结肠炎大鼠模型
肠炎颗粒对溃疡性结肠炎大鼠模型的影响
图１ 不 同湿 度 下 颗 粒 吸 湿 百 分 率
做 以上 曲线两端切线各一 条 ， 两线相 交所在 的横 坐标值 即为临界相对湿度 （ Ｃ Ｒ Ｈ） ， 据估算 ， 该颗粒的Ｃ Ｒ Ｈ 约为７ ２ ％。
２ ． ９ 休 止角测定 采用 固定漏斗法 ， 将３ 只漏 斗串联并 固定 于水平 放置的坐标纸上 １ ｃ ｍ高度处 ， 小心 将验证试验所 做的
实验动物环境许可证号 ： Ｓ Ｙ Ｘ Ｋ （ 湘） ２ Ｏ Ｏ ９ — ０ ０ ０ １ 。
１ ． ２ 试 药及 仪 器
行研究 ， 以期为其临床应用药提供实验依据 。
１ 材料与方法
１ ． １ 实验动物
ｓ Ｄ 大 鼠６ Ｏ 只， Ｓ Ｐ Ｆ 级， 体质量 ： １ ８ ０ — ２ ２ ０ ｇ ， 雄
结 肠炎证属湿热蕴结 者。 本研究对溃 疡性 结肠炎 大 鼠模型进
性， 供 应单位 ： 长沙市开福 区东创实验 动物 科技 服务部 ， 实验
动物生产许可证号 ： Ｓ Ｃ Ｘ Ｋ （ 湘） ２ ０ ０ ９ － － ０ ０ １ ２ ， 动物进入实验室后 ，
由专人饲 养管理。 动物 室光照充足 ， 通 风和空调设备 良好 ， 室 温１ ８℃一 ２ ５℃， 相对 湿度 ５ ０ ％一 ６ ０ ％， 实 验室按常规定期 消毒 。
以表９ 中吸湿百分率为纵坐标 ， 相对湿度 为横坐标作 图 。
较大， 而粉体流动性 的评 价与测定方法较多 ， 其 中， 休止角 的 测定是检验粉体 流动性好坏 的最简便 的方 法。 本 工艺所得一
贯煎颗粒休止角值为３ ２ ． ４ ５ 。 ， 表 明颗粒流动性好 。 浸膏粉 中多
糖含量高 ， 水溶性大 、 黏性大 。 选 择高浓度 乙醇 可防止浸膏粉 结块 ， 易于制粒 。 在实验过程 中， 作者发现乳糖虽 吸湿程度不 大 ，但 吸湿后不 能保 持冲剂的颗粒状而融化成 流浸膏状 ； 微 晶纤 维素吸湿 程度低 ， 即使 吸湿也 可保持 冲剂 的颗 粒状 ， 是
免疫法复制大鼠溃疡性结肠炎实验模型之探析
免疫法复制大鼠溃疡性结肠炎实验模型之探析溃疡性结肠炎的发生与免疫因素有着密切联系，用免疫法复制大鼠溃疡性结肠炎实验模型可与溃疡性结肠炎患者身体的病理变化更接近。
本法需要一定的设备、条件及相应的技术，实验周期长，但重复性好，较适合用于抗溃疡性结肠炎新药的筛选。
标签：免疫法；溃疡性结肠炎；模型动物实验是现代医学和生命科学研究的一个重要基础和支柱，在实验动物身上复制人类疾病，是促进医学科学发展的重要途径之一，可为医学理论以及治疗和预防疾病的研究提供必不可少的资料和研究方法。
目前复制溃疡性结肠炎动物模型的方法有多种，但尚未有一种模型与溃疡性结肠炎患者在致病因素、病理生理过程、免疫反应、临床表现、治疗手段等诸方面完全相同。
但本病的发生与免疫因素最为密切，因此我们在实验时采取了免疫与局部刺激相结合的造模方法，这样使动物模型与溃疡性结肠炎患者身体的病理变化更接近，使实验研究更靠近临床，更具有说服力。
兹就免疫法复制大鼠溃疡性结肠炎实验模型浅析如下：1免疫法造模的意义最新的研究表明溃疡性结肠炎的发生是患者遗传背景、免疫系统、肠粘膜、肠道菌群及环境等多方面交互作用的结果[1]。
除遗传及肠道菌群因素外，肠粘膜免疫系统在该病的发病机制中便占核心地位。
正常的非炎性肠粘膜的促炎细胞因子与抗炎细胞因子能保持完美的平衡，从而既能对抗肠道内病原体又不至因非致病性抗原产生过激的免疫学反应。
但是在溃疡性结肠炎患者的肠粘膜中，这种平衡则被打破而倾向于促炎反应之侧，最终导致疾病的发生。
因此现代医学实验研究中若采用免疫法复制溃疡性结肠炎病变模型，可最大程度上还原其病理本质，提高相关实验研究的科学价值。
2造膜方法[2] [3] [4]大鼠首次每只足趾内注射抗原（异体结肠粘膜）3mg，并于第10、17、24、31天分别于足趾、背部、腹股沟、腹腔内注射抗原6mg（末次注射不加福氏佐剂）。
然后取血，用凝集法测定抗体，确定抗体产生后，对模型大鼠用乌拉坦麻醉（0.4ml/100g），并进行下列操作（处理前禁食24小时）。
中药预处理对结肠炎模型大鼠的免疫调节效应
Ｃｏ ｒ ｓ ｏ ｄ ｎ ｅ ｔ ：ＹＵ Ｃｈ ｎ ｇ ｎ ， ｍａｌ ｃ ｅ ｇ ｏ ｇｙ ＠ｇ ｉ ｃ ｎ ｒ ｅ ｐ ｎ ｅ ｃ ｏ ｅｇｏ ｇ Ｅ ｉ ｈｎｇ ｎ ． ： ｕ ｍａｌ ｏ ． Ｂａ ｋ ｒ ｕ ｄ ｃｇｏｎ ： Ｉ ｍｍｕ ｅ ｄ ｓｅ ｕ ａ ｉｎ ｐ ａ ｓ ａ ｍｐ ｒ ｎ ｏｅ ｉ ｈ ａｈ ｇ ｎ ｓｓ ｏ ｎ ａ ｎ ｙ ｒ ｇ ｌｔ ｌｙ ｎ ｉ ｏｔ ｔ ｒ ｌ ｎ ｔ ｅ ｐ ｔ ｏ ｅ ｅ ｉ ｆ ｉ ｆ ｍｍａ ｏｙ ｂ ｗｅ ｉ ａ ｅ ｏ ａ ｌ ｔ ｒ ｏ ｌ ｄ ｓ ｓ ｅ
（ Ｄ ． Ｔ ｅ ｉｍｕ ｏ ｏ ｕ ｔｒ ｔｅａｙｗｔ ｔ ｄ ｉ ａ Ｃ ｉｅｅｍ ｄｃｎ ｉｈ ｂ ｃｍｅａｐ ｔ ｔ ｌｓ ａ ｇ ｏ ＩＤ Ｉ ） ｈ ｍ ｎ ｍ ｄ ｌ ｏ ｈ ｒｐ ｉ ｒ ｉｏ ｌ ｈｎｓ ｅ ｉ ｅｍ ｇｔ ｅｏ ｏ ｎｉ ｔ ｔ ｙｆｒ Ｂ ． Ｂ ａ ｙ ｈ ａ ｔｎ ｉ ｅ ａ ｒｅ
、
白细 胞 介 素 （ ）１ Ｉ ・１ Ｉ・０的变 化 ， 行 组 织 学 评 分 。结 果 ： Ｌ ３和 Ｌ １ 并 造模 后 大 鼠均 出现 腹 泻 症状 。 模 后第 ２周 ， 克灵 造 溃
