β-葡萄糖苷酶(β-Glucosidase, β-GC)试剂盒说明书

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α-葡萄糖苷酶(α-Glucosidase)使用说明

α-葡萄糖苷酶(α-Glucosidase)使用说明

α-葡萄糖苷酶(α-Glucosidase)使用说明货号:G8820规格:1g/5g级别:BR其他名称:α-D-葡萄糖苷酶;α-葡糖苷酶CAS号:9001-42-7提取来源:黑曲霉产品简介:α-葡萄糖苷酶(α-Glucosidase,EC 3.2.1.20)又被称为α-葡萄糖苷水解酶或葡萄糖基转移酶(GTase),是一种α-D-葡萄糖苷酶。

它可以从低聚糖类底物的非还原末端切开α-1,4-糖苷键释放出葡萄糖,或将游离的葡萄糖残基转移到另一糖类底物形成α-1,6-糖苷键,从而得到非发酵性的低聚糖。

α-葡萄糖苷酶来源广泛,在人体糖原的降解和动植物、微生物的糖类代谢方面具有重要的生理功能。

α-葡萄糖苷酶广泛应用于食品和发酵工业、化学工业以及医学应用等行业。

酶活定义:每小时产生1μg葡萄糖所需的酶量定义为一个α-葡萄糖苷酶活力单位。

酶活检测方法:参见QB2525-2001。

产品特性:酶活力:300000U/g最适作用温度:50℃,合适的作用温度:50-55℃。

最适作用pH:5.0,合适的作用pH:4.8-5.4。

外观:淡白色粉末或淡黄色液体,分子量约为68.5KD,无臭无味,溶于水,不溶于乙醚和乙醇。

用途:生化研究。

能水解葡萄糖苷(Glucoside)成葡萄糖和其他组成物质,是一种具有生物催化剂功能的蛋白质。

本产品的建议添加量为800U/g干物质,根据实际情况改变添加量。

抑制剂:铜、钛、钴等金属离子对本品有一定的影响。

铅、铝、锌等金属离子对本品有较强的抑制作用。

贮存:建议密封储藏于干燥、低温的环境中(≤25℃),最好在冷藏条件下(4-8℃)储藏。

25℃以下,液体可以储存3个月,保质期内酶活不会降低于产品标示的活力;4℃以下,可较长时间储存。

葡萄糖测定试剂盒(葡萄糖氧化酶法)产品技术要求beiken

葡萄糖测定试剂盒(葡萄糖氧化酶法)产品技术要求beiken

葡萄糖测定试剂盒(葡萄糖氧化酶法)适用范围:本产品用于体外定量测定人血清中葡萄糖(GLU)的浓度。

1.1包装规格1.2产品组成成分试剂盒为单一液体试剂,主要组成成分如下:2.1外观试剂为微红色溶液,透明、无沉淀及絮状悬浮物,外包装完整无破损。

2.2净含量用通用量具量取,体试剂的装量不少于标示量。

2.3试剂空白吸光度用蒸馏水测试试剂盒,在500nm波长、1.0cm光径下,试剂空白吸光度应不大于0.2。

2.4分析灵敏度测试0.0126mmol/L的葡萄糖引起的吸光度变化应大于0.0004。

2.5线性区间葡萄糖的测试范围[2.2,25]mmol/L,线性相关系数(r)应不小于0.990;当测试范围在[2.2,4.0)mmol/L区间内,绝对偏差不超过±0.4mmol/L;当测试范围在[4.0,25]mmol/L区间内,相对偏差不超过±10%。

2.6精密度2.6.1批内精密度分别用高、中、低三个水平的质控品测试试剂盒,所得结果的变异系数(CV)应不大于5.0%。

2.6.2批间精密度用同一质控品分别测试三个不同批号的试剂盒,其相对极差(R)应不大于10.0%。

2.7准确度测试标准物质(编号:GBW(E)090544、GBW(E)090545、GBW(E)090546、GBW09174),当浓度≤4.16mmol/L,实测值与标示值偏差应不超过±0.833mmol/L;当浓度>4.16mmol/L时,实测值与标示值的偏差应不超过±20%。

2.8稳定性贮存在2℃~8℃条件下保存至有效期末,产品性能应符合2.1、2.3、2.4、2.5、2.6.1、2.7的要求。

葡萄糖检测试剂盒(邻甲苯胺比色法)

葡萄糖检测试剂盒(邻甲苯胺比色法)

仅供科研版本号:180720 葡萄糖检测试剂盒(邻甲苯胺比色法)【产品组成】【保存条件】4℃,避光,6个月【产品概述】葡萄糖(Glucose,Dextrose,Glu)又称玉米葡糖,简称葡糖,化学式C6H12O6,分子量为180.16,是自然界分布最广、最重要的一种单糖,属于多羟基醛。

用酶学方法测定葡萄糖是生化检测中的常用方法,最常用的有葡萄糖氧化酶法、己糖激酶法,上述酶学法特点是:1、灵敏度、准确度、精密度均高;2、使用温和的反应条件;3、操作简便;4、适用于自动分析仪。

测定葡萄糖亦可通过邻甲苯胺法、苯胺法、联苯胺法等实现。

葡萄糖检测试剂盒(邻甲苯胺比色法)检测原理是葡萄糖在加热的有机酸中脱水后能与邻甲苯胺缩合呈雪夫氏碱,后者呈蓝绿色,其最高吸收峰为630nm颜色深浅与葡萄糖含量成正比,经分光光度计与标准品进行对比求得葡萄糖量。

