U-3010紫外可见分光光度计

合集下载

紫外可见分光光度计的使用

比值
显示
组成：光源、单色器、样品池、检测器
1．光源： ①能提供连续的辐射；②光强度足够大；③在整个光谱区
内光谱强度不随波长有明显变化；④光谱范围宽；⑤使用
寿命长，价格低。钨灯——可见光区 320～2500nm
氢灯或氘灯——紫外光区 195－375nm
U3010（碘钨灯、氘灯）波长范围190-900nm
。
二分光光度计的使用-光度法
开始
方法正
将样品放入样品池开始测量
打印数据开始测量
测量参数设置
在[Edit]菜单中选择[Method…]选项。出现下列设置窗口.
具体操作程序
Method:
1. 2. general: 计测量） Quantitation定量参数设置页面： Measurement测量方式选择Photometry（光度
在measure中选择波长wavelength，在Calibration中选择 “1st order”， “2st order”， “3st order”，也可以不校准。在concertration中键入标准浓度单位。 3. Instrument
4 standards标准参数设置键入标系的样品浓度及名称
三注意事项
1. 2. 开机预热15分钟左右。测定时应注意：

参照池和吸收池应是一对经校正好的匹配的吸收
池，材料和规格一致。

使用前后应将洗手池洗净，测量时不能用手接触窗口。

已匹配好的比色皿不能用炉子和火焰干燥，不能加热，以免引起光程长度上的改变。
3.

测量条件的选择：
选择适宜波长的入射光:由于有色物质对光有选择性吸收, 为了使测定结果有较高的灵敏度,必须选择溶液最大吸收波长的入射光。控制吸光度A的准确的读数范围:由朗伯-比耳定律可知,吸光度只有控制在0.2~0.7读数范围内时,测量的准确度较高.

紫外可见分光光度计的使用

光吸收遵循朗伯-比尔定律：
A lg T lg I 0 bc
I
I0 入射光辐射强度 I 透射光辐射强度 T 透射比 a 吸光系数 ε 摩尔吸光系数
溶液对光吸收过程
仪器组成单光束分光光度计
0.575
光源
单色器
检测器
显示
吸收池
双光束分光光度计
光源单色器
比
光束分裂器
值
吸收池
检测器
显
示
组成：光源、单色器、样品池、检测器
2 运行UV Solution软件。软件将自动配置计算机的串行口（RS 232 Port）见图
仪器在初始化过程中进行如下自检工作：
• ROM检测 • RAM检测 • 波长步进电机运转检测 • 氘灯点亮检测 • 钨灯点亮检测 • 仪器波长校正
3 仪器主机开始初始化。见图
4 仪器主机初始化完毕，进入工作状态。
1．光源： ①能提供连续的辐射；②光强度足够大；③在整个光谱区内光谱强度不随波长有明显变化；④光谱范围宽；⑤使用寿命长，价格低。钨灯——可见光区 320～2500nm 氢灯或氘灯——紫外光区 195－375nm
U3010（碘钨灯、氘灯）波长范围190-900nm
2．单色器：包括狭缝、准直镜、色散元件单色器是分光光度计的心脏部分，它的作用是把来自光源
感谢下载

选择[Spectrophotometer]菜单下Start]选项开始测量 • 使用按钮方式：按按钮开始测量 • 如果要终止扫描按按钮。
二分光光度计的使用-光度法
开始
方法设定
样品名输入将空白样品分别放入参比池和样品池
进行用户基线校正将样品放入样品池开始测量

