6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶(6-PGDH)活性检测试剂盒说明书 紫外分光光度法

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葡萄糖-6-磷酸酶(G6P)试剂盒使用说明

葡萄糖-6-磷酸酶(G6P)试剂盒使用说明

葡萄糖-6-磷酸酶(G6P)试剂盒使用说明分光光度法货号:BC0930规格:50管/48样产品内容:提取液:60mL×1瓶,4℃保存;试剂一:液体47.5mL×1瓶,4℃保存;试剂二:粉剂×1支,-20℃保存;试剂三:粉剂×1支,-20℃保存;试剂四:液体×1支,-20℃保存;产品说明:葡萄糖-6-磷酸酶((glucose6phosphatase,G6Pase,EC3.1.3.9)广泛存在于动物、植物、微生物和细胞中,是糖异生过程水解葡萄糖-6-磷酸生成葡萄糖的限制酶,在保证血糖的动态平衡方面起着重要的作用。

G6P催化葡萄糖-6-磷酸生成葡萄糖,变旋酶和葡萄糖脱氢酶进一步依次催化NAD+还原生成NADH,在340nm下测定NADH生成速率,即可反映G6P活性。

需自备的仪器和用品:紫外分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1mL石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。

操作步骤:一、样本的前处理:1、细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):提取液体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1mL提取液),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g4℃离心10min,取上清,置冰上待测。

2、组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液),进行冰浴匀浆。

8000g4℃离心10min,取上清,置冰上待测。

3、血清(浆)样品:直接检测。

二、测定步骤:1、分光光度计预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。

工作液的配制:临用前将试剂二、试剂三和试剂四转移到试剂一中混合待用;用不完的试剂4℃保存一周;2、将工作液置于37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)预热5分钟。

3、在1mL石英比色皿中加入50μL样本和950μL工作液,立即混匀,记录340nm处初始吸光值A1和2min后的吸光值A2,计算ΔA=A2-A1。

小鼠葡萄糖 6磷酸脱氢酶 (G6PD) 酶联免疫分析试剂盒 使用说明书

小鼠葡萄糖 6磷酸脱氢酶 (G6PD) 酶联免疫分析试剂盒 使用说明书

小鼠葡萄糖6磷酸脱氢酶(G6PD)酶联免疫分析试剂盒使用说明书产品编号:E0716m10. 终止液:1×10ml/瓶(2N H2SO4)。

11. 覆膜:5张12. 使用说明书:1份自备物品1. 酶标仪(建议参考仪器使用说明提前预热)2. 微量加液器及吸头,EP管3. 蒸馏水或去离子水,全新滤纸标本的采集及保存1. 血清:全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000 x g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。

2. 血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2 - 8° C 1000 x g离心15分钟,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。

3. 其它生物标本:请1000 x g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。

注:以上标本置4℃保存应小于1周,-20℃或-80℃均应密封保存,-20℃不应超过1个月,-80℃不应超过2个月;标本溶血会影响最后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。

操作步骤实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。

实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。

1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。

空白孔加样品稀释液50μl,余孔分别加标准品或待测样品50μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁。

为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。

2. 立即在每个孔中加入检测溶液A工作液50μl(在使用前半小时内配制),轻轻晃动混匀,酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。

3. 弃去液体,甩干,洗板3次。

每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。

葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)检测试剂盒(简易比色法)

葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)检测试剂盒(简易比色法)

葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)检测试剂盒(简易比色法)葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)检测试剂盒(简易比色法)简介:葡糖-6-磷酸脱氢酶( glucose 6-phosphatedehydrogenase ,G-6-PD 或G6PD)是糖酵解途径、柠檬酸循环以外的另一个葡萄糖分解途径的磷酸葡萄糖酸途径(磷酸戊糖途径)中的第一个酶(EC1.1.1.49)。

Leagene 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)检测试剂盒(简易比色法)其检测原理是红细胞G-6-PD 催化葡萄糖-6-磷酸葡萄糖-内酯,后者很快氧化成6-磷酸葡萄糖酸(6-PGA),同时NAPD 被还原成NADPH ,其反应公式如下:G-6-P+NAPD +→6-PGA +L-NADPH 。

在上述偶联反应中,NADPH 生成速率与样本中酶活性呈正比,通过分光光度计或自动分析仪检测吸光度上升速率(ΔA /min),上升速率(ΔA /min)与G-6-PD 活性呈正比,比色杯光径1.0cm ,直接计算酶的活性单位。

