诊断酶学赵敏
海藻酸钠包埋固定胆红素氧化酶的优化
胆红素 （ ｉｒｂｎ 是铁 卟啉化 合物在 人体 内的 代谢产 物 ｂｌｕｉ） ｉ 之一 ， 主要来源于衰 老红 细胞 崩解 后 的血 红蛋 白。人体 内胆 红素 浓度增 高 ， 出现 高 胆红 素 血 症等 … 。胆 红 素 氧 化酶 会 （ ｉｒｂｎｏｉａｅ Ｂ Ｄ） ｂ ｉ ｉ ｘ ｓ ，Ｏ 是一种含 铜离 子 的多酚氧 化酶 ， ｌｕ ｄ 能催 化胆红 素氧化生成 胆绿素的工具酶 ， 氧气是其 电子受 体 ， 利用 此反应 ， 测定波长在 ４ ０ｎ ４ ｍ处 吸光值 的下 降 ， 以用 于血清 可 胆红 素的测定 ， 因此 Ｂ Ｄ常用于 临床诊 断黄疸水平 以及新生 Ｏ
ｚ ｍｅ ｙ ．Ｈｅ ｔｓａ ｉ ｔ ｆ ｈ ａ ｔｂ ｌ ｙ ｏ ｅ ｉ ｉ ｔ ｍｍｏ ｉ ｚ ｄ ｅ ｚ ｍｅ ｗａ ａｓ ｄ ｂ ５ ｄ ｇ ｅ ｓＣ．Ｔ ｅｉ ｂ ｌ ｅ ｎ ｙ ｓｒ ｉｅ ｙ １ ｅ ｒｅ ｈ ｍｍｏ ｉ ｚ ｄ ｅ ｚ ｍｅ ｍａ ｎａ ｎ ｄ ｉ ｃｉｉ ｉ ｂ ｌ ｅ ｎ ｙ ｉ ｔｉ ｅ ｓａ ｔ ． ｉ ｔ ｖ
收稿 日期 ：００年 ｌ ２１ Ｏ月 １ 日。 ３ 责任编辑 ： 张建华 。
硫 酸铵 盐析 、 透 膜 透析 、 乙 二 醇 （ Ｅ ２ ００ 浓 缩 后 ， 半 聚 Ｐ Ｇ ００ ） ４℃ 保存备用 。 胆红素 氧化 酶的 固定化 ： 将海藻酸钠 （ｏ ｉ ｌ ｎｔ） ｓｄｕ ａ ｉａ 溶 ｍ ｇ ｅ 于水 ， 加热 到 ８ Ｏ℃ 配 制成 质 量 浓度 为 ０ １ ｍ 的 黏 稠 液 ．０ ｇ・ Ｌ 体 ， 冷却 至 ２ 待 ５℃左 右 ， 在室温下静 置 ４～ 。取适 量粗 酶 ６ｈ 液加入等体积 的上 述海 藻酸 钠黏液 中 ， 混匀 。用 内径 为 ０ ４ ． ｎ ｌ ｍ的 注 射器 将 上述 混合 液 逐 滴 滴 入 到 ０ ２ ｏ ． ０ ｍ ｌ・Ｌ 的 Ｃ Ｃ 液 中 ， ａ１溶 固定 １ ， 滤 ， 涤 ， 燥 ， 到 直 径 约 ３ｍｍ 的 过 ｈ 洗 干 得 球 状 固定 化 胆 红 素 氧 化 酶 ， 其 放 入 冰箱 中 ４ｑ 保 存 备 用 。 将 Ｃ ２ ２ 酶活力的测定 ． 游 离 酶 酶 活 力 的测 定 ： 用 经 典 胆 红 素 酶 活 力 测 定 方 法 ， 采 以胆红素为底物 ， ２ 在 ８℃水 浴条 件下测定 ４０ｎ ４ ｍ处反应 体 系在反应 ３ｍ ｎ ｉ 前后 的吸光度变 化值 。反应 体系 ： ｎ ｒ — ３ ｉ Ｔｉ Ｌ ｓ Ｈ Ｉ０ １ ｌ・ 一，Ｈ 为 ８ １ 缓 冲液 ， 入 酶 液 １ Ｌ 胆 红 Ｃ （ ． ｍｏ Ｌ ｐ ．） 加 ５ ， 素 贮 存 液 （ ４ ２ｍ ＬＬ ４ ３ ． ｍｏ／ ）５ 。 酶活力（ 位 ： ・ Ｌ ＝ 单 Ｕ ｍ ） ／ ｉ× ｍ ｎ 反应 总 体 积 （ ） ｍＬ ÷ １ ０ ￣酶 量 （ Ｅ 。 其 中 ， ＝ Ａ 一 为 每 分 钟 的 吸 光 度 ８０＋Ｈ ０ ｍ ） （ 。Ａ ） 变化 值 ， 比色杯光径 为 １ｃ 胆红素吸光系数 ｓ ＝ｌ ０ 。 ｍ， ８ ０ ０ 个 酶活力单位定义为 ： 温度为 ２ 在 ８℃ 、ｉ 环境 为 ８ １ ｐｔ ． 的条 件下 ， ｒ ｎ内胆 红素 氧化 酶氧化 １ｔ ｏ 胆 红素 所需 的 １ａ ｉ ｘ ｌ ｍ
实时荧光定量PCR快速鉴定短乳杆菌_赵敏
[作者简介]赵敏(1978-),女,硕士,主管技师,主要从事生物化工研究。
【论著】实时荧光定量PCR快速鉴定短乳杆菌赵敏1,潘劲草1,叶榕1,孟冬梅1,汪皓秋1,孙培龙2(11杭州市疾病预防控制中心,杭州310006;21浙江工业大学生物与环境工程学院,杭州310014)[摘要]目的:建立鉴定短乳杆菌的实时荧光定量PCR法。
方法:根据G anBank登录的乳酸杆菌序列,以gyrB基因为靶目标设计引物和探针,对啤酒中分离到的6株乳酸杆菌进行实验,并对其中一个短乳杆菌样本作定量检测。
结果:实时荧光定量PCR对短乳杆菌可产生特异扩增信号,对其他乳酸杆菌无响应。
标准曲线的相关系数为0197739,测得短乳杆菌样本浓度为15635拷贝/m l。
结论:实时荧光定量PCR是一种快速、特异、灵敏检测短乳杆菌的方法。
[关键词]实时荧光定量PCR;短乳杆菌;快速鉴定[中图分类号]R117[文献标识码]A[文章编号]1004-8685(2007)02-0209-02Rapid detection of Lactobacillus brevis w ith fluorescence real-ti m e quantitative PCRZhao M in1,Pan J i n-cao1,Ye R ong1,M en D ong-m ei1,W ang H ao-qiu1,Sun P ei-long2(11H angzhou C enter for D isease Con tro l and P reventi on,H angzhou310006,Ch i na;21College of B iolog i ca l and Env