微生物限度检查若干问题
微生物检验常见问题解答
微生物检验常见问题解答微生物检验常见问题解答一、方法验证1.做过验证的样品微生物检验方法是否都需要按照新的方法进行重新验证?答：对于微生物限度检查的产品而言，由于培养时间调整，应重新进行验证。
对于无菌检查的产品而言，如果方法未作实质性调整，可以不必重新验证。
个别产品在各论中收载了新的无菌检查方法，对这些品种，应对收载方法的适用性进行验证。
2.以前做过无菌验证的品种是否需要重新按照新的标准再验证?答：参见问题1。
3.“新增抗生素供试品应选择低吸附的滤器及滤膜”比如注射用克林霉素磷酸酯属于抗生素，是否需要重新选取滤膜再验证?答：目前采用的方法如果经验证表明可行，则可以继续使用该方法。
4.微生物方法学验证时，培养时间是否跟样品日常检验所培养时间一致?答：应该一致。
5.微生物限度验证时，如果一个方法只有金葡回收率达不到要求，该方法时是否可以用来做细菌霉菌的检测方法?答：按药典的规定，一个计数方法通过验证，是指所有试验菌的回收率均达到要求。
如果采用各种方法以及方法的组合仍无法使金葡回收率达标，则可以采用使金葡回收率最高的方法作为计数方法。
6.薄膜过滤的冲洗量不能超过1000ml，我公司的喹诺酮类产品原来的方法是每张膜冲洗量为1500和2000ml，请问有没有合适的方法将冲洗量降至1000，各菌的回收率仍能符合规定?答：有几种办法可以降低冲洗剂的用量：1)降低接触滤膜的供试品的浓度;2)改进冲洗的方式，如少量多次地冲洗、降低蠕动泵的转速等;3)添加中和剂，如高价金属离子。
7.微生物限度检查法规定，技术方法验证时，采用上述方法若还存在一株或多株试验菌的回收率达不到要求，那么选择回收率最接近要求的方法和试验条件进行供试品检验。
请问，上述方法是指仅通过一种方法还是一定要通过几种方法联用的?答：应该要把可能采用的所有方法包括方法联用都进行验证。
8.供试品不溶于稀释剂，同时又有抑菌性，限度检查时应如何消除抑菌性?答：采用低速离心的方式，尽可能把供试品去除干净，取离心后的上层液，进行薄膜过滤。
中国药典2020微生物限度检查
中国药典2020微生物限度检查
中国药典2020中对微生物限度的检查要求如下：
1.总菌落数限度：需满足以下要求：
- 不应含有大肠埃希菌或粪链球菌。
- 对无菌制品，其总菌落数规定不应超过制定的标准。
- 必须符合产品特性和验证的任何特定需求。
2.酵母和霉菌限度规定：
- 对无菌制品，每克中不应含有可繁殖的酵母和霉菌。
- 对非无菌制品，每克中不应含有可繁殖的酵母和霉菌。
建议
进行采样和检测多数生物制品样品。
3.大肠菌群限度规定：
- 每克中不应含有大肠菌群。
对某些产品（如消毒剂指定的测定），可以采用其他方法或者规定了合适分析方法的产品例外。
4.针对特定微生物的检查：
- 对某些产品，药典可能要求进行特定微生物的检查，以确保
产品的安全性和质量。
需要注意的是，这只是中国药典2020中关于微生物限度检查
的一般要求，具体的规定可能因产品类型和特性而有所不同。
因此，在进行微生物检查时，需根据产品的特定需求和合适的分析方法进行操作。
在实际生产和质量控制过程中，还需严格按照相关法规和标准进行操作，确保产品质量和安全性。
微生物限度检查的影响因素探讨
微生物限度检查的影响因素探讨1. 引言1.1 微生物限度检查的影响因素探讨微生物限度检查是用于评估食品、药品和环境中微生物污染程度的重要检验项目。
在微生物限度检查中，各种因素会影响检测结果的准确性和可靠性。
探讨微生物限度检查的影响因素对于保证产品质量和公共健康至关重要。
微生物限度检查的重要性在于它可以帮助监控产品的卫生质量，减少风险的传播和交叉污染。
通过及时检测并控制微生物污染，可以有效预防食源性疾病和药品交叉感染的发生。
影响微生物限度检查的因素包括样品的采集和保存条件、检测方法的选择以及环境因素的影响。
样品采集时的操作规范和保存条件将直接影响样品中微生物的数量和种类。
检测方法的选择会影响检测的灵敏度和特异性，进而影响结果的准确性。
环境因素如温度、湿度等也会对微生物的生长和繁殖产生影响。
了解并控制微生物限度检查的影响因素是确保产品卫生质量的重要措施。
只有综合考虑各种影响因素，并采取相应的控制措施，才能确保微生物限度检查结果的准确性和可靠性，从而保障公众健康和安全。
2. 正文2.1 微生物限度检查的重要性微生物限度检查是用于评估产品中微生物污染水平的重要分析方法。
微生物污染可能导致产品腐败、变质和引发疾病等问题，因此对于食品、药品、化妆品等产品的微生物限度检查至关重要。
微生物限度检查可以确保产品的质量和安全性。
通过对产品中微生物数量的测定，可以及时发现并控制可能存在的细菌、霉菌、酵母菌等微生物污染，从而保障产品不受微生物污染的影响，减少对消费者造成的潜在危害。
微生物限度检查也是对生产过程的质量控制的重要手段。
通过对原材料、中间产品和最终产品进行微生物限度检查，可以及时发现生产环节中的潜在问题，及时采取措施避免污染的发生，确保产品的质量稳定和一致性。
微生物限度检查在保障产品质量和安全、确保生产过程质量控制方面具有重要意义。
只有严格执行微生物限度检查标准，控制好微生物污染的水平，才能保障产品质量，提升企业形象，赢得消费者的信任。
微生物限度和无菌检查方法验证中存在的问题
86 I FOOD INDUSTRY I理论THEORY微生物限度和无菌检查方法验证中存在的问题文 郭焕君河北省清河县食品药品检验检测中心的检查上，要根据药品的成分和特点进行分类检查，如对于无抑菌成分和作用的品种，就可按照常规方法进行验证；而对于有抑菌成分和效果的药品，则要根据其菌株特点进行分类验证。
三、方法验证资料尚未实现资源共享方法验证资料是反映药厂对药品的检测质量以及微生物控制效率的总结性文件。
但在实际的检验和审核工作中，由于方法验证资料的上交和共享中牵扯到了大量的人力、物力以及资金的投入，导致许多检验机构在实际的资料审核过程中，为了降低成本，减少工作任务，而忽视了方法验证资料共享的重要性。
并且，还有一部分药厂为了隐瞒自身的药品质量问题，故意拖延方法验证资料时间，从而导致药品的质检工作存在一定程度的纰漏，药品的微生物限度和无菌检查工作不符合规定。
为此，药品监督管理部门必须重视强化方法验证监督管理，严格要求药厂提供准确、可靠的方法验证数据，实现方法验证数据的实时共享，有效保障药品的安全性。
总结总而言之，药品的无菌检查和微生物限度检查是检验药品安全性和质量的重要工作。
为了能够确保药厂产品的安全性和质量，促使我国医疗事业实现可持续性发展，必须重视方法验证工作的实效性，及时反思与改正，以确保药品微生物限度和无菌检查方法验证工作有序展开。
