芦丁的提取分离和鉴定

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槐米中芦丁的提取、分离与鉴定

槐米中芦丁的提取、分离与鉴定

槐米中芦丁的提取、分离与鉴定(一)一、实验目的1、通过芦丁的提取与精制掌握碱酸法提取黄酮类化合物的原理及操作。

2、通过芦丁结构的鉴定,了解苷类结构研究的一般程序和方法。

二、实验原理芦丁:浅黄色针状结晶,mp174℃-178℃。

溶解度:1:8000;热水1:200;冷乙醇1:300;热乙醇1:30;冷甲醇1:100;热甲醇1:10.槲皮素:黄色结晶,mp313℃-314℃(2分子结晶水),能溶解于冷乙醇(1:650),易溶于沸乙醇(1:60),可溶于甲醇、乙酸乙酯等;难溶于水,实验室以稀硫酸水解,乙醇重结晶制得。

本实验主要是利用芦丁分子中含有较多的酚羟基,显弱酸性,可溶于碱中,加酸酸化后又可析出结晶的性质,采用碱溶酸沉法提取,并用芦丁对冷、热水的溶解度相差悬殊的特性进行精制。

三、药品材料槐米、石灰乳、盐酸、广泛PH试纸四、实验操作芦丁的的提取和精制芦丁的提取:取槐米20g置500ml烧杯中,加入沸水400ml及1g硼砂,搅拌下加入石灰乳调至PH8-9,保持微沸30分钟(注意保持PH8-9),并随时补充蒸发掉的水分,趁热用双层纱布滤过,收集滤液,药渣再用200ml水按同样的操作再提取20分钟,合并两次滤液。

浓缩至1/2体积,滤液在60℃-70℃再用盐酸调至PH4-5,静置一周,析出芦丁。

五、实验说明及注意事项1、本实验采用碱溶液酸沉法从槐米中提取芦丁,收率稳定,且操作简便。

在提取前应注意将槐米捣碎,使芦丁易于被热水溶出。

槐花中含有大量粘液质,加入石灰乳使生成钙盐沉淀除去。

PH应严格控制8-9,不得超过10,。

因为在强碱条件下煮沸,时间稍长可促使芦丁水解破坏,使提取率明显下降。

酸沉淀时PH4-5,不宜过低,否则会使芸香苷成烊盐溶于水,降低了收率。

2、提取过程中加入硼砂作用:保护芦丁分子中的邻二酚羟基不被氧化,亦保护邻二酚羟基不与钙离子络合,使芦丁不受损失。

槐米中芦丁的提取、分离与鉴定(二)一、实验目的1、掌握芦丁水解生成苷元的方法及二者之间的分离。

槐花米中芦丁的提取、分离与鉴定

槐花米中芦丁的提取、分离与鉴定

槐花米中芦丁的提取、分离与鉴定槐花是一种常见的中草药,其花中富含多种有效成分,其中包括芦丁。

芦丁是一种天然的黄酮类化合物,具有明显的生理活性,如抗氧化、抗炎、降血压、保护心脑血管等作用。

因此,芦丁的提取、分离与鉴定一直是研究的热点。

提取方法:1.超声波提取法超声波提取是一种利用高频声波的机械震荡作用使样品中植物成分迅速从固相进入溶液的方法。

对于槐花花中芦丁的提取,超声波提取法是一种快速、高效的方法。

具体步骤如下:(1)将干燥的槐花花朵研磨成粉末。

(2)将槐花花粉末加入乙醇水溶液中,浸泡4小时。

(3)将浸泡的样品置于超声波清洗仪中,进行超声波萃取。

(4)离心沉淀,取上清液。

(5)将上清液蒸干,然后用乙醚-乙酸乙酯(1:1)提取,得到芦丁。

2.微波辅助提取法分离方法:1.硅胶柱色谱法硅胶柱色谱法是一种利用柱填充物在不同极性条件下对化合物进行分离和纯化的方法。

对于槐花花中芦丁的分离,硅胶柱色谱法是一种常用的方法。

具体步骤如下:(1)将经过提取的芦丁用甲醇溶解。

(2)将甲醇溶液在硅胶柱上进行逐级洗脱,采用乙醚、乙醇、混合溶液等不同极性的溶剂。

(3)收集洗脱液并进行旋蒸去除溶剂。

(4)取得芦丁。

2.高效液相色谱法(2)将甲醇溶液注入高效液相色谱仪中,以C18为固定相,用水-醋酸溶液-甲醇混合物作为移动相,在一定的流速下进行分离。

(3)收集并分析分离得到的芦丁。

鉴定方法:1.红外光谱法红外光谱法是一种运用分子在红外辐射下的振动和旋转运动来研究分子结构和化学键的强有力的分析方法。

对于芦丁的鉴定,红外光谱法是一种常用的方法。

芦丁的红外光谱图谱表现为具有多种特征峰的典型光谱,如C=0伸缩振动、C-O键伸缩振动和苯环伸缩振动等。

紫外光谱法是利用物质分子中的电子跃迁所产生的吸收现象来确定物质的性质和结构的分析方法。

对于芦丁的鉴定,紫外光谱法也是一种常用的方法。

芦丁的紫外光谱图谱表现为具有两个吸收峰,分别位于286 nm和330 nm。

槐米中芦丁的提取分离与鉴定

槐米中芦丁的提取分离与鉴定

2.实验方法
芦丁粗品
0.5g芦丁粗品
1g芦丁粗品
按1:200加水,煮沸溶 解,趁热抽滤 滤液
放置析晶
2%H2SO4 80ml,直火回 流,加热30min,抽滤
芦丁精品
沉淀
滤液(PC)
水洗至中性,95%EtOH重 结晶 滤液
槲皮素精品
芦丁的精制:取0.5g芦丁粗品,置500mL烧杯中,
按1:200加水,加热至沸,使之充分溶解。
趁热过滤,滤渣再加入300mL水,直火加热0.5h。
趁热过滤,合并两次滤液。
放置,析出沉淀,抽滤,干燥得淡黄色芦丁粗品。
二 芦丁的精制和水解
一 实验原理 1.芦丁的精制是根据芦丁在热水中溶解度大,冷水中溶解度小的性 质进行重结晶而获得芦丁粗品。
2.芦丁是黄酮苷类,可进行酸水解,苷键断裂生成苷元槲皮素,葡 萄糖和鼠李糖。
4.熔点测定:芦丁
熔点测定:槲皮素
THANKS
一,芦丁的提取
1.实验原理:芦丁在冷水中的溶解度为1:10000,在热水中的 溶解度为1:200,在冷乙醇中的溶解度为1:650.因此,采用 水煎法提取芦丁经济,效率高。
2.实验方法
槐米20g,研碎
药渣
滤液
300ml,煎煮0.5h,过滤 滤液
芦丁粗品
取20g槐米,研碎。
置于400mL沸水中,直火煎煮1h(需补充蒸发掉的水分)。
(2)因糖的极性差异造成Rf值,与对照品比较鉴定
(3)黄酮类的显色反应特异性较强,故可与聚酰胺产 生氢键缔合,常用于分离和鉴别。
1.糖的纸色谱(圆形滤纸)鉴定 取澄清的水解液20mL,加碳酸钡中和至中性,滤去生成的硫 酸钡沉淀,滤液浓缩至小体积1mL,供纸色谱点样用。

