LS55操作说明书荧光-磷光-发光分光光度计中文培训手册
LS55荧光分光光度仪说明书
ＬＳ－４５／５５荧光／磷光／发光分光光度计使用说明书美国Perkin Elmer公司２００３ 年４月一、理论基础荧光、磷光、化学发光及生物发光均属于分子发光。
现将其原理简介如下：室温下，大多数分子处于基态的最低振动能层。
处于基态的分子吸收能量后被激发为激发态。
激发态不稳定，将很快衰变到基态。
若返回到基态时伴随着光子的辐射，这种现象被称为“发光”。
每个分子具有一系列严格分立的能级，称为电子能级，而每个电子能级中又包含了一系列的振动能层和转动能层。
图中基态用Ｓ０表示，第一电子激发单重态和第二电子激发单重态分别用Ｓ１、Ｓ２表示，０、１、２、３…表示基态和激发态的振动能层（见图１），第一、二电子的激发三重态分别用Ｔ１和Ｔ２表示（见图２）。
图１荧光的能级图１、荧光的产生当分子处于单重激发态的最低振动能级时，去活化过程的一种形式是以１０－９～１０－６秒左右的短时间内发射一个光子返回基态，这一过程称为荧光发射（见图１）。
２、磷光的产生从单重态回到三重态的分子系间跨越越迁发生后，接着发生快速的振动驰豫而到达三重态的最低振动能层上，当没有其他过程同它竞争时，在１０－４～１０２秒左右的时间内跃迁回基态而发生磷光（见图２）。
由此可见，荧光与磷光的的根本区别是：荧光是由激发单重态最低振动能层至基态各振动能层的跃迁产生的，而磷光是由激发三重态的最低振动能层至基态各振动能层间跃迁产生的。
图２磷光的能级图３、化学发光及生物发光的产生某些物质在进行化学反应时，由于吸收了反应时产生的化学能，而使反应产物分子激发至激发态，受激分子由激发态回到基态时，便发出了一定波长的光，这种吸收化学能使分子发光的过程称为化学发光。
化学发光也发生于生命体系，这种发光被称为生物发光。
二、仪器简介１、仪器原理图３ＬＳ４５／５５荧光／磷光／发光分光光度计的原理图用于测量荧光／磷光／发光的ＬＳ４５／５５是由图３所示的五个主要部件组成的：光源、激发光单色器、样品池、发光单色器及检测器。
Zeiss Supra55扫描电镜操作使用
Zeiss Supra55扫描电镜操作使用zeisssupra55扫描电镜操作使用zeisssupra55(vp)扫描电子显微镜简明操作指南一、开机表明冷启动步骤1、启动ups关上墙上空气控制器，证实ups后面电池控制器关上，按前面面板上on键至两个绿灯暗。
2、启动循环水冷机。
按on键，确认水泵1和制冷指示灯亮。
检查出水口压力在2～3bar。
出水口压力可以由压力表下方阀门调节。
若存有报警，检查水位，按res键。
3、启动空气压缩机。
确认空气压缩机上启动阀门上开关为“i”状态。
检查输出气压为5～6bar。
4、确认主机后两个电源开关状态为on。
此时，主机前面板上红灯暗。
5、按下黄键。
说明：前级真空泵进入工作状态，分子泵、潘宁计和离子泵自动顺序启动。
6、按下绿键。
按下绿键后，电脑可以自动启动，输出计算机密码：7、启动smartsem软件。
用户名：system密码：8、检查真空值，等待真空就绪。
特别注意：当systemvacuum<2×10mbar时，可以自动关上civ阀门(columnisolationvalve)，并启动离子泵。
当gunvacuum=<5×10mbar时，可以启动灯丝。
若长期停机，aes蒸煮。
9、打开灯丝。
10、开tv，检查样品台。
11、装样品(见第二部分)。
12、加高压(eht)。
13、观察样品。
-9-5待机状态1、停用高压(eht)。
2、停用smartsem软件。
注意：分两步，先关用户界面userinterface，后关后台程序emserver。
3、关windows。
4、必要时，第一关能谱、ebsd。
5、按下黄键此时，电子光学系统、样品台及检测系统电源关闭。
电镜真空系统和灯丝继续工作。
待机状态启动1、按下绿键。
按下绿键后，电脑可以自动启动，输出计算机密码：2、启动smartsem软件。
用户名：system密码：3、检查真空值。
4、换样或加高压观察样品。
LS-50荧光分光光度计操作手册
ＬＳ－４５／５５荧光／磷光／发光分光光度计使用说明书美国Perkin Elmer公司王国强黄建权编译２００２年４月一、理论基础荧光、磷光、化学发光及生物发光均属于分子发光。
现将其原理简介如下：室温下，大多数分子处于基态的最低振动能层。
处于基态的分子吸收能量后被激发为激发态。
激发态不稳定，将很快衰变到基态。
若返回到基态时伴随着光子的辐射，这种现象被称为“发光”。
每个分子具有一系列严格分立的能级，称为电子能级，而每个电子能级中又包含了一系列的振动能层和转动能层。
图中基态用Ｓ０表示，第一电子激发单重态和第二电子激发单重态分别用Ｓ１、Ｓ２表示，０、１、２、３…表示基态和激发态的振动能层（见图１），第一、二电子的激发三重态分别用Ｔ１和Ｔ２表示（见图２）。
图１荧光的能级图１、荧光的产生当分子处于单重激发态的最低振动能级时，去活化过程的一种形式是以１０－９～１０－６秒左右的短时间内发射一个光子返回基态，这一过程称为荧光发射（见图１）。
２、磷光的产生从单重态回到三重态的分子系间跨越越迁发生后，接着发生快速的振动驰豫而到达三重态的最低振动能层上，当没有其他过程同它竞争时，在１０－４～１０２秒左右的时间内跃迁回基态而发生磷光（见图２）。
由此可见，荧光与磷光的的根本区别是：荧光是由激发单重态最低振动能层至基态各振动能层的跃迁产生的，而磷光是由激发三重态的最低振动能层至基态各振动能层间跃迁产生的。
图２磷光的能级图３、化学发光及生物发光的产生某些物质在进行化学反应时，由于吸收了反应时产生的化学能，而使反应产物分子激发至激发态，受激分子由激发态回到基态时，便发出了一定波长的光，这种吸收化学能使分子发光的过程称为化学发光。
化学发光也发生于生命体系，这种发光被称为生物发光。
二、仪器简介１、仪器原理图３ＬＳ４５／５５荧光／磷光／发光分光光度计的原理图用于测量荧光／磷光／发光的ＬＳ４５／５５是由图３所示的五个主要部件组成的：光源、激发光单色器、样品池、发光单色器及检测器。
荧光光谱 FL概要
S1
２. 无辐射跃迁的类型
振动弛豫: Vr 10-12sec 外 转 移:无辐射跃迁回到 基态 内 转 移:S2~S1能级之间有 重叠 系间跨跃: S2~T1能级之间 有重叠 反系间窜跃:由外部获取能 量后 T1 ~ S2
迟 滞 荧 光
磷 光
外转移
5
二. 分子荧光(磷光)光谱
1. 荧光(磷光)激发光谱与发射光谱
4
分子的活化与去活化 (p78)
振动弛豫
S2
内转移 荧光
反系间 窜跃
系间 １. 辐射跃迁的类型 窜跃
共振荧光：10-12 sec 荧 光：10-8 sec 磷 光：1~10-4 sec 迟滞荧光:102~10-4 sec
T1
紫 外 可 见 吸 收 光 谱
紫 外 可 见 共 振 荧 光 S0 光 谱
CH3 CH3
hv
+
_
N
CH3
24
CH3
3. 氧的熄灭作用 氧分子是荧光、磷光的熄灭剂，
1
3
M O 2 3 M* 3 O 2
*
3
k1
没有除氧，溶液中 难以观察到磷光
M* 3 M* 3 (M*M) 2M kT
4. 自熄灭与自吸收 当荧光物质的浓度大于1g/L时，常发生荧光的自熄灭(浓度熄灭) 自吸收：
15
3. 荧光(磷光)的量子产率
荧光量子产率的定义： (p91)
发射荧光的分子数 F 激发分子总数
发射磷光的分子数 P 激发分子总数
F
kF k F ki
i 1 n
P st
kP k P ki
i 1 n
kF、 kp主要取决与荧光物质的分子结构； st系间窜跃效率。 ki主要取决化学环境，同时也与荧光物质的分子结构有关。 大多数的荧光物质的量子产率在0.1~1之间； 例如：0.05mol/L的硫酸喹啉，F=0.55； 荧光素 F=1 化合物
光机操作手册中文
X射线安检设备操作手册广州市克金安防科技有限企业目录一、前言二、系统概述三、设备安装四、系统操作五、保养维护一、前言克金X射线安全检查设备是目前全球科技领先旳X射线成像系统。
该设备综合了高下能阵列探测器、数字化图像处理技术和计算机即时图像显示技术等诸多长处, 为顾客提供高效可靠和具有服务功能旳高质量图像。
为了使广大顾客对本设备有全面旳理解, 同步也更以便旳使用该设备, 特编写了此顾客手册。
本手册全面地简介了克金X射线安全检查设备旳工作原理以及怎样调整维护、维护和保养。
在使用X射线安全检查设备前, 请仔细阅读本手册。
对于顾客不遵守安全规范而损坏了设备, 我司不承担任何责任。
本设备应由接受过正规培训旳人员操作。
为防止射线旳危害, 操作人员必须一直严格遵守射线防护规则。
广州市克金安防科技有限企业拥有本手册旳版权。
未经我司或其授权代理旳书面许可, 不得以任何形式旳手段复制本手册。
由于时间精力有限, 该手册难免有疏漏和局限性之处, 敬请广大顾客、专家予以批评指正。
二、系统概述1.工作原理设备是借助于输送带将被检查行李送入X射线检查通道而完毕检查旳。
行李进入X射线检查通道, 将阻挡包裹检测传感器, 检测信号被送往系统控制部分, 产生X射线触发信号, 触发X射线射线源发射X射线束。
一束通过准直器旳扇形X射线束穿过输送带上旳被检物品, X射线被被检物品吸取, 最终轰击安装在通道内旳双能量半导体探测器。
探测器把X射线转变为信号, 这些很弱旳信号被放大, 并送到信号处理机箱做深入处理。