组大 鼠体 质 量 显 著 高 于 Ａ Ａ组 和正 常 对 照 组 （ ＜ ． ） Ｚ Ｐ ０ ５ 。在 炎 症 急性 期 ， 克 灵 组 大 鼠外 周 血 Ｃ ４／Ｄ ＋ ０ 溃 Ｄ ＋ ８比值 显 著 低 Ｃ 于 正 常对 照 组 （＜ ． ） 血 清 Ｉ．Ｂ水 平 、 Ｐ０ ５， ０ Ｌ１ 结肠 组 织 学 评 分 显 著 低 于 Ａ Ａ 组 和 正 常 对 照 组 （＜ ． ）血 清 Ｉ．０水 平 Ｚ Ｐ ００ ， ５ Ｌ１ 显著 高 于正 常 对 照 组 （＜ 、 ） 结 论 ： 期 应 用 中药 溃 克 灵 对 模 型大 鼠结 肠 炎 的发 生 具 有 一 定 预 防保 护 作 用 ． 能 Ｐ ００ 。 ５ 短 可 与下 调 Ｃ ４／Ｄ Ｄ ＋ ８比值 、 制 促 炎 因子 Ｉ．Ｂ分 泌 和促 进 抗 炎 因子 Ｉ．０分 泌 等 免疫 调节 机 制 有 关 。 Ｃ 抑 Ｌ１ Ｌ１
结肠炎动物模型具体步骤及方法
结肠炎动物模型具体步骤及方法原型物种人来源三硝基苯磺酸钠(TNBS)导致的结肠炎模式动物品系SPF级SD大鼠，健康，6~8W，雄性，体重为180g-200g。
实验分组实验分六组：正常对照组、模型组、阳性药组、受试药组三个剂量组。
实验周期4-6 weeks建模方法模型制作方法：动物造模当日计为实验第1天，各组动物造模前禁食不禁水24 h，乙醚吸入麻醉，将一直径2.0 mm、长约12 cm的塑胶管由肛门轻缓插入大鼠体内深约8 cm，缓慢注入一定浓度的TNBS的乙醇溶液，1 min之内完成。
灌药完毕后，缓慢拔出塑胶管，用手捏住肛门，提起大鼠尾部，持续倒置3min，避免造模试剂流出，使造模剂充分渗入大鼠肠腔内。
对照组动物使用等体积的生理盐水，按上述同样操作进行灌肠。
各组动物均正常饲养。
TNBS的乙醇溶液（将体积分数为5%的TNBS水溶液与无水乙醇以体积2:1混合）现配现用。
应用用于结肠炎药物的研发和机理的研究1. 一般情况观察及体重记录一般观察：观察各组动物的情况，若出现意外症状，记录情况并及时反馈；记录可能出现的死亡率。
体重：从给药前一天开始，每三天称量并记录各组动物体重，直至给药结束，绘制体重变化曲线。
实验过程中体重共记录10次体重统计、变化曲线作图。
2. 肠组织取材及大体评分：各组动物安乐死后，解剖时截取自肛门向上的整段结肠组织测量结肠长度进行宏观评价：各个结肠组织带标尺拍照，记录原始的大体形态，依照评分标准进行评分。
结肠组织大体评分标准如下：0分无损伤1分充血但没有溃疡2分充血而且肠壁变厚但没有溃疡3分有一处小溃疡，最长径约0-1cm4分溃疡较大，最长径约1-2cm5分溃疡较大，最长径>2cm对应以上评分标准，记录每份结肠组织的具体评分。
评分标准参考文献：Wallace JL, Keenan CM. An orally active inhibitro of leukotriene synthesis accelerates healing in a rat model of colitis. Am J Physiol,1990 258:G527-G5343.3 结肠组织病理染色：组织做以下处理：每个结肠均分成3段，每个动物取材的位置要尽量一致（不管剪切位置是否有病理损伤尽量保持一致）。
溃疡性结肠炎大鼠模型研究进展
基金项目:甘肃省教育厅基金资助项目(编号:103002)。
作者简介:王小莲(1974—),女,讲师,甘肃省张掖医学高等专科学校(张掖 734000)。
溃疡性结肠炎大鼠模型研究进展王小莲 关键词:溃疡性结肠炎;动物模型;综述中图分类号:R574162 文献标识码:A 文章编号:1000-7156(2011)03-0054-03 溃疡性结肠炎(UC )又称非特异性溃疡性结肠炎,是一种病因不明的大肠黏膜的慢性炎症和溃疡性病变。
建立理想的动物模型对于阐明该病的病因、病变发展规律以及有效的防治有重要意义。
UC 动物模型的制备方法,除了常用的经典方法如乙酸造模法、角叉菜胶法等化学方法,近年来,出现了许多新的造模方法,在发病机制上更接近于自然患病。
现将制作UC 动物模型方法综述如下。
1 化学造模法111 乙酸造模法:Cetinkaya A[2]将乙酸注入大鼠结肠,然后以019%NaCl 溶液冲洗2次。
造模后大鼠出现腹泻、血便,第3天病变达高峰期,病变以远端结肠为主,多在1周内消失。
该模型的不足之处在于结肠炎症以急性单纯性黏膜炎症为主,病情进展和愈合迅速。
目前主要用于UC 急性炎症发作期药物治疗的疗效观察和评价黏膜愈合机制。
112 角叉菜胶造模法:大鼠自由饮用3%角叉菜胶溶液2周后出现UC 症状,3周后肉眼可见盲肠、结肠、直肠出现针尖大小的溃疡和出血点。
组织学可见隐窝脓肿、变形,黏膜溃疡形成,黏膜和黏膜下层炎性细胞渗出。
该模型的特点是病变局限于结直肠,造模过程中粪便含菌量升高。
该模型的优点是持续时间长,急性期3～6周,持续6～8周,停止饮用角叉菜胶后炎症持续1～2周。
缺点是模型动物多用豚鼠,成本较高,周期较长。
113 葡聚糖硫酸钠(DSS ):BALB /c 小鼠自由饮用5%DSS溶液5天,造成急性UC 模型。
急性模型表现为体重下降、腹泻、血便,溃疡多出现于远端结肠。
产生的细胞因子主要为白细胞介素(I L )-12、干扰素(I F N )-γ、I L -1、肿瘤坏死因子(T NF )-α等。
不同大鼠溃疡性结肠炎模型的比较与探讨
的实验 动物模 型有化学诱导模 型 、 免疫致敏模 型 、 细胞移植 模型和基 基 本 活 动 如 常 ；Ｄ组 黏 液 血 便 持 续 约 ２周 ， 动 厌食 、 便 或 稀 便 、 懒 软 毛 正 体 其 因 敲除 模 型 等 。 文就 Ｔ Ｓ诱 导 、 纯 免疫 法及 免 疫 复合 法 ３种 Ｕ 色 无 华 持 续 约 ８周 ； 常 组 大 鼠 大 便 正 常 ， 重 略 有 增 加 ， 它 无 变 本 ＮＢ 单 Ｃ 大 鼠模 型进 行 比较 和 探 讨 ， Ｕ 为 Ｃ的 研 究 提 供 恰 当 的 实 验 动 物 模 型 。 化。
２结 果 ．
２１一 般 情 况 ． Ｂ、 、 组 在 造 模 １ ＣＤ ｄ后 ， 始 逐 渐 出现 懒 动 、 背 、 食 、 重 下 开 拱 厌 体
