医院常规细菌培养 ppt课件
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医院空气细菌培养常规知识讲解
六、附录
Ⅰ类区域：层流洁净手术室、层流洁净病 房（参照洁净室空气培养方法与标准）。 Ⅱ类区域：普通手术室、产房、婴儿室、 早产儿室、普通保护性隔离室、供应室无 菌区、烧伤病房、重症监护病房。 Ⅲ类区域：儿科病房、妇产科检查室、注 射室、换药室、治疗室供应室清洁区、急 诊室、化验室、各类普通病房和房间。 Ⅳ类区域：传染病科及病房。
1、采样时间，选择消毒处理后4h内进行采样。 2、采样面积，被采表面＜100c㎡，取全部表
面；被采表面≥100 c㎡，取100 c㎡。 3、采样方法，用5 x5cm2的标准灭菌规格板；
放在被检物体表面，用浸有无菌生理盐水采样液的 棉拭子1支，在规格板内横竖往返各涂抹5次，并随 之转动棉拭子，连续采样4个规格板面积，剪去手 接触部分，将棉拭子放人装l0ml采样液的试管中送 检。门把手等小型物体则采用棉拭子直接涂抹物体 的方法采样。
Байду номын сангаас 6、采集标本要无菌观念强、操作熟练、标记 清楚明确。
医护人员手采样
1、采样时间，在接触病人、从事医疗活动前进行 采样。
2、采样面积及方法，被检人五指并拢，将浸 有无菌生理盐水采样液的棉试子一支在双手指曲面 从指根到指端来回涂擦各两次（一只手涂擦面积 30cm² )，并随之转动采样棉试子，剪去手接触部 位，将棉试子放人装有l0ml采样液的试管内送检。 采样面积按平方厘米（cm ²）计算。
(6)打开平皿盖，将盖口向下扣放，计时；
(7）暴露5分钟；
(8)纪录采样房间面积、时间、地点、位置、采 样人及采样时环境条件（如湿度、温度）
(9）看表、5分钟；
（10）收取平皿；
（11）如室内面积＜30m2一条对角线上取3点， 放平皿时先放最里边（内边），收取时先收最外边 点上的平皿；
医院常规空气细菌培养PPT课件
• （10）收取平皿；
• （11）如室内面积＜30m2一条对角线上取3点， 放平皿时先放最里边（内边），收取时先收最外边 点上的平皿；
医院常规空气细菌培养
10
• 物体表面采样
医院常规空气细菌培养
11
• 1、采样时间，选择消毒处理后4h内进行采样。
•
2、采样面积，被采表面＜100c㎡，取全部表
面；被采表面≥100 c㎡，取100 c㎡。
7
• 1)着装整洁，帽子遮住全部头发，口罩遮盖口鼻；
•
(2)备齐用物：治疗盘或篮、酒精灯、火柴、
直径9cm普通营养琼脂平皿（根据需要备足量，分
别标记1,2,3,4,5；或东、西、南、北、中；或东
南、西南、东北、西北、中）、灭菌棉拭子、试管、
试管架、笔、纪录单、计时表、湿度、温度计。
•
(3)剪指甲、洗手；
取出5个培养皿将培养皿翻转放在采样点上。摆放
相应高度的凳子或治疗车、桌，采样高度与地面垂
直高度80一150cm;
医院常规空气细菌培养
9
• (6)打开平皿盖，将盖口向下扣放，计时；
• (7）暴露5分钟；
• (8)纪录采样房间面积、时间、地点、位置、采 样人及采样时环境条件（如湿度、温度）
• (9）看表、5分钟；
4、布点方法，室内面积≤30m 2，设一条对角线上取3 点，即中心一点、两端各距墙lm处各取一点；室内面积＞ 30m2，设东、西、南、北、中5点，其中东、西、南、北 点均距墙lm.
医院常规空气细菌培养
2
• 1.面积≤30 m2，设一条对角线取三点，即中间一 点，两端各距墙1米处各取一点（图1)
医院常规空气细菌培养
拭子放人装l0ml采样液的试管中； • （15)对于曲线物体、小型物体等则（门把手等）
• （11）如室内面积＜30m2一条对角线上取3点， 放平皿时先放最里边（内边），收取时先收最外边 点上的平皿；
医院常规空气细菌培养
10
• 物体表面采样
医院常规空气细菌培养
11
• 1、采样时间，选择消毒处理后4h内进行采样。
•
2、采样面积，被采表面＜100c㎡，取全部表
面；被采表面≥100 c㎡，取100 c㎡。
7
• 1)着装整洁，帽子遮住全部头发，口罩遮盖口鼻；
•
(2)备齐用物：治疗盘或篮、酒精灯、火柴、
直径9cm普通营养琼脂平皿（根据需要备足量，分
别标记1,2,3,4,5；或东、西、南、北、中；或东
南、西南、东北、西北、中）、灭菌棉拭子、试管、
试管架、笔、纪录单、计时表、湿度、温度计。
•
(3)剪指甲、洗手；
取出5个培养皿将培养皿翻转放在采样点上。摆放
相应高度的凳子或治疗车、桌，采样高度与地面垂
直高度80一150cm;
医院常规空气细菌培养
9
• (6)打开平皿盖，将盖口向下扣放，计时；
• (7）暴露5分钟；
• (8)纪录采样房间面积、时间、地点、位置、采 样人及采样时环境条件（如湿度、温度）
• (9）看表、5分钟；
4、布点方法，室内面积≤30m 2，设一条对角线上取3 点，即中心一点、两端各距墙lm处各取一点；室内面积＞ 30m2，设东、西、南、北、中5点，其中东、西、南、北 点均距墙lm.
