梅毒血清学检测策略及影响因素

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梅毒血清学检测策略

1.非梅毒螺旋体抗原血清学试验：•原理：梅毒螺旋体破坏宿主细胞释放以及其螺旋体细胞表面释放的类脂物质，刺激机体产生抗类脂抗体（反应素）。

在体外该抗体与心磷脂、卵磷脂和胆固醇组成的抗原反应，形成凝集反应。

•方法：VDRL (venereal disease research laboratory test) USR (unheated serum reagin test )RPR (rapid plasma reagin circle card test) TRUST (tolulized red unheated serum test)特点：非特异性反应，一、梅毒血清试验2、梅毒螺旋体抗原血清试验基于TP特异性抗原，检测TP抗体TPPA TPPA物，荧光镜下，TP呈苹果绿色荧光。

阴性弱阳性阳性图18-1 TP抗体酶联免疫法试验双抗原夹心一步法原理图18-2 TP抗体酶联免疫法试验双抗原夹心二步法原理•电化学发光(ECLIA)免疫检测原理亲和素5）TP-RT胶体金法：•临床：用于梅毒筛查•注意：高敏感性，特异较？IgG 特异性总抗体特异性IgG 抗体特异性IgM 抗体5-7周反应素抗体变化规律Comparison of three syphilis serodiagnosis algorithms and clinical 665 RPR-/TPPA+ patients were excluded from positive serodiagnosis due to a missed diagnosis rate of 24.2% (665/2,749).Man-Li Tong, et al. Analysis of three algorithms for syphilis serodiagnosis and implications for clinical management. ClinicalInfectious Diseases 2014;58:1115-1124.The traditional algorithm•One lab ：•98%EIA +/PRP+→•TP-PA+•CDC. Discordant results from reverse sequence syphilis screening--five laboratories ，United States ，2006-2010. MMWR. Morbidity and mortality weekly report ，2011，60(5): 133.特点：仅检测活动性梅毒。

三种梅毒血清学检测方法结果分析

自动化操作、仪器阅读，使结果更客观准确，试验结果也便于存档，利于实验室标准化，实验室管理和大规模标本的筛查。
因此，ＥＬＩＳＡ方法常用于大批量标本定比例的假阳性结果［３１，ｊ因此阳
ＥＬＩＳＡ和ＴＰＰＡ２种方法。此外，因检测的是非特异性抗体，结果中生物学假阳性较高，除对其他螺旋体感染时出现阳性外，假阳性还出现在急、慢性感染，妊娠，高丙种球蛋白血症，结缔组织病，溶血性贫血和其他自身免疫性疾病，也可出现在老年人和一些健康人，且多数情况下查不出原因Ⅲ ，因此ＴＲＵＳＲ法不适合作为筛查试验。但非特异性抗体会随着有效治疗而逐渐降低，故临床上也将ＴＲＵＳＲ等非特异性试验作为疗效观察的指标，这是特异性实验无法取代的。ＥＬＩＳＡ试剂主要采用双抗原夹心法，是将基因重组表达
试剂均在有效期内使用，记录患者的姓名、性别、年龄及诊断并进行统计分析。１．４统计学处理：采用Ｅｘｃｅｌ表录入并处理数据，计数资料用检验，以Ｐ＜０．０５为差异有统计学意义。
２结果
经临床诊断结合检测结果确诊为梅毒感染１９９例，阴性
ＴＲＵＳＴ再次，见表１。
１．２试剂和仪器：试剂有ＥＬＩＳＡ试剂盒（北京万泰公司）、
表１７７３６份标本中１９９例梅毒血清：学３种方法检测结果
３讨
论
因工程连接成一个多标位的嵌合抗原，大大提高了检测试剂

梅毒血清学检测模式的选择

梅毒血清学检测模式的选择梅毒是一种慢性性传播疾病。

它可以侵犯皮肤、黏膜及其他多种组织器官，可有多种多样的临床表现，病程中有时呈无症状的潜伏状态。

近年来，我国梅毒的的患病率快速上升，因此，对梅毒的诊断及正确地评价，为临床提供准确、及时的依据显得尤为重要。

本文主要对常用3种血清学试验方法以及检测模式的选择进行了专题讨论，有助于检验人员控制检验质量、临床医师提高梅毒实验诊断效能，减少漏诊和误诊。

01梅毒血清学试验概括梅毒螺旋体一旦侵入人体后，血清中可产生非特异性反应素抗体和梅毒螺旋体的特异性抗体。

因此梅毒血清学试验包括非梅毒螺旋体抗原试验和梅毒螺旋体抗原试验两大类。

01非梅毒螺旋体抗原血清试验采用一定比例的卵磷脂、牛心肌心磷脂及胆固醇混合物为抗原，与梅毒螺旋体感染机体过程中释放的类脂抗原刺激机体产生的抗类脂抗原抗体(反应素)结合发生抗原抗体反应，出现凝集颗粒为阳性反应。

02梅毒螺旋体抗原血清试验采用梅毒螺旋体全菌或特异性重组蛋白作为抗原检测患者血清中特异性抗体。

不同级别的医疗机构由于条件不同，所开展的试验方法不尽相同，但根据《梅毒诊断标准WS273—2018》，必须同时具备开展至少两种血清学试验方法的条件，本文讨论的三种梅毒血清学试验方法特点见表1。

