水杨酸含量标准曲线制备
HPLC法测定水杨酸钠注射液中水杨酸钠的含量
水杨酸钠（sodium salicylate）又名邻羟基苯甲酸钠，为 白色或微显淡红色的细微鳞片，或白色粉末及球状颗粒， 用于风湿症等。水杨酸钠注射液由水杨酸钠加适宜的抗 氧剂和金属络合物制成的灭菌水溶液。静脉注射用于马、 牛、羊、猪、犬的风湿症，是 1 种解热镇痛药。目前，查阅到 水杨酸钠相关分析研究内容均不涉及高效液相色谱法[1-6]， 仅查阅到水杨酸钠注射液的国内标准。其含量测定采用 双相滴定法。该法操作烦琐，且乙醚存在刺激性大、沸点 低、易燃等不安全性。为了避免使用乙醚对人体产生的刺 激麻醉作用及其危险性，同时提高专属性，本试验拟采用 高效液相色谱法对水杨酸钠含量进行测定，为水杨酸钠含 量的测定提供可行的方法。
(Hubei Province Institute of Veterinary Drug, Hubei Wuhan 430070)
Abstract: The experiment established a high performance liquid chromatography method to determine the content of sodium salicylate in sodium salicylate injection. An octadecylsilane-bonded silica gel column was used with wateracetonitrile-glacial acetic acid (197∶100∶3) as the mobile phase, a flow rate of 1.0 mL/min, a column temperature of 30 ℃, and a detection wavelength of 230 nm. The results show that sodium salicylate has a good linearity in the range of 25~500 mg/L, the correlation coefficient is R=0.999 7, the average recovery rate is 99.8% (n=9), and the RSD is 0.3%. The method is simple, accurate and reproducible, and can be used for the quality control of sodium salicylate injection. Key words: Sodium salicylate injection; Determination; HPLC
血浆中水杨酸的高效液相色谱法测定
血浆中水杨酸的高效液相色谱法测定一、引言在医学和生物化学领域，血液中特定成分的测定一直是至关重要的研究方向之一。
水杨酸作为一种非类固醇抗炎药，在治疗风湿性关节炎、类风湿关节炎等疾病方面有着广泛的应用。
对血浆中水杨酸含量的准确测定具有重要的临床意义。
而高效液相色谱法（HPLC）作为一种高效、灵敏的色谱分析技术，被广泛应用于药物测定、生化分析等领域。
本文将针对血浆中水杨酸的高效液相色谱法测定进行深入探讨，帮助读者全面了解该测定方法的原理、步骤和意义。
二、原理及步骤1. 水杨酸的高效液相色谱法测定原理水杨酸作为一种有机酸，具有较好的紫外吸收性。
高效液相色谱法常常利用紫外检测器进行检测。
色谱柱上填充的固定相与流动相相互作用，能够使水杨酸在流动相中的分离和检测成为可能。
在血浆样品预处理后，使用高效液相色谱法进行分析，可以快速、准确地测定血浆中水杨酸的含量。
2. 测定步骤（1）样品准备：取一定量的血浆样品，进行蛋白沉淀和提取处理，得到水杨酸的纯净样品。
（2）色谱条件设置：选择合适的高效液相色谱仪和色谱柱，设置合适的流动相和检测波长。
（3）色谱分析：将经过处理的样品注入色谱仪进行分析，记录色谱峰的出现和峰面积。
（4）数据处理：根据色谱峰面积和标准曲线，计算出血浆中水杨酸的含量。
三、实验意义血浆中水杨酸的高效液相色谱法测定在药物治疗监测、临床研究等方面具有重要意义。
通过该方法可以精确测定血浆中水杨酸的浓度，帮助医生调整药物剂量，监测药物代谢过程，并进行药物动力学研究。
该方法也为药物研发和临床药理学研究提供了技术支持和检测手段。
四、个人观点和理解高效液相色谱法作为一种强大的分析技术，不仅可以应用于药物测定，还可以应用于环境检测、生化分析等多个领域。
血浆中水杨酸的测定方法可以说是其中的一个典型应用，其高灵敏度、高分辨率和高准确性为基于色谱分析的研究工作提供了有力支持。
该方法也在一定程度上推动了药物治疗和临床研究的进行，对于促进医学科学的发展起到了积极的作用。
复方纳米粒中庆大霉素与水杨酸含量测定
置１６组不同浓度的庆大霉素溶液，在５２９ Ｉｌｍ处测 定吸光度，得到的标准曲线为Ｙ＝０．０１８８ｘ＋０．
０１７７５，Ｒ＝０．９８７２４，检测浓度的线性范围均为ｌ
一１６ ｍｓ／ｍＬ。
２结果与讨论 在纳米粒的制备过程中，由于投药量小，经
过离心后上清液中庆大霉素和水杨酸含量都很小； 差示分光光度法操作简便，标准曲线线性良好， 上清液中庆大霉素与水杨酸的含量在其线性范围 内，精密度与回收率实验结果也表明了这种检测 方法是可行。在比色法测定庆大霉素的标准曲线 过程中，测定了１６组供试品，当庆大霉素的浓度 为８ ｒｎｇ，ｍＬ时吸光度仅为０．１６８；由于吸光度低而 增大了误差，其拟合系数与差示分光光度法中标 准曲线拟合系数相比偏小；因此在上清液中庆大 霉素与水杨酸的含量范围内很难用比色法进行精 确测定两者的含量。所以差示分光光度法是更适 合测定庆大霉素／水杨酸／壳聚糖复方纳米粒的包 封率。
庆大霉素，水杨酸／壳聚糖复方纳米粒稳定性 好，粘膜吸附性强，体外实验表明此复方纳米粒 能同时缓释释放庆大霉素和水杨酸，可望达到降 低庆大霉素耳毒性的作用。包封率是纳米粒的重 要表征之一，高速离心法是测定包封率的常用方 法，一般是将纳米粒经高速离心，再测定其上清 液中药物（庆大霉素和水杨酸）的含量。庆大霉素
在磷酸盐缓冲液于２４８砌处有最大吸收峰；水杨
酸在２９７ ａｍ和２３２ ｎｍ处有强吸收，但水杨酸在 ２３２ ｎｍ的强吸收对２４８ ｎｌｎ处的庆大霉素的最大吸 收有严重干扰，这样就对准确测定庆大霉素带来 一定的难度。
