免疫组化法和qPCR技术检测FBP1在结直肠腺癌中的表达及临床意义

免疫组化法和qPCR技术检测FBP1在结直肠腺癌中的表达

及临床意义

刘家有;邓世山;朱剑军;侯令密;谢少利;黄波

【摘要】Objective:To explore the expression of FBP1 in colorectal adenocarcinoma and its clinical significance.Methods:46 pairs of fresh human colorectal adenocarcinoma tissues and its adjacent normal tissues were collected from the Affiliated Hospital of North Sichuan Medical College from September 2014 to February 2016,Quantitative RT-PCR was used to detect the expression level of FBP1 mRNA in tissues.30 specimens of human colorectal adenocarcinoma tissues and its adjacent normal tissues were collected from the Affiliated Hospital of North Sichuan Medical College from July 2015 to June 2016,immunohistochemical was used to exam the level of FBP1.Results:Quantitative RT-PCR show that the expression level of FBP1 mRNA in colorectal adenocarcinoma tissues was remarkably lower than that in adjacent normal colorectal tissues

(t=2.934,P=0.006).The expression level of FBP1 decreased as the increase of malignancy degree and Duke's stages and distant lymph metastases in colorectal adenocarcinoma (P=0.000).The expression level of FBP1 mRNA in male patients was higher than that in those females,but the difference was not significant (t=1.294,P=0.165).Immunohistochemical results show that the expession level of FBP1 in colorectal adenocarcinoma tissues was lower than that in adjacent normal colorectal tissues

(χ2=19.461,P=0.000).Conclusion:The decreased expression level of FBP1

mRNA and its protein may act a critical role in colorectal adenocarcinoma and may be used as a potential therapeutic target for colorectal adenocarcinoma.%目的:探讨果糖-1,6-二磷酸酶1 (fructose-1,6-bisphosphatase 1,FBP1)基因在结直肠腺癌的表达水平及其与临床病理特征的联系.方法:qPCR技术检测川北医学院附属医院2014年9月至2016年2月新鲜结直肠腺癌组织及癌旁正常组织46 例中FBP1基因的表达水平.免疫组化方法检测川北医学院附属医院2015年7月至2016年6月结直肠腺癌及癌旁对照组织的蜡块标本30例中FBP1的表达及分布情况.结果:qPCR技术检测结果表明,FBP1 基因在结直肠腺癌组织中的表达水平低于在癌旁正常组织中的表达水平

(t=2.934,P=0.006);FBP1基因在结直肠腺癌组织中的表达水平随着结直肠腺癌肿瘤的恶性程度的增加(F=13.267,P=0.000)、Duke's 分期的增加

(F=15.864,P=0.000)、远处淋巴结的转移(t=14.285,P=0.000)而降低;FBP1基因在男性患者的结直肠腺癌组织中的表达水平高于其在女性患者的表达水平,但差异无统计学意义(t=1.294,P=0.165).免疫组化结果显示FBP1在结直肠腺癌组织中低表达甚至缺失,而在癌旁正常组织中高表达,二者差异具有统计学意义

(χ2=19.461,P=0.000).结论:FBP1 基因及蛋白质的低表达可能在结直肠腺癌的发生发展中有着重要的作用,是其潜在的治疗靶标.

【期刊名称】《川北医学院学报》

【年(卷),期】2017(032)002

【总页数】5页(P167-171)

【关键词】结直肠腺癌;果糖-1,6-二磷酸酶1;免疫组化法;qPCR

【作者】刘家有;邓世山;朱剑军;侯令密;谢少利;黄波

【作者单位】川北医学院人体解剖学教研室,四川南充 637000;川北医学院人体解剖学教研室,四川南充 637000;川北医学院人体解剖学教研室,四川南充 637000;川北医学院附属医院普外科,四川南充 637000;川北医学院附属医院普外科,四川南充 637000;川北医学院临床技能培训中心,四川南充 637000

【正文语种】中文

【中图分类】R735.3

结直肠腺癌是消化道第二位的常见恶性肿瘤，位居癌症死亡率第四位，严重威胁人类的健康[1]，探索与结直肠腺癌发病的相关基因，对结直肠腺癌的早期预防和诊治具有重要意义。果糖-1，6-二磷酸酶1 (fructose-1，6-bisphosphatase

1,FBP1)是葡萄糖异生的关键酶之一，在机体内源性葡萄糖的合成、输出及调控中发挥重要作用[2]。研究发现FBP1与许多肿瘤的发生发展相关，如FBP1基因表达水平的降低或缺失导致肾透明细胞癌的恶性程度增加、患者的预后变差[3]；FBP1在乳腺癌中和在肝细胞癌中的表达水平也降低，且随着恶性程度的增加而降低[4-5]。但在结直肠腺癌中FBP1基因的表达情况如何，目前尚未见相关文献报道。本文通过免疫组化方法和qPCR技术检测FBP1在结直肠腺癌中的表达情况，探讨FBP1与临床病理特征之间的关系，为结直肠腺癌早期诊断、治疗及寻找潜在的靶标提供理论基础。

1.1 研究对象

收集川北医学院附属医院2014年9月至2016年2月新鲜结直肠腺癌(该诊断均经病理证实)及对照癌旁正常组织(距肿瘤边缘大于5 cm以上，病理未发现癌细胞)标本46例，年龄37～79岁，平均年龄57.5岁，中位年龄59岁。标本收集后立即置于液氮中速冻，及时提取组织总RNA并进行逆转录。收集川北医学院附属医院2015年7月至2016年6月结直肠腺癌及癌旁正常组织标本30例，年龄28～