蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留快速检测方法标准
蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测
蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测蔬菜是我们日常生活中不可或缺的食物之一，是我们餐桌上重要的一部分。
随着农业生产的发展，农药的使用也在逐渐增加，为了提高产量和质量，农民们经常使用有机磷及氨基甲酸酯类农药来防治病虫害。
这些农药的残留问题却引起了人们的关注。
对蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留的快速检测成为了一个迫切需要解决的问题。
有机磷及氨基甲酸酯类农药是目前农业生产中广泛使用的一类农药，它们能够有效地抑制害虫和杂草的生长，提高作物产量。
在农药使用过程中，由于农民对农药的使用不当或者过量使用，导致蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药的残留量超标的情况屡见不鲜。
这些农药残留会对人体健康造成潜在的威胁，因此对蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留的快速检测显得尤为重要。
目前，关于蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留快速检测的方法有很多种，包括色谱法、光谱法、质谱法等。
这些方法虽然在检测有机磷及氨基甲酸酯类农药残留方面具有一定的灵敏度和准确性，但是它们需要昂贵的设备和复杂的操作流程，并且需要较长的时间才能得到结果，无法满足快速检测的需求。
研究人员正在不断寻找更加简便、快速和准确的方法来检测蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留。
近年来，基于生物传感技术的快速检测方法逐渐成为研究热点。
生物传感技术是一种利用生物材料的特异性反应来检测目标化合物的技术，具有操作简便、灵敏度高、结果快速等优点。
在蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留的快速检测中，常用的生物传感技术包括酶传感技术、免疫传感技术和核酸传感技术等。
酶传感技术是利用酶对目标化合物的特异性反应来进行检测的技术。
在蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留的快速检测中，常用的酶包括乙酰胆碱酯酶、磷酸化酶等。
当有机磷及氨基甲酸酯类农药存在时，它们会与酶发生特异性的化学反应，产生颜色变化或发光信号，从而实现对有机磷及氨基甲酸酯类农药残留的快速检测。
除了传统的生物传感技术之外，近年来还出现了一些新的快速检测方法，如基于纳米材料的快速检测方法、基于光学技术的快速检测方法等。
蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量
样品取样部位
• 参照GB/T 2763-2014上面的具体要求。因 为这部分内容较多又很重要，请大家一定 认真学习标准。
蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类 农药残留量快速测定
盐城市农产品质量监督检验测试中心 丁立彤
• 4 抽取不同样品时推荐使用一次性手套，每抽一 个样品时更换一次。抽样全过程所有用具都要保 证不会对样品造成二次污染。
抽样程序
• 5抽样人员要与受检单位人员共同确认样品的真实性和代 表性，在现场认真填写抽样工作单，准确记录抽样的相关 信息。双方签字、盖单位公章。抽样工作单一式四联，第 一联留抽样单位，第二联留被抽单位，第三联随样品，第 四联交任务下达单位。抽样工作单填写的信息要齐全、准 确，字迹清晰、工整。
• 6因遇到抽样点关闭、天气状况等特殊情况造成不能抽样， 或在规定时间内抽样点抽不到样品，应及时与任务下达单 位联系，汇报情况。
抽样程序
• 7 抽取的样品应放入塑料袋中，装入样品后的塑 料袋要密封，样品袋一旦打开后不能恢复原状。 封条上标明封样时间，并由双方代表共同签字。
• 8 样品袋上要加贴样品的标识。标识的内容包括 样品名称、样品编号和抽样时间。
1、对照溶液测试
2、样品处理 （1）样品的采集和称取 （2）样品提取液的制备
（1）样品的采集和称取
称烧杯去皮
（2）样品提取液的制备
吸取5ml缓冲液
3、样品溶液测试
四、结果判定
当蔬菜的提取液对酶的抑制率≥50%， 表示蔬菜中可能有高剂量的有机磷或 氨基 甲酸酯类农药存在， 样品为阳性结果 ， 确定阳性结果前，对样品需重复检验2次 结果一致方能判定。 对阳性结果的样品， 可以用其他定量方法进一步确定具体农药 品种和含量。当蔬菜的提取液对酶的抑制 率＜50%，表示检测结果阴性。
蔬菜农药残留快速检测技术
蔬菜农药残留快速检测基础知识一、蔬菜农药残留酶抑制法检测原理农残速测仪检测原理是酶抑制法，在必然条件下，有机磷和氨基甲酸酯类农药能抑制乙酰胆碱酯酶的活性，其抑制率与农药的浓度呈正相关。
在正常情况下，酶催化代谢产物水解，其水解产物与显色剂反映，产生黄色物质，用分光光度计在410纳米处测定吸光度随时间的转变值，计算出抑制率，通过抑制率的大小可以判断样品中是不是有高剂量的有机磷或氨基甲酸酯类农药的存在。
二、农药残留速测法检测对象一、有机磷类农药包括：甲胺磷、水胺硫磷、乐果、敌百虫、敌敌畏、氧化乐果、马拉硫磷、甲基异柳磷、辛硫磷、甲基对硫磷、甲拌磷、乙酰甲胺磷、久效磷、杀螟硫磷、倍硫磷、毒死蜱等。
二、氨基甲酸酯类农药包括：叶蝉散、速灭威、西维因、涕灭威、克百威（呋喃丹）、异丙威、灭多威等。
三、农药残留速测法依据的标准中华人民共和国国家标准GB/—2003蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测2003-08-11发布2004-01-01实施中华人民共和国卫生部中国国家标准化管理委员会发布四、检测方式一、准备阶段试剂或条件发生转变及时间距离比较长时，应重做。