iron m ental Eng i neer i ng,Zhe jiang U niversity of T echnology,H angzhou310014,Chi na)[Ab stract]O bjective:To estab ilish a fl uo rescence rea l-ti m e quantitative PCR assay for the identifi cation of Lactobacillus bre-vis1M e thods:W it h re f e rence to Lactobacill us spp sequences from G anbank,t he spec ifi c pr i m e rs and probe w ere desi gned on the basis o f gyrB g ene1S i x Lactobacillus spp w ere detected,one o fwh ich w as detec ted by quantitati ve PCR1Resu lts:L1brevis we re a m-p lified by fl uorescence real-ti m e quantitati ve PCR assay tri umphantl y and other Lactobacillus s pp d i dn c t generate any signa l1T he co rre l a ti on co efficien tw as01977391Sa mp le(L ac A-1)concen trati on w as15635copy/m l1Con cl u si on:F l uorescence real-ti m e quantitati ve PCR assay is a rap i d,spec ific and sensiti ve me t hod for quantify i ng L1brevis1[K ey words]F luorescence rea l-ti m e quantita tive PCR;Lact obacillus brevis;R ap i d i den tificati on短乳杆菌(Lact obacillus brev is)是最主要的乳酸杆菌属啤酒污染菌,在发酵行业检出率非常高,50%以上的细菌污染事件均由该菌引起[1]。
肝病实验室检查及止凝血功能检查模板
TBIL
DBIL IBIL ALT AST TBA Urea
9.33
2.22 7.11 14.08 27.38 6.23 5.49
0～20
0～ 8 0～17 0～40 0～40 0～15 1.7～8.3
μmol/L
μmol/L μmol/L U/L U/L μmol/L μmol/L
肌酐
尿酸
CREA
γ-谷氨酰转移酶（GGT）
总胆红素 ：1.7-17.1μmol/L 直接胆红素 ＆间接胆红素 白蛋白，前白蛋白，视黄醇蛋白 白蛋白/球蛋白（A/G）为1.5-2.5：1 看低 合成不足 营养不良 肝功下降
凝血指标
胆碱酯酶CHE
一、血清酶检查
肝脏是人体含酶最丰富的器官. 有些酶具
有一定组织特异性，根据酶活性测定可用于
※乙肝五项检验报告单——临床意义
HBsAg + HBV感染携带的标志 HBsAb + 对HBV有一定免疫力；疫苗接种后产 生；接受免疫球蛋白、输血治疗被动获得。 HBeAg + HBV复制旺盛，病毒数量多，传染性 强的标志 HBeAb + HBV复制减少，传染性减弱的标志 HBcAb + HBV现症感染或既往感染的标志
TBIL
DBIL IBIL ALT AST AST/AБайду номын сангаасT
9.0
1.7 7.6 134 70 0.52 123 84
6.8～34.2
1.7～8.6 4.8～25 0～40 0～40 11～50 40～150
μmol/L
μmol/L μmol/L U/L U/L U/L U/L ↑ ↑ ↑
γ-谷氨酰转 γ-GT或 肽酶 GGT 碱性磷酸酶 ALP或AKP
临床免疫学检验-第五章-诊断酶学
(二)连续监测法测定酶活性
偶联反应中存在几个时相：
①预孵育期： ②延滞期： ③稳态期：
酶偶联法测定ALT的吸光度变化
米－曼氏方程
• Michaelis 和Menten提出的酶作用的中间产物学说
E+S
K1 K2
ES K3
E+P
1913年提出了著名的酶促反应速度与底物浓度关系 的
方程式，即米-曼氏方程(Michaelis-Menten equation):
酶 ALT AST ALP
ACP LD CK γ-GT
AMY LPS ChE#
方法 连续监测法 底物中含磷酸吡哆醛
底物中不含磷酸吡哆醛 连续监测法 底物中含磷酸吡哆醛
底物中不含磷酸吡哆醛 连续监测法（磷酸对硝基苯酚法）
比色法（磷酸麝香草酚法） 连续监测法 L→P，即LD-L法
P→L，即LD-P法 连续监测法（酶偶联法）
(三)干扰因素