表1 梅毒血清学试验方法比较非梅毒螺旋体抗原试验梅毒螺旋体抗原试验快速血浆反应素环状卡片试验(RPR) 梅毒螺旋体酶联免疫吸附试验(TP-ELISA)梅毒螺旋体颗粒凝集试验(TPPA )优点操作简便迅速，结果容易判定，价格低廉操作简便，客观准确，特异性和灵敏性均好试剂稳定，结果明了，敏感性好，特异性强不足反应素特异性不强，敏感性低，易出现生物学假阳性，前带现象引起的假阴性操作步骤繁琐、必须成批进行标本检测，检测梅毒IgM和IgG的混合体手工操作，对操作人员水平要求较高，不合适大批量检测临床应用梅毒血清学初筛试验和治疗疗效的观察各期梅毒的筛查，医院内大批量血液的筛查梅毒筛查的确证02梅毒血清学检测模式选择依据01检测目的流行病调查，传染病筛查、诊断、疗效观察02目标人群针对不同人群选择合适的方法，如住院患者的传染病筛查，性别门诊疑似梅毒患者，孕产妇的孕前、产前筛查、产后追踪等03实验方法充分考虑每种检测方法的敏感性和特异性，提高诊断率04检测时间避开窗口期，必要时多次复查；检测周期时长05成本效益降低检测成本，提高诊断率，避免漏诊、误诊减少纠纷表2 梅毒血清学试验方法对梅毒不同分期检测的敏感性和特异性比较临床分期非梅毒螺旋体抗原试验梅毒螺旋体抗原试验敏感性一期74%～87% 70%～100% 二期100% 100%三期34%～94% 95%～98%特异性96%～99% 94%～100%表中数据摘自《梅毒诊断标准WS273—2018》从表中我们可以看出，对于不同分期的梅毒诊断，不能仅靠单一的检测方法来完成，必须进行联合检测才能提高诊断的准确性。