医院常规空气细菌培养
2
• 1.面积≤30 m2，设一条对角线取三点，即中间一 点，两端各距墙1米处各取一点（图1)
医院常规空气细菌培养
拭子放人装l0ml采样液的试管中； • （15)对于曲线物体、小型物体等则（门把手等）
医院常规细菌培养
医院常规细菌培养
手术室
编辑版ppt
1
空气培养方法及标准
程序要求：在做空气培养前1小时，关闭室 内门窗，打开层流，减少室内人员走动，使 空气静止。从检验科取培养皿，途中应用包 布包裹，做培养者戴好口罩帽子，将培养皿 放于需做培养的房间内，打开5分钟。在采 样时禁止有人走动，采样结束后，盖好玻璃 培养皿，填写培养单，贴好标记，用包布包 裹后送细菌室培养。培养结果报告，由专人 保存，除霉雨季节每月做两次空气培养，其 余时间每月做一次
布点方法：如图
编辑版ppt
2
①面积≤30平米，设一条对角线取三点， 即中间一点，两端各距墙1米处各取一点 (手术室层流手术室面积27平米）
编辑版ppt
3
②室内面积>30平米，设两条对角线，东，
西，南，北，中取五点，其中东，西， 南北距墙均1米（飞秒手术室面积为32平 米）
编辑版ppt
4
采样方法：用9cm直径普通培养皿放在 采样点暴露5 分钟后送检培养
编辑版ppt
10
医护人员手采样 采样时间：在接触病人、从事医疗活 动前进行采样。 结果计算：手细菌菌落总数=平皿上菌 落的平均数×采样液稀释倍数
编辑版ppt
11
采样方法
剪指甲、洗手 着装整洁，帽子遮住全部头发，口罩遮盖口鼻； 取一支灭菌棉拭子，取标记“手”的试管 盖严试管 嘱被检人五指并拢 将浸有无菌生理盐水采样液的棉试子一支在双手指 曲面从指根到指端来回涂擦各两次，并随之转动采 样棉试子,五指分开,涂擦指缝、指尖
编辑版ppt
6
看表、5分钟；
取平皿
注意事项:放平皿时先放最里边（内边 ），收取时先收最外边点上的平皿
编辑版ppt
7
手术室
编辑版ppt
1
空气培养方法及标准
程序要求：在做空气培养前1小时，关闭室 内门窗，打开层流，减少室内人员走动，使 空气静止。从检验科取培养皿，途中应用包 布包裹，做培养者戴好口罩帽子，将培养皿 放于需做培养的房间内，打开5分钟。在采 样时禁止有人走动，采样结束后，盖好玻璃 培养皿，填写培养单，贴好标记，用包布包 裹后送细菌室培养。培养结果报告，由专人 保存，除霉雨季节每月做两次空气培养，其 余时间每月做一次
布点方法：如图
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2
①面积≤30平米，设一条对角线取三点， 即中间一点，两端各距墙1米处各取一点 (手术室层流手术室面积27平米）
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3
②室内面积>30平米，设两条对角线，东，
西，南，北，中取五点，其中东，西， 南北距墙均1米（飞秒手术室面积为32平 米）
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4
采样方法：用9cm直径普通培养皿放在 采样点暴露5 分钟后送检培养
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10
医护人员手采样 采样时间：在接触病人、从事医疗活 动前进行采样。 结果计算：手细菌菌落总数=平皿上菌 落的平均数×采样液稀释倍数
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11
采样方法
剪指甲、洗手 着装整洁，帽子遮住全部头发，口罩遮盖口鼻； 取一支灭菌棉拭子，取标记“手”的试管 盖严试管 嘱被检人五指并拢 将浸有无菌生理盐水采样液的棉试子一支在双手指 曲面从指根到指端来回涂擦各两次，并随之转动采 样棉试子,五指分开,涂擦指缝、指尖
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6
看表、5分钟；
取平皿
注意事项:放平皿时先放最里边（内边 ），收取时先收最外边点上的平皿
编辑版ppt
7
细菌培养鉴定及抗菌药物敏感试验PPT课件
头孢羟氨苄）
• 环丙沙星：二代喹诺酮类（氧氟沙星、洛美沙星、氟咯沙星、培氟沙星、诺氟沙星即氟 酸）