本试剂盒专门用于人或动物的血清、血浆、脑脊液、细胞、组织等样本中的葡萄糖含量定量测定。

本试剂盒的特点:1、特异性高,其测定结果为真糖值;2、不受还原物质干扰;3、无需去除血浆或血清中的蛋白质。

本试剂盒仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。

【使用方法】1、样本处理:①血清、血浆、脑脊液样本:从待测样本中分理出的血清或血浆不应有溶血,直接检测,如超过线性范围(25mmol/L),用蒸馏水稀释后检测。

②细胞样本:a、取适量的细胞(一般推荐>106以上),1000g离心10min,弃上清,留取沉淀。

b、用PBS或生理盐水清洗1~2次,1000g离心10min,弃上清,留取沉淀。

c、加入200~300μl的PBS或生理盐水匀浆,冰浴条件下超声破碎细胞,功率300W,每次3~5s,间隔30s,重复3~5次。

亦可手动匀浆,制备好的匀浆液不可离心,待用。

亦可用1~2%Triton X-100冰浴30~60min,制备好的裂解液不可离心,待用。

③组织样本:准确称取适量组织样本,按质量(g):生理盐水或PBS(ml)=1:9的比例,加入生理盐水或PBS,冰浴条件下手动或机械匀浆。

葡萄糖检测试剂盒(O-toluidine 法) 产品说明书

葡萄糖检测试剂盒(O-toluidine 法) 产品说明书

葡萄糖检测试剂盒(O-toluidine法)产品编号 产品名称包装 S0201S 葡萄糖检测试剂盒(O-toluidine 法) 200次 S0201M葡萄糖检测试剂盒(O-toluidine 法)1000次产品简介:葡萄糖检测试剂盒(O-toluidine 法) (Glucose Assay Kit with O-toluidine)是一种基于葡萄糖与邻甲苯胺的显色反应,通过比色法超高灵敏度、超宽线性范围检测血清、血浆、尿液、细胞或组织裂解液、饮料等溶液中葡萄糖含量的试剂盒。

本试剂盒灵敏度高、线性范围极宽、使用便捷。

本试剂盒对于在5-10,000mg/dl (相当于约0.28-550mM)范围的葡萄糖内有良好线性,并且具有操作便捷、显色稳定、无需煮沸、成本低、适合高通量检测等优点。

本试剂盒检测下限可以达到5mg/dl (20µl 样品),相当于50ng/ml 或278µM ;检测上限可以达到2000mg/dl (5µl 样品)或10,000mg/dl (1µl 样品),相当于20mg/ml (约111mM)或100mg/ml (约555mM)。

本试剂盒既可以轻松检测正常血样中的葡萄糖浓度,也可以检测高血糖血样品。

市售常见血糖仪的葡萄糖浓度检测范围约为1-30mM ,相当于约20-600mg/dl ,在检测一些过高血糖或过低血糖样品时会存在困难,而本试剂盒提供了5-10,000mg/dl (相当于约0.28-550mM)极宽的葡萄糖浓度检测范围。

本试剂盒所需样品体积小。

本试剂盒推荐的样品用量为5-20µl ,也可以使用如1-2µl 或更小体积的样品。

本试剂盒特异性好。

与常用的葡萄糖氧化酶-过氧化酶偶联(GOD-POD)法相比,由于邻甲苯胺试剂只与醛糖显色,且不受其它还原性物质的影响,本试剂盒非常适合血清、尿液等溶液中葡萄糖浓度的检测。

葡萄糖(glucose),也被称为dextrose 或grape sugar ,被认为是自然界中分布最广且最为重要的一种单糖。

β-半乳糖苷酶染色试剂盒使用说明

β-半乳糖苷酶染色试剂盒使用说明

β-半乳糖苷酶染色试剂盒使用说明产品简介:β-半乳糖苷酶染色试剂盒(β-Galactosidase Staining Kit)是一种基于衰老时SA-β-Gal(senescence-associatedβ-galactosidase)活性水平上调而对衰老细胞或组织进行染色检测的试剂盒。

在普通的光学显微镜下就可以观测到细胞或组织的衰老情况。

绝大多数正常细胞被认为仅有有限的分裂能力,在不能分裂后就进入衰老状态。

此时细胞仍然是存活的,但细胞的基因和蛋白的表达谱发生了很大改变。

衰老细胞不能在一些常规的刺激下再诱导细胞分裂,并且衰老细胞的细胞周期分布也比较特殊,不同于一些损伤诱导的细胞休眠,也不同于细胞生长接触抑制的情况。

衰老细胞通常体积变会大,表达pH 6.0时有高酶活性的β-半乳糖苷酶。

细胞衰老也被认为是生物体抑制肿瘤的一种方式,同时也是生物体老化(aging)的一种潜在原因。

本试剂盒可以用于培养细胞的衰老检测,也可以用于组织切片的衰老检测。

β-半乳糖苷酶染色试剂盒以X-Gal为底物,在衰老特异性的β-半乳糖苷酶催化下会生成深蓝色产物,光学显微镜下很容易观察到变成蓝色的表达β-半乳糖苷酶的细胞或组织。

本试剂盒仅染色衰老细胞,对衰老前的细胞(presenescent cells)、静止期细胞(quiescent cells)、永生细胞(immortal cells)或肿瘤细胞等不会染色。

