离子交换填料选择
离子交换层析配基、基架、填料
离子交换层析配基、基架、填料
离子交换层析是一种常见的分离和纯化方法，广泛应用于生物、化学、环境等领域。
离子交换层析的基本原理是利用离子交换材料与待分离物质之间的化学亲和性差异，通过物质在离子交换材料中的分配来实现分离纯化。
离子交换层析的关键组成部分包括配基、基架和填料。
配基是指离子交换材料上的活性基团，其化学性质决定了材料的亲和性。
常见的配基包括阴离子交换基、阳离子交换基、强酸交换基和弱酸交换基等。
基架是指离子交换材料的骨架结构，常用的基架材料包括聚苯乙烯、聚乙烯、硅胶等。
填料是指用于填充离子交换柱的材料，常见的填料材料包括硅胶、聚合物、玻璃等。
离子交换层析的选择和优化要考虑到多个因素，如待分离物质的性质、离子交换材料的性能、离子交换柱的尺寸、流速等。
通过合理选择配基、基架和填料，并调整操作条件，可以实现高效、经济的分离纯化过程。
总之，离子交换层析是一种重要的分离纯化技术，配基、基架和填料是其关键组成部分。
选择合适的离子交换材料和填料，并合理调整操作条件，可以实现高效、经济的分离纯化过程。
- 1 -。
离子交换器填料装填说明
关于离子交换器垫层及树脂装填说明
1、设备安装就位后要对衬胶设备进行电火花测试，确保满足技术要求。
2、装填垫层及树脂前，必须对设备进行一次水压试验，合格后再打开离子交换器的上、下人孔，再次检查交换器内部结构，特别是法兰，要进行进水观察，确保法兰之间不漏水，衬胶层无异常现象。
3、装填石英砂垫层：最底层粒径为ø16－32，装填厚度为400mm（以超过穹形多孔板上部100mm为准）,装填料时先人工挑选粒径最大的卵石沿穹形多孔板弧线铺一层，厚度为100mm，再用粒径为ø16－32的卵石装填至要求高度。
第二层为ø8－16规格，装填高度150mm，第三层为ø4－8规格，装填料高度100mm，第四层为为ø2－4规格，装填料高度150mm，第五层为ø1－2规格，装填料高度200mm。
垫层装填总高度为1000mm。
装填时务必保证每层石英砂垫层均应平整（附石英砂装填示意图）。
4、装完石英砂填料层，关闭上、下人孔，再次做水压试验，合格后再打开上人孔，按技术协议要求树脂型号及每种树脂高度装填树脂（若不做水压试验，万一装好了树脂，下人孔漏，就会出大问题了，因为树脂随水一起流出来，你很难将下人孔紧到不漏水的。
弄的不好，还要将树脂挖出后从新装填）。
5、从上人孔装树脂，要注意的是一不要将树脂混错，二不要将包装材料落到床内。
树脂装填高度一般要高于规定的100mm。
6、关好上人孔，再次做水压试验。
离子交换层析柱和填料选择指南
平衡 1M
样品 上样体积
梯度洗脱
不结合的分子在 梯度开始前被洗脱
[NaCl]
10–20 CV
5–10 CV 0
柱体积（CV）
图1.使用梯度洗脱的典型IEX分离。
洗涤 高盐洗涤
5 CV
再平衡
紧密结合 的分子在 高盐洗涤 中被洗脱
5–10 CV
蛋白质由含有可以被测定的弱酸和弱碱基团（即电离 基团）。因此，蛋白质的净表面电荷是高度依赖的p H，并将随着环境pH变化而逐渐改变。每种蛋白质都 有其针对pH的独特静电荷关系，这可以被视为滴定 曲线（图2）。这条曲线反映了蛋白质整体净电荷如 何根据环境的pH变化。可以在不同的pH值下利用IEX 以分离具有截然不同电荷性质的多种蛋白。图2显示 如何选择正确的pH（实现令人满意的分最重要参数 之一）。
清洗程序，方案1
用4 CV达到70%的乙醇或30%的异丙醇洗涤。 用至少2 CV的蒸馏水冲洗，直到紫外基线和洗 脱pH稳定。 立即用3 CV的起始缓冲液洗涤（流速与步骤2相 同）。
清洗程序，方案2
用2 CV含有去垢剂的碱或酸溶液洗涤（例如含有 0.1–0.5%非离子型去垢剂的0.1 M乙酸）。 用5 CV 70%乙醇冲洗以去除残留的去垢剂。 用至少2 CV的蒸馏水冲洗（流速与步骤1相同）， 直到紫外基线和洗脱pH稳定。 用3 CV的起始缓冲液洗涤（流速与步骤1相同）。
用于阳离子交换层析的缓冲液
pH间隔
物质
1.4-2.4 2.6-3.6 2.6-3.6 3.3-4.3 3.3-4.3 3.7-4.7 5.1-6.1 4.3-5.3 5.2-6.2 5.6-6.5 6.7-7.7 7.0-8.0 7.8-8.8
马来酸 甲基马来酸 柠檬酸 乳酸 甲酸 琥珀酸 琥珀酸 乙酸 甲基马来酸 MES 磷酸盐 HEPES BICINE
离子交换剂预处理的方法 -回复
离子交换剂预处理的方法-回复离子交换剂预处理是一种常用的水处理方法，用于去除水中的离子污染物。
在这篇文章中，我将一步一步回答关于离子交换剂预处理的方法的问题，并详细解释每一步的原理和操作。
