DNA的提取与鉴定
dna提取与鉴定实验报告
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dna提取与鉴定实验报告《DNA提取与鉴定实验报告》DNA提取与鉴定是一项重要的实验技术,它在生物学、医学、犯罪学等领域都有着广泛的应用。
本实验报告将介绍DNA提取与鉴定的实验过程以及结果分析。
首先,我们需要准备实验所需的样本。
在本次实验中,我们选择了番茄作为实验样本。
番茄的细胞中含有丰富的DNA,是进行DNA提取的理想材料。
我们先将番茄样本切碎并加入提取液中,通过离心等步骤将DNA从细胞中分离出来。
经过提取过程,我们成功地获得了番茄DNA的提取物。
接下来,我们对提取得到的DNA进行鉴定。
通过PCR扩增和电泳分析,我们成功地对番茄DNA进行了鉴定。
PCR扩增是一种常用的DNA复制技术,它可以将DNA扩增成大量的复制物,从而方便后续的分析。
电泳分析则是通过电场作用将DNA分子按大小进行分离,从而得到DNA的特征条带。
通过PCR扩增和电泳分析,我们确认了提取得到的DNA样本的纯度和完整性。
最后,我们对实验结果进行了分析。
通过实验,我们成功地提取并鉴定了番茄DNA,证明了提取与鉴定实验的可行性。
这项实验为我们提供了一个重要的技术平台,可以在日后的研究中应用到DNA提取与鉴定的相关领域,为生物学、医学和犯罪学等领域的研究工作提供了重要的技术支持。
总的来说,DNA提取与鉴定实验是一项重要的实验技术,它在生物学、医学、犯罪学等领域都有着广泛的应用前景。
通过本次实验,我们对DNA提取与鉴定的实验过程有了更深入的了解,为今后的研究工作提供了重要的技术支持。
希望通过我们的努力,可以为相关领域的研究工作做出更大的贡献。
dna粗提取与鉴定实验知识点
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dna粗提取与鉴定实验知识点一、实验原理。
1. DNA的溶解性。
- DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同。
在0.14mol/L的NaCl溶液中溶解度最低,在此浓度下,DNA的钠盐形式会从溶液中析出;而在2mol/L的NaCl溶液中,DNA的溶解度较高。
- DNA不溶于酒精溶液,但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精。
利用这一原理,可以将DNA与蛋白质进一步分离。
2. DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性。
- 蛋白酶能水解蛋白质,但对DNA没有影响。
- 大多数蛋白质不能忍受60 - 80℃的高温,而DNA在80℃以上才会变性。
- 洗涤剂能够瓦解细胞膜,但对DNA无影响。
3. DNA的鉴定原理。
- 在沸水浴的条件下,DNA遇二苯胺会被染成蓝色。
二、实验材料的选取。
1. 选用鸡血细胞作为实验材料的原因。
- 鸡血细胞中红细胞有细胞核,含有丰富的DNA,而植物细胞需要研磨等复杂操作才能释放出DNA。
- 鸟类的血红细胞有细胞核,而哺乳动物成熟的红细胞没有细胞核,不能用于提取DNA。
三、实验步骤及注意事项。
1. 实验步骤。
- 制备鸡血细胞液:取鸡血细胞液(加柠檬酸钠抗凝),离心或静置后取下层血细胞。
- 提取细胞核物质:将血细胞放入蒸馏水中,细胞吸水涨破,释放出核物质(包括DNA和蛋白质等),然后用纱布过滤,取滤液。
- 溶解DNA:在滤液中加入2mol/L的NaCl溶液,使DNA溶解。
- 析出含DNA的黏稠物:向上述溶液中缓慢加入蒸馏水,使NaCl溶液浓度降低至0.14mol/L,此时DNA的溶解度最低,会析出,过滤后取黏稠物。
- 将DNA的黏稠物再溶解:将黏稠物放入2mol/L的NaCl溶液中,使DNA再次溶解。
- 过滤含DNA的NaCl溶液:用纱布过滤,除去不溶的杂质。
- 提取较纯净的DNA:向滤液中加入冷却的酒精溶液(体积分数为95%),DNA不溶于酒精,会析出白色丝状物,这就是较纯净的DNA,用玻璃棒搅拌后可以卷起。
DNA的粗提取与鉴定
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DNA 的粗提取与鉴定
一、实验原理:
1、析出DNA 的原理:DNA 在NaCL 溶液中的溶解度是随着NaCL 浓度的变化而变化的,当NaCL 的物质的量浓度为0.14mol/L 时,DNA 的溶解度最低,高于或低于这一浓度溶解度都会增高。
如图:
2、提纯DNA 的原理:
DNA 不溶于冷酒精,而细胞中某些物质可溶于冷酒精。
3、鉴定原理:DNA 遇二苯胺(沸水浴)会染成蓝色。
二、方法步骤:
材料准备:常用鸡血细胞液
柠檬酸钠(抗凝剂)+鸡血−−−→静置或离心
血浆(弃去)+鸡血细胞液。
如图:
说明:①柠檬酸钠防止血液凝固。
②弃去上清液,是因为DNA 存在于血细胞中,血浆很少(没有)。
③用鸟类血细胞是因为鸟类成熟红细胞含DNA ,而哺乳动物成熟红细胞不含DNA ,所以不能用。
④本实验还可以用菜花或动物肝脏等作实验材料。
第一次在2中,使DNA与蛋白质分离
①两次加入高浓度NaCL
第二次在5中,DNA再溶解
第一次在1中,使细胞吸水涨破
②两次加入蒸馏水
第二次在3中,降低DNA的溶解度
第一次在1中,取滤液(含核物质)
③三次过滤第二次在4中,取黏稠物质
第三次在6中,取滤液
说明:在第一、三次取滤液时,纱布1—2层,第二次取黏稠物时纱布应多层。
④5次搅拌均要求超一个方向,轻缓,防止DNA断裂。
(二
璃制品表面带电荷,DNA中的磷酸基带相反的电荷,会被吸附于玻璃表面,减少DNA。
分子生物学实验:DNA提取与鉴定生物教案
