LC色谱柱的选择方法
液相色谱教程液相色谱方法开发
液相色谱教程液相色谱方法开发液相色谱(Liquid Chromatography，简称LC)是一种常用的分离和分析技术，广泛应用于化学、生物、医药等领域。
液相色谱方法的开发是为了解决特定问题和满足特定需求而进行的，本文将介绍液相色谱方法开发的一般步骤和注意事项。
液相色谱方法的开发步骤如下：1.确定分离目标：首先确定需要分离和分析的目标化合物，包括确定化合物的物理化学性质和分离特性等。
2.选择色谱柱：根据分离目标，选择合适的色谱柱。
色谱柱的选择应考虑样品的性质、分离机理、应用要求等因素。
3.选择流动相和梯度条件：根据分离目标，选择合适的流动相（包括溶剂和缓冲剂等）和梯度条件（包括流动相的组成和梯度程序等）。
4.优化色谱条件：通过改变流动相组成、流速、柱温等参数，优化色谱条件，达到最佳分离效果。
5.建立分析方法：根据样品的特点和分析需求，建立分析方法。
包括确定检测器的波长或离子选择器、设置进样量和检测浓度范围等。
6.方法验证：对开发的液相色谱方法进行验证，包括准确度、精密度、线性范围、检出限等指标的确定。
液相色谱方法开发过程中需要注意的事项如下：1.样品制备：样品的制备要充分考虑到样品的性质和分析方法的要求，如需要进行前处理、提取、洗脱、浓缩等。
2.色谱柱保养：液相色谱柱的保养对于保证色谱方法的重复性和稳定性至关重要。
包括定期清洁、适当的保存和使用。
3.流动相准备：流动相的配制要严格按照要求，注意流向的调整、PHA值的调节、气泡和杂质的排除等。
4.柱温控制：柱温对色谱分离的效果有很大影响，需要根据分析需求对柱温进行控制和调节。
5.检测器选择：根据分析的目标和样品的特性，选择合适的检测器，如紫外检测器、荧光检测器、质谱检测器等。
6.数据处理：对色谱结果进行正确的数据处理和解释，包括峰面积计算、峰识别和归一化等。
总结来说，液相色谱方法的开发是一个系统的工程，需要综合考虑样品特性、分析需求和分离机理等因素。
液相色谱介绍
液相色谱介绍液相色谱（Liquid Chromatography，简称LC）是一种分离和分析样品成分的实验室技术，属于色谱分析方法的一种。
它是利用样品在固定相和移动相之间分配系数的不同，实现成分分离和检测的方法。
液相色谱因其高灵敏度、高分辨率、广泛的应用范围等特点，在化学、生物、食品、环境等领域具有重要意义。
液相色谱的主要组成部分包括：1. 色谱柱：色谱柱是液相色谱的核心部件，用于分离样品成分。
它由固定相（stationary phase）和填充物组成，固定相的选择取决于分离目标和样品性质。
2. 流动相：流动相是液相色谱中用于载带动态成分的溶液。
其选择和配比对于色谱分离效果至关重要。
通常，流动相由溶剂、缓冲液和添加剂组成。
3. 进样器：进样器用于将样品引入色谱柱。
常见的进样器有手动进样器和自动进样器。
4. 检测器：检测器用于检测分离后的样品成分。
常见的检测器有紫外检测器、荧光检测器、电化学检测器等。
5. 泵：泵用于驱动流动相在色谱系统内循环，保证样品分离过程的进行。
液相色谱的保养知识包括：1. 色谱柱保养：长时间不用时，色谱柱内应充满溶剂，两端封死。
正相色谱柱使用相应的有机相，如ACN。
2. 手动进样器：使用缓冲溶液时，要用水冲洗进样口，同时搬动进样阀数次，每次数毫升。
3. 流动相：使用前必须过滤，不要使用多日存放的蒸馏水（易长菌）。
4. 带seal-wash的1100，要配制90%水10%异丙醇，以每分23滴的速度虹吸排出，溶剂不能干涸。
5. 定期检查和维护：根据说明书或现场工程师的建议，定期检查液相色谱仪的性能，确保其在良好状态下运行。
总之，液相色谱技术的应用领域广泛，可为科研和生产提供准确、有效的分析手段。
了解液相色谱的原理、保养方法以及相关应用，有助于更好地利用这一技术进行科学研究和生产实践。
UPLC色谱柱技术介绍
• AAA, OST, PST, PrST and Glycan
Transferability between HPLC and UPLC
HSS T3 HSS C18
HSS C18 SB HSS PFP HSS Cyano
XBridge HPLC and ACQUITY UPLC BEH columns
• BEH 130Å C18, C8, Shield RP18, Phenyl, HILIC and Amide • BEH 300Å C18 and C4 • BEH 200Å SEC
BEH HILIC BEH Amide
• HSS C18, T3, C18 SB,PFP,Cyano • CSH C18, Fluoro-Phenyl and Phenyl-Hexyl
3x107 2x107 1x107
Without VanGuard™ Pre-column
H3C O
H
H
S
HO
ON
With VanGuard™
Pre-column
N H3C
CH3
0
0.60
0.80
1.00
Diltiazem
2.0x106 SIR m/z 415.2
1.20
1.40
Minutes
1.5x106
色谱柱使用维护
©2014 Waters Corporation
23
ACQUITY UPLC 颗粒平台
BEH 亚乙基桥杂化颗粒
130Å, 200Å, 300Å
HSS 高强度硅胶颗粒
100Å
CSH 表面带电杂化颗粒
最新UPLC色谱柱技术介绍