第一步：了解离子交换剂的原理和分类离子交换剂是一种能够去除水中离子的材料。
它们通常是高分子化合物或矿物质，具有特殊的交换活性基团。
根据其化学结构和功能，离子交换剂可以分为阳离子交换剂和阴离子交换剂。
阳离子交换剂可以去除水中的阳离子，如钠、钙、镁等，而阴离子交换剂则可以去除水中的阴离子，如氯离子、硝酸根离子等。
第二步：选择适合的离子交换剂在选择离子交换剂之前，需要对待处理水样的离子组成进行分析。
根据水样中存在的离子种类和浓度，选择相应的离子交换剂来去除特定的污染物。
例如，如果水样中含有高浓度的钙离子，可以选择具有高选择性钙离子交换基团的阳离子交换剂来处理。
第三步：制备离子交换剂床离子交换剂通常以粒状形式存在，并且需要制备成床层形式以进行处理。
制备床层的方法根据不同的离子交换剂而异。
一般情况下，将离子交换剂颗粒装填到特定的容器中，并使用支撑层和床层填料来固定离子交换剂颗粒。
这样可以确保水流通过床层时可以与离子交换剂充分接触。
第四步：水处理操作进行离子交换剂预处理时，需要将待处理水样通过制备好的离子交换剂床层。
水通过床层时，床层中的离子交换剂将与水中的离子发生交换作用。
靠近床层入口处的床层颗粒首先接触到水中的离子，而靠近床层出口处的床层颗粒则是最后接触到水中的离子。
离子在床层中的吸附和交换作用使得水中的离子被去除或替代。
第五步：再生或更换离子交换剂随着时间的推移，离子交换剂床层上的交换基团会逐渐饱和或变得不再有效。
当离子交换剂床层达到饱和或效果不佳时，需要进行再生或更换离子交换剂。
再生的过程通常涉及对床层进行反冲洗、酸洗或碱洗来去除吸附的离子，并恢复交换基团的活性。
如果再生无效或离子交换剂寿命已到，必须更换新的离子交换剂床层。
c18填料 氨基甲酸酯 离子交换 双功能
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1. c18填料C18填料是一种常用于高效液相色谱法（HPLC）分离和纯化的填料。
它是一种亲脂性填料，其主要成分是十八烷基链。
C18填料具有高度的稳定性和良好的亲脂性，能够有效分离非极性化合物。
2. 氨基甲酸酯氨基甲酸酯是一类重要的有机合成试剂，常用于氨基酸和肽类化合物的合成。
它具有较高的反应活性和化学稳定性，广泛应用于药物合成、生物化学研究和医药工业领域。
3. 离子交换离子交换是一种通过固定相上的功能基团与离子间相互作用实现的分离技术。
它广泛应用于离子交换色谱、离子交换膜和树脂的制备等领域。
4. 双功能双功能化合物指具有两种或多种不同功能基团的化合物。
这类化合物常常具有多种应用价值，例如药物分子设计中的多靶点作用、多功能材料和催化剂设计等。
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愿我的文章能够为你带来有益的信息和启发！C18填料是一种在高效液相色谱法（HPLC）中广泛应用的填料，其特点是具有较高的亲脂性和能有效分离非极性化合物。
它主要由十八烷基链构成，这种构造使其能够与非极性分子发生相互作用，并在分离过程中发挥作用。
C18填料在分离科学领域有着广泛的应用，在制药、化工、环境监测等多个领域都有着重要的作用。
HPLC技术是一种分离和检测化合物的重要技术，在HPLC中，填料被广泛应用于柱体中，通过填料和待测化合物之间的相互作用来实现分离。
博格隆离子交换填料
Bestarose DiamondBestarose Diamond QBestarose Diamond DEAE同传统的阴离子交换介质相比，该系列产品可在更高流速条件下捕获目的分子能在短时间处理更大体积的样品，缩短生产周期，提高产量适用于工业生产基质高度交联琼脂糖平均颗粒大小90μm离子载量Bestarose Diamond Q 160 -220μmolCl-/ml介质Bestarose Diamond DEAE 290 -350μmolCl-/ml介质动态结合载量Bestarose Diamond Q ＞100mgBSA/ml介质Bestarose Diamond DEAE ＞90mgOvalbumin/ml介质建议工作流速＜700cm/hpH稳定性Bestarose Diamond Q 2-12(工作) 2-14（CIP，短期）Bestarose Diamond DEAE 2-9 (工作) 2-14（CIP，短期）化学稳定性常用水性缓冲液稳定复合型阳离子交换介质Bestarose Diamond MMCMMC Bestarose 6FFMMC是一种复合型阳离子配基，具有该配基的介质，可从大批的物料中捕获和中度纯化蛋白上样无需稀释电导，高盐条件下结合蛋白新的选择性、包含离子、疏水和氢键作用Bestarose Diamond MMC与MMC Bestarose 6FF的基质不同，Diamond介质赋予介质更好的工业应用。