100T 该试剂盒试剂可以检测50次样本,该试剂盒仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。

组成:自备材料:1、生理盐水2、水浴锅3、比色杯4、分光光度计操作步骤(仅供参考):1、预备溶血液:取新奇抗凝血,离心取上清及白细胞层,用4℃预冷的生理盐水洗涤,每次取上清时,务必去除剩余的白细胞层,再加预冷的生理盐水配成含红细胞压积为30%的红细胞悬液,4℃保存备用。

临用前,以样本稀释液稀释,即为溶血液。

4℃保存10h ,编号名称TE0085 100TStorage试剂(A): 样本稀释液100ml -20℃ 避光试剂(B): G6PD assay buffer 100ml 4℃ 试剂(C): NADP 18mg -20℃ 试剂(D): G-6-P 1支-20℃ 试剂(E): G-6-P 稀释液10mlRT 使用说明书1份-20℃保存48h。

6-磷酸葡萄糖酸检测

6-磷酸葡萄糖酸检测

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6-磷酸葡萄糖酸检测
6-磷酸葡萄糖酸(6-Phosphogluconic acid)是戊糖磷酸途径与恩特纳–杜德洛夫途径中的一种中间代谢产物,由6-磷酸葡萄糖酸内酯酶生成,并被磷酸葡萄糖酸脱氢酶作用以产生核酮糖5-磷酸。

6-磷酸葡萄糖酸也可以被6-磷酸葡萄糖酸脱水酶作用而产生2-酮, 3-脱氧-6-磷酸葡萄糖酸。

迪信泰检测平台采用液相质谱联用(LC-MS)的方法,使用Thermo Scientific的
U3000快速液相色谱对样品进行分离,Thermo Scientific™ Q Exactive™对样品进行鉴定,可高效、精准的检测6-磷酸葡萄糖酸的含量变化。

