常用固定液的配制
4 多聚甲醛固定液配制
4％的多聚甲醛溶液通常是作为流式标本的储存液，保存在2－8℃。
要使用时，可用PBS稀释至工作液（应用液）。
因为甲醛有毒，所以在配置4％的多聚甲醛固定液时要做好防护措施。
下面详细介绍4%多聚甲醛固定液配制步骤和方法。
4%多聚甲醛固定液配制需材料和设备：
去离子水、HCl (稀)、NaOH (1 N)、多聚甲醛粉末、1X PBS（0.137 M NaCl, 0.05 M NaH2PO4, pH 7.4）、0.22μm滤膜、玻璃器皿、手套和保护眼镜、磁力搅拌器、温度计、通风柜
步骤：
要配制1 L的4%多聚甲醛，在通风柜中，将800 mL的1X PBS加入玻璃烧杯，边搅拌边加热至约60℃，注意不能让溶液沸腾。
往热PBS溶液中加入40g多聚甲醛粉末。
多聚甲醛粉末可能不会立即溶解，可通过滴入1N NaOH搅拌逐步提高pH值，直至多聚甲醛粉末完全溶解。
待溶液冷却，过滤溶液，用PBS调节溶液体积至1L。
检查pH值，用稀盐酸调节pH值至6.9左右。
保存：
4％的多聚甲醛溶液可分装成多管冻存，或者保存在2－8℃大约1个月。
常用固定液配制
1. 福尔马林-醋酸-酒精固定液(FAA)50%或70%酒精90ml + 冰醋酸5ml + 福尔马林(37%~40%甲醛)5ml可用作固定植物的一般组织,但不适用于单细胞及丝状藻类,也不适宜作细胞学研究。
幼嫩材料用50%酒精代替70%酒精，可防止材料收缩。
若材料坚硬，可略减冰醋酸，略增福尔马林。
若材料易收缩，可稍增加冰醋酸。
久置时另加入5ml甘油以防蒸发和材料变硬。
此液又可作保存液。
固定时间最多10h。
如果用在植物胚胎的材料上，改用下面的配方，效果较好：50%酒精89ml + 冰醋酸6ml + 福尔马林5ml2. 福尔马林-丙酸-酒精固定液（FPA）福尔马林5ml + 丙酸5ml + 50%酒精90ml固定一般的植物组织，通常固定24h，可长久保存。
3. 酒精-醋酸-氯仿固定液（卡诺固定液，Carnoy fixative）配方Ⅰ：纯酒精3份+ 冰醋酸1份配方Ⅱ：纯酒精6份+ 冰醋酸1份+ 氯仿3份适用于植物组织和细胞学材料，为研究细胞分裂和染色体的优良固定液。
固定时间不宜过久。
4. 酒精-福尔马林固定液福尔马林2~6（6~10）ml + 70%酒精100ml固定植物一般组织，尤其适用于萌发的花粉管的固定。
通常固定24h，亦可长久保存。
5. 酒精-福尔马林-甘油固定液95%酒精150ml + 5%福尔马林100ml + 甘油50ml此液也可长期储存材料。
6. 铬酸-醋酸固定液根据固定对象的不同，可分为强、中、弱3种配方：（1）弱液配方：10%铬酸2.5ml + 10%醋酸5ml + 蒸馏水92.5ml（2）中液配方：10%铬酸7ml + 10%醋酸10ml + 蒸馏水83ml（3）强液配方：10%铬酸10ml + 10%醋酸30ml + 蒸馏水60ml弱液配方用在固定较柔软的材料，如藻类、苔藓和蕨类的原叶体等。
固定时间较短，一般为数小时，最长可固定12~24h，但藻类和蕨类的原叶体可缩短到几分钟至1h。
病理组织常用固定液的配制
病理组织常用固定液的配制（免疫组化）一、常规固定液的配制（1）10%甲醛液浓甲醛 10ml蒸馏水 90ml(2 ) 缓冲中性甲醛液浓甲醛10mlPBS缓冲液（Ph7.2）90ml(3 ) 10%中性甲醛液浓甲醛10ml蒸馏水90ml碳酸钙加至饱和(4 ) Bouin氏固定液苦味酸饱和水溶液75 ml甲醛2 ml冰醋酸5 ml该固定液中的冰醋酸，对胶原纤维等组织有膨胀作用，而甲醛对组织有收缩作用，两种试剂的混合使用，用以抵消彼此间的副作用，使组织固定达到优良的固定水平。
（5）醛糖钙固定液甲醛100ml蔗糖300ml乙酸钙20g蒸镏水90ml先将蔗糖和乙酸钙溶于蒸镏水，后加入甲醛。
该固定液对于做酶的组织化学的研究效果较好，组织固定后，做冰冻切片，再给予显示。
当前国内外基本上都还是要用甲醛来固定组织。
从免疫组织化学的角度来说，甲醛固定的组织大部分都可以用免疫组化的手段来检测，据多人认为，它对lgA ，lgM，J链，K 链和λ链的标记效果较好，且背景清晰。
但美中不足的是：经它固定的组织，可与蛋白形成醛交联蛋白，这种醛键可封闭抗原。
固此，在免疫组化实际检测中，应根据不同的要求和需要，采用酶消化或者其它抗原修复如微波、高压等的方法，以便破坏醛键重新暴露抗原。
（6）Zenker氏固定液：重铬酸钾25g升汞50g蒸馏水1000ml冰醋酸50ml先将重铬酸钾和升汞溶于水中，尢其是重铬酸钾，应用热水或加温的方法将其溶解，然后过滤贮存于带盖的玻璃瓶中，如暴露于空气中，该溶液将会被慢慢氧化而便颜色加深，导致失效。