高流速、大体积处理量操作周期短、提高产量高刚性基质、耐压性能高离子交换剂类型Bestarose Diamond MMC 复合型阳离子交换剂MMC Bestarose 6FF 复合型阳离子交换剂动态结合载量Bestarose Diamond MMC 电导30mS/cm时，28mg BSA/ml介质MMC Bestarose 6FF 电导30mS/cm时，28mg BSA/ml介质建议工作流速Bestarose Diamond MMC <1000cm/hMMC Bestarose 6FF 50-400cm/h基质Bestarose Diamond MMC 高度交联琼脂糖MMC Bestarose 6FF 6%高度交联琼脂糖平均颗粒大小Bestarose Diamond MMC 75μmMMC Bestarose 6FF 90μmpH稳定性2-12(工作)，2-14(CIP，短期)化学稳定性在所有的常用缓冲液中稳定：8M尿素、6M盐酸胍、70%乙醇、1M NaOH、1M乙酸保存条件20%乙醇4℃-30℃Bestarose Diamond MMC纯化某重组蛋白Blue BestaroseBlue Bestarose 6 Fast FlowBlue Bestarose High Performance俗称“蓝胶”，是由配基Cibacron Blue 3G共价偶联到琼脂糖基质上制成，先进的基质生产工艺和交联工艺保证了它的高流速及高的动态结合载量。
阴离子交换填料使用说明
阴离子交换填料使用说明凝胶型号QAE葡聚糖凝胶A-25DEAE葡聚糖凝胶A-25DEAE葡聚糖凝胶A-50基团－N＋(CH2CH3)3Cl-－N(CH2CH3)2－N(CH2CH3)2载量 2.6-3.2mmol/g3-4mmol/g3-4mmol/g相应产品QAE Sephadex-A25DEAE Sephadex A-25DEAE Sephadex A-50颗粒大小（μm）干粉40-120干粉40-120干粉40-120应用离子交换层析介质，纯化蛋白及巨大分子等离子交换层析介质，纯化蛋白及巨大分子等离子交换层析介质，纯化蛋白及巨大分子等pH稳定性2-132-132-121使用方法将干粉浸泡于60-70％乙醇中过夜（充分搅拌），去离子水洗净乙醇。
取适量凝胶湿态装柱，绝对不能出现凝胶断层，依次分别用五倍柱体积的0.15M氢氧化钠、水、0.15M盐酸、水、0.15M氢氧化钠、水上柱至中性。
然后用上样的平衡液平衡柱后即可上样。
2上样量上样的多少取决于分离的要求及漏出的控制，当作饱和吸附时可以多上样，富集时为70-80％的柱体积，需要分离不同组分时应减少上样量，上样量控制在柱体积的25%以内。
柱高严格控制在25cm以内（A-50），因为这是软胶。
3洗脱方法：上样后用平衡液淋洗三个柱体积，然后在平衡液中加入一定浓度的氯化钠（或其它无机盐）进行洗脱（改变平衡液PH值也是洗脱的方法）。
4在位清洗（CIP）凝胶使用十次后作一次CIP，目的是去除柱床内沉淀的及顽固残留的蛋白。
方法是以0.15M氢氧化钠反向洗四个柱体积，再以至少三个柱体积平衡缓冲液再生。
请避免使用磷酸，醋酸缓冲液.而可以采用Tris-HCl作为使用Buffer。
5保存第1页，共2页用过的产品应密封贮存在4℃~25℃（保存溶液为20%乙醇），通风、干燥、清洁的地方。
不能冷冻。
用过的柱子贮存在4℃（20%乙醇）。
上样之前，样品必须去除色素，否则色素会被吸附到填料上，影响填料的正常使用。
离子交换树脂填料如何再生即使用时的注意事项
离子交换树脂填料如何再生即使用时的注意事项离子交换树脂是一种多孔性固体聚合物，它在水处理、化学分离和提纯等领域有着广泛的应用。
在使用过程中，树脂会逐渐丧失其交换能力，需要进行再生以恢复其功能。
以下是关于离子交换树脂再生的一般步骤以及使用时的注意事项：再生步骤：1. 反冲洗：用清水从下向上逆向清洗树脂层，以去除树脂中的悬浮颗粒和破碎树脂。
2. 浸泡：将树脂放入合适的再生液中浸泡，如强酸或强碱溶液，以使树脂上的离子被新离子替换。
3. 正冲洗：用清水从上向下冲洗树脂层，以彻底清除残留的再生液。
4. 淋洗（可选）：如果树脂用于生产高纯度水，可能需要进一步淋洗以减少可溶性杂质。
注意事项：安全防护：操作者应穿戴适当的防护设备，如橡胶手套、护目镜等，并避免直接接触皮肤和眼睛。
储存条件：树脂应储存在干燥的地方，避免暴露于阳光直射或极端温度下。
预处理：新树脂在使用前通常需要进行预处理，以去除制造过程中的杂质。