纳米金比色法测定多西环素和土霉素

纳米金比色法测定多西环素和土霉素曲黎;魏燕丽;范淑敏【摘要】采用柠檬酸钠还原法合成粒径约13 nm 的纳米金粒子．采用紫外-可见分光光度计、荧光分光光度计研究了纳米金粒子与多西环素／土霉素分子的相互作用；通过改变缓冲溶液、纳米金粒子用量、反应时间确定了比色法测定的最优反应条件．结果表明：在弱酸溶液中，多西环素／土霉素分子中的氨基官能团（－NH2）得到电子成为带电基团（－ NH3＋）并通过静电引力与纳米金粒子结合，使得纳米金粒子发生聚集，导致纳米金吸收光谱发生红移和展宽，颜色由酒红色变成蓝色；在盐酸-柠檬酸钠的缓冲溶液中加入2 mL 纳米金，反应时间为10 min 的条件下测得多西环素和土霉素的线性范围分别为0．06～0．66 mg ・ L －1和0．59～8．85 mg ・ L －1，检出限（3σ）分别为0．0086、0．0838 mg ・ L －1．该方法前处理简单、灵敏、可靠，有望应用于食品分析和临床分析等领域．%The well-dispersed gold nanoparticles (GNPs) were synthesized through sodium cit-rate reduction method .UV-Vis spectrometer and fluorescence spectrophotometer were used to investigate the mutual effect between GNPs and doxycycline/oxytetracycline .The experimental parameters were optimized with regard to pH ,incubation time and concentration of the GNPs . The amino group ,which is positively charged in weakly acidic medium (namely , - N H3 + ) , integrates with the negative charge on the surface of gold nanoparticles to form a bigger binding product through electrostatic binding ,resulting the aggregation of GNPs with a red-to-purple-to-blue color change .The absorption band of GNPs had a red shift and broadened .Under opti-mal experimentalconditions ,the linear ranges of the colorimetric sensor were 0 .06 - 0 .66 mg ・L - 1 and 0 .59 - 8 .85 mg ・ L - 1 with the corresponding limit of detection (3σ) of 0 .008 6 and 0 .083 8 mg ・ L - 1 for doxycycline and oxytetracycline respectively .This method is promising for foods and clinical analysis owing to to its simple ,reliable ,convenient and low-cost .【期刊名称】《化学研究》【年(卷),期】2016(027)002【总页数】6页(P189-194)【关键词】纳米金粒子;比色法;多西环素;土霉素【作者】曲黎;魏燕丽;范淑敏【作者单位】河南科技学院新科学院，河南新乡 453003;河南科技学院新科学院，河南新乡 453003;河南科技学院新科学院，河南新乡 453003【正文语种】中文【中图分类】O652.7四环素类抗生素(tetracycline antibiotics)是含有并四苯基本骨架的一类广谱抗生素[1-3]. 土霉素和多西环素都可以促进畜禽的生长，预防和治疗畜禽、鱼类的疾病，并可以增加产奶量. 过量使用土霉素和多西环素造成动物产品中药物残留，影响人体健康，因此对动物源性食品中土霉素和多西环素的最高残留，各个国家都有相应的标准及检测方法[4-6]. 目前，我国对于土霉素和多西环素的测定，常用的方法有高效液相色谱法(HPLC)、紫外分光光度法[7]、电化学分析法[8-10]、荧光法[11-12]和细菌抑制法[13]等.纳米金比色法灵敏度高，简单、快速，是目前研究比较热门的分析测定方法. 纳米金比色分析的主要优势是通过肉眼即可观察其颜色变化，简单快速，而且省去昂贵复杂的仪器，另外纳米金的消光系数高，灵敏度高，因而比色分析被用于蛋白质，DNA，金属离子和小分子等多种物质的检测，同时被用于蛋白质之间、DNA之间的相互作用研究[14-16]. 目前，纳米金比色法已成功用于三聚氰胺、瘦肉精等物质的检测[17]. 本文采用纳米金比色法测定土霉素和多西环素，测定结果与药典分析结果一致. 此方法简单，测定速度快，而且不需要昂贵的仪器及大量的分析试剂，在食品分析及环境监测方面有很好的应用前景.1.1 仪器与试剂PHS-3C酸度计(上海仪电科学仪器有限公司)；U-3010紫外-可见分光光度计(日本岛津公司)；F-7000荧光分光光度计(日本日立)； FA1204B电子分析天平(上海佑科仪器有限公司)；CL-2恒温加热磁力搅拌器(郑州长城科工贸有限公司)；Tecnai G2 20s-twin高分辨型透射电子显微镜(日本).四氯金酸(Sigma-Aldrich 公司)；多西环素，土霉素对照品(中国药品生物制品检定所)；盐酸-乙酸钠缓冲溶液、盐酸-柠檬酸钠缓冲溶液；多西环素片剂(0.1 g，国药准字H13021945)和注射液(0.1 g，国药准字p0060405)为药店随机购买；二次蒸馏水、超纯水由实验室提供，所用试剂均为分析纯.1.2 纳米金的合成[5]用新配制的王水浸泡所用玻璃器皿24 h，超纯水洗后烘干备用. 将氯金酸配成1%的溶液，精确量取1 mL于100 mL棕色容量瓶中稀释至0.01%. 将0.01%的氯金酸溶液搅拌加热至沸后加入2.75 mL 1%的柠檬酸钠溶液，12 min后颜色由紫红色变为酒红色，冷却至室温，用0.2 μm超滤膜过滤，滤液于棕色试剂瓶中4 ℃保存备用.1.3 测定吸光度取2.5 mL新制纳米金于5 mL容量瓶中，加入盐酸-柠檬酸钠缓冲溶液，定容. 取2 mL纳米金，依次加入不同体积的多西环素标准溶液(1.50×10-4 g·mL-1 )/土霉素标准溶液(1.48×10-3 g·mL-1)，混合均匀，以水为参比分别测定吸光度.2.1 纳米金表征纳米金呈酒红色，其表观颜色及粒径与文献报道一致. 球形纳米金粒子存在表面等离子吸收的特征峰，以水为空白，绘制纳米金吸收曲线，如图1所示，在518 nm 处有最大吸收，据此可计算纳米金的粒径，约为13 nm[18]. 由纳米金的紫外可见吸收光谱图可以看出纳米金颗粒稳定，符合分析要求.纳米金的透射电镜分析(TEM)如图2所示，制备的纳米金为球形，粒径均匀，分散良好.2.2 多西环素/土霉素测定原理实验利用柠檬酸钠还原氯金酸制备纳米金，纳米金粒子表面包裹大量的柠檬酸根离子，由于静电排斥力纳米金不发生凝聚. 在弱酸溶液中，多西环素/土霉素分子中的氨基官能团(-NH2)可以得到电子(-NH3+)，和纳米金粒子之间通过静电引力相互作用，引发纳米金凝聚. 凝聚后的纳米金透射电镜图如图3所示，纳米金凝聚在一起，证明了纳米金粒子与四环素类抗生素之间的相互作用. 凝聚后纳米金颜色由酒红色变为紫色最终变为蓝色，由于纳米金表面等离子共振，其吸收光谱发生红移和展宽，紫外-可见吸收光谱如图4，纳米金的最大吸收峰由原来的518 nm红移至640 nm. 纳米金的共振散射光谱如图5所示，纳米金凝聚后，共振散射光谱增强. 并且在一定范围内纳米金的聚集与多西环素/土霉素的浓度呈现良好的线性关系，据此可建立简单、快速测定多西环素/土霉素的比色分析.2.3 实验条件优化将多西环素加入纳米金后，纳米金产生凝聚，其凝聚程度可用Δ(A640/A518)来表示. 在pp.0～7.0范围考查缓冲溶液对测定的影响. 图6显示不同缓冲溶液对测定的影响，结果表明使用盐酸-柠檬酸钠缓冲溶液的测定效果较好. 图7显示缓冲溶液加入量对测定的影响，700 μL pH为2.1的盐酸-柠檬酸钠缓冲溶液引起纳米金凝聚的Δ(A640/A518)值最大. 其原因是pH 过低时，纳米金粒子表面所带负电荷较少, 不利于结合多西环素, 而pH 过高, 多西环素中质子化的氢解离, 使正电荷减少,也不利于结合.