• 红霉素：大环内酯类 • 呋喃妥因（坦丁）：硝基呋喃类（目前由于更有效的低毒的喹诺酮类应用已受限） • 庆大霉素：氨基糖苷类 • 庆大霉素增效：氨苄西林、青霉素或万古霉素和氨基糖苷类抗生素联合有无协同作用 • 亚胺培南：碳青霉烯类（美洛培南、必安培南、帕尼培南） • 左旋氧氟沙星：第三代喹诺酮类（司帕沙星、妥舒沙星、左氟沙星） • 利奈唑胺：恶唑烷酮类 • 苯唑西林：耐酶青霉素（甲氧西林、萘夫西林、氯唑西林、氟氯西林） • 青霉素： • 哌拉西林/他唑巴坦：脲基组青霉素（美洛西林、阿洛西林哌拉西林）及β-内酰胺酶抑
制剂 • 利福平： • 链霉素增效：氨苄西林、青霉素活万古霉素和氨基糖苷类抗生素联合有无协同作用 • 辛内吉：奎奴普汀-达福普汀 • 复方新诺明：SMZ/TMP磺胺甲恶唑(SMZ)与甲氧苄啶(TMP)的复方制剂 • 四环素：对四环素S可推测多西环素和米诺环素S，但四环素R/I二者也可以S • 万古霉素：糖肽类（替卡拉宁）
• 肠球菌属：氨基糖苷类（除高浓度筛选外）、头孢菌素 类、克林霉素和甲氧苄啶/磺胺甲噁唑（复方新诺明） 耐药
• 鼠疫耶尔森菌：β-内酰胺类抗微生物药 • 鲍曼不动杆菌或无硝不动杆菌：所有氨基青霉素或Ⅰ、
Ⅱ代头孢或氯霉素，这两菌对以上抗生素天然耐药。 • 洋葱伯克霍尔德菌：氨基糖苷类抗生素或亚胺培南，该
• 2 .耐甲氧西林的凝固酶阴性的葡萄球菌（MRSCN）： 耐药机制与MRSA相同，多重耐用性比MRSA更为严 重。
17
3. 超广谱β-内酰胺酶肠杆菌科（ESBL）：肠杆菌科的 大肠埃希氏菌，肺炎克雷伯菌，产酸克雷伯氏菌， 可以产生质粒介导的β-内酰胺酶，从而对β-内酰胺 类抗生素，特别是第三代头孢和氨曲南等耐药，但 是通常对于含有β-内酰胺酶抑制剂的复合药物如阿 莫西林/克拉维酸，氨苄西林/舒巴坦，头孢哌酮/舒 巴坦等敏感，对于四代头孢可能敏感或耐药，对亚 胺培南敏感，由于这种耐药机制有质粒介导，可以 在不同细菌之间传播，故其检出率逐渐升高。除了 上述几种细菌外在其他肠杆菌科甚至铜绿假单胞菌 中均有发现，目前看来，复方β-内酰胺类药物头孢 哌酮/舒巴坦（舒普深），哌拉西林/他唑巴坦（特 治星）效果较好，而阿莫西林/克拉维酸，氨苄西林 /舒巴坦的耐药性较高。
• 环丙沙星：二代喹诺酮类（氧氟沙星、洛美沙星、氟咯沙星、培氟沙星、诺氟沙星即氟 酸）
• 红霉素：大环内酯类 • 呋喃妥因（坦丁）：硝基呋喃类（目前由于更有效的低毒的喹诺酮类应用已受限） • 庆大霉素：氨基糖苷类 • 庆大霉素增效：氨苄西林、青霉素或万古霉素和氨基糖苷类抗生素联合有无协同作用 • 亚胺培南：碳青霉烯类（美洛培南、必安培南、帕尼培南） • 左旋氧氟沙星：第三代喹诺酮类（司帕沙星、妥舒沙星、左氟沙星） • 利奈唑胺：恶唑烷酮类 • 苯唑西林：耐酶青霉素（甲氧西林、萘夫西林、氯唑西林、氟氯西林） • 青霉素： • 哌拉西林/他唑巴坦：脲基组青霉素（美洛西林、阿洛西林哌拉西林）及β-内酰胺酶抑
制剂 • 利福平： • 链霉素增效：氨苄西林、青霉素活万古霉素和氨基糖苷类抗生素联合有无协同作用 • 辛内吉：奎奴普汀-达福普汀 • 复方新诺明：SMZ/TMP磺胺甲恶唑(SMZ)与甲氧苄啶(TMP)的复方制剂 • 四环素：对四环素S可推测多西环素和米诺环素S，但四环素R/I二者也可以S • 万古霉素：糖肽类（替卡拉宁）
• 肠球菌属：氨基糖苷类（除高浓度筛选外）、头孢菌素 类、克林霉素和甲氧苄啶/磺胺甲噁唑（复方新诺明） 耐药
• 鼠疫耶尔森菌：β-内酰胺类抗微生物药 • 鲍曼不动杆菌或无硝不动杆菌：所有氨基青霉素或Ⅰ、
Ⅱ代头孢或氯霉素，这两菌对以上抗生素天然耐药。 • 洋葱伯克霍尔德菌：氨基糖苷类抗生素或亚胺培南，该
• 2 .耐甲氧西林的凝固酶阴性的葡萄球菌（MRSCN）： 耐药机制与MRSA相同，多重耐用性比MRSA更为严 重。
17
3. 超广谱β-内酰胺酶肠杆菌科（ESBL）：肠杆菌科的 大肠埃希氏菌，肺炎克雷伯菌，产酸克雷伯氏菌， 可以产生质粒介导的β-内酰胺酶，从而对β-内酰胺 类抗生素，特别是第三代头孢和氨曲南等耐药，但 是通常对于含有β-内酰胺酶抑制剂的复合药物如阿 莫西林/克拉维酸，氨苄西林/舒巴坦，头孢哌酮/舒 巴坦等敏感，对于四代头孢可能敏感或耐药，对亚 胺培南敏感，由于这种耐药机制有质粒介导，可以 在不同细菌之间传播，故其检出率逐渐升高。除了 上述几种细菌外在其他肠杆菌科甚至铜绿假单胞菌 中均有发现，目前看来，复方β-内酰胺类药物头孢 哌酮/舒巴坦（舒普深），哌拉西林/他唑巴坦（特 治星）效果较好，而阿莫西林/克拉维酸，氨苄西林 /舒巴坦的耐药性较高。
医院常规空气细菌培养
7、操作步骤与质量标
