第五章 蛋白质代谢

功能：
①能调节铁的吸收和运输，对多酚及多胺类底物有
催化其氧化的能力，具有亚铁氧化酶及胺氧化酶 的活性 ②抗氧化作用，可防止组织中脂质过氧化物和自由 基的生成，特别在炎症时具有重要意义


肝病时铜蓝蛋白合成减少，血浆Cp含 量降低。 肝豆状核变性(wilson病)是一种遗传病， 可能因为肝细胞溶酶体不能将来自铜蓝 蛋白的铜排入胆汁，导致铜在肝、肾、Hale Waihona Puke Baidu脑及红细胞中聚积，发生铜中毒。
α2 –MG含量可显著增高。不属于急性时相 反应蛋白。
铜蓝蛋白(ceruloplasmin,Cp or CER)
理化性质：属α 2球蛋白。由脏脏合成的一种
糖蛋白、分子量为160，000.每分子Cp可牢 固地结合6个铜离子，并因携铜而呈蓝色。
Contains 95% of the total serum copper.
α1 -抗胰蛋白酶 (α1 –antitrypsin,AAT)
理化性质：分子量51KD，含糖10%-12%，占
α1区带的90%。肝脏合成，半寿期5～6天。
功能：蛋白酶抑制物 临床意义：
1.AAT缺陷：COPD、胎儿呼吸窘迫综合征 2.急性时相反应蛋白
增高：主要见于组织损伤，炎症，恶性 肿瘤，妊娠。
发展趋势:
总蛋白测定
蛋白分离测定技术
个别蛋白质的测定
测定体液标本:
血浆：普遍 尿液，脑脊液和胸腹水等：有选择性的组织病变检查
体液蛋白质的测定方法概括：
免疫化学法特异定量个别蛋白质
常规：免疫浊度法、免疫扩散法，免疫电泳法，
微量：放射免疫测定（RIA），酶免疫测定法（ELA/ELISA）
电泳测定：
血浆蛋白质的分类
1.电泳分类法
白蛋白、α1-球蛋白、α2-球蛋白、β-球蛋白、γ-球蛋白
2.功能分类法
载体蛋白、免疫防御系统蛋白、凝血和纤溶蛋白、酶、 蛋白酶抑制物、激素、参与炎症应答的蛋白。
3.各电泳区带的主要蛋白质组成与成分
电泳正常参考值： 白蛋白：57-68% α1球蛋白：1.0-5.7% α2球蛋白：4.9-11.2% β球蛋白：7-13% γ球蛋白：9.8-18.2%
原理：芳香族氨基酸在280nm处有一吸收峰
方法准确性受蛋白质分子中该种氨基酸含量的影响
干扰：
1.尿酸、胆红素在280nm处有干扰 2.核酸最大吸收峰260nm ，在280nm处有干扰。可采 用双波长法予以纠正。
5、TP测定——染料结合法
原理：酸性环境下，蛋白质分子可与染料的阴
离子产生颜色反应。 氨基黑、丽春红：常用于电泳染料。 考马斯亮蓝：用于测定尿液、脑脊液蛋白或更 高呈色灵敏度的电泳 邻苯三酚红钼：用于测定尿液、脑脊液蛋白
临床意义



CRP是第一个被认识的急性时相反应蛋白，在 急性创伤和感染时其血浓度急剧升高。 CRP是非特异性指标，主要用于结合临床病史 监测疾病。 超敏CRP轻度升高与冠状动脉事件、中风及周 围血管病相关，是独立危险因素。Hs-CRP在冠 心病等AS性疾病诊治中的应用价值已越来越受 到临床重视。
临床意义：
1.协助wilson病的诊断 2.急性时相反应蛋白
转铁蛋白（Transferrin,TRF）

理化性质:分子量约79.5KD，含糖量6%，在
β1区带。主要由肝细胞合成

功能：运输由肠道吸收和红细胞降解释放的
铁，以复合物的形式进入骨髓，供红细胞合成 血红蛋白
临床意义
用于贫血的诊断和对治疗的监测 A．缺铁性贫血：TRF升高，铁饱和度降低。 B．铁利用障碍性贫血：TRF正常或降低，铁饱 和度升高。 C．铁负荷过量：TRF水平正常，铁饱和度升高。 D．在急性时相反应时降低。 E．作为营养状态指标,在营养不良及慢性肝脏疾 病时下降。 F.妊娠时升高 正常的铁饱和度为30%--38%
血浆蛋白质检验
宁红霞 临床生化检验教研室
教学目标与要求
掌握：血浆中几种重要蛋白质的性质及其临床应 用；血清蛋白质电泳组分的临床分析；血清总蛋 白、清蛋白、蛋白电泳的检测方法。急性时相反 应的概念及其临床意义。
熟悉：血浆蛋白质的种类及生理功能；
了解：免疫固定电泳检测原理；各血浆蛋白质的
英文缩写。
第一节