同时我们也考察了纳米金的用量对体系测定的影响. 改变纳米金的用量从1～3 mL，不同纳米金用量对应的Δ(A640/A518)值如图8所示，纳米金的浓度增大时，其最大吸收峰值降低，当纳米金浓度高时，对仪器的染色比较严重，且对低浓度的多西环素变化不灵敏，当纳米金浓度低时，颜色变化不灵敏，因此实验选择2 mL纳米金.图9考察了反应时间对测定的影响，连续测定1 h，结果表明:加入多西环素，10 min凝聚程度最大，10 min后基本不再变化，反应时间设为10 min.2.4 多西环素/土霉素的测定在最优条件下，按照实验方法依次加入多西环素标准溶液并测定其吸收光谱(图10)，由Δ(A640/A518)对多西环素的浓度作图(如图10所示)，线性范围为0.06～0.66 mg·L-1，线性回归方程为Δ(A640/A518)= 0.042+ 1.480 4c(多西环素，mg·L-1),相关系数为0.998，检出限(3σ)为0.008 6 mg·L-1,纳米金比色法测定多西环素具有检出限低，灵敏度高，方法简单等优点，有望应用于食品分析领域. 最优条件下测定土霉素，测定其吸收光谱(图11)，在0.59～8.85 mg·L-1 范围内，线性回归方程为Δ(A630/A518) = 0.222 + 0.077c(土霉素，mg·L-1),相关系数0.999，检出限(3σ)0.083 8 mg·L-1.2.5 常见物质的干扰表1考察了金属离子、氨基酸及结构类似药物的干扰. 结果表明，对于0.54 mg·L-1多西环素，该体系基本不受干扰，有较好选择性.2.6 回收率取多西环素20片，研细, 精密称取约一片多西环素质量，盐酸溶解后过滤，移至容量瓶，定容. 进行标准加入回收实验，精密量取适量样品溶液，分别加入标准溶液0.06、0.54 mg·L-1，测定吸光度，计算回收率，实验重复3次.精密量取1 mL多西环素注射液于棕色容量瓶中，进行标准加入回收实验，精密量取适量样品溶液，分别加入标准溶液0.12、0.42 mg·L-1，测定吸光度，计算回收率，结果见表2.2.7 含量测定精密量取多西环素片剂及注射液样品，按实验方法测定，结果见表3. 测定结果表明所购多西环素片剂及注射液含量在标示范围95.0%～105%内, RSD 较小, 符合药品质量管理规定.采用柠檬酸钠还原氯金酸方法得到纳米金. 在弱酸环境中纳米金可与多西环素、土霉素相互作用，产生凝聚，其吸收光谱发生红移，据此测定多西环素、土霉素. 优化了缓冲溶液、纳米金用量及反应时间等反应条件；在最佳条件下，测定结果令人满意. 同时分析了多西环素片剂及注射液，结果与药典方法结果一致. 该方法简单快速，且不需昂贵仪器及大量分析试剂，在食品及环境分析方面前景广泛.【相关文献】[1] CHOPRA I, ROBERTS M. Tetracycline antibiotics: mode of action, applications, molecular biology, and epidemiology of bacterial resistance [J]. Microbiol Mol Biol Rev, 2001, 65(2): 232-260.[2] LUO Y l, XU J Y , LI Y, et al. A novel colorimetric aptasensor using cystramine-stabilized gold nanoparticles as probe for rapid and specific detection of trtracycline in raw milk [J]. Food Control, 2015, 54: 7-15.[3] NICOLAOU K G, CHEN J S, EDMONDS D J. Recent advances in the chemistry and biology of naturally occurring antibiotics [J]. Angew Chem Int Ed, 2009, 48(4): 660-719.[4] SHEN L, CHEN J, LI N, et al. Rapid colorimetric sensing of tetracycline antibiotics with in situ growth of gold nanoparticles [J]. Anal Chim Acta, 2014, 839: 83-90.[5] WANG R Y, FAN S M, WANG R Q, et al. Determination of aninoglycoside antibiotics bya colorimetric method based on the aggregation of gold nanopatricles [J]. Nano, 2013, 8(4): 37-45.[6] WANG S, LIU J H, YONG W, et al. A direct competitive assay-based aptasensor for sensitive determination of tetracycline residue in honey [J]. Tnlanta, 2015, 131: 562-569.[7] 斯琴，敖登高娃，李虎东. 偏最小二乘紫外分光光度法同时测定四环素、土霉素和甲稀土霉素[J]. 内蒙古大学学报: 自然科学版， 2007，38(1): 28-30.[8] 潘丹梅，胡荣宗，韦冬萍. Ni电极电化学流通池检测四环素类药品的研究 [J]. 电化学, 2007，13(2): 122-125.[9] 邢晓平.鸡蛋中残留四环素类抗生素的快速测定研究 [J]. 盐城工学院学报: 自然科学版， 2006，19(4)： 16-19.[10] 刘美华，田芹，任丽萍. 动物食品中土霉素残留检测方法的研究进展 [J]. 化学工程师, 2005，4: 50-52.[11] 高红，赵一兵，郭祥群. 一种测定四环素类抗生素的光谱新方法 [J]. 光谱学与光谱分析，2006， 26(3)： 488-490.[12] 顾运琼，梁伟江，罗旭键，等. 白花丹素镧(Ⅲ)配合物与牛血清白蛋白相互作用的光谱学研究[J]. 化学研究， 2013, 24(6): 605-610.[13] 朱金国，刘红霞. 发光细菌检测四环素族抗生素体系的建立 [J]. 中国食品卫生杂志, 2005，17(2)： 150-153.[14] MINSEON C, MIN S H, CHANGILL B, et al. A simple and direct electrochemical detection of interferon-γ using its RNA and DNA aptamers [J]. Chem Commun, 2008, 45: 73-75.[15] ELHAM N, AMIR M, AYYOOB A. Colorimetric DNA detection of transgenic plants using gold nanoparticles functionalized with L-shaped DNA probes [J]. Physica E: Low-dimensional Systems and Nanostructures, 2016, 75: 188-195.[16] CHANG C C, CHEN C Y, CHUANG T L, et al. Aptamer-based colorimetric detection of proteins using a branched DNA cascade amplification strategy and unmodified gold nanoparticles [J]. Biosensors and Bioelectronics, 2016, 78(15): 200-205.[17] NAVEEN K, RAMAN S, HARISH K. Colorimetric detection of melamine in milk by citrate-stabilized gold nanoparticles [J]. Anal Biochem, 2014, 456: 43-49.[18] WOLFGANG H, NGUYEN T K T, JENNY A. Determination of size and concentration of gold nanoparticles from UV-Vis spectra [J]. Anal Chem， 2007,79: 4215-4221.。