UPLC色谱柱沃特世科技（上海）有限公司赵嘉胤Jiayin_zhao@ACQUITY UPLC色谱柱背景知识简介—UPLC色谱柱技术—VanGuard™ 保护柱如何选择ACQUITY UPLC色谱柱—ACQUITY UPLC BEH色谱柱—ACQUITY UPLC HSS色谱柱—ACQUITY UPLC CSH色谱柱色谱柱使用维护ACQUITY UPLC色谱柱背景知识简介—UPLC色谱柱技术—VanGuard™ 保护柱如何选择ACQUITY UPLC色谱柱—ACQUITY UPLC BEH色谱柱—ACQUITY UPLC HSS色谱柱—ACQUITY UPLC CSH色谱柱色谱柱使用维护原产厂家化学键合厂柱填充厂分销商硅胶颗粒和杂化颗粒合成填料键合Source & control of silica gel can make a big difference in your chromatography填料键合Waters分拨与销售柱填充分拨与销售柱填充分拨与销售分拨与销售柱填充•Manufactures under cGMP , ISO 9001 and ISO 13485 guidelines •Registered with FDA as a medical device manufacturer填料颗粒的合成坚固高效的1.7 µm BEH 、CSH 和1.8 µm HSS 颗粒迄今为止技术最先进的全多孔颗粒柱效最高，PH 使用范围最宽和卓越的机械强度设计特点全新硬件设计低谱带展宽新型过滤片色谱柱装填柱床稳定，耐受UPLC 工作压力沃特世专有的新型装填技术新的测试仪器软件采用eCord TM 技术无纸追踪色谱柱使用历史支架系绳包嵌式16 mm 微芯片eCord 永久附在色谱柱上智能芯片自动下载关键参数到色谱柱历史文件提供色谱柱全程使用历史 信息不可删除存在芯片上的信息可减少记录纸张色谱柱无纸使用记录VanGuard™ 保护柱特为UPLC®使用而设计ACQUITY UPLC色谱柱背景知识简介—UPLC色谱柱技术—VanGuard™ 保护柱如何选择ACQUITY UPLC色谱柱—ACQUITY UPLC BEH色谱柱—ACQUITY UPLC HSS色谱柱—ACQUITY UPLC CSH色谱柱色谱柱使用维护BEH亚乙基桥杂化颗粒130Å, 200Å, 300ÅHSS高强度硅胶颗粒100ÅCSH表面带电杂化颗粒130Å行业领先的化学稳定性•宽pH范围，耐受性最强•通用性极佳•固定相种类与柱规格丰富•除通用于小分子化合物，还有专用于生物制药行业的BEH柱产品提高选择与保留•T3 ：增强对极性分子的反相保留能力•C18：提供常规硅胶C18选择性•C18SB:高硅醇活性以增强对碱性分析物的保留，而同时维持好的峰形•Cyano，PFP：提供不同的选择性同时保证色谱峰形使选择性最大化•独特的选择性•低离子强度酸性条件下，对碱性化合物的高载量与优异峰形•较宽pH范围，高低pH条件切换时平衡迅速BEH C 18BEH C 8BEH Phenyl BEH Shield RP18BEH HILICFive particle substrates•130Å, 200Å and 300Å BEH [Ethylene Bridged Hybrid], HSS [HighStrength Silica] and CSH [Charged Surface Hybrid]•All are available in HPLC and UPLC particle sizes Wide and growing selection of column chemistries•15 stationary phases•BEH 130Å C 18, C 8, Shield RP 18, Phenyl, HILIC and Amide •BEH 300Å C and C BEH Amide CSH C 18CSH Fluoro-Phenyl 184•BEH 200Å SEC•HSS C 18, T3, C 18SB,PFP ,Cyano•CSH C 18, Fluoro-Phenyl and Phenyl-HexylProven application-based solutions•AAA, OST, PST, PrST and GlycanTransferability between HPLC and UPLCXBridge HPLC and ACQUITY UPLC BEH columns HSS HPLC and ACQUITY UPLC HSS columnsXSelect HPLC and ACQUITY CSH columnsVanGuard Pre-columns CSH Phenyl-HexylHSS T3HSS C 18HSS C 18SB HSS PFP HSS CyanoACQUITY UPLC色谱柱背景知识简介—UPLC色谱柱技术—3.0mm ID UPLC色谱柱—VanGuard™ 保护柱如何选择ACQUITY UPLC色谱柱—ACQUITY UPLC BEH色谱柱—ACQUITY UPLC HSS色谱柱—ACQUITY UPLC CSH色谱柱UPLC-HPLC方法无缝转换UPLC生物分子分析方案New 2.5 µm eXtended Performance Columns 介绍U.S. Patent No. 6,686,035 B2Bridged Ethanes within a silica matrixWide pH range (1-12)High pressure toleranceEnhanced efficiency (1.7 µm)XTerra ®MS C 18BEH C 18测试终止(估计>250 h)测试终止(估计>250 h)BEH HILIC 050100150200250300在50mM TEA 中实验时数(pH 10, 50°C)Symmetry ® C 18Silica C 18–品牌A Silica C 18–品牌BOH -OH -•仅需打断四个硅氧键即可腐蚀一个硅单位•表面腐蚀所产生的硅酸离子在流动相中溶解度大,使硅胶基体溶解的反应向右移动, 从而加快了溶解速度•pH >7时上述腐蚀过程容易发生•须同时断裂六个键才可以去除经乙基桥键连接的两个硅单位(该过程极难发生)•填料基体溶解所产生的有机硅离子在流动相中的溶解度较低, 因此容易累积在填料微孔表面, 有时可能会重新连接回颗粒表面, 形成所谓的‘自我修复’机制。
