微生物实验七 放线菌的形态观察
微生物实验放线菌的形态观察
实验一：丝状微生物的鉴定实验目的：1、观察常见放线菌的基本形态特征。
2、观察镰刀菌与木霉的基本形态。
3、掌握埋片培养法培养放线菌。
4、掌握载片培养法培养丝状真菌。
5、学会用显微镜观察未染色样品。
实验原理：放线菌的菌落早期绒状同细菌菌落月牙状相似，后期形成孢子菌落呈粉状、干燥，有各种颜色呈同心圆放射状。
放线菌一般由分枝状菌丝组成，它的菌丝可分为基内菌丝(营养菌丝)、气生菌丝或有孢子丝三种。
放线菌生长到一定阶段，大部分气生菌丝分化成孢子丝，通过横割分列的方式产生成串的分生孢子。
孢子丝形态多样，有直、波曲、钩状、螺旋状、轮生等多种形态。
孢子也有球形、椭圆形、杆状和瓜子状等等。
它们的形态构造都是放线菌分类鉴定的重要依据。
真菌的菌丝较放线菌粗，菌落疏松，主要用肉眼观察，必要时借助放大镜或显微镜。
利用显微镜主要观察孢子的着生状态，孢子形状及菌丝有无横隔等。
3材料3.1菌种链霉菌（Streptomyces sp.）；诺卡氏菌（Nocardia sp.）；尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)；绿色木霉（Trichoderma viride）3.2培养基高氏1号培养基，PDA培养基。
3.3器皿培养皿，载玻片、盖玻片、无菌滴管、镊子、接种环、小刀(或刀片)、水浴锅，显微镜，超净工作台，恒温培养箱。
4流程4.1埋片培养法: 倒琼脂→切槽→接种→埋片→培养→镜检→记录绘图。
4.2载片培养法：滴琼脂→凝固→边缘接种→盖盖玻片→培养→镜检→记录绘图。
5步骤埋片培养法：1 向每个培养皿倒约20毫升高氏一号琼脂培养基，待凝固。
2 用无菌手术刀在琼脂平板上平行开两条槽，取出其中的琼脂培养基。
3 在槽的外侧边缘接种待鉴定的放线菌菌株。
4 将无菌载玻片呈与槽垂直的方向盖在平板上面，用镊子轻轻压下，使载玻片与琼脂平板接触。
5 放于28℃培养3天。
6 将载玻片从平板上取下，直接在显微镜下观察。
载片培养法：1 将无菌载玻片放于洁净工作台。
霉菌和放线菌的接种、培养及形态观察
一、实验目的：
1、了解霉菌，放线菌形态观察的基本方法并了 解其基本形态特征.
2、掌握培养基配置，无菌操作，接种与培养，
显微镜观察等各种综合微生物技能的运用。
二、实验原理
1、微生物接种方法：接斜面、接平皿、接三 角瓶。
2、微生物的培养方法：静止培养、振荡培养。
二、实验原理
1、放线菌（玻璃纸法）：
制备培养基 倒平板 放玻璃纸，铺平
制菌悬液
培养7d
涂布菌液
28℃倒置
制片观察。
2、真菌（载片法）： 准备湿室 融化培养基 整理湿室
点接孢子ห้องสมุดไป่ตู้
加水棉球
覆培养基
28℃保湿培养7d
加盖玻片
镜检。
3、形态观察
• 观察内容：
霉菌、放线菌的营养菌丝体、
气生菌丝体、孢子丝、分生孢子 头、分生孢子、孢子梗、足细胞 等的形态和结构。注意不同微生
物典型结构形态的区别。
五、注意事项
1、本实验步骤均应无菌操作； 2、倒平板时，摇动培养皿要轻，以免溅出；
3、铺玻璃纸时，涂布棒冷却后，才可与玻璃 纸接触；
4、加盖玻片时要轻压，使培养物均匀的分布 在盖玻片下； 5、取玻璃膜观察时，取放线菌最薄的地方； 6、培养时，培养基滴半滴，以保证一周后结 果理想。
3、放线菌的培养观察方法： 插片法、搭片法、玻璃纸法。 4、霉菌的培养观察方法：载片培养法。