①开机预热15分钟。
②仪器调0。
③仪器调100。
④制作对照。
第①、②、③步在天天利用前必需做，在改换新一瓶试剂时也必需做。
二、对照①在干净的试管顶用移液管加入提取液。
②用移液器提取的酶，加入到试管中。
③用移液器提取的显色剂，加入到试管中。
④适度晃动试管，使液体混合均匀，25℃左右的温度放置15分钟。
⑤15分钟后，用移液器提取的底物，加入到试管中，晃动试管，使液体混合均匀，马上倒入比色皿中，放入仪器1通道，按启动键开始检测。
⑥时间到后显示对照结果，一般对照值应在30以上，按Y保留，对照结束。
3、样品检测液①用天平称取表面干净蔬菜或水果1g剪成1cm左右的方块，放入小烧杯中。
②用移液器提取5ml的提取液用振荡器震荡2分钟。
③将烧杯中的液体用移液器提取的上清液到试管中，为检测液。
蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测
（GB/T 蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测）方式一快速卡法一、目的要求：学习快速卡法测定有机磷农残快速查验法及熟悉查验结果评定。
二、实验原理：胆碱脂酶可催化靛酚乙酸脂（红色）水解为乙酸与靛酚（蓝色），有机磷或氨基甲酸脂类农药对胆碱脂酶有抑制作用，使催化、水解、变色的进程发生改变，由此可判定出样品中是不是有高剂量有机磷或氨基甲酸脂类农药的存在。
三、实验试剂：一、固化有胆碱脂酶和靛酚乙酸脂试纸卡片；二、pH 磷酸盐缓冲液：别离称取15.0g磷酸氢二钠[Na2HPO4•12H2O]与1.59g无水磷酸二氢钾[KH2PO4]，用500 mL蒸馏水溶解。
四、实验步骤：一、整体测定法（1）选取具有代表性的蔬菜样品，擦去表面泥土，剪成1cm左右方形碎片,取5g防入带盖瓶中，加入10 mL缓冲溶液，振摇50次，静置2min以上.(2) 取一片快速卡，用白色药片沾取提取液，放置10min以上进行预反映，有条件时在37 ℃恒温装置中放置10min。
预反映后的药片表面必需维持湿润。
（3）将快速卡对折，用手捏3min或用恒温装置恒温3min，使红色药片与白色药片叠合发生反映。
注意：每批测定应设一个缓冲液的空白对照。
二、表面测定法（粗筛法）（1）擦去蔬菜表面泥土，滴2~3滴缓冲液在蔬菜表面，用另一片蔬菜在滴液处轻轻摩擦。
（2）取一速片测卡，将蔬菜上的液滴滴在白色药片上。
（3）放置10 min以上进行预反映，有条件时在37 ℃恒温装置中放置10 min。
预反映10 min，预反映后的药片表面必需维持湿润。
（4）将快速卡对折，用手捏3min或用恒温装置恒温3min，使红色药片与白色药片叠合发生反映。
注意：每批测定应设一个缓冲液的空白对照。
五、检测结果判定：一、结果判定结果以酶被有机磷或氨基甲酸脂类农药抑制（为阳性）、未抑制（阴性）表示。
与空白对照卡比较，白色药片不变色或略有浅蓝色均为阳性结果。
白色药片变成天蓝色或与空白对照卡相同，为阴性结果。
果蔬中有机磷和氨基甲酸酯类农药的快速检测
（． １ 河南农业 大学 迅 捷测试技术 有限公 司， 郑州 ４ ０ ０ ；２河南 省建筑科学研 究院 ， 州 ４ ０ ０ ） ５０２ ． 郑 ５０２
摘要 ： 通过研究表明， 丁酰胆碱酯酶对果蔬中有机磷和氨基甲酸酯类农药较为敏感 ， 检测有机磷和氨基 甲酸酯类农
药的最佳条件 ： 预反应时间１ ｎ最佳预反应温度３ ５ｍｉ ， ７℃， 酶最佳用量为００ 底物最佳用量００ 显色剂 ． ｍＬ， ５ ．５ｍＬ，
ｒ ｓｄ ｅ ｉ ｕｅ
吸光度值变小） 根据颜色（ 。 吸光度值） 变化的 目 ， 前 果蔬中有机磷及氨基 甲酸酯快速检验方法主要 系的颜色较浅（ 是酶抑制率法 ， 这种 检测方法是以国家标 准（ ／ 情况来判断有机磷和氨基 甲酸酯类农药残留的多少。 ＧＢ Ｔ １ ６ ０ ２ ０ ）所用酶为小麦酶）农业部 颁标准 （ Ｔ １２实验设备与试剂 ３ — ０ ２（ ８ 、 ＮＹ／ ＿ ４ ８２ ０ ） ４ — ０ （ 酶为 丁酰胆碱 酯酶 ） 乙酰胆碱 酯酶抑 制 １ 所用 和 测试仪 ： Ｎ Ｃ Ⅵ型农药残留、 Ｙ ．Ｌ 重金属综合速测仪（ 河 率法（ ＢＴ ０９１９ ２０ ） 础的 ， Ｇ ／５０ ． — ０２为基 ９ 但市场上 检测仪 器的 南农大迅捷测试技术有限公 司研制） 。 灵敏 度相差 很大 ， 又有一些 厂 家有各 自的检 测方 法及判 断 预 反应 装置 ： Ｎ Ｃ Ⅵ 型测试 仪 自配 预反 应池 ， Ｙ ．Ｌ 控温 标准 ， 这些都不利于无公害蔬菜与绿色食品市场的培育与
文章编号 ：０ ６ ０ １ （ ０ ７ ０ — ３ ６ ０ １ ０ —４ ３２ ０ ） ５０ ２ — ２
Ｒａ ｉ ｓ ａ ｃ ｆＯｒ ａ Ｏ ｈ ｓ ｈ ｒ ｓ Ｐｅ ｔ ｉｅ ａｎ ｐｄ Ｒｅ ｅ ｒ ｈＯ ｇ ｎ ｐ Ｏ ｐ Ｏ ｕ ｓ ｉ ｄ ｄ ｃ Ｃａ ｂ ｍａ ｅ Ｐｅ ｔ ｉｅ ｎ Ｆ ｕｔ ｎ ｇ ｔ ｂｅ ｒ ａ ｔ ｓｉ ｄ ｓ ｉ ｒ ａ ｄ Ｖｅ ｅａ ｌ ｃ ｉ
蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测
蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测
随着工业的发展和农业的现代化，化学农药的广泛应用成为农业生产中的常见现象。
因此，农产品中农药残留已成为一个普遍的问题。
为了确保消费者的健康和安全，需要对
农产品中的农药残留进行检测。
其中，有机磷类及氨基甲酸酯类农药是最常见的农药残留
物之一。
本文将介绍如何快速检测蔬菜中的有机磷类及氨基甲酸酯类农药残留量。
有机磷类农药是一类广泛使用的农药，它的主要成分是磷酸酯化合物。
这种农药可以
杀死害虫、杂草和真菌，从而保护作物的生长。
但是，它往往会对环境和人体产生有害影响，因此需要对其进行检测。
在蔬菜中，有机磷类农药的常见成分包括马拉硫磷、甲胺磷、乐果等。
针对这些残留物的检测方法主要有色谱法、荧光法和电化学法等。
其中，色谱法