梅毒螺旋体血清学试验常用方法

梅毒螺旋体血清学试验常用方法标题：深度解析梅毒螺旋体血清学试验常用方法梅毒螺旋体血清学试验是检测梅毒感染的常用方法之一，其结果对于梅毒的诊断有重要意义。

本文将深度解析梅毒螺旋体血清学试验的常用方法，包括其原理、操作流程、结果解读以及临床应用，并对梅毒螺旋体血清学试验的意义进行探讨。

1.梅毒螺旋体血清学试验的原理梅毒螺旋体血清学试验是通过检测患者血清中的抗梅毒螺旋体抗体来判断是否感染了梅毒。

常用的方法包括不同类型的血清学试验，如血浆凝集试验（RPR）、螺旋体血清凝集素试验（TPPA）和梅毒血清酶免疫吸附试验（EIA）。

这些方法可以检测患者的血清中是否含有特异性的抗梅毒螺旋体抗体，从而进行梅毒的诊断。

2.操作流程及常用方法梅毒螺旋体血清学试验的操作流程包括标本采集、标本处理、试剂配置、反应操作等步骤。

常用的方法包括RPR、TPPA和EIA。

RPR是一种快速筛查试验，可以在诊断初期进行使用，但其结果需要进一步确认。

TPPA是一种高度特异性的确认试验，可以用来确认疑似梅毒感染的患者。

EIA是一种定量检测方法，可以检测血清中特异性的抗体水平，有助于判断患者的感染程度。

3.结果解读及临床意义梅毒螺旋体血清学试验的结果需要进行准确解读。

阴性结果可以排除梅毒感染的可能，但也有假阴性的风险；阳性结果需要结合临床症状、病史及其他检测结果进行综合分析。

对于梅毒感染的患者，早期诊断和治疗至关重要，可以避免并发症的发生，同时也有助于阻断梅毒的传播。

4.个人观点和理解在进行梅毒螺旋体血清学试验时，我们需要充分理解不同方法的原理和操作流程，以确保结果的准确性。

梅毒螺旋体血清学试验的结果需要综合分析，结合临床情况进行判断，避免假阳性或假阴性结果的影响。

对于梅毒患者，及时的诊断和治疗对于控制疾病的传播和预防并发症的发生至关重要。

总结梅毒螺旋体血清学试验是诊断梅毒的重要方法之一，其结果对于患者的治疗和预后有重要意义。

通过深度解析梅毒螺旋体血清学试验的常用方法，我们可以更加全面地理解梅毒的诊断和治疗，为临床工作提供重要参考。

梅毒螺旋体血清学试验常用方法

梅毒螺旋体血清学试验常用方法梅毒螺旋体血清学试验常用方法梅毒是一种由梅毒螺旋体感染引起的性传播疾病，其在世界范围内广泛存在。

为了准确诊断梅毒，血清学检测是一种常用的方法。

本文将介绍梅毒螺旋体血清学试验的常用方法，旨在帮助读者更全面、深入地了解这一主题。

1. 微量血试验微量血试验是常用的梅毒螺旋体血清学试验之一。

它的优势在于只需要很少的血液样本，却能提供准确可靠的结果。

该试验通过检测患者血液中的抗梅毒螺旋体抗体来诊断梅毒。

这些抗体在感染后数周内开始产生，并持续存在于血液中。

微量血试验通常采用凝集试验、免疫层析试验或酶联免疫吸附试验等方法进行。

2. 血清螺旋体沉降率试验血清螺旋体沉降率试验是另一种常用的梅毒螺旋体血清学试验。

该试验可以评估患者血清中的梅毒螺旋体抗体的水平。

试验原理是将患者血清与一定量的抗原（梅毒螺旋体）混合，并在一定时间内观察螺旋体与血清中的抗体结合沉降形成的沉降率。

沉降率越高，说明血清中的抗体水平越高，暗示患者可能存在梅毒感染。

3. 链球菌溶血试验链球菌溶血试验是一种常见的反应型血清学试验，也可用于梅毒的检测。

该试验基于患者血清中的抗链球菌溶血素抗体与试剂中的链球菌溶血素结合的反应。

通过测定溶血素结合率，可以评估患者血清中的抗体水平。

一旦患者感染了梅毒螺旋体，抗链球菌溶血素抗体的水平会升高，从而反映出可能存在梅毒感染。

总结回顾：梅毒螺旋体血清学试验是诊断梅毒的常用方法。

微量血试验、血清螺旋体沉降率试验和链球菌溶血试验是其中常见的三种方法。

微量血试验通过检测患者血液中的抗梅毒螺旋体抗体来诊断梅毒；血清螺旋体沉降率试验通过观察螺旋体与血清中的抗体结合沉降形成的沉降率评估抗体水平；链球菌溶血试验则是通过测定抗链球菌溶血素抗体的结合率进行评估。

这些试验的目的都是为了准确诊断梅毒感染，帮助患者尽早接受治疗以防止疾病的进展和传播。

个人观点和理解：虽然梅毒螺旋体血清学试验在梅毒的诊断中发挥着重要的作用，但我们也需要意识到这些试验对梅毒感染的早期诊断有一定的局限性。

5种血清学方法检测梅毒螺旋体抗体的评价

5种血清学方法检测梅毒螺旋体抗体的评价摘要目的评价分析5种血清学方法检测梅毒螺旋体抗体的效果。

方法基于本次研究需求，分别采取梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验（TPPA）、化学发光法（CLIA）、甲苯胺红不加热血清试验（Trust）、酶联免疫吸附试验（ELISA）以及免疫印迹法（WB）对120例标本实施梅毒螺旋体抗体检测，对比分析5种检测法阳性率，将WB作为参照分析其他4种检测法的总符合率、特异度以及敏感度。

结果经分析，TPPA法、CLIA法、ELISA法以及Trust法和WB法阳性率对比差异无统计学意义（P>0.05）；将WB检测法当作确认试验，TPPA 法、CLIA法、ELISA法特异度、敏感度和总符合率均比较高。

结论经研究结果分析可知，TPPA法、CLIA法、ELISA法不管是敏感度，还是特异度均比较高，实际应用中可根据梅毒螺旋体抗体实际情况合理选用检测法。

关键词血清学；梅毒螺旋体抗体；检测在临床中梅毒作为常见性传播疾病之一，传染性非常高，目前在献血员以及临床患者输血之前、各种创伤性检验中梅毒血清学检验已成为常规检测中一项基本项目，基于该形势下，选用快捷、灵敏度和特异度均比较高以及操作便捷的检测法对于正确筛查与诊断梅毒也变得尤为重要[1，2]。

本次研究就5种血清学方法检测梅毒螺旋体抗体的效果进行评价。

现报告如下。

1 资料与方法1. 1 一般资料本次研究所用标本来自2012年7月～2015年5月到本院诊治患者120例，全部标本均实施梅毒螺旋体抗体检测，其中男50例，女70例，年龄32～56岁，平均年龄（45.26±4.9）岁。

1. 2 方法于空腹状态下采集3 ml静脉血，以3000 r/min进行离心，离心时间一般为10 min，经血清分离实施检测。

5种血清检测法所用仪器如下：洗板机、水浴箱、Clem Clin化学发光免疫分析仪、振荡器、Roto-2600c酶标仪以及离心器等；所用试剂有CLIA试剂、ELISA试剂、TPPA试剂、WB试剂以及Trust试剂。

102.梅毒血清学检验

梅毒的血清学试验参考范围：性病研究实验室试验（VDRL）阴性不加热血清反应素试验（USR）阴性快速血浆反应素试验（RPR）阴性荧光密螺旋体抗体吸收试验（FTA-ABS）阴性梅毒螺旋体血凝试验（TPHA）1：25以下为阴性梅毒螺旋体制动试验试验标本活动螺旋体数为对照标本的40%为阴性梅毒螺旋体抗体试验（TP-Ab）阴性临床评价：1．梅毒螺旋体也称苍白密螺旋体，是性传播疾病梅毒的病原体。

