湿热灭菌(1)
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降一个对数单位)所需的时 间，以分(钟)表示。D值越大，说明该微生物的耐热性越强。不同的微生物在 不同环境条件下具有各不相同 的D值。 (2) Z值
Z值即灭菌温度系数，系指使某一种微生物的D值下降一个对数单位，灭菌 温度应升高的值(℃)，通常 取10℃。 (3) F值
F值为灭菌程序所赋予待灭菌品在温度T下的灭菌时间，以分(钟)表示。由 于D值是随温度的变化而变化，所以要在不同温度下达到相同的灭菌效果，F 值将会随D值的变化而变化。灭菌温度高时，F值就小，灭菌温度较低时，所 需F值就大。 (4) F0值
项Hale Waihona Puke Baidu14 灭菌设备
1. 概念 2. 常用的灭菌方法
14.1 概念
❖ 灭菌：用物理或化学的方法杀灭或去除 物料或设备中所有微生物的过程。
14. 2 常用的灭菌方法
1. 干热灭菌 2. 湿热灭菌 3. 紫外线灭菌 4. 化学药品灭菌 5. 过滤除菌
第二节 湿热灭菌设备
❖ 物质在灭菌器内利用高温高压的水蒸气或其他热力 学灭菌手段杀灭细菌的方法。
高压蒸汽灭菌器的基本构造如下：
1. 外锅 或称“套层”，供贮存蒸汽用，连有用电加热的蒸汽
发生器，并有水位玻管以标志盛水量。外锅的外侧一般包有 石棉或玻璃棉绝缘层以防止散热。如直接使用由锅炉接入的 高压蒸汽，则外锅在使用时充满蒸汽，作为内锅保温之内锅 或称灭菌室，是放置灭菌物的空间．可配制铁蓖架以分放灭 菌物
F0值即标准灭菌时间，系灭菌过程赋予待灭菌物品在121℃下的等效灭菌 时间，即T＝121℃、Z＝10℃ 时的F值。121℃为标准状态，F0值即为标准灭菌时间，以分(钟)表示
5. 灭菌率L L值系指在某温度下灭菌1分钟
所相应的标准灭菌时间(分钟)， 即F和F的比值(L＝F/F)。当Z＝ 10℃时，不同温度下的L值是不 同的(见表1)。不同Z值下的灭菌 率均可查得。
❖ 用于输液瓶、口服液的灭菌，操作简单方便
❖ (1)灭菌原理 ❖ 高压蒸汽灭菌是在密闭的高压蒸汽灭菌器(锅)中进行的。其原理是：
将待灭菌的物体放置在盛有适量水的高压蒸汽灭菌锅内。把锅内的水加 热煮沸，并把其中原有的冷空气彻底驱尽后将锅密闭。再继续加热就会 使锅内的蒸汽压逐渐上升，从而温度也随之上升到100℃以上。为达到 良好的灭菌效果，一般要求温度应达到121℃(压力为0.1MPa)，时间维 持15-30min。也可采用在较低的温度(115℃，即0.075MPa)下维持 35min的方法。此法适合于一切微生物学实验室、医疗保健机构或发酵 工厂中对培养基及多种器材、物品的灭菌。蒸汽压力与温度的关系如表 2-2所示。 ❖ 在使用高压蒸汽灭菌器进行灭菌时，蒸汽灭菌器内冷空气的排除是否完 全极为重要，因为空气的膨胀压大于水蒸汽的膨胀压；所以当水蒸汽中 含有空气时，压力表所表示的压力是水蒸气压力和部分空气压力的总和， 不是水蒸气的实际压力．它所相当的温度与高压灭菌周内的温度是不一 致的。这是因为在同一压力下的实际温度，含空气的蒸汽低于饱和蒸汽。 见表2-3所示。
1.259 1.585 1.995 2.513 3.162 3.984 5.012 6.329 7.943 0.000 2.600 5.873
2湿热灭菌设备
❖ 1）高压蒸汽灭菌器
❖ 是应用最早、最普遍的一种灭菌设备。常用 的有手提式、卧式、立式热压灭菌器。
❖ 以蒸汽为灭菌介质，用一定压力的饱和蒸汽， 直接通入灭菌柜中，对待灭菌品进行加热， 冷凝后的饱和水及过剩的蒸汽由柜体底部排 出。
❖ 由上表看出：如不将灭菌锅中的空气排除干净，即 达不到灭菌所需的实际温度。因此，必须将灭菌器 内的冷空气完全排除，才能达到完全灭菌的目的。
在空气完全排除的情况下，一般培养基只需在 0.1MPa下灭菌30min即可。但对某些物体较大或蒸 汽不易穿透的灭菌物品，如固体曲料、土壤和草炭 等，则应适当延长灭菌时间，或将蒸汽压力升到 0.15MPa保持1-2h。