正确选购色谱柱需要注意哪些方便
正确选购色谱柱需要注意哪些方便色谱柱是气相色谱、液相色谱等分析仪器的核心部件，其性能直接影响到分析结果的准确性和可靠性。
因此，在选购色谱柱时，需要关注以下几个方面的注意事项：1、确定分析目的和样品类型首先，需要明确分析的目的和样品类型，以便选择合适的色谱柱。
例如，假如需要进行环境监测、食品安全、药物分析等领域的分析，可以选择相应的专用色谱柱；假如需要进行石油、化工、制药等行业的分析，可以选择相应的行业专用色谱柱。
2、选择合适的固定相固定相是色谱柱的核心部分，其性能直接影响到色谱柱的分别效果和稳定性。
常见的固定相有硅胶、氧化铝、聚合物等。
硅胶固定相具有较好的耐高温性和化学稳定性，适用于各种类型的样品分析；氧化铝固定相具有较高的选择性和分别度，适用于多而杂样品的分析；聚合物固定相具有良好的亲水性和选择性，适用于生物样品、食品等亲水性样品的分析。
3、选择合适的柱尺寸和内径色谱柱的尺寸和内径直接影响到色谱柱的分别效果和分析速度。
一般来说，柱尺寸越大，分别效果越好，但分析时间越长；柱内径越小，分别效果越好，但分析时间越长。
因此，需要依据实际需求选择合适的柱尺寸和内径。
4、选择合适的柱温柱温对色谱柱的分别效果和分析速度有很大影响。
一般来说，柱温越高，分别效果越好，但分析时间越长；柱温越低，分别效果越差，但分析时间越短。
因此，需要依据实际需求选择合适的柱温。
同时，还需要考虑色谱柱的热稳定性，以确保在高温下仍能保持良好的分别效果。
5、选择合适的流动相流动相是推动样品在色谱柱中移动的动力，其性能直接影响到色谱柱的分别效果和分析速度。
常见的流动相应有甲醇、乙腈、水等。
在选择流动相时，需要考虑其与固定相的兼容性、极性、粘度等因素，以确保在实际应用中能够获得良好的分别效果。
6、考虑色谱柱的品牌和价格市场上有很多不同品牌和型号的色谱柱，价格差别较大。
在选择色谱柱时，需要综合考虑品牌、价格、性能等因素，选择性价比较高的产品。
色谱柱基础知识的总结
色谱柱基础知识的总结色谱柱是色谱分析中的重要工具，它是用来分离混合物中不同化合物的设备。
色谱柱的选择和使用对于色谱分析结果的准确性和灵敏度起着至关重要的作用。
下面将对色谱柱的基础知识进行总结。
色谱柱的种类主要包括气相色谱柱（GC柱）和液相色谱柱（LC柱）。
GC柱使得样品在高温下蒸发成为气态，然后通过柱子的分离效应进行分离。
LC柱是将可溶于液相的样品通过柱子的分离效应进行分离。
色谱柱的工作原理是样品分离的基础。
色谱柱的分离效应由固定填充物和流动相的选择决定。
固定填充物是色谱柱中的重要组成部分，分为填充型和包袋型。
填充型色谱柱常用的填充物有硅胶、氧化铝、氮化硅等。
填充型色谱柱适用于对极性物质的分离。
包袋型色谱柱通常是指薄层涂布型的液相色谱柱，常见的包袋型色谱柱有C18、C8、C4等。
包袋型色谱柱适用于对非极性以及中等极性物质的分离。
流动相的选择也是色谱柱分离效应的关键因素。
在GC柱中，通常使用气体作为流动相，常用的有氢气、氦气等。
在LC柱中，流动相一般是有机溶剂和缓冲液的混合物，常见的有甲醇、乙腈等。
流动相的选择要根据要分离的物质的属性，如极性、溶解度等进行合理选择，以提高分离效果。
色谱柱的选择要根据需要分离的物质的性质进行。
对于GC柱的选择，常见的指标有极性、温度范围、长度和内径等。
相对于液相色谱柱，GC柱的选择范围较窄，通常根据物质的极性选择合适的GC柱。
液相色谱柱的选择相对较为复杂，常见的指标有固定相类型、粒径、孔径、长度和内径等。
固定相的选择要根据样品的性质进行，如极性的物质选择极性固定相，非极性物质选择非极性固定相。
粒径和孔径的选择会影响柱子的分离效果和分析时间。
总之，色谱柱是色谱分析中的重要工具，其选择和使用对于色谱分析结果至关重要。
合理选择柱子的类型和填充物，以及优化流动相的组成和条件，能够提高色谱分离效果和分析灵敏度。
同时，良好的色谱柱的使用与保养也是保证色谱分析质量的重要环节。
只有不断深入了解和熟悉色谱柱的基础知识，才能更好地进行色谱分析工作。
液相色谱操作过程和特点
液相色谱操作过程和特点液相色谱（Liquid Chromatography，简称LC）是一种分析技术，它利用液体流动相在固定相上的分配作用，将溶液中的化学物质分离、分析和定量。
液相色谱的操作过程通常包括样品制备、进样、色谱柱选择、流动相选择、洗脱条件优化、检测器选择、数据采集和处理等步骤。
具体操作过程如下：1. 样品制备：将待分析样品制备成溶液，通常需要进行样品提取、前处理、稀释等步骤，以获得适合进样的样品。
2. 进样：将样品溶液通过进样装置引入色谱系统中。
进样装置可以是自动进样器，也可以是手动进样装置。
3. 色谱柱选择：根据样品的特性和分离要求选择适合的色谱柱。
色谱柱通常有不同的分离机理，如反相、离子交换、大小排阻、手性和亲合等。
4. 流动相选择：根据样品特性和分离要求选择适当的流动相。
流动相可以是有机溶剂、水、缓冲液等，需要根据色谱柱和待分离化合物的相容性选择。
5. 洗脱条件优化：调整流动相的成分、比例和洗脱梯度，以实现化合物的分离和增强分离效果。
6. 检测器选择：选择适合的检测器，对色谱柱洗脱出的化合物进行检测。
常用的检测器有紫外-可见光谱检测器、荧光检测器、质谱检测器等。
7. 数据采集和处理：通过检测器将得到的信号转换为电信号，并进行数据采集和处理，包括峰面积计算、质谱数据解析等。
液相色谱的特点包括：1. 高分离效率：液相色谱的分离效率较高，可以实现多组分混合物中的化合物快速准确分离。
2. 分析速度快：相比气相色谱，液相色谱的分析速度较快，样品制备和进样过程较简单，分析时间短。
3. 适应性广：液相色谱适用于多种化合物的分离和分析，包括有机物、无机物、生物大分子等。
4. 分析灵敏度高：液相色谱常与灵敏的检测器（如质谱检测器）联用，可以实现低浓度物质的快速准确分析。