索 疾 病 的病 因 、 病 机 制 、 变 发 展 规 律 具 有 指 导 意 义 ， 发 病 同时 也 是 明 确 降 、 便 次 数 增 多 、 便 或 稀 便 、 便 末 端 有 黏 液 血 或 脓 点 等 表 现 ； 大 软 大 Ｂ 疾 病 治 疗 方 法 及 新 药 开 发 与 研 究 的 前 提 和 保 障 。 近年 来 开 展 的 Ｕ 组 症 状 持 续 ２周 ．第 ３周 后 基 本 活 动 如 常 ； 。 Ｃ Ｃ组 症 状 持 续 ｌｄ ２周 后 Ｏ，
常对 照组ｆ） Ｎ Ｓ 乙醇组（）单纯免疫组（） Ａ 、Ｔ Ｂ ／ Ｂ、 ｃ和免疫复合ｔ （）每组 ￣ｎ ， ｉ
各２ Ｏ只 。 １ ＿ 要试剂与仪器 Ｇ ２主 Ｌ一 ２ Ａ 型 高 速 冷 冻离 心机 （ ０ 湖南 仪 器 仪 表 厂、 ． Ｕｖ一 ２ ０型 可 见 紫外 分 光 光 度 计（ ６ 日本 岛津 公 司 ） ＮＢ 。Ｔ Ｓ和 完 全 佛式佐剂（ｉｍ Ｓｇ ａ公 司） ， 双缩脲试剂盒与蛋 白标准液（ 广州晶美公司）大 ， 鼠 细胞 因子 检 测 试 剂 盒 Ｔ — ａＩ ＮＦ 、 Ｌ一 ６北 京 邦定 生 物 医学 公 司） （ 。 １ － 模 方 法 。 家兔 结 肠 黏 膜 制 成 组 织 匀 浆 ， ３０ ｒｍｉ 度 ３造 取 以 ０ ０／ ｎ速 离 心 ３ ｒｉ， 上清 液 提 纯 ， 缩 脲 法 检 测 蛋 白含 量 ， 等 量 完 全 佛 式 ０ ｎ取 ａ 双 与
抗凝治疗在TNBS诱导的大鼠实验性结肠炎模型中的作用
抗凝治疗在TNBS诱导的大鼠实验性结肠炎模型中的作用
结肠炎是一种常见的炎症性肠道疾病，其主要特征是结肠黏膜的慢性炎症和溃疡形成。
目前，抗凝治疗已经被广泛应用于心血管疾病等病症中，然而其在结肠炎治疗中的作用尚不清楚。
为了探究抗凝治疗在结肠炎中的作用，我们使用TNBS（三硝基苯磺酰氯）诱导的大鼠实验性结肠炎模型进行了实验研究。
首先，我们随机将大鼠分为两组，分别为抗凝治疗组和对照组。
接着，我们通过肛门给予大鼠TNBS诱导结肠炎。
在治疗组中，我们给予大鼠抗凝药物，而对照组则不进行任何治疗。
在治疗结束后，我们对大鼠进行了结肠镜检查，并收集了血液和组织样本。
经过观察，我们发现抗凝治疗组的大鼠结肠炎症状明显减轻，与对照组相比，其结肠镜下显示的炎症程度和溃疡面积明显减少。
同时，在抗凝治疗组中，大鼠血液中的炎症指标如C-反应蛋白（CRP）和白细胞计数也显著降低。
此外，我们还观察到抗凝治疗组的大鼠结肠黏膜组织中炎症细胞浸润减少，结肠黏膜屏障功能得到改善。
这些结果提示抗凝治疗在TNBS诱导的大鼠实验性结肠炎模型中具有抗炎作用。
抗凝药物可能通过减少炎症细胞浸润和改善结肠黏膜屏障功能来减轻结肠炎症状。
然而，我们的研究还存在一些局限性，例如我们没有对抗凝治疗的机制进行深入研究。
总之，我们的研究结果表明抗凝治疗在TNBS诱导的大鼠实验性结肠炎模型中具有抗炎作用。
这为进一步研究抗凝治疗在结肠炎中的应用提供了初步的实验依据。
希望通过进一步的研究，我们能够深入了解抗凝治疗在结肠炎治疗中的机制，并为结肠炎患者的临床治疗提供新的思路和方法。
免疫复合法建立大鼠溃疡性结肠炎模型的探讨
摘 要 目的 ： 探 讨 免 疫 复 合 法 和 化 学 法建 立 大 鼠 溃 疡性 结 肠 炎模 型 的优 劣 ， 寻 求 更 接 近 人 类 发 病 机 制 的 溃 疡 性 结 肠 炎 动 物模型。方法 ： 将 Ｗｉ ｓ ｔ ａ ｒ 大 鼠 随机 分 成 正 常 组 、 免疫复合组和化 学组 ， 免 疫 复 合 组 前 ３周 每 周 给 予 抗 原 ｇ ｌ ， ４ ￣液 （ 含 异 体 抗 原８ ｍ ｇ ） 注 射 １次 ， 共 注 射 ３次 ， 第 ４周 免 疫 复合 组 和 化 学 组 均 用 １ ０ ０ ｍｇ Ｔ Ｎ Ｂ Ｓ ／ ｋ ｇ ＋５ ０ ％ 乙醇 灌 肠 。分 别 于造 模 后 第 １天 、 第ｌ ４天 、 第５ ６天 取 材 ， 比 较 造 模 后 各 组 大 鼠的 症 状 、 体征、 病 理 反 应 等 方 面 的 变化 。 结 果 ： 与 正常组 比较 ， 免 疫 复 合 组 与
ｙ ｓ ｉ ｓ ｏ ｆ ｔ ｈ ｅ ｓ ｔ ｒ ｅ ｎ ｇ ｔ ｈ ａ ｎ ｄ ｗ ｅ ａ ｋ ｎ ｅ ｓ ｓ ｂ ｅ ｔ ｗ ｅ ｅ ｎ ｔ ｈ ｅ ｉ ｍｍｕ ｎ ｅ ｃ ｏ ｍｐ ｌ ｅ ｘ ｍｅ ｔ ｈ ｏ ｄ ａ ｎ ｄ ｔ ｈ ｅ ｃ ｈ ｅ ｍｉ ｃ ａ ｌ ｍｅ ｔ ｈ ｏ ｄ ｆ ｏ ｒ ｅ ｓ ｔ ａ ｂ ｌ ｉ ｓ ｈ ｉ ｎ ｇ ａ ｎ ｅ ｘ ｐ ｅ ｒ ｉ ｍｅ ｎ ｔ ａ ｌ ｒ ａ ｔ ｍｏ ｄ ｅ １ ．Ｍ ｅ ｔ ｈ ｏ ｄ ｓ ：Ｗ ｉ ｓ ｔ ａ ｒ ｒ ａ ｔ ｓ ｗ ｅ ｒ ｅ ｒ ａ ｎ ｄ ｏ ｍｌ ｙ ｄ ｉ ｖ ｉ ｄ ｅ ｄ ｉ ｎ ｔ ｏ ｎ ｏ ｒ ｍａ ｌ ｇ ｒ ｏ ｕ ｐ，ｉ ｍｍｕ ｎ ｅ ｃ ｏ ｍｐ ｌ ｅ ｘ ｇ ｒ ｏ ｕ ｐ ａ ｎ ｄ ｃ ｈ ｅ ｍｉ ｃ ａ ｌ ｇ ｒ ｏ ｕ ｐ ．Ｒａ ｔ ｓ ｉ ｎ
免疫复合型溃疡性结肠炎大鼠模型的实验研究
免疫复合型溃疡性结肠炎大鼠模型的实验研究康宜兵;吕永慧;吴宇金;钟志勇;武昕【摘要】目的建立免疫复合型溃疡性结肠炎大鼠模型并探讨其应用价值.方法 20只SD大鼠,随机分为正常对照A组10只、模型组10只.模型组用大鼠颈、背部皮下注射抗原乳化液,第23天,造模组大鼠TNBS灌肠.空白对照组以生理盐水灌肠,比较各组大便的性状、便血程度、体重下降情况,并进行组织学观察.结果 UC模型大鼠体重减轻,体重增长缓慢(P＞0.05).血清IL-10水平降低(P＜0.05).大便的性状评分、CMDI评分均升高(P＜0.01).结论免疫复合型溃疡性结肠炎大鼠模型,该模型成功率高,重复性好,且模型的病变机制与人类UC相符,是较为理想的溃疡性结肠炎动物模型.【期刊名称】《云南中医中药杂志》【年(卷),期】2015(036)010【总页数】3页(P55-57)【关键词】溃疡性结肠炎;大鼠;动物模型【作者】康宜兵;吕永慧;吴宇金;钟志勇;武昕【作者单位】广东省广州市中医医院,广东广州510000;广东省广州市中医医院,广东广州510000;广东省广州市中医医院,广东广州510000;广东省医学实验动物中心,广东广州510000;广东省医学实验动物中心,广东广州510000【正文语种】中文【中图分类】R285溃疡性结肠炎(ulcerative colitis，UC)是一种主要累及直肠、结肠黏膜的慢性非特异性炎症。
