反渗水输水管路的末端采样。
六、透析液的监测
（一)采样方法：
透析液：透析用水与A、B 两种血液透析浓缩液混合 后进入人体透析之前的液 体。 在进入透析器前采样。 注意：疑有透析液污染或严 重感染病例时，应增加采 样点，如原水口、软化水 出口、透析液配液口、反 渗水出口、贮水罐出口等。
六、透析液的监测
四、使用中消毒液染菌量测定
（三）结果判断： 使用中消毒液染菌量≤100cfu/ml,不得检出致病菌； 无菌物品保存液应无菌生长。 注意：采样时应严格遵守无菌技术操作规程，正确
选用中和剂，采样后及时送检。
常用消毒剂的中和剂
消毒剂
中和剂
含氯（碘）消毒剂（万福 金安、安尔碘、碘伏)
醛类溶液（2%碱性戊二醛、 领苯二甲醛）
要轻。先布皿，后开盖。 3.同一房间空气物表采样，应先采空气，
后采物表，最好由同一人操作。
二、手卫生效果的监测方法
（一）采样时间：在接触患者、进行诊疗活动前采样。 （二）采样方法：被检者五指并拢，用浸有含相应中
和剂的无菌洗脱水液浸湿的棉拭子在双手指曲面从 指跟到指端往返涂擦2次，一只手涂擦面积约30cm2， 涂擦过程中同时转动棉拭子；将棉拭子接触操作者 的部分剪去，投入10ml含相应中和剂（0.1%硫代硫 酸钠）的无菌洗脱液试管内，及时送检
医院清洁、消毒及灭菌 与环境卫生学监测
各类环境空气、物体表面
菌落总数应符合表1要求。 Ⅰ类环境为采用空气洁净技术的诊疗场所，分洁净手术
部和其他洁净场所(ICU、NCU)。 Ⅱ类环境为非洁净手术部（室）；产房；导管室；血液
病病区；烧伤病区等保护性隔离病区；重症监护病区（ RICU、EICU、NICU）；新生儿室等。 Ⅲ类环境为母婴同室；消毒供应中心的检查包装灭菌区 和无菌物品存放区（压力差，按照Ⅱ类环境）；血液透 析中心（室）；其他普通住院病区等。 Ⅳ类环境为普通门（急）诊及其检查、治疗室；感染性 疾病科门诊和病区。
一、空气消毒效果监测
（2）室内面积 >30m2，设4角及中央5点，4角布点部 位距离墙壁1m。
一、空气消毒效果监测
（3）采样方法：将血平皿或普通营养琼脂平皿 （直径9cm)放在室内各采样点处，采样高度为距 离地面80—150cm，采样时将平皿盖打开，扣放 于平皿旁，暴露规定时间（Ⅱ类环境暴露15min， Ⅲ类环境暴露5min），盖好立即送检。
一、空气消毒效果监测
洁净手术室静态空气净化效果的监测
3、布点顺序：
放置培养皿：总平面中最里面的房间
依次
向外布置 最后人员撤出
每个房间从房间最里面的点开始 最后布置门
附近的点 然后人员撤出
收取培养皿：从最外边的房间开始，每间房间从
门附近的培养皿开始，最先布置的平皿最后收。
一、空气消毒效果监测
洁净手术室静态空气净化效果的监测 4、采样方法：将平皿（直径 9cm)放在室内 各采样点处，采样点可布置在地面上或不高 于地面0.8m的任意高度上；在手术区检测时 应无手术台，当手术台已固定时，检测高度 应在台面之上0.25m；采样时将平皿盖打开， 扣放于平皿旁，暴露30min,盖好立即送检。
五、内镜消毒灭菌效果监测
（三）结果判断： 消毒内镜：细菌总数＜20cfu/件，不能检出致病 菌； 灭菌内镜：无菌检测合格。 （四）采样周期：
消毒内镜每季度一次；灭菌内镜每月一次。
若采样结果超标时，应及时查找原因，并复检，直至合格。
六、透析液的监测
（一)采样方法： 透析用水：自来水经粗滤、砂过 滤器、活性碳过滤器、水软化 器（树脂置换）、反渗透装置、 储水罐、出水加压泵等步骤处 理后出口的液体。
（4）检测方法：将采样后平皿置37℃温箱培养48h, 计数并鉴定。
一、空气消毒效果监测
注意事项：采样前应关毕门窗和空调， 无人走动情况下，静止10min再进行采 样。
儿科病房、母婴同室、妇产科检查室、人流室、治疗室、注 射室、换药室、输血科、血液透析中心（室）、急诊室、口 腔科、化验室、各类普通病房、感染性疾病科门诊及其病房 等；
21个监测用培养皿加1个对照共22个培养皿
11个监测用培养皿加1个对照共12个培养皿
7个监测用培养皿加1个对照共8个培养皿
5个监测用培养皿加1个对照共6个培养皿
郑州大学第五附属医院 洁净手术部空气检验报告单
一、空气消毒效果监测
空气采样时的注意事项 1.空气消毒前将放置平皿的采样台准备好。 2.行走路线：尽可能少在室内走动，动作
监测注意事项
5、采样时，尽量用大小一致的无菌棉签，并将棉签 通过采样管壁挤压，去除多余的采样液，使之处于 湿润状态，而不是浸泡状态，然后按30°角度有序、 用力均匀地涂抹采样品，禁用干棉签采样。
6、采样后应及时送检。 7、外科手消毒与卫生手消毒被检测人员要分开。
环境类别 Ⅰ类环境 Ⅱ类环境
空气平均菌落数a
CFU/皿
洁净手术部
符合GB 50333要求
其他洁净场所 ≤4.0（30min）b
≤4.0（15min）
CFU/㎡
物体表面平均菌 落数CFU/c㎡
≤150 ≤5.0
－
≤5.0
Ⅲ类环境
≤4.0（5min）
－
≤10.0
Ⅳ类环境
≤4.0（5min）
－
≤10.0
七、灭菌质量的监测
过氧化氢等离子体灭菌的监测 一、物理监测法：每次灭菌应连续监测并记录每 个灭菌周期的临界参数。 二、化学监测法：每包进行。应进行包外、包内 化学指示物监测。 三、生物监测： 指示菌株：嗜热脂肪杆菌芽孢（ACTT7953） 四、监测周期：应每天至少进行一次灭菌循环的 生物监测。
灭菌方式
儿科病房、母婴同室、妇产科检查室、人流室 、治疗室、注射室、换药室、输血科、消毒供 应中心、血液透析中心（室）、急诊室、化验 室、各类普通病房、感染性疾病科门诊及其病 房等；物体表面细菌菌落总数≤10 cfu/cm2。
四、使用中消毒液染菌量测定
使用中消毒剂、灭菌剂应进行生物监测和化学监测。 生物监测：消毒剂每季度一次，
三、物品表面消毒效果监测
（三）采样方法（棉拭子法、压印法两种） 1、棉拭子法： 用5×5cm的标准灭菌规格板，放在被检物体表面， 用浸有无菌0.03mol/L磷酸盐缓冲液或生理盐水采 样液的棉拭子，在规格板内横竖往返均匀涂抹5次， 并随之转动棉拭子，可连续采样1~4个规格板面积。 剪去手接触部分，将棉拭子放入装有10ml采样液 （营养肉汤）的试管内，立即送检。 门把等小型物体采用棉拭子直接在物体表面按一 定顺序涂抹采样，结果计算用cfu／件表示。