三、实验器材
1、器皿：湿室、镊子、平板、无菌滴管、
显微镜、涂布棒、移液器、滤纸、水棉球载 玻片等。 2、培养基：高氏一号培养基、半固体PDA 培养基。 3、菌种：5406链霉菌、黑曲霉、青霉。
四、实验步骤
放线菌的形态观察实验报告
放线菌的形态观察实验报告放线菌的形态观察实验报告放线菌是一类广泛存在于自然界中的微生物，具有丰富的多样性和重要的生物学功能。
本次实验旨在通过对放线菌的形态进行观察，了解其基本特征和生长习性。
以下是实验过程和观察结果的详细描述。
实验材料和方法：1. 实验材料：放线菌培养基、无菌培养皿、无菌匙、显微镜、石英片。
2. 实验方法：a. 取一块无菌培养皿，将放线菌培养基倒入培养皿中，待其凝固。
b. 使用无菌匙，将待观察的放线菌菌落划入培养基表面，尽量避免交叉污染。
c. 将培养皿盖好，放置在恒温箱中，温度设定为28摄氏度。
d. 每隔一段时间，取出培养皿进行观察，使用显微镜观察放线菌的形态特征，并用石英片进行取样。
实验观察结果：1. 放线菌的形态特征：a. 放线菌呈现为长而细的菌丝状，类似于细长的线状结构。
b. 放线菌的菌丝通常呈现分枝状，形成复杂的网络结构。
c. 放线菌的菌丝颜色多样，包括白色、黄色、红色等，具有一定的色彩变异性。
d. 放线菌的菌丝表面常常有颗粒状物质附着，形成颗粒状结构。
2. 放线菌的生长习性：a. 放线菌生长缓慢，通常需要较长时间才能形成可见的菌落。
b. 放线菌的菌落呈现不规则形状，边缘模糊不清，有时会形成分支状的菌落。
c. 放线菌的菌落表面通常光滑而湿润，有时会有微小的颗粒状结构。
d. 放线菌在培养基上生长的过程中，会逐渐扩散并形成新的菌落。
3. 放线菌的细胞结构：a. 放线菌的菌丝由一系列细胞组成，细胞间通过连接点相互连接。
b. 放线菌的细胞内含有细胞质和细胞核，细胞核通常位于细胞中央。
c. 放线菌的细胞质内含有丰富的有机物质和细胞器，包括线粒体、内质网等。
实验讨论和结论：通过对放线菌的形态进行观察，我们可以发现放线菌具有独特的细胞结构和生长习性。
放线菌的菌丝状结构和分枝状特征使其能够在土壤中广泛分布，并与其他微生物相互作用。
放线菌的色彩变异性可能与其生长环境和代谢产物有关，这也为进一步研究放线菌的生态功能提供了线索。
实验七 放线菌的形态观察
实验七放线菌的形态观察实验七放线菌的形态观察实验七放线菌生物学形态学观察112周红照1102040226 1。
客观的1.学习观察放线菌形态的基本方法；2.观察放线菌的个体形态特征。
二、原理放线菌是一种丝状原核微生物，因其菌落常在固体表面呈放射状生长而得名。
放线菌主要存在于土壤中，多数为腐生菌，少数为寄生菌，有的与植物共生固氮。
放线菌通常由分支发达的菌丝体组成，菌丝直径为0.2-1.2μm。
主要由两部分组成，一部分生长在培养基内，一般没有横隔，有固定和吸收养分的作用，称为基内菌丝或营养菌丝，当基内菌丝发育到一定阶段，即可向空中伸展形成气生菌丝。
在显微镜下观察时，气生菌丝颜色较深，并且比基内菌丝粗两倍左右。
有些种的气生菌丝发育到一定阶段，其顶端可形成孢子丝。
有的仅在气丝上形成单个或一对球形孢子。
孢子丝分直、波曲、螺旋等形状。
螺旋有松、紧、大、小之分，其方向也有左旋和右旋之分，大多数种为左旋，少数种为右旋。
螺旋的数目也是种的特征之一。
孢子丝的着生方式分为单生、丛生和轮生。
大部分放线菌的孢子丝长到一定阶段均可凝聚分裂形成孢子，少数的则以较原始的横隔分裂方式形成孢子。
