免疫组化法和qPCR技术检测FBP1在结直肠腺癌中的表达及临床意义
IQGAP1在肺癌中的表达及其临床意义
IQGAP1在肺癌中的表达及其临床意义【摘要】目的探讨肺癌中支架蛋白IQGAP1的蛋白表达水平,及IQGAP1对肺癌细胞运动侵袭能力的影响。
方法RT-PCR检测IQGAP1 mRNA的表达,免疫组织化学SABC法及Western blot检测IQGAP1蛋白的表达,并采用Transwell 实验探讨IQGAP1蛋白促进侵袭转移的作用机制。
结果研究发现其在肺癌组织存在高表达,IQGAP1蛋白可以通过提高肺癌细胞的运动能力促进肺癌的侵袭转移。
结论IQGAP1与肺癌密切相关,可能在肺癌的侵袭和转移中起重要做用。
【Abstract】Objective To investigate the expression of Scaffold protein IQGAP1 in lung cancer, and the influence to cell invasion and metastasis.Methods The expression of IQGAPI mRNA was studied by RT-PCR, the expression of IQGAPl Protein was analyzed by immunohistochemistry and western blot, invasion and metastasis of IQGAP1was test by Transwell. Results The abnormal high expression of IQGAP1 in lung cancer tissues compared with non-cancerous tissues. The IQGAP1 expression was positive correlated with the survival of lung cancer. IQGAP1 promote lung cancer invasion and metastasis by improve cancer cell motility. Conclusion The IQGAP1 expression is closely related to lung cancer, may play important role in invasion and metastasis in human lung cancer.【Key words】lung cancer; IQGAP1; Cell movement; Invasion and metastasis1 材料与方法收集新鲜肺癌组织标本36份,标本离体后迅速切取肺癌组织;人肺正常细胞;低和高转移肺巨细胞癌细胞株95C和95D。
5种蛋白在肠道腺癌中的表达及临床意义
5种蛋白在肠道腺癌中的表达及临床意义唐大峻;文立新;秦胡兰【摘要】目的:探讨肠道腺癌中肺耐药相关蛋白(LRP)、P‐糖蛋白(P‐gp/P170)、拓扑易构酶(ToPoⅡ)、胸腺嘧啶合成酶(Ts)及谷胱甘肽转移酶(GST )‐π的表达水平及其临床意义。
方法采用免疫组化法检测96例原发性肠道腺癌及15例正常肠黏膜中Ts、P170、ToPoⅡ、LRP、GST‐π的表达情况,并综合分析其与各临床参数和预后的关系。
结果 LRP、P170、ToPoⅡ、Ts在肠道腺癌组织中呈高表达状态;5种蛋白在癌组织中的表达水平与年龄、性别无关,但在有淋巴结转移者表达高于无淋巴结转移者,LRP、P170在低分化腺癌组织中的表达明显高于高中分化腺癌,而Ts的表达明显低于高中分化腺癌;浸润肌层及以内的腺癌表达ToPoⅡ明显高于浸润至浆膜者;LRP、P170、Ts阳性表达患者的5年存活率低于阴性表达者。
结论 Ts、P170、ToPoⅡ、LRP、GST‐π5种耐药蛋白与肠道腺癌分化程度、浸润深度、淋巴结转移以及5年存活率均有不同程度的相关性,这在制订肠道腺癌的个性化化疗方案以及患者预后评估上具有重要的临床意义。
%Objective To investigate the expression and clinical significance of Thymine synthetase (Ts) ,P‐glycoprotein(P170) ,toposiomerase(ToPoⅡ) ,lung resistance‐related protein(LRP) ,glu tathione tfan sferase(GST‐π) in colorectal carcinoma tissue .Methods The expression of Ts ,P170 ,ToPoⅡ ,LRP and GST‐πin 96 patients with colorectal carcinoma and 15 healthy persons were detected by immunohistochemical technique ,and their relationship with clinical indicators and prognosis of carcinoma were explored .ResultsLRP ,P170 ,ToPo Ⅱ and Ts in in testinal tissues showed high expression inintestinal adenocarcinoma .The five kinds proteins expression levels in the adeno‐carcinoma had no relationship with age and gender ,but these were higher in the cases with lymph node metastasis than those without lymph node metastasis .The levels of LRP ,P170 in low differentiation adenocarcinoma were sig‐nificant higher than that in high differentiation adenocarcinoma ,while the expression of Ts was significant lower than that in high differentiation adenocarcinoma .The expression of ToPo Ⅱ was significant higher in invasion muscle layer than that of infiltratedserosa .The five years survival rate of patients with positive expression of LRP ,P170 were lower than that of the negative expressioncases .Conclusion Ts ,P170 ,ToPo Ⅱ ,LRP and GST‐πhave relationships with intestinal adenocarcinoma differentiation degree ,invasion depth ,lymph node metastasis and the survival rate of five years ,these relationships important for personalized chemotherapy scheme and prognostic evaluation .【期刊名称】《检验医学与临床》【年(卷),期】2015(000)004【总页数】4页(P454-456,459)【关键词】肠道腺癌;多药耐药;免疫组织化学【作者】唐大峻;文立新;秦胡兰【作者单位】重庆市石柱土家族自治县人民医院病理科 409100;重庆市石柱土家族自治县人民医院普外科 409100;重庆市石柱土家族自治县人民医院病理科409100【正文语种】中文联合化疗是中晚期肠道癌的综合性治疗手段之一,而肿瘤对化疗药物产生耐药是导致化疗失败的重要原因之一。
