胞浆异柠檬酸脱氢酶(ICDHc)活性检测试剂盒说明书 微量法

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肉桂醇脱氢酶(CAD)活性检测试剂盒说明书__微量法UPLC-MS-4246

肉桂醇脱氢酶(CAD)活性检测试剂盒说明书__微量法UPLC-MS-4246

微量法肉桂醇脱氢酶(CAD)活性检测试剂盒说明书货号:UPLC-MS-4246规格:100T/96S产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系工作人员。

试剂名称规格保存条件提取液液体120mL×1瓶4℃保存试剂一粉剂×1瓶-20℃保存试剂二液体×1瓶4℃保存试剂三液体25mL×1瓶4℃保存溶液的配制:1、提取液:内含不溶物,使用前摇匀。

2、试剂一:临用前加入5mL试剂三溶解。

可溶解后分装-20℃保存,避免反复冻融。

3、试剂二:液体置于试剂瓶内玻璃管中。

临用前加入15mL乙醇充分混匀,配好后4℃保存。

4、工作液的配制:将试剂一、试剂二、试剂三按1:1:2(V:V:V)的比例配制工作液,工作液现用现配。

产品说明:CAD是木质素生物合成途径中的关键酶之一,催化香豆醛、芥子醛以及松柏醛等生成与之相应的肉桂醇。

该酶多存在于高等植物、酵母、菌类中,研究该酶可以探讨多种生物细胞发育过程中木质素沉积的代谢机理,为减少水果石细胞含量提高其品质提供依据。

CAD催化肉桂醛和NADPH生成肉桂醇和NADP+,在340nm下测定NADPH消耗速率,即可反映CAD活性。

注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。

如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品:紫外分光光度计/酶标仪、低温离心机、水浴锅、微量石英比色皿/96孔UV板、可调式移液枪、研钵/匀浆器、冰、乙醇和蒸馏水。

操作步骤:一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)1、组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液)进行冰浴匀浆,然后10000g,4℃,离心10min,取上清,置冰上待测。

2、细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):提取液体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1mL提取液),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);10000g4℃离心10min,取上清,置冰上待测。

琥珀酸脱氢酶(SDH)活性检测试剂盒说明书 微量法

琥珀酸脱氢酶(SDH)活性检测试剂盒说明书 微量法

琥珀酸脱氢酶(SDH)活性检测试剂盒说明书微量法注意:正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定。

货号:BC0955规格:100T/96S产品内容:试剂一:液体110mL×1瓶,-20℃保存;试剂二:液体1mL×1瓶,-20℃保存;试剂三:液体18mL×1瓶,4℃保存;试剂四:粉剂×1支,4℃保存;临用前加入到试剂三中溶解待用;试剂五:粉剂×1瓶,4℃保存;临用前加入4mL双蒸水,用不完的试剂仍4℃保存;试剂六:粉剂×1瓶,-20℃保存;临用前加入3.333mL双蒸水,用不完的试剂4℃保存。

产品说明:SDH(EC 1.3.5.1)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中。

SDH是线粒体的一种标志酶,位于线粒体内膜上的一种膜结合酶,是连接呼吸电子传递和氧化磷酸化的枢纽之一。

此外,为多种原核细胞产能的呼吸链提供电子。

SDH催化琥珀酸脱氢生成延胡索酸,脱下的氢通过吩嗪二甲酯硫酸(PMS)传递还原2,6-二氯酚靛酚(DCPIP),并且在600nm处具有特征吸收峰,通过600nm吸光度的变化,测定2.6-DPIP的还原速度,代表SDH酶活性。

需自备的仪器和用品:可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量比色皿/96孔板、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。

操作步骤:一、SDH的提取准确称取0.1g组织或收集500万细胞,加入1mL试剂一和10uL试剂二,用冰浴匀浆器或研钵匀浆充分研磨,4℃11000g离心10min,取上清,置冰上待测。

二、测定步骤和加样表1、分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至600nm,蒸馏水调零。

2、样本测定试剂名称(μL)测定管空白管试剂三168168试剂五121237℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)保温10min左右样本10蒸馏水10试剂六1010将试剂三和试剂五依次加入到1.5mLEP管中,37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)保温10min后加入到微量比色皿或96孔板再按表格依次加入各试剂,在600nm波长下记录20秒时的初始吸光度A1和1分20秒时的吸光度A2,计算ΔA=A1-A2,得到ΔA测定,ΔA空白。

果胶酶活性检测试剂盒说明书 微量法

果胶酶活性检测试剂盒说明书 微量法

果胶酶活性检测试剂盒说明书微量法注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

货号:BC2635规格:100T/48S产品内容:提取液:液体100mL×1瓶,4℃保存。

试剂一:液体25mL×1瓶,4℃保存。

若溶液中有不溶解物质,可以50℃水浴溶解。

试剂二:液体20mL×1瓶,4℃避光保存。

标准品:粉剂×1支,10mg半乳糖醛酸。

临用前加入0.943mL蒸馏水,配成50μmol/mL的标准液产品说明:果胶酶(pectinase)是分解果胶的酶类,包括原果胶酶,果胶酯酶,多聚半乳糖醛酸酶和果胶裂解酶四大类,广泛存在于高等植物果实和微生物中,是水果加工中最重要的酶。

