79例自然流产绒毛的染色体分析

79例自然流产绒毛的染色体分析

李 凡,温庆荣,郑胤强,马 莉,郭 芸

(赣州巿妇女儿童医院,江西 赣州 341000)

摘 要:目的:探讨自然流产与染色体异常的关系,为临床提供科学依据。方法:对79例自然流产绒毛采用直接

法或培养法制备染色体,常规制片,G 显带,染色体核型分析。结果:检出染色体异常42例;异常率为53.16%。结论:染色体异常是导致自然流产的重要因素之一。进行染色体检查,对自然流产的病因、诊断及再次妊娠具有重要的指导意义。

关键词:自然流产;染色体异常中图分类号:R 715.5 文献标识码:A 文章编号:1001-5779(2009)03-0376-02

自然流产是妇科的常见病之一。合子内在的缺陷是引起胚胎早死及自发流产的重要原因。我室对79例自然流产绒毛进行染色体分析,现报告如下。

1 对象与方法

1.1 对象 79例绒毛来自因有自然流产先兆,前来我院妇科门诊、遗传门诊就诊以及在妇科病房住院的患者,均B 超检查提示:/胚胎停育0或难免流产,而行清宫术(流产胚胎为孕37~84天,孕妇年龄20~36岁)1.2 方法 在无菌负压吸宫术中获得绒毛组织,置无菌生理盐水中进行挑选,选出优质绒毛组织5~7m g 剪碎置10mL 的离心管,加入1%枸橼酸钠3~4mL 及秋水仙素(最终浓度为0.5~0.6L g /mL)混匀,置37e 水浴箱中15m in ,取出加固定剂(甲醇B 冰醋酸=3B 1)0.5mL 混匀,以1500r /m i n 离心

3m i n ,弃上清液。加固定液3mL 混匀,置室温固定

15m i n ,离心弃上清液。再重复固定一次。加60%冰醋酸数滴后再加固定剂数滴,离心弃上清液。加新配固定剂数滴混匀,滴于预热玻片上,56e 烤箱烤片14h 。G 显带,核型分析3个,计数20个以上。结构异常或嵌合体增加计数及分析。同时,对79例夫妇进行外周血染色体分析。按照I SC N (1995)描述核型。

2 结 果

在对79例绒毛染色体进行核型分析中,正常核型37例,异常核型42例,异常率为53.16%。常染色体数目异常32例、结构异常3例;性染色体数目异常4例、结构异常1例;三倍体2例。绒毛染色体异常核型见表1。

表1 绒毛染色体异常核型

序号染色体异常核型

例数(%)1

45,X

49.5247,XX (XY ),+237.1347,XX (XY ),+337.1447,XY,+712.4546,XX /47,XX ,+8

12.4647,XX,+14

24.8747,XX (XY ),+16(46,XY /47,XY,+16)1330.9847,XY,+1712.4947,XX,+21(47,XY,i nv(9),+21)24.81047,XX (XY ),+22(46,XY /47,XY,+22)614.21169,XXY

24.81246,XY,i nv(9)/46,XY,inv(9),-7,+der(7)t(7;13)(q35;q13)12.41346,XX,-13,+t(13;13)12.41446,XY,-13,+der(13)t(5;13)(q22;p13)12.41546,XY,Y \18

12.4合计

42

100.0

第29卷第3期 赣 南 医 学 院 学 报 Vo l .29NO .32009年6月 J OURNAL OF GANNAN M EDI CAL UN I V ERSI TY JUN .2009

在对79例夫妇进行外周血染色体分析中,检出平衡易位携带者1例,9号臂间倒位2例,大Y1例。

3讨论

孕早期胚胎染色体异常是自然流产最重要的原因之一。1977年徐道觉报道,自然流产胚胎染色体畸变者约占流产胚胎的42%[1],国内外文献均有报道,自然流产中胚胎染色体异常占50%左右。本文结果显示胚胎染色体异常率53.16%,与报道相近。

