糖尿病大鼠指标
大鼠糖尿病造模成功的标准
大鼠糖尿病造模成功的标准大鼠糖尿病造模成功的标准糖尿病是一种常见的代谢性疾病，其特点是血糖水平异常升高。
为了更好地研究糖尿病的发病机制和寻找新的治疗方法，科学家们常常使用动物模型进行实验研究。
而大鼠作为一种常用的实验动物，其糖尿病模型的建立和评价就显得尤为重要。
大鼠糖尿病模型的建立主要有两种方法：化学诱导和基因突变。
化学诱导法是通过给予大鼠某些化学物质，如链脲佐菌素（STZ）或高脂饮食，来诱导其发生糖尿病。
而基因突变法则是通过基因工程技术改变大鼠体内某些基因的表达，使其模拟人类糖尿病的发生过程。
无论是哪种方法，大鼠糖尿病模型的建立都需要满足一定的标准才能被认为是成功的。
下面将介绍大鼠糖尿病模型成功的标准。
1. 血糖水平异常升高：大鼠糖尿病模型的核心特征就是血糖水平异常升高。
正常情况下，大鼠的空腹血糖水平应该在3.9-6.1 mmol/L之间，而糖尿病模型大鼠的空腹血糖水平应该明显高于正常范围。
2. 葡萄糖耐量异常：正常情况下，大鼠在葡萄糖负荷后，血糖水平会在一定时间内迅速上升，然后逐渐恢复到正常范围。
而糖尿病模型大鼠在葡萄糖负荷后，血糖水平上升明显较高，并且恢复较慢。
3. 胰岛功能异常：胰岛是调节血糖水平的重要脏器，而胰岛功能异常是导致糖尿病发生的主要原因之一。
在大鼠糖尿病模型中，胰岛功能异常表现为胰岛细胞数量减少、胰岛素分泌减少或胰岛素抵抗增加等。
4. 病理学变化：糖尿病是一种慢性代谢性疾病，其发展过程中会引起一系列的组织和器官损伤。
在大鼠糖尿病模型中，可以观察到胰岛组织结构异常、肝脏脂肪变性、肾小球硬化等病理学变化。
5. 症状表现：大鼠在发生糖尿病后会出现一系列的临床表现，如多饮、多尿、消瘦等。
这些临床表现也是评价大鼠糖尿病模型是否成功的重要指标之一。
综上所述，大鼠糖尿病模型成功的标准主要包括血糖水平异常升高、葡萄糖耐量异常、胰岛功能异常、病理学变化和临床表现。
只有同时满足这些标准，才能认定大鼠糖尿病模型的建立是成功的。
有氧运动对糖尿病大鼠血糖等生化指标的影响
Ｗ ＢＣ、 Ｐ Ｔ ｂ ｔ ｅ ｎ ｔ ｅ ｅ ｐ ｒ ｎ ｌ ｏ ｐ ａ ｄ ｃ ｎ ｒ ｌ ｒ ｕ ． Ｌ ｅ ｗ ｅ ｘ ｉ ｈ ｅ ｍｅ ｔ ｕ ｏ ｔｏ ｏ ｐ ａ ｇ ｒ ｎ ｇ Ｋｅ ｗｏ ｄ ： ｙ ｅ ｐ ｒｓ Ｂｌｏ ｌ ｃ ｓ ； Ｂｉ ｃ ｅ ｃ ｌ ｎ ｅ ； Ｄｉｂ ｔ ｓｒ ｔ ｙ ｒ ｓ Ｏｘ ｇ ｎ ｓ ｏ ｔ； ｏ ｄｇｕ ｏ ｅ ｏ ｈ ｍｉａ ｄ ｘ ｉ ａ ｅｅ ｓ ａ
ＢＵ Ｎ、ＭＣ Ｖ、ＭＣ Ｈ、ＭＣ ＨＣ无显著性 （ ＞ ．５ ｐ ００ ）影响；但与对照组相 比，血糖 、ＧＰ 、Ｒ Ｃ、 Ｔ Ｂ Ｈ Ｔ Ｃ 、ＨＧＢ、ＲＤ 、Ｐ ｌ Ｗ Ｌ 、ＷＢ Ｔ Ｃ却发 生 了显 著性 （ ＜ ．５）变化 。 ｐ ００
关键 词 ：有氧运动 ；血糖 ；生化指 标；糖尿病大 鼠
中图分类号 ：Ｇ８ ４７ ０．
文献标识码 ：Ａ
当今 ，糖尿病 已成为我 国的重大社 会 问题 ，如何有 效
防治 ，减低 并发症和提 高社会生产力 水平 ，是全社会都 十
分 关 注 的 问题 。 早 在 １３ ９ ５年 ， 著 名 糖 尿 病 学 家 Ｊ ｓｎ就 总 ｏｌ ｉ
１ 材 料 与方 法
龚 云
ＧＯＮＧ ｎ Ｙｕ
摘
要 ： 察有 氧运动对糖尿病模型 大鼠血糖 等生化 指标的影响。四氧嘧 啶诱 导的糖尿病大 鼠 观
２ ０只 ，随机分为 实验组 （ ０只 ）和对照组 （ ０只 ） 实验组动物进行 ４ ｄ连续跑 台运动 ，第 １ １ 。 ５ ４ ｄ断 头取血 测血糖 、转氨酶 、尿素氮和血 常规指标 。结果发现 ：有氧运 动对糖尿 病大 鼠的 ６
高脂高糖饲养下的SD大鼠糖尿病 相关指标研究
高脂高糖饲养下的SD大鼠糖尿病相关指标研究摘要：目的：通过膳食诱导的方式，观察高脂高糖饲养的SD 大鼠血糖、血脂等变化情况，探讨2 型糖尿病IR 模型建立的简便方法。