5. 操作简便：相比其他分析技术，液相色谱的操作比较简便，不需要高度专业技术人员。
总之，液相色谱是一种广泛应用于分析化学领域的分离和分析方法，具有高分离效率、快速分析速度、广泛适应性、高分析灵敏度和简便操作等特点。
watersxbridge苯基柱使用说明
watersxbridge苯基柱使用说明摘要：1.简介2.苯基柱的安装与拆卸3.流动相的选择与配制4.流速的设置5.分析条件的优化6.常见问题与解决方法7.注意事项正文：Waters XBridge 苯基柱是一款高效液相色谱柱，适用于液相色谱（LC）分析。
在使用前，请确保充分了解并遵循以下使用说明。
1.简介Waters XBridge 苯基柱是一款用于液相色谱（LC）的高效液相色谱柱。
它具有柱效高、柱压低等优点，广泛应用于生物制药、食品分析等领域。
2.苯基柱的安装与拆卸在安装苯基柱时，请确保柱温低于30 摄氏度。
首先，将柱芯插入色谱柱入口，然后顺时针旋转至柱芯无法继续旋转。
在拆卸时，请逆时针旋转柱芯以松开，然后轻轻取出。
3.流动相的选择与配制流动相是液相色谱分析过程中样品在柱子中移动的介质。
根据需要分析的样品选择合适的流动相，如水、乙腈、甲醇等。
流动相需要使用去离子水和有机溶剂（如乙腈）配制，以获得适当的离子强度和极性。
4.流速的设置流速是液相色谱分析过程中样品在柱子中移动的速度。
根据色谱柱的规格和样品的要求设置流速，流速过快可能导致峰形变差，流速过慢则可能导致分析时间延长。
5.分析条件的优化分析条件的优化包括温度、流速、有机溶剂比例等因素。
根据样品分离的需要，调整这些条件以获得更好的分离效果。
6.常见问题与解决方法在使用苯基柱过程中，可能会遇到峰形异常、出峰时间过长等问题。
检查流动相、柱温是否合适，尝试调整流速，以解决这些问题。
7.注意事项在使用苯基柱时，请遵循液相色谱的操作规程。
避免柱子在高温下长时间存放，以免影响柱效。
总之，正确使用Waters XBridge 苯基柱，可以提高液相色谱分析的准确性和效率。
安捷伦的色谱柱的介绍及选择
D250oC O2 孔径
80A & 300A
粒径
1.8 µm 3.5 µm 5.0 µm 7.0 µm
ZORBAX Rx
多孔硅胶微球
安捷伦拥有此项填料专利技术
8
Agilent LC colmns
4
Zorbax主要的键合相
Zorbax硅胶颗粒
StableBond
二异丙基 二异丁基键合
Rx-C18/Sil
Zorbax Eclipse XDB-C18 (B类硅胶)
普通硅胶（A类）
由于带负电荷的残留硅羟基和酸 性表面上金属含量高 (硅羟基的 pKa低), 导致碱性化合物发生拖 尾
高纯硅胶 (B类)
ZORBAX SB-C18 (B类硅胶)
由于金属含量低, 硅羟基pKa高, 碱性化合物不发生拖尾
ODS (A类硅胶) 封端
Eclipse StableBond
柱装填
• 具可追溯性 • 可定购生产批号不同的色谱柱 • 特殊规格定制ExtendBo Nhomakorabeaus RP
4
Agilent LC colmns
2
ZORBAX®硅胶类型
A类硅胶
Original ZORBAX SIL (1970s) 由于带负电荷的残留硅羟基和酸性表面 上金属含量高 (硅羟基的pKa低), 导致 碱性化合物发生拖尾
高通量和LC/MS柱
Zorbax 高通量柱，LC/MS 色谱柱 Zorbax 快速分离柱 Zorbax 快速分离高通量柱 Zorbax 溶剂节省色谱柱 Zorbax 微径色谱柱 Zorbax 毛细管柱和纳流柱
生化分析柱
Zorbax 300 SB 柱 Zorbax 300Extend柱 Zorbax Poroshell柱 Zorbax Eclipse AAA柱 Zorbax GF-250/450 凝胶柱 Zorbax Oligo HPLC柱 Zorbax SAX和SCX柱 MARS mRP column
质谱(lc-ms)方法开发指南
质谱（LC-MS）方法开发指南一、概述质谱（LC-MS）是一种强大的分析技术，广泛应用于生物医药、食品安全、环境监测等领域。
然而，开发一个可靠、灵敏的LC-MS方法并非易事，需要仔细的实验设计和严谨的操作。
本文旨在提供一份LC-MS方法开发的指南，帮助研究人员高效地完成LC-MS方法的开发工作。
二、样品准备1. 样品的选择：LC-MS分析的样品应具有一定的纯度和稳定性，避免样品中含有大量的杂质或不稳定的成分。
2. 样品的前处理：对于复杂样品，需要进行适当的前处理，如固相萃取、液-液萃取等，以提高分析的准确性和灵敏度。
三、色谱条件的选择1. 色谱柱的选择：根据样品性质和分析需求选择合适的色谱柱，如C18柱、C8柱等。
2. 流动相的选择：优化流动相的组成、pH值和流速，以提高分离效果和信号强度。
3. 温度控制：对于一些温敏感化合物，需要对色谱柱进行恒温控制，以避免样品分解或形成不稳定的反应物。
四、质谱条件的选择1. 离子源的选取：根据样品的性质选择合适的离子源，如电喷雾离子源（ESI）或化学电离源（APCI）等。
2. 探测器的选择：选择适当的探测器，如飞行时间质谱仪（TOF-MS）、三重四极杆质谱仪（Q-TOF）、四极杆质谱仪等。
3. 离子监测条件的优化：优化离子源的参数和质子化/去质子化离子片段的监测条件，以获得清晰的质谱图谱。
五、方法验证1. 灵敏度的验证：进行样品的定量限、检出限和线性范围的验证，以确保LC-MS方法的灵敏度满足分析要求。
2. 选择性的验证：对可能干扰的成分进行测试，验证LC-MS方法的选择性和特异性。
3. 精密度和准确度的验证：进行重复性和回收率的验证，评估LC-MS 方法的精密度和准确度。
六、实验操作的注意事项1. 仪器的维护和校准：定期对LC-MS仪器进行维护和校准，保证仪器的稳定性和准确性。
2. 样品的处理和储存：严格按照操作规程对样品进行处理和储存，避免样品受到污染或降解。
气相色谱柱的选择方法色谱柱是如何工作的