1. 其他酶和物质的干扰 2. 酶的污染 3. 非酶反应 4. 分析容器的污染 5. 沉淀形成
（四）血清酶活性浓度测定的条件的优化
1.方法选择 尽可能采用连续监测法；尽量减少操作步骤。 2.仪器和设备 明确规定仪器和设备的各种性能规范。 3.试剂 化学试剂必须具有一定纯度；试验用水最好是纯水或双蒸水。 4.自动生化分析仪参数的设置
参考区间 男：≤45U/L；女：≤34U/L* 5~40U/L 男：≤35U/L；女：≤33U/L* 8~40U/L 1~12岁＜500U/L； 男：12~15岁＜750U/L，
＞25岁40~150U/L； 女：＞15岁40~150U/L 0.5~1.9U/L ≤252U/L* 200~380U/L 男：≤169U/L；女：≤143U/L*
酶学测定两点法与速率法的探讨
参 考 文 献
通 常酶 活性 测 定 的方 法 有 两 种 ： 是 固定 时 间 法 ； 是 连 一 二
续 监测 法 Ｌ 。 ２ Ｊ
测 定 酶 反 应 开 始 后 某 一 段 时 间 内 （。 ｔ） 物 或 浓 度 的 ｔ到 ｚ产 总变化量 ， 以求 取 酶 反 应 速 度 （ 度 的 大 小 即酶 活 性 高 低 的度 速 量） 方法称固定时间法 ， 称两点法。 的 又 连续 测 定 （ １ 每 ５秒 至 １分 钟 监测 一 次 ） 酶反 应 过 程 中某 一
【 关键 词】 实 验室 技 术 和 方 法 ； 方 法 ； 对 比研 究 ； 酶学
ＤＯＩ １ ． ９ ９ ｊｉｓ ． ６ ３ ４ ３ ． ０ ０ ０ ． ８ ：０ ３ ６ ／．ｓｎ １ ７ — １ ０ ２ １ ． ９ ０ ０
中 图分 类 号 ： ４ ６ １ ２ Ｒ ４ ． １
文 献 标 识 码 ： Ｂ
乞 ｌ
ｔ ２
图 １ 酶 反 应 的 时 间 曲线
图２
两 点 法测 定 中酶 反 应 的 可 能 性
酶 活 性 测 定 必 须 建 立 在 酶 浓 度 ［ ］ 反 应 产 物 浓 度 Ｐ 或 Ｅ与 底 物浓 度 ［ ］ 变 化 成 正 比 的 基 础 上 ， 公 式 表 示 为 ： Ｅ 一 ｓ的 以 Ｅ］
通 过 测 定 底 物 浓 度 的下 降或 产 物 浓 度 的 上 升 ， 以追 踪 酶 可 促 反 应 。一 个 典 型 的酶 促 反 应 曲线 可 以分 为 几 个 反应 期 ， 个 各 反 应 期 持 续 时 间 的 长短 根 据 不 同 酶 促 反 应 及 反 应 条 件 有所 不 同 。反 应 初 期 ， 在 着 一 个 延 滞 期 （ａ ｈｓ） 此 期 随 实 验 条 存 １ ｐ ａｅ ， ｇ 件 不 同 ， 以延 续 几 秒 至 几 分 钟 。 随后 就 是 一 个 底 物 或 产 物 变 可 化 与 时 间成 直 线 关 系 的 时期 ， 为 线 性 期 （ ｎａ ｈ ｓ） 称 １ ｅｒｐ ａｅ 。此 期 ｉ 反应速度是恒定的 ， 即酶 促 反 应 的 初 速 度 。在 线 性 期 内 ， 物 底 浓 度 很 低 时 ， 应 速 度 与 底 物 浓 度 成 正 比 。根 据 不 同 酶 学 反 反
一种鲜桃益生菌发酵饮料及制作方法[发明专利]
![一种鲜桃益生菌发酵饮料及制作方法[发明专利]](https://img.taocdn.com/s3/m/e57adae602020740bf1e9b45.png)
专利名称：一种鲜桃益生菌发酵饮料及制作方法专利类型：发明专利
发明人：赵敏,李爱梅
申请号：CN200910074473.5
申请日：20090525
公开号：CN101632474A
公开日：
20100127
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：一种鲜桃益生菌发酵饮料，是用鲜桃榨汁制成培养基，在一定温度和时间条件下发酵培养双歧杆菌、保加利亚乳杆菌、嗜热链球菌和乳酸杆菌等益生菌，再将完成发酵的益生菌液体灭活制成饮料。
生产鲜桃益生菌发酵饮料的料渣还可生产鲜桃益生菌果酱。
本发明极大地拓宽了双歧杆菌等益生菌培养基选材的应用范围，为消费者提供了一种新型的益生菌发酵饮料，原料来源丰富，成本低廉，制备工艺稳定，生产设备投资少，操作简单，易推广。
申请人：赵敏
地址：036000 山西省朔州市政府办公大楼A406室
国籍：CN
代理机构：山西五维专利事务所(有限公司)
代理人：李毅
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瓜尔胶降解菌诱变及甘露聚糖酶特性研究
瓜尔胶降解菌诱变及甘露聚糖酶特性研究
李慧玲;刘祖艳;赵敏
【期刊名称】《安徽农业科学》
【年(卷),期】2013(000)036
【摘要】为了筛选降解瓜尔胶的菌株,从亚麻液中筛选到l株降解瓜尔胶产β-甘露聚糖酶的细菌HL-28,经形态观察、生理生化特性和16S rDNA序列分析鉴定其为金黄杆菌(Chryseobacteriu).菌株HL-28产甘露聚糖酶的活力达64.532 U/ml,经紫外诱变育种获得突变株HL-28-30,酶活提高到339.787 U/ml,提高了426.54％.粗酶发挥催化作用的最适pH值为5.6,最适反应温度50℃.