方法：20 只体重140~210g的普通级成年SD 雄性大鼠，随机分普通饲料组、高脂高糖饲料组，每组10 只，经30 天的分组饲养，检测实验前后SD 大鼠体重、血糖、血胆固醇、血胰岛素水平，统计分析。
结果：高脂高糖饲料组SD 大鼠体重、血清总胆固醇、餐后2.0h胰岛素水平显著高于对照组,(P<0•05)。
提示高脂高糖饲养的SD 大鼠易发生肥胖、糖耐量减低和血脂代谢紊乱,是成功的IR 动物模型建立方法。
关键词：糖尿病胰岛素抵抗代谢综合征胰岛素抵抗(Insulin Resistance，IR)是指胰岛素作用的靶器官对胰岛素作用的敏感性下降，即正常剂量的胰岛素产生低于正常生物学效应的一种状态。
目前认为，IR 不仅是2 型糖尿病的发病基础，更是贯穿多种代谢相关疾病的主线，是连结它们的纽带，为这些疾病的共同病理生理基础。
【1】本研究旨在通过膳食诱导的方式，观察高脂高糖饲养的SD 大鼠血糖、血脂、胰岛素等变化情况，以期为2 型糖尿病IR模型建立提供依据。
1 材料与方法1.1 动物：20 只体重140~210g 的普通级成年SD 雄性大鼠由广州中医药大学实验动物中心(粤检证号 D2001 A009号)提供，由专人单笼喂养，自由进食和饮水，动物房温度保持在20±3℃，湿度 50%~70%，光照时间12h，实验周期30d。
1.2 高糖高脂饲料的制备：10.0%猪油、20.0%蔗糖、胆固醇1.0%、 10.0%蛋黄粉、0.5%胆酸钠、58.5%常规饲料组成。
1.3 造模方法：在动物房适应喂养3 天后，根据体重和空腹血糖值随机分为两组，即正常普通饲料组(对照组)和高糖高脂饲料组(实验组)，每组10 只SD 大鼠。
1.4 指标测定：①体重：实验前、实验第15 天、实验第30 天各测量一次SD 大鼠体重(禁食16 小时后)；②血糖、血脂、胰岛素水平：实验前、饲养30 天后各测量一次，其中空腹血糖（FPG）、空腹胰岛素（INS）、胆固醇（TC）指标均需禁食16小时后测定，餐后2.0h血糖（2hPG）、餐后2.0h胰岛素（2hINS）指标需做糖耐量负荷实验，方法为以2.0g/kg 给各组大鼠灌服蔗糖溶液，于空腹及糖负荷后2.0h 取尾血标本测定。
糖尿病大鼠模型
［13］郑里翔.STZ和alloxan联合使用复制实验性糖尿病大鼠模型［J］.中国病理生理杂志,1999,15(8)：758
2.2.1 链脲佐菌素（streptoxolocin,STZ）
STZ是一种广谱抗菌素，具有抗菌、抗肿瘤的性能和致糖尿病的副作用，对实验动物的胰岛β细胞具有高度选择性的毒性作用【5】。STZ诱导的糖尿病因给药方式不同，其成模效果也有所差别，如采用小剂量分次给药的方法，则建立与人类1型糖尿病表现相似的大鼠模型，如采用较大剂量一次性注射的给药方法，则建立与人类2型糖尿病表现相似的大鼠模型，其原理可能与胰岛的损伤程度有关【6】。
1型糖尿病模型（IDDM模型）：静脉或腹腔一次大剂量注射STZ所制得的速发型糖尿病系胰岛β细胞直接受损害所致：按55mg/kg给大鼠腹腔内注射STZ，由于STZ对胰岛β细胞的直接损害，胰岛的分泌减少而致血糖升高，出现糖尿病的各种表现【6】。多次小剂量注射所制得的迟发型糖尿病模型则与T淋巴细胞介导的β细胞不断破坏有关：应用30mg/kg多次注射STZ诱导大鼠DM，逐渐加重胰岛功能损伤，终达失代偿，可有效模拟糖尿病病程及发病机理，并降低动物模型的死亡率【7】。这样建立的动物模型与人类IDDM更接近。
［6］黄 波,刘学政,庞东渤.不同途径注射链脲佐菌素致大鼠糖尿病模型的研究［J］.锦州医学院学报,2003,24(1):19.
［8］司晓晨，尚文斌，卞慧敏，等.链脲佐菌素加高脂膳食诱导2型糖尿病大鼠模型［J］.安徽中医临床杂志,2003,15(5)：383.
［9］郭啸华，刘志红，李 恒，等高糖高脂饮食诱导的2型糖尿病大鼠模型及其肾病特点［J］.中国糖尿病杂志,2002,10(5)：290.