1)着装整洁，帽子遮住全部头发，口罩遮盖口鼻；
(2)备齐用物：治疗盘或篮、酒精灯、火柴、 直径9cm普通营养琼脂平皿（根据需要备足量，分 别标记1,2,3,4,5；或东、西、南、北、中；或东 南、西南、东北、西北、中）、灭菌棉拭子、试管、 试管架、笔、纪录单、计时表、湿度、温度计。
(6)点燃酒精灯； (7）取一支灭菌棉拭子，取标记“物体表面” 的试管，打开试管塞； (8)火焰消毒试管口、试管塞，浸取灭菌采样液； (9）火焰消毒试管口、试管塞，盖严试管； （10）用棉拭子在规格板空心处
（11)横竖往返各涂抹5次，并随之转动棉拭子； （12）连续采样4个规格板面积； （13）打开试管塞，火焰消毒试管口、试管塞； （14）用无菌剪剪去棉拭子手接触部分，将棉 拭子放人装l0ml采样液的试管中； （15)对于曲线物体、小型物体等则（门把手等） 采用棉拭子直接涂抹物体的方法采样； （16）纪录采样面积、时间、物体名称、采样人。
2采样面积及方法被检人五指并拢将浸有无菌生理盐水采样液的棉试子一支在双手指曲面从指根到指端来回涂擦各两次一只手涂擦面积30cm并随之转动采样棉试子剪去手接触部位将棉试子放人装有l0ml采样液的试管内送检
医院感染管理操作规范
环境卫生学标本采集操作规范
医院感染管理操作规范
急诊 班丽萍 2014-8-15
六、附录
Ⅰ类区域：层流洁净手术室、层流洁净病 房（参照洁净室空气培养方法与标准）。 Ⅱ类区域：普通手术室、产房、婴儿室、 早产儿室、普通保护性隔离室、供应室无 菌区、烧伤病房、重症监护病房。 Ⅲ类区域：儿科病房、妇产科检查室、注 射室、换药室、治疗室供应室清洁区、急 诊室、化验室、各类普通病房和房间。 Ⅳ类区域：传染病科及病房。
细菌的培养及鉴定 ppt课件
细菌的培养及鉴定
抗酸染色步骤
1、涂片包括涂片、干燥、固定三步。
涂片
干燥
固定
细菌的培养及鉴定
抗酸染色步骤
2、染色包括初染、脱色、复染三步。
初染
脱色
复染
冲洗
冲洗
石炭酸复红维持 3-5’ 3%盐酸酒精30 ’’ ~1’
冲洗
干燥 油镜观察
细菌的培养及鉴定
美蓝复染1 ’
抗酸染色结果
抗酸菌呈红色， 常堆积成团， 排列无序， 偶呈分枝状生长。 背景及非抗酸性细菌呈兰色。
细菌培养及鉴定
细菌的培养及鉴定
标本采集原则
1.及时采集微生物标本作病原学检查 2.在抗菌药物使用前采集标本 3.采样时严格执行无菌操作 4.标本容器须无菌，但不得有消毒剂 5.采样后立即送检 6.送检标本应注明细菌来的培源养及和鉴定检验目的
咳痰方法
病人先漱口，清洁口腔，去除表面的菌群 病人深咳，收集从下呼吸道咳出的痰液 无痰可用3％～5％NaCl 5ml雾吸约5min导痰 以清晨第二口痰为佳 标本采集后放置时间不超过2小时
细菌的培养及鉴定
清洁中段尿液
尽量取早晨第一次尿液 嘱患者留取标本的前一天晚上少饮水 女性病人 ➢收集标本前用肥皂水冲洗外阴，再以灭菌清水
冲洗尿道口 ➢排出几毫升后，不停止尿流，采集中段尿 男性病人 ➢翻转包皮，清洗尿道口 ➢排出几毫升后，不停止尿流,采集中段尿
采集标本后立即送检！
细菌的培养及鉴定
常用的培养基种类和用途
细菌的培养及鉴定
革兰染色步骤
涂片包括涂片、干燥、固定三步。
涂片
干燥
固定
细菌的培养及鉴定
固定的目的：
使细菌的细胞凝固，使菌体与玻片粘 得更牢固； 可改变菌体对染料的通透性； 加热固定可杀死细菌，比较安全。
抗酸染色步骤
1、涂片包括涂片、干燥、固定三步。
涂片
干燥
固定
细菌的培养及鉴定
抗酸染色步骤
2、染色包括初染、脱色、复染三步。
初染
脱色
复染
冲洗
冲洗
石炭酸复红维持 3-5’ 3%盐酸酒精30 ’’ ~1’
冲洗
干燥 油镜观察
细菌的培养及鉴定
美蓝复染1 ’
抗酸染色结果
抗酸菌呈红色， 常堆积成团， 排列无序， 偶呈分枝状生长。 背景及非抗酸性细菌呈兰色。
细菌培养及鉴定
细菌的培养及鉴定
标本采集原则
1.及时采集微生物标本作病原学检查 2.在抗菌药物使用前采集标本 3.采样时严格执行无菌操作 4.标本容器须无菌，但不得有消毒剂 5.采样后立即送检 6.送检标本应注明细菌来的培源养及和鉴定检验目的
咳痰方法
病人先漱口，清洁口腔，去除表面的菌群 病人深咳，收集从下呼吸道咳出的痰液 无痰可用3％～5％NaCl 5ml雾吸约5min导痰 以清晨第二口痰为佳 标本采集后放置时间不超过2小时
细菌的培养及鉴定
清洁中段尿液
尽量取早晨第一次尿液 嘱患者留取标本的前一天晚上少饮水 女性病人 ➢收集标本前用肥皂水冲洗外阴，再以灭菌清水