由于目前的药品类型各不相同，其中有许多药品本身就带有一定的杀菌和抑菌作用，这就导致了在实际的微生物限度和无菌检查时会出现假阴性的检测结果，从而严重影响药品检测的真实性。
因此，为了能够更好地完善我国药品的微生物控制工作，除了要针对药品的特点进行差异化检测外，还应加强检测人员专业素养、优化方法验证形式。
一、检测人员专业能力有待加强在药品的微生物限度和无菌检查工作中，参与检测的工作人员是影响药品检测真实性的决定性因素。
由于这是一项程序较为复杂和烦琐的工作，相关工作人员不但要有一定的微生物专业基础知识，同时还要具备一定的操作技能。
无菌检测和微生物限度常见问题
无菌检测和微生物限度常见问题1、问:做无菌验证时阳性对照菌是怎么加入的？可以在加完培养基后用无菌的注射器把菌液注入吗？答:严格的说是要在最后一遍冲洗液中加入阳性对照菌的,这主要是考量滤膜对于阳性菌的截留性～但是滤器如果可以提供滤膜对于阳性菌的充分截留的话在最后的培养体系中加入阳性菌也是未尝不可的.如果供试品没有抑菌作用,可以在加完培养基后用无菌的注射器把菌液注入,摇匀如果供试品有抑菌作用,正如安哥洛卡所讲,在最后一次冲洗液中加入阳性对照菌,摇匀,抽虑,加培养基.无菌检查，加入阳性的方法可以有许多种，可以根据个人的习惯。
只是注意：1、避免人为污染。
2、阳性菌加入数量2、问:离心沉淀法的原理、操作和注意事项是什么?答:原理:利用沉降系数的差异将供试品和微生物进行分离;操作:取规定量的供试液，3000转/分离心20分钟（供试液如有沉淀，先以500转/分离心5分钟，取全部上清液再离心），弃去上清液，留底部集菌液约2ml，加稀释剂至原规定量.注意事项:真菌由于沉降系数比较小,500r/min离心5min，黑曲霉、白色念珠菌回收率为20%,因此其检查不适宜用低速离心沉淀法.3、问:稳定性实验的微生物及无菌检查,是否每次都要做?答:是;原因:一实验期内可能会染菌;二灭菌后微生物并不是就彻底"死亡",有些成为碎片,这些碎片在一定的条件和时间下,可以自我修复而复活.三稳定性的考察，也应包括药品有效期的考察，在此期间所有的项目都应是合格的，无菌也是其中之一，如果在有效期内无菌不合格，也可以说明该药品存在一定的缺陷，至少，有效期有问题。
4、问:眼部给药制剂如何做卫生学检验?答:液体制剂:无菌检查;半固体及固体制剂:微生物限度检查5、问:滴眼液的微生物限度为何进行无菌检查?答:一滴眼剂产品系按照无菌工艺生产且终产品为灭菌产品,故其成品的微生物质量应要求统一为无菌;所以,滴眼剂产品的临床合理用药应与其卫生标准要求一致,即将其微生物质量要求统一为无菌,显然更为合理;二滴眼剂的微生物质量要求为无菌,是与各国药典在滴眼剂要求上的统一,及对《中国药典》此项规定合理性的补充及完善等方面看,滴眼剂成品的微生物质量要求统一为无菌具有必要性。
中药口服制剂微生物限度检查不合格的原因及解决办法
中药口服制剂微生物限度检查不合格的原因及解决办法这几年中药生产企业执行GMP 的力度愈来愈强，提升了产品质量。
但同时也出现了一些意想不到的问题，如一些企业发生了产品微生物限定检查不合格的质量事故。
2010版中国药典提高了制剂微生物限度检查标准，如增加培养基适用性检查，延长细菌培养时间。
GMP( 2010 年修订) 第四十八条要求，口服液体和固体制剂暴露工序区域，应当采取适当的微生物监控措施。
因此对中药制剂微生物限度超标进行有针对性的分析并提出解决问题的措施尤为重要，下面围绕中药生产的一系列环节分析微生物限度检查不合格的因素。
由于国家强制推行GMP，中药生产企业的厂房、设施等硬件设施越来越先进，软件管理水平也提升较快。
但一些设备如喷雾干燥、一步制粒大大缩短了物料干燥时间，除细菌、霉菌、控制菌的效果却不如烘房。
另外洁净区密闭加恒温恒湿的空气非常适合微生物的生长和繁殖。
人员是药品生产中主要的污染源，人体表面、衣服的污染物随着人的各种动作也会散发出来。
所以中药生产中药防止污染，首先要从人抓起。
进入生产区域的人员应与房间面积相匹配。
如人员数量较多，语言交流、咳嗽生产操作等活动会导致人体表面、衣服排出大量的污染物，这些污染物随着人体动作散发在空气中，增加了污染药品的可能性。
这些人员包括QA 检查员、设施检修人员、外单位检查参观人员等，一部分这类人员对微生物知识不甚了解，不规范的穿着、维修极易给生产区域带来新的污染源。
所以对非生产区域操作人员进行有关微生物、洁净区的培训很有必要。
制剂生产区域的人员应具有较高学历，应易接受内容繁多的微生物知识，并有较强的洁净生产意识。
对操作人员进行有效培训是很有必要，这些培训的着重点包括洗手、手消毒、洁净服的穿戴要求等。
规范化的操作能大大减少人直接或近距离与药品接触而带来的污染。
但是在实际操作中，操作人员操作存在诸多问题，如规范操作意识不强、洁净服不穿或穿戴不规范、用手直接接触最终灭菌物料、大声闲聊及野蛮操作。
微生物限度检查的影响因素探讨
微生物限度检查的影响因素探讨微生物限度检查是一种常见的质量检测方法，可用于检测食品、药品、饮用水等样品的微生物污染情况，以确保它们符合国家和国际标准要求，保护消费者的健康和安全。
然而，微生物限度检查的结果受多种因素的影响，需要进行综合分析和评价。
本文将探讨微生物限度检查的影响因素及其相关问题。
一、样品收集和保存样品的收集和保存是微生物限度检查的前提条件，其合理性对检测结果有重要影响。
收集时应遵循采样原则，如随机采样、同一批次采取多点采样、样品之间保持一定距离等，尽可能真实反映污染情况。
保存时应注意温度、湿度、氧气、光照等条件，并尽快送到实验室进行检测，以避免因保存不当导致结果失真。
二、抗菌剂的使用在微生物限度检查中，涉及到样品的富集和分离过程，常常需要使用抗菌剂，如青霉素、链霉素、氯霉素等。
这些抗菌剂对微生物生长具有抑制作用，可有效提高检测灵敏度。
然而，抗菌剂的选择、浓度和作用时间等因素会对检测结果产生影响，若使用不当，不但无法保证检测结果可信可靠，还可能导致假阴性或假阳性结果的出现。
三、实验方法的选择微生物限度检查包括总微生物数、大肠杆菌、真菌和酵母菌等指标，不同指标的检测方法也有所不同。
例如，总微生物数可采用平板计数法或滤膜法等，大肠杆菌可采用膜过滤法或培养法等。
实验方法的选择需要考虑检测灵敏度、特异性、重复性、经济性等因素，以保证检测结果的准确性和可靠性。
四、实验条件的控制实验条件的控制对微生物限度检查的结果也有很大影响。
例如，实验室温度、湿度、光照等条件应该控制在一定范围内，以保证实验环境的稳定性和一致性；实验室设备的选择和维护也很重要，例如，平板计数器、显微镜、培养箱等设备应该定期维护和校准，保持其精度和准确性。
浅谈药品微生物限度检查存在的问题
浅谈药品微生物限度检查存在的问题摘要：非无菌药品在生产、运输、储存等环节可能会引入微生物污染。