是最常见的检测方法之一。
该方法可以快速和准确地检测出有机磷类农药在蔬菜中的残留量。
除了现有的检测方法之外，近年来还出现了一种新型的检测技术——基于光纤传感器
的检测技术。
这种技术利用光纤的传导性能和敏感度来检测蔬菜中的农药残留。
与传统的
检测方法相比，基于光纤传感器的检测技术具有响应快、准确、灵敏度高等特点，可以快
速地检测出蔬菜中的农药残留，同时可节省检测成本和时间。
总之，在蔬菜中确定有机磷类及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测对保障农产品质
量和消费者的健康至关重要。
通过创新技术和不断的研究，我们可以期望未来的检测方法
会更加成熟、高效和安全。
蔬菜中有机磷类农药残留的快速检测
近年来，由蔬菜中农药残留超标而引起的中毒事故时有发生，因此对蔬菜中农药残留的监测显得尤为重要。
在蔬菜生产中，所使用的农药主要包括有机磷类和氨基甲酸酯类农药[1]。
传统的有机磷类和氨基甲酸酯类农药的残留分析方法主要有气相色谱法、液相色谱法、薄层色谱法及质谱联用[2]等，这些方法测试灵敏、准确度高，但预处理较为烦琐，测试时间较长，且仪器比较昂贵，对仪器的使用条件和操作人员要求也比较严格，只适用于实验室检测[3]。
如果能在蔬菜上市前快速检测出其农药残留是否超标，将能防止许多农药中毒事件的发生，确保消费者的安全。
为了满足市场需求，九十年代快速检测方法应运而生[4]，其中植物酯酶抑制法以其操作简单、方法灵敏、检测快速、原料来源广、成本低廉、保存期长、适合现场检测等优点被广泛使用[5]。
目前用于快速检测的植物酯酶主要是从大米、小米、玉米、面粉[6]、大豆[7]等粮食作物中提取，在很大程度上造成了粮食的浪费。
本实验通过使用从苜蓿这种非粮食作物中提取的植物酯酶，以2，6—二氯乙酰靛酚为显色剂，通过对蔬菜中常用的氧化乐果、甲基对硫磷、甲拌磷、甲胺磷、久效磷等5种有机磷农药的敏感性研究，确定了蔬菜中有机磷农药残留的快速检测方法。
实验结果表明，该方法农药残留最低检测限较低，可以满足国内和欧盟对以上5种有机磷农药最低残留量的检测要求。
1试剂与仪器1.1仪器UV-2802PCS 型紫外可见分光光度计（上海尤尼柯仪器有限公司），高速冷冻离心机（法国JOUAN ），蔬菜中有机磷类农药残留的快速检测王亚飞，张金艳（黑龙江八一农垦大学文理学院，大庆163319）摘要：通过研究蔬菜中常用的5种有机磷农药对植物酯酶的抑制作用，以2，6—二氯乙酰靛酚为显色剂，确立了蔬菜中有机磷农药残留的快速检测方法。
实验结果表明：该方法能快速检测氧化乐果、甲基对硫磷、甲拌磷、甲胺磷、久效磷等5种有机磷农药在蔬菜中的残留，最低检测限范围为0.002~0.05μg ·mL -1。
蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测
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2
我 国 农药 残 留检 测 方 法 的研 究 现 状
一
农药 残 留分 析 是 门 综 合 性 高 涉 及 面 广 的分析 科 学 食 品 k k 中 农 药残 留水平 般 在 m g ／ g ~ t g ／ g 之 间 农 药 残 留检 测 是 对 复 杂 混 合 物 中痕 量 组 分 进 行 检 测 当 前 我 国对 蔬 菜 瓜 果 等农产 品 中农 药 残 留 的 定 量检 测 技 术 已 达 到 相 当 高 的 水平 目前 采 用 的农 药残 留分析 方法 可 分 为 定 量 及 定 性 分 析法 定 量 分 析 法 主 要 有 薄 层 色 谱 分 析检 测 技 术 气 相 ( 液 相 ) 色 谱 分 析 技 术 毛 细 管 电色 谱 分析技 术 超 临界流 体 色 谱 分 析技术等 波 谱 分 析检 测 方 法 该 类技术在 分 析检 测方 面 较 为精确 但 是 由 于 仪 器 价格 昂 贵 操 作 成 本高 以 及 操作耗 时较 长 结 果 滞 后 若 采 用 其 开 展 快 速 检 测 工 作 不太 切 合 实 际 定 性 分 析 法 主 要 有 化 学 显 色 法 生 物传 感 器 法 及 酶 学 法 生
一 一
l pr o d u c t s ha h l p r o d u c ts a n d t
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v e g e t a b l e s i s c o n s id e r e d t o b e la t e d th e d e v e lo p m e n t o f m e t h
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一
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一
酶抑制法检测蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留
酶抑制法检测蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留以及对该检测方法的评价王志波（如皋市农产品质量检验测试中心 226500）摘要：在人们广泛关注食品质量安全的今天，作为监控农产品质量安全的最直接的有效手段，蔬菜农药残留速测技术得到迅速发展。
蔬菜农药残留速测法主要有酶抑制法和化学试剂速测法两种。
它们都具有快速、简便、灵敏、成本低等特点。
在基层监督部门、蔬菜生产基地及市场得到广泛应用。
本文根据行业标准《NY／T448-2001》，利用酶抑制法和相关农残速测仪及配套试剂盒对我市主要批发市场、农贸市场、超市的蔬菜样品进行了检测。