临用时，取贮存液950ml，加入50ml的冰醋酸，即可使用。
应用该固定液固定的组织，一般不要超过24h，取出组织，流水冲冼12小时以上，然后保存于75%-80%的酒精中，在切片染色前，必须用碘除去汞盐的沉着。
应用该固定液的组织，细胞核及细胞浆染色十分清晰，特别是要显示骨骼肌的横纹时，应用本液可获得满意的结果，但由于其含有醋酸，故不能用于保存细胞颗粒，红细胞及含铁血黄素。
固定液
1．经过固定的组织可保持在10%福尔马林或70%乙醇中。
2．染色前脱掉组织中的苦味酸①自来水冲洗②50%乙醇③或70%乙醇饱和碳酸锂
乙醇BOUIN’S液（DUBOSCQ-BRAZIL FLUID）
用途：用于固定肾活检，组织学制备固定液。
试剂：
乙醇Bouin’s贮存液:
80%乙醇750.0ml
甲醛300.0ml
步骤：
1．活检标本要立即放入Hollande’s固定剂中，标本容器上注明时间。
2．标本完成固定后保持在70%乙醇中。
3．不能让Hollande’s液固定的标本与磷酸缓冲福尔马林接触，否则会出现蓝色沉淀。
ORTH’S液
用途：用于证实肾上腺胞浆中嗜络微粒，这种证明可能对嗜络细胞瘤的诊断很重要。不是一种好的多用途的固定剂。
苦味酸5.0g
充分混合，液体稳定性2年，标明配制日期。
工作液：
贮存液70.0ml14.0ml
醋酸5.0ml10.0ml
使用前加醋酸。
固定时间：1～4小时。
步骤：
1．把新鲜组织标本放进乙醇Bouin’s工作液中。
2．充分固定后把组织移到70%的乙醇中。
HOLLANDE’S固定液
用途：作为胃肠和前列腺活检基本固定剂，这种固定剂让H.E染色更清晰，它“软化”组织避免切片脆裂。苦味酸会溶解掉红细胞。
ZENKER’S液
用途：Zenker’s液是一种核固定剂。该液是细胞学及病理学常用的固定剂，对细胞核固定最好，最适合于造血和网状内皮组织的固定。也常作为三色染色的组织固定剂，在三色染色中还作为媒染剂使用。但对于含血量较多的组织标本尽量不要选Zenker’s液固定。
试剂：
Zenker’s贮备液：
电镜缓冲液、固定液、染液配方
固定液配方一、戊二醛固定液:市售戊二醛为25%or50%水溶液，一般用磷酸缓冲液或二甲砷酸盐溶液配制成所需浓度的固定液0.1mol/L 二甲砷酸钠缓冲液 A 液：二甲砷酸钠•3H 2O 4.28g加双蒸水至100ml B 液：HCL(36-38%) 1.66ml 加双蒸水至100ml按下表比例混合A 、B 液以配制0.2M 二甲砷酸钠母液（在通风橱配制），加1倍双蒸水即得0.1M 二甲砷酸钠缓冲液0.1mol/L 磷酸缓冲液 A 液：Na 2HPO 4溶液 2.84g Na 2HPO 4 / 3.161g Na 2HPO 4 •H 2O / 3.56g Na 2HPO 4 •2H2O /5.363g Na 2HPO 4 •4H2O / 7.164g Na 2HPO 4 •7H2O加双蒸水至100mlB 液：NaH 2PO 4溶液 2.40g NaH 2PO 4/ 2.76g NaH 2PO 4 •H 2O/ 3.121g NaH 2PO 4 •2H 2O 加双蒸水至100ml按下表比例混合A 、B 液以配制0.2M 磷酸缓冲液，加1倍双蒸水即得0.1M 磷酸缓冲液二、四氧化饿固定液 1、2%四氧化饿水溶液将0.5 or 1.0g 装四氧化饿安踣瓶充分洗净，放入棕色试剂瓶，在排毒柜内将安瓿瓶敲破，立刻加入双蒸水，配制成2%四氧化饿水溶液，盖上盖子，溶解1d. 2、用0.1M 磷酸缓冲液配制成四氧化饿固定液 0.1M 磷酸缓冲液 5ml2%四氧化饿水溶液 5ml 三、karnovsky 2%多聚甲醛-2.5%戊二醛固定液 1、10%多聚甲醛水溶液 多聚甲醛 2g 双蒸水 20ml 2、固定液配制0.2M 磷酸缓冲液 50ml25%戊二醛 10ml 双蒸水加至100ml 10%多聚甲醛水溶液 20ml染色液配方一、 透射电镜正染色液1、柠檬酸铅（Re ynolds’）溶液 硝酸铅 1.33g 柠檬酸三钠 1.76g 切片染色时间5-10min 双蒸水 30mlNOTICE:该溶液易与空气中CO 2作用而产生沉淀，故使用与保存时，应尽量减少与空气接触，若稍有白色沉淀即舍弃 2、醋酸双氧铀-50%饱和溶液 醋酸双氧铀 2g 50%乙醇 100ml 切片染色时间15-30min （室温），延迟时间or 提高温度可加反差 NOTICE:溶液呈鲜黄色，若变淡则表示失效。