此外,我们还提供其他糖酵解类物质检测服务,以满足您的不同需求。

LC-MS测定6-磷酸葡萄糖酸样本要求:
1. 请确保样本量大于0.2g或者0.2mL。

周期:2~3周。

项目结束后迪信泰检测平台将会提供详细中英文双语技术报告,报告包括:
1. 实验步骤(中英文)。

2. 相关参数(中英文)。

3.质谱图片。

4. 原始数据。

5. 6-磷酸葡萄糖酸含量信息。

迪信泰检测平台可根据需求定制其他物质测定方案,具体可免费咨询技术支持。

葡糖6磷酸脱氢酶和6磷酸葡萄糖脱氢酶

葡糖6磷酸脱氢酶和6磷酸葡萄糖脱氢酶

葡糖6磷酸脱氢酶和6磷酸葡萄糖脱氢酶葡糖6磷酸脱氢酶和6磷酸葡萄糖脱氢酶,作为糖代谢途径中的重要酶类,扮演着重要的角色。

在我们深入探讨这两种酶的功能和作用之前,让我们先来了解一下糖代谢的基本原理和过程。

一、糖代谢的基本原理和过程1. 葡萄糖是生物体内主要的能量来源,它参与呼吸作用,提供细胞代谢所需的能量。

2. 当葡萄糖进入生物体内后,通过一系列的酶类催化作用,最终被分解为水和二氧化碳释放出能量。

3. 而葡萄糖6磷酸脱氢酶和6磷酸葡萄糖脱氢酶则分别参与了糖代谢途径中的两个重要步骤。

二、葡糖6磷酸脱氢酶1. 葡糖6磷酸脱氢酶是糖代谢途径中的一种重要酶类,它参与了糖酵解途径中磷酸戊酮酸环节的调节。

2. 通过催化反应,葡糖6磷酸转化为6-磷酮葡萄糖和NADPH,同时释放出能量。

3. 这一特定的反应在糖代谢途径中具有重要的调节作用,对细胞内能量平衡和代谢健康起着至关重要的作用。

三、6磷酸葡萄糖脱氢酶1. 6磷酸葡萄糖脱氢酶是糖代谢途径中的另一种重要酶类,它参与了糖异生途径中的关键步骤。

2. 通过催化反应,6-磷酮葡萄糖转化为果糖6磷酸和NADH,同时释放出能量。

3. 这一特定的反应在糖异生途径中具有关键的调节作用,直接影响生物体内糖类物质的合成和储存。

总结回顾通过对葡糖6磷酸脱氢酶和6磷酸葡萄糖脱氢酶的功能和作用的深入探讨,我们可以更加全面、深刻地理解糖代谢途径中的关键环节。

这些酶类的存在和作用,保证了糖类物质在生物体内能够有效地转化、利用和合成,从而为细胞代谢提供了重要的能量和原料。

个人观点和理解葡糖6磷酸脱氢酶和6磷酸葡萄糖脱氢酶作为糖代谢途径中的重要酶类,对于维持细胞内的能量平衡和代谢平衡至关重要。

它们在糖代谢途径中各自发挥着重要的调节作用,保证了糖类物质的合理利用和转化。

对于这两种酶的功能和作用,我们应该更加深入地了解和认识,从而为生物体内糖类代谢的健康和平衡作出更多的贡献。

学术界对葡糖6磷酸脱氢酶和6磷酸葡萄糖脱氢酶的研究和探索也应该得到更多的关注和重视。

新生儿葡萄糖6-磷酸脱氢酶 2007.10

新生儿葡萄糖6-磷酸脱氢酶 2007.10

新生儿葡萄糖6-磷酸脱氢酶(Neonatal G6PD)试剂盒使用说明书修订日期:2007.10 产品编号:ND-1000【用途】本试剂盒用于定量测定采血滤纸片上血标本中葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)的浓度,以辅助筛查新生儿G6PD缺乏症。

【测试简介和说明】葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)缺乏症是一种临床上最常见的酶缺乏症。

它是一种等位基因异常现象,以X染色体连锁的隐性形式遗传下来。

全世界约有2-4亿人患有G6PD缺乏症。

本质上说,它是一种异质情况,并以男性居多,因为男性只有一条G6PD拷贝,因此他们要么正常,要么异常。

女性可以为正常、杂合体或纯合体,仅依靠表型很难区分。

患有G6PD缺乏症的女性杂合体病人有一条正常G6PD合成的基因拷贝,和另一条产生变体酶的基因拷贝。

正是由于这种双向合成使女性杂合体病人有两种红细胞群体,一种正常,一种则缺乏G6PD。

这就使杂合体女性的G6PD缺乏症很难得以诊断,因为正常红细胞部分地掩盖了异常红细胞。

这种掩盖发生时,女性G6PD缺乏症病人一般会产生比男性病人高的定量结果。

根据G6PD变体的轻重程度,可将其分为四种:第一种是遗传性非球形红细胞溶血性贫血;第二种是G6PD严重缺乏症;第三种是G6PD轻度缺乏症;第四种是缺乏性变体。

G6PD缺乏症在美国的发生率为0.6-2.9%;中东高达26%;在台湾,男性发病率为4.5%,女性为2.7%。

G6PD缺乏症患者对一些化学物质敏感,如抗疟疾药、6-氨基喹啉、蚕豆、磺胺类药物、一些感染、大剂量维生素C都能引起溶血作用。

因接触沉淀因子而致氧化应激的患者常表现为黄疸、疲劳、面色苍白、呼吸急促、嗜睡、心动过速和脾肿大。

对G6PD缺乏症的处理方法是避免接触沉淀因子。

新生儿和幼儿患G6PD缺乏症尤其值得关注,因为未结合胆红素积累到一定程度时会导致脑核黄疸症,这种病是导致新生儿智力迟钝和死亡的主要原因。

第二种G6PD变体水平较高的新生儿的黄疸发生率明显高于其他群体,但是,一旦发现,可通过光线疗法和苯巴比妥鲁米治疗进行预防。

葡萄糖含量试剂盒使用说明(测组织、细菌或细胞)

葡萄糖含量试剂盒使用说明(测组织、细菌或细胞)

葡萄糖含量试剂盒说明书(测组织、细菌或细胞)使用说明分光光度法正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定货号:BC2500规格:50管/48样产品内容:试剂一:0.5μmol/mL葡萄糖溶液10mL×1瓶,4℃保存;试剂二:液体25ml×1瓶,4℃保存;试剂三:液体25ml×1瓶,4℃保存;产品说明:葡萄糖不仅是细胞能量代谢的主要底物,而且其代谢中间产物是生物合成的重要底物。

植物可通过光合作用产生葡萄糖。

就哺乳动物而言,葡萄糖不仅是大脑神经系统、肌肉、脂肪组织等的唯一能源,而且与还原性辅酶、乳糖和乳脂的合成密切相关。

葡萄糖氧化酶催化葡萄糖氧化成葡萄糖酸,并产生过氧化氢;过氧化物酶催化过氧化氢氧化4-氨基安替比林偶联酚,生成有色化合物,在505nm有特征吸收峰。

需自备的仪器和用品:可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵和蒸馏水操作步骤:一、葡萄糖提取:1、组织的处理:按照组织质量(g):蒸馏水体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL蒸馏水),研磨成匀浆,95℃水浴10分钟(盖紧,防止水分散失),冷却后,8000g,25℃离心10min,取上清液备用。