孢子有球状、椭圆状、杆状、瓜子状等形状，在光镜下即可观察。
放线菌菌落小，与培养基结合紧密，不适合用接种钩拾取，难以直接观察。
本实验采用插入法对放线菌的形态进行了观察。
插入法适用于营养菌丝、气生菌丝和孢子菌丝的对比观察。
在接种放线菌的培养基一侧以45度角插入无菌盖玻璃，使放线菌在培养基和盖玻璃的交界处生长，并附着在盖玻璃上。
菌丝生长一段时间后，取下盖玻璃进行染色，然后直接观察。
3、材料1.菌种:紫色直丝链霉菌(streptomycesviolaoeorectus)灰红紫类群黑化链霉菌（streptomycesnigrificans）灰褐类群天蓝链霉菌（streptomycescoelicolor）蓝色类群丰加链霉菌（streptomycestoyocaensis）白孢类群2.染色剂：石炭酸复红染液3.培养基：高氏一号培养基4.其他：玻片、镊子、酒精灯、洗瓶、雪松油、二甲苯、镜子清洁纸、吸水纸。
放线菌形态的观察- 唐山师范学院(“菌丝”相关文档)共10张
• 放线菌是主要的抗生素产生菌。链霉菌属是放线菌的一个 大属，链霉菌具有典型的丝状放线菌特征。主要分布在土壤中， 产生土腥味素，使泥土散发出“泥腥味”。链霉菌产生大量的 抗生素。
•
它的菌丝可分为基内菌丝(营养菌丝)即紧贴培养基表面或渗入
培养基内生长的菌丝，主要是吸收营养与排泄代谢产物。直径
细，约为微米。能产生黄、橙、红、紫、蓝、绿、灰、褐、黑
等色素或不产生色素。色素分脂溶性和水溶性两类，水溶性色
素能渗入培养基内，使培养基着色，而脂溶性色素质使菌体着
色。
• 菌丝生长到一定阶段向空气中生长出气生菌丝，气生菌丝颜色深，直
径比营养菌丝粗，约1-1.4微米，菌丝呈直形或弯曲而分枝，有的
也产色素。
放线•菌是放主要线的抗菌生素以产生菌无。 性方式繁殖，生长到一定阶段，成熟时，大部分气生 链孢霉子菌 成产熟菌生后大，丝量散的落特抗四生周化素。。为产生孢子的菌丝，即孢子丝。孢子丝以横隔分裂的方
（4）染色 用石炭酸复红覆盖印迹，染色1-2min后水洗。 链霉菌属是放线菌的一个大属，链霉菌具有典型的丝状放线菌特征。
用镊子取一洁净载玻片，在火馅上稍微加热，然后把玻片盖放在带菌落的培养基小块上，再用小镊子轻轻压几下，使菌落的部分菌丝体（气生菌丝 ，孢子丝或孢子）压在载玻片上。 观察放线菌的基本形态特征 ； 它的菌丝直径和细菌相仿，但长度不定。 链霉菌产生大量的抗生素。 孢子丝的着生情况、形态和所产孢子的形态、表面结构、颜色等随菌种而不同，而且比较稳定，因此是分类的主要依据。 链霉菌属是放线菌的一个大属，链霉菌具有典型的丝状放线菌特征。 链霉菌产生大量的抗生素。 玻璃纸具有半透膜特性，其透光性与载玻片基本相同，采用玻璃纸琼脂平板透析培养，能使放线菌生长在玻璃纸上，然后将长菌的玻璃纸剪取小片 ，贴放在载玻片上，用显微镜镜检可见到放线菌自然生长的个体形态。 能产生黄、橙、红、紫、蓝、绿、灰、褐、黑等色素或不产生色素。 4微米，菌丝呈直形或弯曲而分枝，有的也产色素。 色素分脂溶性和水溶性两类，水溶性色素能渗入培养基内，使培养基着色，而脂溶性色素质使菌体着色。 4微米，菌丝呈直形或弯曲而分枝，有的也产色素。 链霉菌属是放线菌的一个大属，链霉菌具有典型的丝状放线菌特征。 （3）固定：载玻片有印迹的一面向上，通过酒精灯火焰三次固定。 采用插片培养法、印片法、胶带纸法也能观察放线菌的个体形态。
学习手册-放线菌的形态观察.