机体对梅毒螺旋体感染可产生体液和细胞免疫反应，梅毒螺旋体血清学试验是诊断梅毒的依据之一。

血清学试验主要有两个类型，一类是VDR L，USR和RPR．属非螺旋体抗原试验，是用正常牛心类脂质作为抗原，测定血清中的反应素，为筛查试验。

另一类是FTA-ABS，TPHA和TPl，属螺旋体抗原试验，是用梅毒螺旋体作为抗原，检测血清中的特异性抗体，为确证试验。

2．非螺旋体抗原试验(VDRL，USR，RPR)敏感性高，其反应素效价与病变活动性有关。

第一期梅毒病灶出现后1～2周即可测出反应素，第二期梅毒病人血清中反应素效价最高，阳性率可达99％，经药物治疗后可转阴。

先天性梅毒80％～100％阳性。

但此类试验特异性不高，常有假阳性反应，在分析结果时应注意结合病史、临床症状及特异性试验作出正确判断。

FTA-ABS的敏感性和特异性均高，在早期梅毒首先出现阳性，病人经药物治疗后反应仍不转阴，故不能用作疗效的评价，常用于梅毒的确定诊断。

TPI是一种经典的特异性较高的梅毒血清学反应，假阳性不到1％，主要用于晚期梅毒及疑难病人的诊断。

TPHA具有敏感、快速、简便等特点，但特异性不及FTA-ABS和TPI。

采取脑脊液标本进行特异性抗体检测，对中枢神经系统的梅毒具有诊断价值。

3．暗视野检查法对梅毒的诊断有重要意义。

此法系采取病灶组织渗出液、淋巴穿刺液或组织悬液制成涂片，在暗视野显微镜下直接检查梅毒螺旋体，主要适用于初期梅毒的检查，有一定局限性。

暗视野检查法一次阴性结果不能否定梅毒的存在，一般连续检查3天阴性才能予以排除。

梅毒血清学检查的方法和临床意义的简述

梅毒血清学检查的方法和临床意义的简述梅毒血清学检查是一种常见且有效的检测方法，用于诊断和监测梅毒感染。

通过检测人体对梅毒螺旋体所产生的抗体反应，可以确定是否存在梅毒感染，并评估感染的程度和治疗效果。

本文将对梅毒血清学检查的方法和临床意义进行简要介绍。

一、梅毒血清学检查的方法梅毒血清学检查主要包括结核试验（Treponemal tests）和非结核试验（Non-treponemal tests）两类。

1. 结核试验结核试验是通过测量患者体内特异性的抗体反应来确认梅毒感染。

最常用的结核试验方法包括：（1）梅毒螺旋体颗粒凝集试验（Treponema pallidum particle agglutination assay，TPPA）：该试验基于抗体和抗原的凝聚反应，通过检测血清中是否存在梅毒抗体来确定感染情况。

（2）补体结合试验（Complement fixation test，CFT）：该试验通过补体结合反应来检测患者血清中特异性抗体的存在。

阳性结果显示患者体内存在梅毒抗体，可能存在梅毒感染。

（3）荧光抗体试验（Fluorescent treponemal antibody-absorption test，FTA-ABS）：该试验通过检测患者体内的抗梅毒抗体，使用荧光标记的抗体来确认感染情况。

2. 非结核试验非结核试验主要用于初筛梅毒感染和监测治疗效果。

最常用的非结核试验方法包括：（1）梅毒血清反应素试验（Venereal Disease Research Laboratory test，VDRL）：该试验基于血清中患者对梅毒螺旋体组织破坏产生的反应素，通过测量血清的滴度来评估感染的程度。

（2）快速测定试验（Rapid Plasma Reagin test，RPR）：该试验与VDRL类似，通过观察血清与梅毒抗原接触后是否发生凝集反应来判断感染情况。

需要注意的是，结核试验（Treponemal tests）通常被认为是高度特异性的，但对于监测治疗效果并不敏感；而非结核试验（Non-treponemal tests）则具有较高的敏感性，但特异性较低。

三种梅毒血清学检验方法在梅毒检测中的应用

三种梅毒血清学检验方法在梅毒检测中的应用梅毒是一种由梅毒螺旋体细菌引起的性传播疾病，其主要途径是性接触。

梅毒的早期症状可能很轻微，甚至不易察觉，但如果不及时治疗，梅毒会逐渐发展为严重的并发症，影响患者的生活质量甚至生命健康。

及早检测和治疗梅毒至关重要。

而血清学检验方法是目前梅毒检测的主要手段之一，三种常用的梅毒血清学检验方法包括血浆螺旋体抗体试验（RPR）、螺旋体特异性抗体试验（FTA-ABS）和改良螺旋体暗视野试验（MHA-TP）。

本文将对三种梅毒血清学检验方法在梅毒检测中的应用进行介绍和分析。

一、血浆螺旋体抗体试验（RPR）血浆螺旋体抗体试验（RPR）是目前常用的梅毒血清学检验方法之一，它可以快速检测出患者体内的非特异性抗体反应。

RPR检测的原理是利用碳颗粒结合胶体金技术测定患者血清或血浆中的非特异性抗体反应，通过观察血清样品和RPR抗原之间的物质交互作用来判断患者是否感染了梅毒螺旋体。

RPR检测方法具有操作简单、敏感度高和结果快速的特点，因此在临床检测中得到了广泛的应用。

在梅毒的初期感染阶段，患者体内可能已经产生了非特异性抗体反应，因此RPR检测方法对于早期患者的检测具有较高的准确性。

RPR检测结果还可以用于监测患者的治疗效果和疾病的进展情况。

但需要注意的是，RPR检测方法可能会出现假阳性反应，因此在诊断过程中需要结合临床症状和其他检测结果来综合判断。

血浆螺旋体抗体试验（RPR）在梅毒检测中具有重要的临床应用价值。

二、螺旋体特异性抗体试验（FTA-ABS）虽然FTA-ABS检测方法比RPR检测方法更为特异和敏感，但其检测过程相对复杂，需要使用荧光染色和免疫分析等高级技术，因此成本较高。