浓度控制：再生液的浓度要适当，浓度过高可能会损坏树脂，浓度过低则可能导致再生效果不佳。
时间控制：浸泡时间应根据实际情况调整，过短可能无法充分再生，过长则可能对树脂造成损伤。
水质监测：定期检查出水质量，当水质下降到一定水平时，应及时进行再生。
再生剂选择：选择适当的再生剂，例如阳离子树脂一般用硫酸或盐酸再生，阴离子树脂一般用氢氧化钠再生。
特定类型树脂的再生：对于不同的应用和树脂类型，再生方法可能有所不同。
例如：强酸性阳离子树脂用于钠离子交换器制取软水时，可用10%盐水反复浸泡3~4次，每次浸泡约1小时，然后完全再生。
制取纯水时，强酸性阳离子交换树脂依次用4~5%的HCl浸泡并水洗、4%的NaOH浸泡并水洗、4~5%的HCl浸泡并水洗，每次浸泡不少于1小时。
强碱型阴离子交换树脂依次用4%的NaOH浸泡并水洗、4~5%的HCl浸泡并水洗、4%的NaOH浸泡并水洗，每次浸泡不少于1小时。
博格隆离子交换填料
Bestarose DiamondBestarose Diamond QBestarose Diamond DEAE同传统的阴离子交换介质相比，该系列产品可在更高流速条件下捕获目的分子能在短时间内处理更大体积的样品，缩短生产周期，提高产量适用于工业生产基质高度交联琼脂糖平均颗粒大小90μm离子载量Bestarose Diamond Q 160 -220μmolCl-/ml介质Bestarose Diamond DEAE 290 -350μmolCl-/ml介质动态结合载量Bestarose Diamond Q ＞100mgBSA/ml介质Bestarose Diamond DEAE ＞90mgOvalbumin/ml介质建议工作流速＜700cm/hpH稳定性Bestarose Diamond Q 2-12(工作) 2-14（CIP，短期）Bestarose Diamond DEAE 2-9 (工作) 2-14（CIP，短期）化学稳定性常用水性缓冲液稳定复合型阳离子交换介质Bestarose Diamond MMCMMC Bestarose 6FFMMC是一种复合型阳离子配基，具有该配基的介质，可从大批的物料中捕获和中度纯化蛋白上样无需稀释电导，高盐条件下结合蛋白新的选择性、包含离子、疏水和氢键作用Bestarose Diamond MMC与MMC Bestarose 6FF的基质不同，Diamond介质赋予介质更好的工业应用。
高流速、大体积处理量操作周期短、提高产量高刚性基质、耐压性能高离子交换剂类型Bestarose Diamond MMC 复合型阳离子交换剂MMC Bestarose 6FF 复合型阳离子交换剂动态结合载量Bestarose Diamond MMC 电导30mS/cm时，28mg BSA/ml介质MMC Bestarose 6FF 电导30mS/cm时，28mg BSA/ml介质建议工作流速Bestarose Diamond MMC <1000cm/hMMC Bestarose 6FF 50-400cm/h基质Bestarose Diamond MMC 高度交联琼脂糖MMC Bestarose 6FF 6%高度交联琼脂糖平均颗粒大小Bestarose Diamond MMC 75μmMMC Bestarose 6FF 90μmpH稳定性2-12(工作)，2-14(CIP，短期)化学稳定性在所有的常用缓冲液中稳定：8M尿素、6M盐酸胍、70%乙醇、1M NaOH、1M乙酸保存条件20%乙醇4℃-30℃Bestarose Diamond MMC纯化某重组蛋白Blue BestaroseBlue Bestarose 6 Fast FlowBlue Bestarose High Performance俗称“蓝胶”，是由配基Cibacron Blue 3G共价偶联到琼脂糖基质上制成，先进的基质生产工艺和交联工艺保证了它的高流速及高的动态结合载量。
液相色谱的常见类型及其常用填料的特点与用途
液相色谱的常见类型及其常用填料的特点与用途
液相色谱（Liquid Chromatography）的常见类型包括：
1. 通用液相色谱（Normal Phase Liquid Chromatography，NPLC）：使用极性填料，非极性流动相，适用于分离极性化
合物。
2. 反相液相色谱（Reversed Phase Liquid Chromatography，RPLC）：使用非极性填料，极性流动相，适用于分离非极性
或弱极性化合物。
3. 离子交换色谱（Ion Exchange Chromatography，IEC）：使
用带有离子交换官能团的填料，适用于分离带电离子或分离具有不同离子状态的化合物。
4. 碳氢化合物色谱（Hydrocarbon Chromatography）：使用低