紫外可见分光光度计的主要部件及应用

紫外可见分光光度计的主要部件及应用下载提示：该文档是本店铺精心编制而成的，希望大家下载后，能够帮助大家解决实际问题。

文档下载后可定制修改，请根据实际需要进行调整和使用，谢谢!本店铺为大家提供各种类型的实用资料，如教育随笔、日记赏析、句子摘抄、古诗大全、经典美文、话题作文、工作总结、词语解析、文案摘录、其他资料等等，想了解不同资料格式和写法，敬请关注!Download tips: This document is carefully compiled by this editor. I hope that after you download it, it can help you solve practical problems. The document can be customized and modified after downloading, please adjust and use it according to actual needs, thank you! In addition, this shop provides you with various types of practical materials, such as educational essays, diary appreciation, sentence excerpts, ancient poems, classic articles, topic composition, work summary, word parsing, copy excerpts, other materials and so on, want to know different data formats and writing methods, please pay attention!引言：紫外可见分光光度计是一种广泛应用于化学、生物、医药等领域的仪器设备，用于测量物质在紫外可见光谱范围内的吸收特性。

紫外实验讲义

实验五紫外光谱法定性分析实验一、实验目的1．了解U-3010紫外可见分光光度计的构造、原理及使用方法。

2．了解紫外光谱法在定性分析中的应用。

3．掌握查阅紫外标准谱图的方法。

二、仪器与试剂仪器：U-3010紫外可见分光光度计1cm石英吸收池试剂：苯环己烷0.016mol/L丙酮正己烷溶液0.021mol/L丙酮甲醇溶液0.025mol/L丙酮水溶液5.0×10-5mol/L苯酚甲醇溶液4.9×10-5mol/L对溴苯胺甲醇溶液7.3×10-5mol/LC4H6O甲醇溶液（K带）0.015mol/LC4H6O甲醇溶液（R带）0.1mol/LNaOH溶液0.1mol/LHCl溶液三、实验内容1．检查仪器波长及分辨率2．环己烷的纯度检验3．氢键强度测定4．溶液酸碱性对紫外光谱的影响5．鉴定有机化合物结构四、实验原理及步骤1．检查仪器波长及分辨率（1）基本原理紫外可见分光光度计在使用前或使用一定时间后，需对光度计的波长标尺进行必要的检查与校正，以保证测试结果的准确可靠。

利用苯蒸气紫外光谱的B吸收带进行波长校正和分辨率检查，是实验室中常用的一种简便可行的方法。

苯蒸气在（230～270）nm间的B吸收带为苯的特征谱带，它以中等强度吸收和明显的振动精细结构为特征。

将实验测得的苯蒸气的紫外光谱与苯蒸气的标准紫外光谱图相对照，据此可判断所用仪器的波长精度及分辨率。

（2）实验步骤①于干燥洁净的1cm石英吸收池中，滴入一滴液态苯，盖上池盖，稍停片刻，待苯蒸气在吸收池中饱和后，放入样品光路，参比光路放入空吸收池，测定苯蒸气在（200～350）nm间的吸收光谱。

②将测得的苯蒸气的紫外吸收光谱与苯蒸气的标准紫外光谱图相对照，以检验所用仪器的波长精度及分辨率。

2．己烷的纯度检验（1）基本原理检验某一化合物中是否有杂质的主要依据是根据其光谱特征的不同来判断。

可分为下述两种情况：①如果某一化合物在一定波长范围内无吸收，而杂质在该波长范围具有特征吸收，则可根据杂质吸收带的特征，即吸收峰的形状、波长及摩尔吸光系数等来检查该化合物中是否含有该杂质。