2.技术指标一般指标通道尺寸: 500*300 650*500 800*650 1000*800 1000*1000传送带速度: 0.2m/s传送带最大负荷: 200kg辨别力: 直径0.10mm金属线穿透力: >30mm胶卷安全性: 对ISO1600胶卷安全泄漏剂量: <1.5µGy/hX射线发生器管电流: 0.4mA~1.2mA管电压: 100~160KV射线束发散角: 60°冷却方式: 密封式油冷工作周期: 100%图像系统X射线传感器: L形光电二极管阵列探测器显示屏: 高辨别率22英寸液晶显示屏多能高穿透: 显示高能多穿透彩色/黑白图像: 彩色/黑白图像切换部分剔除: 有机物、无机物、混合物剔除图像锐化: 边缘锐化效果图像放大: 图像放大效果图像增亮: 图像亮度逐层加亮图像细化: 图像细节度增长图像检索: 图像回放搜索报警: 对不可穿透或可疑物报警图像回拉: 显示已过图像安装数据工作温度/湿度: 0℃~45℃/20%~95%（不冷凝）储存温度/湿度: -20℃~60℃/20%~95%（不冷凝）工作电压: 220V AC（±10%）功率损耗: 1.0KW（最大）噪声级: <65dB其他功能时间日期显示操作员识别急停工作状态显示外接打印机端口外接U盘接口X射线状态识别3.重要用途X射线安全检查设备广泛合用于机场、火车站、汽车站、政府机关大楼、大使馆、会议中心、会展中心、酒店、商场、大型活动、邮局、学校、物流行业、工业检测等场所。
PE公司LS55-操作手册
10-4----102
Perkin - Elmer Corporation
Interactive graphical setup page with context-sensitive help information
Standard Curve is measured and plotted
分析法的应用
与最新进展
荧光分析的应用
• 1、无机化合物的荧光分析 • • 2、有机化合物的荧光分析
1、无机化合物的荧光分析
• ＊金属离子 • 如：Li、Na K Ru Cs Cu Ag Mg Ca • Ba Zn Ge Hg Al 铟(In) Ti Cr • Mn Fe Ni …… • 稀土元素及铀、钍 • ＊非金属离子 • 如：硼、硅、硝酸盐、亚硝酸盐、 • 氰化物、氨、肼、磷、砷、 • 氧、硫、硒、卤离子……
3D Graph Viewer
LS-55的各种应用领域
• • • • •
生化：氨基酸 蛋白质 核酸的定量分析 食品：毒物 农药残留分析 药物：维生素 药物的定性定量 药物代谢 环保：痕量污染物 燃料油 润滑油的芳烃 聚合物薄膜 橡胶中防老剂等助剂
• •
纤维及所吸附的染料和增亮 剂等 的测定
Model LS-55 --- Typical Applications in the Life Sciences
2、有机化合物的荧光分析
• 醇、酚 • 胺及含氮化合物：脂肪胺、芳族胺、胍、
脲、含氮衍生物及含含氮杂环衍生物
• • • • •
羧酸、氨基酸、羰基化合物 不饱和化合物 糖及衍生物 甾族化合物 ……
• LS - 50B
LS 55
Luminescence Spectrometer
PE公司LS55-操作手册
荧光、磷光、发荧光分析的应用
• 1、无机化合物的荧光分析 • • 2、有机化合物的荧光分析
1、无机化合物的荧光分析
• ＊金属离子 • 如：Li、Na K Ru Cs Cu Ag Mg Ca • Ba Zn Ge Hg Al 铟(In) Ti Cr • Mn Fe Ni …… • 稀土元素及铀、钍 • ＊非金属离子 • 如：硼、硅、硝酸盐、亚硝酸盐、 • 氰化物、氨、肼、磷、砷、 • 氧、硫、硒、卤离子……
ICBC and the Model LS-50B
ICBC and the Model LS-50B
ICBC and the Model LS-50B
3D Graph Viewer
LS-55的各种应用领域
• • • • •
生化：氨基酸 蛋白质 核酸的定量分析 食品：毒物 农药残留分析 药物：维生素 药物的定性定量 药物代谢 环保：痕量污染物 燃料油 润滑油的芳烃 聚合物薄膜 橡胶中防老剂等助剂
• •
纤维及所吸附的染料和增亮 剂等 的测定
Model LS-55 --- Typical Applications in the Life Sciences
2、有机化合物的荧光分析
• 醇、酚 • 胺及含氮化合物：脂肪胺、芳族胺、胍、
脲、含氮衍生物及含含氮杂环衍生物
• • • • •
羧酸、氨基酸、羰基化合物 不饱和化合物 糖及衍生物 甾族化合物 ……
LS-45／55 荧光／磷光／发光分光光度计使用说明书
ＬＳ－４５／５５荧光／磷光／发光分光光度计使用说明书美国Perkin Elmer公司王国强黄建权编译２００２年４月一、理论基础荧光、磷光、化学发光及生物发光均属于分子发光。
现将其原理简介如下：室温下，大多数分子处于基态的最低振动能层。
处于基态的分子吸收能量后被激发为激发态。
激发态不稳定，将很快衰变到基态。
若返回到基态时伴随着光子的辐射，这种现象被称为“发光”。
每个分子具有一系列严格分立的能级，称为电子能级，而每个电子能级中又包含了一系列的振动能层和转动能层。
图中基态用Ｓ０表示，第一电子激发单重态和第二电子激发单重态分别用Ｓ１、Ｓ２表示，０、１、２、３…表示基态和激发态的振动能层（见图１），第一、二电子的激发三重态分别用Ｔ１和Ｔ２表示（见图２）。
图１荧光的能级图１、荧光的产生当分子处于单重激发态的最低振动能级时，去活化过程的一种形式是以１０－９～１０－６秒左右的短时间内发射一个光子返回基态，这一过程称为荧光发射（见图１）。
２、磷光的产生从单重态回到三重态的分子系间跨越越迁发生后，接着发生快速的振动驰豫而到达三重态的最低振动能层上，当没有其他过程同它竞争时，在１０－４～１０２秒左右的时间内跃迁回基态而发生磷光（见图２）。
由此可见，荧光与磷光的的根本区别是：荧光是由激发单重态最低振动能层至基态各振动能层的跃迁产生的，而磷光是由激发三重态的最低振动能层至基态各振动能层间跃迁产生的。
图２磷光的能级图３、化学发光及生物发光的产生某些物质在进行化学反应时，由于吸收了反应时产生的化学能，而使反应产物分子激发至激发态，受激分子由激发态回到基态时，便发出了一定波长的光，这种吸收化学能使分子发光的过程称为化学发光。
化学发光也发生于生命体系，这种发光被称为生物发光。
二、仪器简介１、仪器原理图３ＬＳ４５／５５荧光／磷光／发光分光光度计的原理图用于测量荧光／磷光／发光的ＬＳ４５／５５是由图３所示的五个主要部件组成的：光源、激发光单色器、样品池、发光单色器及检测器。
L2L5系列分光光度计说明书
TZ提示本产品使用说明书只针对L2、L2s 可见分光光度计及L5、L5s 紫外可见分光光度计产品的使用说明。
上海仪电分析仪器有限公司1.1 原理.....................................................................................................1 6.1 光度测量........................................................................................... 18 1.2 用途.....................................................................................................2 6.2 光谱测量........................................................................................... 20 1.3 特点.. (2)6.3 定量测量 (26)6.4 动力学测量....................................................................................... 34 2 仪器的主要技术指标、规格和功能....................................................... 3 6.5 系统设置........................................................................................... 36 2.1 技术指标............................................................................................. 3 2.2 产品规格............................................................................................. 6 6.6版本信息 (37)目次1 原理、用途和特点................................................................................... 