生物类经常用的一些化学试剂的配制方法
生物类经常用的一些化学试剂的配制方法l．乳酸苯酚固定液乳酸10g, 结晶苯酚10g, 甘油20g, 蒸馏水10mL。
2. 1.6%溴甲酚紫溴甲酚紫1.6g溶于100mL乙醇中，贮存于棕色瓶中保存备用。
用作培养基指示剂时，每1000mL 培养基中加入lmL 1.6%溴甲酚紫即可。
3. V.P.试剂CuSO4 1g，蒸馏水l0mL，浓氨水40mL，10% NaOH 950mL。
先将CuSO4溶于蒸馏水中，然后加浓氨水，最后加入10%NaOH。
4. 0.02%甲基红试剂甲基红0.1g，95% 乙醇760mL，蒸馏水100mL。
5. 吲哚反应试剂对二甲基氨基苯甲醛8g, 95%乙醇760mL，浓HCl160mL。
6. Alsever’s血细胞保存液葡萄糖2.05g, 柠橡酸钠0.8g, NaCl 0.42g，蒸馏水l00mL。
以上成分混匀后，微加温使其溶解后，用柠檬酸调节pH 6.1，分装于三角瓶中(30～50mL/瓶), 113℃湿热灭菌15min，备用。
7. Hank’s液(l)贮存液A液：(I)NaCl80g, KCl4g, MgSO4·7H2O1g，MgCl2·6H2O1g，用双蒸馏水定容至450mL：(II)CaCl2 1.4g (或CaCl2·2H2O 1.85g) 用双蒸馏水定容至50mL。
将I和II液混合，加氯仿1mL即成A液。
(2)贮存液B液：Na2HPO4·12H2O 1.52g，KH2PO4 0.6g, 酚红0.2g, 葡萄糖10g,用双蒸馏水定容至500mL，然后加氯仿1mL，酚红应先置研钵内磨细，然后按配方顺序一一溶解。
(3)应用液：取上述贮存液的A和B液各25mL，加双蒸馏水定容至450mL，113℃湿热灭菌20min。
置4℃下保存。
使用前用无菌的3% NaHCO3调至所需pH。
注意：药品必须全部用A.R试剂，并按配方顺序加入，用适量双蒸馏水溶解，待前一种药品完全溶解后再加入后一种药品，最后补足水到总量。
常用固定剂的配方
常用固定剂的配方(一) 凝固型固定剂1、酒精(ethyl，alcohol)常用95%酒精及纯酒精。
酒精穿透力强，固定时间常在1小时以内。
高浓度酒精有使材料收缩的作用。
70％的酒精可作保存液。
配制低度酒精必须要用普通酒精即95％的酒精，绝不可用纯酒精。
酒精为还原剂，不能与铬酸、锇酸、重铬酸钾等氧化剂配合。
酒精可使核酸，蛋白质及肝醣等发生沉淀，但能溶解脂肪及拟脂。
2、铬酸(chromic acid)铬酸是一种很好的保存剂，可以使蛋白质沉淀，组织硬化，但是容易使组织收缩，同时渗透亦比较缓慢。
一般与其它药剂混合使用，可以成为优良的固定剂。
平常与醋酸合并应用，效果良好。
特点：易潮解，为强氧化剂。
缺点：渗透力弱，易使组织发生收缩。
3、苦味酸(picric acid)苦味酸对于组织渗透缓慢，且能使组织强烈收缩。
但可使蛋白质。
核酸等沉淀，并防止过度硬化，对以后增进染色能力很大。
一般很少单独使用，常与其他药剂混合使用。
固定后需要用50％或70％酒精洗涤。
特点：渗透力弱，易使组织发生收缩，易爆炸。
注意事项：一般用50%或70%酒精洗涤。
4、醋酸(acetic acid)醋酸为无色透明的液体，刺激性极强，冷则凝结成冰，故又叫冰醋酸。
醋酸以与水和酒精配成各种比例的溶液，所用浓度为0.2～5％，也常与其他固定剂配合使用。
醋酸穿透性很强，单独使用，有使原生质膨胀的作用，故常与酒精，甲醛等合用，醋酸为固定染色体的优良固定液，因此固定染色体的固定液中，几乎都含有醋酸。
特点：渗透力强，可使组织产生膨胀作用。
(二) 非凝固型固定剂1、福尔马林(formalin)浓度在2～10％的福尔马林，为很好的硬化剂，但是渗透力薄弱，而且对材料会引起强烈收缩。
所以最好与其他药剂混合使用，效果会大大增加。
注意的是，它亦是一种还原剂，故不宜与氧化剂铬酸、锇酸相混。
特点：很好的硬化剂，强还原剂；渗透力弱。
2、重铬酸钾(potassium dichromate)用作固定剂的浓度1～3％。
10%标本福尔马林固定液成分要求
10%标本福尔马林固定液成分要求摘要：一、福尔马林固定液的作用二、10% 标本福尔马林固定液的成分要求1.福尔马林2.缓冲液3.防腐剂三、固定液的配制方法四、固定液的注意事项正文：福尔马林固定液是一种广泛应用于生物学、医学和化学实验室的固定剂，主要用于标本的防腐、固定和保存。
在病理学、细胞学、遗传学等生物医学领域，福尔马林固定液对于标本的保存具有至关重要的作用。
