微生物检验实验室李斯特菌属标准操作规程

微生物检验实验室李斯特菌属标准操作规程

1.概述

李斯特菌属包括产单核细胞李斯特菌、伊氏李斯特菌、斯氏李斯特菌等菌种，其中产单核细胞李斯特菌对人和动物致病。

2.标本类型

血液、脑脊液、尿液、痰、穿刺液、脓液标本。

3.鉴定

3.1形态与染色：革兰阳性小杆菌，大小为（0.4~0.5um）×(1~2um),直或微弯，常呈V字形成对排列，偶尔可见双球状；无芽胞，无荚膜，在22~25℃形成周鞭毛，有动力，37℃时

鞭毛很少或无。

3.2培养特性：在血琼脂平板上形成较小、圆形、光滑而有

狭窄β溶血环的

菌落；在液体培养基中呈均匀浑浊生长；在半固体培养基中，动力自穿刺线向四周蔓延生长，呈倒伞状。

3.3生化反应：触酶试验阳性；分解葡萄糖、鼠李糖、水杨苷，不分解蔗糖、木糖、甘露醇；吲哚、尿素酶和硝酸盐还原试验阴性，甲基红、VP和CAMP试验阳性。

3.4鉴别要点：

3.4.1本菌特征：革兰阳性短杆菌，菌落较小，有狭窄的℃时无动力；触酶试验阳性，37℃时有动力，25溶血环；β．

分解葡萄糖、水杨苷，不分解甘露醇。

3.4.2 与肠球菌的鉴别本菌具有耐盐、耐碱、耐胆汁等特点，易误为粪肠球菌，两者可用触酶试验加以鉴别。

3.4.3 与无乳链球菌的鉴别本菌也可能因培养条件不同而

呈链状，37℃培养往往无动力，CAMP试验阳性，常误为B 群链球菌；链球菌触酶试验阴性可与之鉴别。

3.5 操作步骤

3.5.1 涂片染色观察菌落特征，在血平板上挑取可以菌落，涂片染色镜检。

3.5.2 触酶试验参见《触酶试验标准操作规程》

3.5.3 鉴定从血平板上挑取纯菌落，用微生物鉴定仪或传

统生化反应进行细菌鉴定。

4.药敏

参见《药物敏感性试验标准操作规程》及CLSI M100-S20最新版本文件.

5.质量控制

参见《质量控制程序》

6.检验结果解释与分析

本菌容易被认为是污染的杂菌（类白喉杆菌）而丢弃。幼龄培养呈革兰阳性，48h后多转为革兰阴性。因此当遇到25℃培养有动力的杆菌，而按照革兰阴性杆菌鉴定不符时，应

考虑到李斯特菌的可能。．

7.临床意义

产单核细胞李斯特菌在自然界分布很广，土壤、水、人和动物粪便中均可存在，常伴随EB病毒引起传染性单核细胞增

多症，也可引起脑膜炎、败血症等。近年来在发达国家常因污染奶制品引起食物中毒。

8.鉴别流程

较小、圆形、光滑而有狭窄β溶血菌落观察：

V小杆菌，直或微弯，呈字形成对排列G+涂片染色：

触酶+，25℃动力+

+CAMP试验-

其他李斯特菌产单核细胞李斯特菌

参考文献[1] 中国合格评定国家认可委员会.CNAS-GL23；2008医学实验室质量和能力认可准则在临床微生物学检验

领域的指南.2008

[2] 周庭银编著.临床微生物学诊断与图解.第二版.上海：上海科学技术出版社，2007

[3] 叶应妩，王毓三，申子瑜主编.全国临床检验操作规程.

第三版.南京：东南大学出版社，2006

[4] MurrayPR.Manual O/F Clinical Mircrobilogy.9th

ed.Washington:ASM Press,2007

[5] ISO 15189:2007医学实验室-质量和能力认可准则.2007

编写人：AAA、BBB 操作人：本室操作人员

批准人：