学习手册《情境：放线菌的形态观察》引导文-单元设计-实训指导书情境：引导文放线菌的形态观察阅读材料材料一：放线菌简介放线菌（Actinomycete）是原核生物的一个类群。
因在固体培养基上呈辐射状生长而得名。
大多数有发达的分枝菌丝。
菌丝纤细，宽度近于杆状细菌，约0.5～1微米。
可分为：营养菌丝，又称基质菌丝，主要功能是吸收营养物质，有的可产生不同的色素，是菌种鉴定的重要依据；气生菌丝，叠生于营养菌丝上，又称二级菌丝（见下图）。
放线菌是一群革兰氏阳性、高( G + C) mol% 含量( >55% ) 的细菌。
放线菌因菌落呈放线状而的得名。
它是一个原核生物类群，在自然界中分布很广，主要以孢子繁殖，其次是断裂生殖。
与一般细菌一样，多为腐生，少数寄生。
放线菌与人类的生产和生活关系极为密切，目前广泛应用的抗生素约70%是各种放线菌所产生。
一些种类的放线菌还能产生各种酶制剂（蛋白酶、淀粉酶、和纤维素酶等）、维生素（B12）和有机酸等。
弗兰克菌属（Frankia）为非豆科木本植物根瘤中有固氮能力的内共生菌。
此外，放线菌还可用于甾体转化、烃类发酵、石油脱蜡和污水处理等方面。
少数放线菌也会对人类构成危害，引起人和动植物病害。
因此，放线菌与人类关系密切，在医药工业上有重要意义。
放线菌在自然界分布广泛，主要以孢子或菌丝状态存在于土壤、空气和水中，尤其是含水量低、有机物丰富、呈中性或微碱性的土壤中数量最多。
放线菌只是形态上的分类，不是生物学分类的一个名词。
有些细菌和真菌都可以划归到放线菌。
土壤特有的泥腥味，主要是放线菌的代谢产物所致。
放线菌细胞的结构与细菌相似，都具备细胞壁、细胞膜、细胞质、拟核等基本结构。
个别种类的放线菌也具有细菌鞭毛样的丝状体，但一般不形成荚膜、菌毛等特殊结构。
放线菌的孢子在某些方面与细菌的芽孢有相似之处，都属于内源性孢子，但细菌的芽孢仅是休眠体，不具有繁殖作用，而放线菌产生孢子则是一种繁殖方式。
放线菌的实验报告
放线菌的实验报告放线菌的实验报告一、引言放线菌是一类广泛存在于自然界中的微生物，以其独特的形态和生物学特性而备受研究者的关注。
本实验旨在通过对放线菌的分离培养、形态观察和抗生素产生能力的检测，进一步了解放线菌的特点和应用潜力。
二、材料与方法1. 放线菌分离培养：将土壤样品取自自然环境中，加入到含有适宜培养基的培养皿中，进行稀释均匀。
然后将培养皿密封，置于恒温培养箱中，在适宜的温度下培养一段时间，直至观察到单个菌落的形成。
2. 放线菌形态观察：取一颗单个菌落，用显微镜观察其形态特征，包括菌丝的形状、颜色、分枝情况等。
3. 抗生素产生能力检测：将分离得到的放线菌菌株接种到含有抗生素敏感菌株的琼脂平板上，观察菌落周围是否出现抑制圈。
三、结果与讨论1. 放线菌的分离培养：经过一段时间的培养，观察到培养皿中出现了单个菌落。
将这些菌落通过传代培养，得到纯种的放线菌菌株。
2. 放线菌的形态观察：在显微镜下观察到放线菌菌丝呈分枝状，颜色多样，有的呈白色、黄色或橙色。
菌丝通常呈直线状，但也有少数呈弯曲或环状。
3. 抗生素产生能力检测：将分离得到的放线菌菌株接种到含有抗生素敏感菌株的琼脂平板上，观察到菌落周围出现了抑制圈。
这表明放线菌具有抗生素产生的能力，可以对其他细菌产生抑制作用。
放线菌作为一类重要的微生物资源，具有广泛的应用前景。
其产生的抗生素被广泛应用于医药领域，用于治疗各种感染性疾病。
此外，放线菌还具有其他生物活性物质的合成能力，如抗肿瘤物质、抗氧化物质等。
因此，对放线菌的深入研究具有重要意义。
在本次实验中，我们成功地从自然环境中分离出了放线菌，并观察到了其形态特征和抗生素产生能力。
然而，实验中仍存在一些不足之处。
首先，由于实验时间有限，我们只对放线菌的形态进行了简单的观察，没有进行更深入的分类和鉴定。
其次，我们只检测了放线菌的抗生素产生能力，而未对其产生的抗生素进行具体的鉴定和分析。