【精编】免疫组化在肿瘤病理诊断中的应用
人工智能
通过机器学习算法对免疫 组化图像进行自动识别和 分析,减少人为误差。
未来发展方向与前景
标准化和规范化
制定统一的免疫组化操作指南和标准,提高诊断的一致性和可靠 性。
临床转化应用
加强免疫组化技术在临床实践中的应用,提高肿瘤诊断和治疗水 平。
多学科合作
加强病理学、肿瘤学、免疫学等多学科合作,共同推动免疫组化 技术的发展和应用。
乳腺癌免疫组化诊断
总结词
乳腺癌免疫组化诊断是利用免疫组织化学技术对乳腺癌进行诊断的方法。
详细描述
通过检测乳腺癌组织中特定抗原的表达,有助于确定肿瘤的分子分型,预测患者的预后和指导治疗。常见的乳腺 癌免疫组化指标包括雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)、人类表皮生长因子受体2(HER2)等。
肺癌免疫组化诊断
05
案例分析
乳腺癌免疫组化诊断案例
总结词
乳腺癌是一种常见的恶性肿瘤,免疫组化在 乳腺癌的诊断中具有重要作用。
详细描述
通过免疫组化技术,可以检测乳腺癌组织中 雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)和 人表皮生长因子受体2(HER2)的表达情况 。这些标志物的表达状态对于乳腺癌的分类 、预后评估和指导治疗具有重要意义。例如 ,ER和PR阳性提示患者可能对内分泌治疗 敏感,而HER2阳性则提示患者可能从靶向 治疗中受益。
总结词
肺癌免疫组化诊断是利用免疫组织化学技术对肺癌进行诊断的方法。
详细描述
通过对肺癌组织中特定抗原的表达进行检测,有助于肺癌的分类、分期和预后评估。常 见的肺癌免疫组化指标包括细胞角蛋白(CK)、甲状腺转录因子1(TTF-1)等。
结直肠癌免疫组化诊断
总结词
结直肠癌免疫组化诊断是利用免疫组织 化学技术对结直肠癌进行诊断的方法。
免疫组化在肿瘤病理诊断中的应用
二、免疫组化在肿瘤诊断中的应用
(一)上皮性肿瘤标记
1.角蛋白(Keratin):一种中间丝蛋白,分 (1)表皮角蛋白(Epidermal keratin, EK)——鳞状上皮或高分化鳞癌标记;(2) 细胞角蛋白(cytokeratin,CK)——低分子 角蛋白,对腺癌、移行细胞部及低分化鳞癌 标记。一般用广谱型角蛋白抗体为好,常用。
(七)癌基因与抗癌基因,促转移与转移抑制 基因蛋白抗体标记。
目前应用很多,因方法比分子生物学技术 简单,但是这种结果不能直接反应肿瘤基因的 活性,只能间接反应肿瘤基因代谢活性,要注 意正确评价它的价值。
一、免疫组化在诊断中的应用原则
1.防止假阳性与假阴性,防止操作中的污染, 规范操作,设阳性与阴性对照。
2.选用2种以上同类抗体:目前肿瘤均为相 关抗原,特异性不足,多种同类抗体可提高 阳性率。
3.正确评价免疫组化的结果:其结果受抗 体、特异性与质量、操作、标本固定等多种 因素影响。
4.合理的选择抗体:既要符合设计的要求, 价廉物美,分1、2、3线抗体。
4.癌胚抗原(Carcinoembrgonic antigen, CEA):是从结肠癌中分离而得一种球蛋白, 定位于细胞膜上,对肠、胃、肺、胰、肝、 乳腺等腺癌标记阳性,但个别非上皮肿瘤也 可阳性。
5.甲胎蛋白(Alpha Fetoprotein,AFP): 由胎肝细胞提取的一种酸性糖蛋白,细胞浆 和膜上表达,它对肝细胞癌、卵黄囊癌的特 异性标记。睾丸
2.结蛋白(Desmin,Des):平滑肌、横纹 肌均可阳性。
3.肌动蛋白(Actin):平滑肌、血管内皮、 肌上皮细胞标记,HHF35特异。
采用组织芯片技术分析P21在胰腺癌中的表达及与预后的关系
采用组织芯片技术分析P21在胰腺癌中的表达及与预后的关系方华;玉素甫•买买提;黄韬;谢二娟【摘要】目的:分析P21蛋白在胰腺癌和癌旁组织中的表达及与预后的关系。
方法共90例胰腺癌患者纳入研究,每例均有完整的临床资料及对应的癌组织和癌旁组织标本,采用免疫组化技术进行芯片染色。
分析免疫组化染色结果中P21的表达与胰腺癌临床病理特征的关系,并进行生存分析,探讨 P21对预后的判断价值。
结果90例胰腺癌组织中P21阳性表达率为48.9%。
P21阳性表达与肿瘤大小、淋巴结转移、临床分期及细胞核增殖抗原(Ki-67)表达等相关(P<0.05)。
P21阳性组患者的总生存期(Overall survival,OS)低于 P21阴性组患者(P=0.022)。
Cox多因素分析显示胰腺癌和癌旁组织中P21的阳性表达以及胰腺癌组织中Ki-67阳性表达为患者不良预后的独立影响因素。
结论胰腺癌组织中P21阳性表达预示胰腺癌的不良预后,Ki-67与P21在胰腺癌组织中同时阳性表达或胰腺癌癌旁组织中 P21阳性表达可增加不良预后风险。
%Objective To explore the P21 expression in pancreas cancer and paracancerous tissues,and its correlation with the prognosis of pancreas cancer.Methods Immunohistochemistry was used to detect the P21 expression in 90 cases of pancre-as cancer and paracancerous tissues via tissue microarrays.The clinical data were analyzed retrospectively.Survival analysis and the COX proportional hazards model were used to explore the prognostic value of the P2 1 expression in pancreas canc-er.ResultsThe positive rate of P21 expression in 90 cases of pancreas cancer tissues was 48.9%.The P21 expression was signifi-cantly associated with tumor size,lymph node metastasis,clinicalstage,and Ki-67 expression (P<0.05 for all).The overall survival (OS)in patients positive for the P2 1 expression was significantly shorter than in those negative for the P2 1 expression (P=0.022).Multivariate analysis revealed that the P21 expression in pancreas cancer and paracancerous tissues,and the Ki-67 expression in pancreas cancer tissues were independent predictors of poor prognosis in patients with pancreas cancer.Conclusion The P21 expression predicts a poor prognosis in patients with pancreas cancer.The simultaneous expression of P21 and Ki-67 in pancreas cancer tissues or P2 1 expression in paracancerous tissues may increase the risk of poor prognosis in pancreas carci-noma.【期刊名称】《华中科技大学学报(医学版)》【年(卷),期】2016(045)003【总页数】4页(P331-334)【关键词】胰腺癌;P21;预后;细胞核增殖抗原【作者】方华;玉素甫•买买提;黄韬;谢二娟【作者单位】湖北省医学会,武汉430071;华中科技大学同济医学院附属协和医院乳腺甲状腺外科,武汉 430022;华中科技大学同济医学院附属协和医院乳腺甲状腺外科,武汉 430022;湖北省医学会,武汉430071【正文语种】中文【中图分类】R735.9胰腺癌恶性度极高[1],早期即可转移至肝脏,预后差。