芦丁的提取与鉴定

芦丁的提取与鉴定
芦丁,槲皮素分别 用甲醇溶解,加入 ZrOCl2,再加入柠檬 酸
实验现象 芦丁分层上层呈浅 黄色,下层出现紫 红色环。槲皮素分 层上层为浅黄色, 下层为无色
芦丁,槲皮素溶液 都变成紫红色
芦丁,槲皮素溶液 都出现荧光
解析 Molish 反应是鉴定 糖的反应。芦丁含 有葡萄糖和鼠李 糖,所以出现紫环 反应,槲皮素没有 糖结构,所以没反 应。 盐酸镁粉反应是检 查是否有黄酮类化 合物的最常用方 法。芦丁,槲皮素 都含有黄酮结构, 所以出现紫红色。 芦丁,槲皮素都含 有黄酮结构。
所以可以认为 a 为葡萄糖,b 为鼠李糖。糖试液中含有葡萄糖和鼠李糖。芦丁样品中含有 芦丁,槲皮素样品中含有槲皮素。 (4)薄层色谱
Rf(A)=0.46 Rf(B)=0.40 Rf(C)=0.10 Rf(D)=0.07 因为 Rf(A)≈ Rf(B) Rf(C)≈ Rf(D)
所以可以认为 B 为芦丁,D 为槲皮素。 五.实验结果与讨论
二. 实验原理
芦丁为双糖苷,具有较大极性,对热水和冷水具有较大的溶解差异,故用水对其进行提取 精制。
芦丁可被稀水解,生成槲皮素及葡萄糖,鼠李糖,并通过薄层层析,纸层析鉴定。芦丁 及槲皮素还可以通过化学反应及紫外及红外光谱鉴定。
OH OH
OH OH
HO
O
HO
O
+
H
+
O
OH
OH O Glc O
OH O
芦丁粗品
重结晶
芦丁纯品
原理:黄酮苷难溶于酸水,易溶于碱水。
2 芦丁及槲皮素的纸层析和聚酰胺薄膜层析的结果如何?为什么不同?
在纸层析中 Rf 槲皮素>Rf 芦丁,在聚酰胺薄膜层析中 Rf 槲皮素<Rf 芦丁

芦丁的提取分离和鉴定

芦丁的提取分离和鉴定

综合化学实验: 芦丁的提取分离和鉴定芦丁简介:芦丁(Rutin)又名芸香苷化学式: C27H30O16·3H2O,是一种浅黄色针状结晶有机化合物,广泛存在于自然界植物中,是一种被人们广泛使用的有机天然产物。

目前已发现含有芦丁的植物至少在70种以上,常见的如烟叶、槐花、荞麦和蒲公英中均有不同含量。

尤其以中药槐米(豆科、槐属,槐树Sophora japonica的花蕾)和荞麦中含量最高,因此槐米可作为大量提取芦丁的天然植物原料。

中药槐米(炒碳)味苦性凉、具清热凉血、止血之功。

常用于治疗多种出血症:肠风便血、痔血、尿血、衄血、崩漏下血、赤血下痢等。

西医研究其主要有效成分为有机化合物“芦丁”而中药槐米中芦丁的含量可高达12~16%,是主要的芦丁天然来源。

槐米中还含有槲皮素、三萜皂苷、槐花米甲素、槐花米乙素、槐花米丙素等。

研究文献证明芦丁具有VitP(维生素P)样作用(VitP具有生物类黄酮的功能,可防止维生素C被氧化而受到破坏,增强维生素功效;增加毛细血管壁强度,防止瘀伤。

有助于牙龈出血的预防和治疗,有助于因内耳疾病引起的浮肿或头晕的治疗等)。

而芦丁具有类似作用如可降低毛细血管脆性和调节通透性等,在医学临床上常将其用作毛细血管脆性引起的出血症以及防治高血压病等的辅助治疗药物。

芦丁是由槲皮素(quercetin)3位上的羟基与芸香糖(rutinose,一种由葡萄糖glucose与鼠李糖rhamnose组成的双糖)脱水合成的苷,是一种浅黄色粉末或极细的针状结晶,含有三分子的结晶水,熔点为174~178℃,无结晶水时188~190℃。

溶解度:冷水中为1:10000;热水中1:200;冷乙醇1:650;热乙醇1:60;冷吡啶1:12。

微溶于丙酮、乙酸乙酯,不溶于苯、乙醚、氯仿、石油醚,溶于碱而呈黄色。

补充知识:关于苷(gān)和甙(dài): 苷类(glycosides,旧称甙)又称配糖体,是糖或糖的衍生物的半缩醛羟基与另一类非糖物质中的羟基以缩醛键(甙键)脱水缩合而成的环状缩醛衍生物,水解后能生成糖与非糖化合物。

芦丁的提取分离与鉴定实验步骤

芦丁的提取分离与鉴定实验步骤

芦丁的提取分离与鉴定实验步骤芦丁是一种常见的中药化合物,具有抗氧化、抗炎和抗肿瘤等多种药理活性。

其提取分离与鉴定是中药研究和应用的重要环节之一、下面将介绍芦丁的提取分离与鉴定的实验步骤。

一、实验材料和仪器设备准备:1.实验材料:苦橙干燥植物材料、无水乙醇、石油醚、正己烷、醋酸乙酯、以及色谱柱填料等。

2.仪器设备:真空泵、旋转蒸发器、离心机、高效液相色谱仪、紫外可见分光光度计等。

二、芦丁的提取:1.将苦橙植物材料粉碎成粉末,并称取适量的粉末样品。

2.将粉末样品加入具有提取性质的溶剂中(如乙醇),在室温下进行搅拌提取一定时间。

3.使用滤纸或过滤杯过滤掉植物残渣,得到提取液。

4.通过旋转蒸发器将提取液中的溶剂蒸发掉,得到精制的芦丁提取物。

三、芦丁的分离与纯化:1.将精制的芦丁提取物溶解在适量的溶剂中,制备样品溶液。

2.使用色谱柱装填适合的色谱填料(如硅胶),并将样品溶液注入柱上。

3.使用不同极性溶剂按梯度洗脱柱上的化合物。

4.通过比色法或紫外可见分光光度计测定洗脱液中芦丁的吸收强度,并收集含有目标化合物的部分。

5.通过旋转蒸发器将洗脱液中的溶剂蒸发掉,得到芦丁的分离纯化产物。

四、芦丁的鉴定:1.使用高效液相色谱仪对分离纯化产物进行分析。

2.调节适宜的流动相,并设定合适的检测波长和流速。

3.使用芦丁的标准品制备不同浓度的标准曲线,用于定量分析。

4.将分离纯化产物溶解在流动相中,进行色谱分析并记录色谱图。

5.通过比较分离纯化产物的保留时间和峰面积与标准曲线的关系,定量分析样品中芦丁的含量。

通过以上的步骤,可以完成芦丁的提取分离与鉴定工作。

实验过程中要注意实验条件的控制,如提取溶剂的选择、色谱柱填料的选择和流动相的调节等。

同时,还应注意实验操作的规范和安全,确保实验的准确性和可重复性。

芦丁的提取分离与鉴定实验报告

芦丁的提取分离与鉴定实验报告

芦丁的提取分离与鉴定实验报告芦丁的提取分离与鉴定实验报告引言:芦丁是一种天然的黄酮类化合物,具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤等多种生物活性。