冲洗尿道口 ➢排出几毫升后，不停止尿流，采集中段尿 男性病人 ➢翻转包皮，清洗尿道口 ➢排出几毫升后，不停止尿流,采集中段尿
采集标本后立即送检！
细菌的培养及鉴定
常用的培养基种类和用途
细菌的培养及鉴定
革兰染色步骤
涂片包括涂片、干燥、固定三步。
涂片
干燥
固定
细菌的培养及鉴定
固定的目的：
使细菌的细胞凝固，使菌体与玻片粘 得更牢固； 可改变菌体对染料的通透性； 加热固定可杀死细菌，比较安全。
细菌的接种与培养—细菌的培养(微生物检验课件)
菌落
菌落与菌苔
菌落
菌落与菌苔
菌落(S型)
菌落(R型)
液体培养基生长现象
混浊生长 形成沉淀：多见于链状排列的细菌 形成菌膜：多见于厌氧菌
液体培养基生长现象
菌膜 沉淀
浑浊Βιβλιοθήκη 对照半固体培养基生长现象
有鞭毛细菌：在培养基中沿穿刺线并向外扩散生 长，穿刺线边缘模糊。
无鞭毛细菌：只沿穿刺线生长，穿刺线边缘清晰。
细菌培养技术
学会使用不同的方法培养细菌 知道接种细菌用具、接种细菌的环境要求 学会正确选择并使用接种细菌用具的方法 知道细菌在各种培养基上的生长现象
细菌培养方法
一般培养（需氧培养） ➢ 培养温度：35℃（采用恒温培养箱） ➢ 培养时间：18～24h 二氧化碳培养法：烛缸法、二氧化碳培养箱 厌氧培养法：厌氧培养箱、厌氧袋、厌氧罐、疱肉培养法、硫乙醇酸盐法等
恒温孵育箱
恒温孵育箱
恒温孵育箱
二氧化碳培养箱
厌氧罐
厌氧袋
厌氧手套箱
细菌在平板上的生长现象
菌落 ➢ 定义：指单个细菌在平板培养基上生长繁殖，形成单一肉眼可见的细菌集团。 ➢ 菌落特征：大小、形状、边缘、颜色、表面、透明度、湿润度、黏度、溶血性 ➢ 菌落类型：光滑型（S）、粗糙型（R）、黏液型（M） 菌苔：指多个菌落融合在一起形成的细菌堆积物。
半固体培养基生长现象
斜面培养基生长现象
叙述细菌培养方法有哪些。 简述细菌在各种培养基中的生长现象。 从哪些方面描述菌落的性状？
临床标本的细菌学检验.ppt
35
• 结果报告
1. 阳性结果报告: (1) 初级报告 (2) 最终报告
2. 阴性结果报告：
36
中枢神经系统感染的细菌学 检查
• 脑脊液为一水样透明液体，存在于脑室 和蛛网膜下腔内。在生理情况下，血液 和脑脊液之间有血脑屏障，阻碍各种微 生物通过血液进入中枢神经系统。正常 人的脑脊液是绝对无菌的。在病理情况 下，血脑屏障受到破坏，病原微生物及 其产物进入脑脊液，引起中枢神经系统 损害。此时在脑脊液中可培养检出病原 微生物 。
their toxins in tissues or in the blood. Systemic disease caused by the spread of the microorganisms via the circulating blood is commonly called SEPTICEMIA. 一过性、间歇性、持续性
39
脑膜炎类型
观察物
细菌性的 结核性的 真菌性的 病毒性的
优势白细 胞类型
糖
分裂的多形核 嗜中性粒细胞
单核细胞
很低
低
5-20mg/100ml 20-40mg/100ml
单核细胞
低 20-40mg/ml
蛋白
增高
增高
增高
涂片染色 革兰染色
抗酸染色
印度墨汁
单核细胞
正常 65-70mg/ml
感染早期 轻度增高
31
•菌血症时血液中的细菌并不多，通常仅10～20 CFU/ml, 故采血量大阳性率高。 •采血培养应该尽量在使用抗菌药之前进行,在24 h 内采 集2～3 次做血培养(一次静脉采血注入到多个培养瓶中 应视为单份血培养) 。 •对间歇性寒战或发热，应在寒战或体温高峰到来之前 0.51h采集血液，或于寒战或发烧后1h进行。 •标本运送: 采血后应该立即送检,如不能立即送检,需室温 保存或置35 ℃～37 ℃孵箱中,切勿冷藏。
• 结果报告
1. 阳性结果报告: (1) 初级报告 (2) 最终报告
2. 阴性结果报告：
36
中枢神经系统感染的细菌学 检查
• 脑脊液为一水样透明液体，存在于脑室 和蛛网膜下腔内。在生理情况下，血液 和脑脊液之间有血脑屏障，阻碍各种微 生物通过血液进入中枢神经系统。正常 人的脑脊液是绝对无菌的。在病理情况 下，血脑屏障受到破坏，病原微生物及 其产物进入脑脊液，引起中枢神经系统 损害。此时在脑脊液中可培养检出病原 微生物 。