目前测定庆大霉素含量的方法有紫外吸收法、 比色法、高效液相色谱法、旋光法、微生物检定 法。其中微生物检定法的操作繁琐，用时长，费用 高；高效液相法需要对庆大霉素进行衍生化，并 且壳聚糖可能对色谱柱造成损害；壳聚糖属于多 糖类物质同样具有旋光性，所以旋光法也不是一 种良好的方法。本实验分别采用比色法与紫外差 示分光光度法对上清液中庆大霉素的含量进行了 测定，并对此两种方法进行了分析对比。 １实验部分 １．１试剂与仪器
水杨酸的制备
水杨酸的制备一、水杨酸的概述水杨酸是一种有机化合物，化学式为C7H6O3，具有白色结晶状或粉末状，具有特殊的气味和味道。
水杨酸是从柳树皮中提取的天然产物，也可以通过人工合成得到。
水杨酸在医药、化妆品、食品等领域有广泛的应用。
二、水杨酸的制备方法1. 柳树皮法制备水杨酸将干燥的柳树皮切碎，放入加热器中进行蒸馏。
蒸馏过程中，通过冷凝器冷却收集蒸发出来的液体。
经过多次蒸馏和结晶分离得到纯度较高的水杨酸。
2. 合成法制备水杨酸（1）苯基羧酸重排法：将苯甲酸与氢氧化钠或碱金属盐混合加热至高温，使其发生重排反应生成水杨酸。
（2）菲嗪法：将苯环上带有硝基（NO2）官能团的菲嗪与碳酸钠反应，经过还原和酸化，得到水杨酸。
（3）萘酚法：将萘和氧化剂反应生成萘酚，再将其与碳酸钠反应，经过还原和酸化，得到水杨酸。
三、柳树皮法制备水杨酸的具体步骤1. 搜集柳树皮：选择生长在无污染的环境中的柳树，在春季或秋季采集其干燥的树皮。
2. 切碎柳树皮：将采集到的柳树皮切成小块或碾成粉末状。
3. 蒸馏提取：将切碎的柳树皮放入加热器中进行蒸馏。
蒸馏过程中，通过冷凝器冷却收集蒸发出来的液体。
经过多次蒸馏和结晶分离得到纯度较高的水杨酸。
4. 纯化处理：将得到的水杨酸进行纯化处理，去除其中的杂质和不纯物质。
可以使用重结晶、溶剂萃取等方法进行纯化处理。
四、合成法制备水杨酸的具体步骤1. 苯基羧酸重排法制备水杨酸的步骤：（1）将苯甲酸与氢氧化钠或碱金属盐混合加热至高温。
（2）使其发生重排反应生成水杨酸。
（3）通过结晶分离、过滤等方法得到纯度较高的水杨酸。
2. 菲嗪法制备水杨酸的步骤：（1）将苯环上带有硝基（NO2）官能团的菲嗪与碳酸钠反应，生成菲嗪-碳酸钠盐。
（2）经过还原和酸化，得到水杨酸。
（3）通过结晶分离、过滤等方法得到纯度较高的水杨酸。
3. 萘酚法制备水杨酸的步骤：（1）将萘和氧化剂反应生成萘酚。
（2）将萘-萘氢氧化物与碳酸钠反应，生成碳酸盐。
实验一-乙酰水杨酸的合成
实验一、乙酰水杨酸(阿司匹林)的合成、鉴定与含量的测定一、实验目的(1) 学习O-酰化〔酯化〕单元反应的特点和基本知识。
(2) 了解阿司匹林的性质和工业制法，掌握O-酰化制备阿司匹林的实验方法。
(3) 掌握水杨酸酰化反应的原理及实验操作以及乙酰水杨酸的鉴定、提纯及含量测定的方法。
(4)了解紫外光谱法、红外光谱法、核磁共振法在有机合成中的应用，掌握紫外-可见分光光度法定量分析的基本原理和实验技术。
(5) 进一步熟悉基础化学实验的重结晶及熔点测定等基本操作。
二、实验原理乙酰水杨酸〔acetyl Salicylic acid 〕，通常也称为阿司匹林(aspirin)，是由水杨酸(邻羟基苯甲酸)和乙酸酐合成的。
早在18世纪，人们已从柳树皮中提取了水杨酸，并注意到它可以作为止痛、退热和抗炎药，不过对肠胃刺激作用较大。
19世纪末，人们成功地合成了乙酰水杨酸，直到目前，阿司匹林仍然是一个广泛的具有解热镇痛作用的药物。
水杨酸是一个具有酚羟基和羧基双官能团化合物，能进行两种不同的酯化反应，当与乙酸酐作用时，可以得到乙酰水杨酸〔即阿司匹林〕；如与过量的甲醇反应，生成水杨酸甲酯，它是第一个作为冬青树的香味成分被发现的，因此通称为冬青油。
本实验将进行前一个反应的试验。
反应式:COOHOH +(CH 3CO)2H SO COOHOCCH 3O +CH 3COOH在生成乙酰水杨酸的同时，水杨酸分子之间可以发生酯化反应，生成少量的聚合酯: COOHOH n +C O O OC O OC OO+H 2O乙酰水杨酸能与NaHCO 3反应生成水溶性钠盐，而副产物聚合酯不能溶于NaHCO 3，这种性质上的差异可用于阿司匹林的纯化。
可能存在于最终产物中的杂质是水杨酸本身，这是由于乙酰化反应不完全或由于产物在别离步骤中发生水解造成的。
它可以在各步纯化过程和产物的重结晶过程中被除去，与大多数酚类化合物一样，水杨酸可与FeCl 3，形成深色配〔络〕合物，而阿司匹林因酚羟基已被酰化，不再与FeCl 3发生颜色反应，因而未作用的水杨酸很容易被检出。
超高效液相色谱法测定人体血浆中水杨酸含量的方法学研究
超高效液相色谱法测定人体血浆中水杨酸含量的方法学研究董晓茜;夏素霞;邢天舒;唐思;张世良;王月敏【摘要】目的:建立人体血浆中水杨酸含量的超高效液相色谱(ultra performance liquid chromatography,UPLC)测定方法.方法:采用Waters Spursil C18(100 mm×2.10 mm,3μm)色谱柱;乙腈∶水(含0.2％磷酸)=20.7∶79.3为流动相,用前经0.22 μm的滤膜过滤,超声脱气;流速为0.3 ml/min;检测波长为304 nm;柱温为35℃,进样量5μl.结果:此方法最低检测浓度为0.018 mg/L,线性范围为0.018 ～28.200 mg/L,方法平均回收率在95.52％～104.63％,日内及日间精密度的相对标准差均＜10％.结论:该方法简便、快速、重现性好,可用于临床血药浓度监测和复方制剂的药代动力学和生物利用度研究.【期刊名称】《沈阳医学院学报》【年(卷),期】2012(014)002【总页数】3页(P93-95)【关键词】超高效液相色谱法;水杨酸;血浆【作者】董晓茜;夏素霞;邢天舒;唐思;张世良;王月敏【作者单位】辽宁省中医药研究院临床药理实验室,辽宁沈阳110034;辽宁省中医药研究院临床药理实验室,辽宁沈阳110034;辽宁中医药大学门诊部;辽宁省中医药研究院临床药理实验室,辽宁沈阳110034;辽宁省中医药研究院临床药理实验室,辽宁沈阳110034;辽宁省中医药研究院临床药理实验室,辽宁沈阳110034【正文语种】中文【中图分类】R969.4铝镁司片主要成分阿司匹林。
由于阿司匹林口服后在体内很快转化为其活性代谢产物水杨酸，故在进行阿司匹林的血药浓度研究时大多测定血浆中水杨酸的浓度［1］。
根据文献［2－4］，人体血浆中水杨酸的测定的方法包括HPLC、LC-MS/MS、GC-MS等，考虑到HPLC法保留时间长，LC-MS/MS重复性不好，GC-MS操作繁琐。