【总页数】4页(P14041-14043,14046)
【作者】李慧玲;刘祖艳;赵敏
【作者单位】东北林业大学生命科学学院,黑龙江哈尔滨150040;黑龙江中医药大学药学院,黑龙江哈尔滨150040;东北林业大学生命科学学院,黑龙江哈尔滨150040;东北林业大学生命科学学院,黑龙江哈尔滨150040
【正文语种】中文
【中图分类】S188
【相关文献】
1.苯胺黑药降解菌降解条件优化及降解酶特性的研究 [J], 宋卫锋;武纯;林丽婷;倪俊;汪卫
2.阿维菌素降解菌的诱变选育及降解特性 [J], 胡秀虹;张廷辉;汤承浩;黄剑
3.纤维素降解菌CMC-4的分离鉴定、诱变和酶学特性研究 [J], 王霞;华琳;张海龙;朱安宁;曹慧
4.β-甘露聚糖酶产生菌R10的产酶特性研究 [J], 熊郃;干信
5.菲降解菌的特性及其降解酶纯化研究 [J], 贾玉红;曲媛媛;周集体;李昂;艾芳芳因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
胆红素氧化酶的特性及应用研究综述
胆红素氧化酶的特性及应用研究综述
黄世臣;赵敏
【期刊名称】《延边大学农学学报》
【年(卷),期】2014(036)001
【摘要】胆红素氧化酶(bilirubin oxidase,BOD)是多铜氧化酶家族的1个成员,因能催化胆红素为胆绿素而得名.随着对该酶研究的深入,发现它具有漆酶无法比拟的优点.本文从BOD的生物化学特性、酶的产生来源、在污染物降解、染料脱色等环境治理、生物燃料电池制备或胆红素传感器制备等领域中的应用作了较为详尽的综述.
【总页数】10页(P78-87)
【作者】黄世臣;赵敏
【作者单位】东北林业大学生命科学学院,黑龙江哈尔滨150040;延边大学农学院,吉林延吉133002;东北林业大学生命科学学院,黑龙江哈尔滨150040
【正文语种】中文
【中图分类】Q55
【相关文献】
1.胆红素氧化酶法消除胆红素对酶法测定胆固醇的干扰 [J], 汪玄文
2.用胆红素氧化酶消除胆红素对肌酐动力学法测定的影响 [J], 王忠诚
3.胆红素氧化酶及其变异体在胆红素血症评价中的应用 [J], 张雷;张晓;罗智颖
4.胆红素氧化酶法消除胆红素对酶法测定甘油三酯的干扰探讨 [J], 杨剑虹;王金湖
5.胆红素氧化酶的生物电化学特性研究进展 [J], 赵敏;刘祖艳;张曦;赵丹
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血清酶在急性有机磷中毒预后判定中的作用
血清酶在急性有机磷中毒预后判定中的作用赵敏;杨金霞【期刊名称】《中华腹部疾病杂志》【年(卷),期】2005(5)1【摘要】目的检测急性有机磷农药中毒(AOPP)病人血清肌酸磷酸激酶(CK)、肌酸磷酸激酶同功酶(CK-MB)、谷草转氨酶(AST)及乳酸脱氢酶(LDH)水平,同时检测血清胆碱酯酶(ChE)活力变化,对其与预后的关系进行探讨.方法 58例病人按病情分为轻中度、重度、中间综合征(IMS)、死亡4组.来诊后即刻采血、服毒后第2、3、4、5、6d及住院最后1d采血.检测血清CK、CK-MB、LDH、AST及ChE.结果病人血清组织释放酶变化,轻中度中毒组织释放酶不高;其他三组与轻中度中毒组比,4种组织释放酶升高明显,P＜0.05.IMS组CK、CK-MB、及死亡组CK-MB、LDH明显高于重度中毒组,P＜0.05.中毒后血清ChE活力降低,以后逐渐回升,死亡病例组服毒后连续检测3d,血ChE活性未见到明显回升.结论AOPP时,血清中组织释放酶CK、CK-MB、LDH及AST可作为判断病情及预后的一个指标.血清ChE持续不升或回升缓慢提示预后不良.【总页数】3页(P19-21)【作者】赵敏;杨金霞【作者单位】中国医科大学附属第二医院急诊科,沈阳市,110004;中国医科大学附属第一医院药局,沈阳市,110001【正文语种】中文【中图分类】R595.4【相关文献】1.血清丁酰胆碱酯酶活性预测急性有机磷中毒预后 [J], 段彤;吴芳兰;周燕;颜素岚;2.神经元特异性烯醇化酶在急性有机磷中毒患者血清中的动态变化及临床意义 [J], 马力;杨自建;周元陵;李秀菊3.血清丁酰胆碱酯酶活性预测急性有机磷中毒预后 [J], 段彤;吴芳兰;周燕;颜素岚4.血清基质金属蛋白酶-9水平对急性非ST段抬高型心肌梗死合并糖尿病患者心功能及预后的评估作用研究 [J], 刘紫东;付伟5.急性有机磷中毒患者血清ChE、肝酶、miR-214表达与APACHEⅡ分值关系及其预后预测意义 [J], 王安;王园园;杨俊礼因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
血清乳酸脱氢酶对诊断急性白血病的临床价值