their toxins in tissues or in the blood. Systemic disease caused by the spread of the microorganisms via the circulating blood is commonly called SEPTICEMIA. 一过性、间歇性、持续性
39
脑膜炎类型
观察物
细菌性的 结核性的 真菌性的 病毒性的
优势白细 胞类型
糖
分裂的多形核 嗜中性粒细胞
单核细胞
很低
低
5-20mg/100ml 20-40mg/100ml
单核细胞
低 20-40mg/ml
蛋白
增高
增高
增高
涂片染色 革兰染色
抗酸染色
印度墨汁
单核细胞
正常 65-70mg/ml
感染早期 轻度增高
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•菌血症时血液中的细菌并不多，通常仅10～20 CFU/ml, 故采血量大阳性率高。 •采血培养应该尽量在使用抗菌药之前进行,在24 h 内采 集2～3 次做血培养(一次静脉采血注入到多个培养瓶中 应视为单份血培养) 。 •对间歇性寒战或发热，应在寒战或体温高峰到来之前 0.51h采集血液，或于寒战或发烧后1h进行。 •标本运送: 采血后应该立即送检,如不能立即送检,需室温 保存或置35 ℃～37 ℃孵箱中,切勿冷藏。
医院常规细菌培养
采集标本要无菌观念强、操作熟练、标记清楚明 确
谢谢大家
放映结束 感谢各位的批评指导！
谢 谢！
让我们共同进步
连续采样4个规格板面积 打开试管塞，用火焰消毒试管口、试管塞 用无菌剪剪去棉拭子手接触部分，将棉拭子放入装 l0ml采样液的试管中； 对于曲线物体、小型物体等则（门把手等）采用棉 拭子直接涂抹物体的方法采样； 纪录采样面积、时间、物体名称、采样人。
采集标本要无菌观念强、操作熟练、标记清楚明确。
医护人员手采样 采样时间：在接触病人、从事医疗活 动前进行采样。 结果计算：手细菌菌落总数=平皿上菌 落的平均数×采样液稀释倍数
采样方法
剪指甲、洗手 着装整洁，帽子遮住全部头发，口罩遮盖口鼻； 取一支灭菌棉拭子，取标记“手”的试管 盖严试管 嘱被检人五指并拢 将浸有无菌生理盐水采样液的棉试子一支在双手指 曲面从指根到指端来回涂擦各两次，并随之转动采 样棉试子,五指分开,涂擦指缝、指尖
将棉拭子投人装l0ml采样液的试管中 试管口、试管塞，盖严试管 整理用物 纪录采样时间、对象、采样人、采样对象的左右 手 立即将标本送验、培养。
细菌菌落数标准：层流手术室 ≤5cfu/c㎡
操作步骤
剪指甲、洗手 着装整洁，帽子遮住全部头发，口罩遮盖口鼻； 备齐用物：治疗盘、直径9cm普通培养皿（分别标 记1,2,3,4,5；或东、西、南、北、中；或东南、 西南、东北、西北、中）、灭菌棉拭子、 试管、试管架、笔、纪录单、计时表、温度计。 打开平皿盖 暴露5分钟 纪录采样房间面积、时间、地点、位置、采样人及 采样时环境条件
医院常规细菌培养
手术室王岩 2017-8
①面积≤30平米，设一条对角线取三点， 即中间一点，两端各距墙1米处各取一点
(手术室层流手术室面积27平米）
谢谢大家
放映结束 感谢各位的批评指导！
谢 谢！
让我们共同进步
连续采样4个规格板面积 打开试管塞，用火焰消毒试管口、试管塞 用无菌剪剪去棉拭子手接触部分，将棉拭子放入装 l0ml采样液的试管中； 对于曲线物体、小型物体等则（门把手等）采用棉 拭子直接涂抹物体的方法采样； 纪录采样面积、时间、物体名称、采样人。
采集标本要无菌观念强、操作熟练、标记清楚明确。
医护人员手采样 采样时间：在接触病人、从事医疗活 动前进行采样。 结果计算：手细菌菌落总数=平皿上菌 落的平均数×采样液稀释倍数
采样方法
剪指甲、洗手 着装整洁，帽子遮住全部头发，口罩遮盖口鼻； 取一支灭菌棉拭子，取标记“手”的试管 盖严试管 嘱被检人五指并拢 将浸有无菌生理盐水采样液的棉试子一支在双手指 曲面从指根到指端来回涂擦各两次，并随之转动采 样棉试子,五指分开,涂擦指缝、指尖
将棉拭子投人装l0ml采样液的试管中 试管口、试管塞，盖严试管 整理用物 纪录采样时间、对象、采样人、采样对象的左右 手 立即将标本送验、培养。
细菌菌落数标准：层流手术室 ≤5cfu/c㎡
操作步骤
剪指甲、洗手 着装整洁，帽子遮住全部头发，口罩遮盖口鼻； 备齐用物：治疗盘、直径9cm普通培养皿（分别标 记1,2,3,4,5；或东、西、南、北、中；或东南、 西南、东北、西北、中）、灭菌棉拭子、 试管、试管架、笔、纪录单、计时表、温度计。 打开平皿盖 暴露5分钟 纪录采样房间面积、时间、地点、位置、采样人及 采样时环境条件