果胶酶水解果胶生成半乳糖醛酸,半乳糖醛酸与DNS试剂反应生成在540nm有特征吸收峰的棕红色物质,测定540nm处吸光值变化可计算得果胶酶活性。

试验中所需的仪器和试剂:可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、微量玻璃比色皿/96孔板、可调式移液枪、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。

操作步骤:一、粗酶液提取:组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液)进行冰浴匀浆,然后10000g,4℃,离心10min,取上清置于冰上待测。

菌类:按照细胞数量(104个):提取液体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细胞加入1mL 提取液),冰浴超声波破碎细胞(功率300w,超声3秒,间隔7秒,总时间3min);然后10000g,4℃,离心10min,取上清置于冰上待测。

液体:直接检测。

二、测定步骤:1、分光光度计/酶标仪预热30min以上,调节波长至540nm,蒸馏水调零。

2、将50μmol/mL标准液用蒸馏水稀释为10、8、6、4、2、1μmol/mL的标准溶液备用。

3、取40μL样本沸水浴10min备用。

4、操作表:(在1.5mL离心管中)对照管测定管标准管空白管试剂一(µL)20020020020050℃水浴温育5min标准溶液(µL)--40-样本(µL)-40--蒸馏水(µL)---40煮沸样本(µL)40---混匀,50℃水浴反应30min,马上沸水浴5min,冷却后8000g,常温离心10min,取上清。

精浆柠檬酸定量检测试剂盒(酶法)产品技术要求华康

精浆柠檬酸定量检测试剂盒(酶法)产品技术要求华康

医疗器械产品技术要求编号:精浆柠檬酸定量检测试剂盒(酶法)2.性能指标2.1外观性状a)试剂盒标签应印制清晰、无错误;包装应清洁干净、无泄漏液体;组份组装应正确无误。

b)A 液应为棕色澄清透明,无絮状物、无肉眼可见颗粒的液体,为悬浊液。

c)B 液(冻干粉)复溶后应为澄清透明,无絮状物、无肉眼可见颗粒的液体。

d)缓冲液应为应为澄清透明,无絮状物、无肉眼可见颗粒的液体。

e)冻干粉溶解液应为澄清透明,无絮状物、无肉眼可见颗粒的液体。

f)柠檬酸校准液应为澄清透明,无絮状物、无肉眼可见颗粒的液体。

g)标本稀释液应为澄清透明,无絮状物、无肉眼可见颗粒的液体。

2.2装量试剂盒液体组份装量不小于组份标签标示装量。

2.3试剂酸碱度试剂盒组份缓冲液pH值范围6.5±0.1。

2.4精密度a)试剂盒重复性CV%≤10%。

b)试剂盒批间相对偏差R≤15%。

2.5准确度参考物质测试值相对偏差R不超过±15%。

2.6特异性干扰试验干扰率不超过±10%。

2.7线性范围a)在线性范围0~80umol/mL内,回归系数r≥0.990。

b)线性偏差X1~X3不超过±10%,X4、X5不超过±20%。

2.8最低检出限不高于0.1umol/mL。

2.9空白吸光度不高于0.050。

2.10分析灵敏度介于0.050 OD~0.150 OD/(10umol/mL)单位浓度。

2.11批内瓶间差试剂盒批内瓶间差的变异系数CV%≤10%。

线粒体复合体Ⅲ活性检测试剂盒使用说明

线粒体复合体Ⅲ活性检测试剂盒使用说明

线粒体复合体Ⅲ活性检测试剂盒使用说明微量法正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定货号:BC3245规格:100管/96样产品内容:试剂一:液体100mL×1瓶,-20℃保存;试剂二:液体20mL×1瓶,-20℃保存;试剂三:液体1.5mL×1支,-20℃保存;试剂四:液体20mL×1瓶,4℃保存;试剂五:粉剂×1支,-20℃保存;试剂六:液体2.5mL×1瓶,-20℃保存;产品简介:线粒体复合体Ⅲ(EC1.10.2.2)又称CoQ-细胞色素C还原酶,广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞的线粒体中,是线粒体呼吸电子传递链主路和支路的共有成分,负责把还原型CoQ的氢传递给细胞色素C,生成还原型细胞色素C。

与氧化型细胞色素C不同,还原型细胞色素C在550nm有特征光吸收,因此550nm光吸收增加速率能够反映线粒体复合体Ⅲ酶活性。

试验中所需的仪器和试剂:可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

操作步骤:一、样本的前处理:组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离:(1)准确称取0.1g组织或收集500万细胞,加入1mL试剂一和10uL试剂三,用冰浴匀浆器或研钵匀浆。