对于组织切片或组织块,可以检测的样品数量视样品的大小而定,对于普通的切片也至少足够检测100个样品,使用6孔板测定,足够测定100个样品。

产品组成:试剂(C):β-半乳糖苷酶染色液A1ml4℃避光试剂(D):β-半乳糖苷酶染色液B1ml4℃避光试剂(E):β-半乳糖苷酶染色液C100ml4℃避光使用说明书1份自备材料:1、PBS或HBSS2、细胞培养器皿3、显微镜操作步骤(仅供参考):(一)贴壁细胞染色:1、对于6孔板中培养的细胞,吸除细胞培养液,用PBS或HBSS洗涤1次,加入1ml β-半乳糖苷酶染色固定液,室温固定15min。

Gus染色试剂配制及使用方法

Gus染色试剂配制及使用方法

●产品简介:gus(β-glucuronidase,β-D- 葡萄糖苷酸酶)基因是目前常用的一种报告基因,其表达产物β-葡萄糖苷酸酶(GUS)是一种水解酶,能催化许多β-葡萄糖苷酯类物质的水解,它可以将5-溴-4-氯-3-吲哚-β-葡萄糖苷酸酯(X-gluc.htm' target=_blank>x-gluc)分解为蓝色的物质,其检测方法简单、快速、灵敏、稳定,且背景活性低。

因为绝大多数植物细胞内不存在内源的GUS活性,因此gus基因广泛用作转基因植物的报告基因,尤其是在研究外源基因瞬时表达的转化实验中广泛应用。

该试剂盒包含GUS染色的全部试剂,使用方便,只需将染色液和缓冲液按照比例混合即配成GUS染色液。

该试剂盒可以配制50ml GUS染色液。

●贮存和效期:X-gluc染色液-20℃保存;GUS染色缓冲液4℃贮存。

自开封之日起有效期一年。

●使用说明:一. GUS染色液配制:X-gluc染色液为50×浓缩液,使用前用GUS染色缓冲液稀释50倍即配成GUS染色液。

如0.1 ml X-gluc染色液加入到5 ml GUS染色缓冲液中,即配成5 ml GUS染色溶液。

该染色溶液最好现用现配,短期贮存可以-20℃保存2-3天。

二. GUS染色步骤:1.将准备好的材料浸泡在GUS染色液中,于25-37℃保温1小时至过夜。

2.叶片等绿色材料转入70%乙醇中脱色2-3次,至阴性对照材料呈白色。

3.肉眼或显微镜下观察,白色背景上的蓝色小点即为GUS表达位点。

注:用于染色的植物材料的制备方法要因涉及的特定组织和器官的不同而异。

例如,拟南芥的根、花和叶片以及烟草幼苗的根就可以不作任何预处理而直接染色。

但是像烟草和马铃薯这些植物的茎和叶就必须在染色前切成薄片(1-3mm)。

当操作大的组织和样品时,可以选用真空渗入法来帮助底物和酶渗入细胞。

GUS能与显色底物X-gluc 反应,显现蓝色,因而可以通过组织化学染色定性研究GUS的表达水平和表达模式。

β—葡萄糖苷酶及其应用

β—葡萄糖苷酶及其应用

β—葡萄糖苷酶及其应用
β—葡萄糖苷酶(β-glucosidase)是一种能够水解β-D-葡萄糖苷键的酶,广泛存
在于微生物、植物和动物中。

其分子量一般在40-200kDa,可分为单一子单位和多亚单位,各具特殊生化和物理特性。

β—葡萄糖苷酶与α-L-酪氨酸酶(α-L-fucosidase)、α-
L-糖苷酶(α-L-arabinofuranosidase)及α-L-汉龙链苷酶(α-L-rhamnosidase)等类酶共同构成了木多糖降解系统,被广泛应用于食品、酿造、纸浆造纸、纺织、生物质化学
等行业。

β—葡萄糖苷酶具有以下特性:
1. pH适宜范围广,多数β—葡萄糖苷酶最适pH在4.5-5.5之间;
2. 温度适宜范围广,一般在40-70℃之间最活跃,但有些β—葡萄糖苷酶在高温下
仍保持较高活性;
3. 抗离子力较强,能承受高浓度盐及葡萄糖等阻碍因素;
4. 亲水性较强,对水分子的纵向排列具有明显影响,对分子量较大的糖分子同样亲和。

除上述领域外,β—葡萄糖苷酶还在生物反应器内设备产生誊本线单酚胡萝卜苷酯(Taxifolin)的生产过程中得到广泛应用。

由于其具有水溶性、稳定性和易于分离和纯
化等优点,因此可以在大规模工业生产中被广泛应用。

总之,β—葡萄糖苷酶具有广泛的应用前景,尤其适用于利用天然木质细胞壁中的木
聚糖制备可再生燃料、化学品及其他有机化合物等领域,未来在绿色化学和能源领域的应
用前景十分广阔。

细胞衰老特异性β-半乳糖苷酶检测试剂盒产品说明书(中文版)

细胞衰老特异性β-半乳糖苷酶检测试剂盒产品说明书(中文版)