血清乳酸脱氢酶对诊断急性白血病的临床价值赵敏【期刊名称】《中国现代医生》【年(卷),期】2015(053)001【摘要】目的探讨血清乳酸脱氢酶对急性白血病中的诊断及临床价值.方法选取我院血液科诊断为急性白血病的住院患者,收集时间为2011年6月～2013年9月共计94例,16例为急性白血病初诊未治者,定义为初诊未治组;30例急性白血病难治复发者;定义为难治复发组;48例急性白血病缓解者,定义为化疗缓解组.调查每个研究对象一般情况、实验项目,测定血清乳酸脱氢酶值.结果化疗缓解组、难治复发组、初诊未治组血清乳酸脱氢酶分别为(149.5±36.7)IU/L、(387.2±63.4)IU/L、(601.5±165.8)IU/L,经检验发现化疗缓解组最低,初诊未治组血清乳酸脱氢酶最高,差异有统计学意义(P＜0.05);化疗缓解组、难治复发组、初诊未治组骨髓原始幼稚细胞分别为(19.5±2.9)％、(46.6±16.3)％、(98.6±33.6)％,化疗缓解组骨髓原始幼稚细胞最低,初诊未治组骨髓原始幼稚细胞最高,差异有统计学意义(P＜0.05).结论血清乳酸脱氢酶值越高,说明急性白血病患者预后越差,对化疗反应越差,骨髓原始幼稚细胞越高.【总页数】3页(P135-137)【作者】赵敏【作者单位】沈阳市苏家屯区中心医院检验科,辽宁沈阳 110101【正文语种】中文【中图分类】R733.71【相关文献】1.血清乳酸脱氢酶测定在急性白血病患者中的临床价值 [J], 田秋生2.血清乳酸脱氢酶在诊断急性白血病中的作用 [J], 石瑞平;范玮;宋祎;郭树霞3.血清乳酸脱氢酶水平测定在儿童急性白血病中的临床诊断价值 [J], 赵园园4.血清乳酸脱氢酶、铁蛋白和血小板生成素在急性白血病与骨髓异常增生综合征鉴别诊断中的应用 [J], 黄小华5.血清腺苷脱氨酶和乳酸脱氢酶水平测定在儿童急性白血病诊断中的价值 [J], 沈伟涛;洪楷因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
多种角蛋白抗体对早期胃癌的诊断
多种角蛋白抗体对早期胃癌的诊断
苏长青;赵敏
【期刊名称】《实用癌症杂志》
【年(卷),期】1994(009)002
【摘要】应用三种角蛋白抗体对２０例早期胃癌进行了免疫组化及免疫电镜观察，结果三种抗体的反应谱各不相同，早期胃癌细胞角蛋白分布较弥散，染色以ＨＫ２最佳，Ｋ１７４次之，ＲＡＫ反应最弱。
多种角蛋白抗体配伍应用，有助于角蛋白分子配偶的检出，使染色效果改善，较易发现位于粘膜腺体之中的早期癌变细胞和游离于腺体之外的分散浸润的癌细胞。
【总页数】2页(P78-79)
【作者】苏长青;赵敏
【作者单位】不详;不详
【正文语种】中文
【中图分类】R735.204
【相关文献】
1.抗角蛋白抗体在类风湿性关节炎早期诊断中的价值 [J], 杨凤
2.抗角蛋白抗体与抗环瓜氨酸肽抗体在早期类风湿关节炎诊断中的意义比较 [J],
王丽;邱敏
3.多种自身抗体检测对类风湿关节炎早期诊断的意义 [J], 张文兰;胡同平;王永福
4.多种肿瘤相关抗原抗体在乳癌早期诊断中的应用 [J], 徐莉娟;代丽萍;王凯娟;张
建营;王鹏
5.抗角蛋白抗体、抗核周因子和抗环瓜氨酸肽抗体联合检测幼年类风湿关节炎:早期诊断及治疗评估意义 [J], 韩彤昕;李彩凤;王江;邝伟英;周怡芳;何晓琥
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溶菌酶在医药领域的研究进展
溶菌酶在医药领域的研究进展
赵丽艳;赵敏
【期刊名称】《黑龙江医药》
【年(卷),期】2010(23)6
【摘要】溶菌酶是一类无毒无害的蛋白质,具有良好的抗菌消炎作用.本文综述了溶菌酶的结构特点、作用机制、分离纯化、基因克隆等方面的研究现状,并对其医药应用和发展前景做了展望.
【总页数】3页(P917-919)
【作者】赵丽艳;赵敏
【作者单位】东北林业大学生命科学学院;东北林业大学生命科学学院
【正文语种】中文
【中图分类】R977.3
【相关文献】
1.壳聚糖及其衍生物在医药领域的研究进展 [J], 王双燕
2.响应性水凝胶及其在生物医药领域应用研究进展 [J], 唐立宗;张琳;董云生;齐春晓;刘祥胜;王淑芳
3.中国小型猪在生物医药领域的研究进展 [J], 陈雨荣;安星兰;张胜;翟岩辉;于浩;代相鹏;李子义
4.有机复合相变材料在医药领域的研究进展 [J], 周煜凌;朱志雯;顾浦中;张明
5.溶菌酶在饲料领域的研究进展 [J], 王怀蓬;乌日娜;孙镇平;张瑞姿;杨波
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真菌漆酶分子生物学研究进展
真菌漆酶分子生物学研究进展
赵敏;杨谦;宋小双;刘桂丰
【期刊名称】《林产化学与工业》
【年(卷),期】2005(25)1
【摘要】概述了漆酶分子生物学的研究情况,包括其理化性质、氨基酸序列分析、基因克隆、基因结构分析和组织分析、基因家系、表达调节及异源表达.