(2)将匀浆600g,4℃离心5min。

(3)弃沉淀,将上清液转移至另一离心管中,11000g4℃离心10min。

(4)上清液即为除去线粒体的胞浆蛋白,可用于测定从线粒体泄露的复合体Ⅲ(此步可选做)。

(5)步骤(4)中的沉淀即为线粒体,加入200uL试剂二和2uL试剂三,超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3秒,间歇10秒,重复30次),用于复合体Ⅲ酶活性测定。

二、测定步骤:1.分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至550nm,蒸馏水调零。

2.样本测定(1)工作液的配制:临用前把试剂五转移到试剂四中混合溶解,置于37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)孵育5min;用不完的试剂4℃可保存一周;(2)在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL样本、25μL试剂六和200μL工作液,立即混匀,记录550nm处初始吸光值A1和2min后的吸光值A2,计算ΔA=A2-A1。

血清异枸橼酸脱氢酶(ICD)

血清异枸橼酸脱氢酶(ICD)
血清异枸橼酸脱氢酶(ICD)
介绍Байду номын сангаас
01 正常值
03 注意事项 05 相关症状
目录
02 临床意义 04 相关疾病
血清异柠檬酸脱氢酶的测定,临床上对诊断肝病有一定意义。尤其是恶性肿瘤病人血清异柠檬酸脱氢酶的升 高,往往是肝脏转移的信号。
正常值
(1)比色法:4-11U/L。 (2)酶速率法(37℃):1-7U/L。 (3)紫外法: 1.5-7.0U/L。 (注:具体参考值 请根据各实验室而定。)
相关疾病
病毒性肝炎,肝硬化
相关症状
黄疸,腹痛,腹水,恶心与呕吐,消瘦,水肿
感谢观看
临床意义
升高:急性肝炎、慢性肝炎、肝硬化、肝癌、肝转移癌、胆石症、胆囊炎、胆道阻塞、胰腺炎、右心功能不 全、肺梗死、新生儿黄疸、溶血性疾病等。
注意事项
一、抽血前的注意事项 (1)抽血前一天不吃过于油腻、高蛋白食物,避免大量饮酒。血液中的酒精成分会 直接影响检验结果。 (2)体检前一天的晚八时以后,应开始禁食12小时,以免影响检测结果。 (3)抽血时应放 松心情,避免因恐惧造成血管的收缩,增加采血的困难。 二、抽血后应注意 (1)抽血后,需在针孔处进行局 部按压3-5分钟,进行止血。注意:不要揉,以免造成皮下血肿。 (2)按压时间应充分。各人的凝血时间有差异, 有的人需要稍长的时间方可凝血。所以当皮肤表层看似未出血就马上停止压迫,可能会因未完全止血,而使血液 渗至皮下造成青淤。因此按压时间长些,才能完全止血。如有出血倾向,更应延长按压时间。 (3)抽血后出现 晕针症状如:头晕、眼花、乏力等应立即平卧、饮少量糖水,待症状缓解后再进行体检。 (4)若局部出现淤血, 24小时后用温热毛巾湿敷,可促进吸收。

索莱宝(Solarbio)线粒体异柠檬酸脱氢酶(ICDHm)活性检测试剂盒说明书

索莱宝(Solarbio)线粒体异柠檬酸脱氢酶(ICDHm)活性检测试剂盒说明书

线粒体异柠檬酸脱氢酶(ICDHm )活性检测试剂盒说明书微量法货号: BC2165规格: 100T/48S 产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系索莱宝工作人员。

试剂名称规格保存条件提取液一液体60 mL×1瓶4℃保存提取液二液体600 μL×2支-20℃保存提取液三液体40 mL×1瓶4℃保存试剂一粉剂×1瓶4℃保存试剂二粉剂×1瓶常温保存试剂三液体10 mL×1瓶4℃保存试剂四粉剂×2支-20℃保存试剂五液体5 mL×1瓶常温保存试剂六液体15 mL×1瓶常温保存标准品粉剂×1支4℃保存溶液的配制:1、提取液二:易挥发试剂,用完后盖紧盖儿后及时放回-20℃保存;2、试剂一:临用前加入5 mL 试剂三,充分溶解待用;3、试剂二:临用前加入5 mL 试剂三,充分溶解待用;4、试剂四:临用前加入0.375 mL 双蒸水,充分溶解待用;5、标准品:10 mg α-酮戊二酸。

临用前加入684 μL 蒸馏水,配成100 μmol/m L 标准液;6、工作液的配制:临用前根据用量将试剂一、试剂二按1:1比例混合,现配现用。

产品说明:线粒体异柠檬酸脱氢酶(isocitrate dehydrogenase ,ICDHm ),广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞的线粒体中,与线粒体基因表达及线粒体其他的功能有关。

异柠檬酸脱氢酶在生物体内有两种存在形式,以NAD 为辅酶的NAD-依赖型异柠檬酸脱氢酶,和以NADP 为辅酶的NADP-依赖型异柠檬酸脱氢酶。

异柠檬酸脱氢酶的主要功能,是在体内三羧酸循环中,催化异柠檬酸生成α-酮戊二酸,将NAD 还原成NADH ,通过测定α-酮戊二酸的生成量,可以计算出线粒体异柠檬酸脱氢酶活力高低。

