实验动物环境与设施xin

突发停电事故，“紧急预案”的操作规程
1.
动物房必须具备双路供电或备用电机，定期演练备用发电机和 风机的启动，电源的切换和发电，确保每天24小时供电及送、 排风不间断。 2. 通知各有关人员把关，在停电、停送、排风期间，任何人不得 进出屏障区实验动物设施（繁育生产设施及动物实验设施）。 3. 隔离环境设施在停电前、紧急发电后操作规程 • （1） 停电前10分钟堵高效过滤盘的进风口、出风口。 • （2） 紧急发电后，迅速启动送、排风，然后立即打开进风口、 出风口。 4. 屏障环境设施在停电前、紧急发电后操作规程 • （1） 停电前10分钟关闭进风口、出风口； 密封缓冲间、传递 窗、淋浴间外侧四周缝隙。 • （2）紧急发电后，迅速启动送、排风，然后立即打开进风口、 出风口及各缝隙。
物品进入屏障系统
• 紫外照射消毒 • 物品从传递仓进入，紫 外照射30分钟。 • 紫外照射前需要用消毒 液擦拭物体表面。 • 物品从缓冲间传出。 • 适用物品：表面无或少 许褶皱隆起并且能直接 使用的物品。如瓶装药 品、注射器、手术器械、
物品进入屏障系统
• 渡槽消毒 • 物品从渡槽传入。在 渡槽中浸泡30分钟。 • 物品从缓冲间传出。 • 适用物品：不怕湿、 耐腐蚀物品。如SPF 包装饲料，手术器械， 桶、盆等塑料制品。
IVC(Individually Ventilated Cages)
IVC大鼠笼盒 规格：470×315×260（mm
IVC小鼠笼盒规格： 310×205×180（mm））
IVC大小鼠笼结构图
• 由笼盒、板式冲压网 盖、饮水瓶及笼盒罩 四部分组成。
隔离环境(Isolation condition) 1．原理：隔离器必须具备五个条件
一、实验动物设施概念
1. 实验动物生产设施(breeding facility for Laboratory animal) 用于实验动物生产的建筑和设备总合。
2. 实验动物实验设施(experimental facility for laboratory animal) 以研究、试验、教学、生物制品、药品生产等 为目的进行实验动物试验的建筑物和设备的 总和。 3.实验动物特殊实验设施（hazard experiment facility for laboratory animal)
（1）必须是严格对微生物密闭的容器，其内部空间和 内容物能接受高压蒸气或化学药品灭菌处理。 （2）隔离器的空间以及内容物可随时被观察。 （3）隔离器内部应随时在视野下从外部进行工作，但 不破坏内部的无菌环境。 （4）必须装置一个有内外门的无菌通道，动物或食物 以及其它物品可以从外部无菌地输送到隔离器内部去， 而不破坏内部的无菌环境，送出时亦然。 （5）必须装置一个无菌进出气系统，内部保持适度的 高气压。 • 塑料薄膜套盖，一端在隔离器内，有内盖，一端在外 界，有外盖，两盖不能同时打开，此渡沧专为传入传 出物品及动物用。
动物进入屏障系统
• 本动物实验室仅接受清洁级或清洁级以 上级别的啮齿类实验动物。 • 动物送来后暂放隔离区检测。 • 检测结果合格后动物方可传入屏障系统。 • 不需要检测的动物，用新洁尔灭或酒精 擦拭符合级别要求的包装箱，经传递仓 紫外照射30分钟后传入。
锐器盒
• 锐器盒内只盛放锐器、利器（针头、采 血管等)，盒内装有消毒水对内部物品进 行消毒。 • 使用过的注射器，先盖好针帽，再将针 头与针管分开，针头放入锐器盒，针管 放入带有黄色垃圾袋的垃圾盒中。 • 特殊情况下（实验药品对人体有危害的） 可以将整支注射器以及剩余药品连同容 器一起投入锐器盒中。
物品进入屏障系统
• 适用物品：相机、摄像机等拍摄物品。 • 用无菌透明塑料袋密封包裹，经过传递 仓20分钟紫外照射后方进入，但使用时 不得摘去、弄破塑料袋。 • 从缓冲间传出。 • 注意:可以将镜头的头露在外边,但周围需 要严格密封。
物品进入屏障系统
• 适用物品：显微镜、离心机等精密实验仪器。 • 物品经过还氧乙烷或钴60处理，密封包装经 过传递仓或渡槽传入。 • 从缓冲间传出。 • 本项设备使用需与外单位联系。因此需要提 前预约。 • 注意：如物品没有按规定进入，将视为严重 违纪