气相色谱柱的选择方法色谱柱是如何工作的气相色谱柱的分别效果紧要取决于其固定相，柱长度，柱内径,液膜厚度这几个因素，从原理上讲，这几个因素相同的柱子，其分别效果是完全一样的。
1）柱长度的选择分气相色谱柱的分别效果紧要取决于其固定相，柱长度，柱内径，液膜厚度这几个因素，从原理上讲，这几个因素相同的柱子，其分别效果是完全一样的。
1）柱长度的选择辨别率与柱长的平方根成正比。
在其他条件不变的情况下，为取得加倍的辨别率需有4倍的柱长。
较短的柱子适于较简单的样品，尤其是由那些在结构、极性和挥发性上相差较大的组分构成的样品。
一般来说：15m的短柱用于快速分别较简单的样品，也适于扫描分析；30m的色谱柱是常用的柱长，大多数分析在此长度的柱子上完成；50m、60m或更长的色谱柱用于分别比较多而杂的样品。
应当注意，柱长加添分析时间也加添。
2）柱内径的选择柱径直接影响柱子的效率、保留特性和样品容量。
小口径柱比大口径柱有更高柱效，但柱容量更小。
0.25mm：具有较高的柱效，柱容量较低。
分别多而杂样品较好。
O.32mm：柱效稍低于O.25mm的色谱柱，但柱容量约高6096。
0.53mm：具有仿佛于填充柱的柱容量，可用于分流进样，也可用于不分流进样，当柱容量是紧要考虑因素时（如痕量分析），选择大口径毛细管柱较为合适。
3）液膜厚度的选择液膜厚度影响柱子的保留特性和柱容量。
厚度加添，保留也加添。
O.1→2m：薄液膜厚度的毛细管柱比厚液膜的毛细管柱洗脱组分快，所需柱温度低，且高温下柱流失较小，适用高沸点的化合物的分析。
0.25〜0.5m：常用的液膜厚度。
厚液膜：对分析低沸点的化合物较为有利。
4）固定相的选择不同的固定相对不同的分析物的影响不同，依据相像相溶原理,性质越相近，固定相对其的流动阻力越大，其保留时间越长.色谱柱就是通过这个原理将不同性质的混合物相互分开的。
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脱氧胆酸钠 液相色谱
脱氧胆酸钠液相色谱
脱氧胆酸钠是一种胆酸的衍生物，通常用于药物研究和制备中。
液相色谱（Liquid Chromatography，LC）是一种常用的分析技术，可以用于分离、鉴定和定量分析脱氧胆酸钠以及其他相关化合物。
以下是进行脱氧胆酸钠液相色谱分析的一般步骤：
1.样品制备：准备脱氧胆酸钠的样品。
这可能包括样品的溶解、
稀释和过滤等步骤，以确保样品适合进入液相色谱系统。
2.色谱柱选择：选择适当的色谱柱，通常是反相柱（Reverse Phase，
RP）或离子交换柱，以实现对脱氧胆酸钠的有效分离。
3.流动相选择：选择适当的流动相，通常是水、甲醇、醋酸等的
混合物。
流动相的选择取决于色谱柱的性质和分离条件的需求。
4.梯度程序：设置梯度程序，控制流动相组成的变化以实现对脱
氧胆酸钠和其他目标化合物的有效分离。
5.检测器选择：选择适当的检测器，如紫外-可见光谱检测器
（UV-Vis Detector），用于检测和记录脱氧胆酸钠的吸收峰。
6.进样：将样品注入色谱柱进行分离。
通常使用自动进样器来确
保精确和重复的进样。
7.数据分析：通过数据系统记录和分析色谱图，确定脱氧胆酸钠
的峰位置、峰面积等信息。
8.定量分析：使用标准曲线法或内标法等方法进行脱氧胆酸钠的
定量分析。
9.质量控制：进行质量控制步骤，确保分析的准确性和重复性。
在进行液相色谱分析时，根据实验的具体要求和仪器的配置，可能需要进行一些调整。
确保所有步骤都符合标准分析方法，并在实验室安全的条件下进行操作。
安捷伦的色谱柱的介绍及选择
Agilent LC colmns 1提高分离速度，节约分析成本安捷伦液相色谱柱介绍与选择OUTLINE安捷伦液相色谱柱介绍及选择建议如何提高液相色谱分离效率安捷伦新一代常规分析柱Agilent LC colmns2Agilent LC colmns 3常规分析柱Zorbax Eclipse Plus 柱Zorbax Eclipse XDB Zorbax Stable Bond 柱Zorbax Extend C18柱Zorbax Bonus-RP 柱Zorbax SB-Aq 柱Zorbax RX HPLC 柱原先的Zorbax ODS 柱Zorbax 正相柱其他Zorbax 柱生化分析柱Zorbax 300 SB 柱Zorbax 300Extend 柱Zorbax Poroshell 柱Zorbax Eclipse AAA 柱Zorbax GF-250/450 凝胶柱Zorbax Oligo HPLC 柱Zorbax SAX 和SCX 柱MARSmRP column高通量和LC/MS 柱Zorbax 高通量柱，LC/MS 色谱柱Zorbax 快速分离柱Zorbax 快速分离高通量柱Zorbax 溶剂节省色谱柱Zorbax 微径色谱柱Zorbax 毛细管柱和纳流柱制备柱Zorbax PrepHT 制备柱Zorbax ®液相色谱柱常规分析柱Agilent TC /HCAgilent TC/HC (2)Agilent ®液相色谱柱制备柱Agilent prep 制备柱Agilent LC colmns4安捷伦Zorbax ®HPLC 色谱柱严格的质量控制产品研究与开发硅胶生产键合柱装填•具可追溯性•可定购生产批号不同的色谱柱•特殊规格定制StableBondEclipseBonus RP ExtendAgilent LC colmns 5二氧化硅Na K Mg Al Ca Ti Fe Zr Cu Cr ZnZorbax Rx-SIL 10< 34 1.52nd 3nd nd nd 1Zorbax SIL 17nd nd 579322188< 1nd 88Nucleosil 56N/A N/A nd 1305776nd N/A N/A ndHypersil 2900N/A 403003865230N/A N/A N/A N/And = 未检出金属浓度（ppm)A 类硅胶Original