注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。

胞浆异柠檬酸脱氢酶(ICDHc)试剂盒说明书

胞浆异柠檬酸脱氢酶(ICDHc)试剂盒说明书

货号: QS1103 规格:50管/48样胞浆异柠檬酸脱氢酶(ICDHc)试剂盒说明书紫外分光光度法正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定测定意义:ICDHc(EC 1.1.1.42)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,催化异柠檬酸脱氢脱羧生成α-酮戊二酸,同时还原NADP+生成NADPH。

ICDHc是细胞质中除了磷酸戊糖途径外又一种NADPH重要来源,在逆境中该酶活性通常会发生显著变化。

测定原理:利用ICDHc催化NADP+还原成NADPH反应,在340 nm下测定NADPH浓度的增加。

自备实验用品及仪器:紫外分光光度计、恒温水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 mL石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制:提取液:60mL×1瓶,4℃保存;试剂一:液体50 mL×1瓶,4℃保存;试剂二:粉剂×1支,4℃保存;试剂三:粉剂×1支,4℃保存;试剂四:粉剂×1支,-20℃保存;样本的前处理:1、细菌、细胞或组织样品的制备:细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):提取液体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1mL提取液),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。

组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液),进行冰浴匀浆。

8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。

2、血清(浆)样品:直接检测。

测定步骤:1、分光光度计预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。

2、将试剂二转移至试剂一中充分溶解,置于37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)水浴中预热10min左右;用不完的试剂4℃保存。

NADP-苹果酸脱氢酶(NADP-MDH)活性检测试剂盒说明书微量法

NADP-苹果酸脱氢酶(NADP-MDH)活性检测试剂盒说明书微量法

NADP-苹果酸脱氢酶(NADP-MDH)活性检测试剂盒说明书微量法NADP-苹果酸脱氢酶(NADP-MDH)活性检测试剂盒说明书微量法注意:正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定。

货号:BC1055规格:100T/96S产品内容:提取液:液体100mL×1瓶,在4℃保存;试剂一:液体20mL×1瓶,在4℃保存;试剂二:粉剂×1支,-20℃保存;临用前加入500μL双蒸水,用不完的试剂仍-20℃保存;试剂三:粉剂×1支,-20℃保存;临用前加入600μL双蒸水,用不完的试剂仍-20℃保存。

产品说明:MDH(EC1.1.1.37)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,线粒体中MDH是TCA循环的关键酶之一,催化苹果酸形成草酰乙酸;相反,胞浆中MDH催化草酰乙酸形成苹果酸。

草酰乙酸是重要的中间产物,连接多条重要的代谢途径。

因此,MDH在细胞多种生理活动中扮演着重要的角色,包括线粒体的能量代谢、苹果酸-天冬氨酸穿梭系统、活性氧代谢和抗病性等。

根据不同的辅酶特异性,MDH 分为NAD-依赖的MDH和NADP-依赖的MDH,NADP-MDH主要存在于真核细胞中。

NADP-MDH催化NADPH还原草酰乙酸生成苹果酸,导致340nm处光吸收下降。

试验中所需的仪器和试剂:紫外分光光度计/酶标仪、低温离心机、水浴锅、可调节移液器、微量石英比色皿/96孔板(UV板)和蒸馏水操作步骤:一、粗酶液提取:细菌或培养细胞:收集细菌或细胞到离心管内,弃上清,按照每200万细菌或细胞加入400μL提取液,超声波破碎细菌或细胞(功率20%,超声3s,间隔10s,重复30次),8000g4℃离心10min,取上清,置冰上待测。

组织:称取约0.1g组织,加入1mL提取液进行冰浴匀浆;8000g4℃离心10min,取上清,置冰上待测。

血清(浆)样品:直接检测。

二、测定步骤:1、酶标仪/紫外分光光度计调节波长至340nm,蒸馏水调零。

NADP-苹果酸脱氢酶(NADP-MDH)试剂盒说明书

NADP-苹果酸脱氢酶(NADP-MDH)试剂盒说明书

NADP—苹果酸脱氢酶(NADP—MDH)试剂盒说明书NADP苹果酸脱氢酶(NADPMDH)试剂盒说明书微量法100管/96样注意:正式测定前务必取23个预期差异较大的样本做推测定测定意义:MDH(EC1.1.1.37)广泛存在于动物、植物、微生物和培育细胞中,线粒体中MDH是TCA循环的关键酶之一,催化苹果酸形成草酰乙酸;相反,胞浆中MDH催化草酰乙酸形成苹果酸。