糖尿病大鼠HDL-C和LDL-C的变化及丝胶的调节作用
糖尿病大鼠HDL-C和LDL-C的变化及丝胶的调节作用杨振军;张艳;侯丽娜;刘东慧;陈志宏【摘要】目的：探讨丝胶对2型糖尿病大鼠低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein cholesterol，LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇(high density lipoprotein cholesterol，HDL-C)的调节作用。
方法：48只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、糖尿病模型组、丝胶治疗组和阳性对照组，每组12只大鼠。
25mg/kg链脲佐菌素腹腔注射3d(1次/d)建立2型糖尿病大鼠模型；模型成功建立后，糖尿病模型组大鼠不再做任何处理，丝胶治疗组大鼠给予丝胶(2.4g/kg/d)灌胃35d，阳性对照组大鼠给予二甲双胍(55.3mg/kg/d)灌胃35d。
分别检测各组大鼠的血糖以及血清HLD-C和LDL-C的水平。
结果：与正常对照组大鼠比较，模型组大鼠的血糖、LDL-C明显升高，HDL-C明显降低(P＜0.01，P＜0.05)；与模型组大鼠比较，丝胶治疗组、阳性对照组大鼠的血糖、LDL-C明显降低，HDL-C明显升高(P＜0.01)。
结论：丝胶可通过提高HDL-C水平、降低LDL-C水平改善糖尿病时血脂代谢紊乱。
%Objective:To investigate the regulatory effectsof sericin on low density lipoprotein cholesterol (LDL-C) and high density lipoprotein cholesterol (HDL-C) of type 2 diabetic rats.Methods:48 male SD rats were randomly divided into normal control group, diabetes model group, sericin treatment group and positive control group (n=12). Streptozotocin (25mg/kg) was injected into the peritoneal cavity for 3 days (one time a day) to establish type 2 diabetes rats model. Then the rats in model group received no more treatments;the rats in sericin treatment group were lavaged sericin (2.4g/kg/d) for 35-day;the rats in positive control group were lavaged metformin (55.3mg/kg/d) for 35-day. Theblood glucose, HDL-C and LDL-C of rats in each group were respectively detected.Results:Compared with rats in normal control group, the blood glucose and LDL-C of rats in model group increased obviously, while HDL-C decreased obviously (P<0.01,P<0.05). Compared with rats in model group, the blood glucose and LDL-C of rats in sericin treatment group and positive control group decreased significantly, while HDL-C increased significantly (P<0.01). Conclusions:Sericin can obviously improve lipiddisorder ofdiabetes mellitus byincreasingHDL-C and decreasing LDL-C.【期刊名称】《承德医学院学报》【年(卷),期】2013(000)005【总页数】3页(P372-374)【关键词】2型糖尿病;血脂;HDL-C;LDL-C;丝胶【作者】杨振军;张艳;侯丽娜;刘东慧;陈志宏【作者单位】承德医学院人体解剖学教研室，河北承德 067000;承德医学院人体解剖学教研室，河北承德 067000;承德医学院人体解剖学教研室，河北承德067000;承德医学院人体解剖学教研室，河北承德 067000;承德医学院人体解剖学教研室，河北承德 067000【正文语种】中文【中图分类】R587.1目前，治疗糖尿病多采用控制饮食、运动、口服降糖药物、注射胰岛素等方法。