由于FTA-ABS检测方法只能检测出患者体内的特异性抗体反应，不能用于监测治疗效果和疾病进展情况。

尽管如此，螺旋体特异性抗体试验（FTA-ABS）在梅毒检测中仍然具有重要的临床应用价值。

三、改良螺旋体暗视野试验（MHA-TP）与FTA-ABS检测方法相比，MHA-TP检测方法的操作相对简单，成本较低，因此在一些医疗资源相对匮乏的地区仍然是一种常用的检测方法。

梅毒＂血清固定＂及其应对策略

３１Ｔ．Ｐ膜多肽抗原、蛋白及基因的改变脂
ＴＰ外
近年来梅毒发病率逐年上升，世界每年新增约全１２００万新病例，而在我国其发病率在性传播疾病中
仅次于生殖道沙眼衣原体感染，第二位。梅毒患居者治疗后出现的一种血清学现象日益受到关注，即梅毒经正规驱梅治疗后，有少数患者血清ＲＲ下降Ｐ到某个滴度时不再降低（ＰＲＲ持续阳性）这种现象，
贴切合理２发病情况
道部分患者口服红霉素治疗，ＰＲＲ滴度下降到１：２
国内学者杨文林等回顾１间４３例梅毒患者０年２
资料发现患者中２年内有７４例（１．％）占７５出现血
后，续观察２年，Ｐ连ＲＲ仍未转阴：分患者未予以部
ｓｔｃ）是我们在治疗梅毒患者过程中所面临的重ｉａｅ，ｓｎ
大难题。
１基本概念
血清固定的定义目前仍未统一。一般认为，梅毒患者经正规驱梅治疗后，床症状消失，非梅使Ｔ致Ｐ持续慢性感染。
梅毒（感染后２年以内）按规定时问（６个月），＞随访
如ＲＲ仍不转阴，Ｐ晚期梅毒（染后２年以上）按感，
梅药物的使用对治疗梅毒至关重要，梅药物剂量驱要充足，程要规范。胡蔚毅等对６种抗生素治疗疗

梅毒实验室检测技术及策略的进展

中国艾滋病性病2〇21年3月第27卷第3期Chin J AIDS STD Vol.27 No.3 Mar 2021323DOI: 10.13419/ki.aids.2021.03.30•综述•梅毒实验室检测技术及策略的进展刘经纬，徐文绮，尹跃平(中国医学科学院北京协和医学院皮肤病医院/中国疾病预防控制中心性病控制中心，南京210042)摘要：梅毒螺旋体作为梅毒的病原体，可侵犯人体形成一种慢性的性传播疾病。

本病临床表现复杂，可侵犯人体全身器官，既能产生各种各样的症状和体征，又可多年无症状而呈潜伏状态。

梅毒的实验室检测方法主要有病原学检测法和血清学检测法。

针对不同人群以及疾病的不同进展，应合理选用一种或多种检测方法，提高梅毒实验室检测的准确率。

关键词：梅毒；实验室检测；检测策略中图分类号：K 759.1 文献标志码：A文章编号：1672-5662(2021)03-0323-04Progress of methods and strategies for laboratory syphilis detection LIU Jingwei, XU Wenqi, YIN Yueping.(Institute o f Dermatology, Chinese Academy o f Medical Sciences & Peking Union Medical College, National Center for STD Control, China CDC, Nanjing 210042, China)Correspondingauthor:YINYueping,Email:*****************Supported by the National Science and Technology Major Project (2018ZX10101001-004-003); the Initiative for Innovative Medicine, Chinese Academy of Medical Sciences (2016-I2M-3-021); Nanjing Incubation Program of the National Clinical Research Center (2019060001)Abstract: Treponema pallidum, as the pathogen of syphilis, can invade the human body and form a chronic sexually transmitted disease. The clinical manifestations are complex and can invade almost all organs of a body. It can not only produce various symptoms and signs, but also be latent without symptoms for many years. The laboratory detection methods mainly include pathogenic methods and serological methods. According to different groups or different progress of the disease, one or more methods should be appropriately selected to improve the accuracy of syphilis detection.Keywords: syphilis; laboratory detection; strategy梅毒是由梅毒螺旋体(7V e/K>n e m« p a//i W u m，T p)引起的一■种慢性感染性疾病，多发于低收入的国家和地区，通过性传播或者母婴传播途径感染。