1 6 应用操作. (18)2.3 主要功能.............................................................................................73 安装指导 (8)3.1 安装条件............................................................................................. 8 3.2 开箱检视.............................................................................................84 仪器外型及结构系统说明 (9)4.1 仪器外型............................................................................................. 9 4.2 内部布局........................................................................................... 10 4.3 结构系统...........................................................................................115 仪器的基本操作 (14)5.1 测试准备........................................................................................... 14 5.2 键盘操作. (16)7 仪器的维护和故障识别......................................................................... 38 7.1 日常的维护....................................................................................... 38 7.2 光源更换........................................................................................... 39 7.3 故障识别........................................................................................... 40 7.4 波长的校正 (45)8 仪器的保管及免费修理期限 (46)L2 L2s 产品执行的标准号：Q /Y X L Z 79L5 L5s 产品执行的标准号：Q /Y X L Z 82上海仪电分析仪器有限公司1 原理、用途和特点1.1 原理物质对光的吸收具有选择性，在光的照射激发下，产生了吸收效应。
常见分析仪器操作规程
气相色谱仪－Ⅱ(GC14B)操作规程一、准备工作1、按分析要求换上所需的色谱柱，若使用玻璃柱，则小心装卸，以免损坏。
2、检查汽化室玻璃衬管是否污染，以及密闭橡胶垫完好程度。
如需要应换上干净的衬管和新的密封橡胶垫。
3、打开各部位开关或部件（包括气路和电路部分）前必须检查各部位开关。
部件是否处于正常位置，如遇异常需复位后方能开动，以免发生意外和损坏仪器。
4、启动氢气发生器和空气压缩机打开氮气瓶开关，并调节减压阀使输出压力为0.7mPa；调节主机侧面的载气输入压力至0.6mPa，再将柱流量计的流量调至所需的流量。
二、开机1、启动主机电源，按需要设定温度：a、按“INJ”，按数字键设定进样温度，然后按“ENT”b、按“DETT”，按数字键设定检测器温度，然后按“ENT”输入。
c、按“COL”及“INITTEMP”，再按数字键设定柱箱温度，然后按“ENT”输入。
2、按分析所需分别设定柱箱温度，进样温度和检测温度后，按“START”主机则进行加热升温。
3、待检测温度超过100℃时，将空气压力调至50kPa，氢气调至100kPa，按住“IGNIT”减少空气后则用点火器点火，确认点燃后再把氢气调至60kPa，打开FID 放大器，调节好所需量程。
4、启动数据处理机，按所需设置数据处理机参数和含量计算方法，适当的纸速观察基线稳定情况，待在分析灵敏度条件下平稳后即可进行分析工作。
5、做好样品分析前的仪器运转情况登记。
三、关机1、将进样及检测温度设置低于150℃，然后将柱箱温度设置接近室温进行降温。
2、关闭氮气钢瓶开关，关闭氢气发生器及空气压缩机电源开关。
3、待柱箱温度接近室温及氮气，氢气，空气压力表压力降至零后，则可关闭主机电源。
4、关闭氮气纲瓶上的减压阀（逆时针旋转）。
关闭主机侧面的氮气、氢气和空气旋纽，最后放掉空气压缩机内的储气。
5、检查是否全部已处于关闭状态，做好分析完毕仪器使用及运转情况记录。
注：以上操作程序仅对仪器常用的使用FID 检测的填充色谱单柱恒温分析而言，若使用的本机其他附件或检测器（TCD），以及其他方法时需与有关人员联系，并一起操作使用。
LS55安装和维护手册
LS55安装和维护手册1 安全须知和注意事项LS55荧光分光光度计是符合PerkinElmer公司的指标要求和国际电工委员会61010-1对电子设备用于测量，控制和实验室使用的安全需求。
这种仪器是符合国际电工委员会第一类等级的标准。
这本手册包含的信息和警告是为了确保操作人员的安全和仪器的安全使用。
这种仪器设置是在室内使用，且正确的按照以下条件操作：室内温度15摄氏度到 35摄氏度相对湿度不超过75%，无冷凝安全操作的环境要求•室内使用•海拔高度不能超过2000m•温度范围在5摄氏度到40摄氏度•温度达到31摄氏度时相对湿度小于80%，当温度达到40摄氏度时相对湿度小于50%。
•电压波动不能超过正常电压的10%•符合国际电工委员会2类等级标准。
仪器的任何接地如果断开的话，可能将会对仪器造成伤害。
当仪器连接上了主电源时，接线端子带电。
仪器内部任何的调整，维修和打开仪器必须有维修工程师和受过专门培训的人员来处理，而且这些调整和维修必须在断电的情况下操作。
仪器主电源虽然断开，但电路上的电容还是带电的。
当您更换主电源的保险丝时，请按照要求更换型号一样的保险丝，不要使用将就的保险丝替代。
当仪器有以下现象时，请立即停止使用该仪器•有很明显的损坏•不能达到实验的目的，测试结果失败•在不好的环境中保存很久•受到运输的严重挤压仪器上的警示标签图1 caution label当上面图标贴在仪器上时，意思是“小心，危险”。
用户必须采取预防措施。
LS55 仪器上有三个这个图标：•在仪器的样品窗⎯表示这里可能会对你的眼睛有伤害，不要凝视样品室里的光源。
•在靠近输入电源插座边⎯表示更换的保险丝符合CSA的规格。
•在仪器左上角⎯表示移开盖子可能会有电压的危险图2 High voltage label高电压标签表示移开盖子将会导致电压危险在仪器里有两个这个标签警示：•在仪器内部灯源的盖子上面•在仪器内部检测器的盖子上面这些标签警示的意思是在盖子打开前，仪器和主电源必须关掉。
LS55操作说明书荧光-磷光-发光分光光度计中文培训手册
ＬＳ－４５／５５荧光／磷光／发光分光光度计使用说明书美国Perkin Elmer公司２００３ 年４月一、理论基础荧光、磷光、化学发光及生物发光均属于分子发光。
现将其原理简介如下：室温下，大多数分子处于基态的最低振动能层。
处于基态的分子吸收能量后被激发为激发态。
激发态不稳定，将很快衰变到基态。
若返回到基态时伴随着光子的辐射，这种现象被称为“发光”。
每个分子具有一系列严格分立的能级，称为电子能级，而每个电子能级中又包含了一系列的振动能层和转动能层。
图中基态用Ｓ０表示，第一电子激发单重态和第二电子激发单重态分别用Ｓ１、Ｓ２表示，０、１、２、３…表示基态和激发态的振动能层（见图１），第一、二电子的激发三重态分别用Ｔ１和Ｔ２表示（见图２）。
图１荧光的能级图１、荧光的产生当分子处于单重激发态的最低振动能级时，去活化过程的一种形式是以１０－９～１０－６秒左右的短时间内发射一个光子返回基态，这一过程称为荧光发射（见图１）。
２、磷光的产生从单重态回到三重态的分子系间跨越越迁发生后，接着发生快速的振动驰豫而到达三重态的最低振动能层上，当没有其他过程同它竞争时，在１０－４～１０２秒左右的时间内跃迁回基态而发生磷光（见图２）。
由此可见，荧光与磷光的的根本区别是：荧光是由激发单重态最低振动能层至基态各振动能层的跃迁产生的，而磷光是由激发三重态的最低振动能层至基态各振动能层间跃迁产生的。
图２磷光的能级图３、化学发光及生物发光的产生某些物质在进行化学反应时，由于吸收了反应时产生的化学能，而使反应产物分子激发至激发态，受激分子由激发态回到基态时，便发出了一定波长的光，这种吸收化学能使分子发光的过程称为化学发光。
化学发光也发生于生命体系，这种发光被称为生物发光。
二、仪器简介１、仪器原理图３ＬＳ４５／５５荧光／磷光／发光分光光度计的原理图用于测量荧光／磷光／发光的ＬＳ４５／５５是由图３所示的五个主要部件组成的：光源、激发光单色器、样品池、发光单色器及检测器。
赛默飞世尔-LS-55和LS-45荧光光谱仪-产品手册说明书