草酰乙酸是紧要的中心产物,连接多条紧要的代谢途径。

因此,MDH在细胞多种生理活动中扮演侧紧要的角色,包括线粒体的能量代谢、苹果酸天冬氨酸穿梭系统、活性氧代谢和抗病性等。

依据不同的辅酶特异性,MDH分为NAD倚靠的MDH和NADP倚靠的MDH,NADPMDH重要存在于真核细胞中。

测定原理:NADPMDH催化NADPH还原草酰乙酸生成苹果酸,导致340nm处光汲取下降。

需自备的仪器和用品:紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板和蒸馏水。

试剂的构成和配制:试剂一、提取液100mL×1瓶,在4℃保存;试剂二、液体20mL×1瓶,在4℃保存;试剂三、粉剂×1瓶,20℃保存;样本测定的准备:1、细菌、细胞或组织样品的制备:细菌或培育细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;依照细菌或细胞数量(104个):试剂一体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1mL试剂一),超声波碎裂细菌或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g4℃离心10min,取上清,置冰上待测。

组织:依照组织质量(g):试剂一体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL试剂一),进行冰浴匀浆。

8000g4℃离心10min,取上清,置冰上待测。

2、血清(浆)样品:直接检测。

测定步骤:1、分光光度计或酶标仪预热30min以上,调整波长至340nm,蒸馏水调零。

乙醇脱氢酶(ADH)活性检测试剂盒说明书

乙醇脱氢酶(ADH)活性检测试剂盒说明书

乙醇脱氢酶(ADH )活性检测试剂盒说明书微量法货号:BC1085规格:100T/96S 产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系索莱宝工作人员。

试剂名称规格保存条件提取液液体100 mL×1瓶4℃保存试剂一液体20 mL×1瓶4℃保存试剂二粉剂×1瓶-20℃保存试剂三液体2 mL×1瓶4℃保存溶液的配制:1、提取液:内含不溶物,使用前摇匀;2、试剂一:临用前把试剂二转移到试剂一中,分装保存于-20℃。

产品说明:ADH 是生物体内短链醇代谢的关键酶,催化乙醇与乙醛可逆转换,在很多生理过程中起着重要作用。

哺乳动物ADH 主要在肝脏生成,肝脏损伤导致ADH 释放到血清中。

血清ADH 活性高低反映了肝功能是否异常。

ADH 催化NADH 还原乙醛生成乙醇和NAD +,NADH 在340nm 处有吸收峰,而NAD +没有;测定340nm 吸光度下降速率,来计算ADH 活性。

注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。

如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品:冰、低温离心机、紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板(UV 板)、可调式移液器、研钵/匀浆器、蒸馏水。

操作步骤:一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)1、 组织:按照组织质量(g ):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g 组织,加入1mL 提取液)进行冰浴匀浆。

16000g ,4℃离心20min ,取上清置冰上待测。

2、 细菌、细胞:按照细胞数量(104个):提取液体积(mL )为500~1000:1的比例(建议500万细胞加入1mL 提取液),冰浴超声波破碎细胞(功率300w ,超声3秒,间隔7秒,总时间3min );16000g ,4℃离心20min ,取上清液置冰上待测。

3、血清等液体:直接测定。

异柠檬酸裂解酶(ICL)活性检测试剂盒说明书__微量法UPLC-MS-5074

异柠檬酸裂解酶(ICL)活性检测试剂盒说明书__微量法UPLC-MS-5074

微量法异柠檬酸裂解酶(ICL)活性检测试剂盒说明书注意:本产品试剂有所变动,请注意并严格按照该说明书操作。

货号:UPLC-MS-5074规格:100T/96S产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系工作人员。

试剂名称规格保存条件提取液液体110mL×1瓶4℃保存试剂一液体5mL×1瓶4℃保存试剂二液体4mL×1瓶4℃保存试剂三粉剂×2瓶-20℃保存试剂四粉剂×2瓶-20℃保存试剂五液体40μL×1支4℃保存试剂六液体5mL×1瓶4℃保存试剂七粉剂×1支4℃保存溶液的配制:1、提取液:临用前将试剂七加入到提取液中,勿放于-20℃;2、试剂三:临用前每瓶加入2.5mL蒸馏水,充分混匀待用;用不完的试剂-20℃分装保存2周,避免反复冻融;3、试剂四:临用前每瓶加入5mL蒸馏水,充分混匀待用;用不完的试剂-20℃分装保存2周,避免反复冻融;4、试剂五:使用前需先离心。

根据用量按照试剂五:蒸馏水为1:8的体积比例充分混匀,现用现配;5、工作液配制:按试剂一:试剂二:试剂三:试剂四:试剂五=29:35:42:42:3的比例将各试剂混合后备用(共151μL,1T的量),根据样本数量现用现配。

产品说明:ICL(EC4.1.3.1)主要存在于植物和微生物中,油料作物种子在萌发过程中,通过乙醛酸循环及其他过程将脂肪转变成碳水化合物。

ICL是乙醛酸循环的关键酶之一。

ICL催化异柠檬酸降解为乙醛酸和琥珀酸,乙醛酸和NADH在LDH的作用下生成乙醇和NAD,NADH在340nm 下有特征吸收峰,监测340nm吸光度的减小速率可间接反应ICL活性。

注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。

如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品:紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、移液器、微量石英比色皿/96孔UV板、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。