细胞衰老特异性β-半乳糖苷酶检测试剂盒产品说明书(中文版)主要用途细胞衰老特异性β-半乳糖苷酶检测试剂是一种旨在以X-Gal为底物,通过细胞内β-半乳糖苷酶在酸性条件下稳定表达,催化生成深蓝色的沉积产物,从而在光学显微镜下观察到蓝色表达的细胞作为细胞复制性衰老(replicative senescence)的分子特征来识别和探测衰老细胞的权威而经典的技术方法。

该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的。

广泛应用于细胞生物学研究。

其适用于各种人体和动物细胞或活体内(in vivo)检测。

产品即到即用,性能稳定,参数优化,着色敏感,堪称国际上同类产品最佳。

技术背景细胞复制性衰老是细胞控制其生长潜能的保障机制。

衰老细胞停滞在细胞周期的G1期,表现出细胞扁平、胀大、颗粒增多的形态特征,尤其在酸性条件下,细胞内β-半乳糖苷酶活性增加,而成为细胞衰老的生物学标记。

产品内容清理液(Reagent A)毫升固定液(Reagent B)毫升酸性液(Reagent C)毫升稀释液(Reagent D)毫升染色液(Reagent E)毫升产品说明书 1份保存方式保存染色液(Reagent E)在-20℃冰箱里;其余的保存在4℃冰箱里;稀释液(Reagent D)和染色液(Reagent E)用铝箔封裹,避免光照;有效保证6月用户自备2毫升离心管:用于配制染色工作液15毫升锥形离心管:用于配制染色工作液恒温培养箱:用于染色孵育光学显微镜:用于观察染色后的细胞实验步骤操作一、25cm2细胞培养瓶染色实验开始前,将试剂盒里的染色液(Reagent E)从-20℃的冰箱里取出,放进冰槽里等待溶化。

然后移取xx毫升稀释液(Reagent D)到2毫升离心管,加入xx微升染色液(Reagent E),混匀后,放进37℃恒温水槽里预热,标记为染色工作液。

然后进行下列操作:1.小心抽去25cm2细胞培养瓶里的培养液2.小心加入xx毫升清理液(Reagent A),清洗生长中的细胞表面3.小心抽去清理液4.小心加入xx毫升固定液(Reagent B),覆盖整个生长表面5.在室温下孵育5分钟6.小心抽去固定液7.小心加入xx毫升酸性液(Reagent C),清洗细胞表面8.小心抽去酸性液9.重复实验步骤7和8一次10.小心加入xx毫升染色工作液,覆盖整个细胞表面11.放进37℃培养箱,孵育3小时至16小时,或细胞呈现蓝色(注意:避免液体蒸发)12.在光学显微镜下观察和计数:表达衰老特异性β- 半乳糖苷酶的细胞为阳性细胞,呈现蓝色。

人α葡萄糖苷酶α-glucosidase试剂盒使用方法

人α葡萄糖苷酶α-glucosidase试剂盒使用方法

人α葡萄糖苷酶(α-glucosidase)试剂盒使用方法检测范围:96T7 U/L -200 U/L使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中α葡萄糖苷酶(α-glucosidase)含量。

实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人α葡萄糖苷酶(α-glucosidase)水平。

用纯化的人α葡萄糖苷酶(α-glucosidase)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入α葡萄糖苷酶(α-glucosidase),再与HRP标记的α葡萄糖苷酶(α-glucosidase)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的α葡萄糖苷酶(α-glucosidase)呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人α葡萄糖苷酶(α-glucosidase)浓度。

试剂盒组成1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。

若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。

在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。

加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。

6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。

土壤 β-葡萄糖苷酶(Solid-β-Glucosidase,S-β-GC)试剂盒说明书

土壤 β-葡萄糖苷酶(Solid-β-Glucosidase,S-β-GC)试剂盒说明书

货号:QS2935 规格:50管/24样土壤β-葡萄糖苷酶(Solid-β-Glucosidase,S-β-GC)试剂盒说明书可见分光光度法正式测定前务必取 2-3个预期差异较大的样本做预测定测定意义:S-β-GC 能够催化水解芳基或烃基与糖基原子团之间的糖苷键生成葡萄糖,是纤维素分解酶系中重要组成成分之一,在土壤微生物的糖类代谢方面具有重要生理功能。

测定原理:S-β-GC 能够催化对-硝基苯-β-D 吡喃葡萄糖苷生成对-硝基苯酚,后者在 400nm 有特征光吸收。

自备实验用品及仪器:可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、甲苯(不允许快递)和蒸馏水。

试剂组成和配制:试剂一:甲苯5mL×1 瓶,4℃保存;(自备)试剂二:粉剂×2 瓶,-20℃保存;临用前每瓶加入 6mL 蒸馏水,充分溶解备用,用不完的试剂仍-20℃保存;试剂三:液体25mL×1 瓶,4℃保存;试剂四:液体50mL×1 瓶,4℃保存;样品处理:新鲜土样自然风干或 37 度烘箱风干,过 30~50 目筛。

混匀,37℃振荡反应 1h 后,立即90℃水浴 5min(盖紧,防止水分散失),流水冷却充分混匀,室温静置 2min 后,400nm 处蒸馏水调零,测定吸光值 A,计算ΔA=A 测定管-A 对照管。

每个测定管设一个对照管。

第1页,共2页S-β-GC 活力计算:标准条件下测定的回归方程为 y = 0.0032x -0.0027;x 为标准品浓度(μmol/L),y 为吸光值。

单位的定义:每天每 g 土样中产生 1 μmol 对-硝基苯酚定义为一个酶活力单位。

S-β-GC 活力(μmol/d /g 土样)=(ΔA+0.0027) ÷0.0032×V 反总÷W÷T =138.7×(ΔA+0.0027) T:反应时间,1h=1/24d; V 反总:反应体系总体积:9.25×10-4 L;W:样本质量,0.05g第2页,共2页。