Fluorescence Spectroscopy FactsFor bioresearch applications involving analysis of minute quantities of material, few other techniques offer as much sensitivity and selectivity at such a moderate cost.Consider these key advantages:Extraordinary sensitivity:Fluorescence spectroscopy detects concentrations as low as one part per trillion. This is 10,000 times more sensitive than absorption spectroscopy.Because luminescence is measured directly, a small emission can be amplified many times with little noise.Unprecedented selectivity:Scanning fluorescencespectrometers make use of two selectable wavelengths (excitation and emission) for unmatched selectivity and multi-dimensional information. Environmentally sensitive:Electronic transitions measured in fluorescence spectroscopy are longer-lived than those measured in absorption spectroscopy. They also are sensitive to local polarity,pH, viscosity, and thermal effects. Broad-based applications capabilities:Fluorescence instruments have a six- to seven-fold greater linear measurement range for quantitative analysis than spectrophotometers –with little error at the extremes.Safety:Using fluorescent tags instead of radioisotopes simplifies laboratory safety procedures.2Always the right choiceThe PerkinElmer LS-55 and LS-45 FluorescenceSpectrometers provide your laboratory with the ultimate blend of high performance, reliability, ease-of-use, durability,and versatility. The LS-55 and LS-45 are the right choice to meet your laboratory’s current and future applications needs.Indispensable features of these instruments include: Ultimate flexibility.No instruments handle a wider range of bioscience applications than the LS-55 and LS-45. These instruments are ideally suited for bioresearch including cell-biology, immunology, enzymology, protein analysis, and microplate-based measurements.Broad range of accessories.The wide range of accessories specifically designed for the LS-55 and LS-45 is versatile enough to handle virtually any type of sample.Reliable optical performance.The LS-55 features continuously variable slits, in increments of 0.1 nm, for ultimate control of measurement conditions.The holographic gratings of the LS-55 minimize stray light for the highest sensitivity,accuracy and reproducibility. The LS-45 has fixed slits, for sturdy,dependable daily use.Durable, long-lived light source.Unlike conventional light sources, the Pulsed Xenon lamp minimizes photobleaching of samples. This preserves the integrity of the sample and delivers accurate and uncompromised results.Simply Versatile:The LS-55and LS-45Fluorescence SpectrometersThe Pulsed Xenon lamp:Astroke of brilliance Preserving the integrity of your samples is crucial to the success of your experiments. PerkinElmer uses ahigh-energy Pulsed Xenon source for the LS-55 and LS-45. Pulsed Xenon offers these advantages:•Minimal photobleaching of samples •Long-lived excitation for stability and accuracy •Improved low-light detection capability relative to other light sources •Wide UV output (to 200 nm), for great flexibility when selecting excitation wavelengths •Replaceable pre-aligned bulb (no need to replace the entire lamp module)•Delay and gate time can be varied to measure phosphorescence •The ability to be turned off, for measuring chemiluminescence and bioluminescence•Used by thousands of researchers for thousands of applications around the worldThe Pulsed Xenon lamp:A stroke of brilliance Preserving the integrity of your samples is crucial to the success of your experiments. PerkinElmer uses a high-energy Pulsed Xenon source for the LS-55 and LS-45. Pulsed Xenon offers these advantages:•Minimal photobleaching of samples •Long-lived excitation for stability and accuracy •Improved low-light detection capability relative to other light sources •Wide UV output (to 200 nm), for greater flexibility when selecting excitation wavelengths •Replaceable pre-aligned bulb (no need to replace the entire lamp module)•Delay and gate time can be varied to measure phosphorescence •The ability to be turned off, for measuring chemiluminescence and bioluminescence •Used by thousands of researchers for thousands of applications around the worldAcademicCell biology, cellular toxicity/viability, molecular toxicity, proteinfolding/unfolding, receptor binding studies, teaching (simple assays, DNS, and protein quantification), research (assay