在动物试验模型的研究方面，近年来开展的UC的实验动物模型有化学诱导模型、免疫致敏模型、细胞移植模型和基因敲除模型等，其中TNBS 诱导、单纯免疫法及免疫复合法3种UC大鼠模型较为常用。
免疫复合法模型的致病机制是在全身致敏的基础上给TNBS，导致迟发性变态反应造成肠黏膜的损伤，达到全身免疫异常与局部炎症病变的结合。
虽然制作方法稍复杂，但免疫复合法重复性好，病变更类似人UC，持续时间长，是较理想的造模方法。
免疫复合法模型病变累及全结肠以及末段回肠，溃疡病变可维持8周以上，12周后有愈合倾向，但仍可见结肠壁增厚及炎性细胞浸润[1]。
结肠炎大鼠模型
结肠炎大鼠模型————————————————————————————————作者：————————————————————————————————日期：4.1 材料与方法4.1.1 材料（一）实验试剂2，4，6-三硝基苯磺酸购于Sigma 公司（二）实验仪器同第三章；FCOM-6124 型半自动生化分析仪，德国倍肯公司（三）实验日粮组成与营养水平基础日粮按照NRC(1998)营养标准配制，如表4-1。
（四）实验动物SD 大鼠购于哈尔滨医科大学实验动物中心。
4.1.2 方法（一）实验动物分组与处理选取体重220±10 g 的SD 大鼠400 只，雌雄各半，分别采用醋酸和TNBS/乙醇两种方法复制大鼠结肠炎模型。
动物饲养于空调室内，室温20±2℃，相对湿度40%-50%，基础日粮如表4-1，颗粒饲料喂养，自由饮水。
将大鼠随机分为4 组：Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组和Ⅳ组。
Ⅰ组和Ⅱ组造模前饲喂4 周鱼油（0.5%的鱼油）后，Ⅰ组继续饲喂含0.5%鱼油日粮，而Ⅱ组饲喂基础日粮；Ⅲ组在造模后饲喂含0.5%鱼油日粮，而Ⅳ组造模后饲喂基础日粮。
（二）大鼠结肠炎模型的建立通过广泛文献检索和多次预实验结果，我们选取醋酸和2，4，6-三硝基苯磺酸/乙醇灌肠法两种方法建立结肠炎大鼠实验模型。
醋酸模型的建立参考文献[140-142]，大鼠禁食不禁水24h，乙醚轻微麻醉后，用外径为2mm的硅胶管插入大鼠肛门内约8cm，经管内注入10%的醋酸溶液2ml，10-20s 后注入生理盐水5ml以消除醋酸的作用，自然清醒后放回笼内正常饲养。
TNBS/乙醇模型的建立参考文献[143]复制大鼠结肠炎模型，大鼠禁食不禁水24h，乙醚轻微麻醉后，用外径为2mm 的硅胶管插入大鼠肛门内约8cm，经管内注入TNBS/50%乙醇溶液0.85ml，倒立30s，捏紧肛门平放5min 即可，自然清醒后放回笼内正常饲养，实验期为28d。
（三）样品的采集与处理分别于模型复制成功第24h、7d、14d 和28d 后称重、无菌采取血液后处死大鼠。
五大急性和慢性肠道炎症动物模型剖析
五大急性和慢性肠道炎症动物模型剖析摘要：炎症的病因是多因素的，因此研究人员和临床兽医需要应用不同的动物模型来模拟人类相关疾病。
那么，知道用于研究哺乳动物急性和慢性肠道炎症性疾病的各种动物模型的相对优势和局限性是极有必要的。
本文旨在说明在每个动物模型的优点和缺点，希望能有助于研究人员在急性或慢性刺激促进肠道疾病模型上的选择。
肠道是一个高度复杂的器官，需要复杂的动物模型来研究其功能和疾病。
在肠道内含有各种消化的食物成分或维持肠道环境的好氧、厌氧和兼性厌氧菌，而这些细菌通常对肠道，和生理和免疫功能有显著的影响。
研究肠道疾病的动物模型从小鼠到非人灵长类动物有很多种，虽然没有一个单一的动物模型是完美的，但对研究肠道炎症来说每个模型都具有独特探索肠道损伤和疾病的各个方面的功能。
小鼠: 小鼠是最常用于肠道研究的动物模型，基因工程小鼠在研究肠道炎症中尤为重要。
IL-10基因敲除小鼠C3H和BALB/c是已知的，比野生型C57BL／6小鼠易自发结肠炎。
另外，C57BL / 6比BALB/c 和C3H/HeJ小鼠更容易诱发Th2细胞介导的结肠炎，TCRα链缺陷的C57BL / 6小鼠比BALB/c和C3H/HeJ更容易诱发结肠炎。
此外，我们都知道用于诱导慢性肠道炎症的化学试剂会受到小鼠遗传背景的影响。
例如，三硝基苯磺酸（TNBS）、化学试剂用于刺激小鼠的CD样症状，很大程度取决于遗传背景；SJL / J，C3HeJ和BALB/c小鼠用TNBS造模，可建立小鼠CD肠病变，而C57BL／6小鼠相同的条件下保持相对不受影响。
同样，瑞士韦伯斯特和C3H/HeJ 葡聚糖硫酸钠（DSS）给药后小鼠发展UC样病变，但C57BL／6小鼠DSS处理后显示较少的组织损伤。
当选择用小鼠来研究肠道损伤时，小鼠和人类微生物组、免疫反应以及单胃的解剖结构之间的相似性也是重要的考虑因素。
小鼠和人在许多肠道特异性基因上有高相似性，且小鼠基因组和人基因组学比较研究得出人类和老鼠的基因90%是共享的，大约80%的基因同源。
溃疡性结肠炎大鼠模型研究现况
成 黏膜 屏 障结 构破 坏 ， 而 启 动 炎 症 ， 炎 症 介 质 与 人 类 急 性 继 其
肠炎 的炎 性 介 质 相 似 口 。方 法 为 口 ： 鼠禁 食 后 麻 醉 ， 肛 门 ］ ］大 从 插 入 导 管 注 入 ４ ～ ５ 乙 酸 溶 液 １ ～３ ｓ ， 人 生 理 盐 水 ５ ０ 后 注