关键词：质量安全；农药残留；速测；酶抑制Abstract：The increasing concern on the food security has stimulated the development of methods for rapid detection of pesticide residues which is the most direct and most effective means of quality-safety monitoring of agricultural products. The methods of rapid detection of pesticide residues on vegetables, including enzyme inhibition method and chemical method, have been widely used in primary regulation departments、vegetable production bases and markets due to their simple, rapid, sensitive and low costing characters. Vegetable samples collected from wholesale markets、farmer markets、supermarkets were detected by enzyme inhibition method using pesticide residues detector coupled with reagent set according to standard (NY／T448-2001) in this paper.Key words: agricultural products security;Pesticide residues; rapid test;enzyme inhibition1仪器与试剂1.1检测仪器RP－410速测仪，T－200型电子天平，电热恒温培养箱，可调移液枪（10～100微升；1-5毫升），配套玻璃仪器及其它配件。
蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留快速检测方法标准
蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留快速检测方法标准蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留快速检测方法标准1. 范围本标准规定了由酶抑制法测定蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检验方法。
本标准适用于蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速筛选测定。
测试方法酶抑制率法2. 原理在一定条件下，有机磷和氨基甲酸酯类农药对胆碱酯酶正常功能有抑制作用，其抑制率与农药的浓度呈正相关。
正常情况下，酶催化神经传导代谢产物（乙酰胆碱）水解，其水解产物与显色剂反应，产生黄色物质，用分光光度计在410nm处测定吸光度随时间的变化值，计算出抑制率，通过抑制率可以判断出样品中是否有高剂量有机磷或氨基甲酸酯类农药的存在。
3.试剂3.1 pH8.0缓冲溶液：分别取43.5g无水磷酸氢二钾与2.2g磷酸二氢钾，用510mL蒸馏水溶解。
3.2 显色剂：分别取160mg二硫代二硝基苯甲酸（DTNB）和15.6mg 碳酸氢钠，用20mL缓冲溶液溶解，4°C冰箱中保存。
3.3 底物：取25.0mg硫代乙酰胆碱，加3.1mL蒸馏水溶解，摇匀后置4℃冰箱中保存备用。
保存期不超过十天。
3.4 乙酰胆碱酯酶：根据酶的活性情况，用缓冲溶液溶解，3 min 的吸光度变化D A0值应控制在0. 3以上。
摇匀后置4℃冰箱中保存备用，保存期不超十天。
3.5 可选用由以上试剂制备的试剂盒。
乙酰胆碱酯酶的ΔA0值应控制在0.3以上。
4 仪器4.1 分光光度计或相应测定仪。
4.2常量天平。
4.3 恒温水浴或恒温箱5 分析步骤5.1 样品处理：选取有代表性的蔬菜样品，冲洗掉表面泥土，剪成1cm左右见方碎片，取样品1g，放入烧杯或提取瓶中，加入5mL 缓冲溶液，静制十五分钟，之间需振荡几次，待用。
5.2 对照溶液测试：先于试管中加入2.5mL缓冲溶液，依次加入0.lmL酶液、0.1mL显色剂、0.lmL底物摇匀，此时检液开始显色反应，应立即放入仪器比色池中，记录反应3 min的吸光度变化值ΔA0。
蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留快速检测技术
- 61 -Vegetables 2019.8检验检测收稿日期：2019-03-19蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留快速检测技术许爱霞1，2（1.甘肃省干旱生境作物学重点实验室/甘肃农业大学农学院，甘肃 兰州 730070；2.定西市农产品质量安全监督管理站，甘肃 定西 743000）摘要：为了为农产品质量安全检测及监管工作提供理论保障，就近年来农药残留快速检测技术的发展，分析了蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留快速检测技术的原理、方法、结果判定等。
对农药残留检测与农产品质量安全的重要性进行了讨论，并提出建议，如加强农业投入品监管、强化农产品例行监测、加强品牌认证、推进质量安全追溯工作、开展风险预测评估等。