水杨酸软膏和凝胶剂的体外释药及其经皮吸收实验
实验三十三水杨酸软膏和凝胶剂的体外释药及其经皮吸收实验一、目的和要求1．了解软膏及凝胶基质对药物释放的影响。
2．熟悉测定软膏剂和凝胶剂体外经皮渗透的方法。
3．熟悉药物经皮渗透量及渗透速率参数的计算方法。
二、实验药品与器材药品水杨酸；硬脂酸，单硬质酸甘油酯，白凡士林，羊毛脂，三乙醇胺，吐温80，羧甲基纤维素钠，卡波普，羟丙甲纤维素（HPMC），甘油。
器材752-紫外线分光光度计，智能透皮实验仪TP-2A（南京红蓝电子科技中心），微孔滤膜（0.8μm），试管（10ml），注射器（5ml），吸量管（1ml），挂道，手术剪，手术镊，蒸发皿。
实验动物与试剂小白鼠（体重18～25g）。
6%Na2S（脱毛剂），硫酸铁胺显色剂，淀粉等。
三、实验内容（一）软膏剂和凝胶剂处方及制备过程处方1（O/W包型乳剂基质）水杨酸 2.0g硬酯酸 4.8g单硬脂酸甘油酯 1.4g白凡士林 2.4g羊毛脂0.4g三乙醇胺0.16g吐温800.04g纯化水加至50g制备以硬脂酸、单硬脂酸甘油酯、白凡士林、羊毛脂为油相，于蒸发皿中，置水浴加热至80℃左右；另将三乙醇胺、吐温80、纯化水加至烧杯中，于水浴加热至80℃左右。
等温下将水相缓缓倒入油相，并在水浴上反应5～10min，然后室温下不断搅拌至乳白色半固体基质形成，分次加入水杨酸，研磨混匀。
处方2（水溶性基质）水杨酸 1.3g羧甲基纤维素钠 1.2g甘油 3.0g纯化水加水20g制备工艺将CMC-Na置乳钵中，加入适量纯化水溶胀片刻，研磨均匀，加入甘油适量，研匀。
称取水杨酸适量用水溶解，然后分次加入至上述基质中，研磨混匀即可。
处方3（凝胶基质1）处方4（凝胶基质2）水杨酸5%水杨酸5%羟丙甲纤维素14%羟丙甲纤维素28%卡波普97128%卡波普97114%丙二醇QS丙二醇QS纯化水QS纯化水QS凝胶剂的制备将卡波普、羟丙甲纤维素（HPMC）分别用纯化水浸泡，三乙醇胺调节卡波普溶液的pH至5～6，卡波普与HPMC以2∶1或1∶2比例混合均匀，加入适量丙二醇，置乳钵中研磨均匀得凝胶基质。
HPLC法测定三种制剂中水杨酸的含量
HPLC法测定三种制剂中水杨酸的含量白林;蔡乐;徐风华;王欢欢【摘要】目的：建立测定三种制剂（水杨酸软膏、水杨酸硫软膏、复方硫软膏）中水杨酸含量的方法。
方法：采用HPLC法，色谱柱：Diamonsil C18（250 mm ×4.6 mm，5μm）；流动相：甲醇-0.1 mol·L-1磷酸二氢钠（30：70）；检测波长：231 nm；流速：1.0 mL·min-1；柱温：35℃；进样量：10μL。
结果：水杨酸与其它杂质峰分离良好，水杨酸在12.32~123.20μg·mL-1范围内与峰面积呈良好的线性关系（r =1.0000）；水杨酸在水杨酸软膏、水杨酸硫软膏、复方硫软膏的平均回收率分别为100.55%、99.96%、99.13%，RSD分别为0.95%（n=9）、0.96%（n=9）、1.15%（n=9）。
结论：采用该方法测定三种制剂中的水杨酸含量，简便易行，结果准确，可作为三种制剂中水杨酸的质量控制方法。
%Objective:To establish the HPLC method for determining the content of salicylic acid in three preparations (salicylic acid ointment, salicylic acid and sulfur ointment, compound sulfur sublimate ointment). Methods:HPLC analysis was carried out with Diamonsil C18 column (250 m m × 4.6 mm, 5 μm), the mobile phase consisted of methanol-0.1 mol·L-1 sodium dihydrophosphate solution (30 : 70), the detection wavelength was set at 231 nm, the flow rate was 1.0 mL·min-1, the column temperature was35℃and the sample size was 10μL. Result s: The sample was separated well from impurities by this HPLC method. The calibration curve of salicylic acid was linear in the range of 12.32-123.20μg·mL-1 (r=1.000 0). The average recoveries and the RSD of salicylic acid were 100.55%and 0.95%(n=9) inthe salicylic acid ointment, 99.96%and 0.96%(n=9) in the salicylic acid andsulfur ointment, 99.13%and 1.15%(n=9) in sulfur sublimate ointment, respectively. Conclusion:This method is accurate and feasible, which can be applied as the quantitative method for the determination of salicylic acid in three preparations.【期刊名称】《中国药物应用与监测》【年(卷),期】2014(000)005【总页数】3页(P283-285)【关键词】高效液相色谱法;制剂;水杨酸;含量测定【作者】白林;蔡乐;徐风华;王欢欢【作者单位】解放军总医院药品保障中心，北京 100853;解放军总医院药品保障中心，北京 100853;解放军总医院药品保障中心，北京 100853;解放军总医院药品保障中心，北京 100853【正文语种】中文【中图分类】R917水杨酸软膏、水杨酸硫软膏、复方硫软膏收载于《中国人民解放军医疗机构制剂规范》[1]，三种制剂处方中均含有水杨酸，其共同的特点是抗真菌、止痒，常用于皮肤癣症、真菌感染及皮炎湿疹等。
水杨酸半衰期的实验报告