2016.5梅毒检测技术

– 本法可用于大样本血清检测。
• 化学发光法的临床应用意义基本同ELISA
梅毒免疫层析快速检测方法（全血法）
梅毒免疫层析快速检测方法（血清、血浆法）
梅毒快速检测新进展
梅毒螺旋体抗原血清试验临床意义
• 作为非梅毒螺旋体抗原血清试验(如RPR等)初筛阳性标本的确证试验，排除RPR 假阳性。 • 不能区分既往感染和现症感染，应结合非梅毒螺旋体抗原血清试验结果进行诊断。 • TPPA等梅毒螺旋体抗原血清试验不能作为疗效观察的指标。
报告： ELISA 阳性 RPR 阳性及滴度
推荐 TPPA复检
报告： ELISA 阳性 TPPA 阳性 RPR 阴性
报告： ELISA 阳性 TPPA 阴性 RPR 阴性
回答
• • • • • • • 一旦感染梅毒，梅毒螺旋体特异性抗体常终身阳性？ RPR/TRUST只能用于梅毒初筛？二期梅毒时，TPPA和RPR两种血清学试验100％阳性？ TPPA（- ）/ RPR（+）结果一般可排除梅毒螺旋体感染？ TPPA是梅毒螺旋体抗原检测试验检测方法的“金标准”？病人接受梅毒第一次初筛可采用任何一种血清学检测方法？ TPPA是梅毒血清学检测确证方法,所以TPPA（+）即可诊断为梅毒？ • RPR和TRUST的方法原理相同，所以两种方法的定量试验结果相同？ • TPPA（+）/ RPR（-）可能是极早期梅毒？ • RPR试验假阳性即表明被检测标本中不存在梅毒螺旋体非特异性抗体？
定量试验结果判断血清稀释度 1:2 + 1:4 1:8 1:16 ？？结果
+
问题：定量试验原倍血清滴度是多少？
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梅毒检测技术规范（100808）

梅毒检测技术规范（100808）全国梅毒检测技术规范（试⾏讨论稿）中国疾病预防控制中⼼⼆○⼀○年⼋⽉前⾔为了加强全国梅毒检测⼯作的管理，提⾼检测质量，根据《中华⼈民共和国传染病防治法》、《中国预防与控制梅毒规划（2010-2020）》的精神，在卫⽣部及中国疾病预防控制中⼼的领导下，性病控制中⼼组织国内相关领域的专家制订了《全国梅毒检测技术规范》（下称"规范"）。

本“规范”是基于我国⽬前梅毒检测⼯作的需要以及梅毒检测技术的发展，对梅毒检测相关的样品采集、检测⽅法、检测策略、质量管理等做出具体的规范要求，经上报卫⽣部并获准由中国疾病预防控制中⼼下发，适⽤于全国各级医疗、疾病预防控制、妇幼保健、采供⾎、出⼊境检验检疫等提供梅毒检测服务的机构。

本“规范”起草单位：中国疾病预防控制中⼼性病控制中⼼本“规范”参加编写单位：中国疾病预防控制中⼼艾滋病性病预防控制中⼼、中国疾病预防控制中⼼妇幼保健中⼼、⼴东省⽪肤性病控制中⼼、江苏省疾病预防控制中⼼、天津疾病预防控制中⼼、上海市⽪肤性病医院本“规范”参加编写及审核⼈员：尹跃平、王千秋、王宝玺、邢⽂⾰、王临红、郑和平、傅更峰傅更锋、顾伟鸣、郑钟洁、龚匡隆、陈祥⽣。

本《规范》编写⼯作联系⼈：魏万慧本《规范》适⽤于全国所有的梅毒检测实验室。

本《规范》解释权属于中国疾病预防控制中⼼。

⽬录第⼀章梅毒及其病原体第⼆章样品的采集和处理第三章梅毒⾎清学检测第四章梅毒体病原学检测第五章梅毒核酸检测第六章实验室⽣物安全第七章梅毒⾎清学检测实验室质量管理第⼀章梅毒及其病原体梅毒是由梅毒苍⽩螺旋体（Treponema pallidum）引起的⼀种性传播疾病，可引起神经、⼼⾎管等多系统损害，严重影响⼈群的⾝体健康。

此外，梅毒亦可通过胎盘传给胎⼉，导致⾃发性流产、死产或先天梅毒等。

20世纪80年代，梅毒在我国重新出现，90年代末以来，全国梅毒报告病例数明显增加，呈快速流⾏的趋势，已成为我国重要的公共卫⽣问题。

梅毒检测技术规范(100808)

全国梅毒检测技术规范（试行讨论稿）中国疾病预防控制中心二○一○年八月前言为了加强全国梅毒检测工作的管理，提高检测质量，根据《中华人民共和国传染病防治法》、《中国预防与控制梅毒规划（2010-2020）》的精神，在卫生部及中国疾病预防控制中心的领导下，性病控制中心组织国内相关领域的专家制订了《全国梅毒检测技术规范》（下称"规范"）。

本“规范”是基于我国目前梅毒检测工作的需要以及梅毒检测技术的发展，对梅毒检测相关的样品采集、检测方法、检测策略、质量管理等做出具体的规范要求，经上报卫生部并获准由中国疾病预防控制中心下发，适用于全国各级医疗、疾病预防控制、妇幼保健、采供血、出入境检验检疫等提供梅毒检测服务的机构。

本“规范”起草单位：中国疾病预防控制中心性病控制中心本“规范”参加编写单位：中国疾病预防控制中心艾滋病性病预防控制中心、中国疾病预防控制中心妇幼保健中心、广东省皮肤性病控制中心、江苏省疾病预防控制中心、天津疾病预防控制中心、上海市皮肤性病医院本“规范”参加编写及审核人员：尹跃平、王千秋、王宝玺、邢文革、王临红、郑和平、傅更峰傅更锋、顾伟鸣、郑钟洁、龚匡隆、陈祥生。