关键词：有机磷；氨基甲酸酯；农药；快速检测；技术Rapid Detection Technology of Organophosphorus andCarbamate Pesticide Residues in VegetablesXU Aixia 1,2(1. Gansu Provincial Key Laboratory of Aridland Crop Science/Agricultural College of Gansu Agricultural Uni-versity, Lanzhou 730070, China; 2. Dingxi Agricultural Product Quality and Safety Supervision and Administra-tion Station, Dingxi 743000, China)Abstract: In order to provide theoretical guarantee for the inspection and supervision of agricultural product quality and safety, the principle, method and result determination of the rapid detection technology of organophosphorus and carbamate pesticide residues in vegetables were analyzed based on the development of the rapid detection technology of pesticide residues in recent years. The importance of pesticide residue detection and quality safety of agricultural products were discussed. Suggestions were put forward, such as strengthening the supervision of agricultural inputs, enhancing routine monitoring of agricultural products, strengthening brand certification, promoting quality and safety traceability, carrying out risk prediction and evaluation and so on.Keywords: organophosphorus; carbamate; pesticide; rapid detection; technology目前，在影响我国农产品质量安全的因素中，较为突出的是有机磷和氨基甲酸酯类农药残留问题[1]。
蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留的快速测定
蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留的快速测定作者：洪明祥来源：《农业开发与装备》 2016年第4期洪明祥（沈阳市农业监测总站，辽宁沈阳 110034）摘要：介绍了蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留快速测定技术，根据有机磷及氨基甲酸酯类农药能抑制乙酰胆碱酯酶活性，从而导致加入底物后颜色发生不同程度的变化，读出吸光度变化值，进而计算出抑制率的方法来判断果蔬中有机磷及氨基甲酸酯类农药的残留情况。
对快速测定技术的优点、缺点以及需要注意的问题作了系统阐述。
关键词：蔬菜；有机磷及氨基甲酸酯类农药；快速测定技术随着人民生活水平的提高、健康意识的增强，蔬菜的质量安全问题已成为社会各界普遍关注的大事。
因其涉及千家万户，关系国计民生，各级政府对蔬菜生产与流通领域中的监管措施也在不断强化。
传统的检测技术如气相色谱仪、液相色谱仪等大型仪器设备虽具备灵敏度高、检测数据准确的优势，但是由于其检测时间长、成本高、对检测人员专业性要求高等不利因素而不能对蔬菜销售中进行有效的监督管理。
因此，用时少、成本低，易操作的快速测定方法在这种历史背景下有了广阔的发展空间。
1 实验原理及方法1.1 实验原理根据有机磷和氨基甲酸酯类农药能抑制昆虫中枢和周围神经系统中乙酰胆碱酶的活性，造成神经传导介质乙酰胆碱的积累，影响正常传导，使昆虫中毒致死，根据这一昆虫毒理学原理，用在对农药残留的检测中。
如果蔬菜的提取液中不含有机磷或氨基甲酸酯类农药残留或残留量较低，酶的活性就不被抑制，反之，如果蔬菜的提取液中含有一定量的有机磷或氨基甲酸酯类农药，酶的活性就被抑制，再用农药残留快速检测仪测定吸光值随时间的变化，计算出抑制率，便可判断出蔬菜中含有机磷或氨基甲酸类酯农药的残留情况。
1.2 实验设备RP—410农药残留快速检测仪、电子天平（精确到0.1g）、台式培养箱。
1.3 实验试剂pH8磷酸缓冲液、丁酰胆碱酯酶、底物（碘化硫代丁酰胆碱）、显色剂（二硫代二硝基苯甲酸），酶、底物及显色剂均用缓冲液溶解。
有机磷类和氨基甲酸酯类农药的快速检测
有机磷类和氨基甲酸酯类农药的快速检测集团文件发布号：（9816-UATWW-MWUB-WUNN-INNUL-DQQTY-有机磷类和氨基甲酸酯类农药的快速检测（农药速测卡使用说明）方法编号：CDC-1011 1 适用范围：本方法适用于蔬菜、水果、相应食物、水及中毒残留物中有机磷类和氨基甲酸酯类农药的快速检测。
本方法摘自国家标准快速检测方法GB/T5009.199-2003。
2 检测原理：胆碱酯酶可催化靛酚乙酸酯（红色）水解为乙酸与靛酚（蓝色），有机磷或氨基甲酸脂类农药对胆碱酯酶有抑制作用，使催化、水解、变色的过程发生改变，由此判断样品中是否含有过量有机磷或氨基甲酸酯类农药的残留。
3 检测试材3.1 固化有胆碱酯酶和靛酚乙酸酯试剂的农药速测卡。
3.2 乙酸乙酯3.3 pH7.5磷酸盐浸提（缓冲）溶液：分别取15.0g磷酸氢二钠[Na2HPO4·12H2O]与1.59g磷酸二氢钾[KH2PO4]，用500mL蒸馏水溶解。
3.4 称量天平3.5 有条件时配备专为农药速测卡而设计的“农药残留速测仪”和超声波提取器。
4 蔬菜、水果中农药残留量的检测、结果判断与注意事项4.1 表面测定法（粗筛法）：擦去蔬菜表面泥土，滴2～3滴浸提液在蔬菜表面，用另一片蔬菜在滴液处轻轻摩擦。
取一片速测卡，将蔬菜上的液滴滴在白色药片上。
放置10min进行预反应，将速测卡对折（红色药片与白色药片叠合）后，用手捏3min时，打开与空白对照实验卡比较，白色药片不变色或略有浅蓝色均为阳性结果。
白色药片变为天蓝色或与空白对照卡相同为阴性结果。