维普资讯
重庆 医 学 ２ ０ ０ ７年 ４月 第 ３ ６卷 第 ７期
６６ １
・
综
述 ・
溃 疡 性 结 肠 炎 大 鼠 模 型 研 究 现 况
段 征 综 述 ， 维 伟 审校 汪 ４ ０ １） ０ ０ ６ （ 庆 医科 大 学 组 胚 教 研 室 重
１ 化 学 刺激 法
性 期 。 两 种 制作 方 法 均 在 第 ４ ５ 出现 腹 泻 ， ～ 天 隐血 试 验 阳性 ， 第 ５ ７天 均 出现 不 同 程 度 的 肉 眼 血 便 。停 用 Ｄ Ｓ后 第 １ ２ ～ Ｓ ～ 天 仍 可 见 血 便 ， 泻 可 持 续 ３ ４ 。 大 鼠饮 用 Ｄ Ｓ１周 后 ， 腹 ～ ｄ Ｓ 出
药物 。 ２ 免 疫 学 方 法
冲洗 ３次 。１ ｄ内 ， 鼠 出 现 不 同程 度 的 血 性 腹 泻 、 量 减 ～３ 大 食 少 、 动 、 发 无 光 泽 、 重 下 降 。 病 理 改 变 与 人 ＵＣ 相 似 ： 少 毛 体 肉 眼观 察 从 乙状 结 肠 到 降 结 肠 均 可 见 水 肿 ， 壁 明显 增 厚 、 硬 ， 肠 僵
巴 滤 泡 。该 模 型 制 备 简单 、 济 ， 能 较 好 复 制 人 Ｕ 复 发 缓 经 且 Ｃ
解 的 特 点 。但 制 备周 期 较 长 ， 肠 黏 膜 病 变 主 要 位 于 左 侧 ， 结 并 可 导 致 结 肠 上 皮 萎 缩 、 育 不 良 ， 而 增 加 癌 症 的 发 生 率 ， 一 发 从 这 点 与 人 ＵＣ相 似 ， 不 适 用 于 ＵＣ治 疗 性 研 究 口 但 。Ｄ Ｓ模 型常 Ｓ 用 于 筛 选 那 些 对 Ｕ 相 关 性 的 大 肠 癌 具 有 预 防 和 治 疗 作 用 的 Ｃ
DSS诱导溃疡性结肠炎大鼠模型肝脏紧密连接蛋白的表达改变
DSS诱导溃疡性结肠炎大鼠模型肝脏紧密连接蛋白的表达改变饶艳霞;陈洁;吴亦栋;顾伟忠【摘要】目的研究实验性溃疡性结肠炎模型中肝脏紧密连接蛋白的表达以及肝脏功能和组织学的变化.方法将 SD大鼠随机分为实验组和对照组,实验组经饮水途径连续 6 d给予3%葡聚糖硫酸钠 (DSS) 后自由饮水2 周;苏木精-伊红 (HE) 染色分析肝脏和结肠的组织学变化;生化分析检测血清中丙氨酸转氨酶、天门冬氨酸转氨酶、总胆红素、碱性磷酸酶水平,实时定量逆转录聚合酶链反应检测大鼠肝组织紧密连接蛋白的表达.结果与对照组比较,DSS处理后大鼠体质量下降,差异有统计学意义 (P< 0.05);结肠变短,差异有统计学意义 (P< 0.01);黏膜溃疡、糜烂和炎症细胞浸润,炎症在第14天左右达到峰值,后逐渐缓解;DSS处理组血清ALT显著升高,肝重量显著降低,差异均有统计学意义(P <0.01);部分DSS处理大鼠肝组织点状出血、炎症细胞浸润和局灶性肝细胞脂肪变性,但是总体水平差异无统计学意义;DSS大鼠肝脏occludin、claudin3 mRNA表达水平差异无统计学意义,ZO-1、claudin1、claudin2 mRNA表达显著下降 (P <0.01),claudin7 mRNA明显增加 (P <0.05).结论短期DSS干预结合饮水2 周诱导的大鼠结肠炎模型有急性损伤、慢性修复的特点;此外DSS处理大鼠出现ALT升高以及紧密连接复合体蛋白表达转录发生改变,提示DSS诱导的大鼠溃疡性结肠炎模型伴肝细胞损伤和肝脏屏障功能受损.%Objective To investigate the expression of liver tight junction, liver function and its histopathological change in experimental ulcerative colitis. Methods Sprague-Dawley (SD) rats were randomly divided into two groups, experimental group fed with 3% dextran sulfate sodium (DSS) in the drinking water for six days and the control group. Histologicalexaminationrnwas performed in liver and colon. The liver function was assessed by serum alanine aminotransferase (ALT), aspartate aminotransferase (AST), alkaline phosphatase (AP), and total bilirubin (Tbili) level. Real time RT-PCR was used to detect the expression of seven proteins including occludin, ZO-1, claudin1, claudin2, claudin3 and claudin. Results Compared to control group,DSS treated rats showed weight lose (P<0.05), shorter colon length (P<0.01), and prominent colitis in distal colon characterized by dilations of gland crypt, ulcer, and inflammatory cell infiltration. The inflammation was the most severe at the 14th day, and then tended to subside. DSS