FOXG1p21在结直肠腺癌中的表达及意义
65.3
52
34.7 园援园缘源
66
44.0
臆远园 岁
86
45
52.3
41
47.7
29
33.7
性别
男性
员圆圆
75
61.5
47
38.5
54
44.3
女性
114
68
59.6
46
40.4 0.791
41
36.0
部位
左半结肠、直肠
89
60
67.4
29
32.6
41
46.1
右半结肠
147
83
56.5
64
43.5 0.101
40
40.0
阅期
16
11
68.8
5
31.3 0.016
7
43.8
淋巴结转移 无
127
68
53.5
59
46.5
45
35.4
有
109
75
68.8
34
31.9 0.023
随着结直肠腺癌分化程度的降低即恶性程度 的升高 责圆员 蛋白表达丢失率逐渐升高 源猿.5豫(圆园/ 源远)、缘怨援愿豫(愿圆/员猿苑)、苑猿援6豫(猿怨/缘猿),差异有统计学 意义(P越园援园园猿);与性别、年龄、部位、阅怎噪藻泽 分期及 淋巴结转移均无明显相关性(表 1)。 圆援猿 云韵载郧员、责圆员 表达与结直肠腺癌患者预后的 关系:生存时间约圆 年、圆 年内复发/转移的结直肠腺 癌患者的 云韵载郧员 的表达阳性率和 责圆员 的表达丢
窑 228 窑
·医学检验·
山西医药杂志 2019 年 1 月第 48 卷第 2 期 Shanxi Med J,January 2019,Vol. 48. No.2
Caveolin-1蛋白在直肠癌组织中的表达及其临床意义
Caveolin-1蛋白在直肠癌组织中的表达及其临床意义刘卫梅【摘要】目的探讨Caveolin-1蛋白在直肠癌发生、发展过程中表达的变化及其临床意义.方法应用免疫组化S-P法检测直肠癌旁正常组织20例、腺瘤26例及直肠癌88例中Caveolin-1蛋白的表达情况,并讨Caveolin-1蛋白表达与直肠癌各参数之间的联系.结果 Caveolin-1蛋白在癌旁正常组织中、腺瘤及直肠癌阳性表达率分别为85.0%(17/20)、57.7%(15/26)及29.5%(26/28),3组间两两比较,差异有统计学意义(P<0.01);不同组织学类型癌组织Caveolin-1蛋白阳性表达率比较差异无统计学意义(P>0.05);直肠癌浸润深度与浅度Caveolin-1的阳性率比较差异有统计学意义(P<0.05);直肠癌高、中分化与低分化Caveolin-1的阳性率比较差异有统计学意义(P<0.05);直肠癌区域淋巴结有转移与无转移Caveolin-1的阳性率比较差异有统计学意义(P<0.05);直肠癌有远处转移与无远处转移Caveolin-1的阳性率比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 Caveolin-1蛋白在癌旁正常黏膜、腺瘤及癌组织中呈渐进性低表达,可能在直肠癌的发生、发展中起重要作用,有可能成为直肠癌非常重要的生物学标志物.【期刊名称】《中国医学工程》【年(卷),期】2016(024)003【总页数】2页(P1-2)【关键词】胞膜窖;窖蛋白-1;直肠癌;免疫组化【作者】刘卫梅【作者单位】河南省焦作市第二人民医院病理科,河南焦作454001【正文语种】中文【中图分类】R449直肠癌是消化系统较常见的恶性肿瘤,近些年来,我国直肠癌发病率呈持续上升趋势,发病率和死亡率分别为9.4/10万和10.4/10万。
直肠癌的发生、发展是一个十分复杂的过程,涉及许多肿瘤相关分子,Caveolin-1是微囊蛋白的主要结构,它与恶性肿瘤的发生、浸润、发展及转移密切相关。
免疫组化染色法及肿瘤标志物检测在结直肠癌患者中的诊断价值
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A19G9检出率及检测水平均明显高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05).结论㊀免疫组化染色法检测是肿瘤患者可选的重要检查,能检出患者抑癌基因的异常与否,有助于结直肠癌患者的诊断.肿瘤标志物C E A㊁C A12G5㊁C A19G9等是结直肠癌诊断㊁治疗及预后判断的重要标志物.关键词:免疫组化染色法;㊀结直肠癌;㊀肿瘤标志物中图法分类号:R446.6;R735.3文献标志码:A文章编号:1672G9455(2019)19G2898G03㊀㊀随着社会的发展㊁科学的进步,医疗技术日新月异,人们对于疾病的认识也越来越深入,而临床上癌症患者也越来越多,结直肠癌是消化系统中常见的恶性肿瘤之一,严重威胁患者的生命健康[1].结直肠癌患者确诊时往往已到了中晚期,生存率不太乐观[2].临床上对于结直肠癌的诊断方法很多,包括直肠指诊㊁C T㊁肠镜,最直观而准确的方法就是肠镜[3].由于基因检测费用昂贵,所以临床患者接受度差,而基因检测可准确评估患者癌症的发生和发展情况[4].结直肠癌的治疗方法有手术㊁化疗㊁放疗等,在治疗过程中常常会发生各种并发症及不良反应,严重影响患者的正常生活,对患者的生理及心理均造成严重伤8982 检验医学与临床2019年10月第16卷第19期㊀L a b M e dC l i n,O c t o b e r2019,V o l.16,N o.19害[5].目前国内外对于结直肠癌的诊断和治疗也有很多争议,近年来,关于抑癌基因K A I1的研究也有一定进展,该基因在抑制大肠癌细胞生长㊁增殖㊁转移方面有重要作用.癌胚抗原(C E A)㊁糖类抗原(C A)12G5㊁C A19G9是结直肠癌重要的肿瘤标志物,对于结直肠癌的诊断和治疗有重要意义.本研究选取2018年1-10月在该院治疗的24例结直肠癌患者和进行健康体检的24例健康人作为研究对象,探究免疫组化染色法检测在结直肠癌患者中的诊断效果及肿瘤标志物的相关性,现报道如下.1㊀资料与方法1.1㊀一般资料㊀选取2018年1-10月在本院治疗的24例结直肠癌患者作为研究组,其中男11例,女13例,另选取同期来本院进行健康体检的24例健康人作为对照组,其中男12例,女12例.对照组年龄45~65岁,平均(51.8ʃ5.9)岁;研究组年龄44~65岁,平均(51.3ʃ6.8)岁.两组研究对象年龄等一般资料比较,差异无统计学意义(P>0.05),具有可比性.1.2㊀纳入和排除标准1.2.1㊀纳入标准㊀研究组符合西医诊断结直肠癌标准;对照组明确无癌症疾病;自愿参与本研究并签署知情同意书.1.2.2㊀排除标准㊀不符合纳入标准者;精神病患者㊁神经官能症患者㊁有严重系统性疾病患者㊁其他系统癌症患者;孕妇㊁哺乳期女性㊁近期有妊娠要求者;使用过化疗药物治疗者;正在参与其他临床试验患者.1.3㊀方法㊀对两组研究对象先行腹部C T㊁M R I㊁结肠镜等检查,然后进行呼吸㊁血压㊁心率㊁脉搏等生命体征检查,并对所有研究对象进行常规处理,采取相应的措施对并发症进行预防,如对患者进行补液治疗,以纠正患者电解质紊乱.分别对研究组和对照组进行基因检测,测定体内抑癌基因K A I1分布情况;从研究组癌灶处取癌组织㊁癌旁组织㊁正常组织,采用免疫组化染色法检测,从对照组提取正常大肠组织,将组织制成标本,对标本进行染色,然后在高倍镜下观察并记录抑癌基因K A I1蛋白表达阳性率.抽取两组研究对象空腹静脉血检测血清肿瘤标志物水平.1.4㊀观察指标㊀比较两组研究对象抑癌基因表达情况及血清肿瘤标志物C E A㊁C A12G5㊁C A19G9检测水平.1.5㊀统计学处理㊀采用S P S S19.0统计软件进行数据处理及统计分析,计数资料以例数或百分率表示,两组间比较采用χ2检验;呈正态分布的计量资料以xʃs表示,两组间比较采用独立样本t检验.以P<0.05为差异有统计学意义.2㊀结㊀㊀果2.1㊀研究组和对照组不同组织中抑癌基因K A I1分布情况比较㊀研究组正常组织中抑癌基因K A I1表达分布占比为80.2%㊁癌旁组织为60.1%㊁癌组织为21.4%,正常组织㊁癌旁组织㊁癌组织中抑癌基因K A I1表达分布占比逐渐降低,差异有统计学意义(P<0.05).