医院常规细菌培养
手术室王岩 2017-8
①面积≤30平米，设一条对角线取三点， 即中间一点，两端各距墙1米处各取一点
(手术室层流手术室面积27平米）
医院常规空气细菌培养PPT课件
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•
6、采集标本要无菌观念强、操作熟练、标记清楚明确。
第15页/共23页
• 医护人员手采样
第16页/共23页
• 1、采样时间，在接触病人、从事医疗活动前进行采样。
•
2、采样面积及方法，被检人五指并拢，将浸有无菌生理盐水采样液的棉试子一支在双手指曲面从指根
到指端来回涂擦各两次（一只手涂擦面积30cm² )，并随之转动采样棉试子，剪去手接触部位，将棉试子放
• 次（一只手涂擦面积30 cm² )，并随之转动采样棉试子；
第19页/共23页
•
(10）打开试管塞，火焰消毒试管口、试管塞；
•
(11)用无菌剪剪去棉拭子手接触部分，将棉拭子投人装l0ml采样液的试管中；
•
(12）火焰消毒试管口、试管塞，盖严试管；
•
（13)将酒精灯盖严，整理用物；
•
(14）纪录采样时间、对象、采样人；
第5页/共23页
7、操作步骤与质量标
第6页/共23页
• 1)着装整洁，帽子遮住全部头发，口罩遮盖口鼻；
•
(2)备齐用物：治疗盘或篮、酒精灯、火柴、直径9cm普通营养琼脂平皿（根据需要备足量，分别标记
1,2,3,4,5；或东、西、南、北、中；或东南、西南、东北、西北、中）、灭菌棉拭子、试管、试管架、
笔、纪录单、计时表、湿度、温度计。
•
(3)剪指甲、洗手；
•
(4）选择消毒处理后与进行医疗活动之前的期间采集空气样本；
第7页/共23页
•
(5）室内面积＜30m2设一条对角线上取3点，即中心一点，两端各距离墙1 m。取出3个培养皿，将培养
皿翻转放在采样点上；室内面积＞30m2设东、西、南、北、中；或东南、西南、东北、西北、中5点，其中
•
6、采集标本要无菌观念强、操作熟练、标记清楚明确。
第15页/共23页
• 医护人员手采样
第16页/共23页
• 1、采样时间，在接触病人、从事医疗活动前进行采样。
•
2、采样面积及方法，被检人五指并拢，将浸有无菌生理盐水采样液的棉试子一支在双手指曲面从指根
到指端来回涂擦各两次（一只手涂擦面积30cm² )，并随之转动采样棉试子，剪去手接触部位，将棉试子放
• 次（一只手涂擦面积30 cm² )，并随之转动采样棉试子；
第19页/共23页
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(10）打开试管塞，火焰消毒试管口、试管塞；
•
(11)用无菌剪剪去棉拭子手接触部分，将棉拭子投人装l0ml采样液的试管中；
•
(12）火焰消毒试管口、试管塞，盖严试管；
•
（13)将酒精灯盖严，整理用物；
•
(14）纪录采样时间、对象、采样人；
第5页/共23页
7、操作步骤与质量标
第6页/共23页
• 1)着装整洁，帽子遮住全部头发，口罩遮盖口鼻；
•
(2)备齐用物：治疗盘或篮、酒精灯、火柴、直径9cm普通营养琼脂平皿（根据需要备足量，分别标记
1,2,3,4,5；或东、西、南、北、中；或东南、西南、东北、西北、中）、灭菌棉拭子、试管、试管架、
笔、纪录单、计时表、湿度、温度计。
•
(3)剪指甲、洗手；
•
(4）选择消毒处理后与进行医疗活动之前的期间采集空气样本；
第7页/共23页
•
(5）室内面积＜30m2设一条对角线上取3点，即中心一点，两端各距离墙1 m。取出3个培养皿，将培养
皿翻转放在采样点上；室内面积＞30m2设东、西、南、北、中；或东南、西南、东北、西北、中5点，其中
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医院常规细菌培养
①面积≤30 平米，设一条对角线取三点， 即中间一点，两端各距墙1米处各取一点
(手术室层流手术室面积27平米）
②室内面积>30平米，设两条对角线，东，
西，南，北，中取五点，其中东，西， 南北距墙均1米（飞秒手术室面积为32平 米）
采样方法：用9cm直径普通培养皿放在 采样点暴露5 分钟后送检培养
用棉拭子在规格板空心处横竖往返各涂抹5次，并随之转动棉 拭子
连续采样4个规格板面积 打开试管塞，用火焰消毒试管口、试管塞
用无菌剪剪去棉拭子手接触部分，将棉拭子放入装l0ml采样液 的试管中；