![分子生物学实验:DNA提取与鉴定生物教案](https://img.taocdn.com/s3/m/5fe3fd90b8f3f90f76c66137ee06eff9aff84979.png)
分子生物学实验:DNA提取与鉴定生物教案提取与鉴定生物教案一、教学目标:1.了解DNA分子的结构和基本特征。
2.理解DNA提取和测序的原理。
3.掌握实验操作技能,能够成功提取DNA并进行测序。
4.了解DNA在生物学研究中的重要性和应用价值。
二、教学内容:1.DNA的结构和基本特征DNA是一个双螺旋结构,由磷酸、脱氧核糖和碱基组成。
DNA分子的两个螺旋互相螺旋在一起,由氢键连接。
DNA分子的碱基有四种:腺嘌呤、胸腺嘧啶、鸟嘌呤和胞嘧啶。
两个互补的碱基可以通过氢键进行配对,形成碱基对,例如腺嘌呤和胸腺嘧啶配对,鸟嘌呤和胞嘧啶配对。
2.DNA提取和测序的原理DNA提取是从生物样品中提取DNA分子的过程。
一般来说,DNA提取需要先破坏细胞膜和核壁,释放出DNA分子,然后通过离心、酶解和纯化等步骤将DNA分离并提取出来。
DNA测序是对DNA分子的核苷酸序列进行测定的过程。
DNA测序是通过识别DNA分子不同碱基的序列来实现的。
目前常见的DNA测序方法有Sanger测序和高通量测序两种。
3.实验操作技能DNA提取实验的操作技能包括实验前的准备工作、标本的采集、样品的处理、DNA的纯化和保存等步骤。
具体的实验步骤包括:(1)样品的切割、切碎和研磨。
(2)样品的裂解和蛋白质分离。
(3)DNA的纯化。
(4)鉴定DNA的纯度和浓度。
(5)冷冻和保存DNA样品。
DNA测序实验的操作技能包括:(1)DNA准备。
(2)参比序列的准备。
(3)PCR扩增。
(4)测序反应。
(5)序列分析和组装。
4.DNA在生物学研究中的重要性和应用价值DNA是生物学研究中不可或缺的分子,在生物学、医学、农业、环境学等多个领域都有广泛的应用。
例如:(1)通过DNA测序,可以对人类基因组或其他物种的基因组进行研究,了解基因功能和基因变异等信息。
(2)DNA检测可以用于鉴定生物学样品的物种、性别和亲缘关系。
(3)DNA诊断可以用于疾病的诊断和治疗。
(4)DNA疫苗可以用于预防疾病。
dna粗提取和鉴定的原理
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dna粗提取和鉴定的原理
DNA粗提取和鉴定主要是通过以下原理进行的:
1. 粗提取:DNA粗提取是将DNA从生物样本(如血液、唾液、组织等)中分离出来的过程。
最常用的方法是细胞裂解,以释放DNA。
细胞裂解可以通过物理方法(如机械切割、超声波
处理)或化学方法(如蛋白酶消化、洗涤剂裂解)来实现。
裂解后,可进行离心等步骤以去除细胞残渣和其他杂质,得到含有DNA的提取液。
2. 鉴定:DNA鉴定是通过比较DNA序列的相似性或特征来确定个体的身份、亲缘关系等。
主要有以下鉴定方法:
- 聚合酶链式反应(PCR):PCR是通过复制特定DNA片段的方法,使得起始数量较少的DNA可以被扩增到足够数量以
进行分析。
PCR需要通过引物选择性扩增特定的DNA序列,
然后通过酶切、电泳等技术进行分析。
- DNA测序:DNA测序是确定DNA序列的方法。
常用的测
序技术有Sanger测序和下一代测序(如Illumina、Ion Torrent 等)。
测序后得到DNA的碱基序列,可以与数据库中的已知
序列进行比对,从而确定DNA的来源、身份等信息。
- DNA指纹技术:DNA指纹技术是根据DNA上的多态性位
点进行鉴定。
常用的方法是通过PCR扩增多个DNA位点,然后通过电泳等技术进行分析。
与其他个体相比较,每个个体的DNA指纹是独特的,可以用于身份鉴定、亲缘关系判定等。
这些原理在DNA粗提取和鉴定过程中相互作用,可以帮助科学家从生物样本中提取和鉴定DNA,为研究、法医学和医学诊断等领域提供有力的技术支持。
DNA的提取和鉴定
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• 2 破碎细胞,获取含DNA的滤液
• 若选用鸡血和洋葱作实验材料,则怎样获 取含DNA的滤液?
在鸡血细胞液中加入一定量蒸馏水并用玻棒搅 拌,过滤后收集滤液;切碎洋葱,加入一定量 洗涤剂和食盐,搅拌研磨,过滤后收集滤液。
• 在以上实验中,加入蒸馏水、洗涤剂和食 盐的作用分别是什么?过滤时应当选用( 滤纸、尼龙布)。
Thanks
• 3 去除滤液中的杂质
• 最初获得的DNA滤液含有蛋白质、脂质等 杂质,需要进一步提纯DNA。阅读教材提 供的三种方法,分析其中的原理。
• 方案一的原理是DNA在不同浓度NaCl溶液 中溶解度不同;
• 方案二的原理是蛋白酶分解蛋白质,不分 解DNA;
• 方案三的原理是蛋白质和DNA的变性温度 不同。
• ↓→除去细胞质中的大部分物质。
• DNA初步纯化………… 与等体积95%冷却 酒精混合,析出白色丝状物
• ↓→除去核蛋白、RNA、多糖等。
• DNA鉴定……………… 二苯胺,沸水浴, 呈现蓝色
• 其它注意事项:
• 在鸡血中加入柠檬酸钠防止凝固;鸡血静 置或离心以提高细胞悬液浓度;使用塑料 烧杯;使用尼龙布过滤;玻棒沿同一方向 搅拌;玻棒搅拌要缓慢(细胞破裂快速搅 拌);玻棒不要碰到烧杯壁;二苯胺试剂 要现用现配等。为了提高DNA纯度,在科 学实验中通常使用的洗涤剂有十六烷基三 甲基溴化铵(CTAB)、十二烷基硫酸钠( SDS)。
• 3.实验操作 • 制备鸡血液…………加柠檬酸钠,静置或
离心
•↓ • 破碎细胞,释放DNA… 加蒸馏水,同一方
向快速通方向搅拌
• ↓→过滤,除去细胞壁、细胞膜等。 • 溶解核内DNA………… 加入NaCl至2mol/L
dna的粗提取与鉴定
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dna的粗提取与鉴定DNA的粗提取与鉴定一、粗提取粗提取的方法是通过物理和化学方法从一个或多个生物样品中提取DNA样品,通常是为了进行DNA分子生物学分析、基因组学以及其他科学研究。