ZORBAX SIL (1970s)由于带负电荷的残留硅羟基和酸性表面上金属含量高(硅羟基的pKa 低), 导致碱性化合物发生拖尾B 类硅胶(高纯)ZORBAX Rx-Sil (1987)由于金属含量低, 硅羟基pKa 高,碱性化合物不发生拖尾Zorbax Rx-SIL: 11种金属< 35 ppm (未检出其他杂质, <1ppm); 99.995% 纯度的二氧化硅ZORBAX ®硅胶类型Agilent LC colmns6选择适用于pH7.5流动相的色谱柱流动相:乙腈: 50 mMK 2HPO 4: 55: 45, pH 7.5UV: 224 nm 23°C进样量: 20 µL (0.5 µg / µL)Zorbax Eclipse XDB-C18 (B 类硅胶)ZORBAX SB-C18(B 类硅胶)ODS (A 类硅胶)封端ODS (A 类硅胶)不封端普通硅胶（A 类）由于带负电荷的残留硅羟基和酸性表面上金属含量高(硅羟基的pKa 低), 导致碱性化合物发生拖尾高纯硅胶(B 类)由于金属含量低, 硅羟基pKa 高,碱性化合物不发生拖尾Agilent LC colmns7硅胶填料－液相色谱柱的基础……Zorbax 液相色谱柱硅胶特点Zorbax 硅胶的制备方法由液相色谱柱著名创始人J.J. Kirkland 发明，属于安捷伦公司的专利技术。
液相色谱柱几个参数的定义
液相色谱柱几个参数的定义液相色谱（Liquid Chromatography，LC）是一种将液体作为流动相进行分离、净化、分析和鉴定样品中化学成分的方法。
液相色谱柱是液相色谱中的核心部件，它通过填充不同类型和性质的固体填料，使样品溶液在流动相作用下发生分离。
液相色谱柱的参数对于分离效果、分离速度和分离选择性等方面都产生重要影响，下面将介绍几个重要的液相色谱柱参数的定义。
1. 柱型（Column Type）：柱型是指液相色谱柱填料的物理形态，包括管状柱、开管状柱、管束柱等。
不同类型的柱具有不同的优缺点，如管状柱具有高分离效果和分辨率，但样品容量较小；开管状柱则具有较大的样品容量，适合分离复杂样品。
2. 柱长度（Column Length）：柱长度是指填充物所占据的柱体长度，通常用毫米（mm）表示。
柱长的选择与实验要求有关，一般柱长越长，分离效果越好，但分离时间也相应增加。
柱长的选择还取决于仪器的型号和分析要求。
3. 内径（Inner Diameter）：内径是液相色谱柱内部流通通道的直径，通常用毫米（mm）表示。
较小直径的柱内液流速度快，分离效果好，但柱内压力较高，适用于高效液相色谱；较大直径的柱则适用于制备液相色谱。
4. 填料（Stationary Phase）：填料是液相色谱柱中的固体物质，用于将样品分离。
填料可以是无机或有机颗粒，也可以是化学修饰后的硅胶、高效液相填料等。
填料的选择取决于样品的性质和分析要求，不同填料具有不同的静相亲水性、反相亲水性等物化特性。
5. 粒径（Particle Size）：粒径是填料表面质量的衡量指标，即填料颗粒的直径。
粒径直接影响分离效果和柱压，通常用微米（μm）表示。
较小的粒径有更大的表面积，提供更好的分离效果，但柱压也相应增加，适用于高效液相色谱；较大的粒径则用于制备液相色谱。
6. 球形度（Sphericity）：球形度是填料颗粒外形的一个参数，它形容填料颗粒的形态规则程度，通常用于判断填料的质量和性能。
液相色谱标液苯乙烯标液标定方法
液相色谱标液苯乙烯标液标定方法液相色谱(Liquid Chromatography, LC)是一种分析化学方法，广泛应用于药物分析、环境监测、食品安全等领域。
液相色谱法是基于样品成分在液体和固体相之间的分配系数不同而实现成分分离的方法。
而液相色谱分析中的标液是指已知浓度的标准品，用于检验和校准分析仪器，以确保分析结果的准确性和可靠性。
在液相色谱分析中，苯乙烯是一种常用的标准品，用于定量测定样品中苯乙烯的含量。
下面将介绍液相色谱标液苯乙烯标定方法。
1.实验设备和试剂准备-液相色谱仪：包括色谱柱、检测器、进样器等。
-色谱柱：选择适合的色谱柱，如C18柱，亲水性柱等。
-检测器：根据需要选择合适的检测器，如紫外检测器(UV检测器)。
-进样器：选择合适的进样器，如自动进样器或手动进样器。
-一级标液：准备苯乙烯的一级标液。
2.样品制备-准备待测物样品：根据实验需求选择样品类型，如溶液、固体样品或气相样品。
-样品前处理：根据样品特性，可能需要进行预处理，如溶解、稀释、提取等。
3.标液配置与标定步骤-标液配置：使用一级标液准备苯乙烯的二级标液。
一般情况下，将一级标液稀释至一定浓度，以便于后续标定。
一级标液的浓度可以根据实验需要选择，一般在10-1000μg/mL之间。
-标定步骤：1)打开液相色谱仪，预热系统至稳定状态。
2)选择合适的色谱柱，并进行平衡。
根据柱的要求，通常使用适当的流动相进行平衡，以稳定柱的性能。
3)通过进样器将标液进样。
为了减少误差，可以多次进样，并取平均值。
4)调整流动相条件，如流速、流量、温度等，使试样在色谱柱中分离并达到最佳分离效果。
5) 根据测定所需的波长，设置检测器的参数。
典型的波长选择是254nm，但也可以根据实验需求进行调整。
6)在液相色谱仪的软件或控制面板上记录检测器的输出信号。
7)使用标准曲线法，绘制苯乙烯浓度与检测器信号峰面积的关系曲线。
通过这条标准曲线可以计算待测物中苯乙烯的浓度。
石墨碳 lc 色谱柱
石墨碳 lc 色谱柱
石墨碳（Graphitized Carbon）LC色谱柱是一种常用的色谱柱
类型。
石墨碳色谱柱具有良好的保留性能和选择性，在分离复杂化合物时表现出较高的效果。
石墨碳色谱柱的特点包括:
1. 它是一种非极性固定相，适用于分离极性化合物和非极性化合物。
2. 石墨碳具有较高的热稳定性，能够在较高温度下进行分析，适用于热稳定性较差的样品。
3. 石墨碳具有较高的化学稳定性，可在酸性和碱性条件下工作，适用于各种样品类型。