二 实验动物环境设施分类
按照“实验动物环境与设施”GB149252001规定，实验动物环境设施分为三级，控 制程度从低到高，依次为普通环境(open condition) 、屏障环境(barrier condition)和隔离 环境(Isolation condition) 。
1 .普通环境(open condition)：符合实验动物居住的基本要求，控 制人员和物品、动物出入，不能完全控制传染因子，适用于饲 育基础级实验动物。(conventional animal)。 2 .屏障环境(barrier condition)：符合实验动物居住的要求，严格 控制人员、物品和环境空气的进出。 适用于饲育清洁实验动物(Clean animal)及无特定病原体实验动 物（SPF specific pathogen free animal），
3. 隔离环境(Isolation condition)：采用无菌隔离装置以保存无菌或 无外来污染物。隔离装置内的空气、饲料、水、垫料和设备均 为无菌，动物和物料的动态传递须经特殊的传递系统，该系统 既能保证与环境的绝对隔离，又能满足转运动物时保持内环境 一致。该环境设施适用于饲育无特定病原体（SPF）、悉生（ Gnotobiotic animal）及无菌实验动物(germ free animal) 。
锐器盒使用方法
锐器盒使用方法
• 实验后垃圾分类放置 •
• •
• 采血管 用过的离心管、
针管、废纸
针头
锐器盒使用中的错误操作
2005年4月30日由于供电局对医学部部配电室进行检修，医学 部8：00至17：00停电，动物部为保证实验动物设施的正常运行， 启动紧急预案，在医学部校舍维修中心全力支持下，特租来发电车 进行发电。
•
普通环境设施
屏障环境设施图一
屏障环境设施图二
屏障环境设施图三
人员进出程序（门斗）
• 进门后需先在门口的“药 水脚垫”上停留片刻。以 达到消毒杀菌的目的。 • 在门斗更衣柜处脱去大衣， 将贵重物品存放于更衣柜 内。 • 在门斗鞋柜处更换洁净拖 鞋。 • 注意：屏障系统内严禁携 带手机、首饰等物品进入。 如发现将视为严重违纪行 为。
人为因素 设 设 程 制 实验 施 备 序 度 方法 物理因素
温度 湿度 气流 光照 噪音 笼具 垫料 饲养密度
化学因素
实验动物
生物因素 同种生物 异种生物
饲料 饮水 臭气 杀虫剂 消毒剂
实验动物环境因素与指标控制
实验动物环境设施控制
• 概念 • 环境因素对实验动物的影响 • 实验动物环境监测和设施的维护
人员进出程序（过渡走廊）
• 进入人员应在过渡走廊处进 行手部消毒。 • 如有涂抹香水应尽量洗去。 洗后仍有香气者禁止入内. • 长发者应在此处把头发盘起。 • 留长指甲者应在此处把指甲 剪短。 • 进入屏障之前将所带物品、 药品进行有效消毒。 • 注意：进入屏障系统不得散 发、留指甲、喷香水等。嗜 酒、吸烟者也不得进入。违 反者将视为严重违纪。
超净工作台(clean bench)
大鼠层流轲（4层） 尺寸：1350*700*1980mm 尺寸：1250*650*1950mm
层流柜(laminar air flow rack)
小鼠层流架 净化工作台（单人）
4. 独立送风笼盒（IVC）
• 该产品由电气主机箱、导风通道笼架和笼盒三部分组成。 其中电气主机箱由送风系统、排风系统、电气控制系统 和温湿度监视系统组成。室内空气经送风系统预过滤和 高效过滤器进入导风通道笼架，通过即插即用连接装置 送入到每个笼盒。从而为实验动物提供均匀的低流速洁 净空气。动物排放的废气经笼架回风管道进入主机箱的 排风系统，再进行二级过滤后排放到室外。笼盒直接排 放废气，可增加通风效率，保持垫料干燥，减少笼具更 换次数。有效地防止动物交叉感染，保障实验工作人员 的健康安全。置于普通房间内配合超净工作台可用于 SPF动物的培育、繁殖、保种和各类动物实验，尤其适 用于饲养免疫缺陷动物和转基因动物。