1. 用拆解液拆解细胞使用拆解液拆解细胞是最常用的粗提取DNA技术。
主要使用的拆解液有Tris-EDTA(TE buffer)、Cetyltrimethyl ammonium bromide (CTAB)、Sarkosyl(SDS)和NaOH溶液等。
各种拆解液的比例和温度可以根据每个实验的要求进行调整。
2. 用磁珠或磁性分选器抽提也可以使用磁珠或磁性分选器来抽提DNA样品。
这种方法可以从多种生物样品中提取DNA,如血清、血浆、细胞粗提物以及血液细胞等。
磁珠抽提的原理是利用磁性珠子来吸附DNA样品,而磁性分选器则是利用磁场将DNA分离出来。
磁珠抽提的优点是简单快捷,缺点是提取的DNA质量不够高。
3. 改良的拆解方式一些改良的拆解方式可以用来考察某一特定细胞类型。
这些方法包括冷冻破碎、湿热破裂、极限温度破裂和化学破裂等。
这些技术可以有效地提高蛋白质和DNA的提取效率,但缺点是需要较高的技术要求,而且操作步骤较多,比较耗时。
二、DNA的鉴定DNA的鉴定是指用特定的方法和技术,明确某个DNA样品的鉴定。
常见的DNA鉴定技术有定性分析、定量分析和活性检测等。
1. 定性分析定性分析是指对DNA样品进行定性鉴定,识别出它们是哪种DNA,以确定其基本性质。
常用的定性分析方法有紫外光检测和酶切检测等。
紫外光检测是将DNA浓度调整至1μg/ml,然后放置在紫外光228纳米的紫外灯管(UV lamp)下,通过分析紫外光吸收光谱来鉴定DNA 样品。
酶切检测是将DNA样品与特定的酶进行反应,用来分析DNA的特征。
常用的酶有限制性内切酶(restriction enzymes),例如EcoRI、BamHI、PstI和HindIII等。
2. 定量分析定量分析是指对某一DNA样品的浓度和数量进行测量,以了解其容量。
人教版高中生物选择性必修第3册 DNA的提取和鉴定
![人教版高中生物选择性必修第3册 DNA的提取和鉴定](https://img.taocdn.com/s3/m/a9db35a4c9d376eeaeaad1f34693daef5ff71319.png)
为2 mL的4种不同溶液中,经搅拌后过滤,获得4种滤液,含DNA最少的是滤液 (填
表中字母)。
• 洗涤剂——离子去污剂,能溶解细胞膜,利于DNA释放 • 食 盐——NaCl,利于DNA的溶解于研磨液中 • 研磨不充分——使细胞核内的DNA释放不完全,提取的DNA量变少
破碎鸡血细胞,获取细胞核物质
【思考】:获取含细胞核的滤液中的可能有哪些细胞成分? 可能有DNA、核蛋白、多糖、脂质和RNA等杂质。
过滤
溶解 滤液中
不溶解 滤渣中
去除杂质,将 DNA 与 其 他 大
滤 液 中 加 入 95% 冷 却 酒精
DNA不溶于酒精,某些蛋 白质杂质可溶
分子分离
玻璃棒卷起丝状物
DNA析出
溶液中
DNA的鉴定
A:2mol/L的NaCl+提取 •DNA 溶 解 于 2mol/L 的
丝状物+二苯胺
NaCl中
B:2mol/L的NaCl+二苯 •沸水浴中,DNA遇二苯
【例1】 下列有关“DNA的粗提取与鉴定”实验相关操作中所 选取的试剂,错误的是( B )
【例2】下图为“DNA的粗提取与鉴定”的实验装置,请回答 下列相关的问题:
(1)实验材料选用鸡血细胞液,而不用鸡全血,主要原因是鸡 血细胞液中有较高含量的_D_N__A____。 (2)在图A所示的实验步骤中加蒸馏水的目的是使血细胞吸水涨破, 通过图B所示的步骤取得滤液,再在滤液中加入质量浓度为2 mol/L的NaCl溶液的目的是__使__滤__液__中_的__D_N__A_溶__于_N__a_C_l溶__液___。 (3)图C所示实验步骤中加蒸馏水的目的__使__D_N__A_析__出________。
胺
DNA的粗提取与鉴定
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DNA的粗提取与鉴定(一)实验原理鸟类血液中红细胞有细胞核,细胞核内DNA与蛋白质结合成染色质。
利用DNA在0.14mol/L的氯化钠溶液中溶解度最低,而蛋白质此时的溶解度高的特点,可以使DNA与蛋白质分离,形成沉淀析出,通过过滤,得到粗提取的滤出物DNA。
再利用DNA不溶于酒精,但细胞中的其他物质可溶于酒精的特点,进一步提取出含杂质较少的DNA。
利用DNA遇二苯胺(沸水浴)成蓝色的特性,可以鉴定提取的DNA。
(二)实验材料(以鸡血为例)鸡血细胞液:先配备10%的柠檬酸钠溶液,按180mL新鲜鸡血混合100mL10%柠檬酸钠溶液的比例,立即将血液与柠檬酸钠充分混合,同时用玻璃棒搅拌以免凝血。
然后,用离心机以2000转/min的速度离心4min后,用吸管除去离心管上清液,就可获得所需的鸡血细胞悬液。
每组大约需要5—10mL鸡血细胞悬液。
如果无离心机,可将与柠檬酸钠充分混合的血液置于冰箱内,静置一天,使血细胞自行沉淀后,也可获得所需的鸡血细胞悬液。
(三)试剂与仪器1、2mol/L的NaCl溶液称取117g的NaCl,加蒸馏水至1000mL,使之完全溶解,即可获得2mol/L 的NaCl,须按此配方配备大量的2mol/L 的NaCl。
2、二苯胺试剂A液——1.5g二苯胺溶于100mL冰醋酸中,再加1.5mL浓硫酸,用棕色瓶保存。
B液——体积分数为0.2%的乙醛溶液。
实验前,将0.1mL的B液加入到10mL的A液中,现配现用。
3、0.015mol/L的NaCl溶液称取0.88g氯化钠加蒸馏水至1000mL,使之完全溶解。
4、塑料杯和试管DNA易吸附在玻璃器皿上,用塑料杯和试管可减少提取过程中DNA的损失。
(四)实验方法与步骤1、提取细胞核物质取5—10mL鸡血细胞悬液入烧杯中,加蒸馏水20mL,同时,用玻璃棒沿一个方向快速充分搅拌,使血细胞过度吸水破裂,细胞核内物质释放出来,然后用纱布过滤取其滤液。