group had increased serum ALT and decreased liver weight (P<0.01). Although inflammatory cell infiltration and focal injury in the liver were found in some DSS-treated rats, they were not significantly different from control group. Compared with control group, DSS treated rats had lower expression of ZO-1, claudin1, claudin2 mRNA (P<0.01), but higher expression of claudin7 mRNA (P<0.05). Conclusions A six-day treatment of 3% DSS in drinking water followed by 14 days of tap wate induced a colitis model in SD rats which was characterized by acute injury and slow recovery. In addition, DSStreated rats showed increased ALT and changes of expression of tight junction protein, suggesting that DSS-induced ulcerative colitis rat had liver cell injury and impaired liver barrier function.【期刊名称】《临床儿科杂志》【年(卷),期】2012(030)010【总页数】6页(P967-972)【关键词】葡聚糖硫酸钠;溃疡性结肠炎;紧密连接;血-胆汁屏障;大鼠【作者】饶艳霞;陈洁;吴亦栋;顾伟忠【作者单位】浙江大学医学院附属儿童医院,浙江杭州,310003;浙江大学医学院附属儿童医院,浙江杭州,310003;浙江大学医学院附属儿童医院,浙江杭州,310003;浙江大学医学院附属儿童医院,浙江杭州,310003【正文语种】中文【中图分类】Q95-3炎症性肠病 (inflammatory bowel disease)，包括溃疡性结肠炎 (ulcerative colitis，UC)、克罗恩病(Crohn's disease，CD)，病程迁延且慢性，除典型肠道症状以及上皮组织的病理改变之外，也包括一些肠外的病变，涉及皮肤、关节以及肝脏损伤等[1]。
蒙药加味“伊赫哈日——12”对溃疡性结肠炎大鼠模型肠组织SOD活力及MDA含量的影响
关键 词 ： 蒙药加 味 “ 伊 赫哈 日一 １ ２ ” 溃 疡 性 结肠 炎 实验 研 究
中图分类号 ： Ｒ ２ ９
文献标识码 ： Ｂ
文章编 号： １ ６ ７ ２ — ８ ３ ５ １ （ ２ ０ １ ３ ） ０ ５ — ０ ０ ６ ８ — ０ ２ 剂 量 组 阳性 对 照 组
阴性 对 照 组
模 型组
与阴性对照组 比较 ， ＊ Ｐ ＜ Ｏ ． ０ ５ ， Ｐ ＜ ｎ ０ ｌ ； 与模型组比较 ａ Ｐ ＜ ０ ． ０ ５ ，
Ｐ＜ ０ ． ０１ 。
巨噬细胞不仅 可吞 噬异物和有效清 除体 内衰老变性 的细胞 ， 还能分泌多种生物活性物质 ，在免疫应答 和免疫 调节 中起 重 要作用 ， 活化的巨噬细胞可选择性杀伤恶性细胞 。 本次抗肿瘤 实验显示蛞蝓提取物对 ｓ 。 肉瘤有较好的抑制作用 ， 并能不同 程度提高荷瘤小 鼠免疫器官指数 ，明显提高荷瘤小 鼠淋 巴细 胞转化反应和巨噬细胞吞 噬功能 ， 说 明其保护机体免疫器官 ， 提高免疫功能的作用 。提示蛞蝓提取物可通过调动机体 内在 与阴性对照组 比较， ． ０ ５ ， Ｄ１ ； 与模型组 比较 ａ Ｐ ＜ ０ ． ０ ５ ， 的防御机制 ， 重建或提高机体的免疫 功能 ， 从而发挥抗肿瘤作 ０１ 。 用 。这可能是蛞蝓抗肿瘤作用 的机理之一 。 ３ ． ４对 Ｃ ｏ ｎ Ａ诱导 的淋巴细胞转化反应 的影响 ：蛞蝓提取 物高 参 考 文 献 中低三个剂量组均 能明显提 高 Ｃ ｏ ｎ Ａ诱导 的淋 巴细胞转化反 ｆ １ １ 林 吕柯 ， 编著． 广西 药用动物［ Ｍ１ ． 南宁： 广西科学技术 出版社 ， 应， 与正常组 比较 差异有统计学意义 （ Ｒ０ ． ０ １ ） ， 见表 ４ 。 １ ９ ９ １ ： ３ ９ ． ４讨 论 『 ２ １ 徐淑云 ， 卞如濂 ， 陈修 ， 主 编． 药理 实验方法学［ Ｍ】 ． 北京 ： 人 民 肿瘤的发生 、 发展过程 中， 机体免疫系统和肿瘤 细胞 之间 卫生 出版社 ， ２ ０ ０ １ 第三版 ： １ ７ ５ ７ — １ ７ ７ ９ ． 失去平衡 。免疫功能低下是导致肿瘤发生 的重要原 因之一 。 『 ３ ］ 周 际昌 ， 编著 ． 实用肿 瘤 内科 学【 Ｍ】 ． 北京 ： 人 民卫 生出版社 ， 研究证 明，免疫器官 的脏器指数是衡 量机体免疫 功能的初步 １ ９ ９ ９： １ ４ ３ ． 指标 ， 淋 巴细胞 的转化情 况 ， 可 反映机体 的细胞免 疫水平 ， 而 △基金项 目： 广西 自然科学基金（ ２ ０ １ ０ Ｇ ＸＮ Ｓ Ｆ Ａ ０ １ ３ １ ３ ７ ｏ
消化系统疾病动物模型
消化系统疾病动物模型（一）胃肠疾病动物模型1、急性胃炎动物模型（1）酸制剂诱发急性胃炎模型：Wistar大鼠，雄性，300g，大鼠禁食24h，在清醒状态下，用下述试剂或物质灌胃：①水杨酸制剂（如20mmol／L阿司匹林或水杨酸溶液）按100mg／kg体重灌胃；②2ml10mmol／L的醋酸或2ml不同浓度的盐酸（1、10、100mmol／L）；③2ml同种动物胆汁或2mmol／L的牛磺胆酸；④2ml15％的乙醇。
