U-3010紫外可见分光光度计

比 值
显 示
组成：光源、单色器、样品池、检测器
1．光源： ①能提供连续的辐射；②光强度足够大；③在整个光谱区
内光谱强度不随波长有明显变化；④光谱范围宽；⑤使用
寿命长，价格低。 钨灯——可见光区 320～2500nm
氢灯或氘灯——紫外光区 195－375nm
U3010（碘钨灯、氘灯）波长范围190-900nm
。
二 分光光度计的使用-光度法
开始
方法设定
Biblioteka Baidu
样品名输入 将空白样品分别放入参比池和样品池
进行用户基线校正
将样品放入样品池 开始测量
打印数据 开始测量
测量参数设置
在[Edit]菜单中选择[Method…]选项。出现下列设置窗口.
具体操作程序
Method:
1. 2. general: 计测量） Quantitation定量参数设置页面： Measurement测量方式选择Photometry（光度

系统基线校正方法。 使用空气作为参比和样品。按按钮 出对话框见图，选 择System后按[OK]按钮，进行系统基线校正。
测
有两种方法可以开始测量： 使用菜单方式
量
选择[Spectrophotometer]菜单下Start]选项开始测量 使用按钮方式 ：按按钮 开始测量

如果要终止扫描按按钮
在measure中选择波长wavelength，在Calibration中选择 “1st order”， “2st order”， “3st order”，也可以不校准。 在concertration中键入标准浓度单位。 3. Instrument
4 standards标准参数设置 键入标系的样品浓度及名称
颜 色 的 产 生
植物叶子呈现绿色是 因为植物中存在一种 吸收蓝紫光和红光的 载体——叶绿素
互 补 色 原 理
光谱示意
完全吸收
复合光 表观现象示意
完全透过
吸收黄色光
利用一定频率的紫外--可见光照射分析物，它将有选择 地被吸收。吸收光谱可以反映出物质的特征。
物质对光的选择性吸收－溶液对光的作用
溶液对光的作用示意图
紫外可见分光光度计
主要内容
1、工作原理及仪器组成 2 、分光光度计的使用 波长扫描 定量测定
3 、注意事项
一、工作原理及仪器组成
物质的颜色与吸收光的关系： 当白光照射到物质上时，如果物质对白光中某种颜色
的光产生了选择性的吸收，则物质就会显示出一定的颜色。
物质所显示的颜色是吸收光的互补色。
5 吸光度自动校零 在开始测试前，需要进行吸光度校零。在样品室参比和样 品光路中分别放入空白样品。按按钮 进行吸光度校零。 6 在wavelength中设定扫描的最大吸收波长， 7 放入标样，选中第一个标样，点measure依次测定完成 后自动给出标准曲线。 8 选择SAMPLE进行样品测定，全部测定完后点击END，此 时 自动生成一个文件，打开此文件，另存为所需的文件名。 9 关机时，先退出UVsolution，再关电脑，最后关光度计上 的power。
2．单色器：包括狭缝、准直镜、色散元件 单色器是分光光度计的心脏部分，它的作用是把来自光源 的混合光分解为单色光并能随意改变波长。它的主要组成部 件和作用是： ①入射狭缝——限制杂散光进入。 ②色散元件——即棱镜或光栅，是核心部件，可将混合光 分解为单色光。 ③准直镜——把来自入射狭缝的光束转化为平等光，并把 来自色散元件的平等光聚焦于出射狭缝上。 ④出射狭缝——只让特定波长的光射出单色器。
[Load]按钮:用于装载原来保存的方法文件。
[Save]按钮:保存当前的设置参数。 [Save As]按钮:将当前设置参数另存为一个方法文件。
Instrument仪器参数设置页面
Data mode读数显示方式，选择Abs吸光度，波长扫描的起止
范围一般为190-800，狭缝值一般为2
3. 吸收池 玻璃——由于吸收紫外UV光，仅适用于可见光区； 石英——适用于紫外和可见光区 4．检测器：将光信号转变为电信号的装置
光电管
光电倍增管 二极管阵列检测器 5．记录装置：讯号处理和显示系统
Slit 1不存在，Mirror取代了光栅grating 1 Grating2 variable-pitch aberration-corrected diffraction grating 旋转镜将光分成两束，分别通过参比池和样 品池，然后聚集在PMT
2 运行UV Solution软件。软件将自动配置计算机的 串行口（RS 232 Port）见图
仪器在初始化过程中进行如下自检工作：
ROM检测 RAM检测 波长步进电机运转检测
氘灯点亮检测
钨灯点亮检测
仪器波长校正
3 仪器主机开始初始化。见图
4 仪器主机初始化完毕，进入工作状态。
光吸收遵循朗伯-比尔定律：
I0 A lg T lg bc I
I0 入射光辐射强度 I 透射光辐射强度 T 透射比 a 吸光系数
ε 摩尔吸光系数
溶液对光吸收过程
仪器组成单光束分光光度计
0.575
光源
单色器
吸收池
检测器
显示
双光束分光光度计
光束分裂器 光源 单色 器 吸收池 检测器
二 分光光度计的使用-波长扫描
开始
方法设定
样品名输入 将空白样品分别放入参比池和样品池 进行用户基线校正 将样品放入样品池 开始测量
打印数据 开始测量
启动UV Solution软件
1. 打开仪器主机电源。用鼠标点击Windows开始菜单中的 [Hitachi Applications]选项中的[UV Solutions 2.0] 选项。 或者直接在桌面上双击UV Solution图标。
Light一般选择“Auto”
Monitor显示页面
Processing数据处理页面
Report报告结果页面
样品名设置，备注信息及文件名输入
基线校正
用户基线校正方法：可将scan speed 设小一些；进行样 品扫描时，可设大一些。 将空白样品分别放入样品室的 参比光路和样品光路。按按钮
5 测量参数设置
1 在[Edit]菜单中选择[Method…]选项，或按按钮。出现下列窗口。
General:总体设置页面
Measurement测量: Wavelength scan 波长扫描 Time scan 时间扫描 Photometry 定波长测量 Operator操作者: 输入操作者的姓名 Instrument仪器:仪器型号由软件自动从仪器主机获得。 Use Sample Table使用样品表:选择是否使用样品表。 Comments备注:填写一些备注信息。