2、溶解核内的DNA在滤液中加入2mol/L的NaCl40mL,并用玻璃棒沿一个方向搅拌1min,核中DNA游离并充分溶解,染色质中的DNA和蛋白质分离。
dna粗提取与鉴定
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dna粗提取与鉴定DNA粗提取与鉴定DNA是生命的基础,它携带了生物体的遗传信息。
在现代分子生物学中,DNA的提取和鉴定是非常重要的技术。
本文将介绍DNA粗提取和鉴定的方法。
一、DNA粗提取1.1 细胞破碎法细胞破碎法是一种常见的DNA粗提取方法。
它通过机械或化学手段破坏细胞膜和核膜,释放出细胞内的DNA。
机械方法包括高压均质和超声波破碎等,化学方法包括SDS、NaOH等。
这些方法都可以有效地破坏细胞结构,但同时也会对DNA造成一定程度的损伤。
1.2 酚/氯仿法酚/氯仿法是一种经典的DNA粗提取方法,它利用酚对蛋白质和核酸有不同的溶解度来分离DNA。
首先用盐水或缓冲液洗涤样品,然后加入酚/氯仿混合液,在离心后上层为水相(含RNA)、中间为界面层(含蛋白质)和下层为有机相(含DNA)。
通过抽取下层的有机相,可以得到粗提的DNA。
1.3 硅胶柱法硅胶柱法是一种高效的DNA粗提取方法,它基于DNA和硅胶之间的亲和力。
首先将样品加入硅胶柱中,然后用盐水或缓冲液洗涤硅胶柱,最后用低盐缓冲液洗脱DNA。
这种方法可以得到较纯的DNA,并且适用于大量样品处理。
二、DNA鉴定2.1 凝胶电泳凝胶电泳是一种常见的DNA鉴定方法,它利用电场将带电的DNA分子移动到凝胶上。
根据不同长度的DNA片段在凝胶中行进速度不同来分离不同大小的DNA片段。
通过比较样品中不同长度的DNA条带,可以确定样品中是否存在目标序列。
2.2 PCR扩增PCR扩增是一种高效、敏感、特异性强的鉴定方法。
它通过引物特异性识别目标序列,在体外进行大量扩增。
PCR扩增可以检测极少量的目标序列,并且能够对复杂混合物进行分析。
2.3 DNA测序DNA测序是一种直接读取DNA序列的方法。
它通过将PCR扩增的目标片段或提取的DNA样品,进行测序仪读取,得到目标序列的具体信息。
这种方法可以检测出极少量的变异或突变,并且可以对整个基因组进行分析。
三、总结DNA粗提取和鉴定是现代分子生物学中非常重要的技术。
DNA的提取及性质鉴定
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能溶解细胞膜,有利于DNA的释放;
3、将混合液用两层纱布过滤或离心,向滤液 中加入预冷的10ml乙醇溶液,静置,可产生絮 状的DNA。
DNA析出,除去溶于酒精的蛋白质
4、将DNA溶于2mol/LNaCl中,轻轻搅拌使其 溶解。加入等体积二苯胺试剂,振荡均匀,将 试管放入沸水中水浴4~5min,观察颜色的变化。
(2)溶解DNA:取鱼白匀浆液3ml于100ml烧杯中,取10ml的 2mol/LNaCl加入烧杯中,用玻璃棒单向搅拌成溶胶状。 (3)析出DNA粘稠物:取50mL以上的蒸馏水沿杯壁慢慢注入 烧杯中,同时用玻棒单向搅拌,使冻状粘稠物缠在玻棒上。 (4)DNA再溶解:倒掉上清液,把粘稠物放入,10ml 2mol/ LNaCl注入烧杯中,用玻棒充分搅拌,使粘稠物尽量溶解,
易溶解。因此,用0.14mol/LNaCl溶液可简单地
初步分开DNP和RNP。
• 2、 从DNP中把蛋白质去除 • 在分离核酸中最困难的是将核酸与紧密结合的蛋白质分开, 而且还要避免核酸的降解。常用的解离剂是阴离子去垢剂, 如脱氧胆酸钠,十二烷基硫酸钠(SDS),4—氨基水杨酸钠和 萘—1,5—二磺酸钠等,它们具有溶解病毒、细菌的作用, 可使核酸从蛋白质上游离出来,还具有抑制核糖核酸酶的作 用。 • 另外除去核酸中的蛋白质的一个有效办法是用酚—氯仿混合 液,它们可使蛋白质变性并对核糖核酸酶有抑制作用,另外 氯仿比重大可使有机相和水相完全分开,减少残留在水相中 的酚。在用酚—氯仿抽提核酸提取液时,还需要剧烈振摇, 为防止起泡和促使水相与有机相的分离,在酚—氯仿抽提液 中再加上一定量的异戊醇。
关于DNA的鉴定
1、电泳鉴定
2、二苯胺鉴定 3、甲基绿鉴定:取少许丝状物,置玻片中
央,加1滴甲基绿溶液,丝状物变成绿色。
DNA的提取及鉴定
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六、实验操作
1)粗提 1.称取猪肝 8g于100ml的小烧杯中,用剪刀剪碎,加 入2倍重的0.1mol/LNaCl-0.05mol/L 柠檬酸钠缓冲液 (16ml),高速匀浆。
2.将匀浆液( ~25ml)转移到 100ml 离心管中,在 4000r/min下离心10min,弃去上清液。沉淀中继续加 入25ml缓冲液,搅拌均匀后于 4000r/min离心20min, 取沉淀。
2)分离DNP、除蛋白 3.将上述沉淀转移至 250ml烧杯中,加入 40ml0.1mol/LNaCl-0.05mol/L 柠檬酸钠缓冲液、 21ml氯 仿/异戊醇、4ml5%SDS,用保鲜膜封口,振摇 30min。
4.缓慢加入 3.6gNaCl (事先在研钵中研成粉末)使体 系终浓度为1mol/L。将混合液转移至离心管中于 3500r/min离心20min,取上清水相(用滴管吸取并量 体积)。
DNA鉴定或定量(二苯胺法): 颜色反应可先完成标准曲线的制作,
或配置一个标准管。
(二)二苯胺法测定DNA含量
二、原理 核酸含量的测定方法包括紫外吸收法、定磷法和
分别针对DNA和RNA的颜色反应方法
本实验采用针对DNA的二苯胺法测DNA的含量。在 酸性溶液中,DNA与二苯胺共热生成蓝色化合物,该 物质在595nm有最大吸收,在40~400mg/mL范围内其 峰值与DNA含量成正比