为了更好地发掘和利用放线菌的潜力，今后的研究可以从以下几个方面展开：1. 对分离得到的放线菌菌株进行进一步的形态学和生理学研究，以了解其多样性和适应能力；2. 对放线菌产生的抗生素进行鉴定和分析，以寻找新的抗生素种类和开发新的药物；3. 利用基因工程技术改造放线菌，提高其抗生素产量和质量。
山东大学微生物实验报告放线菌形态观察
实验六：放线菌的形态观察姓名:戈奕文学号：201005140022系别：2010生物基地组别：周一下午第一组试验日期：2012年11月5日同组成员：孟亚平宋宁褚鹏程【摘要】配制高氏I号培养基用来培养青色链霉菌和弗式链霉菌，本实验运用插片法观察放线菌的形态，初步地了解放线菌的基本结构和形态。
更直观的了解，基内菌丝、气生菌丝以及气生菌丝分化而成的孢子丝以及孢子。
【关键词】青色链霉菌（Streptomyces glaucus）弗氏链霉菌（Streptomyces microflavus）高氏I号培养基插片法【前言】放线菌（actinomycetes）是指能形成分枝丝状体或菌丝体的一类革兰氏阳性细菌。
广泛存在于自然界中，土壤中最多，主要以孢子繁殖，至今发现的共有五六十属，它与人类的关系极为密切，根据1978年的统计，在当时已发现的5128种抗生素中，有3165种为各种放线菌所产生，链霉菌属又占放线菌中的首位（占放线菌产生的抗生素中的87.5％）；有的放线菌还可用于生产维生素、酶制剂等；少数会引起人类、动物、植物的疾病。
链霉菌属是放线菌中种类最多、分布最广、形态特征最典型的类群，其孢子丝的形态多样，而且性状较稳定，是对它们进行分类、鉴定的重要指示。
因此学习如何培养和观察它们不仅对科学研究有很大的意义，对实际生活应用也有很大的帮助。
本实验采用合成培养基进行培养，采用插片法取菌观察，不仅可观察到放线菌自然生长状态下的特征，而且便于观察不同生长期的放线菌形态，除此之外还可以采用玻璃纸法、印片法进行观察。
链霉菌属（Streptomyces）共约1，000多种，它们具有发育良好的菌丝体，也是实验中选取它们观察的重要原因。
一、实验目的1、掌握放线菌观察方法——插片法;2、了解放线菌的基本形态。
二、实验原理1．高氏I号培养基高氏I号培养基是用来培养和观察放线菌形态特征的合成培养基。
此合成培养基的主要特点是含有多种化学成分已知的无机盐，这些无机盐可能相互作用而产生沉淀。
放线菌的培养和形态观察
放线菌的培养和形态观察胡雪芳 201300261033【实验目的】1.了解和掌握放线菌培养基的特点和培养方法。
2.学习并掌握观察放线菌形态的基本方法。
3.掌握弗氏、白色或者青色链霉菌的形态特征。
4.掌握放线菌菌落形态特征。
【实验原理】1.培养基——高氏I号培养基高氏I号培养基是用来培养和观察放线菌形态特征的合成培养基。
此合成培养基的主要特点是含有多种化学成分已知的无机盐，这些无机盐可能相互作用而产生沉淀。
因此，在混合培养基成分时，一般是按配方的顺序依次溶解各成分，甚至有时还需要将二种或多种成分分别灭菌，使用时再按比例混合。
此外，合成培养基有的还要补加微量元素，如高氏I号培养基中的FeSO4·7H2O的量只有0.001%，因此在配制培养基时需预先配成高浓度的FeSO4·7H2O贮备液，然后再按需加入一定量到培养基中。
可溶性淀粉的配制方法。
2.放线菌放线菌是指能形成分枝丝状体或菌丝体的一类革兰氏阳性细菌。
常见放线菌大多能形成菌丝体，紧贴培养基表面或深入培养基内生长的叫基内菌丝，简称“基丝”，基丝生长到一定阶段还能向空气中生长出气生菌丝，简称“气丝”，并进一步分化产生孢子丝及孢子。
有的放线菌只产生基丝而无气丝。
有的放线菌只产生基丝而无气丝。
孢子丝的形态特征是放线菌的重要鉴定指标。
在显微镜下直接观察时，气丝在上层、基丝在下层，气丝色暗，基丝较透明。
孢子丝依种类的不同，有直、波曲、各种螺旋形或轮生。
图1. 孢子丝的形态在油镜下观察，放线菌的孢子有球形、椭圆、杆状或柱状。