微生物限度检查是非无菌药品质量标准检查项下内容，将是检查药品中微生物污染状况，保障用药安全性和有效性的重要方法。
药品中很多组分都有抑菌作用，从而干扰检查结果的准确性，因此中国药典规定微生物限度检查所选方法的适用性必须要经过确认。
方法适用性试验影响因素很多，其中标准菌株的保存、活化、使用、加菌回收是方法适用性试验的操作难点和关键点之一。
关键词：药品微生物限度检查存在的问题引言制药行业中涉及的微生物检验主要分为生产过程监控和出厂检验两部分。
生产过程监控包括原辅料和中间产品的检验，制药用水的监控，微生物药物的发酵菌种等的鉴定分析，环境微生物的监控、调查和溯源；出厂检验包括终产品的无菌检查，非无菌产品的微生物限度检查，微生物菌株等的鉴定分析。
微生物检测分析方法包括微生物的检测、筛选、计数和鉴定等。
由于传统微生物检测方法简单有效且相对成本低，适用于大部分微生物检测实验室，同时这些方法也存在检验周期长和不能实时反馈工艺和产品现状等问题，成为生产过程微生物质量实时监控及快速放行的障碍，不完全适用于基于过程控制和风险评估的现代化制药行业管理模式。
一、检验方法根据《中国药典》（2020版）[1101]以及相关药品检验要求，对药品进行微生物限度检验，检验内容包括需氧菌总数、霉菌，酵母菌数、控制菌检验，详细记录各种误差发生情况，同时分析影响检验结果误差的主要因素。
在误差影响因素分析中，按照以下步骤进行分析：（1）确认一级影响因素指标，具体包括检验人员（“人”）、检验器具与设备（“机”）、检验材料（“样”）、检验方法（“法”）、检验所处的环境（“环”）；（2）确认二级影响因素指标，在一级指标的基础上进行细化二级指标，同时排除一些不可控因素，如空气质量、材料、实验室来源菌控制等。
其中，“人”包括检验人员的质量控制意识和操作技能水平；“机”包括器皿、设备的洁净度以及设备的性能；“样”包括样品污染程度、活体易变性、抑菌成分、原材料含菌量、原菌液材料质量；“法”包括操作技术标准、材料控制标准、实验室环境质量控制标准；“环”包括培养基质量控制、菌悬液的质量、验证用菌的传代次数、检验技术问题、稀释准确性、菌悬液培养时间控制、菌液保存质量。
微生物限度检查若干问题3篇
微生物限度检查若干问题第一篇：微生物限度检查的基本原则和方法微生物限度检查是指通过各种方法检测食品、药品及其原料中的细菌、霉菌、酵母菌等微生物的数量或存在情况，以判断产品的微生物污染水平和卫生质量。
微生物限度检查是食品、药品生产、流通和消费环节中不可缺少的重要环节，对保障公众健康具有重要的意义。
本文将就微生物限度检查的基本原则和方法进行详细介绍。
一、微生物限度检查的基本原则1.安全原则微生物污染严重影响人体健康，微生物限度检查的首要原则是保障人体健康，检查结果应该以公众健康安全为首要考虑。
另外，在进行检查时，要严格遵守卫生要求，保证检验的环境和器具的无菌。
2.科学原则微生物限度检查过程中，不能凭主观感觉进行判断，必须依据科学规律和实验数据进行判断和分析，保证检测结果的科学可靠性。
3.普遍适用原则微生物限度检查应具有普适性和适应性，考虑到不同类型的食品、药品的制造、存储、运输等都需要进行微生物检查，检查方法应该既具有通用性，又具有具体性，能够适应多种情况的检测需求。
二、微生物限度检查的方法微生物限度检查主要是依靠人们对细菌、真菌、酵母菌等微生物的数量和种类进行检查，以判断其污染程度和卫生质量。
下面将介绍几种常见的微生物限度检查方法。
1.计数法计数法是指使用培养基将微生物生长，然后对生长的微生物进行计数并量化其密度的方法。
计数法常用于数值化微生物的种类和密度，包括总菌落数、大肠菌群数、霉菌和酵母菌数等。
2.微生物培养法微生物培养法是指采用适宜的培养基将微生物菌株培养到可见菌落，然后通过菌落形态、色素产生、臭味等特征鉴定微生物的种类和数量。
3.快速检测法快速检测法是指在不同的环境中、利用快速育种培养和化学检测等技术快速检测微生物污染情况。
这种方法具有快速、灵敏的特点，适用于很多食品、药品制品的检测。
综上所述，微生物限度检查是保障公众健康的关键环节，其基本原则是安全、科学和普适性。
微生物限度检查的方法有计数法、微生物培养法和快速检测法等。
微生物限度检查若干问题
微生物限度检查若干问题微生物限度检查若干问题微生物限度检查是对非规定灭菌制剂及其原、辅料受到微生物污染程度的一种检查方法，是药品微生物学检验的重要容之一。
中国药典2000 年版二部附录幻J微生物限度检查法”、《中国药品检验标准操作规》（2000 年版）及参考书《药品微生物学检验手册》均做了详尽的阐述。
下面对几个比较重要的问题，谈一点工作学习体会，仅供参考。
一、实验室要求开展微生物限度检查工作，首先要按照《药品检验所实验室质量管理规》及《药品生产质量管理规》的要求，建立一个布局合理，使用方便，操作安全的实验室，并且配有完善的实验设施和管理制度。
微生物限度检查、无菌检查、抗生素微生物检定实验室以及接种室（接种对照菌及菌种传代）均应严格分开。
（一）无菌室：1 结构与要求：最好设在二楼以上（防潮、防霉、采光好），面积不超过10 平方米，高度不超过24 米，由2 个缓冲间和操作间组成。
缓冲间与操作间之间应有样品传递窗，出入操作间和缓冲间的门不应直对。
无菌室应六面光滑平整，能耐受清洗消毒，墙壁与地面、墙壁与天花板连接处应呈凹弧形，无缝隙、无死角。
无菌室光照应不低于300 勒克斯，缓冲间和操作间均应装有紫外线杀菌灯2-25w/m3 作空气消毒用。
紫外线波长200-300nm 者''具有杀菌作用，其中以265-266nm 最强，这与DNA 的吸收光谱围一致。
其杀菌机理可能是在DNA 中引起胸腺嘧啶双聚体形成，从而干扰DNA 复制，导致细菌变异或死亡。
紫外线杀菌灯1m 以距离杀菌效果最佳''每次开灯照射时间为20min。
其缺点：穿透力弱，一纸可以挡住，不能穿透固体物，对人的皮肤眼睛有损伤，所以紫外线灯开关应装在无菌室外便于开关。
2温度、湿度：温度应控制在18-26C ”相对湿度40-60'操作间或净化工作台的洁净空气应保持对环境形成正比''不低于49Pa。
3 操作间：应安装空气除菌过滤层流装置，操作间不应安装下水道，洁净度不低于1 万级，净化工作台局部应为100 级。
药品微生物限度检查不合格的原因及预防措施
药 品微 生 物 限度 检 查 不合 格 的 原 因 及 预 防措 施
蒲 艳 （ 黑 龙江哈 星药业有 限公 司 黑龙江鹤 岗 １ ５ ４ １ ０ １ ） 摘 要： 众所 周知 ， 药品不 同于其他 商品 ， 国家对药 品的控 制 非常严格 ， 各项指 标都要合格 才允许 出厂， 微 生物限度 检查 就是其 中之一 。 近 年来 ， 新版ＧＭ Ｐ为 了更好 地保证 药品的质量 ， 时截 生物限度 的检 查也越来越 严格 ， 药品生产 企业也 加大 力度 ， 严格把 关， 一旦微 生物限度检