DNA的提取及鉴定
一、动物肝脏中DNA的提取
一 . 实验目的
学习和掌握用浓盐法从动物组织中提取 DNA的原理和技术
了解分离提取DNA的一般原理
DNA的主要来源
1.动物组织及器官:脾、肝胚芽等 3.微生物:细菌、酵母菌等
核酸和蛋白质在生物体中以核蛋白的形 式存在,其中DNA主要存在于细胞核中,RNA 主要存在于核仁及细胞质中。
真核细胞基因组DNA的提取与鉴定
![真核细胞基因组DNA的提取与鉴定](https://img.taocdn.com/s3/m/c211bbaed1f34693dbef3e06.png)
真核细胞基因组DNA的提取与鉴定一、目的要求掌握真核细胞基因组DNA的提取方法,掌握紫外分光光度法测定DNA含量的方法和DNA电泳方法。
重点实践植物 DNA 的抽提,掌握 CTAB 法快速抽提白三叶草 DNA 。
二、基本原理植物DNA的抽提常采用两种方法:(1)SDS 法:离子去污剂,过程长,纯度高;(2)CTAB 法:该方法简便、快速,DNA产量高(纯度稍次,适用于一般分子生物学操作) 。
CTAB是一种非离子去污剂,植物材料在CTAB的处理下,结合65℃水浴使细胞裂解、蛋白质变性、DNA被释放出来。
CTAB与核酸形成复合物,此复合物在高盐(>0.7mM )浓度下可溶,并稳定存在,但在低盐浓度(0.1-0.5mM NaCl )下CTAB-核酸复合物就因溶解度降低而沉淀,而大部分的蛋白质及多糖等仍溶解于溶液中。
经离心弃上清后,CTAB-核酸复合物再用70-75%酒精浸泡可洗脱掉CTAB。
再经过氯仿/ 异戊醇(24:1) 抽提去除蛋白质、多糖、色素等来纯化DNA,最后经异丙醇或乙醇等DNA沉淀剂将DNA 沉淀分离出来。
现生物试剂公司多依据此原理,经过改造,以吸附膜吸附DNA,除去杂质,从而减少了使用有害药品氯仿抽提的步骤。
琼脂糖凝胶电泳是分离、鉴定和纯化DNA片段的标准方法之一。
琼脂糖是从海藻中提取出来的一种线状高聚物,将其熔化在所需缓冲液中使成清澈、透明的溶液,然后倒入胶模令其固化。
不同浓度的琼脂糖形成的固体基质具有不同的密度(或孔隙度),因此适宜分离不同大小的DNA片段。
在电场中,DNA分子主要因其分子大小不同而被分离。
三、实验步骤(具体见试剂盒操作说明)植物基因组DNA的提取(参考步骤)1.采集适量幼嫩叶片,用液N2 研成粉末,0.4 g 装入1.5ml 离心管中(-20 ℃预冷)。
2.预热 1.5 ×CTAB 到95 ℃,加1ml 到装有叶片粉末的离心管中,混匀(防止冻融)。
《DNA 的粗提取及鉴定》 讲义
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《DNA 的粗提取及鉴定》讲义一、DNA 粗提取及鉴定的原理1、 DNA 在不同浓度氯化钠溶液中的溶解度不同在 014mol/L 的氯化钠溶液中,DNA 的溶解度最小;随着氯化钠溶液浓度的升高,DNA 的溶解度逐渐增大。
利用这一原理,可以将 DNA 与其他杂质分离。
2、 DNA 不溶于酒精溶液但细胞中的某些蛋白质则溶于酒精溶液。
利用这一特点,可以进一步提纯 DNA。
3、 DNA 遇二苯胺试剂会呈现蓝色这是鉴定 DNA 的常用方法。
二、实验材料的选择1、材料选取的原则应选取 DNA 含量相对较高的生物组织,以保证实验能够提取到足够量的 DNA。
同时,材料应新鲜,以避免 DNA 降解。
2、常见的实验材料鸡血细胞是进行本实验的常用材料之一。
鸡血细胞中 DNA 含量丰富,且取材方便。
三、实验步骤1、制备鸡血细胞液将新鲜的鸡血加入柠檬酸钠溶液中,防止血液凝固。
然后离心或静置,使血细胞沉淀,去除上清液,留下鸡血细胞液。
2、破碎细胞,释放 DNA向鸡血细胞液中加入蒸馏水,使细胞吸水涨破,释放出细胞内的物质,包括 DNA。
3、去除杂质(1)过滤:用纱布过滤,去除较大的杂质。
(2)溶解:向滤液中加入 2mol/L 的氯化钠溶液,使 DNA 充分溶解。
(3)析出:缓慢加入蒸馏水,使氯化钠溶液浓度降低至014mol/L,此时 DNA 溶解度最小,析出白色丝状物。
(4)过滤:用多层纱布过滤,收集 DNA 黏稠物。
4、 DNA 的进一步提纯将 DNA 黏稠物放入 2mol/L 的氯化钠溶液中溶解,然后加入等体积冷却的酒精溶液,轻轻搅拌,DNA 会析出,而蛋白质等杂质则溶解在酒精溶液中。
再次过滤,得到较纯净的 DNA。
5、 DNA 的鉴定取两支洁净的试管,分别编号为 1、2。
向 1 号试管中加入 2mL 氯化钠溶液(0015mol/L),作为对照。
向 2 号试管中加入 2mL DNA 提取液。
然后向两支试管中各加入 4mL 二苯胺试剂,混合均匀后,在沸水浴中加热 5 分钟。
dna的粗提取与鉴定实验报告
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dna的粗提取与鉴定实验报告DNA 的粗提取与鉴定实验报告一、实验目的1、了解 DNA 粗提取的原理和方法。
2、学习并掌握 DNA 鉴定的基本技术。
二、实验原理1、 DNA 在氯化钠溶液中的溶解度随氯化钠浓度的变化而改变。
在014mol/L 的氯化钠溶液中,DNA 的溶解度最低。
2、 DNA 不溶于酒精溶液,但细胞中的某些物质(如蛋白质)则溶于酒精。
3、 DNA 与二苯胺试剂在沸水浴条件下会呈现蓝色反应,从而可以鉴定 DNA 的存在。
三、实验材料和用具1、材料新鲜的鸡血细胞液(抗凝剂处理)2、用具(1)烧杯、玻璃棒、滴管、量筒、离心机、纱布、漏斗、铁架台、酒精灯、石棉网、三角架、火柴。
(2)体积分数为95%的酒精溶液、2mol/L 的氯化钠溶液、蒸馏水、二苯胺试剂。
四、实验步骤1、制备鸡血细胞液将新鲜的鸡血加入抗凝剂,静置一段时间后,离心处理,去除上清液,留下鸡血细胞液。
2、提取细胞核物质向鸡血细胞液中加入 2mol/L 的氯化钠溶液,搅拌均匀,使血细胞破裂,释放出细胞核物质。