能否产生菌丝体及由菌丝体分化产生的各种形态特征是放线菌分类鉴定的重要依据。
观察放线菌的形态特征的这些方法的主要目的是尽可能保持放线菌自然生长状态下的形态特征。
3.插片法/印片法观察放线菌插片法：将放线菌划线接种在高氏I号培养基琼脂平板上，扦插上灭菌盖玻片后培养，使放线菌菌丝沿着培养基表面与盖玻片的交接处生长而附着在盖玻片上。
放线菌及霉菌形态观察
霉菌形态比细菌、放线菌复杂，个体比较大(直径310µm)，具有分枝的菌丝体和分化的繁殖器官。观察时 要注意菌丝粗细，菌丝体有无隔膜，营养菌丝有无假根 ，无性繁殖或有性繁殖时形成的孢子是哪一种，孢子是 怎样着生的。
根霉
黑根霉（匍枝根霉） Rhizopus nigricans
• 菌落：初期白色，老熟 后灰褐色
四、方法及步骤
1、放线菌观察：
印片法：用接种铲切取5406放线菌一块（带有 培养基）→在载玻片上轻压一下，弃去培养基，制 成印片→固定（火焰）→蕃红染色→水洗→吸干→ 镜检。
扦片法：
2、霉菌：由于霉菌的菌丝较粗大，而且孢子容易飞 散，如将菌体置于水中容易变形，故观察时不用水浸法 制片，而将菌体置于乳酸石炭酸棉兰染液中，使细胞不 易干燥。
孢子囊
• 显微形态：匍匐枝无色，
假根发达呈褐色。孢子
囊簇生，可形成球状接
合孢子。
假根
匍匐枝接合孢子来自霉 黑曲霉 Aspergillus niger
菌丝体：有横隔，常无色，老熟 时变为浅黄色至褐色，有足细胞 无性生殖体： 1、分生孢子梗 2、顶囊 3、小梗 4、分生孢子
分生孢子
小梗 顶囊 分生孢子梗
在载玻片上滴加一滴乳酸石炭酸棉兰染液 →用镊子挑取少许霉菌菌丝，置于染色液中 →挑散菌丝 →盖上盖玻片，吸去多余染液 →镜检
五、观察与绘图
• 放线菌：观察气生菌丝形态及有无分隔， 孢子丝及分生孢子排列方式
• 黑根霉：假根、匍匐菌丝、孢囊梗及孢 子囊
• 青霉、曲霉：观察菌丝形态及有无分隔， 有无足细胞，分生孢子梗有无顶囊、小 梗及孢子排列方式
有些气生菌丝分化成
各种孢子丝，呈螺旋 状、波浪形或分枝状 等，着生形式有丛生、 互生和轮生三种。孢 子的表面光滑或粗糙， 圆或椭圆和杆状。孢 子有各种颜色。这些 形态特点都是鉴别放 线菌的重要依据。
放线菌的构造和形态观察：形态构造、繁殖、菌落特征
一、放线菌的形态构造
１ 放线菌的概述
➢ 放线菌的应用： a.能产生大量的、种类繁多的抗生素，到目前为止，已分离得到的放线菌产生
的抗生素达4000种以上； b.生产维生素和酶； c.进行甾体转化、烃类发酵和污水处理；
一、放线菌的形态构造
一、放线菌的形态构造
2 形态构造
➢ 菌丝（根据形态和功能不同分为）：基内菌丝（营养菌丝）：产色素，吸收营养 气生菌丝：可分化出繁殖结构，即孢子丝 孢子丝：繁殖，直、波曲、螺旋，丛生、轮生
一、放线菌的形态构造
2 形态构造
➢ 放线菌孢子丝类型：直、波曲、螺旋，丛生、轮生
单轮生
螺旋状
项目二 放线菌的构造和形态观察
小单孢菌属（Micromonospora）：可产生多种 抗生素，如庆大霉素、利福霉素等
放线菌属（Actinomyces) ： 多为致病菌
一、放线菌的形态构造
2 形态构造 ➢ 大部分放线菌由分枝状的菌丝组成，菌丝大多无隔膜，属单细胞，G+。菌丝的 粗细与细菌中的杆菌宽度相近（1μm左右）。细胞壁含胞壁酸、二氨基庚二酸， 不含几丁质、纤维素。
微生物学基础
原核微生物的构造和形态观察
项目二 放线菌的构造和形态观察
一、放线菌的形态构造
１ 放线菌的概述 ➢ 介于细菌和真菌之间的单细胞G+原核生物，细胞构造和细胞壁的化学组成与细 菌相似；由分枝状的菌丝组成，以外生孢子的形式繁殖,这些特征又与霉菌相似； 放线菌菌落中的菌丝常从一个中心向四周辐射状生长,因此叫放线菌。
4 横隔孢子
➢ 基内菌丝或气生菌丝横隔分裂形成，孢子常为球杆状，体积大小相似，又称节孢 子或粉孢子。
细菌放线菌的观察与革兰氏染色实验报告