4. 石墨碳色谱柱具有良好的耐久性和较长的使用寿命。
石墨碳色谱柱在环境分析、食品检测、药物分析和生物分析等领域广泛应用。
在环境分析中，它用于分析水中有机污染物、多环芳烃和农药等。
在食品检测中，它用于分析食品中的农药残留、食品添加剂和香料等。
在药物分析中，它用于分析药品中的杂质和不同组分的分离。
在生物分析中，它用于蛋白质和核酸的分析和定量。
总的来说，石墨碳色谱柱是一种常用的色谱柱类型，具有良好的保留性能和选择性，适用于各种样品类型的分离与分析。
壬烯基琥珀酸酐 液相色谱
壬烯基琥珀酸酐液相色谱壬烯基琥珀酸酐（Nonenylsuccinic Anhydride，简称NSA）是一种重要的有机合成中间体，常用于制备表面活性剂、高分子材料、农药和医药等领域。
液相色谱（Liquid Chromatography，简称LC）是一种常用的分离分析技术，可用于分析复杂混合物中的各种组分。
对于壬烯基琥珀酸酐的液相色谱分析，可以采用以下步骤：样品准备：将壬烯基琥珀酸酐样品进行适当的溶解或稀释，以便于进行液相色谱分析。
仪器准备：准备好液相色谱仪，包括输液泵、进样器、色谱柱、检测器和数据处理系统等部分。
确保仪器处于正常工作状态。
色谱柱选择：根据壬烯基琥珀酸酐的性质选择合适的色谱柱，如C18、C8、苯基等不同类型的色谱柱。
流动相选择：选择适当的流动相，以实现壬烯基琥珀酸酐与其他组分的有效分离。
常用的流动相有甲醇、乙腈和水等。
检测器选择：根据需要选择合适的检测器，如紫外检测器、荧光检测器等。
样品进样：将准备好的样品注入进样器中，通过输液泵将样品送入色谱柱中进行分离。
数据分析：通过液相色谱仪配备的数据处理系统记录并分析分离后的组分，可以得到壬烯基琥珀酸酐的色谱图和相应的浓度数据。
在液相色谱分析壬烯基琥珀酸酐时，需要注意以下几点：确保仪器和色谱柱的清洁度，防止样品污染。
流动相应进行过滤和脱气处理，以避免对色谱柱和检测器造成损害。
根据需要调整流动相的配比和流速，以获得最佳的分离效果。
检测器的波长或激发/发射波长应根据壬烯基琥珀酸酐的性质进行选择。
根据实际需要选择合适的进样量，以获得最佳的分析结果。
在数据分析时，应确保数据的准确性和可靠性，并进行必要的验证和质量控制。
总之，液相色谱是一种有效的分离分析方法，可用于壬烯基琥珀酸酐的分析。
通过选择合适的仪器、色谱柱、流动相和检测器，可以获得准确的浓度数据和良好的分离效果。
hilic色谱柱流动相选择
hilic色谱柱流动相选择
HILIC色谱柱流动相选择是一种分析技术，它可以用来分离和检测由多种不同物质组成的有机体。
它的原理是使用氢氧化减酸的作用使用离子交换机(IEC)或氢氧化减酸机(HILIC)技术将目标物和伴随物从混合溶液中分离开来。
这两种技术都是在液相色谱(LC)柱上进行数据分析的。
IEC 技术是使用正离子交换剂对有机物进行分离，而HILIC技术则是使用负离子交换剂。
HILIC色谱柱流动相选择在分析中常常使用一种特殊的溶剂，叫做乙腈，因为它能够有效地分离具有不同电荷的物质。
乙腈的电荷足以使少量的质子离子保持稳定，从而形成溶解度较高的溶液。
另外，由于乙腈的性质，它有助于将混合物中的离子形式和非离子形式的物质分离开来，并使得用于分析的物质能够更快地从柱中释放出来。
waters酰胺基色谱柱
waters酰胺基色谱柱
Waters公司是一家知名的分析仪器制造商，其生产的色谱柱在液相色谱（Liquid Chromatography，简称LC）领域中应用广泛。
酰胺基色谱柱是Waters公司提供的一种色谱柱，具有独特的选择性和稳定性，常用于多种化合物的分离和分析。
酰胺基色谱柱通常使用酰胺官能团作为固定相的配体，这种配体能够提供极性和非极性相互作用，适用于多种类型化合物的分离。
与传统的C18色谱柱相比，酰胺基色谱柱在分离一些极性化合物时显示出更优的性能。
在选择和使用酰胺基色谱柱时，需要注意以下几点：
1.样品性质：根据样品的极性、分子大小和样品基质
等因素选择合适的酰胺基色谱柱。
2.流动相：酰胺基色谱柱通常对流动相的pH值和有机
溶剂种类比较敏感，需要仔细选择流动相的组成，
以保证色谱分离的效果和柱子的寿命。
3.温度：温度对酰胺基色谱柱的分离性能和稳定性也
有影响，需要根据实验要求调整色谱柱的工作温
度。
4.保护柱：为了延长色谱柱的使用寿命，建议在色谱
系统中安装保护柱，以防止杂质和颗粒物对色谱柱
的损害。
总的来说，Waters酰胺基色谱柱以其独特的分离性能和稳定性，在液相色谱分析中有着广泛的应用，能够满足不同领域用户的需求。
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色谱柱的参数 色谱柱的参数
粒径
粒径越小，分离越快, 柱效越高。但柱压力越高，柱容易被污染， 寿命低 LC-MS和常规分析柱通常使用5 μm填料。3 μm填料使用的困难程 度大，一般非必要时不使用(ODS-100V) Super-ODS为2 μm 填料，UPLC为1.7 μm填料 3cm以下的制备色谱柱通常使用5-10 μm填料 更大内径的制备色谱柱通常使用更大的粒径，如10 μm, 或20 μm
一般柱长2.0-250mm，柱越长，分离度越高，但柱压更高，分离所 需时间更长 分离度与理论 塔板数的平方根成正比，所以增加柱长并不是最有 效的分离手段。一般情况下15cm, 5um的填料可以提供足够的塔板 数 内径：1-2mm LC-MS柱，4.6mm分析柱，10mm以上的半 制备和 制备色谱柱 HPLC仪器的柱外效应-不同的仪器设备配置有相应的最佳流速，因 此适用于不同内径的色谱柱
柱的化学性质
样品性质决定柱的化学性质 样品性质决定柱的化学性质
样品结构 溶解性（有机溶剂、水） pH值 极性 酸碱性 分子量
分离目的决定柱的物理性质 分离目的决定柱的物理性质
分析? 制备? 快速分析?（如Super-ODS） 含量分析? 杂质检验? 所有组分分离?