3、溶解 DNA沿烧杯壁缓缓加入蒸馏水,并不断搅拌,直到溶液中氯化钠浓度降至 014mol/L 时,DNA 溶解度最小,此时会有白色丝状物析出。
4、过滤含 DNA 的黏性物用多层纱布过滤上述溶液,滤去杂质,留下含 DNA 的黏性物。
5、进一步提纯 DNA将上述黏性物再溶解于 2mol/L 的氯化钠溶液中,然后过滤,除去不溶的杂质。
6、析出 DNA向滤液中缓缓加入与滤液体积相等的、冷却的体积分数为 95%的酒精溶液,并用玻璃棒搅拌,溶液中会出现白色的丝状 DNA。
7、 DNA 的鉴定取两支洁净的试管,分别编号为 1、2。
向 1 号试管中加入 2mol/L的氯化钠溶液 2mL,向 2 号试管中加入 DNA 丝状物和 2mol/L 的氯化钠溶液 2mL。
然后向两支试管中各加入 4mL 二苯胺试剂,混合均匀后,将试管置于沸水浴中加热 5 分钟,观察颜色变化。
DNA的提取与鉴定讲解ppt课件
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4.DNA的再溶解。 用高浓度(2mol/L)的氯化钠溶液再溶解DNA粘稠物。
5.DNA的沉淀和浓缩。
对于除去了蛋白质的DNA的氯化钠溶液,必须再进 一步沉淀和浓缩,常用酒精沉淀法。即往含有Na+的 DNA溶液,加入体积分数为95%的冷却酒精,混匀后可 以使DNA沉淀、浓缩,形成含杂质较少的DNA丝状物, 悬浮于溶液中。若丝状物较少,可将混合液再放入冰 箱中冷却几分钟即可。浓缩后的DNA丝状物可以用玻棒 (玻棒有吸附DNA的作用)缓缓旋转的方法卷起。
3.DNA的鉴定: 加入二苯胺试剂4mL,用玻棒搅拌使DNA溶解,沸水 浴5min,观察溶液是否出现浅蓝色。
三、实验小结
1.共有“三次过滤,两次析出,七次搅拌”
2.加入“两次蒸馏水,三次NaCl溶液,一次酒精”
四、实验原理拓展介绍。
1.DNA的释放。 DNA主要在鸡血细胞的细胞核内,正常情况下不会释 放出来,蒸馏水对于鸡血细胞是一种低渗液,水分可以 大量进入血细胞,使之胀破,同时加上玻璃棒快速搅拌 的机械作用,加速血细胞的细胞膜和核膜的破裂。但释 放出来的大量DNA与RNA、蛋白质结合在一起,即释放 的不是纯净的DNA,常称为DNA核蛋白。 2.DNA与蛋白质分离。 在高浓度(2mol/L)的氯化钠溶液中,核蛋白易溶解, 析出DNA并溶解在高浓度的氯化钠溶液中 3.DNA的析出与获取。 因为DNA在低浓度( 0.14mol/L )的氯化钠溶液中溶解 度小,而蛋白质的在其中的溶解度大。所以在向含DNA 的高浓度的氯化钠溶液中加入大量蒸馏水稀释氯化钠溶 液,从而使DNA溶解度下降,蛋白质溶解度增高。
dna的粗提取与鉴定知识点
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dna的粗提取与鉴定知识点一、DNA的粗提取1.1 DNA的来源DNA是存在于生物体内的遗传物质,包括植物、动物、微生物等。
因此,进行DNA粗提取需要选择合适的样品,如血液、组织、细胞等。
1.2 DNA的粗提取方法常见的DNA粗提取方法有以下几种:(1)CTAB法:采用CTAB(十六烷基三甲基溴化铵)与其他试剂配合,可以将细胞壁和细胞膜破坏,从而释放出DNA。
(2)酚/氯仿法:通过酚和氯仿相分离原理,将DNA分离出来。
(3)硅胶柱法:利用硅胶柱吸附原理,将杂质去除后得到纯净的DNA。
二、DNA的鉴定2.1 DNA鉴定的意义DNA鉴定是指通过对个体或物品中的DNA进行检测和比对,确定其身份或来源等信息。
在犯罪侦查、亲子关系确认、遗传疾病诊断等方面有着广泛应用。
2.2 DNA鉴定方法常见的DNA鉴定方法有以下几种:(1)PCR扩增:通过PCR技术扩增目标DNA片段,以便进行后续的分析和比对。
(2)电泳分离:将PCR扩增产物进行电泳分离,根据DNA片段大小的不同,形成不同的条带。
(3)序列比对:对比不同个体或物品中的DNA序列,确定其相似性和差异性。
三、DNA粗提取与鉴定注意事项3.1 样品处理样品处理是影响DNA粗提取和鉴定结果的重要因素。
在采集、保存、运输等方面需要注意避免污染、降解等情况发生。
3.2 实验操作实验操作需要严格控制温度、时间、试剂浓度等因素,以免影响DNA 粗提取和鉴定结果。
同时需要遵守实验室安全规范,保障个人安全和实验室环境卫生。
3.3 数据解读在进行DNA鉴定时,需要结合样品来源、亲缘关系等信息进行综合判断。
同时需要考虑概率统计学原理,在数据解读时避免过度解读或误判。
DNA粗提取和鉴定实验
![DNA粗提取和鉴定实验](https://img.taocdn.com/s3/m/125b194830b765ce0508763231126edb6f1a762a.png)
DNA的粗提取与鉴定实验一、实验原理①DNA主要存在于细胞核②DNA在NaCl溶液中的溶解度,是随着NaCl的浓度的变化而改变的.当NaCl的物质的量浓度为 mol/L时,DNA的溶解度最低.利用这一原理,可以使溶解在NaCl溶液中的DNA析出.③DNA不溶于酒精溶液,但是细胞中的某些蛋白质可以溶于酒精溶液.利用这一原理,可以进一步提取出含杂质较少的DNA.⑷DNA遇二苯胺沸水浴会染成蓝色,因此,二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂.二、实验材料和用具鸡血细胞液5~10ml;体积分数为95%的冷酒精溶液实验前置于冰箱内冷却24h;蒸馏水;质量浓度为0.1g/ml的柠檬酸纳溶液;质量的浓度分别为2mol/L和0.015mol/L的氯化纳溶液新教材不要求0、015的浓度了,都是用的2mol/L;二苯胺试剂;铁架台;镊子;水浴锅;玻璃棒;滤纸;滴管;量筒100ml,一个;烧杯;1000ml,一个,50ml、100 ml 、500ml 各二个;试管20ml,二个;漏斗;试管夹;纱布.