卫生化学笔记：紫外可见分光光度计

紫外可见分光光度计（一）概述一、光学分析法光是一种电磁辐射，电磁辐射是一种以巨大的速度通过空间而不需要任何介质作为传播媒介的光子流，具有波粒二象性电磁波谱：按波长顺序排列的电磁辐射近紫外区（200-400nm）和可见光区（400-780nm）能级跃迁类型为：原子的价电子或分子的成键电子能级二、光学分析法的分类1.光谱法与非光谱法当物质与电磁辐射相互作用时，若物质内部发生能级跃迁，记录由能级跃迁所产生的辐射能强度随波长的变化的图谱称为光谱（spectrum）,利用物质的光谱进行定性、定量和结构分析的方法称为光谱分析法。

2.吸收光谱与发射光谱物质通过电致激发，热致激发或光致激发等过程获取能量，成为激发态的原子或分子，激发态的原子或分子极不稳定，它们可能以不同的形式释放能量，从激发态回到基态或低能态，如果是以电磁辐射的形式释放多余的能量就产生发射光谱。

吸收光谱是物质吸收相应的辐射能而产生的光谱。

其实质在于辐射使物质粒子发生由低能级（一般为基态）向高能级（激发态）的能级跃迁，被选择性吸收的辐射光子能量应为跃迁后与跃迁前两个能级间的能量差。

利用物质的吸收光谱进行定性，定量及结构分析的方法称为吸收光谱法。

3.分子光谱法与原子光谱法原子光谱法是测定气态原子（或离子）外层或内层电子跃迁所产生的原子光谱为基础的分析方法。

为线状光谱。

分子光谱法是以测定分子转动能级，分子中原子的振动能级（包括分子转动能级）和分子电子能级（包括振动-转动能级）跃迁所产生的分子光谱为基础的定性，定量和物质结构分析方法，为带状光谱。

三、紫外-可见分光光度计当辐射通过固体、液体或气体等透明介质分子时，物质分子选择性吸收紫外-可见光谱区的光辐射，根据吸收特征和吸收程度来研究物质组成和结构的定性、定量分析方法。

紫外可见分光光度法的特点：灵敏度较高；准确度较高；选择性较好；仪器设备简单；应用范围广。

（二）基本原理一、紫外-可见吸收光谱的形成1.分子的能级分布分子电子能级分子振动能级分子转动能级2.紫外-可见吸收光谱及其特征吸收峰谷肩峰末端吸收二、紫外-可见吸收光谱与分子结构的关系1.有机化合物的电子跃迁类型σ → σ*跃迁：需能量最大，吸收峰波长一般小于150nm。

紫外分光光度计的表征用途

紫外分光光度计的表征用途紫外分光光度计是一种常用的实验仪器，用于测量物质在紫外光区域的吸收和透过性。

它在许多科学领域，如化学、生物学、医药等方面都有着广泛的应用。

下面我们将详细介绍紫外分光光度计的表征用途。

一、物质浓度测定紫外分光光度计可以通过测量溶液或物质在特定波长下的吸光度来确定物质的浓度。

根据比尔-朗伯定律，溶液中物质的吸光度与浓度成正比。

因此，通过测量吸光度和已知浓度的标准溶液建立标准曲线，再测量待测溶液的吸光度，就可以计算出待测溶液的浓度。

这种测定方法在化学分析中得到广泛应用，如测定水中污染物的浓度、药物的含量等。

二、物质结构分析紫外分光光度计还可以用于物质的结构分析。

不同的物质具有不同的吸收特性，在紫外光区域吸收的峰位和强度可以提供物质的结构信息。

通过对比样品的吸收特性和已知物质的光谱数据，可以确定物质的结构或成分。

三、酶活性测定酶是生物体内的一种重要催化剂，其活性的高低直接关系到生物体的正常功能。

紫外分光光度计可以用于测定酶的活性。

通过测量酶催化反应中产生的物质在特定波长下的吸光度变化，可以计算出酶的活性。

四、药物代谢研究药物代谢研究是药物开发和临床应用的重要环节。

紫外分光光度计可以用于测定药物在体内的代谢过程。

通过测量药物及其代谢产物在特定波长下的吸光度，可以了解药物在体内的代谢速度和代谢产物的形成情况，从而评估药物的代谢动力学和代谢途径。

五、环境监测紫外分光光度计在环境监测中也有着重要的应用。

例如，可以用于测定大气中臭氧、二氧化硫等污染物的浓度，以评估空气质量。

同时，紫外分光光度计也可以用于水体中重金属、有机污染物等的测定，以监测水体的污染程度。

紫外分光光度计具有广泛的应用领域。

它不仅可以用于物质浓度测定和物质结构分析，还可以用于酶活性测定、药物代谢研究以及环境监测等方面。

通过紫外分光光度计的应用，我们可以更好地了解和掌握物质的性质和特性，为科学研究和实际应用提供有力支持。

紫外可见分光光度计的使用方法

紫外可见分光光度计的使用方法1、电源开关，使仪器预热20分钟；▪仪器接通电源后，仪器即进入自检状态，自检结束后波长自动停在546nm处，测量的方式自动设定在透射比方式（%T），并自动调100%和0%T。