本文将重点介绍10% 标本福尔马林固定液的成分要求及配制方法。
首先，我们来了解10% 标本福尔马林固定液的成分要求。
福尔马林即甲醛溶液，是固定液的主要成分，通常浓度为37%~40%。
甲醛具有强烈的固定作用，能够使蛋白质发生变性，从而固定标本中的组织结构和细胞形态。
在配制10% 标本福尔马林固定液时，需要将福尔马林与适量的缓冲液和防腐剂混合。
缓冲液可以中和福尔马林的酸性，稳定pH 值，防止福尔马林挥发。
防腐剂则能抑制微生物的生长，延长固定液的使用寿命。
接下来，我们来学习10% 标本福尔马林固定液的配制方法。
首先，将一定量的福尔马林倒入容器中，然后加入适量的缓冲液，搅拌均匀。
接着，再加入适量的防腐剂，再次搅拌均匀，直至防腐剂完全溶解。
最后，将10% 标本福尔马林固定液倒入密封容器中，妥善保存。
在使用10% 标本福尔马林固定液时，需要注意以下几点：1.佩戴防护设备，如口罩、眼镜和手套，避免直接接触福尔马林，因其具有较强的刺激性和毒性。
2.严格遵循配制比例，确保固定液的浓度准确。
3.使用过程中，避免阳光直射和高温环境，防止福尔马林挥发。
4.固定液具有一定的保质期，注意观察其颜色和气味，如有异常，应及时更换。
总之，10% 标本福尔马林固定液在生物医学领域具有广泛的应用，掌握其成分要求和配制方法对于实验室工作具有重要意义。
卡诺固定液、解离液、改良的苯酚品红试剂的配制
1.卡诺固定液：无水乙醇：冰醋酸=3：1 配制1L固定液：无水乙醇750ML,冰醋酸250ML.
2.解离液：95%的乙醇：浓盐酸=10：8 配制1L解离液：95%的乙醇555.56ML,浓盐酸444.44ML.
3.改良的苯酚品红
1.苯酚品红染色液的配制：
（1）母液A：取0.3g碱性品红，溶解在10ml的70%乙醇（可长期保存）。
（2）母液B：将母液A加入90ml的5%苯酚水溶液中（2周内使用）（3）染色液：取母液B90ml，加入12ml冰醋酸和12ml的37%的甲醛，即为苯酚品红溶液。
2.改良苯酚品红染色液的配制：取50ml苯酚品红染液，加入950ml 的45%冰醋酸和18g山梨醇，即改良苯酚品红染液。
（刚配置染色效果差，但是放置2周后，效果会越来越好。
）
附加：
4.希夫试剂（Schiff）的配制：将0.5g碱性品红(basic fuchsin)溶于100mL
热蒸馏水中，使之充分溶解，待溶液冷却至50℃时过滤，再冷却到25℃时加入1 mol盐酸（HCl）10mL和1g亚硫酸氢钠（NaHSO3）或1.5g偏重亚硫酸钠（Na2S2O5），放置暗处，静置24h后，加0.25～0.5g活性炭摇荡1min，过滤，溶液呈无色，装入棕色瓶中塞紧瓶塞，保存在冰箱内（0～4℃），用前预先取出，使之恢复至室温后再用。
如溶液呈粉红色就不能用，须重配,一般配完2天之内使用。
常用固定液的配制
常用固定液的配制1. 福尔马林-醋酸-酒精固定液(FAA)50%或70%酒精90ml + 冰醋酸5ml + 福尔马林(37%~40%甲醛)5ml可用作固定植物的一般组织,但不适用于单细胞及丝状藻类,也不适宜作细胞学研究。
幼嫩材料用50%酒精代替70%酒精，可防止材料收缩。
若材料坚硬，可略减冰醋酸，略增福尔马林。
若材料易收缩，可稍增加冰醋酸。
久置时另加入5ml甘油以防蒸发和材料变硬。
此液又可作保存液。
固定时间最多10h。
如果用在植物胚胎的材料上，改用下面的配方，效果较好：50%酒精89ml + 冰醋酸6ml + 福尔马林5ml2. 福尔马林-丙酸-酒精固定液（FPA）福尔马林5ml + 丙酸5ml + 70%酒精90ml固定一般的植物组织，通常固定8~24h，可长久保存。
3. 酒精-醋酸-氯仿固定液（卡诺固定液，Carnoy fixative）配方Ⅰ：纯酒精3份+ 乙酸1份配方Ⅱ：纯酒精6份+乙酸1份+ 氯仿3份配方Ⅲ：甲醇6份+乙酸1份+ 氯仿3份适用于植物组织和细胞学材料，为研究细胞分裂和染色体的优良固定液。
固定时间不宜过久。
4. 酒精-福尔马林固定液福尔马林2~6（6~10）ml + 70%酒精100ml固定植物一般组织，尤其适用于萌发的花粉管的固定。
通常固定24h，亦可长久保存。
5. 酒精-福尔马林-甘油固定液95%酒精150ml + 5%福尔马林100ml + 甘油50ml此液也可长期储存材料。
6. 铬酸-醋酸固定液根据固定对象的不同，可分为强、中、弱3种配方：（1）弱液配方：10%铬酸2.5ml + 10%醋酸5ml + 蒸馏水92.5ml（2）中液配方：10%铬酸7ml + 10%醋酸10ml + 蒸馏水83ml（3）强液配方：10%铬酸10ml + 10%醋酸30ml + 蒸馏水60ml弱液配方用在固定较柔软的材料，如藻类、苔藓和蕨类的原叶体等。