下降 和微生物污 染 ， 固 体 培 养 基 的Hale Waihona Puke 再 融 化 只允许一次 。
微 生 物 限 度 检 查 法 是 检 查 非规 定 灭 菌 （ ３ ） 制备含生药材粉 的药品 ， 应 对 生 药 制剂 及其原料 、 辅 料 受 微 生 物 污 染 程 度 的 材 粉 先 进 行 灭 菌 处 理 。 采 用 紫 外 线 照 射 法 方法 。 检 查 项 目包 括 细 菌 数 、 霉 菌数 、 酵 母 或 高 温 干 燥 法 灭 菌 。 菌数 及 控 制 菌 检 查 。 药 品 检 验 结 果 出 现 不 （ ４ ） 微 生 物 检 验 员要 确 保 检 测 方 法 正 合格 现 象 ， 大 多 出 现 在 每 个 剂 型 的 初 次 配 确 ， 使 菌落 计数 结果 真 实 可 信 。 制后 ， 原 因有 很 多 。 通过 多年 在 药 品生 产 与 （ ５ ） 药 品生 产 操 作人 员和 检 验 人 员要 严 检 验 工 作 中的 学 习 ， 总 结 出 了 一 些 药 品 微 格 执 行ＧＭＰ 操作规程 ， 上 岗前 进 行培 训 。 建 生 物 限 度 检 查 不 合 格 的 原 因 及 预 防 措 施 立 牢固的无菌观 念 ， 不 要 认 为 微 生 物 限 度 范 围比 较 宽 ， 因此 操作 马虎 ， 这 样 容 易 造成 １ 药品微生物限度检查不合格 的原因 供试 品的再次 污染 ， 不 能 真 实 地 反 映 供 试 １ ． １生 产设备 品的染菌情况 。 所 以 检 验 者 在 检 验 过 程 中 经 常使用的 生产设 备清洗 不彻底 ， 灭 的 每 一 个 环 节 ， 每 一个 操作 ， 都 要 认 真 谨 菌不充分 ， 这 些 都 会 使 生 产 的 药 品受 到 污 慎 ， 对样 品负责 。 染 。 （ ６ ） 检 验 者 每 次 操 作 前 的消 毒 处 理 必 须 １ ． ２生 产工序 彻底 ， 不留死角 ， 对 检 验 所 用 器 具 根 据 材 料 在药品生产 中， 要经过配料 、 制 粒 等 许 的性 质 进 行 相 应 的 灭 菌 。 每 年 对 干 热 灭 菌 多 个环 节 ， 会 受 到 各 种 因 素 的影 响 ， 容 易 使 法 和 湿 热 灭 菌 法 所 使 用 的 设 备 进 行 验 证 ， 药 品 的 质量 发 生 改 变 。 如 湿 度太 大 ， 不 利 于 干 热 灭 菌 法一 般 用 电 热恒 温 干 燥 箱 灭 菌 ， 制粒 ， 也易使微 生物繁殖 ； 灭菌方 法不 当， 采 用 生物 指 示 剂 枯 草 芽 孢 杆 菌孢 子 进 行验 会 使 微 生 物 限 度检 查 受 到影 响 。 证 ； 湿 热 灭 菌 法 一 般 用 高 压 蒸 汽 灭 菌 器 灭 １ ． ３ 中药材 菌， 采 用 生 物 指 示 剂 嗜 热 脂 肪 杆 菌 孢 子 进 中药制剂 多以生 药材粉 制备 。 生 药 材 行验 证 。 打开药品包装的工具 ， 如 剪 刀 等也 粉没有 经过消毒处 理 ， 所 以 在 对微 生 物 限 应 消 毒 ， 检 验用 的 器具应 清洗 干净 ， 再 灭 度检查过程 中 ， 常会出现不合格现象 。 菌， 吸管放液时不得接触液面 ， 样 品 必 须放 １． ４人员 尽。 这 些环 节 都 有 可 能 污 染 药 品 ， 导 致 实验 生 产操 作 人 员 在 药 品 生 产 过 程 中 及微 误 差 ， 所 以 要 根 据 具 体 情 况 建 立 科 学 的标 正 确 熟 练 的 掌 握 无 菌 操 作 生 物 检 验 员在 微 生 物 检 查 过 程 中 ， 如 果 操 准 操 作 规 程 ， （ ７ ） 化 验 室 无 菌 室的 操 作 间 内不 应 安 装 作不 当都有可 能污染药品 ， 导 致 药 品 微 生 物 限 度检 查 不 合 格 。 下水道 ， 照 明灯 应 嵌 在 天 花 板 内 ， 室 内 墙 壁 应平整光滑 ， 室 内温 湿 度 、 压 差 和 洁 净 级 别 １ ． ５检验 方法 微 生 物 检 验 方 法 出现 了错 误 导致 无 法 应 准 确 无误 ， 净化 工作 台的洁净 度属于 Ｂ 级， 无 菌 室 属于 Ｃ 级， 固体 制 剂 车 间 洁 净 区 得 出真实的结果 。 １ ． ６环境 属于 Ｄ级 ， 定 期 检 测 化 验 室净 化 工 作 台 、 无 药 品 生 产 的 洁 净 区和 药 品检 验 的 微 生 菌 室 和 车 间洁 净 区 的 沉 降 菌 和 悬浮 粒 子 。 悬 浮 物 限 度 检 查 室 及 操 作 台 的 环 境 监 测 必 须 符 还 应 每 年 一 次 连 续 三 次 进 行 沉 降 菌 、 合规 定 ， 环 境 监 测 的 项 目包 括 沉 降 菌 检 测 粒 子 检 测 ， 测 试 人 员必 须 穿 戴 符 合 环 境 洁 静态测试时 ， 室 内 测试 人 员 和悬浮粒子检测等 ， 如 果 有一 项 不 合 格 ， 都 净 度 的无 菌 服 。 有可能导致微生物 限度检查不合格 。 不得多于两 人 。 检 测 结 果 不 合格 时 不 得 使 用， 重新消毒 ， 再 次 检验 合格 后 ， 方可使用。 （ ８ ） 微生 物 检 验 必 须 要 有 标 准 菌 株 且 生 ２ 药品微生物限度检查不合格的预防措 施 物学特征 必须典 型稳定 ， 并 对 菌 种 的 保 存 对 菌种 的 购 买 、 （ １ ） 药 品生 产 的 洁 净 区 和 药 品 检验 的微 与 管 理 制 定标 准 操 作规 程 ， 领用、 确认 试 验 以及 销 毁 进 行 详 细 记 生物 限 度 检查 室 ， 必须定期消毒 ， 如采 用臭 保 存 、 氧灭菌等。 洁净室每次使用完毕清洁干净 ， 录。 （ ９ ） 现 在 培 养 基 配 制 大 多使 用干 粉 培 养 生产期间 ， 每周臭氧消毒一次 。 对 药 品 的 生 使用方便， 但极易吸潮 ， 故 需 妥善 保 存 ， 产设 备 和 检 验 设备 每 月交 替使 用０． ２ ％新 洁 基 ， 尔灭溶液和７ ５ ％乙 醇 溶 液 进 行 日常擦 拭 消 用 后 需 将 盖 盖 紧 ， 并存放于 阴凉 、 干燥处 ， 毒。 擦 拭 操 作 台和 墙 壁 的 丝 光 毛 巾不 能 混 保 证 培 养 基 的 质量 ， 若 出 现 结 块现 象 ， 请 勿 用， 应严格 分开。 使用 。 新 鲜 配制 的 培 养 基 应 在 ２ ℃ ～２ ５ ℃ 避 但不 得冻结 ， 保存时 间不得超过 ３ （ ２ ） 控 制 制 备时 间 ， 如提 取 时 间 、 搅 拌 时 光 保 存 ， 每一批 培养基 均要进行适 应性检查试 间都 不能 太 长 ， 微 生 物 限 度 检 验 时 间 也 要 周 。 验。 为 了避 免 因过 度 受 热 造 成 培 养 基 质 量 控制在 ｌ ｈ 之内 ， 以防染菌。