6. 热源 除直接引入锅炉蒸汽灭菌外，都具有加热装置。近年来的产
表1
温度 T/℃ 121 120 119 118 117 116 115 114 113 112 111 110 109
灭菌率L 1.00 0.794 0.631 0.501 0.398 0.316 0.251 0.199 0.158 0.126
0.1001 0.0791 0.0631
灭菌时间F/ 分 1.00
4. 排气阀 一般外锅、内锅各一个，用于排除空气。新型的灭菌器多
在排气阀外装有汽液分离器(或称疏水阀)．内有由膨胀盒控制的活塞。 利用空气、冷凝水与蒸汽之间的温差控制开关，在灭菌过程中，可 不断地自动排出空气和冷凝水。
5. 安全阀 或称保险阀．利用可调弹簧控制活塞，超过额定压力即自
动放气减压。通常调在额定压力之下，略高于使用压力。安全阀只 供超压时安全报警之用，不可在保温时用作自动减压装置。
表1为Z＝10℃时，不同温度T 下的灭菌率L和所相当的灭菌时 间F L=10
6. 无菌保证值 (SAL)(SterilityAssuranceLevel) 无菌保证值为灭菌产品经灭菌
后微生物残存概率的负对数值， 表示物品被灭菌后的无菌状态。 按国际标
准，规定湿热灭菌法的无菌保证 值不得低于6，即灭菌后微生物 存活的概率不得大于百万分之一。
❖ 蒸汽比热容大，穿透力强，容易使蛋白质变性或凝 固，故其灭菌可靠，操作简便、易于控制，具有灭 菌效率高，经济实用等特点。是目前制剂生产中应 用最广泛的一种灭菌方法。
❖ 缺点：对湿热敏感药物不适用。
1．湿热灭菌的有关参数
(1) D值 D值即微生物的耐热参数，系指一定温度下，将微生物杀灭90％(即使之下
2. 压力表 内外锅各装一只，老式的压力表上标明三种单位：
公斤压力单位(kg/cm2)，英制压力单位(1b/in2)和温度单位 (℃)，便于灭菌时参照。现在的压力表用MPa表示。
3. 温度计 可分为两种，一种是直接插入式的水银温度计，装
在密闭的铜管内，焊插在内锅中．另一种是感应式仪表温度 计，其感应部分安装在内锅的排气管内，仪表安装于锅外顶 部．便于观察。
Z值即灭菌温度系数，系指使某一种微生物的D值下降一个对数单位，灭菌 温度应升高的值(℃)，通常 取10℃。 (3) F值
F值为灭菌程序所赋予待灭菌品在温度T下的灭菌时间，以分(钟)表示。由 于D值是随温度的变化而变化，所以要在不同温度下达到相同的灭菌效果，F 值将会随D值的变化而变化。灭菌温度高时，F值就小，灭菌温度较低时，所 需F值就大。 (4) F0值
项Hale Waihona Puke Baidu14 灭菌设备
1. 概念 2. 常用的灭菌方法
14.1 概念
❖ 灭菌：用物理或化学的方法杀灭或去除 物料或设备中所有微生物的过程。
14. 2 常用的灭菌方法
1. 干热灭菌 2. 湿热灭菌 3. 紫外线灭菌 4. 化学药品灭菌 5. 过滤除菌
第二节 湿热灭菌设备
❖ 物质在灭菌器内利用高温高压的水蒸气或其他热力 学灭菌手段杀灭细菌的方法。
高压蒸汽灭菌器的基本构造如下：
1. 外锅 或称“套层”，供贮存蒸汽用，连有用电加热的蒸汽
发生器，并有水位玻管以标志盛水量。外锅的外侧一般包有 石棉或玻璃棉绝缘层以防止散热。如直接使用由锅炉接入的 高压蒸汽，则外锅在使用时充满蒸汽，作为内锅保温之内锅 或称灭菌室，是放置灭菌物的空间．可配制铁蓖架以分放灭 菌物
F0值即标准灭菌时间，系灭菌过程赋予待灭菌物品在121℃下的等效灭菌 时间，即T＝121℃、Z＝10℃ 时的F值。121℃为标准状态，F0值即为标准灭菌时间，以分(钟)表示
5. 灭菌率L L值系指在某温度下灭菌1分钟
所相应的标准灭菌时间(分钟)， 即F和F的比值(L＝F/F)。当Z＝ 10℃时，不同温度下的L值是不 同的(见表1)。不同Z值下的灭菌 率均可查得。
❖ 用于输液瓶、口服液的灭菌，操作简单方便
❖ (1)灭菌原理 ❖ 高压蒸汽灭菌是在密闭的高压蒸汽灭菌器(锅)中进行的。其原理是：