development, cell-based work), apoptosis studies, and phagocytosis/oxidative processesAgriculturalPesticide tracing, resistance assays, chlorophyll determinations, crop protection,genetic modification, and plant geneticsCell biologyCytotoxicity, cell studies (viability, quantification, proliferation, adhesion), reporter gene, and apoptosisClinicalAssays (enzyme, substrate, toxicity), porphyrins, steroids, vitamin, and amine studiesEnvironmentalPesticide detection, ground water tracing, oil contamination of water, chlorophyll determination of toxic algae, exhaust gas composition, water purity, uranium and aluminum determination, and biomassEnzymologyProtease assays, inhibition studies, surfactant studies, and kinetic assaysImmunologyFluorescent enzyme-linked immunosorbent assays, cell proliferation/activation, and tumor necrosis factorIndustrialCrack tracing (aerospace), security inks, coding phosphors, brightening/whitening reagents, ultraviolet stabilizers and plasticizers, crude oil fingerprinting, and postage stamp markingInorganicAluminum, lead, magnesium, manganese, selenium, zinc, and tinMedicalEnzyme/substrate assays, cellular analysis, including bioluminescence and cell proliferation/activation, immunology assays (tumor necrosis factor and enzyme-linked immunosorbent (ELISA) assayMolecular biologyDNA and mRNA quantification, gene expression, polymerase chain reaction product quantitation, protein quantitation and folding/unfolding, enzyme activity, porphyrin induction assays, and high throughput drug screeningPharmaceuticalVitamins, biogenic amines, drugs, substance abuse, gene expressionand discovery, novel drug delivery systems, combinatorial drug discovery, membrane structure studies, toxicity assays, and cell function assays4The LS-55and LS-45FluorescenceSpectrometers:the industry standardfor bioscience/pharmaceutical applications5Cell ViabilityThe LS-55 can be used to measure cell viability with excellent sensitivity. In this example, the signal from the SYTOX Green nucleic acid stain is proportional to the number of cells thathave lost membrane integrity.Nucleic Acid QuantitationQuantitation of nucleic acid is a routine but essential technique employed by many laboratories. Shown here is the OliGreen assay, which is rapid, sensitive and accurate, with minimalinterference from short oligonucleotides, salts and detergents.EnzymologyExcellent temperature control and the ability to measuresimultaneous reactions make the LS-55 an ideal tool for enzyme studies, such as monitoring the hydrolysis of labeled casein bytrypsin and its inhibition by Aprotinin.Protein QuantitationThe anionic dye sulforhodamine 101 measures total protein by forming complexes with basic amino acid residues. The LS-55 is the perfect choice for using this technique to detect changes in cellsize or population over a range of 100 to more than 100,000 cells.Membrane StructureThe advanced automated polarization capabilities of the LS-55allow studies such as this example of cell membrane fluidity. A fluorescent membrane dye, along with the AutoPole software module and a programmable water bath, was used to measureanisotropy as a function of temperature.Intracellular BiochemistryNon-destructive determinations of intracellular calcium are carried out in living cells by binding with a fluorescent dye.In the presence of a cellular stimulus the LS-55’s fast-filter accessory measures the relative amounts of the free (380 nm)and bound (340 nm) dyes in real-time.Answering the demands of diverse applicationsThe LS-55 and LS-45 Fluorescence Spectrometers feature anentire spectrum of accessoriesWhether your sample is liquid or solid, abundant or limited, there’s an accessory that gets the job done. And, since all accessories are front mounted and easily accessible,you can change sampling modes in an instant.APPLICATION:FEATURES: LS-55LS-4567Additionally, PerkinElmer offers a range of plug-in application modules offering further research capabilities. These include:• Short phosphorescence decay routine • Enzyme-activity program• WPR Scan – allowing the