本《规范》编写工作联系人：魏万慧本《规范》适用于全国所有的梅毒检测实验室。

本《规范》解释权属于中国疾病预防控制中心。

目录第一章梅毒及其病原体第二章样品的采集和处理第三章梅毒血清学检测第四章梅毒体病原学检测第五章梅毒核酸检测第六章实验室生物安全第七章梅毒血清学检测实验室质量管理第一章梅毒及其病原体梅毒是由梅毒苍白螺旋体（Treponema pallidum）引起的一种性传播疾病，可引起神经、心血管等多系统损害，严重影响人群的身体健康。

此外，梅毒亦可通过胎盘传给胎儿，导致自发性流产、死产或先天梅毒等。

20世纪80年代，梅毒在我国重新出现，90年代末以来，全国梅毒报告病例数明显增加，呈快速流行的趋势，已成为我国重要的公共卫生问题。

引起梅毒血清试验假阳性影响因素

引起梅毒血清试验假阳性影响因素用TRUST及TPPA做梅毒血清学检测。

结果 4913例TRUST试验，57例发生生物学假阳性反应，麻风发生率最高，占麻风病例的31.82%，依次为类风湿关节炎17.78%，系统性红斑狼疮（SLE）17.02%，变应性血管炎6.67%，乙型肝炎5.43%，硬皮病3.33%，皮肌炎3.13%，活动性肺结核1.82%，孕妇0.68%，正常人0.08%。

结论所有生物学假阳性反应的TRUST定量试验，滴度均≤1:8，其中91.23%的TRUST定量为1:2，而未经治疗的二期显发梅毒TRUST定量一般≥1:16。

4913例TRUST试验，发生57例生物学假阳性反应，麻风发生率最高，占麻风病例的31.82%，依次为类风湿关节炎17.78%，SLE 17.02%，变应性血管炎6.67%，乙型肝炎5.43%，硬皮病3.33%，皮肌炎3.13%，活动性肺结核1.82%，孕妇0.68%，正常人0.08%。

所有生物学假阳性反应的TRUST定量试验均≤1:8，其中91.23%的TRUST定量为1:2。

61例二期显发梅毒（未经治疗）患者的TRUST定量试验均≥1:16,其中67.2%的TRUST定量试验≥1:32。

目前国内最常用的梅毒血清学初筛试验是以心拟脂为抗原的非特异性梅毒血清学试验，简称TRUST，中文名称为苯甲胺红不加热血清反应素试验。

其所检测的抗体并非抗梅毒螺旋体抗体，而是梅毒螺旋体感染人体以后分解破坏人体组织，其分解产物释放到血液中，使人体产生抗体。

分解释放的产物即是心拟脂，所产生的抗体即是反应素。

据文献记载，除梅毒外尚有其他一些感染和免疫性疾病也可使人体组织受损释放心拟脂到血液中，使人体产生反应素，而使TRUST 出现生物学假阳性反应［1，2］。

并将生物学假阳性反应分为急性和慢性两种。

急性生物学假阳性反应见于病毒性疾病，如风疹、麻疹、水痘、传染性单核细胞增多症、病毒性肝炎；其他如疟疾、活动性肺结核、丝虫病、鼠咬热、回归热、钩端螺旋体病等，多于6个月内消失。

梅毒实验室诊断检测策略的探讨

ｂｒａｎｄｄｉｓｅａｓｅ［Ｊ￣．ＲｅｖＣｌｉｎＥｘｐＨｅｍａｔｏｌ，２００１，５（４）：３３５ — ３６８．［６］刘淑会，荣红，付秀红．ＶｗＦ和ＥＰＣＲ检测在ＡＭＩ中的Ｉ临床意义［Ｊ］．放射免疫学杂志，２０１０，２３（６）：６５８ — ６６０．［７］门剑龙，任静．ｒ卜二聚体临床应用及标准化分析进展［Ｊ］．中华检
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经验交流・
梅毒实验室诊断检测策略的探讨
徐新蓉，张剑波△，龚国富
（湖北省鄂州市中心医院检验科，湖北鄂州４３６０００）

梅毒检测方法分类、结果临床意义、临床检查优缺点、试验筛查策略及检测结果解释

梅毒检测方法分类、结果临床意义、临床检查优缺点、试验筛查策略及检测结果解释在医学上梅毒常用的检测方法主要分为两类，一类是病原学检测；另一类是血清学检测。

病原学检测法：以直接观察病原体为目的的检测，目前在临床上应用的较少，能够开展的医院也不多。

病原学检测1、暗视野显微镜检查2、镀银染色检查血清学检测血清学检测则又包括两大类：1、以非梅毒螺旋体抗原的血清试验：（1）VDRL(性病研究实验室试验)（2）USR（不加热血清反应素试验）（3）RPR(加速血浆反应素环状卡片试验)（4）TRUST(甲苯胺红不加热血清试验)目前RPR和TRUST是我国主要采取的两种非梅毒螺旋体抗原血清检测方法。