【总页数】6页(P115-120)
【作者】赵敏;杨谦;宋小双;刘桂丰
【作者单位】哈尔滨工业大学,生命科学与工程系,黑龙江,哈尔滨,150001;哈尔滨工业大学,生命科学与工程系,黑龙江,哈尔滨,150001;东北林业大学,林学院,黑龙江,哈尔滨,150040;东北林业大学,林学院,黑龙江,哈尔滨,150040
【正文语种】中文
【中图分类】Q554;Q7
【相关文献】
1.影响真菌漆酶表达调控因素的研究进展 [J], 王晶晶;李为;胡美
2.真菌漆酶在绿色化学中的研究进展 [J], 龚睿;孙凯;谢道月
3.真菌漆酶性质、分子生物学及其应用研究进展 [J], 司静;李伟;崔宝凯;戴玉成
4.真菌漆酶的性质、生产、纯化及固定化研究进展 [J], 吴怡; 马鸿飞; 曹永佳; 司静; 崔宝凯
5.固定化真菌漆酶在环境有机污染修复中的应用研究进展 [J], 陈明雨;倪烜;司友斌;孙凯
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非稳态酶活化动力学的布尔函数图论分析
非稳态酶活化动力学的布尔函数图论分析
赵敏
【期刊名称】《生物数学学报》
【年(卷),期】1999(14)3
【摘要】以非稳态酶动力学的布尔函数图形方法研究非稳态酶活化动力学问题，推导出此类反应的非稳态酶动力学方程，并对此动力学方程进行了讨论，分析了酶活化反应体系的非稳态酶动力学过程．
【总页数】6页(P359-364)
【关键词】非稳态;酶动力学;活化;布尔函数;图论
【作者】赵敏
【作者单位】温州师范学院生物系
【正文语种】中文
【中图分类】Q550.2;O153.2
【相关文献】
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产β-甘露聚糖酶菌株的物理和化学诱变育种研究
产β-甘露聚糖酶菌株的物理和化学诱变育种研究李慧玲;刘祖艳;赵敏【摘要】[目的]比较产β-甘露聚糖菌株的物理和化学诱变育种效果.[方法]以产β-甘露聚糖酶的Bacillus subtilis WD23为出发菌株,利用紫外线诱变和甲基磺酸乙酯诱变的方法提高酶的活性.[结果]紫外线照射时间选为20 ～30 s,诱变后酶活提高了8.72％;1％的甲基磺酸乙酯诱变10 min,酶活提高了1.29％.[结论]紫外线诱变效果好于甲基磺酸乙酸,该研究中,物理谤变效果好于化学诱变.【期刊名称】《安徽农业科学》【年(卷),期】2014(000)018【总页数】2页(P5741,5750)【关键词】β-甘露聚糖酶;紫外线诱变;甲基磺酸乙酯诱变【作者】李慧玲;刘祖艳;赵敏【作者单位】东北林业大学生命科学学院,黑龙江哈尔滨150040;黑龙江中医药大学药学院,黑龙江哈尔滨150040;东北林业大学生命科学学院,黑龙江哈尔滨150040;东北林业大学生命科学学院,黑龙江哈尔滨150040【正文语种】中文【中图分类】S182β-甘露聚糖酶(β-mannanase，EC 3.2.l.78)是一种内切水解酶，可以断裂β-1，4-D-甘露糖苷键，其属于半纤维素酶类［1－2］。
人们研究β-甘露聚糖酶始于20世纪50年代末60年代初，1958年Courtios［3］等首次发现产β-甘露聚糖酶的真菌;1960 年 Williams和 Doetsch［4］从细菌中得到β-甘露聚糖酶;1965年Shibata和Reese［5］第1次提出β-甘露聚糖酶的概念。
目前β-甘露聚糖酶已经在医药卫生、纸浆漂白、功能低聚糖的研发和石油开采等方面得到广泛应用。
目前对β-甘露聚糖酶产生菌选育的主要手段是通过诱变育种方式进行菌种改良，从而筛选到适应环境能力强、繁殖力高的高产菌株。
诱变育种具有操作简便、速度快、效果显著等优点。
该研究采用紫外线和甲基磺酸乙酯相结合的诱变方法，提高了β-甘露聚糖酶的活力。
Vit B2测定
一：负荷尿样的收集
棕色尿瓶洗净、晾干。于尿瓶中加入1g草酸，使尿PH3-5，以保证维 生素不易破坏。尿瓶标签注明姓名、性别、编号、试验日期。晨起 排尿后，吞服维生素B25mg，饮水200~500mL，记录时间。服药四小 时内，小便留于瓶内，且到四小时时再次排尿于尿瓶中。
维生素b2的测定赵敏实验目的及要求?掌握受试者服用5mg维生素b2测定4h内受试者尿液中vitb2的排出量评价维生素b2的营养状况
维生素B2的测定
赵敏
实验目的及要求
掌握受试者服用5mg维生素B2，测定4h内受试者尿液中VitB2的排出量，评价维 生素B2的营养状况。
VitB2又叫核黄素是橘黄色无臭的针状结晶，维生素B2在酸性及中性环境中对热 稳定，在碱性环境中易被热和紫外线破PH至1左右。量筒测量4h收集尿液体积V4h尿(mL)，根据 常识尿负荷试验排出核黄素的量及尿液的体积，估计需要稀 释的倍数。建议稀释2.5倍或10倍，稀释用酸性水稀释。