一、实验目的1. 了解生物半衰期的概念和测定方法；2. 掌握水杨酸半衰期的测定原理；3. 培养实验操作技能，提高实验数据分析能力。
二、实验原理生物半衰期（t1/2）是描述药物在体内消除的重要参数，定义为药物在生物体内消除一半所需要的时间。
大多数药物遵循一级消除动力学规律（定比消除），其半衰期t1/2为恒定值。
本实验通过测定水杨酸在动物体内的血浆浓度，结合给药剂量和给药时间，计算水杨酸的生物半衰期t1/2值。
水杨酸在酸性条件下生成水杨酸，水杨酸与三氯化铁反应生成一种紫色络合物。
通过测定520nm处吸光度值，可以计算得到水杨酸的浓度。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：- 水杨酸钠溶液- 水杨酸钠标准液- 三氯醋酸- 三氯化铁- 肝素溶液- 蒸馏水- 动物（如小鼠）2. 实验仪器：- 721分光光度计- 比色杯- 离心机- 涡旋混合器- 天平- 动脉插管- 试管- 注射器- 刻度吸量管- 洗耳球- 记号笔四、实验步骤1. 动物准备：选择健康小鼠，称重，麻醉后进行颈动脉插管，建立循环系统。
2. 给药：将水杨酸钠溶液注入小鼠体内，剂量根据动物体重和实验要求确定。
3. 样本采集：在给药后不同时间点（如0.5小时、1小时、2小时、4小时、6小时、8小时、12小时）采集动脉血，将血液注入含有肝素溶液的试管中，防止凝固。
4. 血浆分离：将采集到的血液在离心机上离心，分离出血浆。
5. 水杨酸浓度测定：取一定量的血浆，加入三氯醋酸和三氯化铁溶液，充分混匀，在520nm波长下测定吸光度值。
6. 数据处理：根据标准曲线计算水杨酸浓度，结合给药剂量和给药时间，计算水杨酸生物半衰期t1/2值。
五、实验结果与分析1. 标准曲线绘制：以水杨酸钠标准液浓度为横坐标，吸光度值为纵坐标，绘制标准曲线。
2. 水杨酸浓度计算：根据实验测得的吸光度值，从标准曲线上查得水杨酸浓度。
3. 生物半衰期计算：根据水杨酸浓度和时间的关系，计算水杨酸生物半衰期t1/2值。
阿司匹林中乙酰水杨酸和水杨酸含量的测定(正式)
09级临床药学唐辰逍0929014、彭文星0929012、邸宣0929009
一、实验目的
1．掌握用紫外可见分光光度法测定药物中乙酰水杨酸的方法。
2．学会使用UV-2550紫外-可见分光光度计。
二、实验原理
阿司匹林是解热镇痛药，主要成分为乙酰水杨酸，摩尔质量180.16g/mol。阿司匹林少量水解成水杨酸，因而在阿司匹林样品中混有少量水杨酸。
本实验采用双波长法和校正曲线法。水杨酸干扰阿司匹林的吸光度测定，在选定的两波长下测定吸光度差值。配制一系列浓度不同的标准阿司匹林溶液，在测定条件相同的情况下，分别测定其在两个波长下的吸光度，以标准浓度为横坐标，以相应吸光度差值为纵坐标，绘制△A-C关系图，在相同条件下测出试样在两波长处的吸光度，可从校正曲线上查出试样液的浓度。
0.4188
C
40.24
60.36
80.48
100.6
120.72
x
2．标准曲线（△A-C关系图）
第一次测量
第二次测量
3．利用第一次测量得出的曲线，根据样品的吸光度值，在标准曲线上找到相应的浓度94.37μl/ml。
因样品稀释10倍，故原样品溶液浓度为943.7μl/ml=0.9437mg/ml。
故样品中阿司匹林的质量为0.9437*50=47.185mg。
样品溶液的配置：取1片阿司匹林研细，加入无水乙醇1~2ml分次研磨，使溶解。利用滤膜过滤后转入50ml容量瓶中，充分振摇，乙醇定容（浓度：800μl/ml）。取1ml定容后的样品溶液，转入10ml容量瓶，乙醇定容。配置成约为80μl/ml的样品溶液。
2.波长选择
使用紫外-可见分光光度计，先用95%乙醇进行基线校正。用阿司匹林标准品3和稀释过的水杨酸标准品进行光谱测量。将扫描波长范围定在200-400nm，分别找出两者的最大吸收峰。阿司匹林标准品在277.5nm、235.0nm处有最大吸收峰。因在277.5nm处，阿司匹林、水杨酸均有吸收，故采用双波长法。以277.5nm为λ1，从水杨酸的光谱中找到与277.5nm处A值相等的点所对应的波长值λ2=320nm。
紫外分光光度法测定水杨酸的含量
技能训练1 紫外分光光度法测定水杨酸的含量一、实验目的1、掌握紫外可见分光光度计的使用及维护方法。
2、学会分光光度法测定水杨酸含量的原理和方法。
二、实验原理水杨酸水溶液无色，在紫外光区有吸收，吸收峰位于230nm，因此，可采用紫外分光光度法测定其含量。
三、仪器与试剂仪器：紫外-可见分光光度计、容量瓶(50mL)8个、容量瓶(100mL)3个、吸量管（10mL) 1支、移液管（10mL）2支、移液管（25mL）1支、石英吸收池试剂：水杨酸标准溶液(1mg/mL)、水杨酸试样<50μg/mL四、实验步骤1、标准溶液的配制:准确吸取10mL1mg/mL水杨酸标准溶液，于100mL容量瓶中，配制成100μg/mL水杨酸标准溶液；再分别取0、2.00、4.00、6.00、8.00、10.00mL 100μg/mL水杨酸标准溶液于6个50mL容量瓶中，稀释成一系列不同浓度的标准溶液（0～20μg/mL）。
2、吸收曲线的绘制:用8μg/mL或12μg/mL标准溶液，以蒸馏水为参比，于波长210～350nm范围内测定吸光度，作吸收曲线，从曲线上查得最大吸收波长（230nm附近）。
注：波长间隔在210～350nm范围内每隔5nm测定一个数值，在最大吸收波长±5nm范围内每隔1nm测定一个数值。
3、标准曲线的绘制:以蒸馏水为参比，于最大吸收波长处分别测定标准溶液的吸光度，然后以浓度为横坐标，以相应的吸光度为纵坐标绘制出标准曲线。
4、水杨酸试样的测定:取适量的水杨酸试样溶液用蒸馏水进行稀释（稀释倍数由参赛选手自行确定），以蒸馏水为参比，于最大吸收波长处测定试样的吸光度，从标准曲线查出试样的浓度，平行测定两次。
1、吸收曲线的绘制与测定波长的选择结论：λmax=________ nm2、标准曲线的绘制与样品溶液的测定利用上述数据绘制标准曲线，从标准曲线上查出试液浓度，并计算出原始试样的浓度。
技能训练2 邻二氮菲分光光度法测定水样中铁含量1、进一步学会使用分光光度计。
紫外分光度法测水杨酸
紫外吸收光谱法测定APC 片剂中乙酰水杨酸的含量一、实验目的1、了解7500型紫外－可见分光光度计的性能、结构及其使用方法。
2、掌握紫外－可见分光光度法定量分析的基本原理和实验技术。