Well-PlateReader to scan multiple spectra per well • Autopol – for programmed measurement of intensity, polarization,or anisotropy vs. temperature• A variety of advanced three-dimensional data-handling, presentation, and export routinesRelax… FL WinLabsoftware is reliable anduser friendlyThe FL WinLab software is user friendly and application specific, seamlessly combining PerkinElmer’s extensive application-specific knowledge and instrument control. The FL WinLab software is easy to configure for the applications you need.Access specific modes of instrument operation –Scan, Time Drive, and Ratio Data Collection –directly from the Applications Menu. You can scan the excitation and emission monochromators either independently or synchronously.FL WinLab software includes a validation protocol that automatically checks instrument performance.This ensures reliable data and helps your laboratory comply with good laboratory practice (GLP).P e r k i n E l m e r F F l u o r e s c e n c e S S p e c t r o m e t e r s a a r e b b a c k e d b y t t h e b b e s t s s u p p o r t t t e a m i i n t t h e i i n d u s t r y .G o t t o w w w .p e r k i n e l m e r .c o m /f l u o r e s c e n c e t o l l e a r n m m o r e .The LS-55 also includes an automated Polarizer that consists of two filter wheels, each containing a horizontal and vertical polarizing element. Polarizer positions are software controlled and can be manually set or automatically controlled for polarization, anisotropy, or G-factor.INSTRUMENT COMPATIBILITYSingle-Cell Peltier AccessoryFour-Position and Single-Position Thermostatted Cell Holder Front Surface Accessory AS93plus Autosampler Accessory APPLICATION:FEATURES: APPLICATION:FEATURES:Temperature ramping studies and measuring thermal denaturation of proteins.All liquid analyses where thermostatting is required.• Single-cell,water-cooled Peltieraccessory (operation 0º to 100º C at a resolution of 0.1º)• Rapid heating and cooling • In-cuvette stirring • Control via temperature controller keypad or softwareSimple,water-cooled cuvette holders are suitable for all liquid analyses.• Controls sample temperature for accurate data collection • Cell holder accommodatesone or four 10 mm pathlength cells as well as micro-cuvettes • Requires a water bath for circulation around the cellsAnalysis of film,paper,powder,fabric,plastic film,and other flat samples.• Used for fluorescence andphosphorescence measurements • Sample can be placed in the accessory directly or held in the synthetic fused silica window powder holder• Ultra small volumes or viscoussamples can be sandwiched between the two windows• Opaque and turbid samplescan be measured in small cuvettes (under 10 mm)High throughput sampling of liquids; highly sensitive alternative to microplate reading.• Can measure up to 200 samples in a single rack• Software-controlled peristaltic pump allows collection of intensity,polarization or anisotropy measurementsSamples with weak emission (enhances the sensitivity of the fluorescence collection).• Recommended forbioluminescence andchemiluminescence measurementsRemote,non-destructive testing of fluorescent papers and fabrics orremote sampling of hazardous materials.• For taking the measurement to the sampleHigh-sensitivity liquid chromatography;alternative to a dedicated LC fluorescence detector.• Works with the monochromators of the LS-55 and LS-45 for optimal sensitivity and specificityDNA quantitation,enzyme-linked assays,protein measurements,fluorescent ELISAs,cell viability testing,and drug and steroid testing.• Measures in fluorescence,phosphorescence,bioluminescence and chemiluminescence modes • Fiberoptic light feed for permanent alignment and high performance • Uses wide range of UV and visible wavelengths • Software allows scanning of flat samples; presents data as a 3D image• Standard or far-UV fiberoptics• Easily removes and installs for switching between plate and cuvette measurements • Can create programs for single end-point and kinetics analyses • Optional plug-in software module allows the user to collect multiple spectra per well• Measures in up to 96 well platesPolarization/anisotrophy work,protein folding/unfolding and DNA melting.