注意：①开机前，先确认仪器样品室内是否有东西挡在光路上。

光路上有东西将影响仪器自检甚至造成仪器故障。

②检查透过率模式下，挡光位置，透过率是否显示00.0%T。

否则要调整暗电流，按“0%T”键，使透过率显示为00.0%T。

返回对光位置时仍能显示100.0%T，否则重新调100%T。

通过“▲”和“▼”键，设定测试波长；按“100%T”键，使透过率显示为100.0%。

如果您要获得被测样品的透射比参数时（透射比方式）：T2、按方式键“MODE”将测试方式设置为透射比方式：▪显示器显示“3、按波长设置键“▲”或“▼”设置您想要的分析波长，如340nm；▪按波长设置键“▲”或“▼”直到显示器显示“340nm xxx x%T”▪每当波长被重新设置后，请不要忘记调整“100.0%T”。

4、将您的参比溶液和被测溶液分别倒入比色皿中；▪比色皿内的溶液面高度不应低于25毫米，大约25毫升。

否则，会影响测试参数的精确度。

▪被测试的样品中不能有气泡和漂浮物，否则，会影响测试参数的精确度。

5、打开样品室盖，将盛有溶液的比色皿分别插入比色皿槽中，盖上样品室盖。

▪一般情况下，参比样品放在样品架的第一个槽位中。

▪被测样品的测试波长在340nm—1000nm范围内时，建议使用玻璃比色皿，被测样品在190nm—340nm范围内时，建议适用石英比色皿。

▪仪器所附的比色皿，其透射率是经过测试和匹配的，未经匹配处理的，比色皿将影响样品的测试精确度。

▪比色皿的透光部分表面不能有指印、溶液痕迹。

否则，将影响样品的测试精确度。

6、将参比溶液推入光路中，按“100%T”键调整零ABS。

▪仪器在自动调整100%T的过程中，显示器显示“ 340nm Blank ...”当100.0%T调整完成后，显示器显示“340nm 100.0%T”7、将被测溶液推或拉入光路中，此时，显示器上所显示是被测样品的透射参比数。

几种光源的更换方法

几种光谱仪器光源的更换方法购买了光谱仪器的用户可能会对光源的更换有所感触，光源可以说是光谱类仪器的主要损耗部件了，您是否遇到过如下烦恼——仪器出保修期了，而此时需要更换光源，请厂家的工程师更换费用多多。

其实您大可不必对此烦恼，电脑可以DIY，更换光源同样可以。

这就象给车胎打点气一样容易，关键要弄清哪部分是不能动的，我们坚决不动就是。

我本人更换过几种仪器的光源，简述一下，希望对大家有所帮助。

1．日立的紫外可见分光光度计（代表机型：U-3010/U-3900）更换钨灯或氘灯后必须进行光源镜的调整，否则光斑会偏离光轴，造成光能量不足，基线噪声变大。

光源镜位置调整时，样品室支架内须保证无任何样品，如采用其他附件时（如：积分球、反射附件等）暂时不要安装在样品室内。

更换氘灯后的调整方法：－测量模式设定为：E(S)或E(R)－光源设定为：仅用D2灯－光电管高压：选固定模式，电压设定为300V左右－波长设定为：656.1nm仔细调整光源镜左和背部两个定位螺钉，使屏幕能量显示值达到最大。

更换钨灯后的调整方法：－测量模式设定为：E(S)或E(R)－光源设定为：仅用WI灯－光电管高压：选固定模式，电压设定为300V左右－波长设定为：600nm仔细调整光源镜右和背部两个定位螺钉，使屏幕能量显示值达到最大。

注意事项：a)光源镜背部的螺钉为灯光束上下调整螺钉，该螺钉调整时要兼顾两个灯的能量，但主要照顾氘灯的能量，因为氘灯的能量比钨灯低得多。

b)一般情况只换一只灯，但调整时两只灯的情况均要检查。

c)调整后要做基线平坦度及噪声水平测试。

2.日立的荧光分光度计（代表机型：F-4500）a）打开仪器右侧光室盖取出氙灯灯架更换氙灯，注意氙灯内充有高压氙气，小心不要碰碎，否则有一定危险性。

氙灯“+”极为粗的一端朝上安装，“-”极为细的一端朝下安装。

b）更换氙灯后必须要调整灯位置，方法如下：在分析方法窗口中将两个单色器狭缝均设定为5 nm。

美普达UV-3100B主机扫描型紫外可见分光光度计产品介绍

美普达UV-3100B主机扫描型紫外可见分光光度计产品介绍：
一：可直接连接打印机，打印图谱和实验数据；
二：强大的存储功能，能保存各种类型的数据和图谱；
三：进口环保型氘灯系统，有效减少您对臭氧的吸入；
四：宽大的样品室，可容纳5-100mm各种规格的比色皿；
五：先进的控制系统，能实时监控氘灯和钨灯的点亮时间；
六：通过选配的Mapada专业扫描软件，可直接联机操作。

七：插座式氘灯和钨灯设计，能使您在换灯后免去光学调试的烦恼；
八：GLP自我鉴定功能，可根据需要随时检测仪器的波长精度和光度精度，并出具检测报告；
九：设计独特的光学系统、1200条/mm高性能全息光栅、原装进口的高性能接收器确保仪器有优良的性能指标。

十：仪器采用320*240、5英寸大屏幕液晶显示器，能直接显示标准曲线、波长扫描、动力学扫描等各种图谱，中文操作界面，使您的使用更加简单、便捷；
美普达UV-3100B主机扫描型紫外可见分光光度计产品技术参数：。