极性填料，适用于分离石油产品、燃料、有机溶剂等样品中的碳氢化合物。
在液相色谱中，常用的填料包括以下几种：
1. 硅胶填料（Silica Gel）：具有良好的化学稳定性和热稳定性，适用于大多数样品的分离。
2. C18填料：具有疏水性，适用于分离非极性化合物。
3. C8填料：相对于C18填料来说，更疏水，适用于分离更疏
水的化合物。
4. CN填料：具有较强的极性，适用于分离极性化合物。
5. NH2填料：具有亲水性，适用于分离极性化合物。
6. 离子交换填料：根据需要可以选择阴离子交换填料或阳离子交换填料，适用于分离带电化合物。
不同类型的填料具有不同的特点和用途。
根据需要选择合适的填料可以实现对不同类型化合物的有效分离和检测。
离子交换层析填料
离子交换层析填料
离子交换层析填料是水处理工程中一种常用的改性添加剂，它可以使水和离子相互交换，从而实现水质的降解改善。
离子交换层析填料的主要作用是去除水中的有害离子，通过它的作用，便能由水产生质量较高的饮用水和清洁水。
离子交换层析填料主要由吸附剂和助剂组成：吸附剂一般是熟碳、活性炭、氧化铝、石灰岩、矿物沥青等；助剂主要有曝气、添加剂、定量压力脱气剂等。
①熟碳：具有良好的向水中的有害离子吸附作用，有利于解决水质污染问题。
②活性炭：具有良好的物理吸附作用，特别适用于染料、有机污染物、重金属等污染物的去除。
③氧化铝：适用于去除水中溶解态的铝离子，可以有效降低水质中的铝含量。
④石灰岩：能有效缓解水中的酸性，保护水中有益离子，也可以用于去除水中镉等重金属元素。
⑤矿物沥青：适用于污染物的去除，主要是具有吸附和离子交换作用。
离子交换层析填料的具体选择要根据水质污染的种类和体积聚集性，选择最适当的吸附剂以及助剂以实现水质的改善。
此外，应尽量采用多种吸附剂和助剂的结合，这样可以增强去除有害离子的效果，保证水的质量。
阳离子交换填料使用说明
阳离子交换填料使用说明
货号:S8180
产品说明:
凝胶型号葡聚糖凝胶SP-C25葡聚糖凝胶CM-C25葡聚糖凝胶CM-C50基团－SO3－H＋－COO－H＋－COO－H＋
载量 2.0-2.6mmol/g190RNase mg/ml190RNase mg/ml 相应产品SP Sephadex-C25CM Sephadex C-25CM Sephadex C-50颗粒大小干粉40-120干粉40-120干粉40-120
应用低分子量蛋白、多
肽、核苷酸以及巨大
分子（MW>200KD）
低分子量蛋白、多肽、
核苷酸以及巨大分子
（MW>200KD）
中等大小生物分子（30－
200KD）
pH稳定性2-132-132-12
操作说明:
1.使用方法
将干粉浸泡于60-70%乙醇中过夜（充分搅拌），去离子水洗净乙醇。
取适量凝胶湿态装柱，绝对不能出现凝胶断层，依次分别用五倍柱体积的0.2M盐酸、水、0.5M氢氧化钠、0.2M盐酸、水上柱至中性。
然后用上样的平衡液平衡柱后即可上样。
2.上样量
上样的多少取决于分离的要求及漏出的控制，当作饱和吸附时可以多上样，需要分离不同组分时应减少上样量。
3.洗脱方法
上样后用平衡液淋洗三个柱体积，然后在平衡液中加入一定浓度的氯化钠（或其它无机盐）进行洗脱（改变平衡液PH值也是洗脱的方法）。
4.在位清洗（CIP）
凝胶使用十次后作一次CIP，目的是去除柱床内沉淀的及顽固残留的蛋白。
方法是用1M 氢氧化钠反向洗四个柱体积，再以至少三个柱体积平衡缓冲液再生。
请避免使用Tris.缓冲液。
层析填料的选择及其装柱技术介绍幻灯片
理想的基质应符合下面的要求： 1．极低的非特异性吸附。 2．高度的亲水性。 3．较好的理化稳定性。 4．大量的化学基团能被有效地活化，而且容易和配体结合。 5．适当的多孔性。
一般亲和吸附剂采用的基质有纤维素、聚丙烯酰胺凝胶、交联 葡聚糖、琼脂糖、交联琼脂糖、多孔玻璃珠等。
常用亲和吸附剂采用的基质
反相层析填料的选择原则
考虑样品组分的种类和性质、分离的规模及对分辨率 的要求、流动相条件：
待分离物分子量，对介质孔径的选择提供指导； 样品组分的疏水性质决定采用何种配基； 分离的规模及对分辨率的要求也是须考虑的因素，通
常分离规模和分辨率的关系是负相关的 ； 反相层析时的流动相条件很大程度上影响反相介质基
层析填料的选择 及装柱技术介绍
佳辰公司生物中心 陈阶
2012-04-18
如何选择填料？
一、依据所纯化的对象的各物理和化学特性。
（一般包括蛋白、酶、重组蛋白、单抗、抗体及抗原、肽类、病毒、 核酸等）
二、纯化所要达到的目的（粗提？中度纯化？ 精细纯化？）。
三、所要选择的层析方法
1. 凝胶过滤 ( Gf)
易脱落。 4) 配体自身应具有较好的稳定性。