对于曲线物体、小型物体等则（门把手等）采用棉拭子直接涂 抹物体的方法采样； 纪录采样面积、时间、物体名称、采样人。
谢谢大家
细菌菌落数标准：层流手术室 ≤5cfu/c㎡
操作步骤
剪指甲、洗手 着装整洁，帽子遮住全部头发，口罩遮盖口鼻； 备 齐 用 物 ： 治 疗 盘 、 直 径 9cm 普 通 培 养 皿 （ 分 别 标 记 1,2,3,4,5；或东、西、南、北、中；或东南、西南、东北、 西北、中）、灭菌棉拭子、 试管、试管架、笔、纪录单、计时表、温度计。 打开平皿盖 暴露5分钟 纪录采样房间面积、时间、地点、位置、采样人及采样时环 境条件
看表、5分钟；
取平皿
注意事项 : 放平皿时先放最里边 （内 边），收取时先收最外边点择消毒处理后 4h 内进行 采样。 采样面积，被采表面＜100平米，取全 部表面；被采表面≥100 平米，取100 平米。
操作步骤 剪指甲、洗手 着装整洁，帽子遮住全部头发，口罩遮盖口鼻； 将5 x 5平米的灭菌规格板，放在被检平面物体表面 点燃酒精灯 面积≥100平米，取100平米 取一支灭菌棉拭子，取标记“物体表面”的试管，打开试管 塞 用火焰消毒试管口、试管塞，浸取灭菌采样液 盖严试管
将浸有无菌生理盐水采样液的棉试子一支在双手指曲面从指根 到指端来回涂擦各两次，并随之转动采样棉试子,五指分开,涂擦 指缝、指尖
将棉拭子投人装l0ml采样液的试管中 试管口、试管塞，盖严试管 整理用物 纪录采样时间、对象、采样人、采样对象的左右 手
立即将标本送验、培养。
采集标本要无菌观念强、操作熟练、标记清楚明
采集标本要无菌观念强、操作熟练、标记清楚明确。
医护人员手采样
采样时间：在接触病人、从事医疗活 动前进行采样。
结果计算：手细菌菌落总数=平皿上菌 落的平均数×采样液稀释倍数
采样方法
剪指甲、洗手 着装整洁，帽子遮住全部头发，口罩遮盖口鼻； 取一支灭菌棉拭子，取标记“手”的试管
盖严试管
嘱被检人五指并拢
①面积≤30 平米，设一条对角线取三点， 即中间一点，两端各距墙1米处各取一点
(手术室层流手术室面积27平米）
②室内面积>30平米，设两条对角线，东，
西，南，北，中取五点，其中东，西， 南北距墙均1米（飞秒手术室面积为32平 米）
采样方法：用9cm直径普通培养皿放在 采样点暴露5 分钟后送检培养
用棉拭子在规格板空心处横竖往返各涂抹5次，并随之转动棉 拭子
连续采样4个规格板面积 打开试管塞，用火焰消毒试管口、试管塞
用无菌剪剪去棉拭子手接触部分，将棉拭子放入装l0ml采样液 的试管中；
对于曲线物体、小型物体等则（门把手等）采用棉拭子直接涂 抹物体的方法采样； 纪录采样面积、时间、物体名称、采样人。
谢谢大家
细菌菌落数标准：层流手术室 ≤5cfu/c㎡
操作步骤
剪指甲、洗手 着装整洁，帽子遮住全部头发，口罩遮盖口鼻； 备 齐 用 物 ： 治 疗 盘 、 直 径 9cm 普 通 培 养 皿 （ 分 别 标 记 1,2,3,4,5；或东、西、南、北、中；或东南、西南、东北、 西北、中）、灭菌棉拭子、 试管、试管架、笔、纪录单、计时表、温度计。 打开平皿盖 暴露5分钟 纪录采样房间面积、时间、地点、位置、采样人及采样时环 境条件
看表、5分钟；
取平皿
注意事项 : 放平皿时先放最里边 （内 边），收取时先收最外边点择消毒处理后 4h 内进行 采样。 采样面积，被采表面＜100平米，取全 部表面；被采表面≥100 平米，取100 平米。
操作步骤 剪指甲、洗手 着装整洁，帽子遮住全部头发，口罩遮盖口鼻； 将5 x 5平米的灭菌规格板，放在被检平面物体表面 点燃酒精灯 面积≥100平米，取100平米 取一支灭菌棉拭子，取标记“物体表面”的试管，打开试管 塞 用火焰消毒试管口、试管塞，浸取灭菌采样液 盖严试管
将浸有无菌生理盐水采样液的棉试子一支在双手指曲面从指根 到指端来回涂擦各两次，并随之转动采样棉试子,五指分开,涂擦 指缝、指尖
将棉拭子投人装l0ml采样液的试管中 试管口、试管塞，盖严试管 整理用物 纪录采样时间、对象、采样人、采样对象的左右 手
立即将标本送验、培养。
采集标本要无菌观念强、操作熟练、标记清楚明
采集标本要无菌观念强、操作熟练、标记清楚明确。
医护人员手采样
采样时间：在接触病人、从事医疗活 动前进行采样。
结果计算：手细菌菌落总数=平皿上菌 落的平均数×采样液稀释倍数
采样方法
剪指甲、洗手 着装整洁，帽子遮住全部头发，口罩遮盖口鼻； 取一支灭菌棉拭子，取标记“手”的试管
盖严试管
嘱被检人五指并拢