紫外分光光度计的概念及测定范围

紫外分光光度计的概念及测定范围介绍如下：
紫外分光光度计（UV-Vis分光光度计）是一种化学分析仪器，用于分析物质的吸收和反射特性。

它可以测量样品对紫外光和可见光的吸收率，从而确定其化学成分和浓度。

紫外分光光度计测定范围通常在190-1100纳米之间，可以分为两个主要的测量区域：
1.紫外区域：190-400纳米，主要用于测量芳香族化合物、蛋白
质、核酸、药物、有机物等吸收率。

2.可见光区域：400-1100纳米，主要用于测量无机化合物和染料
的吸收率。

紫外分光光度计通常由光源、单色器、样品室、检测器和计算机等部分组成。

它被广泛应用于医药、化学、食品、环保、生物等领域中对物质的分析和研究。

紫外光度法测定酪氨酸

紫外光谱分析法测定酪氨酸的含量一、实验目的1、掌握紫外可见分光光度计的工作原理和操作方法；2、用紫外可见分光光度计进行定性及定量分析。

二、实验原理紫外可见分光光度计基本工作原理和红外光谱仪相似，利用一定频率的紫外－－可见光照射被分析的有机物质，引起分子中价电子的跃迁，它将有选择地被吸收。

一组吸收随波长而变化的光谱，反映了试样的特征。

在紫外可见光的范围内，对于一个特定的波长，吸收的程度正比于试样中该成分的浓度，因此测量光谱可以进行定性分析，而且根据吸收与已知浓度的标样的比较，还能进行定量分析。

三、应用范围紫外可见分光光度分析在有机化学、无机化学、生物、医药、材料、冶金、地质等领域有广泛的应用。

可以鉴定分子结构比较复杂的有机物质，测定微量物质的含量，研究物质的分子结构和反应的历程，立体结构的确定等。

工业方面的专门用途包括水分析、食品和饮料分析、DNA和RNA分析、生命科学、分子生物相关的方法以及反射能力测量等。

在药品研究中，可以定量分析留体、维生素、抗菌素、生物碱、黄酮类等。

可进行时间扫描。

四、仪器和试剂仪器：U-3010紫外可见分光光度计；比色管（10ml；25ml）；容量瓶（250ml；50ml）；移液管（10ml；5ml）；滴管；烧杯（500ml；50ml）；玻璃棒；试管架试剂：（1）10-3mol/L酪氨酸储备液：准确称取45.30mgL-酪氨酸,加50 ml二次水溶解，用二次水定容至250ml。

（2）二次水五、实验步骤1.系列标准溶液的配制取5只10 ml比色管，用10-3mol/L酪氨酸储备液配制浓度分别为10-4，2×10-4，3×10-4，4×10-4，6×10-4mol/L标准溶液。

2.绘制标准曲线用紫外可见分光光度计扫描待测酪氨酸溶液，找出酪氨酸的最大吸收峰。

将波长固定在最大吸收峰处，测定系列标准溶液的吸光度。

3.未知溶液的测定在标准系列溶液同样条件下，测量未知溶液的吸光度。

保健酒中总黄酮的含量测定

保健酒中总黄酮的含量测定目的建立测定保健酒中总黄酮含量的方法，并对6个样品进行测定。

方法将样品进行处理后，用NaNO2、Al（NO3）3、NaOH显色，再采用可见分光光度法（检测波长为505 nm）测出吸光度，以芦丁为标准品绘制的标准曲线求出总黄酮含量。

结果方法学考察中精密度、重现性、回收率良好，该方法在15～40 min内稳定，线性范围0～1.01 mg。

结论该方法操作简单，高效稳定，适合本身有颜色的保健酒中总黄酮的含量测定。

标签：保健酒；黄酮；含量测定；分光光度法黄酮类化合物分子中有游离的3-OH、5-OH或邻二酚羟基时可与Al3+、Zr4+、Pb2+等形成配合物显色，此性质可用于黄酮类化合物的定性、定量分析[1]。

本文以亚硝酸钠-硝酸铝显色，采用此法测定保健酒中总黄酮的含量。

1 仪器与试剂1.1仪器U-3010可见紫外分光光度计（日立）；比色皿（1 cm）。

1.2 试剂芦丁标准品（100080-200707，中国药品生物制品检定所），NaNO2（分析纯，天津科盟化工）；Al（NO3）3（分析纯，天津科斯夫化工）；NaOH（分析纯，天津广成）；甲醇（分析纯，山东禹王），保健酒样品（张裕集团提供）。

1.3 试剂配制1.3.1 5% NaNO2的配制精密称取NaNO2 2.5 g，蒸馏水溶解并定容至50 mL，临用现配。

1.3.2 10% Al（NO3）3的配制精密称取Al（NO3）3 5 g，蒸馏水溶解并定容至50 mL，临用现配。

1.3.3 4% NaOH的配制精密称取NaOH 4 g，蒸馏水溶解并定容至100 mL。

1.3.4 75%甲醇配制将蒸馏水与甲醇按1∶3的比例混合，即得。

2 方法与结果2.1标准曲线的制备精密称取120℃干燥至恒重的芦丁对照品10.1 mg，用75%的甲醇溶解并定容至50 mL。

精密吸取0、1、2、3、4、5 mL，分别置于10 mL容量瓶中，各加入甲醇至5 mL，分别加入5%亚硝酸钠0.5 mL，摇匀，放置6 min，加入10%硝酸铝0.5 mL，摇匀，放置6 min，加入4%氢氧化钠4 mL，再加甲醇至10 mL，放置20 min，置比色皿中于400～600 nm之间测定吸收谱，确定最大吸收波长为505 nm，在505 nm处测定吸光度，作标准曲线，得回归方程y = 0.896 5x - 0.002 4，r =0.999 9。