糖尿病的大鼠模型研究
糖尿病的大鼠模型研究糖尿病是一种以高血糖为主要特征的代谢性疾病，在全球范围内已成为一个公共卫生问题。
研究糖尿病的机制和策略对于预防和治疗该疾病具有重要意义。
大鼠模型是糖尿病研究中常用的实验动物模型之一，其具有与人类糖尿病相似的临床表现和生理特征。
本文将介绍糖尿病的大鼠模型以及其在糖尿病研究中的应用。
1. 糖尿病的定义和类型糖尿病是一种代谢性疾病，其特征是血糖水平持续升高，主要由于胰岛素分泌不足或胰岛素作用异常引起。
根据病因和临床特点，糖尿病可分为1型糖尿病、2型糖尿病和其他类型的糖尿病。
2. 大鼠模型的建立和特点大鼠模型是研究糖尿病的重要工具之一，其建立主要通过基因改变、药物诱导或环境因素等方式来模拟糖尿病的发生和发展过程。
在大鼠模型中，常用的糖尿病模型有高脂饮食诱导糖尿病模型、低剂量链脲低毒素诱导糖尿病模型等。
3. 糖尿病大鼠模型在病理机制研究中的应用糖尿病大鼠模型在糖尿病的病理机制研究中起着重要的作用。
通过研究模型大鼠的胰岛素分泌功能、胰岛素信号通路和胰岛素抵抗等方面的变化，可以深入了解糖尿病的发生机制，并为糖尿病的治疗提供理论依据。
4. 糖尿病大鼠模型在药物筛选和治疗策略研究中的应用糖尿病大鼠模型在药物筛选和治疗策略研究中也发挥着重要作用。
通过给大鼠模型注射不同的药物或制定特定的治疗策略，可以评估其对糖尿病的治疗效果，并为临床治疗提供借鉴。
5. 糖尿病大鼠模型的优缺点及未来展望糖尿病大鼠模型具有较高的可重复性和可操作性，可以模拟人类糖尿病的发生和发展过程。
然而，由于大鼠与人类在遗传和生理上的差异，糖尿病大鼠模型仍存在一些局限性。
未来研究应继续改进模型的建立方法，提高其可靠性和可预测性。
总结：糖尿病大鼠模型在糖尿病研究中具有重要的地位和作用。
通过研究模型大鼠的病理变化和应用药物治疗等方法，可深入了解糖尿病的发生机制，并为糖尿病的治疗提供理论依据。
随着研究的不断深入，糖尿病大鼠模型的应用将得到进一步发展，为糖尿病的防治提供更多的支持和帮助。
大鼠血糖测定方法
大鼠血糖测定方法引言：血糖是人体能量代谢的重要指标之一，血糖水平的变化与多种疾病的发展密切相关。
因此，准确测定大鼠血糖水平对于研究人类疾病模型以及药物研发具有重要意义。
本文将介绍几种常用的大鼠血糖测定方法。
一、口服葡萄糖耐量试验（OGTT）口服葡萄糖耐量试验是一种常用的测定大鼠胰岛功能和糖代谢的方法。
实验操作步骤如下：1. 饲养大鼠至试验前12小时内禁食，但可以饮水。
2. 在试验开始前，取大鼠空腹血样测定胰岛素和葡萄糖基线水平。
3. 给予大鼠口服葡萄糖溶液（2g/kg），记录给药时间点为0分钟。
4. 在给药后的30、60、90和120分钟，分别采集大鼠血样，测定血糖水平。
5. 同时测定各时点的胰岛素水平。
6. 通过分析血糖曲线和胰岛素水平变化，评估大鼠胰岛功能和糖代谢状态。
二、静脉注射葡萄糖耐量试验（IVGTT）静脉注射葡萄糖耐量试验是一种常用的测定大鼠胰岛素敏感性和胰岛功能的方法。
实验操作步骤如下：1. 饲养大鼠至试验前12小时内禁食，但可以饮水。
2. 在试验开始前，取大鼠空腹血样测定胰岛素和葡萄糖基线水平。
3. 通过尾静脉注射葡萄糖溶液（1g/kg），记录给药时间点为0分钟。
4. 在给药后的1、3、5、7和10分钟，分别采集大鼠血样，测定血糖水平。
5. 同时测定各时点的胰岛素水平。
6. 通过分析血糖曲线和胰岛素水平变化，评估大鼠胰岛素敏感性和胰岛功能状态。
三、糖化血红蛋白测定法（HbA1c）糖化血红蛋白测定法是一种常用的长期血糖控制指标的测定方法。
实验操作步骤如下：1. 取大鼠全血样本。
2. 提取血红蛋白，去除干扰物质。
3. 通过高效液相色谱法（HPLC）或离子交换色谱法分离和测定糖化血红蛋白（HbA1c）的百分比。
4. 根据HbA1c的百分比，评估大鼠长期血糖控制状态。
四、血糖仪法血糖仪法是一种常用的快速测定大鼠血糖水平的方法。
实验操作步骤如下：1. 取大鼠尾静脉血样或耳朵尖血样。
2. 使用血糖仪将血样放入试纸上，等待血糖仪读数。
实验大鼠血糖正常范围的估算
实验大鼠血糖正常范围的估算血糖是影响机体健康的重要生理指标之一，对糖尿病、糖代谢异常和某些疾病的诊断和治疗都有重要意义。
尽管血糖的正常范围在不同的实验动物（人类、犬类、猫类、小鼠等）中不同，但大多数研究表明，实验大鼠血糖的正常范围在4mmol/L-7mmol/L之间。
尽管血糖的正常范围在实验动物中不同，但大多数研究发现，大鼠的血糖值在4mmol/L-7mmol/L之间。
同时，血糖受多种因素的影响，包括个体状况、营养、睡眠、运动等，它们都有可能影响血糖水平。
因此，评估实验大鼠血糖正常范围的最佳方法是将实验条件和实验大鼠进行评估，以测定实验大鼠血糖正常范围的估算值。
第一步是选择大鼠样本。
一般情况下，根据研究的目的，应选择同年龄，性别，体重，种族等的健康大鼠样本。