原因：在炎症或损伤时，细胞会释放一些炎症 介质，如IL-6、TNF、干扰素、血小板活化因 子，刺激肝细胞合成某些血浆蛋白，而使另一 些蛋白如ALB、PA、TRF合成减少。 特点：急性时相反应是对炎症的一般反应，不 是某一疾病的特异性反应。 但有助于对炎症进 程的监测和对治疗反应的判断。
三、血浆蛋白质的正常参考值
概述
含量：人体固体成分的45% 机体主要 机体蛋白质：的 生物大 分子 种类：10万，3000~5000种/ 单细胞 功能：生长，代谢、血凝、 运动、免疫、信息传递等
一、血浆蛋白质功能和分类
血浆蛋白质的功能



营养作用，修补组织蛋白 维持血浆胶体渗透压 载体 PH缓冲 参与凝血与纤维蛋白溶解 组成体液免疫防御系统
3、TP测定——酚试剂法
原理：运用蛋白质中酪氨酸和色氨酸残基还
原磷钨酸-磷钼酸试剂生成蓝色物质，最大吸 收在745-750nm 改良方法：
Protein + Cu2+ 碱性溶液 Cu-protein complex
Cu-protein complex + 磷钨酸-磷钼酸
钨蓝+ 钼蓝
4、TP测定——紫外分光光度法
（一）参考范围因不同的方法或仪器而不同。 （二）参考范围和不同的年龄组有关。 （三）参考范围和性别有关。 （四）个体不同时期及个体间存在差异。
第二节 血浆蛋白质检测
蛋白质检测方法
蛋白质的检测利用了蛋白质的以下性质

重复的肽链结构
与色素结合的能力 酪氨酸和色氨酸残基对酚试剂反应或吸收紫外光 沉淀后利用浊度或光折射测定
β -微球蛋白
2
（β2-microglobulin， BMG）
理化性质: MW1.18万。主要由淋巴细胞产生，肿瘤细胞合
成BMG的能力非常强。因其分子量小，可从肾小球自由滤 过，但几乎完全可由肾小管重吸收。
临床意义:
1、尿液BMG升高是反映近端小管的灵敏和特异的指标。 特别用于肾移植后，如有排斥反应影响肾小管功能时，可 出现尿中BMG排出量增加。 2、血清BMG能了解肾小球滤过功能。 3、恶性肿瘤及各种炎症时,BMG生成明显升高导致血、尿中含 量升高
结合珠蛋白（haptoglobin,Hp）
理化性质：分子量85000的糖蛋白，主要由肝脏合
成，半寿期为3.5～4天。
功能：能与红细胞中释放出的游离血红蛋白结 临床意义：
1.溶血性疾病：Hp含量明显下降 2.急性时相反应蛋白 3.严重肝病时， Hp合成降低
合， 能防止Hb从肾脏丢失，为机体有效保留铁，并能 避免Hb对肾脏的损伤。
α2 –巨球蛋白
（α2 –macroglobulin，α2 –MG）
理化性质：分子量约715KD，含糖量约8%。
是血浆中分子量最大的蛋白质。由肝细胞与 单核吞噬细胞系统合成。半寿期为5天。
功能：major plasma proteinase inhibitor. 临床意义：低白蛋白血症、肾病综合征时，
β球蛋白： ＴＲＦ ＬＤＬ＆ＶＬＤ Ｌ Ｃ3，Ｃ４ β2 -m Fg
α1球蛋白： ＡＡＴ ＡＡＧ ＡＦＰ ＨＤＬ α2球蛋白： α2ＭＧ Ｈp ＣＥＲ γ球蛋白：
Ig(IgM,IgA,IgG) CRP
二、血浆蛋白质及其异常分析
理化性质
生理功能
临床意义
前白蛋白（prealbumin,PA）
理化性质：肝细胞合成。半寿期：12h 功能：组织修补材料、运载蛋白 临床意义：
C-反应蛋白