4h 后处死动物，剖检可见胃内发生急性弥漫性炎症改变。
胃粘膜表面有浅表糜烂、出血，粘膜层内见中性粒细胞浸润。
（2）胆汁反流性胃炎模型：碱性肠液倒流入胃，刺激胃粘膜可引起炎症，即胆汁反流性胃炎。
常见于原发性或继发性幽门功能紊乱或胃切除手术后。
本法取上部小肠的碱性肠液注入已结扎幽门的同种大鼠胃内，使之对胃粘膜产生持续刺激，形成胃炎。
动物选取雄性Wistar大鼠，体重180～220g,制备上部小肠液，向胃内注入小肠液，2 ml/只（正常对照组注入2 ml生理盐水）。
缝合腹壁，腹腔注射阿托品5 mg/kg体重，以抑制胃液分泌，利于胃粘膜损伤模型的形成。
处死大鼠，开腹，结扎贲门，取出胃，沿胃大弯剪开。
用滤纸吸干表面水分，立即称量胃重，以胃湿重/体重之比（胃系数）表示胃水肿程度。
肉眼观察并计数整个胃粘膜出血点数，作为损伤指数。
模型组动物胃系数和损伤指数明显增加，肉眼观察模型组胃粘膜充血、水肿，皱襞减少，颜色暗红，并有大量散在出血点。
2、慢性胃炎动物模型（1）大鼠慢性萎缩性胃炎模型酗酒、用药不当、饮食习惯不良、幽门螺杆菌感染、自身免疫等是此病的主要病因。
组织病理学是评价造模成功的最主要指标，主要观察和测量胃粘膜厚度、粘膜肌层厚度、腺体数量、壁细胞数量、固有层炎细胞浸润程度和肠化生发生率等。
综合法一：胆汁（去氧胆酸钠）+热水+主动免疫综合法二：去氧胆酸钠+热糊+主动免疫综合法三：去氧胆酸钠+酒精+氨水+吲哚美锌3、动物胃粘膜肠上皮化生模型（1）X线胃局部照射诱发胃粘膜肠化生模型：选用5～8周龄的Wistar 或JCL/SD大鼠。
大鼠化学诱导性结肠炎模型的建立及云母干预治疗机制探讨的开题报告
大鼠化学诱导性结肠炎模型的建立及云母干预治疗
机制探讨的开题报告
一、研究背景
结肠炎是一种常见的炎症性肠道疾病，可以引起慢性腹泻、腹痛、
直肠出血和便秘等症状。
现有的治疗方法主要包括化学药物和手术治疗，但这些治疗方法存在副作用和复发率高的问题，需要更为安全有效的治
疗方法。
云母是一种天然矿物质，具有抗炎、抗氧化和免疫调节等多种生物
活性。
以往的研究表明，云母具有一定的抗结肠炎作用，但其作用机制
尚不清楚。
因此，本研究旨在建立大鼠化学诱导性结肠炎模型，并探究云母的
干预治疗机制，为结肠炎的治疗提供新的策略。
二、研究方法
1. 实验动物
选用雄性SD大鼠60只，体重约200g。
2. 模型建立
将大鼠随机分为两组，对照组和模型组。
模型组给予三氧化二砷诱
导结肠炎，对照组给予等体积的生理盐水。
3. 干预治疗
将模型组随机分为三组，云母高、中、低剂量组。
分别给予不同剂
量的云母进行干预治疗，对照组给予等体积的生理盐水。
4. 指标检测
观察大鼠体质量变化，记录腹泻、腹痛、直肠出血和便秘等症状。
取结肠组织进行病理学和免疫学检测，检测肠道功能和炎症指标的变化。
三、研究意义
本研究的意义在于建立大鼠化学诱导性结肠炎模型，并探究云母的
干预治疗机制，为结肠炎的治疗提供新的策略。
同时，深入了解云母的
生物活性和作用机制，对其进一步应用和开发具有重要价值。
振脾汤对溃疡性结肠炎模型大鼠的形态学及组织病理学的影响疗效观察
（ 河北 省唐 山市 中 医医院肛 肠科 ， 河北
唐山
０ ６ ３ ０ ０ ０ ）
【 摘 要】 目的 观察振脾汤对溃疡性结肠炎（ Ｕ Ｃ ） 模型大鼠灌胃。方法 将 ４ ８ 只 Ｗｉ ｓ ｔ ａ ｒ 大鼠随机分
为正常组 、 模 型组、 振脾 汤组及柳 氮磺吡啶 片组， 每组 １ ２只 ， 采用三硝 基苯磺酸 （ Ｔ Ｎ Ｂ Ｓ ） ／乙醇方 法建立 Ｕ Ｃ模
织病理 学损 伤评 分与模 型组 同期比较差异均有统计学意义（ Ｐ＜ ０ ． ０ ５ ） ， 但 ２组间 比较差异无统计学意义 （ Ｐ＞
０ ． ０ ５ ） 。结论 振 脾汤可以明显改善 Ｕ Ｃ模 型大鼠一般情 况， 增加体质量 ， 改善微循环 ， 抑制 炎症反应 ， 修 复溃
疡， 更适 用于 Ｕ Ｃ的 维持 治疗 。
２ ８ ８
河北 中医 ２ ０ １ ４年 ２月第 ３ ６卷第 ２期
Ｈｅ ｂ ｅ ｉ Ｊ Ｔ Ｃ Ｍ， Ｆ ｅ ｂ ｒ ｕ ａ ｒ ｙ ２ Ｑ
鱼 ：
振 脾 汤对 溃 疡性 结 肠 炎模 型 大 鼠 的形 态 学 及 组 织 病 理学 的影 响疗 效 观 察
王爱磊 张 学明
ａ ｃ ｉ ｄ（ Ｔ Ｎ Ｂ Ｓ ）／ ｅ ｔ ｈ ａ ｎ ｏ ｌ ｍｅ ｔ ｈ ｏ ｄ ． Ａ ｔ ｔ ｗ ｏ ｗ ｅ ｅ ｋ ｓ ａ ｆ ｔ ｅ ｒ ｓ ｕ ｃ ｃ ｅ ｓ ｓ ｆ ｕ ｌ ｍ ｏ ｄ ｅ ｌ ｌ ｉ ｎ ｇ ，ｒ ａ ｔ ｓ ｉ ｎ Ｚ ｈ ｅ ｎ ｐ ｉ ｄ ｅ ｃ ｏ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ ｇ ｒ ｏ ｕ ｐ ａ ｎ ｄ Ｓ ｕ ｌ —
Ｉ ｎ ｖ ｅ ｓ ｔ ｉ ｇ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ Ｚ ｈ ｅ ｎ ｐ ｉ ｄ ｅ ｃ ｏ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｎ ｔ ｈ ｅ ｍｏ ｄ ｅ ｌ ｒ ａ ｔ ｓ ｗｉ ｔ ｈ ｕ ｌ ｃ ｅ ｒ ａ ｔ ｉ ｖ ｅ ｃ ｏ ｌ ｉ ｔ ｉ ｓ ＷＡ ＮＧ Ａｉ ｌ ｅ ｉ ，ＺＨ Ａ ＮＧ Ｘｕ ｅ ｍｉ ｎ ｇ ．
来氟米特对三硝基苯磺酸诱导的大鼠结肠炎模型的影响
是细 胞 因子 与 Ｉ Ｂ Ｄ 的 关 系 倍 受 关 注 。 来 氟 米 特
（ Ｌ ｅ ｆ ） 是一 个相 对低 毒性 的新型 免疫 调节 剂 ， 对 细胞