实验一：细菌、放线菌的形态观察与革兰氏染色姓名:陈虹邑学号：200911233012系别：生物科学与生物技术班级：周二第一组试验日期：2011年9月13日同组成员：邢悦婷呼波一、实验目的及意义1、巩固油镜的使用;2、掌握细菌形态观察的基本方法；3、了解细菌的基本形态和结构。
4、了解革兰氏染色的原理；5、初步掌握细菌涂片的方法；6、掌握革兰氏染色的方法；7、掌握放线菌的涂片方法；8、观察基内菌丝、气生菌丝和孢子丝。
二、实验材料与方法【实验材料】菌种：溶血链球菌(Strptococcus haemolyticus),螺菌(Spirillum sp.) ,巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium), 苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis), 普通变形菌(Proteus vulgaris), 丙酮丁酸梭菌(Clostridium acetotylicum), 褐球固氮菌(Azotobacter chroococcum)等细菌永久装片，放线菌5406，金黄色葡萄球菌（staphulococcus aureus），大肠杆菌（E. coli）试剂：香柏油、无菌水、结晶紫、番红或沙黄、95%酒精、碘液仪器及用具：显微镜、擦镜纸、吸水纸、小滴管，接种环、载玻片、盖玻片、酒精灯【实验方法】细菌的观察1、在载玻片上滴一小滴水，用接种环，采用无菌操作，将细菌挑起，涂到载玻片上，盖上盖玻片。
2、用显微镜对细菌进行活体观察。
观察时先用低倍镜，再用高倍镜，有必要的话，再用油镜观察。
3、观察细菌的永久装片，观察时先用低倍镜，再用高倍镜，有必要的话，再用油镜观察，找到细菌的各种结构。
放线菌的观察1、玻璃纸法：用剪刀，剪下小块的玻璃纸，压片，放在显微镜下观察放线菌的基内菌丝、气生菌丝。
2、印片法：将盖玻片在火焰上稍加热，然后盖到培养基的玻璃纸上，稍用力压一下。
取下盖玻片，放到载玻片上，进行镜检，主要观察放线菌的孢子丝。
放线菌形态观察
菌丝断裂 凝聚分裂（链霉菌）
分生孢子
无性孢子 横膈膜分裂（诺卡氏菌）
孢囊孢子(链孢囊菌属)
插片法观察放线菌
• 鉴于放线菌菌落致密特性，接种环难以 直接挑取观察。
• 插片法使放线菌沿培养基与盖玻片交界 处生长并附着于盖玻片上。一定时间后， 可直接将盖玻片取下、染色观察。
使用高氏一号培养基（28ºC），平板划线培养 ２Ｄ，在培养基菌落处以45º角插入盖玻片（已 灭菌），插片后继续培养一周，实验观察。
实验材料：
• 紫色直丝链霉菌（Streptomyces violaoeorectus） • 黑化链霉菌（ Streptomyces nigrificans） • 天蓝链霉菌（ Streptomyces coelicolor） • 丰加链霉菌（ Streptomyces toyocaensis）
实验步骤
• 镊子酒精灯上烧三次灭菌，小心取出盖玻 片在酒精灯上稍微加热固定
• 用复红或结晶紫染色1 min,水洗（小心） • 置于载玻片上，油镜下观察
注意事项：
• 取玻片需无菌操作
• 盖玻片两面均有菌丝附着，以锐角面附 着菌丝量较多，建议染色、观察此面。
作业
• 1.画图 • 2.表格
菌名
菌落形 气味 背面
孢子丝的形态以及排列方式 是放线菌的重要分类特征。
孢子丝形态 分类
直
波曲 螺旋
松、紧 大、小
左、右
孢子丝 排列方式
单生 丛生 轮生 互生
放线菌孢子丝类型：
直丝 丛生
弯曲 丛生
弯曲 丛生
直丝 单轮生
钩状
松螺旋？
紧螺旋？
具螺旋一级轮生 直丝 二级轮生
具螺旋二级轮生
放线菌形态的观察实验报告
山东大学实验报告2017年11月13日________________________________________ _________________________ 科目：微生物学实验题目：放线菌的形态观察姓名：丁志康一、目的要求• 1.学习并初步掌握观察放线菌形态的基本方法。