• Single position magnetically stirred sample holder with event marking and temperature sensor that measures from 0º to 100º CRapid data collection during biochemical processes(i.e.,intracellular ion collection).• Pairs of optical filters obtain ratio measurements every 40 milliseconds • Two pairs of filters can be fitted on each wheel• Ratio data or individual intensities can be viewed in real-timeAutomation of routine analysis and quantitation and rapid liquid sampling.• Automatically transfers sample from vessel to cuvette• Minimizes handling of quartz cuvettes • Includes software-controlled peristaltic pump and 16 µL volume flowcellTotal Emission AccessoryRemote Fiberoptic Accessory LC Flow Cell AccessoryWell-Plate Reader Accessory Biokinetics AccessoryFast Filter AccessorySipper AccessoryCall 1 800-762-4000(T o l l ff r e e U U .S .) or +1 203-925-4602for a FREE CONSULTATION with a PerkinElmer LS-55 and LS-45 specialist,and ask for an instrument and software demonstration.LS-55 and LS-45 Fluorescence Spectrometersfrom PerkinElmer –the flexibility you need,from the manufacturer you trustA perfect blend of sturdydependability and high performancePerkinElmer, Inc. is a global technology leader focused in Life and Analytical Sciences and Optoelectronics. A $1 billion market leader, the Life and Analytical Sciences division serves a large number of industries, including academic research,biotechnology, clinical screening, pharmaceutical,environmental, forensic, and the petrochemical and semiconductor segments.Our instruments, related software, and customer support programs – including our team of over 1,000 factory-trained service professionals deployed in over 125 countries – help our customers to enhance research productivity, meet strict regulatory requirements, improve time-to-market,and increase manufacturing efficiencies.The LS-55 and LS-45 FluorescenceSpectrometers are the preferred instruments for laboratories worldwide.For a complete listing of our global offices, visit /lasoffices©2006 PerkinElmer, Inc. All rights reserved. PerkinElmer and the PerkinElmer logo and design are registered trademarks of PerkinElmer, Inc. in the United States and other countries.All other trademarks not owned by PerkinElmer, Inc., or its subsidiaries that are depicted herein are the property of their respective owners. PerkinElmer reserves the right to change this document at any time without notice and disclaims liability for editorial, pictorial or typographical errors.007693_01Printed in USACall 1 800-762-4000(T o l l ff r e e U U .S .) or +1 203-925-4602for a FREE CONSULTATION with a PerkinElmer LS-55 and LS-45 Fluorescence Spectrometer specialist .。
荧光磷光发光分光光度计 Luminescence Spectrometer
Perkin Elmer LS55Luminescence Spectrometer螢光光譜儀，可分析激發、放射圖譜分析儀器。
激發波長from 800~200 nm，放射波長from 900~200nm燈源為氖燈(Xenon)，儀器狹縫寬度10 nmC:使用規則1.借用人須遵守本實驗室各項安全規定。
2.使用螢光分析儀前，請先預約登記使用時段。
3.預約螢光分析儀使用時段後，請準時上機，超過預約時間15分鐘後視作棄權，並開放他人登記使用。
4.使用者請自行準備軟碟或隨身碟片前來輸出資料。
(*請確認所用軟碟無病毒存在，方可使用於本儀器相關電腦)5.使用完畢請收拾復原，確實清理並於登記簿註明清理狀況。
6.請確實填寫使用記錄簿，若未遵守，第一次警告，第二次告知主管或指導教授，第三次停止使用。
D:操作程序:1.打開儀器電源(開關位置在儀器左下側，靠近後方位置)。
2.打開電腦電源，進入Windows 畫面。
3.進入FL WinLab 儀器控制軟體。
4.等待儀器“啟始設定”的動作完成後，即可開始操作。
注意：在Windows 的環境中，有些電腦在開機時，會自動抓取Com 埠的裝置，並誤判為滑鼠，這時候必需先開啟電腦，然後才開啟儀器，接著才開啟控制軟體FL WinLab。
5.用滑鼠選取“開始”-> “程式集”-> “PerkinElmerApplications”-> “FLWinLab”，即可啟動軟體。
6. 啟動時只能有一個Method 在執行。
執行的方法如下：6.1 從功能表列上的Application，開啟“應用程式”視窗。
6.2 在“應用程式”的功能表列上，用File -> Method Open 開啟您要使用的Method ->SCAN。
6.3 當左上角的號誌燈亮起綠燈時，(即綠燈位置)，應用程式就會開始執行。
以滑鼠按下號誌燈6.4當左上角的號誌燈亮起紅燈時，應用程式就會結束。
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ＬＳ－４５／５５荧光／磷光／发光分光光度计使用说明书美国Perkin Elmer公司２００３ 年４月一、理论基础荧光、磷光、化学发光及生物发光均属于分子发光。
现将其原理简介如下：室温下，大多数分子处于基态的最低振动能层。
处于基态的分子吸收能量后被激发为激发态。
激发态不稳定，将很快衰变到基态。
若返回到基态时伴随着光子的辐射，这种现象被称为“发光”。
每个分子具有一系列严格分立的能级，称为电子能级，而每个电子能级中又包含了一系列的振动能层和转动能层。
图中基态用Ｓ０表示，第一电子激发单重态和第二电子激发单重态分别用Ｓ１、Ｓ２表示，０、１、２、３…表示基态和激发态的振动能层（见图１），第一、二电子的激发三重态分别用Ｔ１和Ｔ２表示（见图２）。
图１荧光的能级图１、荧光的产生当分子处于单重激发态的最低振动能级时，去活化过程的一种形式是以１０－９～１０－６秒左右的短时间内发射一个光子返回基态，这一过程称为荧光发射（见图１）。