固定时间较短，一般为数小时，最长可固定12~24h，但藻类和蕨类的原叶体可缩短到几分钟至1h。
脑类器官固定方法
脑类器官的固定方法通常涉及使用固定液，如10%的福尔马林，其中甲酸含量为3.6%-4%。
固定液的配制方法是取市售37%-40%的甲醛溶液与蒸馏水按1:9混合。
在实际工作中，可以根据标本体积的大小与固定液体积的比例，适当调整加水的比例至1:5-1:8。
固定时，固定液一般不少于器官组织总体积的10倍。
次日应更换新鲜固定液继续固定数日，以得到较好的效果[4]。
对于脑组织的固定，需要注意避免因压迫导致变形，可以使用细线穿过基底动脉，将脑单独放入一个带盖的容器内，用容器盖住细线两端，使脑呈悬浮状固定。
对于有蛛网膜下腔出血的脑，应在固定前先拍照，然后使用流水冲洗，清除血液后仔细检查脑底动脉环及邻近脑动脉，同时注意检查椎动脉有无破裂并寻找破裂口[4]。
以上就是关于脑类器官固定方法的一些基本信息。
在进行固定时，一定要遵循相应的操作规程，以确保固定的效果达到最佳。
常用固定液的配制
常用固定液的配制1. 福尔马林-醋酸-酒精固定液(FAA)50%或70%酒精90ml + 冰醋酸5ml + 福尔马林(37%~40%甲醛)5ml可用作固定植物的一般组织,但不适用于单细胞及丝状藻类,也不适宜作细胞学研究。
幼嫩材料用50%酒精代替70%酒精，可防止材料收缩。
若材料坚硬，可略减冰醋酸，略增福尔马林。
若材料易收缩，可稍增加冰醋酸。
久置时另加入5ml甘油以防蒸发和材料变硬。
此液又可作保存液。
固定时间最多10h。
如果用在植物胚胎的材料上，改用下面的配方，效果较好：50%酒精89ml + 冰醋酸6ml + 福尔马林5ml2. 福尔马林-丙酸-酒精固定液（FPA）福尔马林5ml + 丙酸5ml + 70%酒精90ml固定一般的植物组织，通常固定8~24h，可长久保存。
3. 酒精-醋酸-氯仿固定液（卡诺固定液，Carnoy fixative）配方Ⅰ：纯酒精3份+ 乙酸1份配方Ⅱ：纯酒精6份+乙酸1份+ 氯仿3份配方Ⅲ：甲醇6份+乙酸1份+ 氯仿3份适用于植物组织和细胞学材料，为研究细胞分裂和染色体的优良固定液。
固定时间不宜过久。
4. 酒精-福尔马林固定液福尔马林2~6（6~10）ml + 70%酒精100ml固定植物一般组织，尤其适用于萌发的花粉管的固定。
通常固定24h，亦可长久保存。
5. 酒精-福尔马林-甘油固定液95%酒精150ml + 5%福尔马林100ml + 甘油50ml此液也可长期储存材料。
6. 铬酸-醋酸固定液根据固定对象的不同，可分为强、中、弱3种配方：（1）弱液配方：10%铬酸2.5ml + 10%醋酸5ml + 蒸馏水92.5ml（2）中液配方：10%铬酸7ml + 10%醋酸10ml + 蒸馏水83ml（3）强液配方：10%铬酸10ml + 10%醋酸30ml + 蒸馏水60ml弱液配方用在固定较柔软的材料，如藻类、苔藓和蕨类的原叶体等。
固定时间较短，一般为数小时，最长可固定12~24h，但藻类和蕨类的原叶体可缩短到几分钟至1h。
常用的组织固定液及配制
常用固定液及其配制固定液分单纯固定液和混合固定液。
1甲醛（formal dehyd e）是无色气体，易溶于水成为甲醛溶液。
易挥发，且有强烈刺激气味，常用得是37％～40％得甲醛溶液，商品名为福尔马林（formal in）。
用作固定的浓度习惯为10％福尔马林（即1份甲醛溶液加9份水配制而成），实际含甲醛4％。
10％福尔马林渗透力强，固定均匀，对组织收缩少。
对脂肪、神经及髓鞘、糖等固定效果好，是最常用的固定剂。
经福尔马林固定时间长的组织，易产生黑色的沉淀，称福尔马林色素。
2 乙醇无色液体，易溶于水，它除可作为固定剂外，还可作为脱水剂，对组织有硬化作用。
固定用一般是80%~95%浓度，乙醇渗透力校弱，它能溶解脂肪，核蛋白被沉淀后，仍能溶于水，因此核的着色不良。
3 中性甲醛液（混合固定液）甲醛（浓）120ml，加蒸馏水880ml,磷酸二氢钠（NaH2PO4?H2O）4g，磷酸氢二纳（Na2HPO4）13g。
此液固定效果比单纯10％福尔马林要好。
4 AF液（混合固定液）95％乙醇90ml，甲醛(浓)10ml。
也有配方是95％乙醇85ml，甲醛（浓）10ml，冰醋酸5ml。
此液除有固定作用外，兼有脱水作用，因此，固定后可直接入95％乙醇脱水。
以上4种固定液中，以中性甲醛为首选，其次为10％福尔马林，乙醇应尽量不用。