三、课前准备鸡血细胞液取质量浓度为0.1g/ml的柠檬酸纳溶液抗凝剂100ml,置于500ml烧杯中.注入新鲜的鸡血约180ml,同时用玻璃棒搅拌,使血液与柠檬酸纳溶液充分混合,以免凝血.将烧杯中的血液置于冰箱内,精置一天,使血细胞自行沉淀.也可以将血液倒入离心管内,用1000r/min转每分的离心机离心2min,血细胞沉淀于离心管底部.实验时.用吸管除去离心管上部的澄清液,就可以得到鸡血细胞液.四、方法步骤①提取鸡血细胞的细胞核物质将制备好的鸡血细胞液5 mL~10mL,注入到50 mL烧杯中.向烧杯中加入蒸馏水20 mL,同时用玻璃棒充分搅拌5 min,使血细胞加速破裂.然后,用放有1-2层纱布的漏斗将血细胞液过滤至1000mL.取其滤液.②溶解细胞核内的DNA将氯化钠的物质的量浓度为 2 mol/L的溶液40mL加入到滤液中,并用玻璃棒沿一个方向搅拌1min,使其混合均匀,这时DNA在溶液中呈溶解状态 .③析出含DNA的粘稠物沿烧杯内壁缓缓加入蒸馏水,同时用玻璃棒不停地轻轻搅拌,这时烧杯中有丝状物出现,注意观察丝状物呈什么颜色.继续加入蒸馏水,溶液中出现的粘稠物会越来越多.当粘稠物不再增加时停止加入蒸馏水这时溶液中氯化钠的物质的量浓度相当于 mol/L经验值:需加约570mL蒸馏水,且分多次加入.将溶液中的DNA与其他杂质分离,这一步骤是实验成败的关键.实验中应该缓慢贴壁加入蒸馏水,并轻轻地沿一个方向不停地均匀搅拌,以利于DNA分子的附着和缠绕.④滤取含DNA的粘稠物用放有多层纱布的漏斗,过滤步骤3中的溶液至 500mL的烧杯中,含 DNA的粘稠物被留在纱布上,滤液丢弃.⑤将DNA的粘稠物再溶解取 1个 50 mL烧杯,向烧杯内注入氯化钠的物质的量浓度为 2 mol/L的溶液 20mL.用钝头镊子将纱布上的粘稠物夹至氯化钠溶液中,用玻璃棒不停地搅拌,约3分钟,使粘稠物尽可能多地溶解于溶液中.⑥过滤含有DNA的氯化钠溶液取1个100 mL烧杯,用放有两层纱布的漏斗过滤步骤5中的溶液.取其滤液,DNA溶于滤液中.⑦提取含杂质较少的DNA在上述滤过的溶液中,加入等体积的、冷却的、体积分数为 95%的酒精溶液使用冷却的酒精,对DNA的凝集效果较佳,并用玻璃棒搅拌,溶液中会出现含杂质较少的白色丝状物.用玻璃棒将丝状物卷起,并用滤纸吸取上面的水分.这种丝状物的主要成分就是DNA.⑧ DNA的鉴定取两支20 mL的试管,各加入氯化钠的物质的量浓度为0.015 mol/L的溶液5 mL,将丝状物放入其中一支试管中,用玻璃棒搅拌,使丝状物溶解.然后,向两支试管中各加入4mlL的二苯胺试剂.混合均匀后,将试管置于沸水中加热 5 min,待试管冷却后,观察并且比较两支试管中溶液颜色的变化.五、讨论①两次使用蒸馏水第一次:细胞吸水胀破第一步第二次:使 DNA黏稠物析出第三步②三次过滤第一次: DNA存在于滤液里第一步第二次: DNA被留在纱布上第四步第三次: DNA存在于滤液里第六步过滤时使用的纱布层数与需用滤液或黏稠物有关,第二次要用其滤出的黏稠物有关,所以要使用多层纱布,第一次和第三次均要用其滤液,使用的纱布为1-2层③两次析出第一次:用 mol/L 的NaCI溶液含杂质多第三步第二次:用冷却的95%的酒精第七步④六次搅拌:第一、二、三、五、七、八步其中除第八步外,其余均要朝一个方向搅拌,在第三、五步搅动还要轻缓,玻璃棒不要直插烧杯底部,这样才能保证得到完整的DNA为什么反复地溶解与析出DNA,能够去除杂质答:用高盐浓度的溶液溶解DNA,能除去在高盐中不能溶解的杂质;用低盐浓度使DNA析出,能除去溶解在低盐溶液中的杂质.因此,通过反复溶解与析出DNA,就能够除去与DNA溶解度不同的多种杂质在NaCl溶液浓度低于 mol/L时,DNA的溶解度随NaCl溶液浓度的增加而逐渐降低;在 mol/L 时,DNA溶解度最小;当NaCl溶液浓度继续增加时,DNA的溶解度又逐渐增大.。
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⒈ 破碎细胞,溶解DNA:
用提取液(裂解液)破坏细胞壁、细胞膜和核膜。
微生物样品提取液:含表面活性剂SDS、溶菌酶等 动物样品提取液:含SDS、蛋白酶K等 植物样品提取液:含CTAB
核酸酶可被Ca2+、Mg2+等激活,提取液均含有螯合剂(如EDTA, 柠檬酸等),螯合这些离子。
(SDS,破膜、蛋白质变性沉淀)——苯酚抽 提蛋白质——氯仿抽提、萃取苯酚
(二)复性 变性DNA在适当条件下,可使两条分开的单链重新形成双螺旋DNA
的过程称为复性(renaturation)。 当热变性的DNA经缓慢冷却后复性称为退火(annealing)。DNA
复性是非常复杂的过程,影响DNA复性速度的因素很多:DNA浓度高, 复性快;DNA分子大复性慢;高温会使DNA变性,而温度过低可使误配 对不能分离等等。最佳的复性温度为Tm减去25℃,一般在60℃左右。 离子强度一般在0.4mol/L以上。ຫໍສະໝຸດ 细胞DNA的提取过程:
裂解:破碎细胞,使细胞中的核酸游离 在裂解体系中
纯化:使核酸与其它杂质彻底分离, 如蛋白质、盐等
总原则:①应保证核酸一级结构的完整性;
②排除其它分子的污染。
鉴定:浓度、纯度、分子量、测序
(技术:分光光度技术、凝胶电泳技术等)
(一)样品预处理(获取分散细胞)
1、植物样品
新鲜组织先用无菌生理盐水洗; 干药材除去霉点,无菌水浸洗;
(二)基因 基因(遗传因子)是具有遗传效应的DNA片段,基因支持着生命的基
本构造和性能。
编码区:是可以被转录的区域 非编码区:不可以被转录的区域
密码子:遗传密码(英文:Genetic code)是一组规则,将DNA或RNA序 列以三个核苷酸为一组的密码子转译为蛋白质的氨基酸序列,以用于蛋 白质合成。 起始密码子为AUG(甲硫氨酸) ;终止密码子:UAA、UAG、UGA.