N-乙酰-β-D -葡萄糖苷酶(NAG)活性检测试剂盒说明书 可见分光光度法

N-乙酰-β-D -葡萄糖苷酶(NAG)活性检测试剂盒说明书 可见分光光度法

N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶(NAG)活性检测试剂盒说明书可见分光光度法注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

货号:BC4290规格:50T/24S产品简介:N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶(EC 3.2.1.52,N-acetyl-β-D-glucosidase,NAG)广泛分布于各种组织中,是一种细胞内溶体酶,测定NAG活性可用于肾小管间质性肾炎、尿路感染、糖尿病肾病综合症、高血压肾病、肾移植后的排异反应和肾病综合症的早期诊断NAG分解N-β-乙酰氨基葡萄糖苷生成对-硝基苯酚,后者在400nm有最大吸收峰,通过测定400nm下吸光度的变化来计算NAG活性。

试验中所需的仪器和试剂:可见分光光度计、天平、台式离心机、1mL玻璃比色皿、可调式移液枪、研钵/匀浆器、EP管。

产品内容:提取液:液体30mL×1瓶,4℃保存;试剂一:液体20mL×1瓶,4℃保存;试剂二:粉剂×1瓶,-20℃保存;临用前加入5mL蒸馏水溶解备用;可-20℃分装保存,避免反复冻融,-20℃可保存2周;试剂三:液体60mL×1瓶,4℃保存;标准品:液体1mL×1支,5μmol/mL的对硝基苯酚溶液,4℃保存。

临用前用蒸馏水将标准品稀释8倍得0.625μmol/mL的标准溶液。

操作步骤:一、粗酶液的提取:1、组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取0.1g组织,加入1mL提取液)进行冰浴匀浆。

15000g,4℃离心10min,取上清置冰上待测。

2、细菌、真菌:按照细胞数量104个:提取液体积(ml)500~1000:1的比例,建议500万细胞加入1mL提取液),冰浴超声波破碎细胞(率300w,超声3s,间隔7s,总时间3min)然后15000g,4℃,离心10min,取上清置冰上待测。

3、血清(浆)等液体:直接测定。

二、测定步骤:1、分光光度计预热30min以上,调节波长至400nm,蒸馏水调零。

β—葡萄糖苷酶及其应用

β—葡萄糖苷酶及其应用

β—葡萄糖苷酶及其应用β-葡萄糖苷酶(β-glucosidase)是一种能够水解葡萄糖苷键的酶类,广泛存在于植物、微生物和动物的细胞内。

它能够催化底物中葡萄糖苷键的切断,生成葡萄糖和相应的配对基团。

β-葡萄糖苷酶是一种具有广泛应用前景的酶类,其应用包括饲料、食品、医药和生物燃料等领域。

β-葡萄糖苷酶在饲料领域中的应用主要是用于改善畜禽饲料中的纤维物质的消化率和饲料的营养价值。

高活性的β-葡萄糖苷酶能够水解纤维素的葡萄糖苷键,释放出葡萄糖,提高纤维物质的消化率,增加能量的利用率。

β-葡萄糖苷酶还能够降低饲料中的抗营养因子(如多糖和非淀粉多糖),提高饲料的可利用性。

在食品加工中,β-葡萄糖苷酶也具有重要的应用价值。

β-葡萄糖苷酶能够降解食品中的苦味化合物,如挥发油中的苦苷和生鲜食品中的芳香苷,改善食品的口感。

β-葡萄糖苷酶能够水解果汁中的芳香苷,提高果汁的营养价值和口感。

β-葡萄糖苷酶还可以用于生产清凉饮料中的甜味剂,如木糖醇和异麦芽糖。

在医药领域中,β-葡萄糖苷酶也有广泛的应用。

β-葡萄糖苷酶能够提高药物的生物利用度,加速药物代谢产物的清除。

β-葡萄糖苷酶可以用于制备抗癌药物。

研究表明,β-葡萄糖苷酶能够将青葙碱类化合物水解生成具有抗癌活性的化合物。

β-葡萄糖苷酶还可以用于制备抗感染药物,如葡萄糖胺酶。

在生物燃料领域中,β-葡萄糖苷酶的应用主要是用于生物质的糖化过程。

生物质经过糖化后可以得到糖,进一步发酵产生乙醇或其他化合物。

β-葡萄糖苷酶作为糖化的关键酶类,能够加速生物质的降解和糖化过程,提高生物燃料的产量和质量。

β-葡萄糖苷酶是一种具有广泛应用前景的酶类,其应用涵盖了饲料、食品、医药和生物燃料等领域。

随着对β-葡萄糖苷酶的深入研究,其应用领域将进一步拓展,并为相关产业的发展带来新的机遇和挑战。

NAG N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶检测试剂盒(速率法)

NAG N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶检测试剂盒(速率法)

N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶检测试剂盒(速率法)说明书【产品名称】通用名称:N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶检测试剂盒(速率法)英文名称: N-acetyl-β-D-glucosaminidase Assay Kit (NAG )【包装规格】R 1:2⨯40ml R 2:2⨯10ml 、R 1:2⨯60ml R 2:2⨯15ml 、R 1:2⨯20ml R 2:2⨯5ml ,校准 品(选配):1⨯1ml 、质控品(选配):1⨯1ml 。