植酸酶活性检测试剂盒说明书 微量法

植酸酶活性检测试剂盒说明书 微量法

植酸酶活性检测试剂盒说明书微量法注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

货号:BC3145规格:100T/48S产品内容:提取液:液体100mL×1瓶,4℃保存。

缓冲液:液体10mL×1瓶,4℃保存。

试剂一:粉剂×2支,4℃保存,临用前加缓冲液4mL配制,现用现配。

试剂二:液体10mL×1瓶,4℃保存。

试剂三:液体10mL×1瓶,4℃保存。

显色剂:粉剂×6瓶,4℃保存,临用前根据用量每瓶加0.4mL双蒸水溶解,再加1.6mL试剂三混匀。

样本处理产品说明:植酸酶(phytase)是催化植酸及其盐类水解为肌醇与磷酸(盐)的一类酶的总称,属磷酸单酯水解酶,它能将食品和饲料中植酸及其盐转化为可供有机体利用的有效磷,降低粪便中的磷含量,减轻对环境的污染,改善营养成分的吸收和利用,因此具有极其广泛的研究和应用价值。

测定原理植酸酶在一定温度和pH值条件下,水解底物植酸钠生成无机磷与肌醇衍生物,无机磷在酸性环境中与钼酸铵显色剂反应生成蓝色复合物,在700nm处有特征吸收峰,根据700nm处吸光值变化可计算得植酸酶活性。

自备实验用品及仪器天平、低温离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、恒温水浴锅,超声溶解器,回旋式振荡器。

操作步骤:1.酶制剂:按照质量(g):提取液体积(mL)为1:500~1000的比例(建议称取约0.001g,加入1mL提取液)第1页,共4页加入提取液,在超声波溶解器上溶解15min,再用回旋式振荡器振荡15min,待测。

2.组织:按照质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g,加入1mL提取液)加入提取液,在超声波溶解器上溶解15min,再用回旋式振荡器振荡15min,4℃,4000g离心10min,取上清待测。

3.饲料样品:饲料烘干粉碎,过40目筛,按照质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g,加入1mL提取液)加入提取液,在超声波溶解器上溶解15min,再用回旋式振荡器振荡15min,4℃,4000g离心10min,取上清待测。

柠檬酸检测试剂盒说明书

柠檬酸检测试剂盒说明书

柠檬酸检测试剂盒说明书
【药品名称】通用名称:柠檬酸测定试剂盒(酶法)
汉语拼音:NingMengSuanCeDingShiJiHe(MeiFa)
【成份】R1:试剂1 Tris 缓冲液40mmol/L,NADH 0.4mmol/L,叠氮钠
0.95g/LR2a:试剂2PIPES 600mmol/L,叠氮钠0.95g/L;
R2b:试剂3(干粉)苹果酸脱氢酶>40KU/L,柠檬酸裂解酶>1KU/L;
柠檬酸标准品:柠檬酸每批定值见瓶签(注:干粉试剂为溶解后浓度。


【适应症】本品用于体外定量测定人精浆样本中柠檬酸的浓度。

【规格】R1:40mL R2a:10mL R2b:1×10mL;R1:80mL R2a:20mL R2b:2×10mL;R1:200mL R2a:50mL R2b:5×10mL;R1:800mL R2a:200mL R2b:20×10mL;100T/盒;200T/盒。

【批准文号】渝食药监械(准)字20XX第2400XXX号。

乳酸脱氢酶是一种氧化还原酶,催化丙酮酸和乳酸的互相转化反应。

乳酸脱氢酶由4个亚单位构成,有两种类型:肌肉型和心肌型。

根据其亚单位成分,分为5种同功酶。

乳酸脱氢酶总活性比色法定量检测试剂是一种旨在通过乳酸脱氢酶反应系统中还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸氧化后峰值的降低,即采用比色法来测定细胞萃取样品中
酶活性的权威而经典的技术方法。

该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的。

其适用于各种细胞或组织裂解样品(动物、人体、植物、昆虫等)乳酸脱氢酶的总活性检测。

产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定。

单宁含量检测试剂盒说明书 微量法 货号:BC1395 规格:100T 96S

单宁含量检测试剂盒说明书 微量法 货号:BC1395 规格:100T 96S

单宁含量检测试剂盒说明书微量法货号:BC1395规格:100T/96S产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系索莱宝工作人员。

试剂名称规格保存条件提取液液体75 mL×2瓶4℃保存试剂一粉剂×1瓶常温保存标准品粉剂×1支4℃保存溶液的配制:1、标准品:10 mg单宁酸。

临用前加入1.175 mL提取液溶解为5000 nmol/mL的标准液。

产品说明:单宁又称植物多酚,是一类广泛存在于植物体内的多元酚化合物。

单宁可作为潜在的生物标记物;与蛋白质结合的能力又称为收敛性或涩性。

其收敛性是多种生理活性的基础,如止血、抗肿瘤、抗衰老等生理活性,也是影响产品口感的因素之一。

根据光谱特性,单宁在275nm下有较强的紫外吸收,通过利用活性炭能够特异吸附单宁的性质来检测单宁含量。

注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。

如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品:紫外分光光度计/酶标仪、离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔UV板、30-50目筛、蒸馏水。

操作步骤:一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)将样本烘干至恒重,粉碎,过30-50目筛之后,称取约0.05g,加入1mL提取液,封口膜封口防止液体溅出,于70℃水浴提取30min,期间可摇晃数次。

12000rpm,25℃,离心10min,取上清,用提取液定容至1mL,待测。

二、测定步骤1.紫外分光光度计/酶标仪预热30min,波长调至275nm。

提取液调零。

2.标准溶液的制备:将5000nmol/mL标准液用提取液稀释为25、12.5、6.25、3.125、1.5625、0.78125nmol/mL标准溶液。

3.加样表:试剂名称测定管对照管标准管空白管试剂一大约5-7mg--大约5-7mg提取液---0.5mL标准溶液--0.5mL-样本0.5mL0.5mL--第 1 页,共 2 页充分混匀震荡5min,13000g 离心20min(若上清中仍有颗粒或浑浊,请多次离心至完全清澈)。

柠檬酸合酶(CS)活性检测试剂盒说明书 微量法

柠檬酸合酶(CS)活性检测试剂盒说明书 微量法

柠檬酸合酶(CS)活性检测试剂盒说明书微量法注意:正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定。

货号:BC1065规格:100T/48S产品内容:提取液:液体50mL×1瓶,-20℃保存;试剂一:液体10mL×1瓶,4℃保存;试剂二:液体0.6mL×1支,-20℃保存;试剂三:液体40mL×1瓶,4℃保存;试剂四:粉剂×2支,4℃保存,临用前加入1mL双蒸水,用不完的试剂仍4℃保存;试剂五:粉剂×2支,-20℃保存,临用前加入500μL双蒸水,用不完的试剂仍-20℃保存;试剂六:粉剂×1支,-20℃保存,临用前加入1.5mL双蒸水,用不完的试剂仍-20℃保存;产品说明:CS(EC 2.3.3.1)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞的线粒体基质中,是三羧酸循环第一个限速酶,是三羧酸循环主要调控位点之一。

CS催化乙酰CoA和草酰乙酸产生柠檬酰辅酶A,进一步水解产生柠檬酸;该反应促使无色的DTNB转变成黄色的TNB,在412nm处有特征吸光值。

试验中所需的仪器和试剂:可见分光光度计/酶标仪、低温离心机、水浴锅、可调节移液器、微量玻璃比色皿/96孔板和蒸馏水。

操作步骤:一、样本前处理组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离:1称取约0.1g组织或收集500万细胞,加入1mL提取液和10μL试剂二,用冰浴匀浆器或研钵匀浆。

2将匀浆液600g,4℃离心5min。

3将上清液移至另一离心管中,11000g,4℃离心10min。

4上清液即胞浆提取物,可用于测定从线粒体泄漏的CS。

5在沉淀中加入200μL试剂一和2μL试剂二,反复吹打充分混匀,用于CS测定。

6柠檬酸合酶酶活即沉淀和上清液中的酶活之和。

二、测定步骤:1、分光光度计/酶标仪预热30min以上,调节波长至412nm,蒸馏水调零。

2、试剂三置于25℃(一般物种)或者37℃(哺乳动物)水浴中预热10min左右(保证无沉淀)。

酸性转化酶(AI)活性检测试剂盒说明书__微量法UPLC-MS-4153

酸性转化酶(AI)活性检测试剂盒说明书__微量法UPLC-MS-4153

本产品仅供科学研究使用!请勿用于临床、诊断、食品、化妆品检测等用途!-上海液质检测技术有限公司第1页共2页酸性转化酶(AI )活性检测试剂盒说明书货号:UPLC-MS-4153规格:100T/48S微量法产品内容:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系工作人员。

试剂名称规格保存条件提取液液体100mL×1瓶4℃保存试剂一液体40mL×1瓶4℃保存试剂二粉剂×1瓶4℃保存试剂三液体20mL×1瓶4℃保存标准品粉剂×1支4℃保存溶液的配制:1、试剂二:临用前加入20mL 试剂一充分溶解备用;用不完的试剂4℃保存;2、标准品:10mg 葡萄糖,临用前加入1mL 蒸馏水溶解,制备10mg/mL 葡萄糖标准液备用。

产品说明:蔗糖转化酶(Invertase ,Ivr )催化蔗糖不可逆地分解为果糖和葡萄糖,是高等植物蔗糖代谢关键酶之一。

根据最适pH ,Ivr 分为酸性转化酶(AI )和中性转化酶(NI )两种类型。

AI(EC 3.2.1.26)主要存在于细胞液泡或自由空间中,最适pH 为4.5~5.0(酸性),通过降解液泡中蔗糖,调节液泡中蔗糖的利用和果实内糖类的积累。

AI 催化蔗糖降解产生还原糖,进一步与3,5-二硝基水杨酸反应,生成棕红色氨基化合物,在540nm 有特征光吸收,在一定范围内540nm 光吸收增加速率与AI 活性成正比。