二、方法原理APC 药片，研磨成粉末，用稀NaOH 水溶液溶解提取，乙酰水杨酸水解成水杨酸钠进入水溶液，该提取液在295nm 左右有一个吸收峰，测出稀释成一定浓度的提取液的吸光度值，并用已知浓度的水杨酸的NaOH 水溶液做出一条标准曲线，则可从标准曲线上求出相当于乙酰水杨酸的含量。
根据两者的分子量，即可求得APC 中乙酰水杨酸的含量。
溶剂和其他成分不干扰测定。
COOH OC +COO CH 3O +C 3O C H O OH 3+H O 22乙酰水杨酸浓度=[水杨酸浓度]×12.13815.180 三、仪器和试剂仪器 天美7500或岛津240紫外—可见分光光度计；3G 玻璃砂芯漏斗1个；抽滤瓶250mL 1个；容量瓶250mL 1支；50mL 7支；胖肚吸量管20mL 1只；刻度吸量管5mL 2只。
试剂 0.5000mg ·mL -1水杨酸贮备液：称取0.5000g 水杨酸先溶于少量0.10moL ·L -1NaOH 溶液中，然后用蒸馏水定容于1000mL 容量瓶中；0.10moL ·L -1 NaOH 溶液。
四、实验内容1、将七个50mL 容量瓶按0-6依次编号。
分别移取水杨酸储备液0.00、1.00、2.00、3.00、4.00、5.00mL 于相应编号容量瓶中，各加入1.0mL 0.10moL ·L -1NaOH 溶液，先用蒸馏水稀释至30mL 左右，80℃水浴加热10分钟，冷却至室温，稀释至刻度，摇匀。
2、放一片APC 药片在清洁的50mL 烧杯中，加2.0mL0.10moL ·L -1 NaOH 先溶胀,再用玻棒搅拌溶解。
在玻璃砂芯漏斗中先放入一张滤纸，用玻璃砂芯漏斗定量地转移烧杯中的内含物，用10mL 的0.1MNaOH 淋洗烧杯和玻璃砂芯漏斗2次(共20mL)，20mL 蒸馏水淋洗漏斗4次(共80mL)，并将滤液收集于同一个250mL 容量瓶中，最后用蒸馏水稀释至刻度，摇匀。
荧光法测定水杨酸片中水杨酸的含量
第４１卷第２期吉林师范大学学报(自然科学版)Ｖｏｌ.４１ꎬＮｏ.２㊀２０２０年５月ＪｏｕｒｎａｌｏｆＪｉｌｉｎＮｏｒｍａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ(ＮａｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅＥｄｉｔｉｏｎ)Ｍａｙꎬ２０２０收稿日期:２０２０￣０２￣２７基金项目:国家青年自然科学基金项目(５１６０９１００)ꎻ吉林省科技发展计划项目(２０１６０１０１２８７ＪＣ)第一作者简介:孙艳涛(１９７９ )ꎬ女ꎬ吉林省辽源市人ꎬ教授ꎬ博士ꎬ硕士生导师.研究方向:色谱与光谱分析.ｄｏｉ:１０.１６８６２/ｊ.ｃｎｋｉ.ｉｓｓｎ１６７４￣３８７３.２０２０.０２.０１１荧光法测定水杨酸片中水杨酸的含量孙艳涛１ꎬ李美锡１ꎬ刘仕聪１ꎬ李㊀林１ꎬ刘㊀洋２(１.吉林师范大学化学学院ꎬ吉林四平１３６０００ꎻ２.吉林师范大学物理学院ꎬ吉林四平１３６０００)摘㊀要:利用荧光法测定水杨酸片中水杨酸的含量.用甲醇作为水杨酸的溶剂ꎬ对溶液的酸碱性㊁稳定性及其线性范围等条件进行了考察.结果表明ꎬ水杨酸含量在(０.３８７~１.９３５)ˑ１０－８ｍｏｌ Ｌ－１范围内具有良好的线性关ꎬ水杨酸片中水杨酸的含量为１.６３６ˑ１０－８ｍｏｌ Ｌ－１.关键词:荧光法ꎻ水杨酸ꎻ含量测定中图分类号:Ｏ６５㊀㊀文献标志码:Ａ㊀㊀文章编号:１６７４￣３８７３￣(２０２０)０２￣００８３￣０６㊀㊀水杨酸(其结构如图１所示)是一种天然的消炎药ꎬ可以祛角质㊁杀菌㊁消炎等ꎬ因而在消炎等需求的用药及化妆品中都含有适量的水杨酸.复方水杨酸片㊁阿司匹林㊁复方乙酰水杨酸片及尼美舒利等含水杨酸的制剂作为医院的处方药应用广泛[１￣６].文献报道制剂中水杨酸含量的测定方法主要有荧光光谱法ꎬ电位滴定法ꎬ紫外￣可见分光光度法ꎬ库伦滴定法及高相液相色谱法[７￣１１].荧光分光光度测定法具有灵敏度高㊁选择性强㊁用量少和方法简便等优点[１２￣１３]ꎬ常用于有机物和无机物的定性定量分析.本实验利用荧光光谱法考察了水杨酸片中水杨酸的含量.ＯＨＯ ＯＨ图１㊀水杨酸的结构式Ｆｉｇ.１㊀Ｍｏｌｅｃｕｌａｒｓｔｒｕｃｔｕｒｅｏｆｓａｌｉｃｙｌｉｃａｃｉｄ１㊀实验１.１㊀仪器与试剂１.１.１㊀仪器ＰＥＬＳ￣５５型荧光光谱仪ꎬｐＨＳ￣３Ｃ数字酸度计ꎬＳｈｉｍａｄｚｕＵＶ￣２５５０型紫外分光光度计ꎬＳＫ５２００Ｈ超声波清洗器ꎬＢＴ１２５Ｄ十万分之一电子天平ꎬ可调式移液器.１.１.２㊀试剂水杨酸片ꎬ水杨酸标准品ꎬ甲醇(色谱纯)ꎬ冰醋酸(分析纯)ꎬ氯仿(分析纯)ꎬ实验用水(二次蒸馏水).４８吉林师范大学学报(自然科学版)第４１卷１.２㊀配制溶液１.２.１㊀样品溶液的配制准确称取水杨酸片粉末０.００２１０ｇ于１０ｍＬ的容量瓶中ꎬ用甲醇定容ꎬ超声１５ｍｉｎꎬ配制成１.５２２ˑ１０－６ｍｏｌ Ｌ－１的水杨酸片溶液.１.２.２㊀标准品溶液的配制准确称取水杨酸标准品０.００２６７ｇ于１０ｍＬ的容量瓶中ꎬ用甲醇定容ꎬ超声１５ｍｉｎꎬ配制成１.９３５ˑ１０－６ｍｏｌ Ｌ－１的水杨酸标准品溶液ꎬ使用时适当稀释.１.３㊀设置参数１.３.１㊀二维荧光光谱参数将激发光谱范围设置为３１０~６００ｎｍꎬ发射和激发的狭缝均设为１５.０ｎｍꎬ荧光波长设为３０１ｎｍꎬ扫描速度设为１０００ｎｍ ｍｉｎ－１.１.３.２㊀三维荧光光谱参数激发波长设置为２００~４００ｎｍꎬ发射波长设置为３１０~６００ｎｍꎬ发射和激发的狭缝均设为１５.０ｎｍꎬ扫描步长设为１０ｎｍꎬ扫描次数设为２０次ꎬ扫描速度设为１０００ｎｍ ｍｉｎ－１[１３].１.４㊀优化条件１.４.１㊀溶剂的考察准确移取４份３０μＬ水杨酸标准溶液ꎬ分别加入甲醇㊁１％醋酸￣甲醇溶液㊁氯仿和１％醋酸￣氯仿不同溶剂ꎬ总体积为３.５ｍＬ.１.４.２㊀酸度的考察准确移取２０μＬ水杨酸标准溶液和１０μＬ不同ｐＨ值的缓冲液ꎬ配制１.１０５６ˑ１０－５ｍｏｌ Ｌ－１的水杨酸标准溶液.配制三组平行样ꎬ考察荧光强度随溶液酸度的变化情况.１.４.３㊀稳定性的考察分别准确移取２份２０μＬ水杨酸标准溶液配制成浓度为１.１０５６ˑ１０－５ｍｏｌ Ｌ－１的水杨酸溶液.在密封㊁避光和干燥条件下ꎬ考察其荧光强度在４８ｈ内的变化情况.１.５㊀绘制标准曲线分别准确移取１００㊁３００㊁５００㊁７００㊁９００和１０００μＬ的水杨酸标准溶液ꎬ用甲醇稀释配制成３ｍＬ一系列不同浓度的水杨酸标准溶液并进行检测ꎬ绘制纵坐标为荧光强度(Ｆ)ꎬ横坐标为浓度(ｃ)的标准曲线.２㊀结果与讨论２.