根据配体对待分离物质的亲和性的不同，可以将其分为 两类：特异性配体（specific ligand）和通用性配体 （general ligand）
亲和吸附介质的配基
（1）酶的抑制剂 （2）抗体 （3）A蛋白 A蛋白（protein A）为分子量约42KD的蛋白质，
Sephadex LH-20 同时具备亲水和亲脂双重性质， 且被分离物质的极性在分离过程中起着重要作 用。
Pharmadex LH-20同时适用于分子类别非常相似 的物质的分离和工业规模的制备，既可用于初 步纯化步骤，也可用于最终精制步骤，如非对 映同分异构体的分离。
离子交换填料选择
采用离子交换柱纯化蛋白时，洗脱采用的离子强度的大小范围应该如何确定，可以根据什么来调整洗脱时的离子强度？离子交换纯化是利用离子交换剂上的可解离基团（活性基团）对各种离子的亲和力不一样人达到分离的目的的一种分离技术。
离子交换剂是含有若干活性基团的不溶性物质，即在不溶性母体上引入若干可解离基团而成，根据引入解离基团的不同，可以分为阳离子交换剂和阴离子交换剂。
各种离子对离子交换剂的亲和力各不相同，亲和力随离子的价数与原子序数增加而增加，而随离子水化膜半径的增加而降低。
对具体离子交换纯化，需要主要离子交换剂的选择和处理。
洗脱不同蛋白的最恰当的离子强度液不一定一样，通常采用浓度梯度和PH梯度相结合的方式洗脱，纯化不同的蛋白最好先摸一摸洗脱液的离子浓度和P H值，其具体的离子浓度范围可以很大，0.01mol/l到1mol/l，甚至3.0mol/l，PH值的范围液很广。
因为蛋白是通过静电引力可逆的结合在离子交换树脂上，要使蛋白与离子交换树脂之间离子键打开，最常用的方法就是加大反荷离子的浓度。
不同反荷离子与树脂亲和力是不同的，其强弱关系为：阳性竞争离子：Ag+》CS+〉K+〉NH4+〉Na+〉H+〉Li+阴性竞争离子：I->NO3->(PO4)3->CN-〉HSO3-〉Mg2+〉HCO3-〉HCO O-〉CH3COO-〉OH-〉F- 如果某种离子溶液洗脱效果不好，可用另一种亲和力强的离子代替。
离子交换柱属于弱离子交换剂，只有在一定的pH值范围内，才能有离子交换能力。
离子交换剂的选择，首重保持欲分离物质的生物活性，以及在不同pH值环境中，此物质所带的电荷和电性强弱。
1. 阴阳离子交换剂的选择若被分离物质带正电荷，例如polymyxin、cytochro me C这些碱性蛋白质，它们在酸性溶液中较稳定，亲和力强，故采用阳离子交换剂；其它像heparin、n ucleic acid这类酸性物质，在碱性溶液中较稳定，则使用阴离子交换剂；如果欲分离的物质是两性离子，一般考虑在它稳定的pH范围带有何种电荷，作为交换剂的选择。
IEX 离子交换填料
CM Beads6FF SP Beads6FFDEAE Beads6FF Q Beads6FF目录1.产品介绍 (1)2.纯化流程 (3)3.填料清洗 (4)4.问题及解决方案 (4)5.订购信息及相关产品 (4)1.产品介绍离子交换树脂广泛用于生物制药和生物工程下游蛋白质、核酸及多肽的分离纯化。
主要包括强酸性阳离子交换树脂、弱酸性阳离子交换树脂、强碱性阴离子交换树脂和弱碱性阴离子交换树脂四种。
本产品四种离子交换树脂均以高交联的6%琼脂糖为介质，可耐受较高的流速及更高的化学稳定性，适合实验室及工业大规模纯化，压力/流速曲线见图1。
图1.介质压力流速曲线（装柱直径50mm，柱高150mm）CM Beads6FFCM Beads6FF是一种弱阳离子交换树脂，离子交换基团为-O-CH2COO-，性能见表1。
表1.CM Beads6FF产品性能性能指标基质高度交联的6%琼脂糖微球离子交换类型弱阳离子离子载量约0.09-0.13mmol H+/ml介质粒径(μm)45-165建议流速300-600cm/hpH稳定范围4-13储存缓冲液含20%乙醇的1XPBS储存温度4°C-30°CSP Beads6FFSP Beads6FF是一种强阳离子交换树脂，离子交换基团-O-CH2CH2CH2SO3-，性能见表2。
表2.SP Beads6FF产品性能性能指标基质高度交联的6%琼脂糖微球离子交换类型强阳离子离子载量约0.18-0.25mmol H+/ml介质粒径(μm)45-165建议流速400-700cm/hpH稳定范围4-13储存缓冲液20%乙醇，0.2M醋酸钠储存温度4°C-30°CDEAE Beads6FFDEAE Beads6FF是一种弱阴离子交换树脂，离子交换基团，-O-CH2CH2-N(C2H5)2，具体性能见表3。