２、磷光的产生从单重态回到三重态的分子系间跨越越迁发生后，接着发生快速的振动驰豫而到达三重态的最低振动能层上，当没有其他过程同它竞争时，在１０－４～１０２秒左右的时间内跃迁回基态而发生磷光（见图２）。
由此可见，荧光与磷光的的根本区别是：荧光是由激发单重态最低振动能层至基态各振动能层的跃迁产生的，而磷光是由激发三重态的最低振动能层至基态各振动能层间跃迁产生的。
图２磷光的能级图３、化学发光及生物发光的产生某些物质在进行化学反应时，由于吸收了反应时产生的化学能，而使反应产物分子激发至激发态，受激分子由激发态回到基态时，便发出了一定波长的光，这种吸收化学能使分子发光的过程称为化学发光。
化学发光也发生于生命体系，这种发光被称为生物发光。
二、仪器简介１、仪器原理图３ＬＳ４５／５５荧光／磷光／发光分光光度计的原理图用于测量荧光／磷光／发光的ＬＳ４５／５５是由图３所示的五个主要部件组成的：光源、激发光单色器、样品池、发光单色器及检测器。
由光源发出的光经激发光单色器得到所需要的激发光波长。
如其强度为Ｉ０ ，通过样品池后，由于一部分光能被荧光物质吸收，其透射光强度减为Ｉｔ 。
荧光物质被激发后，将发射荧光。
为了消除入射光和散射光的影响，荧光的测量通常在与激发光成直角的方向进行。
为了消除可能共存的其他光纤的干扰，如由激发光所产生的反射光、瑞利散射光和拉曼光，以及为将溶液中的杂质所发生的荧光滤去，以获得所需要的荧光，在样品池和检测器之间设置了发光单色器，荧光作用于检测器上，得到了相应的电信号，经放大后再记录下来。
（１）激发光源：在紫外－可见区范围内，氙灯最为常用，而又分连续和脉冲氙灯。
ＬＳ４５／５５采用的是脉冲氙灯。
二者比较如下：所以采用脉冲氙灯的ＬＳ４５／５５不需附件，可直接测定荧光、磷光及发光。
（２）样品池：荧光用的样品池需用低荧光的材料制成，通常用石英，形状以方形和长方形为宜。
（３）激发单色器：用于选择激发波长。
（４）发射单色器：用于分离出荧光／磷光／发光的发射波长。
（５）检测器：荧光的强度通常比较弱，因此应采用具有较高灵敏度的光电倍增管，并与激发光成直角。
ＬＳ４５／ＬＳ５５的标准检测器检测下限为６５０ｎｍ，若要测到９００ｎｍ则应选择红敏倍增管。
三、软件应用（一）、仪器状态菜单的应用脉冲氙灯与连续氙灯的比较脉冲氙灯连续氙灯功耗仅8.3W(50Hz)功耗达150W 光源能量输出相当于20KW(50Hz)能量输出仅150W 灯压低寿命长灯压高,工作时达40~50大气压电源简单轻便电源复杂笨重臭氧产生量极少,低于NIOSH 标准产生大量臭氧,需特殊的灯室以减少影响产生热量很少工作时温升达300~450 o C 不需长时间预热,不用时可关闭需预热数十分钟不需脉冲高压启动需要脉冲高压启动每次闪光20毫秒仅有10微秒强光照射大大减少光解作用样品连续受强光照射容易产生光解作用每一脉冲间测定暗电流,低荧光量时更精确要用遮光器或切光器才能测定暗电流用软件控制即可测定磷光不需附件需要磷光附件才能测磷光脉冲率延迟时间及门限时间均可设定磷光延迟时间等时限受附件转速限制磷光灵敏度不损失磷光灵敏度因使用附件而损失图４仪器状态（Ｓｔａｔｕｓ）菜单在仪器状态（Ｓｔａｔｕｓ）菜单（见图４）中的应用（Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ）项下的下拉菜单中的ＬＳ－５５Ｓｔａｔｕｓ中点击，则出现图５的菜单。
图５仪器状态菜单此菜单中的各部分，均为动态对话框。
点击其中任何部分均可进入下一级菜单，通过参数上的设置，直接用软件控制仪器。
如点击左上角的光源部分（Ｓｏｕｒｃｅ），随即出现图６的菜单：可实现光源的开关、及荧光、磷光和发光测定模式的选择。
１、荧光测定模式的设置图６荧光测定模式的设定在红色的“Luminescence Mode”中“fluor（荧光）”，即可选定荧光测定模式。
通过点击右上角的红色数字“１（氙灯开）”或“０（氙灯关）”，即可控制光源的开关。
２、磷光测定的设置在红色的“Luminescence Mode”中“phos（磷光）”，即可选定荧光测定模式（图7）图７磷光测定模式的设定图７在磷光测定模式下样品受脉冲氙灯光源激发后的测定条件。
氙灯每闪亮一次所产生的能带峰其带宽不超过１０ｕｓ。
在此期间，受激样品所产生的磷光达到最大强度值Ｉ０，然后按指数曲线衰减直至消失。
样品光电倍管要等延迟一段时间（ｔｄ）后才开启，所以不会与光源的闪亮时间重合，门限时间（ｔｇ）──测量时间与延迟时间（ｔｄ）均可调节，最小调整步距为0.01ms如选择的延迟时间大于0.1ms，就不会测量到荧光信号。
每个测定周期可以大于一次闪亮。
例如：设闪亮次数为３，则在每一个测定周期中有３次闪亮及其后的延迟时间和门开时间。
所设的周期时间 (Cycle Time)应≥（闪亮数×电源频率周期）＋ｔｇ+ｔｄ-12.99ms。
如ｔｇ+ｔｄ值大于12.99ms，周期时间应设至大于一个电源周期。
闪亮频率及电源的周波（在中国为50Hz），所以每次闪亮即电源的一个周期（在中国为20ms）。
在磷光的测定模式中，暗电流是在开始测定后自动在２０个数据收集周期中进行测定的，暗电流信号被储存并在该设定波长下测定的样品信号中被减去。
每当改变门限时间时，自动重新测定暗电流。
各参数范围如下表：参数范围步距～9000ms 0.01ms 延迟时间(Delay Time, ｔｄ) 0～500ms 0.01ms 门限时间(Gate Time, ｔg) 0.01周期时间(Cycle Time) 1～ 9999ms 一个电源周期(ms)闪亮次数(Flash) 1～ 10 1注：周期时间 (Cycle Time)应≥（闪亮数×电源频率周期）＋ｔｇ+ｔｄ-12.99ms。
如ｔｇ+ｔｄ值大于12.99ms，则周期时间应设至大于一个电源周期。
３、发光（化学、生物）发光测定的设置在红色的“Luminescence Mode”中“biolum（发光）”，即可选定发光测定模式（图８）。
图８发光测定模式的设定当测定化学或生物发光时，应将光源灯关闭，只有样品光电倍增管接受数据信号，积分时间与磷光测定时一致。
暗电流则自动测定２０次（每隔２０ｍｓ测一次），数据储存并自动从样品测定数据中减去。
每当门限时间改变后，都会自动重测暗电流。
（二）扫描（Ｓｃａｎ）菜单的应用１、扫描的三种方式１．１预扫描：以便找出未知样品的最适宜激发波长；１．２单个单色器扫描：可单独进行激发光或发射光的光谱扫描；１．３同步扫描：两个单色器以一定的波长间距同步转动进行扫描；２、预扫描２．１激发光单色器预扫描（发射光单色器固定在某波长）２．２发射光单色器预扫描（激发光单色器固定在某波长）２．３激发／发射预扫描（自动顺序进行上述两种预扫描）图９激发／发射预扫描菜单在相应的对话小框中分别键入激发光和发射光的起止波长。
在狭缝小框中分别键入激发光和发射光的宽度。
３、激发或发射光谱的扫描３．１激发光谱的扫描图１０激发光谱的扫描３．２发射谱的扫描图１１发射光谱的扫描菜单点击图中Ex.Momo或Em.Mono的单色器图标，则可得到下图：图１３激发或发射单色器的设置菜单点击图１３中的“Emission Filter”中下拉箭头，即可出现一下拉菜单，可选择在光路中加入一定波长下的截止滤光片以消除倍频峰，还可选择“1% Attenuator”即１％的透过衰减片，以降低过强的荧光强度。
４、同步扫描同步扫描有助于一些有机化合物的判别，特别是复杂的混合物物，如粗油。
同步扫描又分为“固定波长差”或“固定能量差”这两种形式。
图１２固定波长差的同步扫描模式即激发光与发射光保持２５ｎｍ的间距同步扫描图１３固定能量差的同步扫描模式即两单色器的频率差（能量差）为３０００４、时间驱动模式图１４时间驱动模式的菜单时间驱动模式可供在固定波长上记录一定时间内的样品荧光强度变化。
图１４的菜单中“Durations(s)”为所要测定的总时间（秒），“Data Interval(s)”为每两个测量点间的时间（秒）。
５、强度／浓度模式（Ｒｅａｄ）图１５强度／浓度模式（Ｒｅａｄ）菜单自动测浓度的步骤：５．１将所含已知浓度的样品标准溶液放入样品室；５．２确认所需的波长及狭缝均已设好；５．３选定Ａｕｔｏｃｏｃｎ行，并在下面的小框中键入该标准溶液的浓度值；５．４键入所需的信号积分时间；５．５单击Ｉｎｔｅｎｓｉｔｙ，标准溶液的荧光强度值会显示在其右边的小框中，此值自动被刚输入的浓度值所除，得到其商Ｋ并暂存，只要一直选定Ａｕｔｏｃｏｃｎ行，以后的样品测定所得的荧光强度会自动乘上Ｋ值而成为浓度值显示。
６、波长编程扫描模式（ＷａｖｅｌｅｎｇｔｈＰｒｏｇｒａｍ）图１６波长编程扫描模式（ＷａｖｅｌｅｎｇｔｈＰｒｏｇｒａｍ）菜单波长编程扫描可在一系列不同的激发和发射波长下来测定样品的荧光强度。
７、用标准曲线法测定浓度的模式图１７仪器应用选项菜单在图１７中选择“Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ（浓度）”项，即可出现下图：图１８浓度测定模式仪器条件设置菜单设定激发波长、最大发射波长及激发与发射狭缝等条件后，点击“Refrence”项，即可出现下图：图１９浓度测定模式标准样品条件设置菜单在图１９的对话框中输入一系列标准样品所对应的浓度及并测量相应的荧光强度值，即可回归出相应的一元或多元的回归方程。
点击“Ｓａｍｐｌｅ”项，即可得到下图：图２０浓度测定模式待测样品条件设置菜单在图２０中输入相应的数据后，点击“ＶｉｅｗＲｅｓｕｌｔｓ＂项，即可得到下图：图２１浓度测定模式待测样品结果图２１显示了待测样品的浓度。