本实验旨在通过提取分离与鉴定的方法,探究芦丁的化学性质和药理作用。

实验步骤:1. 样品准备:将芦丁来源的植物材料研磨成细粉,称取一定质量的样品。

2. 提取:将样品加入适量的溶剂(如乙醇、甲醇等),进行浸泡提取。

3. 过滤:将提取液过滤,去除植物渣滓。

4. 浓缩:将过滤后的提取液进行浓缩,使其体积减小。

5. 结晶:将浓缩后的提取液置于低温环境中,促使芦丁结晶。

6. 分离:通过过滤或离心等方法,将芦丁晶体与溶剂分离。

7. 干燥:将芦丁晶体放置于通风干燥的环境中,使其失去残余溶剂。

8. 纯化:通过重结晶等方法,提高芦丁的纯度。

9. 鉴定:利用色谱、质谱等分析技术,确定芦丁的结构和纯度。

实验结果:经过以上步骤,我们成功地从植物材料中提取分离出芦丁,并得到了纯度较高的芦丁晶体。

通过质谱分析,确认了芦丁的分子结构和相对分子质量。

同时,利用色谱技术对芦丁进行了定性和定量分析,得到了芦丁的含量。

讨论:芦丁作为一种黄酮类化合物,具有多种生物活性。

其抗氧化作用可保护细胞免受自由基的损伤,具有抗衰老、抗炎等作用。

芦丁还具有抗肿瘤作用,能够抑制肿瘤细胞的增殖和转移。

此外,芦丁还具有抗菌、抗病毒等作用,对一些疾病具有一定的治疗潜力。

结论:通过本实验,我们成功地提取分离并鉴定了芦丁,确认了其化学结构和纯度。

芦丁作为一种天然的黄酮类化合物,具有多种生物活性,对人体健康具有积极的作用。

进一步的研究可以探索芦丁的药理机制,为其在临床应用中提供更多的依据。

总结:本实验通过提取分离与鉴定的方法,成功地从植物材料中提取分离出芦丁,并对其进行了鉴定和分析。

芦丁作为一种具有多种生物活性的黄酮类化合物,具有广泛的应用前景。

通过深入研究芦丁的化学性质和药理作用,可以为其在医药领域的开发和应用提供更多的支持。

芦丁的提取分离和鉴定11页

芦丁的提取分离和鉴定11页

芦丁的提取分离和鉴定11页芦丁(rutin)是黄酮类化合物,具有多重药理活性,如抗氧化、抗炎、抗肿瘤、降血糖、抗过敏等。

由于其广泛应用,芦丁的提取分离及鉴定备受关注。

本篇文章主要介绍芦丁的提取分离及鉴定过程。

一、芦丁的提取分离1.提取方法芦丁的提取方法有多种,如超声波提取法、微波提取法、加热提取法、水提法、醇提法等。

其中最常用的是醇提法和水提法。

醇提法:将干燥的植物材料粉碎,加入适量的醇类溶剂(如95%乙醇),浸泡24小时,滤除渣物,将滤液浓缩至一定浓度,再用二甲苯提取,蒸干得到芦丁。

水提法:将干燥的植物材料粉碎,加水浸泡,加热水浴提取,滤去渣物,用非极性溶剂提取,蒸干得到芦丁。

2.分离方法芦丁的分离方法主要有两种,分别是硅胶柱层析和高效液相色谱。

硅胶柱层析:将提取得到的芦丁溶液加入硅胶柱中,用适当的溶剂进行洗脱,收集芦丁纯品。

高效液相色谱:高效液相色谱(HPLC)是目前广泛使用的分离技术。

该法可实现高效、快速、自动化的芦丁纯化,且纯品质量较好,长期保存无损失。

二、芦丁的鉴定1.质谱鉴定质谱鉴定是一种快速、简便、高效的无损鉴定方法。

目前常见的质谱方法有质谱联用技术和飞行时间质谱法。

质谱联用技术:质谱联用技术包括气相色谱-质谱联用法(GC-MS)、液相色谱-质谱联用法(LC-MS)等。

通过对芦丁的母离子或其碎片离子进行分析,可以确定芦丁的分子量、结构和定量信息。

飞行时间质谱法:飞行时间质谱法(TOF-MS)是一种高分辨率质谱分析技术,可以准确测定芦丁的分子量。

2.红外光谱鉴定红外光谱鉴定是一种无损鉴定方法,可以检测芦丁的特征吸收峰。

通过与标准参照物比较,可以确定芦丁的物质性质。

3.紫外光谱鉴定紫外光谱鉴定是一种常用的鉴定方法,可以分析芦丁的吸收光谱和波长。

通过与标准参照物比较,可以确定芦丁的含量。

4.核磁共振鉴定核磁共振鉴定可以测定芦丁的分子结构、质量以及定量信息。

该方法通常采用氢核磁共振(1H-NMR)和碳核磁共振(13C-NMR)。

芦丁的提取分离和鉴别

芦丁的提取分离和鉴别

芦丁的提取分离和鉴别槐花米系豆科槐属植物槐树(Sophora japonica L)的花蕾。

味苦性凉,入肝、大肠经。

具有清热凉血、止血的功效,常用于治疗便血、痔血、尿血、衄血、崩漏下血和赤血下痢等,常炒炭应用。

槐花米主要化学成分为芦丁(芸香甙),具有维生素P样作用,可降低毛细血管脆性、调解其渗透性。

临床用于防治高血压脑病、视网膜出血和慢性气管炎等。

芦丁羟基化衍生物曲克芦丁能抑制血小板聚集,防止血栓形成的作用,同时能对抗内源性血管损伤,增加毛细血管抵抗力,降低其脆性,防止水肿,对急性缺血性脑损伤有显著保护作用,临床用作抗血小板药物。