微生物限度检查的影响因素探讨
微生物限度检查的影响因素探讨微生物限度检查是药品、食品、化妆品等领域中常见的一项质量控制手段，用来检测样品中微生物的种类和数量，以评估其是否满足卫生标准和质量要求。
微生物限度检查的结果直接关系到产品的质量和安全，因此影响因素的探讨对于提高检测的准确性和可靠性具有重要意义。
影响因素一：采样方法采样方法是微生物限度检查中的重要一环，不恰当的采样方法可能导致检测结果的不准确。
在采样时，应选择合适的取样位置，并且避免外界环境的污染。
采样器具和容器的选择也应当符合规定，以避免对样品的二次污染。
影响因素二：检测设备和试剂微生物限度检查的设备和试剂的质量直接影响着检测结果的准确性。
现代微生物限度检查中常用的设备包括生物发酵仪、膜过滤架、培养基接种平板等，这些设备都需要进行严格的校准和验证，以确保其达到检测要求。
试剂的质量也是影响因素之一，不合格的试剂可能导致检测结果的变异。
影响因素三：环境因素微生物限度检查所处的环境条件也会对检测结果产生影响。
温度、湿度、光照和空气质量等因素都可能影响微生物的生长和繁殖，从而影响检测结果的准确性。
在进行微生物限度检查时，需要注意控制环境因素，确保其不会对检测结果产生干扰。
影响因素四：样品处理样品的处理过程也会对微生物限度检查的结果产生影响。
在处理样品时，应当避免外界的污染，并且采取合适的杀菌方法，以避免对样品中微生物的影响。
样品的保存和运输条件也需要得到充分的重视，以确保样品在检测过程中的真实性和准确性。
影响因素五：操作人员技术水平操作人员的技术水平对微生物限度检查的结果影响巨大。
操作人员需要具备丰富的检测经验和专业的技术水平，才能保证检测的准确性和可靠性。
在进行微生物限度检查时，应当重视操作人员的培训和资质要求，以确保其能够准确地进行检测操作。
总结而言，微生物限度检查的结果对于产品的质量和安全具有重要的意义，因此影响因素的探讨对于提高检测的准确性和可靠性非常重要。
在进行微生物限度检查时，应当重视采样方法、检测设备和试剂、环境因素、样品处理和操作人员技术水平等因素，以确保检测结果的准确性和可靠性。
微生物限度检查应注意的若干问题
微生物限度检查应注意的若干问题殷建国(内蒙古巴盟药品检验所,015000)中图分类号:R927 33 文献标识码:B 文章编号:1002-7777(2004)07-0456-01除微生物制剂外,药品微生物限度检查与药品中有效成分的含量测定显著不同,其检查对象具有以下特点:(1)活体易变性:菌细胞在药品中处于不稳定状态,可随存放时间延长死亡,也可在适宜条件下繁殖。
(2)分布不匀:除产品在生产前期污染外,通常是局部的。
一批产品中不同批瓶(盒)中污染状态会出现差异,其污染量特别是致病菌通常是少量的。
正确的检验有赖于合理的抽样方法。
(3)多数处于受损状态:药品中污染的微生物,受到原料处理、加工等过程的影响,或者药品本身对微生物的抑杀作用,使其受到一定程度的损伤,这些受伤的微生物用一般的方法检查,往往会出现假阴性或计数偏低的结果。
(4)生态环境多样复杂:污染菌的来源多样,种类多样,加之药品种类繁多、剂型成分复杂,同一种菌在不同的药剂中所测得的结果各不相同。
微生物限度检查必须遵循以下原则:(1)样品正式检验前必须保持原污染状态。
防止第二次污染和防止微生物的繁殖、死亡。
(2)应有适当的供试液制备方法。
供试液的正确制备是保证检查结果准确可靠的前提。
(3)检验方法准确可靠。
(4)检查结果判断无误。
基于以上原因我们在日常工作中要注意以下几个方面:从样品接触稀释剂开始至注皿应在1小时内完成,对多批样品应分段接种注皿。
稀释方法:吸液在离液面2 5cm处,放液离第二管液面不高于1cm,管内混合吹打不少于10次,瓶内振荡混合不少于15秒。
注皿量:培养基15ml厚度4 0mm,培养基薄,水分易散失,不利于细菌生长;培养基厚,需氧菌不利于生长。
当菌落细小不宜辨别时,应适当延长培养时间。
培养基的质量必须保证,否则影响检测结果的准确性。
总之,作好微生物限度检验,检验人员的职业品德和业务素质至关重要。
要建立科学的质量保证体系,是检验结果正确可靠的基本保证。
微生物限度检查的影响因素探讨
微生物限度检查的影响因素探讨微生物限度检查是指对药品或食品等产品进行微生物数量的检测，以确定其是否符合卫生标准和质量要求。
由于微生物数量的多寡可以影响产品的质量和安全性，因此微生物限度检查是极其重要的。
然而，微生物限度检查的结果受到多种影响因素的影响，需要在检查过程中加以注意和控制。
1.样品采集和制备样品采集是微生物检查的第一步，采样误差和制备不良会影响最终的检测结果。
采样误差包含了采样方法、采样器具和采样时间等因素，而制备不良包含的是样品处理的方法、提取物的选择等因素。
因此，在收集样品时，必须使用合适的方法和器具，并选择适当的提取物，以避免样品的误差和变化。
2.环境因素环境因素是指检测过程中的物理、化学和微生物学因素。
在生产中，环境污染和工艺条件的不良会导致微生物数量偏高或偏低。
例如，工艺条件不良会影响微生物生长的速率和数量，从而影响最终的检测结果。
因此，在进行微生物限度检查时，必须尽可能地控制环境中的不良因素，以保证检测结果的准确性和可靠性。
3.设备和试剂检测设备和试剂的质量和功能对微生物限度检查的结果也有影响。
检测设备必须具备高精度、高效率和可靠性，而试剂的纯度和制备质量必须符合标准。
因此，必须在检测前对设备和试剂进行严格的质量控制，确保其工作状态和质量。
另外，设备和试剂的存储条件和保养也会对结果产生影响，因此要注意存储条件和注意设备的保养。
4.测试流程测试流程包括准备检测物、准备培养基、培养细菌、计数生长的菌落数量等过程。
测试流程的每一步都可能影响最终的检测结果。
例如，不恰当的准备培养基会影响微生物的生长，从而影响菌落计数的准确性；而培养细菌或测试时间不当，也会影响细菌的生长和数量。
因此，在测试过程中，每一步都要严格按照操作流程进行，并进行仔细的检查和评估。
5. 检测标准检测标准是指检测方法、检测项目和检测标准等。
每个国家和地区的检测标准都有所不同，因此在进行微生物限度检查时，必须要遵守当地检测标准。
药品微生物检验常见问题
药品微生物检验常见问题在药品生产和销售过程中，微生物检验是非常重要的环节。
它可以有效防止药品受到微生物污染，确保药品的质量和安全性。
然而，在进行微生物检验时，常常会遇到一些问题。
本文将介绍常见的药品微生物检验问题及其解决方法。
一、样品处理在微生物检验过程中，样品的处理是非常关键的。