yzbaiwrote:（1）10%甲醛：对组织渗透性强，固定均匀。
对组织膨胀约5%，经酒精脱水时有较大的收缩。
能保存脂肪，不能沉淀核蛋白及白蛋白，长期用其固定的组织使组织变为酸性，不利于染色，特别是细胞核的着色。
经自来水冲洗6~24小时后，可以使其酸碱中和，并减少结晶。
（2）4%多聚甲醛：对组织穿透性好，组织收缩小，对大多数抗原物质保存较好，特别是对脂肪和各种酶的固定效果更好。
常用固定液的配制
钉于染液中，过1min后取出，使染色剂略含铁质，以增加染色性能。
静置12h后过滤于棕色瓶中备用（置于避光处）。
12.苏木精染液苏木精的配方很多，常用的有如下3种：配方Ⅰ：苏木精水溶液0.5g苏木精溶入100ml煮沸的蒸馏水中，静置24h后可使用。
配方Ⅱ：代氏苏木精（Delarfield’s haematoxylin）甲液：苏木精1g + 无水酒精6ml乙液：硫酸铝铵（铵矾）10g + 蒸馏水100ml丙液：甘油25ml + 甲醇25ml分别配制甲、乙两液，将甲液一滴滴地加入乙液中，充分搅拌后，放入广口瓶中用纱布蒙住瓶口，置于温暖和光线充足处7~10天，再加入丙液，混匀后静置1~2月，至颜色变为深紫色后，过滤备用，可长期保存。
配方Ⅲ：爱氏苏木精（Ehrlich’s haematoxylin）苏木精1g + 无水或95%酒精50ml + 蒸馏水50ml + 甘油50ml + 冰醋酸5ml + 硫酸铝钾（钾矾）3~5g。
配制时，先将苏木精溶于酒精中，然后依次加入蒸馏水、甘油和冰醋酸，最后加入研细的钾矾，边加边搅拌，直到瓶底出现钾矾结晶为止。
混合后溶液颜色呈淡红色，放入广口瓶中，用纱布封口，自然氧化1~2月，至颜色变为深红色时即可过滤备用，可长期保存。
13.席夫试剂（Schiff’s regent）将0.5g碱性品红溶入煮沸的蒸馏水，搅拌使其充分溶解。
冷却至50℃时，过滤于棕色细口瓶中，加入10ml1mol/L盐酸。
冷却至25℃左右，加入1g偏亚硫酸钾或钠（Na2S2O5或K2S2O5），振荡使其溶解，密封瓶口，置于黑暗低温处过夜。
次日检查，若染色液透明无色或呈淡茶色，即可使用。
若染色较深，可加入少量优质活性炭（0.5~2g），振荡1min，置于4℃冰箱中过夜，过滤使用。
此液配好后，应塞紧瓶塞，外包黑纸，贮藏于冰箱中。
14.硫堇染液将0.25g硫堇粉末，溶于100ml蒸馏水中，即可使用。
使用此液时。
需用微碱性自来水封片或用1%NaHCO3水溶液封片，能产生多色反应。
实验室中固定液
实验室中固定液、缓冲液配置一、固定剂大多数神经激素、肽类物质为水溶性，在用于免疫细胞化学研究之前，常需固定。
但肽类和蛋白质的物理、化学性质不同，因而对不同的固定方法或固定剂的反应也不尽相同。
某些固定剂甚至可同时破坏和/或保护同一抗原的不同抗原决定簇。
因此，在进行免疫细胞化学研究之前，很有必要了解所要研究的物质（蛋白质或肽类）的化学性质，并根据需要来选择适宜的固定剂（或固定方法）以及改进固定条件。
目前，免疫细胞化学研究中常用的固定剂仍为醛类固定剂，其中以甲醛类和戊二醛最为常用。
在此，简要介绍几种目前较为常用和推荐的固定剂，以供读者选用。
1.4%多聚甲醛-0.1mol/L磷酸缓冲液（pH7.3）试剂：多聚甲醛40g0.1mol/L磷酸缓冲液至1000ml配制方法：称取40g多聚甲醛，置于三角烧瓶中，加入500～800ml 0.1mol/L磷酸缓冲液（Phosphate Buffer以下简称PB），加热至60℃左右，持续搅拌（或磁力搅拌）使粉末完全溶解，通常需滴加少许1n NaOH才能使溶液清亮，最后补足0.1mol/L的PB于1000ml，充分混匀。
该固定剂较适于光镜免疫细胞化学研究，最好是动物经灌注固定取材后，继续浸泡固定2～24h。
另外，该固定剂较为温和，适于组织标本的较长期保存。
2.4%多聚甲醛-磷酸二氢钠/氢氧化钠试剂：A液：多聚甲醛40g蒸馏水400mlB液：Na2HPO4·2H2O16.88g蒸馏水300mlC液：NaOH 3.86g蒸馏水200m配制方法：A液最好在500ml的三角烧瓶中配制（方法同前），至多聚甲醛完全溶解后冷却待用。
注意，在溶解多聚甲醛时，要尽量避免吸入气体或溅入眼内。
B液和C液配制好后，将B液倒入C液中，混合后再加入A液，以1n NaOH或1N HCl 将pH调至7.2～7.4，最后，补充蒸馏水至1000ml充分混合，4℃冰箱保存备用。
该固定剂适于光镜和电镜免疫细胞化学研究，用于免疫电镜时，最好加入少量新鲜配制的戊二醛，使其终浓度为0.5%～1%。