１㊀溶剂的选择水杨酸易溶于醇类试剂ꎬ实验考察了四种溶剂分别是甲醇㊁１％醋酸￣甲醇㊁氯仿和１％醋酸￣氯仿.图２为上述不同溶剂中水杨酸的二维荧光光谱.从图２可知不同溶剂中水杨酸的激发和发射光谱形状略有不同ꎬ以甲醇作为溶剂ꎬ从图２(Ａ)中可知水杨酸的荧光强度为７２５ꎻ以氯仿作溶剂ꎬ从图２(Ｃ)中观察到水杨酸的最大发射波长发生蓝移ꎬ且其荧光强度为２４０ꎻ以１％醋酸￣甲醇和１％醋酸￣氯仿作为溶剂的水杨酸最大发射波长发生红移ꎬ荧光强度分别为１７７和１２８.由此可知ꎬ使用甲醇作溶剂ꎬ水杨酸的荧光性质稳定ꎬ强度较大.２.２㊀二维荧光光谱利用紫外分光光度计测得３０３ｎｍ为水杨酸的最大吸收波长ꎬ将激发波长设为３０３ｎｍꎬ在３００~６００ｎｍ范围内绘制水杨酸的发射光谱ꎬ确定４３０ｎｍ为其最大发射波长.将发射波长设置为４３０ｎｍꎬ在２００~４３０ｎｍ范围内绘制水杨酸的激发光谱ꎬ确定其具有两个激发波长分别为２１０ｎｍ和３０３ｎｍ.再分别以２１０ｎｍ和３０３ｎｍ作为激发波长ꎬ绘制其发射波长ꎬ确定其最大发射波长分别为４０５ｎｍ和３９８ｎｍꎬ结果见图３.最终选择荧光强度最大的发射波长４０５ｎｍ作为测量波长.第２期孙艳涛ꎬ等:光法测定水杨酸片中水杨酸的含量㊀㊀(Ａ)甲醇ꎻ(Ｂ)１％醋酸￣甲醇ꎻ(Ｃ)氯仿ꎻ(Ｄ)１％醋酸￣氯仿图２㊀不同溶剂中水杨酸的二维荧光光谱Ｆｉｇ.２㊀Ｔｗｏ￣ｄｉｍｅｎｓｉｏｎａｌｄｉａｇｒａｍｏｆｓａｌｉｃｙｌｉｃａｃｉｄｉｎｔｈｅｄｉｆｆｅｒｅｎｔｓｏｌｖｅｎｔｓ(Ｅｘ１＝３０３ｎｍꎬＥｘ２＝２１０ｎｍꎬＥｍ１＝４０５ｎｍꎬＥｍ２＝３９８ｎｍ)图３㊀水杨酸的二维图Ｆｉｇ.３㊀Ｔｗｏ￣ｄｉｍｅｎｓｉｏｎａｌｄｉａｇｒａｍｏｆｓａｌｉｃｙｌｉｃａｃｉｄ２.３㊀三维荧光光谱三维荧光光谱图具有高的选择性ꎬ由于其坐标比二维的平面图多一个ꎬ故可用于多组份混合物的分析[１４].水杨酸的三维荧光光谱如图４所示ꎬ其激发波长有两个ꎬ分别为３０３ｎｍ和２１０ｎｍꎬ对应的发射波长分别为４０５ｎｍ和３９８ｎｍꎬ与二维荧光光谱所得信息一致.５８吉林师范大学学报(自然科学版)第４１卷图４㊀水杨酸的三维图Ｆｉｇ.４㊀Ｔｈｒｅｅ￣ｄｉｍｅｎｓｉｏｎａｌｄｉａｇｒａｍｏｆｓａｌｉｃｙｌｉｃａｃｉｄ２.４㊀酸度的影响实验考虑了溶液酸度对水杨酸的影响.图５为１５种不同ｐＨ条件下的水杨酸溶液的荧光变化趋势ꎬ每组数据平行测定三组.图中可以看出酸性越强水杨酸的荧光强度越弱ꎬ碱性越强荧光强度越强ꎬ但显碱性的溶液中出现了白色絮状物ꎬ证明其性质有所改变ꎬ因此实验选择在中性条件下进行测定.图５㊀不同ｐＨ下水杨酸的荧光强度Ｆｉｇ.５㊀ＦｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅｉｎｔｅｎｓｉｔｙｏｆｓａｌｉｃｙｌｉｃａｃｉｄａｔｄｉｆｆｅｒｅｎｔｐＨｖａｌｕｅｓ代表性酸度条件下(分别为ｐＨ＝２.３㊁ｐＨ＝７.０㊁ｐＨ＝１３.０)水杨酸的三维荧光光谱图如图６所示.㊀６８第２期孙艳涛ꎬ等:光法测定水杨酸片中水杨酸的含量(Ａ)ｐＨ＝２.３㊁(Ｂ)ｐＨ＝７.０㊁(Ｃ)ｐＨ＝１３.０图６㊀代表性酸度条件下水杨酸的三维荧光光谱图Ｆｉｇ.６㊀Ｔｈｒｅｅ￣ｄｉｍｅｎｓｉｏｎａｌｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅｓｐｅｃｔｒｏｇｒａｐｈｏｆｓａｌｉｃｙｌｉｃａｃｉｄｕｎｄｅｒｒｅｐｒｅｓｅｎｔａｔｉｖｅａｃｉｄｉｔｙｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ２.５㊀稳定性的影响以甲醇作水杨酸的溶剂ꎬ在密封㊁避光㊁干燥条件下保存ꎬ考察其４８ｈ内的稳定性ꎬ从图７可看出水杨酸在４８ｈ内的稳定性良好.图７㊀水杨酸的稳定性Ｆｉｇ.７㊀Ｓｔａｂｉｌｉｔｙｏｆｓａｌｉｃｙｌｉｃａｃｉｄ２.６㊀标准曲线从水杨酸的标准曲线(如图８)得知ꎬ在(０.３８７~１.９３５)ˑ１０－８ｍｏｌ Ｌ－１的浓度范围内ꎬ水杨酸浓度与其强度呈良好的线性关系ꎬ线性方程为ｙ＝３８６.６１ｘ－３３.５５３ꎬ相关系数Ｒ２＝０.９９１２.图８㊀水杨酸的标准曲线Ｆｉｇ.８㊀Ｓｔａｎｄａｒｄｃｕｒｖｅｏｆｓａｌｉｃｙｌｉｃａｃｉｄ２.７㊀含量测定将水杨酸片的荧光强度带入标准曲线方程ꎬ经计算可求出水杨酸片中水杨酸的含量是１.６３６ˑ１０－８ｍｏｌ Ｌ－１.７８８８吉林师范大学学报(自然科学版)第４１卷３㊀结㊀论本实验采用甲醇作为水杨酸的溶剂ꎬ对溶液的酸碱性㊁稳定性及其线性范围等条件进行考察.水杨酸在(０.３８７~１.９３５)ˑ１０－８ｍｏｌ Ｌ－１范围内具有良好的线性关系ꎬ利用荧光法测定水杨酸片中水杨酸的含量为１.６３６ˑ１０－８ｍｏｌ Ｌ－１.参㊀考㊀文㊀献[１]李本淳ꎬ王丹.ＨＰＬＣ法测定复方水杨酸苯甲酸搽剂中水杨酸和苯甲酸的含量[Ｊ].中国药物评价ꎬ２０１７ꎬ３４(４):２５５￣２５７. [２]韩迎春ꎬ赵丽华ꎬ龚时琼ꎬ等.荧光测定阿司匹林肠溶片中水杨酸实验的绿色化[Ｊ].实验室科学ꎬ２０１８ꎬ２１(４):４￣７.[３]马延.经久不衰的阿司匹林[Ｊ].生命世界ꎬ２０１３(２):８４￣９３.[４]邓雅晨ꎬ梁建英.复方乙酰水杨酸片含量测定学生实验方法的改进[Ｊ].教育教学论坛ꎬ２０１３(３４):２６６￣２６８.[５]李彩兰.尼美舒利的临床应用与进展[Ｊ].医学信息(中旬刊)ꎬ２０１０ꎬ５(６):１５３１￣１５３２.[６]ＪＡＮＤＡＭꎬＲＵＥＬＬＡＮＤＥ.Ｍａｇｉｃａｌｍｙｓｔｅｒｙｔｏｕｒ:Ｓａｌｉｃｙｌｉｃａｃｉｄｓｉｇｎａｌｌｉｎｇ[Ｊ].ＥｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌａｎｄＥｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌＢｏｔａｎｙꎬ２０１５ꎬ１１７￣１２８. [７]李蕾ꎬ陈江敏.荧光分光光度法测定阿司匹林中游离水杨酸 ＰＥＧ１５００￣ＯＰ￣(ＮＨ４)２ＳＯ４￣Ｈ２Ｏ双水相体系萃取分离[Ｊ].理化检验(化学分册)ꎬ２００８(１):５８￣６０.[８]贝琦华ꎬ李祎ꎬ刘逸韬ꎬ等.电位滴定法测定尼美舒利含量能力验证结果分析[Ｊ].中国药事ꎬ２０１９ꎬ３３(３):２９０￣２９４.[９]王慧.紫外￣可见分光光度法测定复方苯甲酸软膏中水杨酸的含量[Ｊ].北方药学ꎬ２０１４ꎬ１１(１):１０￣１０.[１０]高从ꎬ杨宁ꎬ黄力.库仑滴定法测定水杨酸醇溶液中水杨酸的含量[Ｊ].中国医院药学杂志ꎬ２０１４ꎬ３４(６):４９４￣４９６.[１１]ＳＵＮＬＪꎬＰＡＮＺＱꎬＸＩＥＪꎬｅｔａｌ.ＥｌｅｃｔｒｏｃａｔａｌｙｔｉｃａｃｔｉｖｉｔｙｏｆｓａｌｉｃｙｌｉｃａｃｉｄｏｎＡｕ＠Ｆｅ３Ｏ４ｎａｎｏｃｏｍｐｏｓｉｔｅｓｍｏｄｉｆｉｅｄｅｌｅｃｔｒｏｄｅａｎｄｉｔｓｄｅｔｅｃｔｉｏｎｉｎｔｏｍａｔｏｌｅａｖｅｓｉｎｆｅｃｔｅｄｗｉｔｈＢｏｔｒｙｔｉｓｃｉｎｅｒｅａ[Ｊ].ＪｏｕｒｎａｌｏｆＥｌｅｃｔｒｏａｎａｌｙｔｉｃａｌＣｈｅｍｉｓｔｒｙꎬ２０１３:１２７￣１３２.[１２]段沅杏ꎬ贺兵ꎬ李干鹏ꎬ等.食品中正二氢愈疮酸含量的高效液相色谱荧光法测定[Ｊ].云南化工ꎬ２０１１ꎬ３８(１):４２￣４７.[１３]王堃ꎬ陈瑾ꎬ赵春晓ꎬ等.荧光分光光度法测定斯达舒中铝的含量[Ｊ].中国民族民间医药ꎬ２０１８ꎬ２７(８):３４￣３６.[１４]孙艳涛ꎬ王丽秋ꎬ赵磊ꎬ等.甘草次酸的荧光光谱研究[Ｊ].时珍国医国药ꎬ２０１３ꎬ２４(３):６２１￣６２２.[１５]于晓娟.微囊藻抑制 ＡｇＢｉＯ３应急处置与酵母菌生态抑制法的研究[Ｄ].上海:上海交通大学ꎬ２０１１.ＤｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｓａｌｉｃｙｌｉｃａｃｉｄｉｎｓａｌｉｃｙｌｉｃａｃｉｄｔａｂｌｅｔｓｂｙｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙＳＵＮＹａｎ￣ｔａｏ１ꎬＬＩＭｅｉ￣ｘｉ１ꎬＬＩＵＳｈｉ￣ｃｏｎｇ１ꎬＬＩＬｉｎ１ꎬＬＩＵＹａｎｇ２(１.ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＣｈｅｍｉｓｔｒｙꎬＪｉｌｉｎＮｏｒｍａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙꎬＳｉｐｉｎｇ１３６０００ꎬＣｈｉｎａꎻ２.ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＰｈｙｓｉｃｓꎬＪｉｌｉｎＮｏｒｍａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙꎬＳｉｐｉｎｇ１３６０００ꎬＣｈｉｎａ)Ａｂｓｔｒａｃｔ:Ｕｓｅｉｎｇｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙｔｏｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｔｈｅｓａｌｉｃｙｌｉｃａｃｉｄｉｎｓａｌｉｃｙｌｉｃａｃｉｄｔａｂｌｅｔｓ.Ｕｓｉｎｇｍｅｔｈａｎｏｌａｓａｓｏｌｖｅｎｔｆｏｒｓａｌｉｃｙｌｉｃａｃｉｄ.Ｔｈｅａｃｉｄａｌｋａｌｉｎｉｔｙｓｔａｂｉｌｉｔｙａｎｄｌｉｎｅａｒｒａｎｇｅｏｆｓｏｌｕｔｉｏｎｗｅｒｅｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｄ.Ｓａｌｉｃｙｌｉｃａｃｉｄｈａｓａｇｏｏｄｌｉｎｅａｒｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｉｎｔｈｅｒａｎｇｅｏｆ(０.３８７~１.９３５)ˑ１０－８ｍｏｌ Ｌ－１.Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｓａｌｉｃｙｌｉｃａｃｉｄｉｎｓａｌｉｃｙｌｉｃａｃｉｄｔａｂｌｅｔｓｂｙｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅｗａｓ１.６３６ˑ１０－８ｍｏｌ Ｌ－１.Ｓｔｕｄｅｎｔｓｈａｖｅｍａｓｔｅｒｅｄｔｈｅｒｏｕｔｉｎｅｔｒｅａｔｍｅｎｔｍｅｔｈｏｄｏｆｄｒｕｇｓａｍｐｌｅａｎｄｔｈｅｂａｓｉｃｏｐｅｒａｔｉｏｎｏｆｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｔｈｒｏｕｇｈｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔꎬｆｕｒｔｈｅｒｕｎｄｅｒｓｔａｎｄｉｎｇｏｆｔｈｅｑｕａｌｉｔａｔｉｖｅａｎｄｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓｏｆｄｅｅｐｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ.Ｋｅｙｗｏｒｄｓ:ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅｍｅｔｈｏｄꎻｓａｌｉｃｙｌｉｃａｃｉｄꎻｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｃｏｎｔｅｎｔ(责任编辑:林险峰)。
水杨酸的定性实训报告
一、引言水杨酸（Salicylic Acid），化学名为2-羟基苯甲酸，是一种常见的有机化合物，广泛应用于医药、化妆品、化工等领域。
在医药领域，水杨酸具有抗炎、镇痛、解热等作用，是阿司匹林的主要成分。
在化妆品领域，水杨酸具有去角质、抗痘等功效。
为了深入了解水杨酸的性质和应用，我们开展了本次水杨酸的定性实训。
二、实训目的1. 熟悉水杨酸的基本性质。
2. 掌握水杨酸的鉴定方法。
3. 提高实验室操作技能。
4. 培养科学严谨的实验态度。
三、实训原理水杨酸分子中含有羧基和酚羟基，具有以下性质：1. 羧基具有酸性，可与碱反应生成盐。
2. 酚羟基具有弱酸性，可与某些金属离子形成络合物。
3. 水杨酸具有特定的红外吸收光谱特征。
基于以上性质，我们可以通过以下方法进行水杨酸的定性鉴定：1. 酸碱滴定法：利用水杨酸的酸性，用碱滴定水杨酸，根据滴定终点判断水杨酸的存在。
2. 紫外-可见分光光度法：根据水杨酸分子中的特定基团，测定其在特定波长下的吸收光谱，判断水杨酸的存在。
3. 红外光谱法：根据水杨酸分子的红外吸收光谱特征，判断水杨酸的存在。
四、实训器材与试剂1. 器材：酸式滴定管、碱式滴定管、锥形瓶、移液管、容量瓶、烧杯、研钵、滤纸等。
2. 试剂：水杨酸标准品、氢氧化钠溶液、酚酞指示剂、氯化铁溶液、乙醇、乙醚等。
1. 酸碱滴定法鉴定水杨酸（1）准确称取一定量的水杨酸样品，溶解于适量水中，配制成待测溶液。
（2）用碱式滴定管准确吸取一定量的氢氧化钠溶液，加入锥形瓶中。
（3）加入几滴酚酞指示剂，观察溶液颜色变化。
（4）用酸式滴定管逐滴加入待测溶液，边加边振荡，直至溶液颜色由红色变为无色。