另外，除了关注这些个体基础之外，为了确保样本的可靠性，同一个研究中所有大鼠应来自同一来源。
第二步是检查样本健康状况。
检查大鼠健康状况是估算血糖正常范围的重要环节，对于每只大鼠，应检查体温，体重，营养状况，精神状态，眼球状态，胃肠系统健康状况，皮肤状况，口腔状况等。
第三步，收集大鼠血液样本。
进行血糖测量前，首先应取血。
一般情况下，取血量以每只大鼠0.5ml为宜，应从大鼠腕部取血，并用血液采集系统进行收集。
第四步，进行血糖测量。
取得血样后，应立即进行血糖测量，使用血糖测量仪将血糖浓度进行测量，并将血糖值在大鼠测量的记录表中记录下来。
第五步，分析大鼠血糖测量结果。
血糖测量结果的分析是估算大鼠血糖正常范围的关键，通常情况下，应使用统计学方法，进行总体数据分析，以确定血糖正常范围估算值。
以上描述了如何估算实验大鼠血糖正常范围的步骤和方法，但是，仅根据血糖测量结果确定大鼠血糖正常范围是不够的，应考虑到大鼠的个体状况，环境因素等，以更准确准确地评估大鼠血糖正常范围的估算值。
实验大鼠血糖正常范围的估算是一项复杂的工作，要根据实验大鼠的个人状况，实验条件，以及血糖测量结果，合理进行估算，以获得更准确的估计值。
国际大鼠糖尿病诊断标准
国际大鼠糖尿病诊断标准
国际上对于大鼠糖尿病的诊断通常使用的是血糖水平来进行评估。
大鼠糖尿病的诊断标准可能会有所不同，但常见的一种标准是依据空腹血糖浓度。
以下是一般性的大鼠糖尿病的诊断标准：
1.正常：空腹血糖水平在3.3至6.1毫摩尔/升（mmol/L）
范围内被认为是正常。
2.糖尿病前期（糖尿病前阶段）：空腹血糖水平在6.2至
6.9 mmol/L之间，表示可能存在糖尿病前期状态，有患糖尿病
的风险。
3.糖尿病：空腹血糖水平在7.0 mmol/L及以上则被诊断
为糖尿病。
需要注意的是，这只是一种通用的参考标准，具体的标准可能会因研究、实验室和医疗机构的不同而有所调整。
此外，在进行实验或研究时，还可能根据特定的实验设计和研究目的对糖尿病的定义和诊断标准进行进一步的调整。
在实际应用中，建议参考相关的实验室方法和研究文献以获取最新和具体的诊断标准。
糖尿病大鼠脑中β-淀粉样蛋白变化的指标观察
【 ｂｔ ｃ】 Ｏ ｊ ｔ ｅ Ｔ ｖ ｔａ ｅ ｔａｏ ｔｐｐｄ ａｅｃ ａｈ ｐｃ ｐｓ Ｍｅ － Ａ ｓａｔ ｒ ｂｅ ｉ ｏｎｅｉ ｔｔ ｅ ｔｎ Ａ３ ｅｔｅ ｎ ｉ ｔ ｔｉ ｏａ ｕ． ｔ ｃｖ ｉ ｓｇ ｅｈ ａ ｒｉ ｏ ｉ ｉ ｄ ｉ ｒ ｐ ｍ ｌ ｆ ｂ ｈ
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1型糖尿病大鼠模型的建立及糖尿病并发症相关指标的测定
1型糖尿病大鼠模型的建立及糖尿病并发症相关指标的测定【摘要】目的为了研究链脲佐菌素(Streptozotocin，STZ)诱导大鼠1型糖尿病模型的方法并观察糖尿病并发症指标的变化。
方法采用一次性腹腔注射STZ(60mg・kg-1)，监测不同时点大鼠的空腹血糖、体重、饮水量及血浆中的丙二醛(maleic dialdehyde，MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)和一氧化氮(nitric oxide，NO)等指标。
结果大鼠注射STZ 60mg・kg-1 72 h后血糖值达到成模标准，并逐渐出现糖尿病表现，观察7周，始终满足成模标准，未见转复。
糖尿病组大鼠肾脏及肝脏肥大指数较对照组增加(P<0.01)。
糖尿病组大鼠较对照组相比血浆中脂质过氧化产物MDA 水平升高，而SOD 和NO 水平下降(P<0.01)。
结论本实验1型糖尿病模型大鼠造模成功且模型稳定，并出现了并发症发生的部分指标变化。
【关键词】 1型糖尿病;大鼠模型;血糖近年来，随着人们生活水平的提高，糖尿病的发病率呈逐年上升的趋势，心血管、肾脏、视网膜等并发症日趋严重。
1型糖尿病及其并发症的病因、发病机理尚未完全阐明，预防和治疗仍不完善，因此建立较理想的动物模型对研究该病的发病机制和治疗具有重要意义。
目前，国内外普遍使用链脲佐菌素(STZ)制备糖尿病动物模型，但成模时间从48 h 至2个月不等[1-4]，模型的稳定性也无权威报道。
本实验主要针对这一模型的制备方法进行探讨，并测定与糖尿病并发症的发生相关的部分指标。
1 材料与方法1.1 实验动物选择和喂养雄性Sprague-Dawley 大鼠，体重120～160g，清洁级，由宁夏医科大学实验动物中心提供。
饲养室内通风良好，室温18～25℃，相对湿度40%～70%，每日12 h光照维持，昼夜循环，饲养时间为9～11月份。
自由摄食、饮水。
1.2 主要试剂和设备 STZ(Sigma公司);微量血糖测定仪，美国强生稳豪(配套血糖试纸);MDA、SOD及NO测试盒均购自南京建成生物技术有限公司;其余试剂均为市售分析纯。
糖尿病对雄性大鼠血清中T、LH、FSH水平的影响