一、实验目的:1.掌握酸碱法提取黄酮苷类的原理及方法;2.掌握黄酮类成分的主要性质及鉴别方法。

二、仪器与试药(一)仪器SHB-Ⅲ循环水式多用真空泵 HHS型电热恒温水浴锅玻璃仪器气流烘干器圆底烧瓶(250mL) ZF-2型三用紫外仪电热恒温干燥箱移液管(10mL、5mL)(二)试药槐花米粗粉硼砂氧化钙乙醇盐酸浓硫酸硅胶 CMC-Na 镁粉α-萘酚甲醇乙酸乙酯脱脂棉三氯化铝试液芦丁和槲皮素对照品甲酸丙酮三、主要成分的结构与性质:*皂苷(Saponin ),粗品为白色粉末,mp 210~220℃,易溶于吡啶,能溶于200倍的甲醇中,酸水解得上述两种苷元及糖。

糖为葡萄糖,葡萄糖醛酸和葡萄醛酸内酯。

R=H 槲皮素R=–glu –rha 芦丁白桦脂醇 槐花二醇四、实验原理:1.芦丁分子结构中含有酚羟基,具有弱酸性,能与碱反应生成盐而溶于水,此盐加酸酸化,又析出芦丁,利用此性质进行提取。

并可利用芦丁在冷水和热水中溶解度相差悬殊,用水重结晶。

2.芦丁在酸性溶液中可被水解,生成槲皮素和糖。

五、实验内容OOROOH OHOH O H OH CH 2OHOH OH(一)芦丁的提取分离和纯化60-70℃用浓盐酸调pH3-4[注3],滤液(弃去)1:200的溶解度加蒸滤液冷却、静置、析晶,过滤 芦丁精品(60-70℃干燥,称重)注1:硼砂因能与芦丁结合,起保护邻二酚羟基的作用,使其不与Ca 2+络合,生成钙盐沉淀,使提取收率下降。

芦丁的提取分离和鉴别

芦丁的提取分离和鉴别

芦丁的提取分离和鉴别槐花米系豆科槐属植物槐树(SophorajaponicaL)的花蕾。

味苦性凉,入肝、大肠经。

具有清热凉血、止血的功效,常用于治疗便血、痔血、尿血、衄血、崩漏下血和赤血下痢等,常炒炭应用。

槐花米主要化学成分为芦丁(芸香甙),具有维生素P样作用,可降低毛细血管脆性、调解其渗透性。

临床用于防治高血压脑病、视网膜出血和慢性气管炎等。

芦丁羟基化衍生物曲克芦丁能抑制血小板聚集,防止血栓形成的作用,同时能对抗内源性血管损伤,增加毛细血管抵抗力降低其脆性,防止水肿,对急性缺血性脑损伤有显著保护作用,临床用作抗血小板药物。

一、实验目的:1.掌握酸碱法提取黄酮苷类的原理及方法;2.掌握黄酮类成分的主要性质及鉴别方法。

二、仪器与试药(一)仪器SHB-III循环水式多用真空泵HHS型电热恒温水浴锅玻璃仪器气流烘干器圆底烧瓶(250mL)ZF-2型三用紫外仪电热恒温干燥箱移液管(10mL、5mL)(二)试药槐花米粗粉硼砂氧化钙乙醇盐酸浓硫酸硅胶CMC-Na镁粉a-萘酚甲醇乙酸乙酯脱脂棉三氯化铝试液芦丁和槲皮素对照品甲酸丙酮三、主要成分的结构与性质:表5-1槐花米中主要成分的物理性质白桦脂醇* (Betulin) 无色针晶251〜252C能溶于醋酸、丙酮、醋酸乙酯、甲醇、乙醇、氯仿、苯等;难溶于石油醚和水。

槐花二醇* (Sophoradiol) 无色针晶219~220C或224C溶于石油醚、苯、丙酮、甲醇;难溶于水*皂苷(Saponin),粗品为白色粉末,mp210〜220°C,易溶于吡啶,能溶于200倍的甲醇中,酸水解得上述两种苷元及糖。

糖为葡萄糖,葡萄糖醛酸和葡萄醛酸内酯。

R=H槲皮素R=-glu-rha芦丁四、实验原理:1.芦丁分子结构中含有酚羟基,具有弱酸性,能与碱反应生成盐而溶于水,此盐加酸酸化,又析出芦丁,利用此性质进行提取。