常见的问题包括样品提取不当、样品保存条件不当等。
在样品提取过程中，应注意采样工具和容器的清洁，并避免外界环境的污染。
同时，在样品保存过程中，应确保温度适宜，避免细菌的生长繁殖。
解决方法：正确选择和使用样品提取工具，并在采样前进行消毒处理。
在采样后，应立即将样品送至实验室，并确保保存条件适当。
二、培养基选择培养基的选择对微生物的检验结果具有重要影响。
常见的问题包括培养基成分不合适、菌落生长过多等。
选择适当的培养基可以提高检测的准确性，并减少假阳性和假阴性结果的发生。
解决方法：根据待检测微生物的特点和需求，选择适当的培养基。
并在使用前，确保培养基的质量和保存条件符合要求。
三、试验环境和设备试验环境和设备的卫生状况对微生物检验结果也具有重要影响。
常见的问题包括实验室环境污染、设备清洁不彻底等。
不良的试验环境和设备可能导致微生物的污染，从而影响检验结果的准确性和可靠性。
解决方法：保持实验室环境的良好卫生状况，定期进行清洁消毒。
对于使用的设备，要进行定期维护和清洁，确保其正常运行。
四、检测方法微生物检验方法的选择和操作也是常见的问题。
不同的方法可能会导致不同的检验结果。
常见的问题包括方法选择不当、操作不规范等。
选择适当的方法并按照规范的操作步骤进行微生物检验是确保检验结果准确可靠的关键。
解决方法：根据检测要求和实际情况，选择适当的微生物检验方法。
在进行检验前，要充分了解该方法的详细操作步骤，并按照规范要求进行操作。
五、结果判读结果的判读也是微生物检验中的一个重要环节。
常见的问题包括判读结果主观性强、判读标准不明确等。
不准确的结果判读可能导致错误的结论，并对药品的质量评估产生误导。
微生物限度和无菌检查方法验证中存在的主要问题探讨
微生物限度和无菌检查方法验证中存在的主要问题探讨摘要：微生物限度和无菌检查是现阶段医药、食品领域必须要强调的内容，因为其对药物安全、食品安全是有重大影响的。
结合社会实践对目前微生物限度和无菌检查工作进行分析，讨论检查方法在利用的过程中存在的主要问题，并就问题的解决方式等做研究与分析，这对于更加专业的开展微生物限度和无菌检查工作有突出的现实意义。
文章对相关内容进行思考与讨论，旨在为目前社会实践提供指导。
关键词：微生物限度；无菌检查；检查方法；问题；对策食品和药品是人类在社会生活实践中离不开的生活必需品，食品安全、无害的食品或者是药品可以帮助人类塑造健康的体魄，但是如果药品和食品存在问题，那不仅达不到预期的目的，还会对身体造成损害，因此在食品、药品食用的过程中做好安全检测是非常必要的。
微生物限度以及无菌检查是食品、药品安全检查中必须要强调的内容，同时其也是评价食品、药品安全性的重要指标，因此在实践中为了更加客观的反映食品、药品的具体情况，需要做微生物限度与无菌检查。
具体的检查工作开展要采用科学的方法，因为方法的差异会导致结果评价差异，所以重视方法本身的科学性和规范性是非常重要的。
对当前社会实践中的检查方法利用做分析，并基于方法问题讨论检查工作开展的有效策略，这对于当前实践来讲是有显著意义的。
一、微生物限度和无菌检查方法存在的问题对现阶段微生物限度和无菌检查工作进行分析可知，在检查方法利用的过程中存在着非常显著的问题，具体表现在如下几个方面。
第一是检查方法的验证资料存在着缺乏的情况。
在实践中，药品品质控制所利用的一种重要手段是药品抽检，且该手段在药品打假和药品市场净化方面发挥着重要作用。
然而在目前的抽检工作中，不管是微生物限度检查还是无菌检验，均存在其验证资料缺乏的情况，因此监督抽检的部分药品是难以进行全检的[1]。
回顾药品抽检历史可知，在2006年抽检的1700批监督药品中，有469批在微生物限度检查中因为缺乏验证资料而无法对其进行全检，而在无菌检查中，同样存在185批因为验证资料缺乏而无法实施全检的药品，这种情况会导致一些假冒伪劣药品流入市场，其不仅会造成市场药品安全问题，还导致了抽样资源的巨大浪费。
药品微生物限度检查不合格的原因及预防措施
学 术 论 坛210科技资讯 SC I EN C E & TE C HN O LO G Y I NF O R MA T IO N 微生物限度检查法是检查非规定灭菌制剂及其原料、辅料受微生物污染程度的方法。
检查项目包括细菌数、霉菌数、酵母菌数及控制菌检查。
药品检验结果出现不合格现象,大多出现在每个剂型的初次配制后,原因有很多。
通过多年在药品生产与检验工作中的学习,总结出了一些药品微生物限度检查不合格的原因及预防措施。
1 药品微生物限度检查不合格的原因1.1生产设备经常使用的生产设备清洗不彻底,灭菌不充分,这些都会使生产的药品受到污染。
1.2生产工序在药品生产中,要经过配料、制粒等许多个环节,会受到各种因素的影响,容易使药品的质量发生改变。
如湿度太大,不利于制粒,也易使微生物繁殖;灭菌方法不当,会使微生物限度检查受到影响。
1.3中药材中药制剂多以生药材粉制备。
生药材粉没有经过消毒处理,所以在对微生物限度检查过程中,常会出现不合格现象。
1.4人员生产操作人员在药品生产过程中及微生物检验员在微生物检查过程中,如果操作不当都有可能污染药品,导致药品微生物限度检查不合格。
1.5检验方法微生物检验方法出现了错误导致无法得出真实的结果。
1.6环境药品生产的洁净区和药品检验的微生物限度检查室及操作台的环境监测必须符合规定,环境监测的项目包括沉降菌检测和悬浮粒子检测等,如果有一项不合格,都有可能导致微生物限度检查不合格。
2 药品微生物限度检查不合格的预防措施(1)药品生产的洁净区和药品检验的微生物限度检查室,必须定期消毒,如采用臭氧灭菌等。
洁净室每次使用完毕清洁干净,生产期间,每周臭氧消毒一次。
对药品的生产设备和检验设备每月交替使用0.2%新洁尔灭溶液和75%乙醇溶液进行日常擦拭消毒。
擦拭操作台和墙壁的丝光毛巾不能混用,应严格分开。
(2)控制制备时间,如提取时间、搅拌时间都不能太长,微生物限度检验时间也要控制在1h之内,以防染菌。
微生物限度检查若干问题
微生物限度检查若干问题第一部分：引言微生物限度检查是药品生产过程中必不可少的环节，其主要目的是为了保证药品的质量和安全性。
在药品生产过程中，微生物污染往往会对药品的质量造成严重的影响，甚至会对人类的健康造成危害。
因此，对于药品的微生物限度检查也越来越受到重视。
第二部分：微生物限度检查的意义1、保证药品的质量微生物限度检查主要目的是为了保证药品的质量，避免微生物的污染对药品的质量造成影响。
只有经过合理的微生物限度检查，才能保证药品的质量符合国家相关的标准要求。
2、保护患者的健康药品是直接用于人体的物质，如果药品中含有微生物污染，有可能对患者的健康造成危害。
通过微生物限度检查，可以尽可能地保护患者的健康。
