第五章 蛋白质代谢

临床意义：
1.协助wilson病的诊断 2.急性时相反应蛋白
转铁蛋白（Transferrin,TRF）

理化性质:分子量约79.5KD，含糖量6%，在
β1区带。主要由肝细胞合成

功能：运输由肠道吸收和红细胞降解释放的
铁，以复合物的形式进入骨髓，供红细胞合成 血红蛋白
临床意义
用于贫血的诊断和对治疗的监测 A．缺铁性贫血：TRF升高，铁饱和度降低。 B．铁利用障碍性贫血：TRF正常或降低，铁饱 和度升高。 C．铁负荷过量：TRF水平正常，铁饱和度升高。 D．在急性时相反应时降低。 E．作为营养状态指标,在营养不良及慢性肝脏疾 病时下降。 F.妊娠时升高 正常的铁饱和度为30%--38%
C-反应蛋白

Байду номын сангаас
（C-reactive protein, CRP）
理化性质：急性炎症病人肝细胞合成,可以
结合肺炎球菌细胞壁C-多糖的蛋白质。

功能：能结合多种细菌、真菌及原虫等多糖
物质，在Ca2+存在下，还能同卵磷脂和核酸结 合，结合后形成的复合物能激活补体系统，从 而引发对侵入细胞的免疫调理和吞噬作用，表 现为炎症反应。
α2 –MG含量可显著增高。不属于急性时相 反应蛋白。
铜蓝蛋白(ceruloplasmin,Cp or CER)
理化性质：属α 2球蛋白。由脏脏合成的一种
糖蛋白、分子量为160，000.每分子Cp可牢 固地结合6个铜离子，并因携铜而呈蓝色。
Contains 95% of the total serum copper.
电泳 组成图谱 半定量 定量
定量化学测定TPr，Alb 染料结合法，UV法，折光法等
一、血清总蛋白测定
(一)血清总蛋白测定方法学概述
凯氏定氮法：参考方法 双缩脲法：是临床测定血清总蛋白首选的常规方法 酚试剂法 紫外吸收法 染料结合法：氨基黑、丽春红、考马斯亮蓝、邻苯三酚红 钼
(二)TP测定各方法学概述
结合珠蛋白（haptoglobin,Hp）
理化性质：分子量85000的糖蛋白，主要由肝脏合
成，半寿期为3.5～4天。
功能：能与红细胞中释放出的游离血红蛋白结 临床意义：
1.溶血性疾病：Hp含量明显下降 2.急性时相反应蛋白 3.严重肝病时， Hp合成降低
合， 能防止Hb从肾脏丢失，为机体有效保留铁，并能 避免Hb对肾脏的损伤。
优点：准确度高，回收率达101.54% ； 精密度好，CV%为0.85% 1、凯氏定氮法 缺点：操作流程长，程序复杂。各种蛋 白质含氮量在疾病状态差异较大，等 该法主要用作血清蛋白质标准品定值及参考性工作，血 清总蛋白常规测定中很少使用。
2、TP测定——双缩脲 法
原理：
蛋白质中的肽键（-CONH-）在碱性溶液中 能与Cu2+作用而产生紫红色络合物，其颜色的 深浅与蛋白质的浓度成正比，而与蛋白质的分子 量及氨基酸成分无关。 双缩脲反应 双缩脲在碱性铜溶液中作用后生成的紫红色反应。
方法学评价
优点：显色稳定性好，干扰物质少， 试剂单一，方法简便。
缺点：灵敏度较低对蛋白质含量低的体液 标本不适合。 干扰物质：主要为右旋糖酐，其与反应混合液中的铜和酒石酸 结合形成沉淀，影响测定结果的准确度。此外胆红素、血红蛋 白、脂浊、某些抗菌素和铵盐等也可干扰结果。
临床意义：
增高 （1）血液浓缩 （2）合成增加 降低 （1）合成障碍 （2）血液稀释 （3）蛋白质丢失 （4）其他
α1 -抗胰蛋白酶 (α1 –antitrypsin,AAT)
理化性质：分子量51KD，含糖10%-12%，占
α1区带的90%。肝脏合成，半寿期5～6天。
功能：蛋白酶抑制物 临床意义：
1.AAT缺陷：COPD、胎儿呼吸窘迫综合征 2.急性时相反应蛋白
增高：主要见于组织损伤，炎症，恶性 肿瘤，妊娠。
（一）参考范围因不同的方法或仪器而不同。 （二）参考范围和不同的年龄组有关。 （三）参考范围和性别有关。 （四）个体不同时期及个体间存在差异。
第二节 血浆蛋白质检测
蛋白质检测方法
蛋白质的检测利用了蛋白质的以下性质