和体 液 免疫 均有 抑 制 作用 ， 已在 多 种疾 病 的治 疗 研 究 中显 示 出 巨大 的应 用前 景 ， 但其对 Ｉ Ｂ Ｄ 有无 治 疗
表达完成 。
主题 词 自由词
结肠 炎／ 药物疗法 ； 三硝基苯磺 酸 ； Ｎ Ｆ — ｋ ａ ｐ ｐ ａ Ｂ； 肿 瘤 来 氟米特
坏 死 因 子一 ； 白细 胞 介 素 １ Ｏ
１ ． １ 动 物 与 主 要 试 剂 健 康 成 年 ６ Ｓ Ｄ大 鼠 ６ ０
只， 体重 １ ８ ０～２ ０ ０ ｇ （ 安徽 医科 大 学 实 验 动 物 中心 ， 清 洁级 ） ， 三 硝 基 苯磺 酸 （ Ｔ Ｎ Ｂ Ｓ ） 购 自Ｓ ｉ ｇ ｍａ公 司 ，
ｋ ｇ ， ｉ ｇ ， ｑ ｄ×１ ４ ｄ ） 。每天观察疾 病 活动指数 （ Ｄ Ａ Ｉ ） ， ２周后处 死 大鼠 ， 并取 出结肠组织进行 大体形 态及组织学评分 。以免
疫 组化方法检测结肠组织核 因子 Ｎ Ｆ — Ｋ Ｂ ０ ６ ５ 、 Ｔ Ｎ Ｆ 一 的表 达 ，
Ｅ ｌ ｉ ｓ ａ法测外周 血 Ｉ Ｌ 一 １ Ｏ的含 量 。结果 与 Ｔ Ｎ Ｂ Ｓ模 型组 相 比， Ｌ ｅ ｆ 组 大 鼠的 Ｄ Ａ Ｉ 、 大体形 态 、 组 织学评 分及肠 黏膜 组织 内Ｎ Ｆ — Ｋ Ｂ ０ ６ ５和 Ｔ Ｎ Ｆ 一 表 达显 著降 低 （ Ｐ＜０ ． Ｏ １ ） ； 大 鼠结肠 黏膜组织 Ｎ Ｆ — Ｋ Ｂ ０ ６ ５在模型组 以胞核 表达 为主 ， 相反正 常对
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
结肠炎大鼠模型
————————————————————————————————作者：————————————————————————————————日期：
4.1 材料与方法
4.1.1 材料
（一）实验试剂
2，4，6-三硝基苯磺酸购于Sigma 公司
（二）实验仪器
同第三章；FCOM-6124 型半自动生化分析仪，德国倍肯公司
（三）实验日粮组成与营养水平
基础日粮按照NRC(1998)营养标准配制，如表4-1。
（四）实验动物
SD 大鼠购于哈尔滨医科大学实验动物中心。
4.1.2 方法
（一）实验动物分组与处理
选取体重220±10 g 的SD 大鼠400 只，雌雄各半，分别采用醋酸和TNBS/乙醇两种方法复
制大鼠结肠炎模型。
动物饲养于空调室内，室温20±2℃，相对湿度40%-50%，基础日粮如表
4-1，颗粒饲料喂养，自由饮水。
将大鼠随机分为4 组：Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组和Ⅳ组。
Ⅰ组和Ⅱ组
造模前饲喂4 周鱼油（0.5%的鱼油）后，Ⅰ组继续饲喂含0.5%鱼油日粮，而Ⅱ组饲喂基础日粮；
Ⅲ组在造模后饲喂含0.5%鱼油日粮，而Ⅳ组造模后饲喂基础日粮。
（二）大鼠结肠炎模型的建立
通过广泛文献检索和多次预实验结果，我们选取醋酸和2，4，6-三硝基苯磺酸/乙醇灌肠法两种方法建立结肠炎大鼠实验模型。
醋酸模型的建立参考文献
[140-142]
，大鼠禁食不禁水24h，乙醚轻微麻醉后，用外径为2mm
的硅胶管插入大鼠肛门内约8cm，经管内注入10%的醋酸溶液2ml，10-20s 后注入生理盐水5ml
以消除醋酸的作用，自然清醒后放回笼内正常饲养。
TNBS/乙醇模型的建立参考文献
[143]
复制大鼠结肠炎模型，大鼠禁食不禁水24h，乙醚轻
微麻醉后，用外径为2mm 的硅胶管插入大鼠肛门内约8cm，经管内注入TNBS/50%乙醇溶液
0.85ml，倒立30s，捏紧肛门平放5min 即可，自然清醒后放回笼内正常饲养，实验期为28d。
（三）样品的采集与处理
分别于模型复制成功第24h、7d、14d 和28d 后称重、无菌采取血液后处死大鼠。
大鼠处死
后，迅速剖取结肠，摘取距肛门6-8cm 病变处结肠4-7cm，用于结肠黏膜损伤的观察和结肠病理
学变化的观察。
沿肠系膜纵轴剪开肠腔，冰生理盐水冲洗干净后将肠黏膜向上平铺于平板上，大头针固定后，用放大镜观察炎症及溃疡发生情况（进行肠道黏膜损伤评分观察）。
将采取的部
分结肠组织，固定、石蜡包埋，病理切片（HE 染色），显微镜下观察大鼠结肠病理学变化情况
（四）观察指标
（1）结肠炎大鼠炎症的观察
观察记录大鼠体重、饮食、粪便性状、死亡率、稀便发生率、皮毛、活动等情况。
同时采取粪便测定潜血情况（联苯胺冰醋酸法），综合体重、粪便性状及隐血情况对大鼠疾病活动指数
（The Disease Activity Index，DAI）进行评分
[144]
（表4-2）；肉眼观察结肠黏膜损伤大体情况，
参考结肠黏膜损伤程度评分标准
[145-148]
（表4-3）；结肠组织HE 染色后光镜下观察结肠组织损
伤情况，参考肠组织学损伤评分标准
[149-150]
（表4-4）。
表4-2 DAI 评分标准
Table 4-2 The standards of DAI score
评分体重减轻(%) 粪便性状粪潜血
0 (–) 正常正常
1 1–5
2 5–10 松软潜血(+)
3 11–15
4 >1
5 稀便肉眼潜血
附：粪便性状评分标准(1)正常粪便：成形颗粒样粪便；
(2)松软粪便：不豁附于肛门的糊状、半成形粪便；
(3)稀便：可豁附于肛门的稀水样便
表4-3 结肠黏膜损伤程度评分标准
Table 4-3 The standards of colonic mucosal injury score
评分大体形态
0 黏膜无水肿、充血及溃疡，肠壁无粘连及增生
1 轻度的黏膜水肿、充血、无溃疡
2 黏膜充血、水肿、糜烂、无溃疡
3 黏膜充血、水肿、糜烂、单个溃疡
4 黏膜充血、水肿、糜烂、多个溃疡
5
黏膜充血、水肿、重度糜烂、多个溃疡，
有>1cm
2
溃疡
（4）数据处理
实验结果以
x
x ±S表示，数据统计分析采用SPSS11.5软件进行数据处理。