（5）记录滴定终点，计算水杨酸的含量。
2. 紫外-可见分光光度法鉴定水杨酸（1）准确称取一定量的水杨酸标准品，溶解于适量乙醇中，配制成标准溶液。
（2）用紫外-可见分光光度计测定标准溶液在特定波长下的吸收值。
（3）准确称取一定量的水杨酸样品，溶解于适量乙醇中，配制成待测溶液。
紫外分光光度法测水杨酸含量
作者：张劬婷作者单位：201508 上海，上海市金山区中心医院漕泾分院加入收藏夹向本刊在线投稿【摘要】目的建立测定樟柳酊中水杨酸含量的方法。
方法以60%乙醇为溶剂，采用紫外分光光度法测定樟柳酊中水杨酸的含量，测定波长为300.10 nm。
结果水杨酸的平均回收率为100.05%，RSD为0.70%，在8～28 μg/ml浓度范围内线性关系良好，相关系数r=0.9999。
结论用紫外分光光度法测定樟柳酊中水杨酸的含量，此方法快速、简便、结果准确、重现性好。
【关键词】紫外分光光度法水杨酸樟柳酊为我院的自拟制剂，其处方组成：水杨酸20 g，樟脑25 g，60%乙醇加至1000 ml，临床用于治疗慢性皮炎。
对该制剂的质量控制，除了利用中和法测定水杨酸含量外［1］，本文通过实验考察建立了仪器测定法，即采用紫外分光光度法测定水杨酸的含量［2］，该方法简便、快速、结果满意。
1 仪器与药品日本岛津uv-2401型分光光度计；水杨酸对照品（中国药品生物制品检定所）；60%乙醇（自制）；纯化水（自制）；樟柳酊（自制）。
2 方法与结果2.1 标准溶液的制备精密称取水杨酸对照品0.1000 g，置50 ml容量瓶中，用60%乙醇稀释至刻度，摇匀，得2 mg/ml水杨酸储备液。
2.2 测定波长的选择精密吸取水杨酸储备液0.5 ml置50 ml容量瓶中，用60%乙醇稀释至刻度，摇匀，在400～200 nm波长范围内扫描，测得在300.10 nm处有一最大吸收峰，同时在此波长范围内，按处方比例稀释的樟脑液无吸收，不干扰测定。
2.3 标准曲线的绘制精密吸取水杨酸储备液0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7 ml分别置50 ml容量瓶中，用60%乙醇稀释至刻度，摇匀，在300.10 nm处测其吸收度，得回归方程：C=37.9399A-0.2130，r=0.9999（n=5）。
可见，水杨酸在8～28 μg/ml浓度范围内线性关系良好。
如何配制水杨酸原液的方法
如何配制水杨酸原液的方法杨酸（Salicylic acid）是一种常用的化学试剂，具有抗炎、杀菌、去角质和深层清洁皮肤的作用。
然而，如果要将其用于肌肤护理，就需要将其稀释成所需浓度的原液。
下面将详细介绍如何制备水杨酸原液。
首先，要准备所需的材料和设备：1. 杨酸粉末：购买纯度高的杨酸粉末，以确保质量和效果。
2. 无水酒精：选择无水酒精，因为水会影响杨酸的溶解度。
3. 称量器具：如电子天平或药典天平，用于准确称量杨酸粉末。
4. 容器和搅拌棒：使用玻璃容器和搅拌棒，因为塑料容器和搅拌棒可能与杨酸发生反应。
5. 空瓶：准备好用于存储水杨酸原液的空瓶。
接下来，按照以下步骤操作：1. 确定所需浓度：根据个人需求和肌肤类型，确定所需的水杨酸浓度。
常见的浓度范围为0.5%到2%之间。
2. 称量杨酸粉末：使用准确的称重器具，按照所需浓度计算，称量出相应的杨酸粉末。
例如，如果要制备100ml浓度为1%的水杨酸原液，需要称量1克的杨酸粉末。
3. 准备酒精溶液：在玻璃容器中倒入无水酒精。
所需酒精的体积取决于所需浓度和制备液体的总体积。
对于100ml制备，大约需要酒精体积的80%。
4. 混合杨酸粉末和酒精：将已经称量好的杨酸粉末缓慢加入酒精中，并用搅拌棒均匀搅拌，直至杨酸完全溶解。
5. 完成制备：将溶液倒入存储容器中，并封闭容器，避免外界污染和水分。
6. 储存和使用：将制备好的水杨酸原液储存在阴凉干燥处或冰箱内，避免阳光直射。
使用前摇匀，倒入容器中使用。
需要注意以下事项：1. 杨酸具有一定的腐蚀性，因此在制备过程中要注意保护自己的眼睛、皮肤和呼吸道，避免直接接触。
2. 在配制原液时，使用防护手套和眼镜等个人防护设备，确保安全。
3. 根据使用须知，使用所配制的水杨酸原液的浓度和频率。
总结起来，配制水杨酸原液是一个相对简单的过程，但要注意安全和准确性。
正确制备并适当使用水杨酸原液可以帮助清洁、抗炎和改善皮肤状况。
如果对化学操作不熟悉，建议请教专业人员的意见。
水杨酸参比溶液测定实验报告
水杨酸参比溶液测定实验报告一、实验目的本实验旨在通过水杨酸参比溶液测定，掌握分光光度法的基本原理和操作方法，了解水杨酸参比溶液的制备及其应用。
二、实验原理1. 水杨酸参比溶液的制备水杨酸参比溶液是由一定浓度的水杨酸和氢氧化钠混合制成的。
其中，氢氧化钠作为碱性缓冲剂可以稳定溶液pH值，使其不受外界因素影响。
2. 分光光度法原理分光光度法是利用物质吸收特定波长的光线而测定物质浓度的一种方法。
在此实验中，我们使用紫外可见分光光度计来测量水杨酸参比溶液对于特定波长（510nm）的吸收量，并根据洛伦茨-伯塞特定律计算出其浓度。
三、实验步骤1. 制备水杨酸参比溶液：按照配方将一定量的水杨酸和氢氧化钠加入蒸馏水中，并搅拌至完全溶解。
2. 测定水杨酸参比溶液的吸光度：将制备好的水杨酸参比溶液分别置于紫外可见分光光度计中，调节波长为510nm，记录吸光度值。
3. 绘制标准曲线：将不同浓度的水杨酸参比溶液各自测定其吸光度值，并绘制出标准曲线。
4. 测定待测样品的浓度：将待测样品加入紫外可见分光光度计中，调节波长为510nm，记录吸光度值，并根据标准曲线计算出其浓度。
四、实验结果及分析1. 水杨酸参比溶液的吸光度与浓度关系通过实验数据绘制出标准曲线，可以看出水杨酸参比溶液的吸光度与其浓度呈现较好的线性关系。
该曲线斜率为0.023，截距为0.003，相关系数R²=0.9988。
2. 待测样品的浓度计算通过实验数据得到待测样品在510nm处的吸光度为0.357。
根据标准曲线计算得出其浓度为15.43mg/L。
3. 实验误差分析在实验过程中，可能会存在一些误差。
例如，制备水杨酸参比溶液时，如果溶解不完全或者操作不规范，可能会导致浓度偏低或高；在测定吸光度时，可能会因为仪器的误差、样品的污染等因素导致数据偏差。
因此，在实验中需要注意操作规范、精确称量、严格控制实验条件等方面的问题。
五、实验结论通过本次实验，我们成功地制备了水杨酸参比溶液，并利用分光光度法测定了其吸光度与浓度之间的关系。