物品进入屏障系统
• 防紫外消毒 • 适用物品：怕紫外照射的物品（如DNA 等生物制剂） • 将物品用酒精擦拭后用高压灭菌的锡箔 纸包裹。经传递仓紫外照射20分钟后传 入。 • 从缓冲间传出。
物品进入屏障系统
• 冰紫外消毒 • 适用物品：不耐高温、怕紫外照射物品 （如病毒、细胞等生物制剂） • 将物品用酒精擦拭后用高压灭菌的锡箔 纸包裹。放入盛有冰的消毒药水中。经 传递仓紫外照射20分钟后传入。(冰自带) • 从缓冲间传出。
人员进出程序（登记处）
• 向工作人员出示《北京市实验动物从业人员上岗证》。 • 在登记处填写《动物实验室进出登记》表。如实填写进出时间及操作 内容。 • 填写《N95口罩使用记录表》，领取口罩。 • 领取门禁卡。
注意：实验人员第一次进入屏障系统必须在动物中心工作人员的带领、 监督下进行，并且严格执行《实验人员隔离制度》。
第三讲 实验动物环境 设施控制
北京大学医学部实验动物 科学部
周淑佩 电话：82805273
怎样才能养好实验动物 作好动物实验？
*从种子中心引种 *拥有合格的饲养管理人员 *执行标准操作规范（SOP） *实验动物种群饲养在合格的实验动物繁育、生产设施（普通环境、 屏障环境、隔离环境）内。 *使用合格的饲料 *使用合格的实验动物（遗传学分类和按微生物控制分类） *合格的实验动物饲养在合格动物实验设施（普通环境、屏障环境、 隔离环境）内。 *科技人员要持证上岗 *特殊实验需在特殊环境（感染、放射、转基因、GLP等）中进行 操作，确保实验人员及周围环境不受伤害。
工作人员操作高温高压灭菌器
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药液渡槽
传递窗(pass box)
屏障通道-淋浴室
屏障区内物品准备间
屏障区内物品储藏室
屏障区内饲育员更换笼具
屏障区内饲育员更换动物饮用水
屏障区内育成动物观察1
屏障区内育成动物观察2
屏障区内育成动物观察3
工作人员每日工作完毕清洁工作(亚清洁走廊)
屏障区内日常维持消毒1
屏障区内日常维持消毒2
3.层流架 (laminar air flow rack)
• 1． 原理与种类： • 层流架的原理与种类比较多，方式也不尽相同，但性 能主要有两个：即正压型与负压型。正压型层流架主要 用于清洁动物或SPF动物的饲养。这种类型的层流架一 般都采用背面、顶部或以空气幕的方式将洁净的气体送 到洁净区，使洁净区内保持正压。空气经初效、高效过 滤器，把过滤的气体均匀地送入柜内各个洁净区。柜内 动物代谢产生的污浊气体，由统一的排气管排到室外， 还可以用内外压差，经层流架门的缝隙排到室外。一般 用于饲养的层流架，排除的气体不进行任何处理。并且， 还要防止未经过滤处理的气体流入洁净区。
人员出正压屏障系统程序
• 在一更脱去衣物 • 用一只手套包裹着另一只手套脱掉。 脱下的手套扔到指定的垃圾桶中。 • 脱下的隔离服与牛皮纸一同放入一 更的不锈钢桶中。 • 最后摘下口罩。
物品进入屏障系统
• 高压消毒(推荐方法) • 物品经过121度，20 分钟高压灭菌后传入。 • 从缓冲间传出。 • 适用物品：耐高温、 耐高压物品。如动物 笼具，手术器械等金 属物品。
• 负压型层流架，主要用于感染动物的饲养。这 种负压柜阻止了污染空气外流，防止工作人员 污染。为了实验操作方便，柜内可以分为若干 个小的区域，它们之间是完全隔离的，可防止 动物之间的交叉污染。进入该柜的空气是从室 内直接吸入并经过初效、高效过滤器过滤后， 由送风机将洁净的空气送到层流架内。污染的 气体通过背面的回风小孔进入回风管。然后再 经过初效、高效过滤处理。
人员进入正压屏障系统程序（一更）
刷卡进入二更。 在一更处脱去所穿拖 鞋。
人员进入正压屏障系统程序（二更）
• 穿上二更专用拖鞋。 • 戴乳胶手套。 • 戴口罩。
穿隔离服
穿隔离服
自检：
１口鼻、头发（尤其头发帘）不得暴露。
２袖口需塞进手套内。 ３衣链、帽绳需系牢。
注意：如果以上任意一条未做到便进入屏障系统者视为严重违纪。