对照组正常组织中抑癌基因K A I1表达分布占比86.3%,研究组与对照组正常组织中抑癌基因K A I1表达分布占比差异无统计学意义(P>0.05).2.2㊀两组肿瘤标志物检出率比较㊀见表1.研究组肿瘤标志物血清C E A㊁C A12G5㊁C A19G9检出率均明显高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05).表1㊀㊀两组肿瘤标志物检出率比较[n(%)]组别n C E A㊀C A12G5㊀C A19G9㊀对照组241(4.17)0(0.00)2(8.33)研究组2421(87.50)18(75.00)19(79.17)χ25.3946.3916.125P<0.05<0.05<0.052.3㊀两组血清肿瘤标志物检测水平比较㊀见表2.研究组血清C E A㊁C A12G5㊁C A19G9检测水平均明显高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05).表2㊀㊀两组血清肿瘤标志物检测水平比较(xʃs,μg/L)组别n C E A C A12G5C A19G9对照组244.6ʃ2.416.8ʃ1.425.1ʃ6.7研究组2416.8ʃ1.433.4ʃ1.8108.0ʃ11.4t11.29410.39111.125P<0.05<0.05<0.053㊀讨㊀㊀论㊀㊀结直肠癌是常见的消化系统恶性肿瘤之一,其恶性程度高㊁病程发展较快㊁5年生存率相对较低.随着社会和经济的发展,人们的生活节奏越来越快,加之一些不良的生活习惯,癌症患者越来越多[6].结直肠癌的发生或许与身体机能变化有关,年轻人较少发生,发病年龄主要在60~70岁,男性发病率高于女性.无论是发达国家还是发展中国家,结直肠癌的发病率均较高,病死率也较高.结直肠癌病因还没有完全明确,是环境和遗传因素共同作用结果.结直肠癌的早期症状主要是排便习惯的改变㊁腹痛㊁腹胀等消化道症状,临床上对于结直肠癌常常采用手术治疗,但是术后发生不良反应的现象较多,严重威胁患者的生命健康,降低患者生活质量[7].有些患者适合术前化疗(即新辅助化疗),化疗结束后再行手术治疗,手术以后再根据病理分型选择放疗或化疗方式.有研究表明,抑癌基因K A I1可以抑制肿瘤细胞的增殖㊁侵袭和转移,并且诱导肿瘤细胞凋亡[8].恶性肿瘤最基本的生物学特性是细胞恶性增殖,细胞的9982检验医学与临床2019年10月第16卷第19期㊀L a b M e dC l i n,O c t o b e r2019,V o l.16,N o.19恶性增殖是因为失去相关基因的调控,健康人体内有致癌基因也有抑癌基因,细胞不会发生恶性增殖就是因为抑癌基因的调控作用,人体内有许多抑癌基因,熟知的有P53㊁P15等[9].当抑癌基因发生基因突变时,细胞周期调控机制紊乱,细胞发生不可控制的增殖,细胞呈现出低分化状态进而发展为癌.不同的抑癌基因作用不同,有的直接抑制肿瘤细胞增殖,有的可以诱导其他基因或者蛋白的活性来调控基因.细胞周期在正常调控下,机体才能正常运转,遗传物质才能稳定,不发生突变[10].正确认识和了解抑癌基因在不同组织内的表达及对肿瘤细胞生物学作用的影响,可以更明确地认识癌症,更好地作出诊断,进而有针对性地进行治疗.本研究相关数据显示,两组正常组织中抑癌基因K A I1表达分布占比比较,差异无统计学意义(P>0.05),抑癌基因K A I1在正常组织㊁癌旁组织㊁癌组织中表达分布占比逐渐降低,差异均有统计学意义(P<0.05),由此表明抑癌基因K A I1对癌细胞具有调控作用,能够抑制癌细胞的生长㊁增殖.健康人体内抑癌基因K A I1的存在对人体是有利而无害的.癌症患者尤其是大肠癌患者体内抑癌基因K A I1表达降低,可能是受环境因素或基因突变的影响,使该基因发生变异,表达下降[11].肿瘤标志物是肿瘤组织在发生和发展过程中所产生的特异性物质,是由肿瘤相关基因及其表达产物表达产生的,对肿瘤的诊断有重要意义.本研究中研究组肿瘤标志物C E A㊁C A12G5㊁C A19G9检出率明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);研究组血清C E A㊁C A12G5㊁C A19G9检测水平均明显高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05).C E A是结直肠癌诊断中常用的标志物,但由于其在肿瘤发展到晚期有转移时才会明显增高,因此C E A的灵敏度和特异度并不理想,只能作为参考诊断依据.C A12G5也是结直肠癌重要的标志物之一,在临床上应用广泛,肝癌患者腹水中也可发现C A12G5,在诊断结直肠癌时要排除肝癌的可能.C A19G9是结直肠癌发生时血清中水平升高的标志物之一,有一定诊断价值.每种肿瘤标志物都有其特定的意义,单一检测肿瘤标志物对于结直肠癌的诊断意义并不重要,当联合检测时,每种肿瘤标志物检测水平均升高,对于结直肠癌的诊断才有说服力.综上所述,免疫组化染色法检测是肿瘤患者可选的重要检查,能检出患者抑癌基因的异常与否,有助于结直肠癌患者的诊断.肿瘤标志物C E A㊁C A12G5㊁C A19G9等是结直肠癌诊断㊁治疗及预后的重要标志物,值得临床进一步推广应用.参考文献[1]沈小东,王喜.老年结肠癌18FG氟代脱氧葡萄糖P E T/C T 摄取值与肿瘤标志物及临床特征的相关性[J].中国老年学杂志,2016,36(10):1712G1713.[2]K I M D H,K I M B,C HO I JH,e t a l.T u m o r c h a r a c t e r i s t i c sa s s o c i a t e dw i t hm a l i g n a n t l a r g eb o w e l o b s t r uc t i o n i n s t a g eI V c o l o r e c t a lc a n c e r p a t i e n t s u n d e r g o i n g c h e m o t h e r a p y[J].I n t JC o l o r e c t a lD i s,2016,31(11):1767G1774.[3]黄坚,胡可.结直肠癌患者采用扶正消癌汤联合化疗治疗疗效及对其免疫功能㊁临床症状及生活质量的影响[J].中华中医药学刊,2017,36(6):274G277.[4]汤军,欧俐苹,陈玲,等.4种血清肿瘤标志物及粪便隐血的联合检测在D u k e sB期结肠癌诊断中的应用[J].重庆医学,2017,46(22):55G58.[5]龚庆豪,戴刚,陈海群,等.抗瘤增效方联合替吉奥治疗晚期结直肠癌疗效及对患者生存质量㊁血清肿瘤标志物的影响[J].中国实验方剂学杂志,2017,24(11):171G176.[6]韩茜,李五生,陈卫东,等.替吉奥联合健脾丸对老年结直肠癌转移患者血清肿瘤标志物㊁C O XG2及MM PG2水平影响研究[J].中华中医药学刊,2016,35(11):2734G2737.[7]华红,郝贵亮,韩彩惠,等.血清m i RG21㊁m i RG92联合检测对结直肠癌诊断效能分析及术后复发的预测价值[J].山东医药,2018,58(22):153G155.[8]姚宏伟,姚响芸,孙涛,等.腹腔镜结直肠癌根治性切除联合同期腹腔镜或开腹肝大部切除术治疗同时性结直肠癌肝转移的疗效分析[J].中华消化外科杂志,2016,15(2):128G134.[9]刘建化,黄成智,曾卫强,等.R A S突变和微卫星不稳定与Ⅲ期结直肠癌患者临床病理特征及预后的相关性分析[J].中国病理生理杂志,2017,34(10):224G225.[10]曾俊,董丹丹,李芳华.白细胞介素6在结直肠癌中的表达及其与增殖细胞核抗原表达的相关性[J].中华病理学杂志,2017,18(2):342G345.[11]惠菲菲,刘凯,杨家和,等.同时性结直肠癌肝转移结直肠癌组织中K i s sG1蛋白和基质金属蛋白酶9蛋白的表达及意义[J].中华消化外科杂志,2016,15(2):153G156.(收稿日期:2019G01G10㊀㊀修回日期:2019G04G02)0092 检验医学与临床2019年10月第16卷第19期㊀L a b M e dC l i n,O c t o b e r2019,V o l.16,N o.19。