并可利用芦丁在冷水和热水中溶解度相差悬殊,用水重结晶2.芦丁在酸性溶液中可被水解,生成槲皮素和糖。

芦丁的提取分离和鉴定实验报告 -回复

芦丁的提取分离和鉴定实验报告 -回复

芦丁的提取分离和鉴定实验报告 -回复一、实验目的:1. 学习芦丁的提取和分离方法。

2. 使用色谱技术鉴定提取物中的芦丁成分。

二、实验原理:1. 芦丁的提取方法:a. 在芦丁含量较高的植物材料中,如杜仲叶中,芦丁可直接通过浸泡、搅拌等方法提取得到。

b. 在含量较低的植物材料中,我们可以使用一些有机溶剂,如乙醇、甲醇等,通过溶剂提取的方法获得。

2. 芦丁的分离方法:a. 使用分离漏斗将提取得到的芦丁溶液与适量的水混合,待分离出有机层后,可以将有机层收集起来。

b. 进一步使用旋转蒸发仪将有机层中的溶剂去除,得到芦丁的纯净固体。

3. 芦丁的鉴定方法:a. 若提取得到的芦丁为固体,我们可以通过比色法,如硼酸铁法,来进行初步鉴定。

芦丁在硼酸铁试液中呈蓝色、紫色。

b. 若提取得到的芦丁为液体,我们可以使用色谱技术,如高效液相色谱(HPLC),对芦丁进行鉴定。

通过比对标准品和峰面积的计算,可以确定芦丁的含量。

三、实验步骤:1. 准备材料:杜仲叶样品、乙醇等有机溶剂、色谱柱、色谱仪等。

2. 提取芦丁:将杜仲叶样品研磨成细粉,加入适量的乙醇中,摇匀浸泡。

放置一段时间后,使用滤纸或过滤器将提取液与渣滓分离开。

3. 分离芦丁:将提取液转移到分离漏斗中,加入适量的水,并进行摇匀,待有机层与水层分离后,打开分离漏斗放流,收集有机层。

4. 蒸发溶剂:将有机层转移至旋转蒸发仪中,控制温度和转速,使溶剂快速蒸发。

待溶剂完全蒸发后,将得到芦丁的固体。

5. 鉴定芦丁:若得到的芦丁为固体,可以进行硼酸铁法的比色鉴定。

若得到的芦丁为液体,可以使用色谱技术进行鉴定,并比对标准品确定芦丁的含量。

四、实验结果及讨论:根据实验操作,我们成功地提取和分离得到了芦丁,并通过比色法或色谱技术进行了鉴定。

通过实验结果,可以初步确定芦丁的含量和纯度。

五、实验总结:通过本次实验,我们学习了芦丁的提取、分离和鉴定方法。

实验结果的准确性和可靠性对于芦丁的研究和应用具有重要意义。

芦丁的提取分离与鉴定实验步骤

芦丁的提取分离与鉴定实验步骤

芦丁的提取分离与鉴定实验步骤
1. 芦丁的提取与分离
芦丁是从柑橘类植物中提取的化合物,它具有抗氧化和抗炎作用,被广泛用于医药和保健品等领域。

下面是芦丁的提取分离实验步骤:1.1 原料准备
准备柑橘类植物(如柚子皮),洗净并晾干备用。

1.2 粉碎
将干燥的柚子皮粉碎成细粉,以便于后续处理。

1.3 提取
将粉碎后的柚子皮放入提取器中,加入适量的乙醇或乙醇-水混合物,摇动提取器,让芦丁溶解在溶剂中。

1.4 分离
用漏斗将提取液分离出来,并加入一定量的水,用醚或苯提取芦丁。

这一步可以反复进行,直到芦丁被完全提取出来。

1.5 精制
用旋转蒸发仪将提取液脱除溶剂,得到芦丁固体。

可以通过再结
晶等方法进行精制。

2. 芦丁的鉴定
芦丁的鉴定是为了确定提取的化合物是芦丁,并确定其纯度和结构等信息。

下面是芦丁的鉴定实验步骤:
2.1 纯度检测
通过色谱等方法检查提取的芦丁的纯度,将纯度较高的芦丁进行下一步实验。

2.2 波长扫描
使用紫外-可见分光光度计对芦丁的最大吸收波长进行扫描。

芦丁的最大吸收波长是在325nm左右。

2.3 质谱分析
通过质谱分析对芦丁进行鉴定。

芦丁的分子量为610g/mol左右,具有明显的分子离子峰(M+)和碎片离子峰。

2.4 核磁共振谱分析
使用核磁共振谱对芦丁进行鉴定。

芦丁的核磁共振谱图有两个明显的峰,代表两个苯环上的羟基。

综上述,通过上述实验步骤可以成功地提取和鉴定芦丁,得到高纯度的芦丁固体,并明确了其结构和纯度等信息,从而为芦丁的应用提供了重要的实验基础。

芦丁的提取分离与鉴定实验记录和结果

芦丁的提取分离与鉴定实验记录和结果

芦丁的提取分离与鉴定实验记录和结果实验记录:
1、芦丁的提取原理
利用芦丁结构中含有多个酚羟基,呈酚酸性,能在碱水中溶解。

的性质,可用碱性溶剂进行提取,提取液加酸后可沉淀析出(碱溶酸沉法)。

也可利用芦丁在冷水中溶解度小,在热水中溶解度大的性质进行提取。

2、芦丁的分离原理
利用芦丁结构在冷乙醇中溶解度小,在热乙醇中溶解度大,以及在热水中溶解度大,在冷水中溶解度小的性质分离。

芦丁用溶剂加热溶解后,趁热抽滤,滤液放冷后能析出而达到分离的H的(如不纯可再重复操作进行分离)。

也可采用醇溶水沉法进行精制。

3、芦丁的鉴定原理
(1)利用吸附薄层色谱的分离原理,芦丁与芦丁对照品在同一条件下进行展开,显色,以达到鉴定芦丁的目的。

(2)通过专属的化学显色反应(如三氯化铝显色反应),确定芦丁的成分类型(黄酮类)。

实验结果记录:
观察斑点颜色,记录图谱并计算Rf值。

总结:
1、本实验出现问题:温度传感器在瓶中与磁子相吸,处理过程中,由于频繁开塞且时间过长,导致大量有效挥发性油物质从侧口挥。

发,最终未能成功收集到大量油性物质。

实验应细心,耐心,不可操之过急。

2、实验的过程也是探索的过程,实验失败,得不到产物,需要我们从失败中总结经验,防止再发生错误;改进实验的方法,寻找合适的方法。

(整理)芦丁的提取分离和鉴定

(整理)芦丁的提取分离和鉴定

综合化学实验: 芦丁的提取分离和鉴定芦丁简介:芦丁(Rutin)又名芸香苷化学式: C27H30O16·3H2O,是一种浅黄色针状结晶有机化合物,广泛存在于自然界植物中,是一种被人们广泛使用的有机天然产物。

目前已发现含有芦丁的植物至少在70种以上,常见的如烟叶、槐花、荞麦和蒲公英中均有不同含量。

尤其以中药槐米(豆科、槐属,槐树Sophora japonica的花蕾)和荞麦中含量最高,因此槐米可作为大量提取芦丁的天然植物原料。

中药槐米(炒碳)味苦性凉、具清热凉血、止血之功。

常用于治疗多种出血症:肠风便血、痔血、尿血、衄血、崩漏下血、赤血下痢等。

西医研究其主要有效成分为有机化合物“芦丁”而中药槐米中芦丁的含量可高达12~16%,是主要的芦丁天然来源。

槐米中还含有槲皮素、三萜皂苷、槐花米甲素、槐花米乙素、槐花米丙素等。

研究文献证明芦丁具有VitP(维生素P)样作用(VitP具有生物类黄酮的功能,可防止维生素C被氧化而受到破坏,增强维生素功效;增加毛细血管壁强度,防止瘀伤。

有助于牙龈出血的预防和治疗,有助于因内耳疾病引起的浮肿或头晕的治疗等)。

而芦丁具有类似作用如可降低毛细血管脆性和调节通透性等,在医学临床上常将其用作毛细血管脆性引起的出血症以及防治高血压病等的辅助治疗药物。

芦丁是由槲皮素(quercetin)3位上的羟基与芸香糖(rutinose,一种由葡萄糖glucose与鼠李糖rhamnose组成的双糖)脱水合成的苷,是一种浅黄色粉末或极细的针状结晶,含有三分子的结晶水,熔点为174~178℃,无结晶水时188~190℃。

溶解度:冷水中为1:10000;热水中1:200;冷乙醇1:650;热乙醇1:60;冷吡啶1:12。

微溶于丙酮、乙酸乙酯,不溶于苯、乙醚、氯仿、石油醚,溶于碱而呈黄色。

补充知识:关于苷(gān)和甙(dài): 苷类(glycosides,旧称甙)又称配糖体,是糖或糖的衍生物的半缩醛羟基与另一类非糖物质中的羟基以缩醛键(甙键)脱水缩合而成的环状缩醛衍生物,水解后能生成糖与非糖化合物。