重复的肽链结构
与色素结合的能力 酪氨酸和色氨酸残基对酚试剂反应或吸收紫外光 沉淀后利用浊度或光折射测定
降低：前白蛋白、白蛋白、转铁蛋白 升高：其他６种蛋白质。
急性时相反应机制： 当机体受到损伤或炎症时释放小分子蛋白质导致肝细胞 中上述蛋白质的合成增加或减少。 急性时相反应的应用： 急性时相反应时,血浆蛋白质的变化和创伤的时间进程有关， 可用于鉴别急性、亚急性和慢性病理状态。
（二）肝脏疾病：
急性肝炎 非典型的急性时相反应，
损伤及多种肿瘤时大多伴有血浆AAG含量升高。
最新研究认为和哮喘有关。
α1 –酸性糖蛋白 （α1 –acid glycoprotein,AAG ）
临床意义
1.急性时相反应蛋白：风湿病、心肌梗死等炎症或 组织坏死时增高3-4倍，3-5天出现浓度高峰。 2.糖皮质激素增加，可引起AAG升高。 3.营养不良、严重肝损害、肾病综合征等蛋白丢失 严重，可引起AAG降低。 4.雌激素使AAG降低。
条件：至少含两个肽键（-CONH-）基团才能和 Cu2+形成络合物,氨基酸及二肽无反 应,三肽以上才能反应。
评价：
优点：简便，准确，重复性好，10g-120g/L线性好， 特异性与精密度好，批内CV%＜2%，显色稳定。 缺点：灵敏度较差，对蛋白质含量低的体液标本不适 合。
应用：常规推荐方法。手工或上机使用。
发展趋势:
总蛋白测定
蛋白分离测定技术
个别蛋白质的测定
测定体液标本:
血浆：普遍 尿液，脑脊液和胸腹水等：有选择性的组织病变检查
体液蛋白质的测定方法概括：
免疫化学法特异定量个别蛋白质
常规：免疫浊度法、免疫扩散法，免疫电泳法，
微量：放射免疫测定（RIA），酶免疫测定法（ELA/ELISA）
电泳测定：
概述
含量：人体固体成分的45% 机体主要 机体蛋白质：的 生物大 分子 种类：10万，3000~5000种/ 单细胞 功能：生长，代谢、血凝、 运动、免疫、信息传递等
一、血浆蛋白质功能和分类
血浆蛋白质的功能



营养作用，修补组织蛋白 维持血浆胶体渗透压 载体 PH缓冲 参与凝血与纤维蛋白溶解 组成体液免疫防御系统
三、疾病时的血浆蛋白质
（一）炎症、创伤
急性时相反应蛋白：在急性炎症或某些组织损伤时，有些 血浆蛋白质含量会增高，有些会降低，这种现象称为急性时 相反应。而这些血浆蛋白质被称为急性时相反应蛋白。 前述β 2 －微球蛋白和 α 2-巨球蛋白以外再加上纤维蛋白 原的九种蛋白质
急性时相反应蛋白分类：
1.营养不良的指标 2.肝功能不全的指标 3.负性急性时相蛋白
白蛋白（albumin，ALB）
理化性质:肝实质细胞合成,半寿期：
15-19天，占总蛋白57%-68%。
功能：主要的载体蛋白；维持血浆胶
体渗透压；缓冲酸碱的能力；重要的 营养蛋白.
白蛋白（albumin，ALB）
临床意义
1.低白蛋白血症：合成不足；丢失过多；分解增 加；分布异常；遗传性疾病。 2.血浆白蛋白增高。 3.估计配体存在形式和作用:特别是药物。 4.个体营养状态的评价指标。 5.遗传性变异。
原理：芳香族氨基酸在280nm处有一吸收峰
方法准确性受蛋白质分子中该种氨基酸含量的影响
干扰：
1.尿酸、胆红素在280nm处有干扰 2.核酸最大吸收峰260nm ，在280nm处有干扰。可采 用双波长法予以纠正。
5、TP测定——染料结合法
原理：酸性环境下，蛋白质分子可与染料的阴
离子产生颜色反应。 氨基黑、丽春红：常用于电泳染料。 考马斯亮蓝：用于测定尿液、脑脊液蛋白或更 高呈色灵敏度的电泳 邻苯三酚红钼：用于测定尿液、脑脊液蛋白
慢性肝硬化
（三）肾脏疾病：
肾病早期 严重肾脏 选择性蛋白质丢失 非选择性蛋白质丢失
（四）风湿病：免疫球蛋白，α 1-酸性糖蛋白，结合珠蛋白及
Ｃ３升高 缺失。
（五）遗传性缺陷：多由于编码相应蛋白质的基因发生突变或
APR的时相
C-反应蛋白首先升高 12小时内α1-酸性糖蛋白也升高 然后α 1-抗胰蛋白酶、触珠蛋白、C4和纤 维蛋白原升高 最后是C3和铜蓝蛋白升高 通常在2～5天内这些APRs达到最高值


原因：在炎症或损伤时，细胞会释放一些炎症 介质，如IL-6、TNF、干扰素、血小板活化因 子，刺激肝细胞合成某些血浆蛋白，而使另一 些蛋白如ALB、PA、TRF合成减少。 特点：急性时相反应是对炎症的一般反应，不 是某一疾病的特异性反应。 但有助于对炎症进 程的监测和对治疗反应的判断。
三、血浆蛋白质的正常参考值
3、TP测定——酚试剂法
原理：运用蛋白质中酪氨酸和色氨酸残基还
原磷钨酸-磷钼酸试剂生成蓝色物质，最大吸 收在745-750nm 改良方法：
Protein + Cu2+ 碱性溶液 Cu-protein complex
Cu-protein complex + 磷钨酸-磷钼酸
钨蓝+ 钼蓝
4、TP测定——紫外分光光度法
β球蛋白： ＴＲＦ ＬＤＬ＆ＶＬＤ Ｌ Ｃ3，Ｃ４ β2 -m Fg
α1球蛋白： ＡＡＴ ＡＡＧ ＡＦＰ ＨＤＬ α2球蛋白： α2ＭＧ Ｈp ＣＥＲ γ球蛋白：
Ig(IgM,IgA,IgG) CRP
二、血浆蛋白质及其异常分析
理化性质
生理功能
临床意义
前白蛋白（prealbumin,PA）
理化性质：肝细胞合成。半寿期：12h 功能：组织修补材料、运载蛋白 临床意义：