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第２卷 第３ ５ 期 ２０ 年 ６月 ８ ０
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医
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学
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关键词 ： 糖尿病 ； 睾酮 ； 性激素
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糖尿病大鼠指标
实验流程1、末次灌胃后，大鼠禁食不禁水12h，与麻醉前进行称重，行腹腔注射3%戊巴比妥钠，0.3ml/100g2、腹主动脉取血，留取全血标本。
3、取肝、脾、肾、胃、心脏及脑。
4、称肝、脾、肾、胃、心脏及脑组织，并分装各个组织，放入-80℃冻存。
其中肝组织剪取1g肝脏，送至肝均浆；肝10%甲醛固定做HE染色，每组5只；肝4%戊二醛固定做电镜，每组一只；5、小肠10%甲醛固定做HE染色，每组5只；小肠4%戊二醛固定做粪便电镜，每组1只；其余肠组织-80℃冻存。
6、肝；制成肝均浆，1g肝脏加入9ml冰生理盐水，制成肝均浆液，离心后，取上清液，于-80℃冻存。
7、全血标本静置30min后，进行离心，分离血清，血清和血浆均放入-80℃冻存。
检测指标：1、肝脏组织1.1HE染色观察肝脏组织的病理学改变。
1.2透射电镜观察肝脏超微结构变化1.3电感耦合等离子体质谱（ICP-MS）1.4试剂盒测肝均浆超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛（MDA）、谷胱甘肽过氧化酶（GSH-Px）、ROS活性氧水平1.5检测肝脏组织中Western blot、NF-kB、COX-2表达情况，计算其阳性表达率2、血清（血浆）2.1全自动化分析仪测谷草转氨酶（AST）、谷丙转氨酶（ALT）、谷氨转肽酶(GGT)、碱性磷酸酶TG2.2酶联免疫吸附法检测血浆中肠结合脂肪酸蛋白（FABp2）、D-乳酸（D-LA）及二胺氧化酶（DAO）水平评价大鼠大肠粘膜损伤2.3试剂盒测血浆超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛（MDA）、4-HNE（羟基壬烯醛）、谷胱甘肽过氧化酶（GSH-Px）、过氧化氢酶（CAT）评价大鼠氧化应激水平2.4酶联免疫吸附试验（ELISA）检测大鼠血浆中α肿瘤坏死因子（TNF α）、肿瘤坏死因子β（TNF-β）、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)、单核细胞趋化因子-1(MCP-1)、细胞间粘附因子-1(ICAM-1)浓度3、肠道菌群采用实时荧光定量PCR技术对粪便大肠杆菌、粪肠球菌、双歧杆菌和嗜酸乳杆菌、脆弱拟杆菌和柔嫩梭菌16SrDNA V3 可变区进行定量分析4肾脏组织4.1超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、还原型谷胱甘肽（ GSH）、过氧化氢酶（ CAT）及内皮素（ ET-1）和肿瘤坏死因子（ TNF-α）的影响。
实验三大鼠糖尿病模型的复制
3 载玻片和盖玻片的处理： （1）清洗：新载玻片上有油污，必须经过清洁液浸泡 12～24h，流水充分漂洗后用蒸馏水清洗5遍以上，浸泡 在95%酒精内2h，用绸布擦干或用红外线烤箱烤干均可， 贮放于玻片盒内备用。盖玻片很薄，以上处理程序必须 缩短，清洁液浸泡只需2h，流水冲洗注意勿损伤玻片等。 （2）载玻片上涂粘附剂：多聚赖氨酸液：多聚赖氨酸 0.1g，加蒸馏水10ml，混合后即可涂片。
冰冻切片前处理
1取材：组织标本主要取之于活组织检查标本、手术切除标 本、动物模型标本以及尸体解剖标本等。前三者均为新鲜组 织，后者是机体死亡2h以上的组织，可能有不同程度的自溶， 其抗原可能有变性消失，严重弥散现象，因此，尸检组织应 尽快固定处理， 2固定：为了更好的保持细胞和组织原有的形态结构，防止 组织自溶，有必要对细胞和组织进行固定。 固定液：4%多聚甲醛磷酸缓冲液pH7.4（多聚甲醛 40g,0.1mol/L PBS液pH7.4500ml，两者混合加热至60℃， 搅拌并滴加1n NaOH至清晰为止，冷却后加PBS液至总量 1000ml）。 方法：浸入法，将组织浸泡在固定液中
操作方法：
Ⅰ型糖尿病造模方法：
1. 链脲佐菌素(stz)建模，造模前的喂养 Ⅰ型糖尿病模型成模比较快，通常大鼠在普通饲 料适应性喂养2周后即可开始造模。禁食12小时以 上(一般过夜禁食，不禁水)。禁食的时间越长， STZ对胰岛β细胞的破坏力越明显，即药效越高。 所以相对禁食时间延长，可以降低STZ的用量。 2. 测正常大鼠血糖，给药，链脲菌素溶于枸缘酸缓 冲液或柠檬酸缓冲液（pH值为4.0－4.5）中， 70~65mg/kg给大鼠腹腔注射；35、45、55、 65mg/kg（0.35、0.45、0.55、0.65ml/100g）。