实验二2-芦丁的提取分离

实验二2-芦丁的提取分离
❖ 3.调碱pH8-9,如果pH<8,芦丁不能完全溶于水, pH>9时加热时糖水解。
❖ 4.调酸pH3-4,如果pH<3,钖盐溶于水,不利于芦 丁的析出,pH>4时酸度不够。
❖ 5.氯仿的作用:防止析出的芦丁霉变。
三、实验目的
1 学习黄酮类成分的提取分离方法
2
掌握黄酮类成分的主要性质
3 掌握TLC鉴定黄酮类化合物的方法
四、实验步骤
1、提取 配制0.4%硼砂水溶液400ml置于1000ml烧杯中,加热
至沸腾,然后加入槐米20g,在搅拌下用饱和石灰水调pH 为8-9。
加热保持微沸30min以上,保持溶液pH为8-9。静置 5-10min,用纱布过滤。
芦丁的提取分离及鉴定
主要内容
1 2 3 4 5
背景介绍 实验目的 实验原理 实验步骤 注意事项
一、背景介绍
❖ 来源——芦丁,又称芸香苷,广泛存在于植物界中, 现已发现含芦丁的植物至少在70种以上,尤以槐花米 和荞麦中含量最高。 槐花米中芦丁的含量可达12-16%。 可作为大量提取芦丁的原料。
❖ 作用——芦丁(又名维生素P),有降低毛细血管通 透性的作用,保持及恢复毛细血管的正常弹性。用于 防治高血压和脑溢血。
❖ 结构性质——芦丁是由槲皮素3位上的羟基与芸香糖脱 水合成的苷。槲皮素是芦丁的苷元。芦丁的极性大于 槲皮素。为浅黄色粉末。溶解性:难溶于冷水,可溶 于热水、甲醇、乙醇、吡啶,易溶于碱水。
二、实验原理
芦丁
槲皮素
芦丁结构中有多个酚羟基,显弱酸性,易溶 于碱液并呈黄色,酸化后又析出。可用“碱提酸沉” 方法进行提取。
重复提取一次,合并滤液。将滤液用盐酸调pH为3-4 左右,再加8滴氯仿,放置过夜。抽滤,水洗3-4次,自然 干燥得粗芦丁。

芦丁的提取分离与鉴定实验原理

芦丁的提取分离与鉴定实验原理

芦丁的提取分离与鉴定实验原理芦丁是一种营养丰富的天然食品添加剂,其含量丰富,口感好,是人们烹饪和食用的重要原料之一。

由于芦丁具有肥胖抑制、血糖稳定、免疫调节、血压降低、预防动脉粥样硬化等功效,它已经受到了越来越多人的喜爱,在作为保健品、膳食补充剂、饮料添加剂等应用领域中也受到了广泛的应用。

由于芦丁含量的高低及其含有的其他物质的复杂性,对芦丁的提取、分离和鉴定均具有重要意义。

芦丁提取是将芦丁从原料中提取出来的一系列活动,是分离和芦丁的前提操作,根据芦丁提取和萃取的原理,采用萃取溶剂改变物质的性质,把有机溶液中的活性成分萃取到有机溶剂层中,从而实现物质提取和分离。

现在,人们主要采用水萃取和溶剂萃取法,才有了提取芦丁的方法。

芦丁分离是在提取溶液中,把芦丁成分从别的成分中分离出来的一系列活动。

它是一种双相分离技术,其中一相是芦丁本身,另一相是其它物质,应用各种不同的物理技术将两相分离。

例如,采用凝胶渗透色谱、高效液相色谱等分离技术,把芦丁内含物与其他物质分离出来。

芦丁鉴定是指在提取和分离完成后,根据物理化学性质和生物学活性,严格检验芦丁的各种特征,明确原料中芦丁的地位,确定提取的芦丁来源、质量或活性的活动。

采用的鉴定方法有荧光光谱分析、层析分析、热分析法、表面活性剂法等。

以上是芦丁提取、分离与鉴定的实验原理,它的实验操作要求十分严格,可以有效提高芦丁产品的质量。

现在,芦丁提取、分离和鉴定技术已经取得显著进展,使得芦丁产品更有保证、更安全。

不仅如此,它还能够进一步提高芦丁产品的活性和质量,为人们提供更高质量的保健产品。

新试验一-芦丁的提取、分离与鉴定

新试验一-芦丁的提取、分离与鉴定

实验一 芦丁的提取、精制与鉴定一、实验目的与要求l 、以芦丁为例学习黄酮类化合物的提取方法;2、掌握黄酮类成分的主要性质及黄酮苷,苷元和糖部分的鉴定方法。

R=-glu-rha 芦丁 R=H 槲皮素芦丁溶解度:冷水1:8000 热水1:200冷乙醇1:300 热乙醇1:30难溶于乙酸乙酯、丙酮,不溶于苯、氯仿、乙醚、及石油醚等溶剂。

槲皮素溶解度:冷乙醇1:650 热乙醇1:60可溶于甲醇、冰醋酸、乙酸乙酯、丙酮、吡啶,不溶于石油醚、乙醚、氯仿和水中。

二、实验原理本实验是利用芦丁在热水中和冷水中溶解度相差较大的性质,用热水提取和精制;芸香苷属于苷类化合物,可被稀酸水解成槲皮素(苷元),葡萄糖和鼠李糖。

芦丁和槲皮素通过化学反应,色谱法和光谱分析进行检识与鉴定。

三、实验内容(一)提取分离和纯化l 、芦丁的提取:2、精制(重结晶):3、芦丁的水解:OO OHOH OROH HO流程图如下:槐米(20g )研碎,于500ml 烧杯中,加350,250ml 水煮沸15min,10min棉花过滤150ml ,1%H 2SO 4直火加热水解30min放置 1-1.5h ,抽滤精品芦丁(水浴浓缩至2ml )(二)鉴定l 、化学检识取芦丁和槲皮素少量,置2支试管中分别加乙醇8ml 使溶解(1)盐酸—镁粉反应:取芦丁和槲皮素乙醇液0.5ml ,置2支试管中分别加浓盐酸5滴,再加少量镁粉,观察颜色变化。

(2)Molish 反应:取芦丁和槲皮素乙醇液0.5ml ,置2支试管中分别加10%α—萘酚0.5ml 摇匀,倾斜试管,沿管壁缓缓滴加浓硫酸0.5ml ,静置,观察二层溶液界面处颜色变化,并比较芦丁和槲皮素的区别。