2、以梅毒螺旋体抗原的血清试验：（1）FTA-ABS（密螺旋体荧光抗体吸收）（2）TPPA/ TPHA(梅毒密螺旋体凝集试验)（3）TP-ELISA(酶联免疫吸附试验)（4）CIA（发光法）（5）GICA（胶体金免疫层析法）（6）WB（蛋白印迹试验）（7）PCR聚合酶链反应（8）梅毒螺旋体IgM抗体检测通过检查血液中的抗体来判断是否感染的检测，是在临床上广泛被采用的检验梅毒的手段，血清学检查主要有以下几点优点：1、实验过程更为方便，更利于用于普遍的筛查，部分实验可以实现自动化。

2、实验结果更为稳定，更为直观，可作为梅毒的确诊实验。

3、实验结果临床意义更丰富，不仅可以作为梅毒的确诊标准，也可以用于观察疗效，复发等。

缺点：由于使用的不是梅毒的特异性抗原，非特异性抗原（心磷脂）可以和很多疾病产生交叉的阳性反应，导致结果出现假阳性结果，大部分的假阳性滴度小于1:4。

梅毒血清学试验较容易出现生物学假阳性反应，可分为急性及慢性两类。

急性生物学假阳性反应见于很多非梅毒的感染性疾病，如：风疹、麻疹、水痘、传染性单核细胞增多症、病毒性肝炎、牛痘疹、活动性肺结核、丝虫病、回归热及钩端螺旋体病等。

随着疾病的消退，在6个月内一般都转为阴性。

慢性生物学假阳性反应见于系统性红斑狼疮、麻风、干燥综合征、系统性硬化症、慢性肝脏疾病、类风湿性关节炎、老年等。

梅毒检测及策略

胺红，稳定、颗粒均匀，生产批间差小，结果易观察
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梅毒螺旋体抗原血清试验
用活的或死的梅毒螺旋体或其成分来作抗原测定抗螺旋体抗体
敏感性和特异性均高，一般用作确证试验检测血清中抗梅毒螺旋体IgG抗体，即使患者
经过足够治疗，仍能长期存在，甚至终身不消失，血清反应仍持续存在阳性，不能用于观察疗效
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文献报道
昆明医科大学附属第一医院（2013） 326例患者和200例健康体检者 ELISA法、TPPA 法和RPR 法的灵敏度分别为95.1、
96.3和83.4，特异性分别为96.0、 98.0和88.0。结论 ELISA法是门诊、住院患者初筛梅毒的理想方法； TPPA法为目前公认最好的梅毒血清学确证试验； RPR滴度试验对评价梅毒疗效和判断是否再感染等有重要临床价值。
4．由于采用EIA法，梅毒治愈多年后仍能检测到梅毒 IgG 。因此，对确证活动性梅毒，监测疗法，发现治疗失败的病例和再感染方面使用RPR是有必要的。
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6．曾经治疗过梅毒的妇女在怀孕期间，RPR检测效价通常增长1或2倍。由此提出需要对这类孕妇进行治疗或再治疗。
7．新生儿梅毒筛查：在没有确定母亲梅毒血清检测结果前，新生儿应该留院。因为存在假阴性和假阳性，不能只做筛查检测（ RPR ）。梅毒IgG检测阳性不能确定新生儿感染梅毒，因为母体抗体可以通过胎盘被动传播，同时满足RPR和IgG检测阳性因此新生儿梅毒阳性必须。新生儿和母亲必须采用相同的检测方法，以保证两者效价结果可比性。
WHO推荐同时采用非梅毒螺旋体和梅毒螺旋体抗原血清试验用于筛查和诊断

梅毒血清学检测方法的选择策略

功能，只有２次取针和吸液步骤，不仅又省去了一次取针和吸液步骤，而且少取了１Ｏ根针，节约了实验成本。然而这两种新的加样模式又有各自的特点。加样模式 Ⅱ在第１次分配过程中就把ＨＩＶ试剂全部加完（河南省红十字血液中心复检组
式Ｉ节省了４３．５０Ｓ，比模式 Ⅱ节省了３７．３０Ｓ。另外，后两种模式均节约了１０根一次性加样针。表１３种分配模式所需时间和加样针数
一
板速度时，选这种模式可暂时缓解加样压力。模式 Ⅲ 的优点在于比第２种模式少了２个分配步骤，时间更短。而且由于一般情况下试剂分配次数越多吸液量也就越大，吸液量越大所需时
间越长，所以该模式下将需多次分配，吸液量大的试剂编到同序列，从而进一步节省了时问。
随着实验室仪器自动化的普及，熟练操作和使用仪器已是实验技术人员工作中非常重要的一部分。只要掌握了一定的仪器使用技巧，就能在实际工作中根据自身特点设计出最合适的程序以获得最大的工作效率。
虽然ＳＴＡＲ全自动加样器英文程序的编辑比较复杂，但与中文程序相比其功能更多，灵活性更强口］。作者在分析了老加样程序（即分配模式Ｉ）和所用试剂的特点后，设计了两种新的加样模式。这两种新模式共同优点在于把单加一孔ＨＣＶ稀释液放到对照品和质控品中一块加，省去了一次单独的分配过程，从而缩短了加样时间。而且新模式应用了等份连续分配