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常用固定液的配制1. 福尔马林-醋酸-酒精固定液(FAA)50%或70%酒精90ml + 冰醋酸5ml + 福尔马林(37%~40%甲醛)5ml可用作固定植物的一般组织,但不适用于单细胞及丝状藻类,也不适宜作细胞学研究。
幼嫩材料用50%酒精代替70%酒精，可防止材料收缩。
若材料坚硬，可略减冰醋酸，略增福尔马林。
若材料易收缩，可稍增加冰醋酸。
久置时另加入5ml甘油以防蒸发和材料变硬。
此液又可作保存液。
固定时间最多10h。
如果用在植物胚胎的材料上，改用下面的配方，效果较好：50%酒精89ml + 冰醋酸6ml + 福尔马林5ml2. 福尔马林-丙酸-酒精固定液（FPA）福尔马林5ml + 丙酸5ml + 70%酒精90ml固定一般的植物组织，通常固定8~24h，可长久保存。
3. 酒精-醋酸-氯仿固定液（卡诺固定液，Carnoy fixative）配方Ⅰ：纯酒精3份+ 乙酸1份配方Ⅱ：纯酒精6份+乙酸1份+ 氯仿3份配方Ⅲ：甲醇6份+乙酸1份+ 氯仿3份适用于植物组织和细胞学材料，为研究细胞分裂和染色体的优良固定液。
固定时间不宜过久。
4. 酒精-福尔马林固定液福尔马林2~6（6~10）ml + 70%酒精100ml固定植物一般组织，尤其适用于萌发的花粉管的固定。
通常固定24h，亦可长久保存。
5. 酒精-福尔马林-甘油固定液95%酒精150ml + 5%福尔马林100ml + 甘油50ml此液也可长期储存材料。
6. 铬酸-醋酸固定液根据固定对象的不同，可分为强、中、弱3种配方：（1）弱液配方：10%铬酸2.5ml + 10%醋酸5ml + 蒸馏水92.5ml（2）中液配方：10%铬酸7ml + 10%醋酸10ml + 蒸馏水83ml（3）强液配方：10%铬酸10ml + 10%醋酸30ml + 蒸馏水60ml弱液配方用在固定较柔软的材料，如藻类、苔藓和蕨类的原叶体等。
固定时间较短，一般为。
1h，但藻类和蕨类的原叶体可缩短到几分钟至12~24h数小时，最长可固定中液配方用于固定根尖、茎尖、未成熟子房和胚珠等。
为了易于渗透，可在此液中加入2%的麦芽糖或尿素。
固定时间12~24h。
强液配方用于固定木质根、茎、成熟子房等。
为了易于渗透，可在此液中加入2%的麦芽糖或尿素。
固定时间12~24h或更长。
7. 铬酸-醋酸-福尔马林混合液这3种药品混合在一起所配成的各种固定液，通常称纳瓦申固定液（Nawashin fixative），简称Craf。
配方见下表：纳瓦申固定(ml)桑弗利斯纳瓦常备(ml)原(ml)Ⅰ4040401%铬酸13 15 10%铬酸8 1020 20 铬酸60 70 15 甲8冰醋酸10液79 40 40 45 75 20 蒸馏水3264 10 40 10 10 30 20 福尔马林乙液36908090607080蒸馏水甲、乙两液均为贮备液，使用之前才将二者混合。
适用于组织学和细胞学的研究材料。
柔嫩而含水多的材料，可选用Ⅰ或Ⅱ固定，坚韧而成熟的材料，可用高浓度的Ⅳ或Ⅴ，一般材料多用Ⅲ。
制作染色体和有丝分裂的纺锤体标本时，常用桑弗利斯固定液。
Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ固定液的固定时间为12~48h，桑弗利斯液固定时间为4~6h。
8. 铬酸-锇酸-醋酸固定液（Flemming fixative）强液：10%铬酸水溶液3.1ml + 2%锇酸的铬酸（2%）水溶液12ml + 10%醋酸水溶液30ml + 蒸馏水11.9ml中液：10%铬酸水溶液0.33ml + 2%锇酸的铬酸（2%）水溶液0.62ml + 10%醋酸水溶液3ml +蒸馏水6.27ml弱液：10%铬酸水溶液1.5ml + 2%锇酸的铬酸（2%）水溶液5ml + 10%醋酸水溶液1ml + 蒸馏水96.5ml 此固定液需现用现配。
固定23~48h。
可用于各种植物组织的固定。
9.Lichent's固定液此固定液适用于固定丝状藻类和真菌80ml 福尔马林5ml +冰醋酸15ml + 铬酸水溶液1%．1. 番红水溶液番红0.1g溶入蒸馏水,定溶至100ml。
用前过滤。
2. 番红乙醇溶液番红1g溶入50%（或95%）酒精,定溶至100ml。
用前过滤。
3. 固绿染液固绿0.1g溶入95%酒精，定溶至100ml。
4. 碘-碘化钾染液碘化钾溶入100ml蒸馏水，再加入1g碘，溶解后即可使用。