(3)FeCL 3反应:取芦丁和槲皮素乙醇液0.5ml ,置2支试管中分别加1%三氯化铁乙醇液几滴,观察颜色变化。

(4) AlCl 3反应:取芦丁和槲皮素乙醇液0.5ml ,置2支试管中分别加1%三氯化铝乙醇液几滴,先置可见光下观察后,置紫外灯下观察颜色变化。

芦丁的提取分离及鉴定

芦丁的提取分离及鉴定

此实验中,水提取法制取芦丁的得率为15%,纯度高达 80%,所得产物量与张来新等[2]的研究结果基本符合,实 际产量相当。实验结果表明。芦丁是重要的黄酮类生物活 性物质,槐米中含有丰富的芦丁,通过性质试验及色谱鉴 定,能够清楚的表现处黄酮类化合物的一些性质。但与舒 晓宏等[12]采用频率20 kHz的超声法从槐米中提取芦丁成分 及黄汉昌13],胡杰[15]等采用冷碱(Na2SO3与石灰水混 合—渗漉提取)酸沉淀法相比较则产率太低,原料浪费比 较严重。 因此,本研究认为在探索芦丁的提取方法的过程中,特别是 在医疗方面[10],我们应尽可能采取更高效率的提取方法, 如超声辐射法,热水提大孔吸附树脂纯化法等。无论采用什 么方法,在实验的操作过程中,我们必须做到操作规范,严谨 细致,实事求是。
2. 实验仪器及药品
SHZ-D循环水式真空泵(河南省巩义市英峪 仪器一厂),电热恒温水浴锅(上海医疗器 械五厂),烧杯(1000ml),圆底烧瓶,球 形冷凝管,漏斗,托盘天平,抽滤瓶,布氏 漏斗滤纸,试管,滴管,新华1号滤纸,铅笔, 铁架台,电炉,石棉网,橡皮管。 槐花米(2011年购于同仁堂大药房), 95%乙醇,浓硫酸,浓盐酸,镁粉,醋酸铅 试剂,1-萘酚,正丁醇,醋酸,1%三氯化铝 乙醇溶液,无水乙醇,硼砂水,饱和石灰水。
OH
HO
O
O
OH
O
CH2O
OH
O OH
O
OH OH OH OH
OH
OH
Hale Waihona Puke OHOOH OH O
槲皮素(Quercetin):C15H10O7·2H2O,黄色结晶, mp313~314 ℃(2分子结晶水),316 ℃(无水物)。能溶 于冷乙醇(1:290),易溶于沸乙醇(1:23),可溶于甲醇、 乙酸乙酯、冰醋酸、吡啶、丙酮等;难溶于水、苯、石油醚等 溶剂。
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四、芦丁的鉴定
定性反应鉴别见附录。
(一)芦丁的酸水解
称取精品芦丁2g
置500ml烧瓶中
加2%的H2SO4200ml
加热回流1小时
放冷,静置,抽滤
酸性滤液沉淀
中和冷水洗两次,干燥
用95%乙醇25 ml最后称重,计算收率。
浓缩
黄色细针状结晶
浓缩液(槲皮素)
(供糖的鉴定)
补充知识:
关于苷(gān)和甙(dài):苷类(glycosides,旧称甙)又称配糖体,是糖或糖的衍生物的半缩醛羟基与另一类非糖物质中的羟基以缩醛键(甙键)脱水缩合而成的环状缩醛衍生物,水解后能生成糖与非糖化合物。目前国际上通用“苷”如“皂苷”,而过去习惯使用的中文名称“甙”目前已不再使用如“皂甙”现统称“皂苷”。
展开剂:正丁酵-醋酸-水(BAW)(4:1:5)上层,悬挂并利用上层展开剂纸色谱分离。
显色剂:苯胺以及邻苯二甲酸混合试液,喷后105℃烘10分钟。显棕红色斑点。
注意事项:纸层析展开时可事先用铅笔在裁剪好的层析纸上画出展开起点(即点样的位置)和预制终点(即展开完毕后展开液的前沿),这样方便进行测量计算比移值。另外由于糖液一般无色,因此点样位置也可事先用铅笔点出标记,注意如果糖液浓度过低(实验时应尽量将糖液蒸发浓缩至3毫升以内)则应多次点样以达到浓集的目的,否则展开后的点不够明显。点样时也需要注意点样液斑不易扩散太大,应控制液斑直径在3 mm以内,同时各点样点之间应尽量保持距离不可过于靠近,否则展开后可能得到较大的样班,而且不同样斑之间可能重合相互干扰而不易测量比移值。下图给出正确的纸层析法标示。
综合化学实验:芦丁的提取分离和鉴定
芦丁简介:
芦丁(Rutin)又名芸香苷化学式: C27H30O16·3H2O,是一种浅黄色针状结晶有机化合物,广泛存在于自然界植物中,是一种被人们广泛使用的有机天然产物。目前已发现含有芦丁的植物至少在70种以上,常见的如烟叶、槐花、荞麦和蒲公英中均有不同含量。尤其以中药槐米(豆科、槐属,槐树Sophorajaponica的花蕾)和荞麦中含量最高,因此槐米可作为大量提取芦丁的天然植物原料。
(2)槐花二醇(sophoradiol)无色针晶,mp219~224℃,溶于石油醚、苯、丙酮、甲醇、难溶于水。
(1)(2)
芦丁属于黄酮苷,分子中具有酚羟基,显酸性,因此可溶于稀碱液中,在酸液中沉淀析出,可利用此性质进行提取分离。利用芦丁易溶热水、热乙醇,较难溶于冷水、冷乙醇的性质选择重结晶方法进行精制。芦丁可被稀酸水解生成槲皮素及葡萄糖、鼠李糖,依此进行制备槲皮素。通过纸色谱及紫外光谱等可进行黄酮及糖的鉴定。芦丁酸性条件下水解的过程见下反应方程式:
③三氯化铝光谱,在盛有样品液的石英杯中,加入三氯化铝6滴,放置1分钟后进行测定。测定后加入3滴盐酸溶液(盐酸:水=1:1)再进行测定。
④醋酸钠光谱:取样品液约3ml,加入过量的无水醋酸钠固体,摇匀(杯底剩有约2mg的醋酸钠),加入醋酸钠后两分钟内测定,5分钟到10分钟后再测定一次。
3.芦丁及槲皮素的色谱
(上述贮备液可放置六个月)
(2)芦丁溶液的配制
精密称取芦丁纯品0.5g,用甲醇适量溶解至50ml容量瓶中,用甲醇稀释至刻度。
(3)光谱的测定
①甲醇光谱:取样品液置石英杯中,至200~500nm内进行扫描,重复一次,观察紫外光谱。
②甲醇钠光谱:取样品液置石英杯中,加入甲醇钠溶液3滴后,立即测定,放置5分钟后再测一次。
2、实验原理(预习报告完成)
3、实验步骤:
(1)要求将实验内容分拆,并画出流程图(预习报告完成)
(2)要求写明各试剂的用量和加入时间(实验报告完成)
(3)要求写明各试剂的用途和各步骤的目的和实验原理(实验报告完成)
4、实验数据
5、描述实验结果
6、对实验数据进行处理和分析,并分析实验结果的合理性。(实验后完成)