大约70%的人类胚胎都在着床前后死亡,染色体的非整倍体被认为是造成人类胚胎这种低着床率和早期丢失的一个重要原因[2]。这种染色体数目畸变的主要发生源自双亲之一方的配子形成时或妊娠初期受精卵卵裂时出现了某号染色体不分离,则导致该染色体增多或减少一条,亦即导致三体性或单体性。21-三体在活产儿中最常见,13-三体、18-三体也偶尔可见,而其它常染色体的三体性大多导致流产。性染色体的三体性在活产女婴中有见,性染色体的单体性不仅见于流产儿,也见于儿童或成人。在本文流产绒毛染色体分析中,常染色体三体是最多见的数目畸变,检出32例,占异常核型的76%,它涉及2、3、7、8、13、14、16、21和22号染色体,以16-三体最多13例,随体性三体共10例,占所有三体的81.25%。有资料显示,在有丝分裂中期的分裂相中,经常可以看到带随体染色体的随体联合。随体联合常常干扰染色体的正常分离[3]。有认为次缢痕和随体的变异可能影响纺锤体不能与染色体相接,干扰染色体的正常运动和分离[4]。16号染色体、带随体染色体的变异频率较高,因此它们可能发生三体性的频率较高。性染色体单体数目畸变,本文4例,占异常核型的9.5%,45,X,这种畸变,除减数分裂时性染色体不分离,导致减少一条性染色体外,其中大约3/4是父系性染色体丢失[1]。

三倍体在流产儿中也十分常见。本文2例,占4.8%,这种染色体的数目异常可源自新的突变,或源自双亲之一方配子形成中的异常有丝分裂或源自精母细胞或卵母细胞减数分裂中的异常,也可源自双受精等。这类染色体异常一般在孕8周以前流产,曾有极少数纯三倍体的活婴报告[5]。

在流产绒毛染色体分析中,染色体结构异常本文检出4例(常染色体结构异常3例;性染色体结构异常1例)。例1;染色体核型:46,XY,-13,+t (13;13),双亲外周血染色体检查均正常,异常染色体来自新的突变。例2;染色体核型:46,XY,-13,

+der(13)t(5;13)(5q22;13p13)m a,t双亲外周血染色体检查,父亲核型正常,母亲核型为46,XX,t (5;13)(q22;p13)。异常染色体来自母亲相互易位的染色体配子,在减速分裂中,通过同源染色体间的配对、交换和分离,形成18种类型的配子,其中一种异常配子与正常配子结合,即形成为5号染色体长臂部分三体,13号染色体短臂部分单体的衍生染色体胚胎导致流产。例3;46,XY,i n v(9)/46,inv(9), -7,+der(7)t(7;13)(7q35;13q13),双亲外周血染色体检查,父亲核型正常,母亲核型为46,XX,inv (9)。9号染色体臂间倒位,属于多态变异,它在人群中的发生率为1%[1]。多态现象通常没有不良的临床后果。但目前许多资料都倾向于多态现象与异常妊娠有关。9号染色体臂间倒位的遗传主要决定于重复的或缺失片断的长短及其所含基因的致死效应[6]。本文出现的嵌合型染色体异常,是否与之相关,尚待进一步研究。本文另一例9号染色体臂间倒位者,其绒毛染色体核型为:47,XY,inv(9),+ 21。例4;46,XY(Y\18),父亲核型为46,XY(Y\ 18),母有二次自然流产史,之后,随访生育一正常女孩。Y染色体大小差异亦属于多态变异,大Y异染色质中DNA过多重复在某些方面可能造成有丝分裂发生错误或影响基因调节及细胞分化紊乱[7]。从而导致不良妊娠结局。染色体异常是导致自然流产的重要因素之一。进行染色体检查,对自然流产的病因、诊断及再次妊娠具有重要的指导意义。

参考文献:

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(收稿日期:2009-03-15)

3期李凡,等79例自然流产绒毛的染色体分析