表3.DEAE Beads6FF产品性能性能指标基质高度交联的6%琼脂糖微球离子交换类型弱阴离子离子载量约0.11-0.16mmol Cl-/ml介质粒径(μm)45-165建议流速300-600cm/hpH稳定范围2-12储存缓冲液含20%乙醇的1XPBS储存温度4°C-30°CQ Beads6FFQ Beads6FF是一种强阴离子交换树脂，离子交换基团如下，具体性能见表4。
阳离子交换填料使用说明
阳离子交换填料使用说明
货号:S8180
产品说明:
凝胶型号葡聚糖凝胶SP-C25葡聚糖凝胶CM-C25葡聚糖凝胶CM-C50基团－SO3－H＋－COO－H＋－COO－H＋
载量 2.0-2.6mmol/g190RNase mg/ml190RNase mg/ml 相应产品SP Sephadex-C25CM Sephadex C-25CM Sephadex C-50颗粒大小（μm）干粉40-120干粉40-120干粉40-120
应用低分子量蛋白、多肽、核
苷酸以及巨大分子
（MW>200KD）
低分子量蛋白、多肽、核苷酸
以及巨大分子（MW>200KD）
中等大小生物分子（30－
200KD）
pH稳定性2-132-132-12
操作说明:
1.使用方法
将干粉浸泡于60-70%乙醇中过夜（充分搅拌），去离子水洗净乙醇。
取适量凝胶湿态装柱，绝对不能出现凝胶断层，依次分别用五倍柱体积的0.2M盐酸、水、0.5M氢氧化钠、0.2M盐酸、水上柱至中性。
然后用上样的平衡液平衡柱后即可上样。
2.上样量
上样的多少取决于分离的要求及漏出的控制，当作饱和吸附时可以多上样，需要分离不同组分时应减少上样量。
3.洗脱方法
上样后用平衡液淋洗三个柱体积，然后在平衡液中加入一定浓度的氯化钠（或其它无机盐）进行洗脱（改变平衡液PH值也是洗脱的方法）。
4.在位清洗（CIP）
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凝胶使用十次后作一次CIP，目的是去除柱床内沉淀的及顽固残留的蛋白。
方法是用1M氢氧化钠反向洗四个柱体积，再以至少三个柱体积平衡缓冲液再生。
请避免使用Tris.缓冲液。
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离子交换层析配基、基架、填料
离子交换层析配基、基架、填料
离子交换层析技术是一种高效的分离纯化技术，在工业化生产、科研领域和医药制造中广泛应用。
离子交换层析的核心是离子交换基质，其中的配基、基架、填料是其重要组成部分。
配基是离子交换基质的主要功能部分，它能吸附目标离子，并释放出相同电荷的离子。
常见的配基有阴离子交换树脂、阳离子交换树脂、配体亲和树脂等。
这些配基的选择要根据目标离子的性质进行，如分子大小、电荷、亲和力等。
基架是离子交换基质的骨架部分，它决定了基质的物理和化学性质。
常见的基架有聚苯乙烯、聚丙烯、聚酰胺等。
基架的选择要考虑到其耐化学腐蚀性、耐高压性和耐温度性等。
填料是离子交换基质中的孔隙部分，其物理和化学性质直接影响了离子交换的效率和选择性。
常见的填料有硅胶、氧化铝、羟基磷灰石等。
填料的选择要根据其孔径大小、表面极性、化学活性等因素进行。
离子交换层析技术的发展，离不开配基、基架、填料等关键技术的不断创新和进步。
随着新型配基、基架、填料的不断出现，离子交换层析技术将会有更广泛的应用空间和更高的效率。
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离子色谱柱填料
离子色谱柱填料
离子色谱柱的填料主要有以下几种类型：
1. 碳酸酯离子交换柱填料：如强阳离子交换柱、强阴离子交换柱等。
这种填料具有较高的吸附容量和分离效果，适用于各种离子化合物的分离和测定。
2. 聚合物离子交换柱填料：如四乙烯四胺离子交换柱、乙二胺离子交换柱等。
这种填料通常具有较高的分离能力和选择性，适用于复杂样品的分析。
3. 硅胶离子交换柱填料：如硅胶强/弱阳离子交换柱、硅胶强/弱阴离子交换柱等。
这种填料结构稳定，容易操作，适用于分离中、小离子和有机酸类化合物。
4. 快速离子交换柱填料：如快速离子交换柱RS等。
这种填料具有较高的分离速度和分离效果，适用于高效分离和分析。
根据不同的实验需求和分析目标，可以选择不同类型的离子色谱柱填料。
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离子交换填料的选择、处理和保存
(1)离子交换填料的选择
离子交换填料的种类很多，离子交换层析要取得较好的效果首先要选择合适的离子交换填料。
首先是对离子交换填料电荷基团的选择，确定是选择阳离子交换填料还是选择阴离子交换填料。
这要取决于被分离的物质在其稳定的pH 下所带的电荷，如果带正电，则选择阳离子交换填料；如带负电，则选择阴离子交换填料。