【预期用途】用于临床实验体外定量分析人尿液中N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶的活力。

临床上主要用于辅助评价肾小管损害。

【检验原理】采用6-甲基-2-巯基吡啶-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷(MPT-NAG )为基质。

此基质在样品中的N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG )的作用下,分解生成6-甲基-2-巯基吡啶(MPT )。

通过测定MPT 在340nm 处吸光度的增加速度可求得NAG 的活力。

NAGMPT-NAG+ H 2O MPT+ N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖(NAG 糖苷)【主要组成成份】由试剂R 1、试剂R 2和校准品、质控品组成。

试剂R 1:磷酸氢二钠缓冲液;试剂R 2:磷酸氢二钠缓冲液,6-甲基-2-巯基吡啶-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷(MPT-NAG )。

校准品:N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶( NAG )、磷酸氢二钠;质控品:磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶注:校准品浓度具体见每批瓶标签,校准品可溯源至Roche 参考品;质控品浓度具有批特异性,见瓶标签;不同批号试剂盒中各组分不可以互换。

【储存条件及有效期】试剂和校准品、质控品在2℃~8℃无腐蚀性气体中避光储存,若无污染,可稳定至失效期,有效期为365天。

试剂开瓶后2℃~8℃可稳定15天。

质控品复溶后在2~8℃条件下可稳定1周。

【适用仪器】日立7170、奥林巴斯AU640、贝克曼LX-20全自动生化分析仪。

β-半乳糖苷酶(β-Galactosidase)活性的整体封片免疫组化检测实验

β-半乳糖苷酶(β-Galactosidase)活性的整体封片免疫组化检测实验

β-半乳糖苷酶(β-Galactosidase)活性的整体封片免疫组化检测实验β-半乳糖苷酶(β-galactosidase)是一种水解酶,催化β-半乳糖苷水解成单糖。

使β-半乳糖苷酶作用的底物包括神经节苷脂GM1、乳糖苷、乳糖、各种糖蛋白。

准备大组织的厚切片进行β-半乳糖苷酶染色材料:小鼠或鸡的整个胚胎、组织或外植体试剂(盒):磷酸盐缓冲液(PBS) 冰冷β-半乳糖苷酶固定剂β-半乳糖苷酶洗涤缓冲液β-半乳糖苷酶染色液仪器、耗材:5毫升或10毫升的聚苯乙烯或聚丙烯帽盖的试管或1.5~2 毫升的离心管;转动平台;染色用密闭箱;附有盖玻片的下陷载玻片或箱式载玻片;纤光照明的解剖显微镜;照相显微镜步骤⑴在冰冷的PBS里解剖胚胎或组织。

置β-半乳糖苷酶固定剂,室温至合适的时间。

固定小鼠胚胎和组织:外植体和E 6.5~E 7.5胚胎5~10 分钟;E 8~E 9.5胚胎或尾巴切面 15~30 分钟;E 10 ~ E 12.5 胚胎 30 ~90分钟;E 13~ E 14.5 胚胎 2 小时;E 15.5 或更大的组织则需要解剖出来或切一半,然后固定2小时。

新生幼鼠或更大的小鼠的灌注需要在解剖特定组织染色之前进行。

⑵用β-半乳糖苷酶洗涤缓冲液室温洗涤3次,每次15 分钟 (针对小胚胎或尾巴切面),或每次30分钟(针对Ell胚胎和大组织),头尾相接地轻柔转动。

⑶将组织置于β-半乳糖苷酶染色液中(室温,30℃或37℃取决于β-半乳糖苷酶表达丰度),在5 毫升或10 毫升的帽盖的试管或1. 5~2毫升的离心管中孵育,以防蒸发。

可用肉眼或解剖显微镜调节染色程度。

⑷得到预期的信号背景比之后(1~48 小时),在PBS中洗涤组织3次,每次30 分钟。

⑸通过解剖镜观察和拍摄样本染色的组织,使用低功率的物镜和来自侧面和顶端的光纤照明。

为了得到最好的结果,将组织放置在附有盖玻片的下陷载玻片或箱式载玻片,用足够的PBS覆盖组织。

β-半乳糖苷酶染色试剂盒说明书

β-半乳糖苷酶染色试剂盒说明书

细胞衰老β-半乳糖苷酶染色试剂盒产品简介:细胞衰老β-半乳糖苷酶染色试剂盒(Senescence β-Galactosidase Staining Kit)是一种基于衰老时SA-β-Gal (senescence-associated β-galactosidase)活性水平上调而对衰老细胞或组织进行染色检测的试剂盒。

在普通的光学显微镜下就可以观测到细胞或组织的衰老情况。

本试剂盒可以用于培养细胞的衰老检测,也可以用于组织切片的衰老检测。

绝大多数正常细胞被认为仅有有限的分裂能力,在不能分裂后就进入衰老(senescence)状态。

此时细胞仍然是存活的,但细胞的基因和蛋白的表达谱发生了很大改变。

衰老(senescence)的细胞不能在一些常规的刺激下再诱导细胞分裂,并且衰老细胞的细胞周期分布也比较特殊,不同于一些损伤诱导的细胞休眠,也不同于细胞生长接触抑制的情况。