3、降低生产成本通过微生物限度检查，可以避免药品在生产过程中由于微生物污染而导致的损失，同时也避免因微生物污染而导致的退货和召回，降低生产成本。
第三部分：微生物限度检查的方法微生物限度检查主要有菌落总数测定法、霉菌和酵母数测定法、大肠杆菌测定法、金黄色葡萄球菌测定法等。
1、菌落总数测定法菌落总数测定法是一种常用的微生物限度检查方法，其过程是将待测样品接种在含有富营养的琼脂培养基上，通过恒温孵育后，计数培养基上生长的菌落数。
2、霉菌和酵母数测定法霉菌和酵母数测定法主要用于检测食品中霉菌和酵母的数量，其过程是将待测样品接种在富含酵母或霉菌菌株的培养基上，通过恒温孵育后，计数培养基上生长的菌落数。
3、大肠杆菌测定法大肠杆菌测定法是一种常用的微生物限度检查方法，其过程是将待测样品接种在含有大肠杆菌菌株的培养基上，通过恒温孵育后，计数培养基上生长的菌落数。
4、金黄色葡萄球菌测定法金黄色葡萄球菌测定法主要用于检测食品中金黄色葡萄球菌的数量，其过程是将待测样品接种在含有金黄色葡萄球菌菌株的培养基上，通过恒温孵育后，计数培养基上生长的菌落数。
第四部分：微生物限度检查的注意事项1、样品的处理样品的处理方法应根据不同的检测方法进行选择，不同检测方法的样品处理方法也不同。
微生物限度检查若干问题
微生物限度检查若干问题微生物限度检查若干问题微生物限度检查是对非规定灭菌制剂及其原、辅料受到微生物污染程度的一种检查方法，是药品微生物学检验的重要容之一。
中国药典2000年版二部附录ⅪJ“微生物限度检查法”、《中国药品检验标准操作规》（2000年版）及参考书《药品微生物学检验手册》均做了详尽的阐述。
下面对几个比较重要的问题，谈一点工作学习体会，仅供参考。
一、实验室要求开展微生物限度检查工作，首先要按照《药品检验所实验室质量管理规》及《药品生产质量管理规》的要求，建立一个布局合理，使用方便，操作安全的实验室，并且配有完善的实验设施和管理制度。
微生物限度检查、无菌检查、抗生素微生物检定实验室以及接种室（接种对照菌及菌种传代）均应严格分开。
（一）无菌室：1结构与要求：最好设在二楼以上（防潮、防霉、采光好），面积不超过10平方米，高度不超过24米，由2个缓冲间和操作间组成。
缓冲间与操作间之间应有样品传递窗，出入操作间和缓冲间的门不应直对。
无菌室应六面光滑平整，能耐受清洗消毒，墙壁与地面、墙壁与天花板连接处应呈凹弧形，无缝隙、无死角。
无菌室光照应不低于300勒克斯，缓冲间和操作间均应装有紫外线杀菌灯2-25w/m3作空气消毒用。
紫外线波长200-300nm者''具有杀菌作用，其中以265-266nm最强，这与DNA的吸收光谱围一致。
其杀菌机理可能是在DNA中引起胸腺嘧啶双聚体形成，从而干扰DNA复制，导致细菌变异或死亡。
紫外线杀菌灯1m以距离杀菌效果最佳''每次开灯照射时间为20min。
其缺点：穿透力弱，一纸可以挡住，不能穿透固体物，对人的皮肤眼睛有损伤，所以紫外线灯开关应装在无菌室外便于开关。
2温度、湿度：温度应控制在18-26℃''相对湿度40-60''操作间或净化工作台的洁净空气应保持对环境形成正比''不低于49Pa。
3操作间：应安装空气除菌过滤层流装置，操作间不应安装下水道，洁净度不低于1万级，净化工作台局部应为100级。
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微生物限度检查若干问题微生物限度检查若干问题微生物限度检查是对非规定灭菌制剂及其原、辅料受到微生物污染程度的一种检查方法，是药品微生物学检验的重要容之一。
中国药典2000年版二部附录ⅪJ“微生物限度检查法”、《中国药品检验标准操作规》（2000年版）及参考书《药品微生物学检验手册》均做了详尽的阐述。
下面对几个比较重要的问题，谈一点工作学习体会，仅供参考。
一、实验室要求开展微生物限度检查工作，首先要按照《药品检验所实验室质量管理规》及《药品生产质量管理规》的要求，建立一个布局合理，使用方便，操作安全的实验室，并且配有完善的实验设施和管理制度。
微生物限度检查、无菌检查、抗生素微生物检定实验室以及接种室（接种对照菌及菌种传代）均应严格分开。
（一）无菌室：1结构与要求：最好设在二楼以上（防潮、防霉、采光好），面积不超过10平方米，高度不超过24米，由2个缓冲间和操作间组成。
缓冲间与操作间之间应有样品传递窗，出入操作间和缓冲间的门不应直对。
无菌室应六面光滑平整，能耐受清洗消毒，墙壁与地面、墙壁与天花板连接处应呈凹弧形，无缝隙、无死角。
无菌室光照应不低于300勒克斯，缓冲间和操作间均应装有紫外线杀菌灯2-25w/m3作空气消毒用。
紫外线波长200-300nm者''具有杀菌作用，其中以265-266nm最强，这与DNA的吸收光谱围一致。
其杀菌机理可能是在DNA中引起胸腺嘧啶双聚体形成，从而干扰DNA复制，导致细菌变异或死亡。
紫外线杀菌灯1m以距离杀菌效果最佳''每次开灯照射时间为20min。
其缺点：穿透力弱，一纸可以挡住，不能穿透固体物，对人的皮肤眼睛有损伤，所以紫外线灯开关应装在无菌室外便于开关。
2温度、湿度：温度应控制在18-26℃''相对湿度40-60''操作间或净化工作台的洁净空气应保持对环境形成正比''不低于49Pa。
3操作间：应安装空气除菌过滤层流装置，操作间不应安装下水道，洁净度不低于1万级，净化工作台局部应为100级。
操作间应准备电子称（感量01g''最大称量300g''乙醇灯''火柴''2碘酊及75乙醇棉球，大、小橡皮乳头，记号笔，灭菌的剪刀，镊子、注射器等。
4缓冲间：应有洗手盒、消毒液、无菌衣、帽、口罩，拖鞋等，不应放置培养箱和其他杂物。
（二）洁净级别及检查方法：通常采用尘粒数及浮游菌数或沉降菌数测定法。
98年国家药监局颁布药品生产质量管理规''把药品生产洁净区空气洁净度划分为四个级别：空气洁净度级别表────────────────────────────尘埃数/立方米活微生物数个洁净级别─────────────────────≥05μm≥5μm浮游菌/立方米沉降菌/皿────────────────────────────100级≤3500≤0≤5≤11万级≤35万≤2000≤100≤310万级≤350万≤2万≤500≤10────────────────────────────尘埃数：用尘埃粒子计数器测定，取样高度离地面1米，间距05-2米''每个测试点连续采样3-5次，仪器显示结果。
沉降菌数测定：无菌室及净化工作台面消毒擦拭后，先启动层流净化装置30min，将营养琼脂平板3个及改良马丁琼脂平板3个直径9cm，置净化台左、中、右各1个''开盖，暴露30min后将盖盖上。
分别在30-35℃培养48h及25-28℃培养72h''细菌和真菌总数不超过1个为100级。