2、细菌或细胞处理:收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):蒸馏水体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1mL蒸馏水),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3S,间隔10S,重复30次),95℃水浴10分钟(盖紧,防止水分散失),冷却后,8000g,25℃离心10min,取上清液备用。

二、测定步骤:1、分光光度计预热30min以上,调节波长至505nm,蒸馏水调零。

2、混合试剂的配制:使用前将试剂二和试剂三1:1等体积混合,用多少配多少。

3、加样表(在EP管中加入下列试剂):试剂(μL)空白管标准管测定管样本100试剂一100蒸馏水100混合试剂900900900混匀,置37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)水浴中,保温15min,于505nm波长处读取吸光度。

葡萄糖-6-磷酸酶染色液(铅法)说明书

葡萄糖-6-磷酸酶染色液(铅法)说明书

葡萄糖-6-磷酸酶染色液(铅法)说明书货号:G1500规格:3×50ml保存:4℃避光,6个月名称3×50ml Storage试剂(A):G-6-Pase孵育液50ml4℃避光试剂(B):ALP硫化液2×1ml RT避光试剂(C):固定液50ml4℃避光试剂(D):G-6-Pase对照液10ml4℃避光产品说明:葡萄糖-6-磷酸酶(glucose-6–phosphatase,G-6-Pase)是一种多存在于哺乳类动物肝、肾、肠等组织的膜结合酶,G-6-Pase和微体紧密结合,定位于内质网,是内质网的主要标志酶,能把葡萄糖-6-磷酸水解成葡萄糖和磷酸。

G-6-Pase对维持血糖浓度的相对恒定有至关重要的作用,是糖代谢的关键酶。

当血糖降低时,G-6-Pase促进肝糖原转变为血糖。

当缺乏G-6-Pase时,会引起糖原分解障碍,使糖原积累在肝、肾、心脏等部位,导致肝糖原储积病。

G-6-Pase最适pH为6.5,在pH6.0~8.0亦可,pH8.0最稳定,pH5.0易变性。

组织化学反应多用pH6.5~6.7。

葡萄糖-6-磷酸酶染色液(铅法)采用重金属捕捉剂和磷酸结合显示酶的活性。

该酶对固定很敏感,组织经80%乙酸溶液固定后用石蜡包埋,G-6-Pase完全被抑制。

需用新鲜组织低温恒冷切片,经甲醛短时固定酶即失活,但可短时低温丙酮固定,但一般不固定。

操作步骤(仅供参考):1.冰冻切片入蒸馏水清洗。

2.入G-6-Pase孵育液37℃孵育20min。

3.自来水冲洗后,蒸馏水冲洗。

4.在上述过程中配制ALP硫化工作液,即取试剂(B)用蒸馏水稀释50倍,即为ALP硫化工作液,即配即用。

切片入硫化工作液,孵育1min。

5.自来水水洗。

6.(可选)入固定液,固定2min。

7.入蒸馏水水洗2次。

8.甘油明胶封片。

染色结果:G-6-Pase活性处棕色沉淀阴性对照(可选):将切片置入试剂(D)-G-6-Pase对照液中,其余步骤相同,结果为阴性。

6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶检测

6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶检测

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6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶检测
6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶(6-phosphogluconate dehydrogenase, 6-PGDH),是一种存在于人体红血球内,协助葡萄糖进行新陈代谢之酵素,在这代谢过程中会产生NADPH(还原型辅酶Ⅱ)的物质能以保护红血球免受氧化物质的威胁。

6-磷酸葡萄糖脱氢酶缺乏时,若身体接触到具氧化性的特定物质或服用了这类药物,红血球就容易被破坏而发生急性溶血反应。

6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶对于磷酸戊糖旁路至关重要,而该途径可为髓鞘脂酸形成提供NADPH 。

迪信泰检测平台采用生化的方法检测辅酶类物质,使用相应的酶类的试剂盒可以高效、精准的检测6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶。

此外,我们还提供其他辅酶类的检测服务,以满足您的不同需求。

生化法测定6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶样本要求:
1. 请确保样本量大于0.2g或者0.2mL。

