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扫描电镜的步骤与方法

取出复合细胞的支架材料,PBS漂洗

4%多聚甲醛溶液固定

PBS漂洗,10%四氧化饿后固定

乙醇、丙酮梯度脱水

乙酸异戊酉旨置换

临界点干燥

表面喷金

扫描电镜观察

扫描电镜:

1、样本浸入生理盐水中清洗5~10min;

2、以4%戊二醛固定24h;1%锇酸后固定2h;

3、50%,70%,90%,100%丙酮梯度脱水,每级10min;

4、50%,70%,90%,100%醋酸异戊酯置换,每级10min;

5、应用临界点干燥仪(日本日立公司产)、液体CO2;

6、等进行干燥;

7、扫描电镜观察

扫描电镜样本的制备干燥简单法:

1、将标本浸入HMDS中(六甲基二硅胺烷),15minx2(在通风厨内)。

2、在室温中,将样品放在通风厨内进行空气干燥60min。

3、干燥后的标本用导电胶贴在样品托上将细胞爬片标本梯度脱水后行乙腈置换,真空干燥,

4、用真空蒸镀金属膜法行导电处理后,扫描电镜观察细胞表面结构,将标本浸入HMDS 中,15minx2(在通风厨内)。

5、在室温中,将样品放在通风厨内进行空气干燥60min。

6、干燥后的标本用导电胶贴在样品托上。

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