糖尿病模型大鼠造模成功标准
糖尿病模型大鼠造模成功标准糖尿病模型大鼠造模成功标准随着社会的发展和生活水平的提高，糖尿病已经成为全球性的慢性病，给社会和个人健康带来了巨大的负担。
糖尿病的发病机制非常复杂，对于糖尿病的研究与治疗一直是医学领域的热点。
在糖尿病研究中，大鼠是最常用的实验动物之一，建立糖尿病模型大鼠对于研究糖尿病的发病机制、药物的筛选以及新疗法的研发具有重要意义。
一、模型建立的基本原则在建立糖尿病模型大鼠时，首先需要明确模型建立的基本原则。
糖尿病模型大鼠的建立需要符合以下几个基本条件：一是模型的建立应当具有可重复性和稳定性；二是模型的建立需要尽量模拟人类糖尿病的特点，包括病因、发病机制、临床表现等；三是模型的建立需要简单易行，成本较低，操作方便等。
二、常用的糖尿病模型大鼠目前常用的糖尿病模型大鼠主要有遗传性糖尿病模型和实验性糖尿病模型。
遗传性糖尿病模型是通过选择性繁育产生的，包括Otsuka Long-Evans Tokushima Fatty（OLETF）大鼠和Spontaneously Diabetic Torii（SDT）大鼠等；实验性糖尿病模型则是通过给予大鼠化学物质或手术干预的方式来诱导糖尿病，包括链脲佐菌素（STZ）诱导大鼠糖尿病模型和高脂饮食诱导大鼠糖尿病模型等。
在选择模型时，需要根据研究的具体目的和需求来进行选择。
三、模型的评价指标成功建立糖尿病模型大鼠后，需要对模型进行全面的评价。
评价指标包括但不限于：血糖水平、胰岛功能、胰岛素敏感性、血脂代谢、病理形态学等。
其中，血糖水平是评价糖尿病模型大鼠最为重要的指标之一，正常参考值是4.4-6.1mmol/L。
对于实验性糖尿病模型大鼠，模型的建立需要证实是否符合模型诱导的特点及所用糖尿病模型的特点。
四、个人观点和总结研究糖尿病模型大鼠的建立标准和指标对于研究糖尿病的发病机制、药物研发以及新疗法的评价具有重要意义。
在评价模型成功与否时，需要深入了解模型建立的原则和具体指标，借助现代生物技术手段对模型进行全面评估。
糖尿病大鼠模型
Wistar大鼠I型糖尿病模型的建立
采用Wistar大鼠一次性腹腔注射50mg/kg STZ建立DM模型（成年雄性，50只，体重为180-220g，适应性喂养一周，适应阶段中精神状态不佳、过于凶猛、体重非稳步增长的动物舍弃。
STZ注射前需禁食12h，不禁水，并测血糖与体重。
空白对照组注射缓冲液。
），造模过程中观察大鼠行为，STZ注射48h后，连续
7天大鼠尾静脉取血测血糖，血糖含量>11.1mM的大鼠视为造模成功（空腹血糖）。
（注：STZ溶于pH4.5，浓度为1mM的枸橼酸三钠-枸橼酸缓冲液中，制成1%溶液，经0.22 μm滤器过滤除菌，低温避光保存。
空白对照组注射枸橼酸缓冲液。
）。
大鼠糖尿病空腹血糖标准
大鼠糖尿病空腹血糖标准
大鼠糖尿病的空腹血糖标准通常是指在实验室动物模型中用于诊断糖尿病的血糖水平。
根据研究和实验的不同，空腹血糖标准可能会有所不同，但一般来说，大鼠糖尿病的空腹血糖标准是在16-18小时禁食后测量的血糖水平。
根据美国糖尿病协会的建议，大鼠的空腹血糖水平在126毫克/分升（mg/dL）以上被认为是糖尿病的诊断标准。
然而，这个标准可能因实验条件、动物品系和研究目的而有所不同。
除了空腹血糖水平外，研究人员还可能会考虑大鼠的餐后血糖水平、胰岛素敏感性、胰岛素抵抗等因素来评估糖尿病模型的严重程度。
这些因素可以提供更全面的评估，帮助研究人员更好地了解大鼠糖尿病模型的特点。
总的来说，大鼠糖尿病的空腹血糖标准是一个重要的指标，但在实验设计和结果解释时，还需要综合考虑其他因素，以确保对糖尿病模型的全面评估。
实验大鼠血糖正常范围的估算
实验大鼠血糖正常范围的估算
血糖被认为是一种营养，它与动物内环境中和整体健康状态有关。
因此，了解小鼠血糖正常范围的研究对预防疾病和改善健康非常重要。
小鼠血糖正常范围受许多因素的影响，包括年龄、性别、营养状
况和有无保健药物的摄入。
一般而言，小鼠的血糖水平应在4.4～
7.8mmol/L之间，高于7.8mmol/L时则被认为是血糖过高，而低于
4.4mmol/L的则被认为血糖过低。
此外，血糖正常范围也会随着小鼠的情绪和健康状况而发生变化。
此外，实际血糖水平也会受到实验条件影响。
为了保证血糖检测
准确性，工作人员应定期训练小鼠来控制血糖，检查供试生物的身心
健康状况，并确保实验设施条件良好。
此外，正确使用细胞内分析仪、灵敏血糖仪等仪器设备也是血糖
检测精确性的关键。
未经实验室验证的血糖检测仪器在结果可靠性方
面很可能出现偏差，因此有责任心的研究人员应定期校验仪器，以确
保可靠测量数据。
综上所述，为了确定小鼠血糖正常范围，应该充分考虑小鼠的体质、环境因素、实验条件以及正确使用仪器等因素。
此外，应定期检
查小鼠的健康状况，以便尽早发现血糖异常的症状，并及时采取相应
的措施。
大鼠血糖实验汇总
20 21 22 23 24 14.0 20.4 20.6 21.1 12.0