周期:2~3周。

项目结束后迪信泰检测平台将会提供详细中英文双语技术报告,报告包括:
1. 实验步骤(中英文)。

2. 相关参数(中英文)。

3. 图片。

4. 原始数据。

5. 6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶活性信息。

迪信泰检测平台可根据需求定制其他物质测定方案,具体可免费咨询技术支持。

葡萄糖脱氢酶(GCDH)活性检测试剂盒说明书 紫外分光光度法

葡萄糖脱氢酶(GCDH)活性检测试剂盒说明书 紫外分光光度法

葡萄糖脱氢酶(GCDH)活性检测试剂盒说明书紫外分光光度法注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

货号:BC2690规格:50T/48S产品简介:GCDH(EC 1.1.1.47)催化D-葡萄糖和NAD(P)生成D-葡萄糖酸和NAD(P)H,主要存在于多种微生物和高等动物的肝脏中。

GCDH是一种制备高含量低聚果糖的理想用酶,同时也是临床血糖测定的诊断用酶,可广泛用于食品工业及医药工业领域中。

GCDH催化D-葡萄糖和NAD生成D-葡萄糖酸和NADH,利用NADH在340nm处吸光值的变化即可反映葡萄糖脱氢酶的活性。

试验中所需的仪器和试剂:紫外分光光度计、台式低温离心机、水浴锅、1mL石英比色皿、可调式移液枪、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。

产品内容:提取液:液体60mL×1瓶,4℃保存。

试剂一:液体50mL×1瓶,4℃保存。

试剂二:粉剂×1瓶,4℃保存。

临用前加入15mL试剂一溶解,用不完的试剂4℃保存。

试剂三:粉剂×2瓶,-20℃避光保存。

临用前每瓶加入5mL试剂一溶解,用不完的试剂建议分装后-20℃避光保存,避免反复冻融。

操作步骤:一、粗酶液提取:组织:按照组织质量(g)︰提取液体积(mL)为1︰5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL 提取液)进行冰浴匀浆,然后,8000g,4℃,离心10min,取上清置于冰上待测。

细胞或细菌:先收集细胞或细菌到离心管内,离心后弃上清;按照细胞数量(104个)︰提取液体积(mL)为500~1000︰1的比例(建议500万个细胞或细菌加入1mL提取液),冰浴超声波破碎细胞或细菌(功率20%或200W,超声3s,间隔7s,总时间5min);然后8000g,4℃,离心10min,取上清置于冰上待测。

血浆(清):直接检测。

二、测定步骤:1、分光光度计预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。

2、工作液的配制:按照试剂一︰试剂二︰试剂三为4︰3︰2的体积比例充分混匀,备用,用前37℃预热10min。

脱氢酶(dehydrogenase,DHA)试剂盒说明书

脱氢酶(dehydrogenase,DHA)试剂盒说明书

脱氢酶(dehydrogenase,DHA)试剂盒说明书脱氢酶(dehydrogenase, DHA)试剂盒说明书微量法100管/96样注意:正式测定之前选择23个预期差别大的样本做猜测定。

测定意义:脱氢酶(dehydrogenase, DHA)是一类催化物质氧化还原反应的酶,催化底物通过细胞色素系统被氧化,释放的能量供机体使用,是生物体取得能量的一种方式。

测定原理:在细胞呼吸过程中,氢受体2, 3, 5 氯化三苯基四氮唑(2,3,5Triphenyl Tetrazolium Chloride, TTC)在脱氢酶作用下接受氢以后,被还原为三苯基甲鐟(Triphenyl Formazone, TF),TF呈现红色,于485nm测定其吸光值,即得脱氢酶活性。

自备试验仪器及用品:筛子、天平、恒温培养箱或水浴锅、低温离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、冰、蒸馏水、甲醇(不允许快递,请用户自备)。

试剂的构成和配制:提取液:液体100mL×1瓶,4℃保管试剂一:粉剂×1瓶,使用前加10mL试剂二溶解,4℃避光保管(尽量现配现用)。

试剂二:液体20mL×1瓶,4℃保管。

试剂三:甲醇,自备。

样品处理:1. 细菌、真菌:依照细胞数量(104个):提取液体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细胞加入1mL提取液),冰浴超声波碎裂细胞(功率300w,超声3秒,间隔7秒,总时间3min);然后8000g,4℃,离心10min,取上清置于冰上待测。

2. 组织:依照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液)进行冰浴匀浆,然后8000g,4℃,离心20min。

3. 液体:直接检测。

测定步骤和操作表:空白管测定管样品(μL)100蒸馏水(μL)100试剂一(μL)100试剂二(μL)100充分混匀,37℃培养24h试剂三(μL)900900振荡1h,8000g,25℃,离心5min,取200μL上清于微量石英比色皿/96孔板,测定A485,△A=A测定A空白管。