衰老细胞细胞通常体积变大,表达pH 6.0时有高酶活性的β-半乳糖苷酶。

细胞衰老也被认为是生物体抑制肿瘤的一种方式,同时也是生物体老化(aging)的一种潜在原因。

碧云天生产的细胞衰老β-半乳糖苷酶染色试剂盒,以X-Gal为底物,在衰老特异性的β-半乳糖苷酶催化下会生成深蓝色产物。

从而在光学显微镜下很容易观察到变成蓝色的表达β-半乳糖苷酶的细胞或组织。

本试剂盒仅染色衰老细胞,不会染色衰老前的细胞(presenescent cells)、静止期细胞(quiescent cells)、永生细胞(immortal cells)或肿瘤细胞。

如果使用6孔板检测,足够测定100个样品;使用24孔板测定,足够测定400个样品;使用96孔板测定,足够测定1000个样品。

对于组织切片或组织块,可以检测的样品数量视样品的大小而定。

对于普通的切片也至少足够检测100个样品。

保存条件:-20℃保存,一年有效。

其中X-Gal溶液需避光保存。

注意事项:β-半乳糖苷酶染色固定液有一定的腐蚀性和毒性,操作时请注意防护。

β-葡糖苷酶(纤二糖酶)测定方法

β-葡糖苷酶(纤二糖酶)测定方法

β-葡糖苷酶(纤二糖酶)测定方法-CAL-FENGHAI.-(YICAI)-Company One1试验二β-葡萄糖苷酶(BG; EC3.2.1.21)活性测定新鲜土样比色法的原理:以对硝基苯-β-D-吡喃葡糖苷为基质,水解产生对硝基酚,比色测定(硝基酚比色法)。

1.配置溶液:(1)改进的通用缓冲溶液(MUB)贮备液:12.1g三羟甲基氨基甲烷(C4H11NO3即Tris)、11.6g马来酸(C4H4O4)、14g柠檬酸(C6H8O7)和6.3g硼酸(H3BO3)溶于500ml 1mol.L-1 NaOH溶液中,用去离子水稀释至1L,于4℃下贮存。

(2)pH值6.0的MUB缓冲溶液:在继续搅拌下,在200ml MUB贮备液中分别滴加0.1 mol.L-1 HcL或0.1mol.L-1 NaOH至溶液pH值为6.0,去离子水稀释定容至1L(3)4-Nitrophenyl-beta-D-glucopyranoside对硝基酚-β-D-吡喃葡糖苷(PNPG)溶液[C12H15NO8=25mmol.mol-1]:0.377g PNPG溶于40ml MUB溶液(pH为6.0)中,用相同pH值的缓冲液稀释至50ml,于4℃下贮存。

301.25(4)Cacl2溶液(0.5mol.L-1):取无水Cacl2 55.49g加入1L的容量瓶中配置(5)Tris缓冲液[c(C4H11NO3)=0.1mol.L-1,pH值12.0]:12.2 g三羟甲基氨基甲烷(Tris)溶于800ml去离子水,用0.5mol.L-1NaOH调节pH至12.0,去离子水稀释至1L(6)标准对硝基苯酚溶液:溶解0.500g 对硝基酚于400ml 双去离子水中,定容到500mL,保存于4度,用时再稀释10倍。

稀释后为100ug.ml-1。

(一般需1000ppm)2.试验过程(1)取1g新鲜土样(<2mm)于100ml三角瓶中,加0.25ml甲苯, 通风橱10min后,4ml pH为6.0的MUB溶液和1mm PNPG溶液,盖上瓶盖,充分混匀,在37℃培养1h。

葡萄糖含量测定试剂盒

葡萄糖含量测定试剂盒

葡萄糖含量测定试剂盒葡萄糖含量测定试剂盒作为分析工具,酶法已在食品、生物化学和制药工业中得到了广泛的应用。

酶法具有特异性强,可重复性好,灵敏度高,检测速度快等优点,是理想的分析方法。

本试剂盒主要用酶法定量测定食品和其他材料中葡萄糖的含量。

葡萄糖在葡萄糖氧化酶的作用下,氧化为葡萄糖酸和过氧化氢。

在过氧化物酶的存在下,过氧化氢与邻联茴香胺反应,生成有色产物。

氧化的邻联茴香胺与酸反应,形成更稳定的有色产品。

在540nm下测定其吸光度值,吸光度值的变化与原来的葡萄糖浓度成正比。

本试剂盒适用于葡萄糖含量的比色测定,可完成100次反应。

试剂准备1. 酶溶液:用98mL酶缓冲液溶解1管酶,颠倒混匀,不要涡旋。

分装后避光保存于-20°C。

2. 邻联茴香胺溶液:在邻联茴香胺试管中,加入5mL蒸馏水溶解酶,颠倒混匀,不要涡旋,分装后避光保存于-20°C。

3. 分析缓冲液:将酶溶液与邻联茴香胺溶液混合,比例为49比1,按需要的量进行混合,混合后的溶液,可在2-8°C下避光保存2周。

如果出现浑浊或有颜色形成,应丢弃。

4. 终止反应液:将市售浓硫酸与蒸馏水混合,比例为1:2。

切记,在40mL蒸馏水中,缓慢加入20mL浓硫酸。

不能将蒸馏水加入浓硫酸中。

其中,浓硫酸需用户自备。

使用说明一样本制备1. 液体样本制备:用蒸馏水将样品稀释至约20~80μg葡萄糖/mL。

如果需要,可过滤或去蛋白,使溶液澄清。

有颜色的溶液需要脱色;碳酸或发酵产品需要脱气。

2. 固体样本制备:称取样品约0.1mg。

用蒸馏水提取样品。

该溶液可加热(<75°C)以辅助提取。

用蒸馏水将样品稀释至约20~80μg葡萄糖/mL。

如果需要,可过滤或去蛋白,使溶液澄清。

二葡萄糖检测方法1:用不同浓度葡萄糖制备标准曲线2. 在第一个试管中加入2mL分析缓冲液启动反应,然后混合,记为零时;随后每间隔30或60秒,在一个试管中加入2mL分析缓冲液,以此类推。