5. 苏丹Ⅲ（或Ⅳ）染液将0.1g苏丹Ⅲ或Ⅳ溶解在50ml丙酮中，再加入70%酒精50ml。
6.改良苯酚品红染液原液A：将3g碱性品红溶入100ml 70%酒精，此液可长期保存。
原液B：将10mlA液加入到90ml 5%苯酚水溶液中。
原液C：将55mlB液加入到6ml的冰醋酸和6ml的38%的甲醛中。
染色液：取C液20ml，加45%冰醋酸80ml，充分混匀，再加入1g山梨醇，放置14天后使用，可保存3年。
7. 间苯三酚染液将5g间苯三酚溶入100ml 95%酒精（若溶液呈黄色，即为失效）。
8. 中性红染液将0.1g中性红溶入100ml蒸馏水，用时稀释10倍。
9. 钌红染液将5~10mg钌红溶入25~50ml蒸馏水，现用现配。
10.龙胆紫染液将0.2g龙胆紫溶入100ml蒸馏水。
现常用结晶紫代替。
必要时可将医用紫药水稀释5倍后代用。
11.铁醋酸洋红染液先将100ml 45%醋酸水溶液置入200ml的锥形瓶中煮沸，移去火苗，然后慢慢地分多次加入1g 洋红粉末（切记不可一次倒入）。
待全部倒入后，再煮沸1~2min，并悬入一生锈的小铁钉于染液中，过1min后取出，使染色剂略含铁质，以增加染色性能。
静置12h后过滤于棕。
色瓶中备用（置于避光处）．12.苏木精染液苏木精的配方很多，常用的有如下3种：配方Ⅰ：苏木精水溶液0.5g苏木精溶入100ml煮沸的蒸馏水中，静置24h后可使用。
配方Ⅱ：代氏苏木精（Delarfield's haematoxylin）甲液：苏木精1g + 无水酒精6ml乙液：硫酸铝铵（铵矾）10g + 蒸馏水100ml丙液：甘油25ml + 甲醇25ml分别配制甲、乙两液，将甲液一滴滴地加入乙液中，充分搅拌后，放入广口瓶中用纱布蒙住瓶口，置于温暖和光线充足处7~10天，再加入丙液，混匀后静置1~2月，至颜色变为深紫色后，过滤备用，可长期保存。
配方Ⅲ：爱氏苏木精（Ehrlich's haematoxylin）苏木精1g + 无水或95%酒精50ml + 蒸馏水50ml + 甘油50ml + 冰醋酸5ml + 硫酸铝钾（钾矾）3~5g。
配制时，先将苏木精溶于酒精中，然后依次加入蒸馏水、甘油和冰醋酸，最后加入研细的钾矾，边加边搅拌，直到瓶底出现钾矾结晶为止。
混合后溶液颜色呈淡红色，放入广口瓶中，用纱布封口，自然氧化1~2月，至颜色变为深红色时即可过滤备用，可长期保存。
13.席夫试剂（Schiff's regent）将0.5g碱性品红溶入煮沸的蒸馏水，搅拌使其充分溶解。
冷却至50℃时，过滤于棕色细口瓶中，加入10ml1mol/L盐酸。
冷却至25℃左右，加入1g偏亚硫酸钾或钠（Na2S2O5或K2S2O5），振荡使其溶解，密封瓶口，置于黑暗低温处过夜。
次日检查，若染色液透明无色或呈淡茶色，即可使用。
若染色较深，可加入少量优质活性炭（0.5~2g），振荡1min，置于4℃冰箱中过夜，过滤使用。
此液配好后，应塞紧瓶塞，外包黑纸，贮藏于冰箱中。
14.硫堇染液将0.25g硫堇粉末，溶于100ml蒸馏水中，即可使用。
使用此液时。
需用微碱性自来水封片或用1%NaHCO3水溶液封片，能产生多色反应。
15.亚甲基蓝染液0.1g亚甲基蓝溶入100ml蒸馏水即可。
16.詹纳斯绿B（Janus green B）染液5.18g詹纳斯绿溶入100ml蒸馏水，配成饱和水溶液。
用时需稀释，稀释倍数应视材料而异。
染液(HE)曙红-苏木精17.曙红（Eosin），酸性染料，为最优良的动物细胞染料，与苏木精配合使用（复染）对动物组织进行对比染色。
苏木精的染液的配方同上。
曙红有以下配制方法：配方Ⅰ：曙红0.5g + 95%酒精100ml配方Ⅱ：曙红0.5g + 蒸馏水100ml配方Ⅲ：曙红0.5g + 95%酒精25ml +蒸馏水75ml18．蛋白胶亦称梅氏蛋白的制作将鸡蛋一个打破让蛋清流入烧杯内，用筷子充分条大雪花状泡沫，然后将它用双层纱布过滤到量筒中，经数小时或一夜，过滤出透明的蛋白液，此时再加入等量的甘油，稍稍振摇使两者混合，最后加入麝香草酚（thymol）（1:100）做防腐作用，可保存几个月到一年（4℃冰箱中）。
载玻片和盖玻片的清洗方法新载玻片的洗涤可分别将载玻片逐片投入到洗液中浸泡数小时，取出后先用自来水冲洗干净洗液，然后再用蒸馏水清洗两遍，最后投入95％酒精中备用，用时取出在玻片用干净的纱布擦干即可。
陈旧的切片标本，如再用其载玻片，可将其浸泡在肥皂水中煮30min左右，然后在热水中洗去残留的树胶及浆糊等，用清水冲洗干净放入洗液中浸1h，然后自来水冲洗干净洗液，再用蒸馏水清洗两遍，最后投入95％酒精中备用。