6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶

6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶

6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶
磷酸葡萄糖酸脱氢酶(Phosphogluconate dehydrogenase,PGD)是一种酶,参与底物——磷酸葡萄糖酸(6-phosphogluconate,6PG)的氧化还原反应,使其产生一分子的
CO2和一分子的NADPH。

PGD是巴氏循环的关键酶之一,也是细胞内NADPH的重要来源之一。

PGD是一个单元酶,大约含有460个氨基酸残基。

在进化过程中,从原核细胞向真核
细胞的转变中,PGD也经历了一些结构和功能上的改变。

比如在哺乳动物中发现的PGD是
一种亲水性膜蛋白,而在原核细胞和植物细胞中则是一种溶解于胞浆中的酶。

PGD的催化过程是一个复杂的氧化还原反应,反应过程中由于底物6PG与酶的活性中
心结合,产生一个混合酸酐化合物。

随后,由FAD作为辅因子参与底物6PG的氧化反应,
生成乙酰葡萄糖酸和FADH2。

接着,由NAD+作为另一种辅因子参与,将FADH2还原为FAD,同时生成CO2和NADPH。

PGD酶活性的调节很重要。

PGD本身是一种具有较高活性的酶,但在一些情况下,例
如细胞内NADPH的含量过多时,往往需要降低PGD酶的活性,以控制细胞内NADPH的水平。

事实上,PGD酶的活性可以通过磷酸化、去磷酸化等多种方式调节,而磷酸化对PGD酶活
性的抑制作用更强。

总之,PGD是一种在能量代谢及氧化还原反应中具有重要作用的酶,其独特的催化机
制和酶活性调节机制为科学家们深入探索细胞内代谢及调控机制提供了有益的帮助。

酶法检测试剂盒举例5个

酶法检测试剂盒举例5个

酶法检测试剂盒举例5个酶法检测试剂盒是一种用于测定特定物质或分子在生物样本中的含量或活性的工具。

它们通常由一系列试剂和材料组成,可以通过酶反应来测量目标物质的浓度或活性。

以下是五个常见的酶法检测试剂盒的举例:1. 葡萄糖酸脱氢酶(G6PD)检测试剂盒:G6PD是一种关键的酶,参与细胞内葡萄糖代谢过程中NADPH的产生。

G6PD缺乏会导致溶血性贫血等疾病。

G6PD检测试剂盒可用于测定血液样本中G6PD活性水平,从而帮助诊断和监测相关疾病。

2. 脯氨酸氧化酶(PAO)检测试剂盒:PAO是一种参与氨基酸代谢的重要酶,可以将脯氨酸转化为丙酮酸和亚硝胺。

PAO检测试剂盒可用于测定尿液中PAO活性水平,从而评估肾功能和相关代谢紊乱。

3. 乳酸脱氢酶(LDH)检测试剂盒:LDH是一种广泛存在于各种组织和细胞中的酶,参与乳酸代谢过程。

LDH检测试剂盒可用于测定血液、尿液或其他体液中LDH活性水平,从而帮助诊断和监测心肌梗死、肝病、恶性肿瘤等疾病。

4. 超氧化物歧化酶(SOD)检测试剂盒:SOD是一种抗氧化酶,能够清除细胞内的超氧阴离子自由基。

SOD 检测试剂盒可用于测定血液或组织样本中SOD活性水平,从而评估抗氧化能力和相关疾病的风险。

5. 淀粉酶(AMY)检测试剂盒:AMY是一种参与淀粉消化的消化酶,能够将淀粉分解为葡萄糖。

AMY检测试剂盒可用于测定食物样本或消化系统分泌物中AMY活性水平,从而评估消化功能和相关消化系统疾病。

以上是五个常见的酶法检测试剂盒的举例。

这些测试剂盒在医学、生物学研究和临床诊断中起着重要的作用,帮助我们了解生物样本中特定物质或分子的含量或活性水平,从而为疾病诊断、治疗和监测提供有力支持。

葡萄糖-6-磷酸脱氢酶试验

葡萄糖-6-磷酸脱氢酶试验

指导葡萄糖-6-磷酸脱氢酶的测定。

【该SOP变动程序】本标准操作程序的改动可由任一使用本SOP的工作人员提出,并报经下述人员批准签字:专业主管、质控主管、科主任。

【检验的适应证】可用于G-6-PD缺乏症高发地区对蚕豆病进行普查普防,在高疟地区对需要服抗疟药的对象进行G-6-PD缺乏症的筛选,防止药物性溶血的发生。

【仪器与试剂】1.仪器:电热恒温水浴箱、离心机、紫外分光光度计。

2.试剂:2.1 Tris-HCI-EDTA缓冲液。

2.2 0.1mol/L氯化镁溶液。