免疫组化在血液肿瘤病理诊断中的应用及意义(一)
免疫组化在血液肿瘤病理诊断中的应用及意义(一)来源:飞华健康网近年来,血液系统肿瘤发病率呈逐年上升趋势。
急性白血病、恶性淋巴瘤是血液系统最常见的恶性肿瘤。
临床上白血病、淋巴瘤类型较多,不同类型在选择治疗方案、疗效及预后方面都不完全相同。
因此,早期诊断,正确分型是关键。
目前在血液病诊断中,形态学、组织化学、遗传学、分子生物学、流式细胞术等检测手段越来越广泛应用,但免疫组织化学(IHC)以其方法简单、特异性强、设备要求低、形态学与免疫学结合等优势,得到各级医院尤其是基层医院的广泛认可,成为其它方法不可完全取代的、血液系统肿瘤病理诊断、鉴别诊断与分型的常规检测手段。
一、血液系统肿瘤IHC检测中应注意的问题IHC方法相对简单,但从取材到发报告之间环节较多,任何环节的疏忽都可能造成检测结果偏差,甚至导致漏诊、误诊。
除IHC染色常规注意事项外,血液肿瘤标本的检测还有其特殊性。
1.标本的前期处理血液系统疾病病理诊断标本,主要是淋巴结、脾脏和骨髓组织。
与其它组织相似,造血细胞表面抗原不同其稳定性会有差异,从而对固定剂的耐受性不同。
组织固定的原则,是采用10%中性福尔马林作为固定剂,固定时间最好不超过24小时。
(1)淋巴结:取材后迅速固定,待组织表面变硬即可修块。
以淋巴结大小为直径,厚度不超过3mm,以使组织得到充分的固定。
如淋巴结中有淤血、坏死成分,应尽量除去。
组织制片中的每个步骤都应严格掌握,以免破坏组织的抗原活性。
(2)脾脏:脾脏组织较大,应注意多点取材;脾脏又是贮血器官,含血量多,取材时应尽量除去积血;取材大小以2×2×7.5px 为宜,取材后尽快固定。
在多块标本中,病理医师应根据HE切片,挑出病变明显的 1~2 块作 IHC 染色。
(3)骨髓组织:特点为组织小,主要为骨质,造血细胞充斥于骨小梁之间。
在组织制片的每个步骤都应相应缩短时间。
骨髓组织制片需要脱钙,酸性脱钙液对抗原活性有影响,常规采用的2%硝酸,脱钙不应超过3小时。
临床分析利用免疫组化技术鉴定肿瘤标志物
临床分析利用免疫组化技术鉴定肿瘤标志物肿瘤标志物是指在体内或体外可检测到的与肿瘤发生和发展相关的物质。
临床上,通过检测肿瘤标志物可以辅助诊断、评估疗效以及监测肿瘤的变化。
而免疫组化技术作为一种重要的检测手段,被广泛应用于肿瘤标志物的鉴定。
本文将对其临床分析利用免疫组化技术鉴定肿瘤标志物的意义、方法以及研究进展进行探讨。
一、免疫组化技术在肿瘤标志物鉴定中的意义免疫组化技术是一种基于免疫反应原理的检测方法,通过对组织或细胞进行抗体的特异性染色,从而判断目标蛋白的表达情况。
在肿瘤标志物的鉴定中,免疫组化技术具有以下几个重要意义:1. 提高准确性:相比传统的组织学染色方法,免疫组化技术更加准确、敏感,能够通过对蛋白的特异性检测,有效区分肿瘤细胞与正常细胞,减少误诊率。
2. 针对靶向治疗:免疫组化技术可以检测到许多与靶向治疗相关的标志物,为患者的个体化治疗提供可靠的依据。
例如,HER2阳性乳腺癌患者可以接受靶向治疗,通过免疫组化技术确定其HER2表达情况,从而指导治疗方案。
3. 监测预后:通过免疫组化技术检测肿瘤标志物的变化,可以判断肿瘤的预后情况。
一些肿瘤标志物的表达水平与肿瘤细胞的恶性程度、预后相关,通过对这些标志物的定量分析,可以预测肿瘤的侵袭性及患者的预后。
二、免疫组化技术鉴定肿瘤标志物的方法免疫组化技术鉴定肿瘤标志物主要包括抗体的选择、标本的制备以及染色的操作。
下面将依次介绍具体步骤:1. 抗体的选择:选择合适的抗体对于免疫组化技术的成功实施至关重要。
抗体的选择应基于对目标蛋白的特异性,不同类型的肿瘤标志物可能需要不同的抗体。
目前已经有许多商业化的抗体可以供临床使用,也可以根据需要选择定制的抗体。
2. 标本的制备:标本的制备对于免疫组化技术的结果至关重要。
一般来说,组织标本需要进行固定、包埋等处理,以保持组织结构完整性。
此外,对于液基细胞学标本,需要根据标本类型选择适当的操作步骤。
3. 染色的操作:染色是免疫组化技术中最关键的步骤之一。
免疫组化在肺小结节穿刺活检标本中对非小细胞肺癌诊断应用分析
免疫组化在肺小结节穿刺活检标本中对非小细胞肺癌诊断应用分析【摘要】肺小结节是一种常见的肺部病变,其中一部分可能是非小细胞肺癌。
免疫组化技术在肺小结节穿刺活检标本中的应用越来越受到关注,可以帮助提高肺癌的诊断准确性和精准治疗。
本文通过介绍肺小结节穿刺活检的临床诊断意义、免疫组化技术在肺癌诊断中的应用、以及在非小细胞肺癌诊断中的新进展,探讨了免疫组化在肺小结节穿刺活检标本中的应用分析。
结果表明,免疫组化技术在肺小结节穿刺活检标本中对非小细胞肺癌诊断具有重要意义,未来的研究方向应当更加深入探讨其临床应用前景,为提高肺癌诊断的准确性和精准治疗提供更多有益信息。
【关键词】肺小结节穿刺活检、免疫组化、非小细胞肺癌、诊断、肺癌、临床应用、新进展、重要性、未来研究方向、应用分析、临床应用前景。
1. 引言1.1 背景介绍肺癌是全球范围内死亡率最高的恶性肿瘤之一,特别是非小细胞肺癌(NSCLC)占据了大部分肺癌患者的比例。
肺小结节是肺癌的早期病变,临床上对肺小结节的诊断和鉴别诊断具有重要意义。
肺小结节穿刺活检是一种常用的检查手段,可以为肺癌的诊断提供可靠的组织学证据。
由于肺癌在组织学上的异质性以及肺小结节的微小结构特点,常规的组织学检查往往存在一定的局限性。
对免疫组化技术在肺小结节穿刺活检标本中对非小细胞肺癌诊断应用进行深入研究和分析具有重要的临床意义和科学价值。
本研究旨在探讨免疫组化技术在肺小结节穿刺活检中的应用特点和优势,为肺癌的早期诊断和治疗提供更准确的参考依据。
1.2 研究目的本研究的目的是探讨免疫组化在肺小结节穿刺活检标本中对非小细胞肺癌诊断的应用分析。
通过对免疫组化技术在肺癌诊断中的应用进行深入研究和分析,旨在提高对非小细胞肺癌的诊断准确性和有效性,为临床医生提供更加可靠的诊断依据。
本研究还旨在探讨免疫组化在肺小结节穿刺活检标本中的具体应用价值,从而为临床实践提供指导和帮助。
通过对免疫组化在非小细胞肺癌诊断中的新进展进行总结和分析,可以为未来的研究和临床实践提供参考和启示。
结肠腺癌的免疫组化分析
结肠腺癌的免疫组化分析
来源:网络
结肠腺癌是结肠腺上皮来源的常见消化道恶性肿瘤,属于结肠癌多种病理类型中的一种。
其病因尚未明确,但本病的发生与多脂肪少纤维的饮食有关,腺瘤状息肉、结肠血吸虫、非特异性溃疡性结肠炎、结肠腺癌细菌性痢疾、阿米巴肠病等亦与本病发生密切相关。
约40%的结肠癌分布于直肠及直肠乙状结肠曲,其余分布于乙状结肠、盲肠、升结肠、降结肠、横结肠及肝、脾曲等处。
一、临床表现
结肠癌起病隐匿,早期仅见粪便隐血阳性,逐步为血便、痢疾样脓血便,里急后重,有时呈顽固性便秘,大便形状变细,或糊状大便,或腹泻与便秘交替,这些改变成为结肠癌的突出表现。
病人常有不同程度的腹痛,常有糜烂、坏死和继发性感染,如发生在右侧则会产生右腹部钝痛,有时出现餐后腹痛。
左侧结肠癌常并发肠梗阻,时有腹部绞痛,伴有腹胀、肠鸣音亢进等。
腹部肿块多见于右腹部,是右侧结肠癌的表现之一,提示已到中晚期,肿块表面可有结节感,一般可以推动,但到肿瘤晚期时则固定,合并感染时可有压痛。
结肠癌的患者可出现进行性贫血,低热,进行性消瘦,恶液质,肝肿大、浮肿、结肠腺癌黄疸和腹水等。
二、免疫组化。
结肠癌组织中AQP1表达与临床病理特征的关系与预后研究