将待灭菌的物体放置在盛有适量水的高压蒸汽灭菌锅内。把锅内的水加 热煮沸，并把其中原有的冷空气彻底驱尽后将锅密闭。再继续加热就会 使锅内的蒸汽压逐渐上升，从而温度也随之上升到100℃以上。为达到 良好的灭菌效果，一般要求温度应达到121℃(压力为0.1MPa)，时间维 持15-30min。也可采用在较低的温度(115℃，即0.075MPa)下维持 35min的方法。此法适合于一切微生物学实验室、医疗保健机构或发酵 工厂中对培养基及多种器材、物品的灭菌。蒸汽压力与温度的关系如表 2-2所示。 ❖ 在使用高压蒸汽灭菌器进行灭菌时，蒸汽灭菌器内冷空气的排除是否完 全极为重要，因为空气的膨胀压大于水蒸汽的膨胀压；所以当水蒸汽中 含有空气时，压力表所表示的压力是水蒸气压力和部分空气压力的总和， 不是水蒸气的实际压力．它所相当的温度与高压灭菌周内的温度是不一 致的。这是因为在同一压力下的实际温度，含空气的蒸汽低于饱和蒸汽。 见表2-3所示。
1.259 1.585 1.995 2.513 3.162 3.984 5.012 6.329 7.943 0.000 2.600 5.873
2湿热灭菌设备
❖ 1）高压蒸汽灭菌器
❖ 是应用最早、最普遍的一种灭菌设备。常用 的有手提式、卧式、立式热压灭菌器。
❖ 以蒸汽为灭菌介质，用一定压力的饱和蒸汽， 直接通入灭菌柜中，对待灭菌品进行加热， 冷凝后的饱和水及过剩的蒸汽由柜体底部排 出。
❖ 由上表看出：如不将灭菌锅中的空气排除干净，即 达不到灭菌所需的实际温度。因此，必须将灭菌器 内的冷空气完全排除，才能达到完全灭菌的目的。
在空气完全排除的情况下，一般培养基只需在 0.1MPa下灭菌30min即可。但对某些物体较大或蒸 汽不易穿透的灭菌物品，如固体曲料、土壤和草炭 等，则应适当延长灭菌时间，或将蒸汽压力升到 0.15MPa保持1-2h。
6. 热源 除直接引入锅炉蒸汽灭菌外，都具有加热装置。近年来的产
表1
温度 T/℃ 121 120 119 118 117 116 115 114 113 112 111 110 109
灭菌率L 1.00 0.794 0.631 0.501 0.398 0.316 0.251 0.199 0.158 0.126
0.1001 0.0791 0.0631
灭菌时间F/ 分 1.00
4. 排气阀 一般外锅、内锅各一个，用于排除空气。新型的灭菌器多
在排气阀外装有汽液分离器(或称疏水阀)．内有由膨胀盒控制的活塞。 利用空气、冷凝水与蒸汽之间的温差控制开关，在灭菌过程中，可 不断地自动排出空气和冷凝水。
5. 安全阀 或称保险阀．利用可调弹簧控制活塞，超过额定压力即自
动放气减压。通常调在额定压力之下，略高于使用压力。安全阀只 供超压时安全报警之用，不可在保温时用作自动减压装置。
表1为Z＝10℃时，不同温度T 下的灭菌率L和所相当的灭菌时 间F L=10
6. 无菌保证值 (SAL)(SterilityAssuranceLevel) 无菌保证值为灭菌产品经灭菌
后微生物残存概率的负对数值， 表示物品被灭菌后的无菌状态。 按国际标
准，规定湿热灭菌法的无菌保证 值不得低于6，即灭菌后微生物 存活的概率不得大于百万分之一。
❖ 蒸汽比热容大，穿透力强，容易使蛋白质变性或凝 固，故其灭菌可靠，操作简便、易于控制，具有灭 菌效率高，经济实用等特点。是目前制剂生产中应 用最广泛的一种灭菌方法。
❖ 缺点：对湿热敏感药物不适用。
1．湿热灭菌的有关参数
(1) D值 D值即微生物的耐热参数，系指一定温度下，将微生物杀灭90％(即使之下
2. 压力表 内外锅各装一只，老式的压力表上标明三种单位：
公斤压力单位(kg/cm2)，英制压力单位(1b/in2)和温度单位 (℃)，便于灭菌时参照。现在的压力表用MPa表示。
3. 温度计 可分为两种，一种是直接插入式的水银温度计，装
在密闭的铜管内，焊插在内锅中．另一种是感应式仪表温度 计，其感应部分安装在内锅的排气管内，仪表安装于锅外顶 部．便于观察。