色谱柱的参数 色谱柱的参数
柱长、内径
高纯硅胶表面的重金属含量，一般为ppm级，液相系统的金属部件 也会产生重金属（ODS-100V\Z为高纯硅胶） 待测组分与重金属发生螯合反应会导致色谱峰形不佳，产生前伸或 拖尾 能与金属形成5或6元环螯合物的待测组分特别容易受重金属影响 可以使用EDTA溶液或稀酸冲洗色谱柱消除重金属影响
色谱柱的参数 色谱柱的参数
硅胶表面性质-硅醇基
硅醇基的酸性较大,可与碱性化合物牢固的结合, 因此含有较多残留 硅醇基的填料在分离碱性化合物时容易产生脱尾、变宽、保留延长 等现象（ODS-100V\Z都进行了彻底封端） 加入适当的扫尾剂如三乙胺可以掩蔽残留的硅醇基, 使碱性化合物 峰形变好 降低流动相pH值小于3,可以减小硅醇基的反应, 从而减小拖尾现象
HPLC 色 谱 柱 选 择
东曹达（上海）贸易有限公司
色谱柱的选择 色谱柱的选择
HPLC 方法开发时首先要: 了解方法的目的（分析？制备？） 了解样品性质（极性？酸碱性？） 选择合适的色谱柱
色谱柱的选择 色谱柱的选择
色谱柱和流动相的选择是色谱技术的核心之一 色谱柱的选择是方法开发的一个重要环节 选择合适的色谱柱可以缩短方法开发所需要的 时间、并且使开发的方法更稳定 在不合适的色谱柱上进行方法开发通常需要更 长的时间、并且成功率较低
色谱柱的参数 色谱柱的参数
封端的效果：
色谱柱的参数 色谱柱的参数
封端-高封端的ODS色谱柱
pH使用范围宽 极性基团封端的色谱柱可以在高水相流动相条件下使用，适合分离 极性化合物 残留的硅醇基影响最小，碱性化合物不拖尾 改善选择性 一般优先使用高封端的色谱柱
色谱柱的参数 色谱柱的参数
封端-低封端或不封端的ODS色谱柱
ODS-100V
C18
3,5
15% (单层)
100
高
好
彻底
好
ODS-100Z
C18
5
20% (单层)
100
高
好
彻底
好
ODS-100S
C18
5
18% (多层)
100
高
好
较好
好
ODS-120T
C18
5
22% (多层)
120
高
好
一般
一般
ODS-120A
C18
5
20% (多层)
120
高
好
未处理
一般
可用于100%的水相（C18链疏水，在纯水相中会倒塌 导致保留降低，因此AQ色谱柱中都有极性的亲水集团 或低封端） 因为硅醇基的影响，对极性相同的化合物有特殊选择性
如何选择合适的色谱柱 如何选择合适的色谱柱
选用高纯硅胶基质的色谱柱 对碱性化合物，选择高封端的色谱柱 高pH值使用时，需要使用特殊封端的色谱柱， 以保证柱寿命，改善峰形(ODS-100S) 大分子量的化合物，需要大孔径的色谱柱 尽量使用低pH值，以减少硅醇基的作用 不同品牌的色谱柱往往有不同的选择性
monomeric bonding
R Si (CH2)17 CH3 R
柱效高, 平衡快
OH + OH CH3
polymeric
O
bonding
CH3 Si (CH2)17 CH3
X Si (CH2)17 CH3 X
O
稳定性好， 制备上样量大
色谱柱的参数 色谱柱的参数
ODS柱的特征结构
色谱柱的参数 色谱柱的参数 封端
色谱柱的参数 色谱柱的参数
孔径
孔径小，含孔率高，则 比表面积大，载碳量高 化合物在孔内分离 孔径大小必须和分子大小相匹配，分子必须能进入孔内，一般小分 子使用80-120A， 大分子通常使用300A。为了达到最佳分离,一般 要求孔径直径是分子直径的3倍以上
色谱柱的参数 色谱柱的参数
比表面积
每克填料的表面积 与粒度、含孔率有关 比表面积大，会增加样品与键合相之间的反应，增加保留、分离 度和制备时的上样量 比表面积小可以缩短分析时间和梯度时的平衡时间 并不是比表面积大或者小就更好，选择适合目的的比表面积
色谱柱的参数 色谱柱的参数 载碳量
硅胶表面键合相的比例 与比表面积，键合覆盖度等有关 对ODS，载碳量从7-18%（ODS-100Z为20%）不等 ODS的载碳量高， 则保留增加，适合分析非极性化合 物。制备色谱的上样量也可以增加 载碳量通常影响选择性
色谱柱的参数 色谱柱的参数
硅胶表面性质-纯度
色谱柱的参数 色谱柱的参数 键合相
超过80%的样品可以使用反相色谱分离，一般方法开发也首先使用 反相色谱 C18， C8，C4等反相色谱，从C18到C8，C4，对化合物的保留降 低 NH2， CN等可用于正相，也可以用于反相 键合试剂不同，对化合物的选择性不同
方法开发时, 长链的烷基键合相(C18,C8)比短链的(C4,C3) 稳定；非极性的键合相比极性的键合相(-NH2)稳定
色谱柱的参数 色谱柱的参数
色谱柱的参数远比一般认为的要多：
柱长， 内径， 例如250*4.6mm. 粒径， 3um, 5um, 10um等 柱的物理性质 孔径，60A，80A，100A，120A等 比表面积， 180m2/g-350m2/g（ODS-100V为450m2/g） 基质：硅胶，聚合物等 硅胶表面性质 载碳量， 10-20%(ODS-120T为22%) 键合试剂， C18,C8, CN等 封端
色谱柱的参数 色谱柱的参数
基质
硅胶： 最通用的基质，强度大，化学修饰容易，但使用的pH值范围 有限（一般为2-8， 特殊修饰的可以使用到1-12）。 下面的介绍也 主要是基于硅胶基质的色谱柱技术 聚合物基质：化学稳定，应用 pH范围宽, 但强度不够大， 批重复 性相对较差。 商品化的色谱柱不多，价格较贵，如Octadecyl-2PW 球型: HPLC 使用 无定型: 中压色谱使用
如何选择合适的色谱柱 如何选择合适的色谱柱
详细阅读色谱柱的说明，了解各种色谱柱的参 数和性质 了解化合物性质：极性，酸碱性，杂质的性质 等 强极性化合物使用AQ色谱柱(ODS-100V) 高比表面积和载碳量可以提高制备色谱的上样 量
TSKGEL反相色谱柱选择一览表 TSKGEL反相色谱柱选择一览表
目的： 减小残留硅醇基
色谱柱的参数 色谱柱的参数
封端
未封端的Si-OH 基团是碱性化合物拖尾的主要原因 酸性条件下，氢离子通过未封端的Si-OH 的间隙进攻O-Si键，导致填料水解 封端的基团会影响色谱柱的使用pH值、对化合物的选择 性等
色谱柱的参数 色谱柱的参数
封端技术
使用小分子硅烷保护残留Si-OH 通过R1基团空间位阻保护残留Si-OH 如使用异丙基代替甲基 通过键合相之间的连接保护残留Si-OH 多次封端
色谱柱的参数 色谱柱的参数
R
最常用的ODS色谱柱
R为非极性基团, 为通用型色谱柱
Si (CH2)17 CH3 R
如果R为强极性基团, 为通常说的AQ”水性”柱, 可以走纯 水,用于强极性化合物（ODS-100V可以走纯水）
色谱柱的参数 色谱柱的参数
键合方式
CH3 OH + X Si (CH2)17 CH3 CH3
硅胶填料： TSK-GEL 固定相 粒径 (μm) 炭含量 孔径（埃） 理论塔 板数 保 持 力 封端处理 耐久 性 主要特征、用途 ODS首选柱；对碱性化合 物分析效果特别好；适于 极性化合物的分析；可适 用100%水相；LC/MS系统 通用型ODS柱；对酸性、 中性、碱性化合物分析效 果好；适于中性和疏水性 化合物的分析 通用型、多层ODS柱的标 准；良好的化学稳定性（ 耐酸、碱） 通用型高性能柱；炭含量 最高；在有机溶剂多的流 动相中发挥威力 炭含量高的高性能柱；可 发挥填料的离子作用；表 面识别能力强，适于分析 芳香族化合物等