结肠癌组织中AQP1表达与临床病理特征的关系与预后研究甄时建【摘要】目的探析结肠癌组织中AQP1表达与临床病理特征之间的关系与预后.方法选择2010年1月至2013年1月期间我院收治的55例结肠癌患者为研究对象,对AQP1表达情况进行检测,对结肠癌病理特征与AQP1之间的关系进行分析.结果癌旁组织与结肠癌的AQP1表达比较有统计学意义(P<0.05).结论结肠癌组织中AQP1表达明显升高,与预后和临床病理特征有关,是比较重要的一个指标.【期刊名称】《中国医药指南》【年(卷),期】2017(015)002【总页数】2页(P4-5)【关键词】结肠癌;AQP1;预后【作者】甄时建【作者单位】湖南中医药高等专科学校附属第一医院病理科,湖南株洲412000【正文语种】中文【中图分类】R735.3+51.1 一般资料:选择2010年1月至2013年1月期间我院收治的55例结肠癌患者为研究对象,其中15例为女性,40例为男性,年龄39~75岁,平均年龄为(57.6±9.3)岁,取结肠癌55例和癌旁组织42例石蜡标本进行研究。
1.2 方法1.2.1 免疫组化染色:石蜡标本连续4 μm切片,脱蜡水化后,用3%过氧化氢进行孵育,蒸馏水冲洗干净后以PBS浸泡,并对其进行抗原修复。
操作的过程中,严格按照试剂盒要求进行:工作液封闭、滴加一抗孵育并冲洗,滴加二抗工作液孵育并冲洗,DAB显色,用苏木素进行复染后梯度酒精脱水干燥,最后用中性树脂封片,显微镜下观察判定结果。
1.2.2 判断结果:由2名专业病理医师对免疫组化结果进行双盲阅片,选择每张切片的5个高倍视野,随机对每个视野的100个细胞进行计数,对阳性率进行计算。
通常情况下,AQP1在细胞质和细胞膜内呈现出棕黄色或者黄色颗粒则可以判定结果为阳性。
AQP1阳性计分标准:(++)为细胞阳性表达≥50%;(+)为细胞阳性表达<50%;(-)为细胞内不存在阳性表达。
FBP1在肾透明细胞癌组织中的表达变化及意义
FBP1在肾透明细胞癌组织中的表达变化及意义洪正东;朱安义;王艳华;史子敏;胡映波【摘要】目的探讨果糖1,6二磷酸酶1(FBP1)在人肾透明细胞癌(RCCC)及其癌旁组织中的表达,以及在肾癌发生、发展及预后中的作用和临床意义.方法选取手术切除的118例RCCC患者的石蜡切片和40例RCCC患者的新鲜标本,分别采用免疫组织化学方法、Western blot和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测肾癌及对应癌旁组织(阴性切缘)中FBP1蛋白及mRNA的表达,分析其与患者临床病理特征及预后的相关性.结果免疫组织化学发现78.81% (93/118)的癌旁组织中可见FBP1蛋白呈强阳性表达,仅39.83%(47/118)的肾癌组织中FBP1蛋白表达阳性.Western blot发现肾癌组织中FBP1的表达阳性率较其相应癌旁组织明显下降(P<0.01).RT-PCR法发现癌旁组织FBP1 mRNA表达水平亦明显高于肾癌组织(P <0.05).FBP1低表达与临床分期、病理分级、危险系数及是否复发明显相关(P<0.05),与年龄、性别、症状及肿瘤大小、部位、是否有坏死、是否有血管侵犯和肾上腺是否有累及无关(P>0.05).FBP1阳性表达的肾癌患者的5年生存率高于FBP1阴性表达者(P<0.05).结论 FBP1及其蛋白在人肾癌组织中低表达,与肾癌的发生、发展相关,可能成为肾癌预后的侯选标志物之一.%Objective To investigate the expression of FBP1 in human renal clear cell carcinoma and paracancerous tissue and its effect and clinical significance in thecarcinogenesis,progression and prognosis of renal cancer.Methods The paraffin sections from 118 patients with renal clear cell carcinoma treated by surgical resection and fresh specimens from 40 patients with renal clear cell carcinoma were selected.The expressions of FBP1 protein and mRNA in renal cancer and paracancerous tissues(negative incisal edge) weredetected by adopting the immunohistochemistry(IHC),Western blot and RT-PCR.Its correlation with clinicopathologic characteristics and prognosis of the patients was analyzed.Results The IHC result,found that strong positive expression of FBP1 protein could be seen in 78.81% (93/118) of cancer-adjacent tissues,while only 39.83% (47/118) of renal cancer tissues had positive expression.Western blot found that the expression positive rate of FBP1 in renal cancer tissue was significantly decreased compared with corresponding cancer-adjacent tissues (P<0.01).RT-PCR found that the FBP1mRAN expression level in cancer-adjacent tissues was also significantly higher than that in renal cancer tissue(P<0.05).The FBP1 low expression was significantly correlated with the clinical stage,pathologic grade,UISS risk coefficient and recurrence(P<0.05),and had no relation with the age,gender,symptoms,tumor size,location,tumor necrosis,vascular invasion and adrenal involvement(P>0.05).The 5-year survival rate in renal cancer patients with FBP1 positive expression was higher than that in the patients with FBP1 negative expression(P<0.05).Conclusion FBP1 and protein are lowly expressed in renal cancer tissue,are correlated with occurrence and development of renal cancer,and may become one of candidate markers of renal cancer prognosis.【期刊名称】《重庆医学》【年(卷),期】2018(047)014【总页数】4页(P1878-1881)【关键词】肾透明细胞癌;果糖1;6二磷酸酶1;基因表达【作者】洪正东;朱安义;王艳华;史子敏;胡映波【作者单位】南昌大学第二附属医院泌尿外科,南昌330006;南昌大学第二附属医院泌尿外科,南昌330006;南昌大学第二附属医院泌尿外科,南昌330006;南昌大学第二附属医院泌尿外科,南昌330006;南昌大学第二附属医院泌尿外科,南昌330006【正文语种】中文【中图分类】R737.11肾癌又称肾细胞癌(renal cell carcinoma,RCC),主要起源于肾小管上皮细胞,是最常见的泌尿系统致死性肿瘤之一,近年在世界各国均有发病率上升的趋势。
免疫组化名称及各指标染色的意义
免疫组化名称及各指标染色的意义ACTH 促肾上腺皮质激素。