其中1、17、18、20以及24号大鼠血 糖浓度远不及16.7mmol/l,造模失败； 而10、14、及16号大鼠血糖浓度接近 16.7mmol/l，决定两天后在测一次血 糖，其血糖检测结果分别为：
10号：HIGH； 14号：23.2mmol/l 16号：24.4mmol/l 提示造模成功
0.190
0.188
糖尿病饥饿大 鼠
9.150
7.693
0.476
0.318
t=0.713<t0.05/2 10=2.228,p>0.05;按照a=0.05的
水准，认为这两项不存在明显 的差别。
t=1.202<t0.05/2 10=2.88,p>0.05; 按照a=0.05的水准，认为这两 项不存在明显的差别。
启示：理论上正常饥饿大鼠的血糖能从肝糖原转化得到补充而不会太低， 但为什么正常饥饿大鼠与糖尿病饥饿大鼠的血糖不存在差别呢？
碘液反 应鉴定 结果
实验的启示：
糖尿病人的饮食治疗原则： 1、适度进食，防止血糖过高。 2、减短两餐进餐时间，防止出现血糖过低的情况。 3、睡前要适当添加一次小吃，减低夜间低血糖的出现的风险。
2
3
组
正常
饥饿 4
5
6
组
糖尿
病饱 2
3
5
6
7
8
16
食组
糖尿
病饥 9 饿组
10 11 12 13 14 15 19 21 22 23
实验结果分析：1、正常饱食大鼠血糖与正常饥饿大鼠血糖值 的无明显差别；肝糖原的含量也无明显差别。
血糖均值
大鼠 糖化血红蛋白 计算
大鼠糖化血红蛋白计算
大鼠糖化血红蛋白（Glycated Hemoglobin，HbA1c）的计算通常与人类的计算方法类似，因为HbA1c是糖尿病患者血糖控制的一个常规指标。
HbA1c反映了过去2-3个月内平均血糖水平。
在大鼠中，计算HbA1c的方法如下：
HbA1c (%)=（测定值−38.72）/1.5819
其中，"测定值" 是测得的大鼠糖化血红蛋白的百分比。
请注意，这个公式可能根据实验室、研究方法或仪器而有所不同。
因此，在进行研究或实验时，最好使用相关实验室或文献提供的具体计算方法。
同时，与医学或生物医学研究相关的实验应该受到伦理审查的监管，并遵循相关的动物实验伦理规范。
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实验流程
1、末次灌胃后，大鼠禁食不禁水12h，与麻醉前进行称重，行腹腔注射3%戊巴
比妥钠，0.3ml/100g
2、腹主动脉取血，留取全血标本。
3、取肝、脾、肾、胃、心脏及脑。
4、称肝、脾、肾、胃、心脏及脑组织，并分装各个组织，放入-80℃冻存。
其中
肝组织剪取1g肝脏，送至肝均浆；肝10%甲醛固定做HE染色，每组5只；
肝4%戊二醛固定做电镜，每组一只；
5、小肠10%甲醛固定做HE染色，每组5只；小肠4%戊二醛固定做粪便电镜，每
组1只；其余肠组织-80℃冻存。
6、肝；制成肝均浆，1g肝脏加入9ml冰生理盐水，制成肝均浆液，离心后，取
上清液，于-80℃冻存。
7、全血标本静置30min后，进行离心，分离血清，血清和血浆均放入-80℃冻存。
检测指标：
1、肝脏组织
1.1HE染色观察肝脏组织的病理学改变。
1.2透射电镜观察肝脏超微结构变化
1.3电感耦合等离子体质谱（ICP-MS）
1.4试剂盒测肝均浆超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛（MDA）、谷胱甘肽过氧化酶
（GSH-Px）、ROS活性氧水平
1.5检测肝脏组织中Western blot、NF-kB、COX-2表达情况，计算其阳性表达
率
2、血清（血浆）
2.1全自动化分析仪测谷草转氨酶（AST）、谷丙转氨酶（ALT）、谷氨转肽酶(GGT)、碱性磷酸酶TG
2.2酶联免疫吸附法检测血浆中肠结合脂肪酸蛋白（FABp2）、D-乳酸（D-LA）及二胺氧化酶（DAO）水平评价大鼠大肠粘膜损伤
2.3试剂盒测血浆超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛（MDA）、4-HNE（羟基壬烯醛）、
谷胱甘肽过氧化酶（GSH-Px）、过氧化氢酶（CAT）评价大鼠氧化应激水平
2.4酶联免疫吸附试验（ELISA）检测大鼠血浆中α肿瘤坏死因子（TNF α）、肿瘤坏死因子β（TNF-β）、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)、单核细胞趋化因子-1(MCP-1)、细胞间粘附因子-1(ICAM-1)浓度
3、肠道菌群
采用实时荧光定量PCR技术对粪便大肠杆菌、粪肠球菌、双歧杆菌和嗜酸乳杆菌、脆弱拟杆菌和柔嫩梭菌16SrDNA V3 可变区进行定量分析
4肾脏组织
4.1超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、还原型谷胱甘肽（ GSH）、过氧化氢酶（ CAT）及内皮素（ ET-1）和肿瘤坏死因子（ TNF-α）的影响。