β-葡萄糖醛酸苷酶(β-G或β-GD)检测

β-葡萄糖醛酸苷酶(β-G或β-GD)检测

迪信泰检测平台
β-葡萄糖醛酸苷酶(β-G或β-GD)检测
β-葡萄糖醛酸苷酶(β-Glucuronidase, β-G或β-GD)是细胞溶酶体中的一种
酸性水解酶,参与机体的生理、病理及药物代谢等过程。

β-GD可水解基底膜中的
主要成分-蛋白多糖,因而参与肿瘤的侵袭和转移过程。

在肝细胞和胃癌组织中含
量丰富。

β葡萄糖醛酸苷酶活性测定,有助于病情观察和预后评价。

迪信泰检测平台采用生化法,可高效、精准的检测β-葡萄糖醛酸苷酶的活性变化。

此外,我们还提供其他糖代谢类检测服务,以满足您的不同需求。

生化法测定β-葡萄糖醛酸苷酶样本要求:
1. 请确保样本量大于0.2g或者0.2mL。

周期:2~3周。

项目结束后迪信泰检测平台将会提供详细中英文双语技术报告,报告包括:
1. 实验步骤(中英文)。

2. 相关参数(中英文)。

3. 图片。

4. 原始数据。

5. β-葡萄糖醛酸苷酶活性信息。

迪信泰检测平台可根据需求定制其他物质测定方案,具体可免费咨询技术支持。

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货号:QS2613 规格:50管/24样β-葡萄糖苷酶(β-Glucosidase, β-GC)试剂盒说明书
可见分光光度法
正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
β-GC(EC 3.2.1.21)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,催化β-糖苷键水解,具有多方面生理作用:在纤维素的糖化作用中,β-GC负责进一步水解纤维素二糖和纤维素寡糖生成葡萄糖;β-GC水解萜烯类香气前驱体,使糖苷键合态变成游离态。

从而产生香味;β-GC能够水解植物体内野黑樱苷,释放HCN,从而防止昆虫取食。

测定原理:
β-GC分解对-硝基苯-β-D-吡喃葡萄糖苷生成对-硝基苯酚,后者在400nm有最大吸收峰,通过测定吸光值升高速率来计算β-GC活性。

自备实验用品及仪器:
可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。

试剂组成和配制:
提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存。

试剂一:粉剂×2瓶,-20℃保存;临用前每瓶加入10mL蒸馏水,充分溶解备用;用不完的试剂仍-20℃保存。

试剂二:液体25mL×1瓶,4℃保存。

试剂三:液体50mL×1瓶,4℃保存。

粗酶液提取:
1、细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):提取液体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1mL提取液),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);15000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。

2、组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液),进行冰浴匀浆。

15000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。

3、培养液、血清(浆)等液体样本:直接检测。

测定步骤:
1、分光光度计预热30min以上,调节波长至400nm,蒸馏水调零。


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测定管需设一个对照管。

β-GC活力计算:
标准条件下测定的回归方程为y =0.00543x -0.0027;x为标准品浓度(nmol/mL),y为吸光值。

(1)按液体体积计算:
单位的定义:每mL样本每分钟产生1nmol对-硝基苯酚定义为一个酶活性单位。

β-GC活性(nmol/min/mL)=[(ΔA+0.0027) ÷0.00543×V反总]÷V样÷T
=61.39×(ΔA+0.0027)
(2)按样本蛋白浓度计算:
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟产生1nmol对-硝基苯酚定义为一个酶活力单位。

β-GC活力(nmol/min/mg prot)=[(ΔA+0.0027)÷0.00543×V反总]÷(V样×Cpr)÷T
=61.39×(ΔA+0.0027) ÷Cpr
需要另外测定,建议使用本公司BCA蛋白质含量测定试剂盒。

(3)按样本鲜重计算:
单位的定义:每g组织每分钟产生1nmol对-硝基苯酚定义为一个酶活力单位。

β-GC活力(nmol/min /g鲜重)=[(ΔA+0.0027)÷0.00543×V反总]÷(W×V样÷V样总)÷T =61.39×(ΔA+0.0027) ÷W
(4)按细菌或细胞密度计算:
单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟产生1nmol对-硝基苯酚定义为一个酶活力单位。

β-GC活力(nmol/min /104 cell)=[(ΔA+0.0027) ÷0.00543×V反总]÷(500×V样÷V样
总)÷T
=0.123×(ΔA +0.0027)
V反总:反应体系总体积,1mL;V样:加入反应体系中样本体积,0.1mL;V样总:加入提取液体积,1mL;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g; 500:细胞或细菌总数,500万;T:反应时间,30min。

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