DNA样品:
OD260 / OD280 =1.8 ,DNA纯度高 OD260 / OD280 > 1.8,含RNA,或DNA部分降解 OD260 / OD280 < 1.8,含苯酚或蛋白杂质
热变性一半时的温度称为熔点或变性温度,以Tm来表示。 DNA的G+C含量影响Tm值。由于G≡C比A=T碱基对更稳定,因 此富含G≡C的DNA比富含A=T的DNA具有更高的熔解温度。根据 经验公式xG+C =(Tm - 69.3)× 2.44可以由DNA的Tm值计算 G+C含量,或由G+C含量计算Tm值。
核酸的降解:核苷酸间的磷酸二酯键的断裂
引起核酸变性的因素有:高温、强酸强碱 有机溶剂、尿素等
当呈双螺旋结构的DNA溶液缓慢加热时,其中的氢键便断开,双 链DNA便脱解为单链,这叫做核酸的“溶解”或变性。在适宜的 温度下,分散开的两条DNA链可以完全重新结合成和原来一样的 双股螺旋。这个DNA螺旋的重组过程称为“复性”。
捣碎或剪碎;加液氮研磨成粉状。
2、动物样品
(1)组织样品:
新鲜样品,生理盐水洗,直接使用(或分装、 -70℃/液氮低温保存);
甲醛固定组织要先去掉甲醛;
石蜡包埋组织要经过组织切片和二甲苯脱蜡等处 理。
(2)血细胞样品: 来源:新鲜血液或者冻贮血液;
抗凝剂:一般用EDTA-Na2或柠檬酸钠(枸橼酸 钠 ),不可使用肝素;
经离心后溶液分为三层:上层是核酸溶液、 中间不溶物为变性蛋白质,下层是苯酚氯 仿溶液。
核酸溶液 蛋白质 苯酚氯仿
3.沉淀DNA
有机溶剂沉淀DNA:2倍体积无水乙醇(或1倍体积的异戊醇)
再用75%乙醇清洗多次。
4.重新溶解DNA
将DNA溶于水或TE溶液。
DNA提取的一般流程
二、核酸的鉴定
(一)核酸浓度检测
分离:红白细胞,一般用明胶,加缓冲液悬浮白细 胞。(血清DNA是研究肿瘤的材料之一)
(3)培养细胞: 离心,弃细胞培养液; 用缓冲液多次漂洗;
3、微生物培养物样品
离心获取菌体细胞, 加缓冲液洗涤, 加缓冲液悬浮菌体细胞。
4、微生物混合样品
用缓冲液悬浮菌体,低速离心,沉淀杂质。 高速离心获取菌体细胞。 用缓冲液洗涤菌体细胞。 加缓冲液悬浮菌体细胞。
2、核酸的溶解度与黏度
DNA与RNA都是极性化合物,都微溶于水,而不溶于乙醇、 乙醚、氯仿等有机溶剂。
DNA的黏度很大,当DNA溶液受热或其他因素作用下,发 生双螺旋结构变为无规则线团结构,此时黏度降低,因此可 用黏度做为DNA变性的指标。
3、核酸的紫外吸收 由于核酸的组成成分是嘌
呤碱、嘧啶碱(带有共轭双 键)具有强烈的紫外吸收, 所以核酸表现出强烈的紫外 吸收性质,其最大的吸收峰 在260nm。
1、DNA提取用具的处理
要求无菌;试剂、器材高压干燥等进行无 DNA酶处理。
2、RNA提取用具的处理
要求无菌,防止二次污染。 RNA易被RNase水解,RNase无处不在且 耐高温,提取条件要求严格。
二、真核生物基因组DNA的常规提取
裂解细胞,溶出DNA 除去杂质
沉淀、浓缩DNA 重新溶解DNA
OD260=1时(比色皿厚度1.0cm) 双链DNA浓度为50 μg/ml, 单链DNA或RNA浓度为40 μg/ml。
DNA(μg/ml) = OD260×50 RNA(μg/ml ) = OD260×40
核酸在260 nm处有吸收峰,蛋白质在280 nm有吸 收峰
核酸的纯度用OD260/OD280比值表示。
核酸提取与鉴定
一、核酸的理化性质 核酸可分为核糖核酸(简称RNA)和脱氧核糖核
酸(简称DNA)。DNA是储存、复制和传递遗传信息 的主要物质基础。
1、核酸的酸碱性质
核酸含有酸性的磷酸基和碱性的含氮的碱基,因此核酸 是两性的电解质,具有等电点。
但磷酸基酸性相对较强,所以核酸通常表现为酸性。在 一定的pH下,核酸能发生两性电离,从而使得核酸带上电荷, 具有电泳行为。
3、增色效应(hyperchromic effect)是指因高分子结构的改变, 而使摩尔吸光系数增大的现象
核酸变性时,双螺旋结构被破坏,嘌呤碱、嘧啶碱暴露出来, 其紫外吸收能力增强。
4、核酸的变性、复性及杂交 核酸的变性:在物理和化学因素的作用下,维系核酸二级结构的 氢键和碱基堆积力受到破坏,DNA由双链解旋为单链的过程。