可用于垂体腺瘤的功能性分类,有助于区分原发性和转移性垂体肿瘤。
某些神经内分泌肿瘤也可出现阳性反应。
Actin 肌动蛋白。
用于标记骨骼肌、心肌、平滑肌及其来源的肿瘤。
AFP 甲胎蛋白.用于标记肝癌、卵黄囊瘤和某些生殖细胞肿瘤。
Bcl-2 主要用于滤泡性淋巴瘤、毛细胞性白血病的辅助诊断及细胞凋亡方面的研究。
CerbB-2 主要作为判断乳腺癌、卵巢癌、子宫内膜癌及消化道肿瘤预后的参考指标,并用于赫赛汀治疗乳腺癌的药物治疗的筛选.CD3 目前是T细胞标记物的首选。
95%以上的T细胞或NK细胞淋巴瘤阳性表达。
CD4 辅助T细胞。
与CD8联合使用,对于某些疾病的诊断、疗效观察及预后有一定意义。
CD8 细胞毒T细胞.一般与CD4联合使用。
CD10 为滤泡中心细胞的标记。
Burkitt淋巴瘤/生发中心母细胞/生发中心滤泡性淋巴瘤可阳性CD15 是成熟粒细胞、R—S细胞的标志之一.主要用于标记霍奇金淋巴瘤。
CD20 B细胞的标记。
主要用于B细胞淋巴瘤的诊断。
CD21 主要用于B细胞、滤泡树突状细胞及其来源的肿瘤.CD30 主要用于R-S细胞和大多数间变性大细胞淋巴瘤的标记。
CD31 内皮细胞标记。
主要用于良、恶性血管源性肿瘤和鉴别诊断以及肿瘤中血管分布的研究。
CD34 内皮细胞标记。
主要用于良、恶性血管源性肿瘤和鉴别诊断以及肿瘤中血管分布的研究。
与CD117联合用于诊断间质瘤.CD56 是NK细胞淋巴瘤比较好的标记物.还可用于神经源性肿瘤的辅助诊断.CD57 自然杀伤细胞.主要用于NK细胞介导的细胞毒、NK细胞及T细胞亚群的功能方面的研究。
CD68 巨噬细胞.可作为组织细胞标记物及骨髓白血病的的鉴别。
CD99 有助于尤文肉瘤、原始神经外胚叶肿瘤、小圆细胞肿瘤进行鉴别。
也可用于鉴别胸腺上皮性肿瘤。
CD117 是胃肠道间质瘤的特异性标记物,可用于指导格列卫药物治疗。
结直肠癌组织中CCNA1、CDC20表达水平及临床预后意义
结直肠癌组织中CCNA1、CDC20表达水平及临床预后意义刘然;熊中原;王晓红【期刊名称】《分子诊断与治疗杂志》【年(卷),期】2024(16)5【摘要】目的探讨结直肠癌(CRC)组织中细胞周期蛋白A1(CCNA1)、细胞分裂周期蛋白20(CDC20)表达水平及与患者临床表现、预后的关系。
方法选取2018年11月至2020年12月期间北京市平谷区医院收治的146例CRC患者作为研究对象,将手术取得癌组织标本纳入CRC组(n=146),将相对应的癌旁组织(离癌组织>3 cm)标本纳入癌旁组(n=146)。
采用免疫组化法检测组织中CCNA1、CDC20表达情况。
通过χ2检验分析CCNA1、CDC20表达与CRC患者临床病理特征的关系,采用多因素Cox回归分析探讨CRC患者预后的相关因素。
结果CRC组CCNA1、CDC20的阳性表达率均高于癌旁组,差异有统计学意义(均P<0.05)。
分化程度为低分化、TNM分期为Ⅲ期、有神经侵犯的患者CCNA1阳性表达率、CDC20阳性表达率分别高于中/高分化、TNM分期Ⅰ~Ⅱ期、无神经侵犯患者,差异有统计学意义(均P<0.05)。
分化程度中/高分化、TNM分期为Ⅰ~Ⅱ期、无神经侵犯、CCNA1阴性、CDC20阴性患者3年生存率分别高于分化程度低分化、TNM分期Ⅲ期、有神经侵犯、CCNA1阳性、CDC20阳性患者,差异有统计学意义(均P<0.05)。
多因素Cox回归分析显示,低分化(HR=2.125,95%CI:1.406~3.214)、TNM分期Ⅲ期(HR=2.614,95%CI:1.504~4.544)、有神经侵犯(HR=2.337,95%CI:1.498~3.647)、CCNA1阳性(HR=2.765,95%CI:1.758~4.348)、CDC20阳性(HR=3.550,95%CI:2.075~6.074)是CRC患者预后的影响因素(P<0.05)。
AF1q在人结直肠癌中的表达及其对结直肠癌细胞增殖及侵袭转移的影响
AF1q在人结直肠癌中的表达及其对结直肠癌细胞增殖及侵袭转移的影响目的:研究AF1q在结直肠癌细胞系及肿瘤组织中的表达情况,探讨AF1q 的表达与结直肠癌发生的相关性。
方法:1.通过RT-PCR免疫组化方法比较AF1q 在结直肠癌组织及癌旁组织中的表达情况及其与临床病理资料的关系。
2. 利用癌症基因组图谱在线数据库(TheCancer Genome Atlas,TCGA)进行生存分析,探讨AF1q与结直肠肿瘤的预后关系。
3.通过RT-PCF及Western Blot方法比较AF1q在不同结直肠癌细胞系中的表达情况;结果:1.AF1q基因mRN表达水平以及蛋白质表达水平, 在结直肠癌组织中均明显高于对照癌旁组织。
回归分析显示,AF1q的表达水平与结直肠癌的淋巴结转移、TNM分期密切相关。
2.利用TCG徼据库结果进行生存分析提示,无论是总生存率(OS,overall survival) 还是无疾病生存率(DFS,disease free survival),AF1q 高表达组均显著差于AF1q低表达组。
3.AF1q在结直肠癌细胞系(SW480,SW48,KM12,SW620,and LoV(中的表达高于对照正常肠上皮细胞系(NCM460。
在SW620LoVo细胞系中高表达,在SW48SW48(细胞系中低表达。
结论:AF1q的表达水平与结直肠癌患者的淋巴结转移情况、TNM分期、以及预后情况密切相关。
AF1q在结直肠癌细胞系中的表达水平高于正常肠上皮细胞系。
目的: 研究结直肠癌细胞系中AF1q对肿瘤细胞增殖、凋亡、侵袭转移能力的影响。
方法:1.在AF1q本底表达较高的SW620 LoVo细胞系中构建AF1q稳定低表达的SW620-shAF1q LoVo-shAF1q细胞系;在AF1q本底表达较低的SW48 SW620细胞系中构建AF1q稳定高表达的SW48-AF1qSW480-AF1细胞系。
并用Western Blot方法检测构建的稳转细胞系中AF1q的表达情况。
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免疫组化法和qPCR技术检测FBP1在结直肠腺癌中的表达及临床意义刘家有;邓世山;朱剑军;侯令密;谢少利;黄波【摘要】Objective:To explore the expression of FBP1 in colorectal adenocarcinoma and its clinical significance.Methods:46 pairs of fresh human colorectal adenocarcinoma tissues and its adjacent normal tissues were collected from the Affiliated Hospital of North Sichuan Medical College from September 2014 to February 2016,Quantitative RT-PCR was used to detect the expression level of FBP1 mRNA in tissues.30 specimens of human colorectal adenocarcinoma tissues and its adjacent normal tissues were collected from the Affiliated Hospital of North Sichuan Medical College from July 2015 to June 2016,immunohistochemical was used to exam the level of FBP1.Results:Quantitative RT-PCR show that the expression level of FBP1 mRNA in colorectal adenocarcinoma tissues was remarkably lower than that in adjacent normal colorectal tissues(t=2.934,P=0.006).The expression level of