北师大版高中生物选修一《生物技术实践》全册课件

实验报告要求
一个实验，一份实验报告，有连续性的实验等到做 完后再写实验报告。
实验报告内容： 1.实验项目名称 2.实验目的 3.实验原理 4. 实验步骤 5.实验结果与分析（即使实验失败也要写好分析） 6.思考题
实验一
微生物培养基的配制和 灭菌
（一）培养基的配制
一、实 验 目 的
了解培养基的配制原理和方法，掌握其配制过 程。
初始pH
培养基的种类
按照培养基的物理状态可分为 1.液体培养基：不加凝固剂的液体状态培养基。 2.固体培养基：在液体培养基中加入2%左右的凝固剂的
固体状态的培养基。 3.半固体培养基：在液体培养基中加入0.2—0.5%凝固
剂而成的半固体状培养基。
琼脂是最优良的凝固剂，自1880年开始用于配制微 生物培养基以来，至今经久不衰。
北师大版高中选修一
生物
全册优质课件
培养基对微生物的选择作用
课堂纪律
严格遵守实验室规章制度 严肃课堂纪律
不允许无故旷课、早退 迟到 工作服
进入微生物实验室的注意事项
1.进入实验室必须穿白大褂 2.实验室内不准吃东西 3.在实验室内不要趴在桌子上 4.实验完成后值日生留下做好清洁工作（值日工作实行组
用于活化菌种， 或培养菌种的斜面
用于保存菌种的斜面
搁置斜面 当培养基冷却至50℃左右时，将试管带棉塞的一端搁
在一根木棒上。搁置的长度要合适，使培养基形成的斜面 的长度不超过试管总长的一半。
（三）半固体培养基制作 （由第7,8组同学各做25支半固体培养基）
6.灭菌 塞棉塞，包扎，灭菌。 高压蒸汽灭菌法：是在密闭的加压容器内进行，加热
使器内的水产生蒸汽，由于密闭，增加了器内的压力，使 水的沸点升高，从而获得高于100度的蒸汽温度。
牛肉膏蛋白胨固体培养基配方：
牛肉膏 蛋白胨 氯化钠 琼脂 水 pH 灭菌
0.3g 1g 0.5g 1.5g 100mL 7.2~7.4 121℃，20min
实验室的常用培养基： 细菌： 牛肉膏蛋白胨培养基； 放线菌：高氏1号合成培养基培养； 酵母菌：麦芽汁培养基； 霉菌： 查氏合成培养基；
培养基配制的基本步骤
称量--配置--调节pH值--过滤--分装--灭菌
1.称量 按照培养基配方，准确称量各成份放于烧杯中。对于不
是粉状（如肉膏），应用烧杯称量。
2.配调 向烧杯中加入适量的水，搅拌，使其溶解（可加热助溶）。 如是配制固体培养基，在琼脂的熔化时，需不断搅拌，并
控制火力不要使培养基溢出或烧焦。待完全熔化后，补足所失 水分。
如果配方中含有淀粉，先将淀粉用少量冷水调成糊状并在 火上加热搅拌，然后加足水分及其他药品，待完全熔化后补足 所失水分。
Fra Baidu bibliotek
3.调节pH值 培养基溶解均匀并冷却至室温时用pH试纸测pH，然后根
据要求加酸或碱（一般用1molHcl和1molNaOH），要缓慢少量 且多加搅拌。培养基配方为自然pH时，不用调节。
制备5-6个平皿)； 6.凝固后放冰箱备用。
（二）斜面培养基制作 （由第5,6组同学各做25支斜面培养基）
1.称取一定量的营养琼脂到100mL的三角瓶中； 2. 加入100mL水； 3. 放入水浴锅内溶解； 4. 在空试管内倒入2～3mL已经溶解好的培养基，【注意尽量不要让培养基
沾到试管口】塞好硅胶塞； 5.放入烧杯中,高压蒸汽灭菌； 6.摆斜面,凝固后放冰箱备用。
牛肉膏蛋白胨半固体培养基配方：
琼脂
0.3g
牛肉膏蛋白胨液体培养基配方：
琼脂
0g
三.操作步骤及本次实验具体安排
牛肉膏蛋白胨培养基的配制
1、固体培养基（平板制作） 2、固体培养基（斜面制作） 2、半固体培养基 3、液体培养基
（一）平板固体培养基制作 （由第1,2,3,4组同学各做2X100mL）
1.称取一定量的营养琼脂到250mL的三角瓶中； 2. 加入100mL水； 3.塞上硅胶塞,用牛皮纸包扎好； 4.高压蒸汽灭菌； 5.灭菌后,当培养基冷却至50℃左右时，倾注平皿(每100mL可
4.过滤 用滤纸或多层纱布过滤，一般无特殊要求可省去。
5.分装 将制好的培养基分装入试管内或三角瓶内，管（瓶）
口塞上棉塞。固体培养基要趁热装。 分装时要避免培养基粘染管（瓶）口，引起污染。分
装量可分为下面几方面： （1）斜面：装量为管长的1/4-1/5。 （2）液体培养基、高层培养基、半固体培养基：装载量不 超过管长的1/3。 （3）三角瓶：装量不超过容积1/2。
营养物质的浓度要适宜 营养物质之间的配比要适宜
培养基的pH值、渗透压、 水活度和氧化还原电势等 物理化学条件要适宜。
通常培养条件：
细菌： pH 7.0~8.0 放线菌：pH 7.5~8.5 酵母菌： pH 3.8~6.0 霉菌：pH 4.0~5.8 藻类： pH 6.0~7.0 原生动物： pH 6.0~8.0
培养基按成分可分为天然培养基、合成培养基和半合成培养基；按物理状 态可分为固体培养基、半固体培养基（0.2%～0.5%的琼脂）和液体培养基；
按用途可分为基础培养基、营养培养基、鉴别培养基和选择培养基等。
培养基简介
培养基
是指由人工配制的、适合微生物生长繁殖或产
生代谢产物用的混合营养料。
碳源、氮源、无机盐、能源、生长因子、水
长负责制，纳入实验成绩） 5.离开实验室前洗手 6.实验现象要隔天观察的实验，必须要按时到实验室记录
实验现象
实验安排
实验一 微生物培养基的配制和灭菌 实验二 微生物的纯培养技术 实验三 显微镜油镜的使用及细胞形态的观察 实验四 土壤、水的细菌学检查 实验五 放线菌、霉菌及酵母菌的形态观察 实验六 环境因素对微生物的影响 实验七 微生物生理生化反应观察 实验八 微生物遗传实验
掌握加压蒸汽灭菌法的原理及其使用方法。
二.实 验 原 理
1. 培养基是供微生物生长、繁殖、代谢的混合养料。不同微生物对营养物 质的要求各不相同，加之实验和研究的目的不同，所以培养基的种类很多， 使用的原料也各有差异，但从营养角度分析，培养基中一般含有微生物所 必需的碳源、氮源、无机盐、生长素以及水分等。另外，培养基还应具有 适宜的pH值、一定的缓冲能力、一定的氧化还原电位及合适的渗透压。