例如待分离的蛋白等电点为4，稳定的pH 范围为6－9，由于这时蛋白带负电，故应选择阴离子交换填料进行分离。
强酸或强碱型离子交换填料适用的pH 范围广，常用于分离一些小分子物质或在极端pH 下的分离。
由于弱酸型或弱碱型离子交换填料不易使蛋白质失活，故一般分离蛋白质等大分子物质常用弱酸型或弱碱型离子交换填料。
其次是对离子交换填料基质的选择。
前面已经介绍了，聚苯乙烯离子交换填料等疏水性较强的离子交换填料一般常用于分离小分子物质，如无机离子、氨基酸、核苷酸等。
而纤维素、葡聚糖、琼脂糖等离子交换填料亲水性较强，适合于分离蛋白质等大分子物质。
一般纤维素离子交换填料价格较低，但分辨率和稳定性都较低，适于初步分离和大量制备。
葡聚糖离子交换填料的分辨率和价格适中，但受外界影响较大，体积可能随离子强度和pH 变化有较大改变，影响分辨率。
琼脂糖离子交换填料机械稳定性较好，分辨率也较高，但价格较贵。
另外离子交换填料颗粒大小也会影响分离的效果。
离子交换填料颗粒一般呈球形，颗粒的大小通常以目数(mesh)或者颗粒直径(mm)来表示，目数越大表示直径越小。
前面在介绍交换容量时提到了一些关于交换剂颗粒大小、孔隙的选择。
另外离子交换层析柱的分辨率和流速也都与所用的离子交换填料颗粒大小有关。
一般来说颗粒小，分辨率高，但平衡离子的平衡时间长，流速慢；颗粒大则相反。
所以大颗粒的离子交换填料适合于对分辨率要求不高的大规模制备性分离，而小颗粒的离子交换填料适于需要高分辨率的分析或分离。
这里特别要提到的是，离子交换纤维素目前种类很多，其中以DEAE-纤维素(二乙基氨基纤维素)和CM-纤维素(羧甲基纤维素)最常用，它们在生物大分子物质(蛋白质，酶，核酸等)的分离方面显示很大的优越性。
一是它具有开放性长链和松散的网状结构，有较大的表面积，大分子可自由通过，使它的实际交换容量要比离子交换树脂大的多；二是它具有亲水性，对蛋白质等生物大分子物质吸附的不太牢，用较温和的洗脱条件就可达到分离的目的，因此不致引起生物大分子物质的变性和失活。
三是它的回收率高。
所以离子交换纤维素已成为非常重要的一类离子交换填料。
(2)离子交换填料的处理和保存
离子交换填料使用前一般要进行处理。
干粉状的离子交换填料首先要进行膨化，将干粉在水中充分溶胀，以使离子交换填料颗粒的孔隙增大，具有交换活性的电荷基团充分暴露出来。
而后用水悬浮去除杂质和细小颗粒。
再用酸碱分别浸泡，每一种试剂处理后要用水洗至中性，再用另一种试剂处理，最后再用水洗至中性，这是为了进一步去除杂质，并使离子交换填料带上需要的平衡离子。
市售的离子交换填料中通常阳离子交换填料为Na 型(即平衡离子是Na 离子)，阴离子交换填料为Cl 型，因为通常这样比较稳定。
处理时一般阳离子交换填料最后用碱处理，阴离子交换填料最后用酸处理。
常用的酸是HCl，碱是NaOH 或再加一定的NaCl，这样处理后阳离子交换填料为Na 型，阴离子交换填料为Cl 型。
使用的酸碱浓度一般小于0.5mol/L，浸泡时间一般30min。
处理时应注意酸碱浓度不宜过高、处理时间不宜过长、温度不宜过高，以免离子交换填料被破坏。
另外要注意的是离子交换填料使用前要排除气泡，否则会影响分离效果。
离子交换填料的再生是指对使用过的离子交换填料进行处理，使其恢复原来性状的过程。
前面介绍的酸碱交替浸泡的处理方法就可以使离子交换填料再生。
离子交换填料的转型
是指离子交换填料由一种平衡离子转为另一种平衡离子的过程。
如对阴离子交换填料用HCl 处理可将其转为Cl 型，用NaOH 处理可转为OH 型，用甲酸钠处理可转为甲酸型等等。
对离子交换填料的处理、再生和转型的目的是一致的，都是为了使离子交换填料带上所需的平衡离子。
前面已经介绍了，离子交换层析就是通过离子交换填料上的平衡离子与样品中的组分离子进行可逆的交换而实现分离的目的，因此在离子交换层析前要注意使离子交换填料带上合适的平衡离子，使平衡离子能与样品中的组分离子进行有效的交换。
如果平衡离子与离子交换填料结合力过强，会造成组分离子难以与交换剂结合而使交换容量降低。
另外还要保证平衡离子不对样品组分有明显影响。
因为在分离过程中，平衡离子被置换到流动相中，它不能对样品组分有污染或破坏。
如在制备过程中用到的离子交换填料的平衡离子是H 或OH 离子，因为其它离子都会对纯水有污染。
但是在分离蛋白质时，一般不能使用H 或OH 型离子交换填料，因为分离过程中H 或OH 离子被置换出来都会改变层析柱内pH 值，影响分离效果，甚至引起蛋白质的变性。
离子交换填料保存时应首先处理洗净蛋白等杂质，并加入适当的防腐剂，一般加入0.02 %的叠氮钠，4°C 下保存。