有条件时，将纸片插入“农药残留速测仪”自动恒温、定时检测。
4.2 整体测定法：选取有代表性的蔬菜样品，擦去表面泥土，剪成1cm 左右见方碎片，取5g放入带盖瓶中，加入10mL浸提液（样品与浸提液的比例为1+2），震摇50次（有条件时，可将提取瓶放入超声波提取器中震荡30秒），静置2min以上。
蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测
蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测随着人们对食品安全和健康的重视，关于农产品中农药残留的检测变得愈发重要。
尤其是蔬菜这一日常饮食中不可或缺的食物，其安全性更是受到广泛关注。
而蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测就显得尤为重要。
那么，有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的检测又是如何进行的呢？我们需要了解一下有机磷及氨基甲酸酯类农药。
有机磷农药是一类广泛使用的杀虫剂，其在农业生产中有着广泛的应用。
由于其毒性较大，如果不当使用或者残留量超标，就会对人体健康造成危害。
检测蔬菜中有机磷农药残留量就显得尤为重要。
而氨基甲酸酯类农药则是一类常见的除草剂和杀虫剂，同样需要重点检测其在蔬菜中的残留情况。
目前，对蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的检测方法主要包括化学方法和生物方法两种。
化学方法是指利用化学分析的方法，通过检测农产品中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的含量来判断其安全性。
这种方法主要包括气相色谱法、液相色谱法、质谱法等。
而生物方法是指利用生物学技术进行检测，通过检测样品中农药残留物对生物体的影响来判断其安全性，包括细胞毒性实验、细胞生长抑制实验等。
值得注意的是，传统的化学方法检测效率较低，且需要较长的检测时间，无法满足农产品快速检测的需求。
近年来，一种新型的快速检测技术——光谱检测技术逐渐受到关注。
光谱检测技术是一种利用物质对光的吸收、散射、发射等特性进行检测的方法，其具有快速、准确、非破坏性等优点。
在蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测中，光谱检测技术可以通过测定蔬菜样品中特定波长下的光谱吸收情况来判断其中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留物的含量。
通过光谱检测技术，可以实现对蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速、准确、非破坏性检测。
除了光谱检测技术，纳米材料技术也是一种新型的快速检测技术。
纳米材料技术是一种利用纳米材料的特殊性能进行检测的方法，其具有灵敏度高、响应速度快、操作简便等特点。
蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测
蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测随着人们对食品安全意识的提高，食品安全问题成为社会关注的焦点。
蔬菜中农药残留是影响食品安全的主要因素之一，尤其是有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量高，对人体健康造成潜在危害。
因此，快速检测蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的方法显得尤为重要。
常规检测方法需要样品预处理、分离纯化并经过复杂分析程序，耗时且成本高。
因此，发展新的快速检测方法迫在眉睫。
近年来微波辅助提取-气相色谱/质谱联用技术被广泛用于农产品中农药残留快速检测，其操作简单、灵敏度高、准确性好等优点越来越受到人们的关注。
1.快速检测方法的原理微波辅助提取技术能够使有机磷和氨基甲酸酯类农药能够充分溶解于有机相中，提取过程快速、高效。
同时，气相色谱/质谱联用技术能够将溶解后的有机磷和氨基甲酸酯类农药残留物清晰准确地分离和定量，具有高灵敏度和高准确性的特点。
2.实验步骤（1）样品准备：取新鲜蔬菜样品，将其洗净、切碎。
取适量的样品，加入玻璃离子交换树脂和水，混合后在微波辅助提取器中进行微波提取。
（2）微波辅助提取：将样品置于微波辅助提取器中，设定合适的时间和温度进行提取，这样有机磷和氨基甲酸酯类农药残留物极易被提取出来。
（3）萃取物的净化：通过萃取物的净化，将微波提取的样品溶液中的杂质去除，保证后续分析的准确性。
（4）色谱分析：将经过净化的样品溶液用气相色谱/质谱联用技术进行分析和检测，可以得到有关有机磷和氨基甲酸酯类农药残留物的详细数据。
3.实验结果与意义实验证明，该方法能够检测到蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留物的质量分数，具有较高的灵敏度和准确性。
比较不同样品准备方法得到的残留物结果，微波辅助提取方法的检测结果更加准确。
这种方法除了可以节省检测时间、简化操作步骤等优点，还可以为蔬菜生产和加工提供可靠的技术支持，更好地保障人们的食品安全。
（完）。
蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测
蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测蔬菜是人们日常饮食中不可或缺的食物之一，但由于不规范的农药使用，导致蔬菜中常常存在有机磷及氨基甲酸酯类农药的残留物。
这些农药残留物对人体健康造成潜在的威胁，因此对蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测具有重要意义。
有机磷及氨基甲酸酯类农药常被广泛应用于蔬菜的种植过程中，主要用于杀虫、杀菌和除草。