三：测定
取尿液5ml于50ml棕色瓶中，酸性水稀释定容至刻度混匀， 作为溶液1。
取核黄素标准储备液（10.0μg/mL）1.00mL、2.00mL、 3.00mL、4.00mL、5.00mL分别置于50mL的容量瓶中，各加 入酸性水稀释至刻度，摇匀。得浓度依次为0.2μg/mL、 0.4μg/mL、μg/mL、0.6μg/mL、0.8μg/mL、1.0μg/mL的核 黄素标准溶液，待测。
核黄素溶液在440nm~500nm波长光照射下发出黄绿 色荧光。在稀溶液中，实验条件一定时，荧光强度F 与核黄素的浓度成正比。加入硫代硫酸钠后荧光被 还原。
仪器与试剂
1. 荧光光度计 2. 酸性水 取浓硫酸1.5mL，加蒸馏水至1000mL PH≈1 3. 核黄素标准储备液10.0μg/mL 精密称取25mg核黄素于
胆红素氧化酶的生物电化学特性研究进展
胆红素氧化酶的生物电化学特性研究进展赵敏;刘祖艳;张曦;赵丹【摘要】从胆红素氧化酶的结构、来源、生物电催化的反应机制(铜离子活性中心的氧化还原电势、直接和介体参与的电子传递)、修饰电极的材料、固定化技术以及在生物燃料电池中的应用等方面介绍了胆红素氧化酶,提出了胆红素氧化酶的结构与来源、生物电催化,胆红素氧化酶燃料电池和胆红素氧化酶在电化学中的应用.【期刊名称】《生物质化学工程》【年(卷),期】2013(047)006【总页数】7页(P9-15)【关键词】胆红素氧化酶;铜离子活性中心;生物电催化;电化学【作者】赵敏;刘祖艳;张曦;赵丹【作者单位】东北林业大学生命科学学院,黑龙江哈尔滨150040;东北林业大学生命科学学院,黑龙江哈尔滨150040;东北林业大学生命科学学院,黑龙江哈尔滨150040;黑龙江大学生命科学学院,微生物省高校重点实验室,黑龙江哈尔滨150080【正文语种】中文【中图分类】TQ35;Q554胆红素氧化酶(bilirubin:oxygen oxidoreductase，EC1.3.3.5，BOD/BRO/BOX)，是一类蓝色多铜氧化酶(blue multicopper oxidases)，在临床诊断上用来测定血清中胆红素和总胆红素的含量，是一种常用的工具酶。
1969年Brodersen首次在豚鼠脑中发现胆红素氧化酶，随后一些学者在鼠肝、鼠肾和鼠小肠中也发现有微含量胆红素氧化酶的存在［1］。
1981年 Murao和 Tanaka［2］首次在漆斑属(Myrothecium sp.)真菌中获得了电泳纯的胆红素氧化酶。
电催化是通过电极、电解质界面上的电荷转移来加速反应的一种催化作用。
生物电催化概念自20世纪70年代引入，是通过酶或氧化还原蛋白的活性位点与电极之间的电子转移实现的催化反应，即将生物催化的高效专一特性与电催化反应完美结合。
1977年Eddowes等首次发现马心细胞色素C(cytochrome C，Cyt.C)在金、锡混合电极表面上发生电催化反应，并获得了可逆的循环伏安(cyclic voltammetry，CV)曲线，这种现象也被定义为直接电子传递(direct electron transfer，DET)［3］。
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(二)Vmax
Vmax表示在一定酶量下的最大反应速率， 即酶完全被底物饱和时的反应速度，与酶浓度 呈正比。在酶的浓度不变时，对于特定底物而言， Vmax也是一个常数。
(三)Km和Vmax的测定 将米－曼氏方程进行倒数处理，而
转换成直线方程为：
1 Km [S] Km 1 1 Vo Vamx[S] V max [S] V max
Vmax［S］ VO =
Km +［S］
6．如一个酶催化正逆两个方向，测定正逆两个 方向底物的Km及底物浓度，可大体推测该酶在 体内催化反应的方向及其催化效率。 7．在代谢酶系中，当一组酶催化连续的代谢反 应时，如已知各酶的Km及其相应底物的浓度， 有助于寻找代谢的限速步骤。一般Km值最大的 酶所催化的反应为该酶系的限速步骤。
1、酶浓度
在［S］＞＞ ［E］时，酶促反应随酶浓度 的增加而增加，即反应速率与酶的浓度成正比。
病理情况下，酶浓度过高时，底物过早而且 过多的被消耗，影响酶活性的测定，故需用生理 盐水或其它缓冲液进行适当的稀释，但要注意稀 释对测定结果的影响，如低酶浓度时，酶易解离 为单体，常比多聚体更易失活。
2、底物的种类和浓度
的可调节性。
常用术语
酶促反应： 由酶所催化的反应
酶活性： 酶催化化学反应的能力
底物：
酶催化所作用的物质
产物：
酶促反应的生成物
酶的特异性：酶对作用物的选择性