（C-reactive protein, CRP）
理化性质：急性炎症病人肝细胞合成,可以
结合肺炎球菌细胞壁C-多糖的蛋白质。

功能：能结合多种细菌、真菌及原虫等多糖
物质，在Ca2+存在下，还能同卵磷脂和核酸结 合，结合后形成的复合物能激活补体系统，从 而引发对侵入细胞的免疫调理和吞噬作用，表 现为炎症反应。
损伤及多种肿瘤时大多伴有血浆AAG含量升高。
最新研究认为和哮喘有关。
α1 –酸性糖蛋白 （α1 –acid glycoprotein,AAG ）
临床意义
1.急性时相反应蛋白：风湿病、心肌梗死等炎症或 组织坏死时增高3-4倍，3-5天出现浓度高峰。 2.糖皮质激素增加，可引起AAG升高。 3.营养不良、严重肝损害、肾病综合征等蛋白丢失 严重，可引起AAG降低。 4.雌激素使AAG降低。
电泳 组成图谱 半定量 定量
定量化学测定TPr，Alb 染料结合法，UV法，折光法等
一、血清总蛋白测定
(一)血清总蛋白测定方法学概述
凯氏定氮法：参考方法 双缩脲法：是临床测定血清总蛋白首选的常规方法 酚试剂法 紫外吸收法 染料结合法：氨基黑、丽春红、考马斯亮蓝、邻苯三酚红 钼
(二)TP测定各方法学概述
优点：准确度高，回收率达101.54% ； 精密度好，CV%为0.85% 1、凯氏定氮法 缺点：操作流程长，程序复杂。各种蛋 白质含氮量在疾病状态差异较大，等 该法主要用作血清蛋白质标准品定值及参考性工作，血 清总蛋白常规测定中很少使用。
2、TP测定——双缩脲 法
原理：
蛋白质中的肽键（-CONH-）在碱性溶液中 能与Cu2+作用而产生紫红色络合物，其颜色的 深浅与蛋白质的浓度成正比，而与蛋白质的分子 量及氨基酸成分无关。 双缩脲反应 双缩脲在碱性铜溶液中作用后生成的紫红色反应。
条件：至少含两个肽键（-CONH-）基团才能和 Cu2+形成络合物,氨基酸及二肽无反 应,三肽以上才能反应。
评价：
优点：简便，准确，重复性好，10g-120g/L线性好， 特异性与精密度好，批内CV%＜2%，显色稳定。 缺点：灵敏度较差，对蛋白质含量低的体液标本不适 合。
应用：常规推荐方法。手工或上机使用。
降低：前白蛋白、白蛋白、转铁蛋白 升高：其他６种蛋白质。
急性时相反应机制： 当机体受到损伤或炎症时释放小分子蛋白质导致肝细胞 中上述蛋白质的合成增加或减少。 急性时相反应的应用： 急性时相反应时,血浆蛋白质的变化和创伤的时间进程有关， 可用于鉴别急性、亚急性和慢性病理状态。
（二）肝脏疾病：
急性肝炎 非典型的急性时相反应，
慢性肝硬化
（三）肾脏疾病：
肾病早期 严重肾脏 选择性蛋白质丢失 非选择性蛋白质丢失
（四）风湿病：免疫球蛋白，α 1-酸性糖蛋白，结合珠蛋白及
Ｃ３升高 缺失。
（五）遗传性缺陷：多由于编码相应蛋白质的基因发生突变或
APR的时相
C-反应蛋白首先升高 12小时内α1-酸性糖蛋白也升高 然后α 1-抗胰蛋白酶、触珠蛋白、C4和纤 维蛋白原升高 最后是C3和铜蓝蛋白升高 通常在2～5天内这些APRs达到最高值
降低：主要见于遗传性α1-AT缺乏症， 由于α1-AT缺乏而引起的肝硬化，支 气管扩张，胰腺纤维化等。对原因不 明的肝硬化病人，检测α1-AT可协助 诊断。
α1 –酸性糖蛋白 （α1 –acid glycoprotein,AAG ）
理化性质：分子量约40KD，含糖约45%。 功能： AAG属急性时相反应蛋白，在炎症、组织
三、疾病时的血浆蛋白质
（一）炎症、创伤
急性时相反应蛋白：在急性炎症或某些组织损伤时，有些 血浆蛋白质含量会增高，有些会降低，这种现象称为急性时 相反应。而这些血浆蛋白质被称为急性时相反应蛋白。 前述β 2 －微球蛋白和 α 2-巨球蛋白以外再加上纤维蛋白 原的九种蛋白质
急性时相反应蛋白分类：
方法学评价
优点：显色稳定性好，干扰物质少， 试剂单一，方法简便。
缺点：灵敏度较低对蛋白质含量低的体液 标本不适合。 干扰物质：主要为右旋糖酐，其与反应混合液中的铜和酒石酸 结合形成沉淀，影响测定结果的准确度。此外胆红素、血红蛋 白、脂浊、某些抗菌素和铵盐等也可干扰结果。
临床意义：
增高 （1）血液浓缩 （2）合成增加 降低 （1）合成障碍 （2）血液稀释 （3）蛋白质丢失 （4）其他
1.营养不良的指标 2.肝功能不全的指标 3.负性急性时相蛋白
白蛋白（albumin，ALB）
理化性质:肝实质细胞合成,半寿期：
15-19天，占总蛋白57%-68%。
功能：主要的载体蛋白；维持血浆胶
体渗透压；缓冲酸碱的能力；重要的 营养蛋白.
白蛋白（albumin，ALB）
临床意义
1.低白蛋白血症：合成不足；丢失过多；分解增 加；分布异常；遗传性疾病。 2.血浆白蛋白增高。 3.估计配体存在形式和作用:特别是药物。 4.个体营养状态的评价指标。 5.遗传性变异。