这些农药残留物不仅会对蔬菜自身造成影响，还会通过人们饮食而进入人体，对人体健康造成潜在的危害。
有机磷农药一般被认为是神经毒剂，会抑制胆碱酯酶的活性，影响人体神经系统的正常功能。
氨基甲酸酯类农药则会对人体的心血管、呼吸和神经系统产生影响。
长期暴露于农药残留物可能会引发慢性中毒，并增加癌症和其他疾病的风险。
为了保障人们食品安全，各国纷纷制定了对农产品中农药残留物的安全标准。
快速检测蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的方法的研究成为了一个热点领域。
目前，研究人员提出了各种各样的检测方法，如色谱法、电化学法、光谱法等，不仅可以快速而准确地检测到蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留物的含量，还具有灵敏度高、操作简便等优点。
色谱法是一种常用的检测方法，主要包括气相色谱法和液相色谱法。
气相色谱法具有分离效果好、检测灵敏度高的特点，但需要耗费较长的样品前处理时间。
液相色谱法则是将样品溶解在溶剂中，并通过液相进行分离和检测，操作简便且快捷。
电化学法是一种非常灵敏的检测方法，可以通过检测电流的变化来间接地确定有机磷及氨基甲酸酯类农药的残留量。
光谱法则可以通过检测样品对特定波长的光的吸收或散射来确定有机磷及氨基甲酸酯类农药的残留量，具有快速和高灵敏度的特点。
蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测是确保人们食品安全的重要一环。
各种各样的检测方法都在不断地研究和发展，以提供更准确、快速和有效的检测手段。
只有通过科学的方法确保农产品中农药残留物的安全水平，才能让人们放心地享用美味的蔬菜。
蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测
蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测
蔬菜中的有机磷和氨基甲酸酯类农药残留是造成食品安全问题的一个重要因素。
这些农药常用于农田中，以控制病虫害，帮助提高农作物产量。
过量或长期使用这些农药会导致其在农产品中残留过量，对人体健康造成潜在威胁。
快速检测蔬菜中的有机磷和氨基甲酸酯类农药残留成为了食品安全监管的重要任务之一。
为能快速准确地检测出这些农药的残留量，科学家们进行了大量的研究，并开发了许多不同的检测方法。
一种常用的检测方法是高效液相色谱法（HPLC）。
这种方法基于样品中目标物与色谱柱中填充物之间的相互作用，通过控制样品在柱中的流动速度，分离并测量目标分析物。
利用此方法，可以快速、准确地检测出蔬菜中的有机磷和氨基甲酸酯类农药残留。
还有一些新兴的技术用于快速检测蔬菜中的有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量。
基于免疫分析的方法，如酶联免疫吸附测定法（ELISA）和免疫层析法，利用特异性抗体与目标农药残留物结合，从而实现快速、灵敏的检测。
还有基于生物传感器的方法，如电化学生物传感和光学生物传感，利用生物分子与目标化合物之间的相互作用来检测、定量目标农药残留。
在选择适合的检测方法时，需要考虑多个因素，包括检测的灵敏度、准确性、简便性和快速性等。
目前，各种方法已经在实践中得到应用，并逐渐得到改进和完善。
蔬菜中的有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测是保障食品安全的重要环节。
通过选择适当的检测方法，并加强监管，能够有效地控制这些有害物质在蔬菜中的残留，保障公众食品安全。
蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量快速检测—酶抑制率法(分光光度法)
结果计算
抑制率(%)=[(ΔA0-ΔAt)/ ΔA0]×100 式中： ΔA0对照溶液反应3min吸光度的变化值； ΔAt样品溶液反应3min吸光度的变化值；
结果判定
结果以酶被抑制的程度（抑制率）表示。 当蔬菜样品提取液对酶的抑制率≥50%时,表 示蔬菜中有高剂量有机磷或氨基甲酸酯类农 药存在，样品为阳性结果。 阳性结果的样品需要重复检验2次以上。
It
原理
在一定条件下，有机磷和氨基甲酸酯类农药对胆碱 酯酶正常功能有抑制作用，其抑制率与农药的浓度 呈正比。正常情况下，酶催化神经传导代谢产物 （乙酰胆碱）水解，其水解产物与显色剂反应，产 生黄色物质，用分光光度计在412nm处测定吸光度 随时间的变化值，计算出抑制率，通过抑制率可以 判断出样品中是否有高剂量有机磷或氨基甲酸酯类 农药的存在。
原理
试剂 pH8.0缓冲溶液 分别取 11.9g无水磷酸氢二钾与３. ２g磷酸二氢钾，用1000mL 蒸馏水溶解。
显色剂 分别取160mg二 硫代二硝基苯甲酸（DTNB） 和15.6mg碳酸氢钠，用20mL 缓冲溶液溶解，4℃冰箱中 保存。
试剂 底物：取25.0mg硫代乙酰 胆碱，加3.0mL蒸馏水溶解， 摇匀后置4℃冰箱中保存备 用。
乙酰胆碱酯酶 根据酶的 活性情况，用缓冲溶液溶 解，3min的吸光度变化ΔA0 值应控制在0.3以上。摇匀 后置4℃冰箱中保存备用。
分析步骤
样品处理：选取有代表性的蔬菜样品，冲洗掉表面泥土，剪 成1cm左右见方碎片，取样品1g，放入烧杯或提取瓶中，加 入5mL缓冲溶液，振荡1~2min，倒出提取液,静置3~5min,待 用。 对照溶液测试： 先于试管中加入2.5mL缓冲溶液，再加入 0.lmL酶液、0.1mL显色剂，摇匀后于37℃放置15min以上 （每批样品的控制时间应一致）。加入0.lmL底物摇匀，此 时检液开始显色反应，应立即放入仪器比色池中，记录反应 3 min的吸光度变化值Δ A0 样品溶液测试：先于试管中加入2.5mL样品提取液，其它操 作与对照溶液测试相同，记录反应3min的吸光度变化值Δ At
蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测