注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。

如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品:可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。

操作步骤:一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)按照组织质量(g ):提取液体积(mL )为1:5~10的比例(建议称取约0.1g 组织,加入1mL 提取液),进行冰浴匀浆。

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胞浆异柠檬酸脱氢酶(ICDHc)活性检测试剂盒说明书微量法
注意:正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定。

货号:BC0405
规格:100T/96S
产品内容:
提取液:液体120mL×1瓶,4℃保存;
试剂一:粉剂×1瓶,4℃保存;用时加入20mL提取液溶解;
试剂二:粉剂×1支,4℃保存;用时每支加275μL双蒸水充分溶解备用;
试剂三:粉剂×1支,4℃保存;用时每支加275μL双蒸水充分溶解备用;
产品说明:
ICDHc(EC1.1.1.42)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,催化异柠檬酸脱氢脱羧生成α-酮戊二酸,同时还原NADP+生成NADPH。

ICDHc是细胞质中除了磷酸戊糖途径外又一种NADPH重要来源,在逆境中该酶活性通常会发生显著变化。

利用ICDHc催化NADP+还原成NADPH反应,在340nm下测定NADPH浓度的增加。

需自备的仪器和用品:
紫外分光光度计/酶标仪、恒温水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板(UV 板)、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。

操作步骤:
一、样本的前处理:
1、细菌、细胞或组织样品的制备:
细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照每200万细菌或细胞加入400μL提取液,超声波破碎细菌或细胞(功率20%,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g4℃离心10min,取上清,置冰上待测。

组织:称取约0.1g组织,加入1mL提取液进行冰浴匀浆。

8000g4℃离心10min,取上清,置冰上待测。

2、血清(浆)样品:直接检测。

二、测定步骤:
1、分光光度计/酶标仪预热30min以上,蒸馏水调零。

2、工作液配制:将试剂一、试剂二、试剂三按85:1:1的比例混合。

3、按下表步骤加样:
试剂名称(μL)测定管
工作液(μL)190
样本(μL)10
将上述试剂按顺序加入微量石英比色皿/石英96孔板中,加样本的同时开始计时,在340nm波长下记录20秒时的初始吸光度A1;迅速将比色皿连同反应液一起放入37℃水浴中,准确反应2分钟;迅速取出比色皿并擦干,记录2分20秒时的吸光度A2。

计算ΔA=A2-A1。

注意事项:
1、若A2-A1大于0.5,需将酶液用提取液稀释,使A2-A1小于0.5,可提高检测灵敏度。

若初始值A1大于0.5可尝试将酶液用提取液稀释。

2、实验时,试剂二、试剂三和样本在冰上放置,以免变性和失活;工作液37℃水浴放置。

3、比色皿中反应液的温度必须保持37℃,取小烧杯一只装入一定量的37℃蒸馏水,将此烧杯放入37℃水浴锅中。

在反应过程中把比色皿连同反应液放在此烧杯中。

4、最好两个人同时做此实验,一个人比色,一个人计时,以保证实验结果的准确性。

三、ICDHc活力单位的计算:
a、按微量石英比色皿计算:
1、血清(浆)ICDHc活力的计算:
单位的定义:每mL血清(浆)在反应体系中每分钟生成1nmol NADPH定义为一个酶活力单位。

ICDHc(U/mL)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷V样本÷T=1608×ΔA
2、组织中ICDHc活力的计算:
(1)按样本蛋白浓度计算:
单位的定义:每mg组织蛋白在反应体系中每分钟生成1nmol NADPH定义为一个酶活力单位。

ICDHc(U/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样本×Cpr)÷T=1608×ΔA÷Cpr
(2)按样本鲜重计算:
单位的定义:每g组织在反应体系中每分钟生成1nmol NADPH定义为一个酶活力单位。

ICDHc(U/g鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W÷V提取×V样本)÷T=1608×ΔA÷W
3、细菌或培养细胞中ICDHc活力的计算:
(1)按样本蛋白浓度计算:
单位的定义:每mg组织蛋白在反应体系中每分钟生成1nmol NADPH定义为一个酶活力单位。

ICDHc(U/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样本×Cpr)÷T=1608×ΔA÷Cpr
(2)按细菌或细胞密度计算:
单位的定义:每1万个细菌或细胞在反应体系中每分钟生成1nmol的NADPH定义为一个酶活力单位。

ICDHc(U/104Cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样本×500)÷T=3.2×ΔA V反总:反应总体积,2×10-4L;
ε:NADPH摩尔消光系数,6.22×103L/moL/cm;
d:石英比色皿光径,1cm;
V样本:加入样本体积,0.01mL;
V提取:加入提取液体积,1mL;
Cpr:样本蛋白浓度,mg/mL;
W:样本鲜重,g;
T:反应时间,2min;
500:细菌或细胞数量,500万。

b、按石英96孔板计算:
将上述公式中光径d-96孔板光径改为0.6cm。

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