糖醛酸的含量测定

糖醛酸的含量测定1. 仪器、试剂与药材Hitachi U-3010 紫外可见分光光度计（日本）超声清洗机（Sb5200D ）宁波生物科技有限公司恒温数控水浴锅（HH —4）国华电器有限公司半乳糖醛酸为urchem 公司，咔唑为国药集团化学试剂有限公司进口分装。

其他试剂均为分析纯。

0.1%的咔唑标准溶液的制备：取0.1g 咔唑，精密称定，置于100ml 容量瓶中，用无水乙醇稀释至刻度，摇匀。

半乳糖醛酸标准溶液的制备：称取20mg 干燥至恒重的半乳糖醛酸对照品，精密称定，置于100ml 容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，得0.1948mg/ml 半乳糖标准溶液。

2.实验部分2.1实验条件的选择：2.1.1最大吸收波长的选择精密吸取半乳糖醛酸标准溶液0.5ml 和五加果实粗多糖溶液0.3ml ，分别置于10ml 的具塞刻度试管中，加水至1.00ml ，加6ml 浓硫酸，摇匀，沸水浴加热20分钟，冷至室温后假如0.1%的咔唑标准溶液0.25ml ，摇匀。

另取1.00ml 水同上操作制得空白溶液。

用日本hitach 紫外-可见分光光度计于400-600nm 波长范围内依次扫描，确定半乳醛酸最大吸收波长为520nm ，样品也为520nm 。

400500600nm糖醛酸纯品0.000.050.100.150.200.250.300.350.400.450.50 Abs糖醛酸纯品Peak # Start (nm) Apex (nm) End (nm) Height (Abs) Valley (nm) Valley (Abs) 600.00 520.00 419.00 0.476 50.349 419.00半乳糖醛酸标准品nmB0.30.40.50.60.70.80.91.0 Abs五加果实粗多糖样品中糖醛酸BPeak # Start (nm) Apex (nm) End (nm) Height (Abs) Valley (nm) Valley (Abs)1 600.00 518.00 415.50 0.953 131.559 415.502.1.2浓硫酸用量考察精密吸取半乳糖醛酸标准溶液0.5ml ，浓硫酸用量为3-10ml ，其它操作同前，分别测定吸收度值。

uv-3010紫外分光光度计操作规程

UV—3010紫外分光光度计操作规程
1、打开主机电源.打开计算机和打印机电源。

2、打开UV—Solution 软件.
3、连机成功后，点击Method图标,设置或打开相应的方法，并确定.
4、点击Sample图标,设置要测量的样品。

5、放入空白样品或以空气为空白，点击Auto zero图标，执行校零。

6、依次放入标准样品，点击Measure图标执行测量。

测量标准样品后，放入待测量样品，点击Sample或F4测量样品.测量完成后，数据处理窗口将会自动打开.处理数据,保存数据并打印报告.
7、关闭UV—Solutions软件。

关闭计算机和打印机电源.
8、关闭主机电源。

9、填写使用记录,并清理实验台面。

紫外分光光度计的组成

紫外分光光度计的组成紫外分光光度计是一种常用的实验仪器，常用于化学、生物、环境等领域的分析和研究。

它能够通过测量样品对紫外光的吸收情况，来获得样品的吸光度数据，从而得到有关样品成分和浓度的信息。

紫外分光光度计主要由光源、光栅、进样系统、检测器和数据处理系统等组件组成。

光源是紫外分光光度计的核心部件之一，它提供紫外光源来照射样品。

紫外分光光度计常用的光源有氘灯和钨灯。

氘灯主要用于紫外区域，波长范围在190-400纳米之间，而钨灯则适用于可见光区域，波长范围从320纳米到2000纳米。

通过选择不同的光源，可以满足不同波长范围的实验需求。

光栅是紫外分光光度计的另一个重要组成部分，它起到分光作用。

光栅是一种具有周期性结构的光学元件，可以将进入的光束按照不同波长分散成不同方向的光束。

通过调整光栅的角度，可以选择不同的波长进行测量。

光栅的性能对光谱分辨率和光谱质量有很大影响，因此选择合适的光栅是非常重要的。

进样系统是紫外分光光度计中用来将样品引入光路的部分。

进样系统通常包括进样仓、进样器和进样管道等组件。

样品可以以液体或固体的形式进入进样仓，并通过进样器控制进样量。

进样管道则起到将样品引入光路的作用。

不同类型的样品可能需要不同的进样系统，以满足实验需求。

检测器是紫外分光光度计中用来检测样品吸收光的部分。

常用的检测器有光电二极管（Photodiode）和光电倍增管（Photomultiplier Tube）。

光电二极管是一种基于光电效应的检测器，可以将光信号转化为电信号。

光电倍增管则是一种更敏感的检测器，可以放大光信号，提高检测灵敏度。

选择合适的检测器可以提高实验的准确性和灵敏度。

数据处理系统是紫外分光光度计中用来处理和分析测量数据的部分。

数据处理系统通常由计算机和相关软件组成，可以对测量数据进行存储、分析和呈现。

通过数据处理系统，可以得到光谱图、吸光度数据等结果，并进行后续的数据处理和分析。

紫外分光光度计主要由光源、光栅、进样系统、检测器和数据处理系统等组件组成。