技术应用J1392019年6月·下蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测袁柱良1 李海英2（1.2东莞市常平镇农业技术服务中心，广东 东莞 523560）摘 要 蔬菜中农药残留作为食品安全管理的重要内容，关于检验蔬菜中的农药残留量主要是检测有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量。
气相色谱法是检测这两类农药的主要标准方法，尽管所具有的灵敏度较高，但是需要耗费较长时间，不适合在临床检验中进行大力推广。
为此，找到快速检测方法刻不容缓。
关键词 蔬菜；有机磷；氨基甲酸酯类农药；残留量；快速检测通过检测农产品中的农药残留可充分确保农产品的质量安全，为此农产品检测的重点在于科学的检测农药残留量。
当下，我国有一百多种有机磷与氨基甲酸酯类农药，质量参差不齐，品种复杂，在检测时很难有效的应用色相谱方法[1]。
若使用CL-BIII残留农药测定仪，对于假阳性问题很难得到有效避免。
现就两种快速检测方法进行详细介绍，详情如下。
1 酶抑制法1.1 原理有机磷与氨基甲酸酯类农药在一定情况下能够对胆碱酯酶的正常功能进行有效抑制，且抑制率的高低直接取决于农药浓度。
通过对待测样品的检测可掌握对乙酰胆碱酶活性抑制情况的了解，根据紫外可见分光光度计原理和412nm 波长的吸光度随时间的变化值可将抑制率计算出来，同时能够初筛/定性分析待测样品。
阴性：抑制率不足50%、阳性：超过50%[2]。
1.2 调试仪器采用CL-BIII 八通道残留农药测定仪。
将电源接通后，开机进行半小时预热；设置参数，选择通道，对照试样与样品试样可分别在第1、2-8通道放置；设置当日测试日期；调0使吸光度为0.000.1.3 试剂配制显色剂：取二硫代二硝基苯甲酸160mg、碳酸氢钠15.6mg，20ml 提取溶解，保存在4℃条件下。
提取溶液：取无水磷酸氢二钠11.9g、磷酸二氢钾3.2g，溶解时采用1000ml 蒸馏水，所制成的提取液pH 为8.0.乙酰胆碱酯酶：使用提取液进行溶解，控制3分钟吸光度变化值超过0.3，摇匀后保存在4℃条件下备用，保存期小于4天。
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蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留快速检测方法标准
1. 范围
本标准规定了由酶抑制法测定蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检验方法。
本标准适用于蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速筛选测定。
测试方法酶抑制率法
2. 原理
在一定条件下，有机磷和氨基甲酸酯类农药对胆碱酯酶正常功能有抑制作用，其抑制率与农药的浓度呈正相关。
正常情况下，酶催化神经传导代谢产物（乙酰胆碱）水解，其水解产物与显色剂反应，产生黄色物质，用分光光度计在410nm处测定吸光度随时间的变化值，计算出抑制率，通过抑制率可以判断出样品中是否有高剂量有机磷或氨基甲酸酯类农药的存在。
3.试剂
3.1 pH8.0缓冲溶液：分别取43.5g无水磷酸氢二钾与2.2g磷酸二氢钾，用510mL蒸馏水溶解。
3.2 显色剂：分别取160mg二硫代二硝基苯甲酸（DTNB）和15.6mg 碳酸氢钠，用20mL缓冲溶液溶解，4°C冰箱中保存。
3.3 底物：取25.0mg硫代乙酰胆碱，加3.1mL蒸馏水溶解，摇匀后置4℃冰箱中保存备用。
保存期不超过十天。
3.4 乙酰胆碱酯酶：根据酶的活性情况，用缓冲溶液溶解，3 min 的吸光度变化D A0值应控制在0. 3以上。
摇匀后置4℃冰箱中保存备用，保存期不超十天。
3.5 可选用由以上试剂制备的试剂盒。
乙酰胆碱酯酶的ΔA0值应控制在0.3以上。
4 仪器
4.1 分光光度计或相应测定仪。
4.2常量天平。
4.3 恒温水浴或恒温箱
5 分析步骤
5.1 样品处理：选取有代表性的蔬菜样品，冲洗掉表面泥土，剪成1cm左右见方碎片，取样品1g，放入烧杯或提取瓶中，加入5mL 缓冲溶液，静制十五分钟，之间需振荡几次，待用。
5.2 对照溶液测试：先于试管中加入2.5mL缓冲溶液，依次加入0.lmL酶液、0.1mL显色剂、0.lmL底物摇匀，此时检液开始显色反应，应立即放入仪器比色池中，记录反应3 min的吸光度变化值ΔA0。
5.3 样品溶液测试：先于试管中加入2.5mL样品提取液，其它操作与对照溶液测试相同，但在加底物之前必须放置15分钟，记录反应3min的吸光度变化值ΔAt。
6 结果的表述计算
6.1 结果计算
检测结果按公式计算：抑制率(%)=[ (ΔA0-ΔA t)/ ΔA0]×100式中：ΔA0－对照溶液反应3min吸光度的变化值；
ΔA t－样品溶液反应3min吸光度的变化值；
6.2 结果判定
结果以酶被抑制的程度（抑制率）表示。
当蔬菜样品提取液对酶的抑制率≥50%时，表示蔬菜中有高剂量有机磷或氨基甲酸酯类农药存在，样品为阳性结果。
阳性结果的样品需要重复检验2次以上。
对阳性结果的样品，可用其它方法进一步确定具体农药品种和含量。
7 附则
7.1酶抑制率法技术指标
7.1.1 灵敏度指标：酶抑制率法对部分农药的检出限见表2酶抑制率法对部分农药的检出限
表2 酶抑制率法对部分农药的检出限
7.1.2 符合率：在检出的抑制率≥50％的30份以上样品中，经气相色谱法验证，阳性结果的符合率应该在80％以上。
8说明
8.1葱、蒜、萝卜、芹菜、香菜、茭白、蘑菇及番茄汁液中，含有对酶有影响的次生物质，容易产生假阳性。
处理这类样品时，可采取整棵蔬菜萃取或采用表面测定法。
对一些含叶绿素较高的蔬菜，也可采取整株蔬菜萃取的方法，减少色素的干扰。
8.2 当温度条件低于37度，酶反应的速度随之放慢，加入酶液和显色剂后放置反应的时间应相应延长，延长时间的确定，应以胆碱酯酶空白对照测试3min吸光度变化差值在0.3以上，即可往下操作。
注意样品放置时间应与空白对照溶液放置时间一致才有可比性。
胆碱酯酶空白对照测试3min吸光度变化差值在0.3以下的原因：一是酶的活性不够，二是温度太低。