母液的配制ppt课件

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铁盐母液的配制方法是：
用电子天平称取硫酸亚（FeSO4.7H2O）和乙二胺四乙酸 二钠（Na2-EDTA），分别用蒸馏水加热溶解，煮沸，使之全 部溶解，溶解后混合后继续煮沸几分钟（约加热5min至溶液
呈金黄色)，冷却后定容至500ml的容量瓶中，倒入棕色磨口
试剂瓶中，经室温放置一段时间令其充分反应后，贴上标签，
培养基类型：MS培养基、B5培养基、N6培养基
MS培养基是由Marashige和Skoog为培养烟草组 织而设计的，是应用最为广泛的培养基。
根据培养材料的种类、有针对性地选择 适宜的培养基，没有任何一种培养基可适合 所有情况下的组织培养。
母液的配制
培养基制备是植物组织培养的基本工作。培养基含 有很多化学成分，而且数量多少不等，性质各有差异。
目前常用的铁盐是硫酸亚铁和乙二胺四乙酸二 钠的螯合物，必须单独配成母液。这种螯合物使 用起来方便，比较稳定，且不易发生沉淀。
母液的配制
3、MS铁盐母液的配制
药品名称
规定用量 扩大 称取量mg 母液定容
mg /L 倍数
体积 ml
FeSO4.7H2O
27.8 100 1390
Na2-EDTA
37.3
100 1865
母液的配制
三、实验器具与药品 电子分析天平、托盘天平、烧杯（50ml, 100ml,
500ml, 1000ml）、量筒（1000ml,100ml, 25ml）、 容量瓶（1000ml,500ml,100ml）、药勺、称量纸、 玻璃棒、滴管、电炉、冰箱。
母液的配制
四、母液配制流程图
确定培养基 贴标签
注明配制日期、扩大倍数、配制人姓名、置于4℃冰箱保存备
用。
母液的配制
如果将新配制的铁盐母液立即放入冰箱中。 则会容易形成沉淀。
按试剂种类和性质将其分别称量、分别溶解、分别配 制、单独保存或几种混合保存，配制培养基时在按比列吸 取即可。
配制母液及培养基时要选用蒸馏水，以免带入杂物质 对培养材料产生不利影响。
母液的配制
实验一 MS培养基贮备液（母液）的配制
一、实验目的
熟悉MS培养基的组成，掌 握贮备液（母液）的配制方法。
母液的配制
CuSO4·5H2O 0.025 1000 25
CoCl2·6H2O
0.025 母液的1配0制00 25
3.铁盐母液的配制 Fe是用量较多的一种微量元素，因铁离子在水
溶液中不稳定，易与氢氧根离子结合二发生沉淀， 必须单独配制。只有其螯合物才容易被植物吸收 和利用，因此需要单独配制成铁盐螯合物母液。
二、实验原理： 配制培养基时，为了使用方便和用量准确，通
常采用母液法进行配制，即将所选培养基配方中各 试剂的用量，扩大若干倍后再准确称量，分别先配 制成一系列的母液置于冰箱中保存，使用时按比例 吸取母液进行稀释配制即可。
以MS培养基为例，所需配制的母液可分为： MS大量元素母液、MS微量元素母液、MS铁盐母液 和MS有机化合物母液等。另外，还要配制生长物质 母液，在不同类型的培养基中使用。
母液的配制
2、微量元素母液的配制
药品名称
规定用量 扩大
ml/L
倍数
称取量mg 母液定容 体积 ml
MnSO4·4H2O 22.3
1000 22300
ZnSO4·7H2O 8.6
H3BO3
6.2
1000 8600 1000 6200
1000
KI
0.83
Na2MoO4·2H2O 0.25
1000 830 1000 250
母液的配制
（3）CaCl2·2H2O要在最后单独加入（因为氯化钙易与磷 酸二氢钾形成磷酸三钙、磷酸钙之类不溶于水的沉淀）。
（4）然后，倒入细口磨砂试剂瓶中，贴上标签，注明配制 日期、扩大倍数、配制人姓名、置于4℃冰箱保存备用。
母液的配制
2.微量元素母液的配制
将MS培养基配方中微量元素的无机盐用量分别扩大1000倍， 用电子天平分别依次称取MnSO4·4H2O 22.3g， ZnSO4·7H2O 8.6g , H3BO3 6.2g，KI 0.83g，Na2MoO4·2H2O 0.25g， CuSO4·5H2O 0.025g， CoCl2·6H2O 0.025g，并用重蒸水逐个 溶解，待全部溶解再依次混合后用容量瓶定容至1000ml，后倒 入细口磨砂试剂瓶中，贴上标签，注明配制日期、扩大倍数、 配制人姓名、置于4℃冰箱保存备用。
按照扩大倍 数称量
母液分装
溶解 按顺序混合
定容
保存于冰箱
母液的配制
五、实验方法及步骤 1.大量元素母液的配制
即含N、P、K、Ca、Mg、S六种元素的混合溶液， 一般配成浓度为10倍或20倍的母液。
药品名称
KNO3 NH4NO3 MgSO4·7H2O KH2PO4
规定用量 扩大 mg /L 倍数
1900 10
理论知识：
培养基：是植物组织培养的物质基础，也是组织培养 能否成功的重要因素之一。
培养基的主要成分是植物生长发育所必需的各种营养元素。
（主要成分） 无机盐类：大量元素、、铁盐 有机营养成分：维生素、肌醇、氨基酸等 植物生长调节剂：细胞分裂素类、 生长素类： IAA（吲哚乙酸）、 萘乙酸 （NAA）
母液的配制
特别是微量元素、维生素等微量成分，因用量少，不仅 称量麻烦，还容易出现误差，所以配制母液是科学和方便 的方法。使用母液不但可以保证培养基个物质成分的准确 性及配制的方便性，且便于低温保藏，从而提高工作效率。
母液的配制
储备液（母液）
母液是将培养基成分扩大若干倍，一般为10倍、20倍、 100倍甚至更高倍数的浓缩溶液。
称取量mg 19000
母液定容 体积 ml
1650 10 16500
370
10 3700
170
10 1700
1000
CaCl2·2H2O
440ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
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母液的配制
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注意： (1) 配制是各化合物应分别称量、分别溶解，经充分溶解后才
能混合。
（2）某些无机成分如Ca2+、SO42一、Mg 2十和H2PO4一等在 一起可能发生化学反应，产生沉淀物。为避免此现象发生，各种 化学药品必须先以少量蒸馏水使其充分溶解后才能混合，混合时 应注意先后顺序。速度宜慢，边搅拌边混合。待第一种化合物溶 解后再加入第二种化合物，当最后一种化合物完全溶解后，将溶 液倒入容1000ml的量瓶中，再加水定容1000ml 。