2.3 2mmol/LNADP2.4 6mmol/L葡萄糖-6-磷酸二钠2.5 6mmol/L-磷酸葡萄糖酸【操作程序】加入物 6-PGD测定 6-PGD+G-6-PD测定1(U) 2(B) 3(U) 4(B)Tris-HCL-EDTA缓冲液0.3 0.3 0.3 0.3MgCl2溶液 0.3 0.3 0.3 0.3NADP﹢溶液 0.3 0.3 0.3 0.3溶血液 0.06 0.06 0.06 0.06蒸馏水 1.74 2.04 1.44 2.04混匀,置37℃水浴10分钟G6P溶液 0.36-PGA溶液0.3 0.3根据每升血液每分钟催化反应产生1umol的NADPH为1个国际单位,换算成每克血红蛋白的酶活力。

先分别求6-PGD及(6-PGD+G-6-PD)的活力,再求G-6-PD 的活力。

8040酶活力(U/gHb)=△Amin×——Hb(g/L)G-6-PD活力=(6-PGD+G-6-PD)-6-PGD【参考值范围及报告单】G-6-PD活力(已校正6-PGD)=8.34±1.59U/ gHb(37℃)G-6-PD活力(未校正6-PGD)=12.1±2.09 U/ gHb(37℃)【葡萄糖-6-磷酸脱氢酶测定的注意事项】1.溶血液制备:取新鲜抗凝血离心去上清及白细胞层,用生理盐水洗涤两次,再加盐水使压积红细胞约为30%,将此红细胞悬液置冰水备用。

人葡萄糖6磷酸脱氢酶酶elisa试剂盒使用说明书

人葡萄糖6磷酸脱氢酶酶elisa试剂盒使用说明书

人葡萄糖6磷酸脱氢酶酶elisa试剂盒使用说明书检测范围:96T0.7mIU/mL - 20mIU/mL使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中葡萄糖6 磷酸脱氢酶(G6PD)含量。

实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人葡萄糖6 磷酸脱氢酶(G6PD)水平。

用纯化的人葡萄糖6 磷酸脱氢酶(G6PD)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入葡萄糖6 磷酸脱氢酶(G6PD),再与HRP 标记的葡萄糖6 磷酸脱氢酶(G6PD)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB 显色。

TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的葡萄糖6 磷酸脱氢酶(G6PD)呈正相关。

用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),通过标准曲线计算样品中人葡萄糖6 磷酸脱氢酶(G6PD)浓度。

试剂盒组成1 30 倍浓缩洗涤液20ml×1 瓶7 终止液6ml×1 瓶2 酶标试剂6ml×1 瓶8 标准品(40 mIU/mL)0.5ml×1 瓶3 酶标包被板12 孔×8 条9 标准品稀释液1.5ml×1 瓶4 样品稀释液6ml×1 瓶10 说明书1 份5 显色剂A 液6ml×1 瓶11 封板膜2 张6 显色剂B 液6ml×1/瓶12 密封袋1 个标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。

若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3 的样品,因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

操作步骤1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

20mIU/mL 5 号标准品150μl 的原倍标准品加入150μl 标准品稀释液10mIU/mL 4 号标准品150μl 的5 号标准品加入150μl 标准品稀释液5.0mIU/mL 3 号标准品150μl 的4 号标准品加入150μl 标准品稀释液2.5mIU/mL 2 号标准品150μl 的3 号标准品加入150μl 标准品稀释液1.25mIU/mL 1 号标准品150μl 的2 号标准品加入150μl 标准品稀释液2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。