7、回答讲义后思考题
中药槐米(炒碳)味苦性凉、具清热凉血、止血之功。常用于治疗多种出血症:肠风便血、痔血、尿血、衄血、崩漏下血、赤血下痢等。西医研究其主要有效成分为有机化合物“芦丁”而中药槐米中芦丁的含量可高达12~16%,是主要的芦丁天然来源。槐米中还含有槲皮素、三萜皂苷、槐花米甲素、槐花米乙素、槐花米丙素等。研究文献证明芦丁具有VitP(维生素P)样作用(VitP具有生物类黄酮的功能,可防止维生素C被氧化而受到破坏,增强维生素功效;增加毛细血管壁强度,防止瘀伤。有助于牙龈出血的预防和治疗,有助于因内耳疾病引起的浮肿或头晕的治疗等)。而芦丁具有类似作用如可降低毛细血管脆性和调节通透性等,在医学临床上常将其用作毛细血管脆性引起的出血症以及防治高血压病等的辅助治疗药物。
3.注意观察槲皮素制备过程中的实验现象。
六、思考题
1.苷类结构检识的一般程序?
2.苷类水解的催化方法?
3.怎样确定芦丁结构中糖基是否联结在槲皮素3-O位上?
4.怎样证明芦丁分子中只含有一个葡萄糖及一个鼠李糖?
5.UV在黄酮类化合物结构鉴定中的应用。
附录:芦丁的定性检测
1.芦丁的定性反应
取芦丁适量,加乙醇使溶解,分成三份供下述试验用:
注意:薄层层析点样注意事项依照纸层析
五、实验说明及注意事项
1.用石灰水调节芦丁提取溶液的pH,既可以达到碱提取芦丁的目的,还可以除去槐米中含有的大量粘液质。但钙离子浓度及pH值均不宜过高,否则多余的钙能与芦丁形成螯合物沉淀,同时黄酮结构在强碱性条件下易被破坏。
2.调PH时,应注意PH不要过低,因为PH过低(pH2以下)会使芦丁形成钅羊盐而使已形成的沉淀重新溶解,同时黄酮母核也会在强碱性条件下被破坏,导致收率下降。
(2)要求写明各试剂的用途和各步骤的目的和实验原理
4、回答指导教师提出的问题
实验报告:
实验报告一律每班用一样大小软皮本,正面写实验报告,背面写实验记录,上课前交预习报告和上一次的实验报告(预习报告和实验报告写一份即可)。
组号同组人(预习报告完成)
天气情况实验室温度湿度(预习报告完成)
1、实验目的(预习报告完成)
2.槲皮素(quercetin)为芦丁的苷元其分子式为:C15H10O7·2H2O,黄色结晶,mp313~314℃(2分子结晶水),316℃(无水物)。能溶于冷乙醇(1:290),易溶于沸乙醇(1:23),可溶于甲醇、乙酸乙酯、冰醋酸、吡啶、丙酮等;难溶于水、苯、石油醚等溶剂。一般在碱水中溶解显黄色。
(二)糖的鉴定(纸色谱法)
纸层析鉴定:采用中速层析滤纸(裁剪尺寸:5×20cm)取水解母液20ml,于水浴上加热,同时于搅拌下加BaCO3细粉中和至中性,过滤去多余BaCO3后,滤液浓缩至2~3ml,得样品液供纸色谱点样用。
标准对照品:以葡萄糖和鼠李糖标准品作对照(1%葡萄糖标准品醇溶液及1%鼠李糖标准品醇溶液)。
芦丁是由槲皮素(quercetin)3位上的羟基与芸香糖(rutinose,一种由葡萄糖glucose与鼠李糖rhamnose组成的双糖)脱水合成的苷,是一种浅黄色粉末或极细的针状结晶,含有三分子的结晶水,熔点为174~178℃,无结晶水时188~190℃。溶解度:冷水中为1:10000;热水中1:200;冷乙醇1:650;热乙醇1:60;冷吡啶1:12。微溶于丙酮、乙酸乙酯,不溶于苯、乙醚、氯仿、石油醚,溶于碱而呈黄色。
(1)盐酸镁粉试验:取样品液适量,加2滴浓HCl、再酌加少许镁粉,即产生剧烈的反应,并逐渐出现红色至深红色。
(2)锆-枸试验:取样品液适量,然后加2%ZrOCl2的甲醇溶液,注意观察颜色变化,再加入2%枸椽酸的甲醇溶液,并详细记录颜色变化。
(3)α-萘酚-浓硫酸反应:取样品液适量,加等体积的l0%α-萘酚乙醇溶液,摇匀,沿管壁缓加浓硫酸,注意观察两液界面的颜色。
三、提取分离和纯化
注1:硼砂因能与芦丁结合,起保护邻二酚羟基,不被氧化破坏的作用,实验证明,提取时加入硼砂,产品质量要好些。
注2:加石灰乳既能达到碱溶解提取芦丁的目的,还可以除去槐花米中大量的粘液质和酸性树脂(形成钙盐沉淀),但pH不能过高和长时间煮沸,因为会导致芦丁的降解。
注3:pH过低会使芦丁形成锌盐而降低收率。
3.皂苷(saponin)一般为白色粉末,mp210℃~220℃。易溶于吡啶。能溶于甲醇(1:200),可酸水解得下列两种苷元及糖。糖为葡萄糖,葡萄糖醛酸和葡萄醛酸内酯。
(1)白桦酯醇(betulin)无色针晶,mp215~220℃,能溶于醋酸,丙酮、醋酸乙酯、甲醇、乙醇、氯仿、苯等;难溶于石油醚和水。
一、目的要求:
1.通过芦丁的提取与精制掌握碱酸法提取黄酮类化合物的原理及操作。
2、掌握化学鉴别试验、苷水解、衍生物制备、熔点和薄层层析检测等手段在苷类结构鉴定上的作用。
3、通过UV、IR、HNMR和MS图谱解析,了解光谱方法黄酮类化合物结构鉴定中的作用。
二、已知重要成分性质:
1.芦丁(rutin):分子式C27H30O16·3H2O,为浅黄色针状结晶物,mp174~178℃(含三分子水);100mmHg和110℃加热12小时后,变为无水物,115~117℃软化,214~215℃发泡分解。难溶于乙醚、三氯甲烷、石油醚、乙酸乙酯、丙酮、二硫化碳、苯等,易溶于吡啶,甲酰胺特别是碱液。通常常用的溶剂下其溶解情况为:较难溶于冷水(1:8000~10000),冷乙醇(1:650);可溶于热水(1:180~200)以及冷甲醇(1:100);较易溶于热乙醇(1:60)和热甲醇(1:10)。
(三)芦丁和槲皮素的薄层层析鉴定
吸附剂:硅胶G(400目)以0.4%羧甲基纤维素钠(CMC-Na)水液作为粘合剂制薄层层析板,板片自然阴干后于烘箱中100℃活化1小时。
展开剂:(1)CHCl3-MeOH-HCOOH(15:5:1)
(2)CHCl3-丁酮-HCOOH(5:3:1)
显色剂:1%的FeC13和1%的K3[Fe(CN)6]水溶液,使用时等体积混和。
2.芦丁的UV
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