激活剂： 加速酶促反应的物质
抑制剂： 减慢甚至终止酶促反应的物质
2、酶的结构与功能
单纯酶：由约100～10000个氨基酸肽键相连而成
酶
结合酶 蛋白质——酶蛋白
Vmax［S］ VO =
Km +［S］
3．如已知酶的Km，可计算某一底物浓度时反应速率v 和最大速率Vmax的比值，并可推知酶的活性中心被底 物饱和的分数。同样，如要求v和Vmax有一定的百分 比，也可算出所需底物浓度为其Km的多少倍。 4．利用工具酶来测定体液中某一成分的浓度或某一 酶的催化活性浓度时，可根据米-曼氏方程或其衍变 方程式来计算工具酶的用量。 5．测定Km值可鉴别不同来源但催化相同反应的酶是 同一种酶或是同工酶。
1 Km [S] Km 1 1 Vo Vamx[S] Vmax [S] Vmax
1 Ｖo
1／Ｖmax
斜率＝ Km V max
１ －
Km
0
双倒数作图法
1 ［Ｓ］
三、酶促反应的影响因素及反应条件的选择
1、酶浓度 2、底物的种类和浓度 3、缓冲液的种类、离子强度和pH 4、温度 5、激活剂与抑制剂 6、其它
对结合酶来说，辅酶或辅基参与酶活性 中心的组成。
二、酶的催化作用机制
1、活化能 2、酶降低活化能的作用机制
酶通过与底物形成一种或多种中间 复合物来降低反应的活化能
三、酶的命名、分类与编号
第二节 酶促反应动力学
一、酶促反应
E+S
K1K2ES来自K-1酶 底物
酶-底物复合物
E+P
酶 产物
米-曼氏方程
一般选择Km最小 的最适底物，酶测定 时底物浓度最好为Km 的10～20倍。
零级反应 一级反应
(三) 缓冲液的种类、离子强度和pH
酶与底物结合的能力，酶的催化活性，会 受不同pH的影响，只有在最佳缓冲系统内才能 充分表达。各种酶都具有使酶促反应速率最大 时的pH，即最适pH。一般来说，动物酶多在 6.5～8.0之间。但ACP反应的最适pH为4.0～7.0 而ALP则为9.0 ～ 10.0。
最适pH并非酶的特征性常数，易受缓冲液的种类、离子 强度及底物浓度不同等因素影响。临床酶学测定时发现， 用不同种类的缓冲液配制相同pH介质所测酶活性并不相同。 缓冲液的离子强度也可影响酶的活性。必须强调的是，各 种体液样品本身也是缓冲液，和底物混合后不一定维持原 来pH，也会影响酶活性测定结果，所以应严格掌握测定样 品与底物的用量比例，一般样品在总体积中的比例应不超 过10％。此外，缓冲液中的物质不应与分析系统中的任何 物质反应，否则应特别加以说明。
诊断酶学 赵敏
第六章 诊断酶学
第一节 概述 第二节 酶促反应动力学 第三节 血清酶 第四节 酶活性浓度的测定技术 第五节 酶的免疫化学测定 第六节 同工酶及其亚型测定 第七节 临床常用血清酶、同工酶及其
亚型分析
第一节 概 述
一、酶的组成、结构和功能
1、酶的本质和特性 本质：蛋白质（绝大部分）或核酸（极少数） 特性：极高的催化效率、高度的特异性、催化
辅酶
非蛋白部分——辅因子
辅基
2、酶的结构与功能
酶是蛋白质，具有一、二、三、四级结构 单体酶：只由一条多肽链构成的酶 寡聚酶：由多个相同或不同亚基以非共价键连接的酶 多酶体系：在细胞内存在着许多由几种不同功能的酶
彼此聚合而成的多酶复合物
酶的活性中心
酶的必需基团在一级结构上可能相距很 远，但在空间结构上彼此靠近，组成具有能 与底物结合并起催化反应的特定空间结构区 域，称为酶的活性中心。
(四)温度
酶促反应也有一个最适温度，在其 两侧反应速率都比较低。在达到最适温 度以前，温度每增加10℃，反应速率增 加1～2倍。但温度对酶活性的影响具有 双重性，一方面温度升高可加快酶促反 应；而另一方面温度可能使酶失活。
人体大多数酶的最适温度为37℃左右，超 过42℃酶活性就逐渐降低，至60℃时酶因蛋 白变性而失去活性。反之，酶在20℃以下时 几乎无催化反应。酶的最适温度与底物浓度、 pH、离子强度、保温时间等许多因素有关。
最大反应速率
VO =
反应速 度
Vmax［S］ 底物浓度 Km +［S］
米氏常数
（一）Km
Vmax［S］ VO =
Km +［S］
若v=0.5Vmax，则Km=[S]，可见Km值 等于酶促反应的初速率为最大速率Vmax一 半时的底物浓度。Km值一般在10-6～10-2mol ／L之间。Km只与酶的性质有关，而与酶的 浓度无关。
Vmax［S］
Km 意义：
VO = Km +［S］
Km是酶的特征性常数之一，在临床酶学分 析中具有重要意义。
1．1／Km可近似地表示酶对底物的亲和力的大小， Km值越小，表示酶与底物的亲和力越大，反之亦然。
2．如果一个酶有几种底物，则对每一种底物各有 一个特定的Km值，其中Km值最小的底物大都是该酶的 最适底物或天然底物。