葡萄糖-6-磷酸脱氢酶测定试剂盒(葡萄糖-6-磷酸底物法)临床方案模板-G6PD-体外诊断试剂-IVD

葡萄糖-6-磷酸脱氢酶测定试剂盒(葡萄糖-6-磷酸底物法)临床方案模板-G6PD-体外诊断试剂-IVD

方 案 版 本 : V1.0
方案日期: 2017/03/27
拟试验时间: 2018 年 8 月 至 2018 年 12 月
临床研究者姓名(签字): 临床研究者所在单位(盖章): *****医院 联系方式(电话):
临床试验类型:
□新诊断试剂产品的研究 ■已有同品种批准上市产品的临床研究 □关于变更申请中产品临床研究
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葡萄糖-6-磷酸脱氢酶测定试剂盒(葡萄糖-6-磷酸底物法)临床试验方案-v1.0-来自017/03/02目录
摘要................................................................................................................................4 试验研究人员................................................................................................................5 1. 基本内容...................................................................................................................6 2. 申办者信息...............................................................................................................7 3. 考核试剂相关信息...................................................................................................7 4. 参比试剂...................................................................................................................8 5. 研究设计.................................................................................................................10 6. 研究步骤.................................................................................................................12 7. 研究试剂管理.........................................................................................................15 8. 文件管理.................................................................................................................16 9. 数据管理.................................................................................................................17 10. 统计考虑...............................................................................................................18 11. 可行性分析...........................................................................................................20 12. 质量控制与质量保证...........................................................................................21 13. 临床研究伦理方面...............................................................................................22 14. 不良事件预测及应当采取的措施.......................................................................24 15. 对临床试验方案的修正规程...............................................................................24 16. 临床试验方案的偏离...........................................................................................24 17. 研究总结与终止...................................................................................................25 18. 保密原则...............................................................................................................25 19. 研究结果发表约定...............................................................................................25 20. 各方承担的职责...................................................................................................26 21. 各方研究方案签署...............................................................................................26
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6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶(6-PGDH)活性检测试剂盒说明书紫外分光光度法
注意:正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定。

货号:BC2100
规格:50T/48S
产品内容:
试剂一:液体100mL×1瓶,4℃保存。

试剂二:粉剂×1瓶,-20℃保存。

临用前配制,加入5mL试剂一,混匀。

试剂三:粉剂×1瓶,4℃保存。

临用前配制,加入5mL试剂一,混匀。


产品说明:
磷酸戊糖途径途径中6-磷酸葡萄糖脱氢酶(G6PDH)和6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶6PGDH依次催化NADPH 合成,与能量的平衡、生长速率和细胞活力等密切相关。

此外,6PGDH逆境生理中具有重要作用。

6PGDH催化6-磷酸葡萄糖酸和NADP+生成NADPH,NADPH在340nm有特征吸收峰,而NADP+没有;通过测定340nm吸光度增加速率,计算6PGDH活性。

需自备的仪器和用品:
紫外分光光度计、低温离心机、水浴锅、可调式移液枪、1mL石英比色皿和蒸馏水。

操作步骤:
一、样本的处理
称约0.1g组织,加入1mL试剂一,冰上充分研磨,10000rpm4℃离心10min,取上清液,待测。

二、测定步骤
1、紫外分光光度计预热30min以上,调节波长到340nm,蒸馏水调零。

2.试剂一置于37℃水浴预热30min以上。

3.加样表:在比色皿中依次加入
试剂名称(μL)测定管(μL)空白管(μL)
样本100-
蒸馏水-100
试剂一700700
试剂二100100
试剂三100100
于340nm处测定3min内吸光值变化,第0s吸光值记为A1,第180s吸光值记为A2。

记△A测定=A2测定-A1测定,△A空白=A2空白-A1空白。

三、6PGDH活性计算:
1)按蛋白浓度计算
活性单位定义:每毫克蛋白每分钟催化产生1nmol NADPH的酶量为1U(U/mg pr)。

6PGDH酶活性(U/mg prot)=[(△A测定-△A空白)÷(ε×d)×106×V反总]÷(Cpr×V样)÷T
=536×(△A测定-△A空白)÷Cpr
(2)按样本鲜重计算
活性单位定义:每克组织每分钟催化产生1nmol NADPH的酶量为1U(U/mg prot)。

6PGDH酶活性(U/g鲜重)=[(△A测定-△A空白)÷(ε×d)×106×V反总]÷(W÷V样总×V样)÷T
=536×(△A测定-△A空白)÷W
ε:NADPH摩尔消光系数,6.22×103L/moL/cm;d:比色皿光径,1cm;
V反总:反应体系总体积,0.001L;V样:反应体系中加入粗酶液体积,0.1mL;
Cpr:粗酶液蛋白质浓度,mg/mL;V样总:提取液体积,1mL;
T:反应时间,3min;W:样本质量,g。

注意事项:
(1)样品处理等过程均需要在冰上进行,且须在提取当日完成酶活性测定,粗酶液避免反复冻融;
(2)试剂二和试剂三须现配现用,当天未用完试剂保存在4℃,可保存1周。

(3)若样本初始(0s)读值大于0.5且△A测定小于0.1,可尝试将样本进行稀释后测定。

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