FBP1 decreased as the increase of malignancy degree and Duke's stages and distant lymph metastases in colorectal adenocarcinoma (P=0.000).The expression level of FBP1 mRNA in male patients was higher than that in those females,but the difference was not significant (t=1.294,P=0.165).Immunohistochemical results show that the expession level of FBP1 in colorectal adenocarcinoma tissues was lower than that in adjacent normal colorectal tissues(χ2=19.461,P=0.000).Conclusion:The decreased expression level of FBP1mRNA and its protein may act a critical role in colorectal adenocarcinoma and may be used as a potential therapeutic target for colorectal adenocarcinoma.%目的:探讨果糖-1,6-二磷酸酶1 (fructose-1,6-bisphosphatase 1,FBP1)基因在结直肠腺癌的表达水平及其与临床病理特征的联系.方法:qPCR技术检测川北医学院附属医院2014年9月至2016年2月新鲜结直肠腺癌组织及癌旁正常组织46 例中FBP1基因的表达水平.免疫组化方法检测川北医学院附属医院2015年7月至2016年6月结直肠腺癌及癌旁对照组织的蜡块标本30例中FBP1的表达及分布情况.结果:qPCR技术检测结果表明,FBP1 基因在结直肠腺癌组织中的表达水平低于在癌旁正常组织中的表达水平(t=2.934,P=0.006);FBP1基因在结直肠腺癌组织中的表达水平随着结直肠腺癌肿瘤的恶性程度的增加(F=13.267,P=0.000)、Duke's 分期的增加(F=15.864,P=0.000)、远处淋巴结的转移(t=14.285,P=0.000)而降低;FBP1基因在男性患者的结直肠腺癌组织中的表达水平高于其在女性患者的表达水平,但差异无统计学意义(t=1.294,P=0.165).免疫组化结果显示FBP1在结直肠腺癌组织中低表达甚至缺失,而在癌旁正常组织中高表达,二者差异具有统计学意义(χ2=19.461,P=0.000).结论:FBP1 基因及蛋白质的低表达可能在结直肠腺癌的发生发展中有着重要的作用,是其潜在的治疗靶标.【期刊名称】《川北医学院学报》【年(卷),期】2017(032)002【总页数】5页(P167-171)【关键词】结直肠腺癌;果糖-1,6-二磷酸酶1;免疫组化法;qPCR【作者】刘家有;邓世山;朱剑军;侯令密;谢少利;黄波【作者单位】川北医学院人体解剖学教研室,四川南充 637000;川北医学院人体解剖学教研室,四川南充 637000;川北医学院人体解剖学教研室,四川南充 637000;川北医学院附属医院普外科,四川南充 637000;川北医学院附属医院普外科,四川南充 637000;川北医学院临床技能培训中心,四川南充 637000【正文语种】中文【中图分类】R735.3结直肠腺癌是消化道第二位的常见恶性肿瘤,位居癌症死亡率第四位,严重威胁人类的健康[1],探索与结直肠腺癌发病的相关基因,对结直肠腺癌的早期预防和诊治具有重要意义。
果糖-1,6-二磷酸酶1 (fructose-1,6-bisphosphatase1,FBP1)是葡萄糖异生的关键酶之一,在机体内源性葡萄糖的合成、输出及调控中发挥重要作用[2]。
研究发现FBP1与许多肿瘤的发生发展相关,如FBP1基因表达水平的降低或缺失导致肾透明细胞癌的恶性程度增加、患者的预后变差[3];FBP1在乳腺癌中和在肝细胞癌中的表达水平也降低,且随着恶性程度的增加而降低[4-5]。
但在结直肠腺癌中FBP1基因的表达情况如何,目前尚未见相关文献报道。
本文通过免疫组化方法和qPCR技术检测FBP1在结直肠腺癌中的表达情况,探讨FBP1与临床病理特征之间的关系,为结直肠腺癌早期诊断、治疗及寻找潜在的靶标提供理论基础。
1.1 研究对象收集川北医学院附属医院2014年9月至2016年2月新鲜结直肠腺癌(该诊断均经病理证实)及对照癌旁正常组织(距肿瘤边缘大于5 cm以上,病理未发现癌细胞)标本46例,年龄37~79岁,平均年龄57.5岁,中位年龄59岁。
标本收集后立即置于液氮中速冻,及时提取组织总RNA并进行逆转录。
收集川北医学院附属医院2015年7月至2016年6月结直肠腺癌及癌旁正常组织标本30例,年龄28~77岁,平均年龄56.8岁,中位年龄58岁。
1.2 主要试剂Trizol试剂购自Ambion公司;Revert Aid first strand cDNA Synthesis Kit 反转录试剂盒购自Thermo Scientific公司;SYBR ®Premix Ex TMTaq Ⅱ试剂购自TaKaRa 公司;琼脂糖购自碧云天公司;Goldenview购自于碧云天公司;Marker Ⅰ 购自 Tiangen 公司;MS anti-FBP1 购自abcom 公司,Goat anti-MS购自abcom 公司,免疫组化(SP)试剂盒与DAB 显色试剂盒均购自北京中杉金桥公司。
1.3 RNA 提取及反转录取新鲜组织 50~80 mg,液氮中研磨均匀成末,按照Trizol说明书操作提取组织总RNA,按照 Revert Aid first strand cDNASynthesis Kit 反转录试剂盒说明书将细胞总RNA逆转录为 cDNA。
1.4 qPCR引物设计按照qPCR引物设计原则,运用 Primer 3.0 软件设计引物,经验证成功设计的基因序列见表1。
qPCR 反应条件:95 ℃预变性3 min,94 ℃变性10 s,54 ℃退火10 s,72 ℃延伸10 s, 40个循环,每个循环结束后进行荧光信号收集。
为判断PCR产物的特异性,在扩增程序结束后,加设一个溶解程序,来形成熔解曲线,溶解温度设置为65~90 ℃,每0.5 ℃为一个梯度,进行荧光信号收集。
每个样本设置3个复孔,取Ct平均值进行计算。
ΔCt=Ct FBP1-Ct GAPDH,ΔCt值越小说明该目的基因的表达量越高,反之亦然。
2-ΔCt表示目的基因相对于内参基因的表达量;本实验用2-ΔCt来表示46个样本中FBP1基因的表达量。
1.5 免疫组化检测所有蜡块由川北医学院附属医院病理科代为切片,SP 法染色,按试剂盒说明书操作,其中一抗和二抗的浓度均为1∶200 ,DAB 显色,苏木素复染。
高倍镜下选取 9个视野计数细胞,按着色深浅评分:无显色0分,弱着色1分,中等着色2分和强着色3分。
根据阳性细胞数占同类细胞数的百分比评分:<25%为1分,25%~50%为2分,51%~75%为3分,>75%为4分。
取两项评分的乘积作为总积分,>5分为高表达,≤4分则为低表达。
以高表达判为阳性。
1.6 统计学分析SPSS 19.0 软件对数据进行分析。
卡方检验检测FBP1蛋白在30例结直肠腺癌组织与对照癌旁组织中表达阳性率的差异;配对t检验检测FBP1 基因在结直肠腺癌中与对照癌旁组织中表达水平的差异;独立样本t检验检测FBP1 基因表达水平差异与结直肠腺癌患者的年龄、性别、淋巴结转移的相关性;方差检验检测FBP1表达水平差异与结直肠腺癌患者Duke’s 分期、肿瘤分化类型的相关性。
P< 0.05 为差异有统计学意义。
2.1 FBP1蛋白在组织中的表达情况免疫组化的结果(图1)显示,FBP1在结直肠细胞中主要分布于细胞核和细胞膜,其在30例癌旁正常组织中表达为阳性有25例,阳性表达率为83.33%;FBP1在30例结直肠腺癌组织中表达为阳性有8例,阳性表达率为26.67%(表2)。