无菌室应在每次操作前后均用01苯扎溴铵溶液或其他消毒液擦拭台面及紫外线照射不到可能污染的死角；用消毒液湿拖地面。
实验室一旦被污染''洁净度达不到要求''可以清洗或更换净化工作台过滤器''甲醛或丙二醇''乳酸熏蒸消毒''方法：支架上放一个烧杯（装少许甲醛，8ml/平方米''下面放一个装有少许乙醇的乙醇灯点燃后，关闭门窗，乙醇用尽后灯自灭，甲醛蒸气充满无菌室，密闭24h。
缺点：甲醛蒸气易锈蚀仪器，对人有刺激，可用氨水中和，减少对人眼的刺激。
二、无菌操作指在无菌的环境条件下，使用无菌的器材，防止微生物污染的操作技术。
从事微生物检验的工作人员必须经过无菌技术及基础微生物学专业知识培训，才具备上岗操作的资格。
所用的物品需清洗、干燥、包扎，无菌。
干烤箱160℃2h''适用于培养皿9cm、试管、吸管、锥形管、剪刀、镊子物品的灭菌；培养基及09氯化钠溶液用高压锅湿热灭菌''含糖培养基一般用113℃30min''以防温度过高成分被破坏；一般培养基115℃30min;09氯化钠溶液可用121℃20min即可。
操作者在缓冲间换拖鞋，用肥皂洗手后，穿戴无菌工作服、帽、口罩，操作前用01苯扎溴铵泡手''75乙醇棉球擦拭双手后''在乙醇灯火焰区操作。
操作中切勿用嘴直接吸吹吸管防止致病菌感染操作人员及口中的杂菌污染供试品。
三、药品微生物检验的特点（一）活体易变性：被污染的供试品中活的微生物具有繁殖能力，如细菌以二分裂法无性繁殖，20分钟繁殖一代，一个细菌10个小时后可变成10亿个细菌。
如糖浆剂细菌数标准为100个/ml，出厂时检验结果合格，由于贮存不当，放置一段时间成为不合格药品，由于营养成分耗尽细菌自身代产物所致的毒性或pH值改变''细菌逐渐死亡，又成为合格药品。
（二）分布不匀：由于生产环节多，从原料、中介体到成品，经过生产多个流程，与不同操作人员接触，特别是生产后期被污染，通常是局部的，药品微生物的污染存在着不均性。
要求：随机取样，二个包装以上，操作前，供试品摇匀后取样。
（三）受损状态：药品中污染的微生物，受到加工、加热过程的机械损伤，药品本身的抑菌杀菌作用，处于受损抑制状态，检验时必须创造适宜的生长环境（培养基的营养、pH值等）使细菌复，从而提高检出率。
如口服制剂，必须检查控制菌大肠杆菌，取1:10的供试液10ml加入胆盐乳糖增菌液中，胆盐乳糖增菌液是分离大肠杆菌的选择培养基，蛋白胨乳糖等成分提供氮源碳源外，胆盐是抑菌剂，对革兰阳性菌有良好的抑菌作用，从而使目的菌更好地生长。
（四）生态环境多样复杂性：药品的种类、剂型繁多，使污染的微生物生态环境多样而复杂。
故对不同的供试品分别采用不同的方法，正确地制备供试液，使药品中污染的微生物得以真实反映，是保证检验结果正确可靠的重要前提条件。
四、供试液的制备：将供试品制成供试液（一般为1:10），有利于供试品中污染的微生物分散，与培养基充分接触，提高阳性检出率。
常用稀释剂为09无菌氯化钠溶液，滴眼剂、王浆、蜂蜜制剂可直接用供试品（原液），作为供试液。
在作10倍递增稀释时，吸管插入第1级稀释液不低于25cm，上下反复吸吹约10次。
吸液时，应先吸至高于吸管上部刻度少许，然后提起吸管，贴于试管壁调整液量至刻度，再沿第2级稀释管的壁在液面上1cm处缓慢吹出全部液体。
每个稀释级需更换吸管。
（一）一般供试品供试液的制备：1液体制剂：糖浆剂等取样10ml至含有玻璃珠的锥形瓶，加入09无菌氯化钠溶液90ml1:10的供试液。
油剂：取样10ml''加聚山梨酯-805ml''再加稀释剂至100ml。
不提倡将稀释剂定量分装后再灭菌，因高压灭菌易使液体蒸发损失。
2固体制剂：片剂：称样10g至研钵量取稀释剂100ml，先加10ml浸没样品，研磨，将上层液倒入锥形瓶，再加少许稀释剂研磨，同上操作直至样品全部研细制成1:10的供试液。
丸剂及锭剂：中药蜜丸取4丸以上剪碎后称样10g''放置匀浆仪专用的不锈钢匀浆杯，加入稀释剂100ml，3000转/分''2min制成1:10的供试液。
胶囊：硬、软胶囊，称样10g，加入稀释剂100ml''放45℃水浴10分钟后振摇''使溶解。
肠溶片（胶囊）、稀释剂用无菌磷酸盐缓冲液pH68100ml。
茶剂：称样10g加稀释剂100ml浸泡30min，用无菌纱布过滤取滤液（1:10的供试液。
袋泡茶取2袋称量''加稀释剂配成1:10浸泡30min。
胶剂：如阿胶，先放4℃冰箱1h''取出后立即称样10g，放入匀浆仪捣碎或用无菌的不锈钢捣罐捣碎，放45℃水浴促溶。
气雾剂：不含抛射剂的可拧开取样10ml，加稀释剂90ml1:10含抛射剂，需先放4℃冰箱1h减压，然后用无菌钢锥钻孔（勿拨出钢锥），转动钢锥使抛射剂徐徐抛出，再用无菌注射器抽出全部药液，然后按标示量用稀释剂补足为原液，以下操作同液体制剂。
乳膏剂：称样10g，加聚山梨酯-805ml促溶''加稀释剂至100ml。
非水溶性供试品：司盘单硬脂酸甘油酯法：眼膏、软膏剂，以凡士林为基质，不溶于水需加乳化剂使供试品乳化。
用减量法称样5g，加入含已灭菌溶化并保温45℃左右的司盘-805g、单硬脂酸甘油酯3g、聚山梨酯-8010g混合物的烧杯中，在45℃水浴中振摇使供试品中凡士林基质乳化''慢慢加入45℃左右的09无菌氯化钠溶液85ml''边加边振摇制成1:20供试液。
（二）抑菌性供试品供试液的制备抑菌及抗菌性药品，如抗生素、沙星类，既然有抑菌杀菌作用，为什么还要做微生物限度检查，其原因是：①被污染的微生物在抗菌药品中因生存环境不利，呈休眠受损状态，但未死亡，一旦用于人体，当条件改变或适宜时，便复仍可生长繁殖，对人体造成危害。
有的耐药性致病菌株可成为对该抗菌药的依赖株。
②抗细菌的药品，不能抗真菌，所以可能被真菌污染；抗真菌的药品不能抗细菌，所以可能被细菌污染，故2000年版药典要求口服抗生素抗细菌的药品检查真菌，抗真菌的药品检查细菌。
细菌数及真菌数的测定，供试品未经特殊处理，因三级稀释，基本上可起到稀释后消除抑菌成分的作用。
1稀释法：取1:10的供试液10ml加入增菌液在200ml以上2沉降法：制成1:10的供试液摇匀后静置10min，使药品中污染的微生物混悬于供试液中，难溶于水的抑菌成分自然沉降在容器底层，吸取上层液10ml至增菌液。
1、2法适合于抑菌性弱的药品。
3薄膜过滤法：由于细菌的直径约1μm''利用045μm微孔滤膜阻截细菌，滤除抑菌成分，冲洗膜上残留抑菌成分，达到消除抑菌成分之目的。
如氯霉素滴眼液，取1:10的供试液40ml，通过直径为50mm装有045μm孔径微孔滤膜的无菌滤器，过滤后用09无菌氯化钠溶液冲洗，冲洗量约1000ml，无菌手续取出滤膜放至无菌平皿，剪成四等份，各取一片分别放置营养汤增菌液二瓶（其中一瓶加入金黄色葡萄球菌50-100个及胆盐乳糖增菌液二瓶其中一瓶加入铜绿假单胞菌50-100个。