• 2.初步了解放线菌的形态特征。
二、基本原理放线菌是指能形成分枝丝状体或菌丝体的一类革兰氏阳性菌。
常见放线菌大多能形成菌丝体，紧贴培养基表面或深入培养基内生长的基内菌丝（简称“基丝”），基丝生长到一定阶段还能像空气中生长出气生菌丝（简称“气丝”），并进一步分化产生孢子丝及孢子。
有的放线菌只产生基丝而无气丝。
在显微镜下直接观察时，气丝在上层、基丝在下层，气丝色暗，基丝较透明。
孢子丝依种类的不同，有直、波曲、各种螺旋形或轮生。
在油镜下观察，放线菌的孢子有球形、椭圆、杆状或柱状。
能否产生菌丝体及由菌丝体分化产生的各种形态特征是放线菌分类鉴定的重要依据。
为了观察放线菌的形态特征，人们设计了各种培养和观察方法，这些方法的主要目的是为了尽可能保持住放线菌自然生长状态下的形态特征。
本试验介绍其中几种常用方法。
1.插片法：将放线菌接种在琼脂平板上，插上灭菌盖玻片后培养，使放线菌菌丝沿着培养基表面与盖玻片的交接处生长而附着在盖玻片上。
观察时，轻轻取出盖玻片，置于载玻片上直接镜检。
这种方法可观察到放线菌自然生长状态下的特征，而且便于观察不同生长期的形态。
2.玻璃纸法：玻璃纸是一种透明的半透膜，将灭菌的玻璃纸覆盖在琼脂平板表面，然后将放线菌接种于玻璃纸上，经培养，放线菌在玻璃纸上生长形成菌苔。
观察时，揭下玻璃纸，固定在载玻片上直接镜检。
这种方法既能保持放线菌的自然生长状态，也便于观察不同生长期的形态特征。
3.印片法：将要观察的放线菌的菌落或菌苔，先印在载玻片上，经染色后观察。
这种方法主要用于观察孢子丝的形态、孢子的排列及其形状等。
方法简便、但形态特征可能有所改变。
放线菌的形态观察实验报告
放线菌的形态观察实验报告实验报告：放线菌的形态观察摘要：本实验在实验室中观察放线菌的形态特征，通过显微镜观察其菌丝和孢子的形态，分析其结构与特性。
实验结果表明，放线菌的形态特征多种多样，具有很强的多样性和适应性，不同品种之间具有一定的差异性。
实验对于深入理解放线菌的生产、利用与控制具有较大的意义。
关键词：放线菌；形态特征；显微镜；差异性引言：放线菌是一类广泛存在于自然界的一种微生物，其具有非常多样化的菌种，广泛分布于不同的环境中，对于人类和动植物的生长生产有着重要的作用。
在实验室中，对于放线菌的形态特征进行分析与研究，对于探究其生存规律、研究其应用和利用等领域具有十分重要的意义。
因此，本实验旨在观察放线菌的形态特征及其差异性，通过显微镜观察其形态结构，为后续有关放线菌研究提供重要的实验数据。
材料和方法：1.实验材料：放线菌、琼脂培养基、显微镜、盖玻片、显微摄像机；2.实验步骤：（1）接种放线菌，利用琼脂培养基进行培养；（2）在培养好的放线菌中，选择纯种菌体，取一定量的菌体；（3）将放线菌菌体放到盖玻片上进行备用；（4）使用显微镜观察放线菌中的细芽和孢子的形态结构，进行拍照记录。
结果：通过显微镜对放线菌的形态进行观察，得到了如下结论：1.不同的放线菌之间表现出彼此独特的形态特征，表现出了很强的差异性；2.在显微镜镜头下观察，不同的放线菌的形态和结构也呈现出了很大的多样性；3.通过观察发现，放线菌中不仅存在菌丝，还产生广泛的分生孢子，形态结构也因菌种的不同而差异较大。
讨论与分析：放线菌形态的差异性和多样性是由于其环境适应性的结果。
在自然环境中，它能够适应不同的温度、水分、PH值等环境因素，因而其形态特征与结构也有所变化。
通过本实验，可以深入了解放线菌的生存规律和自身的适应性，对于进一步研究放线菌的生产和利用方向提供重要的数据支持。
结论：本实验通过观察分析放线菌的形态特征与差异性，得到了如下结论：放线菌具有很强的多样性和适应性，其形态特征和结构因菌种差异而不同，表现出很大的差异性和多样性。
微生物学实验七
二 实验材料
• 菌种：GHSS-Y • 盖玻片、载玻片、显微镜、解剖刀、镊
株（或霉菌CCSJ菌株）、霉菌LSG-2 菌株的个体形态图，并注明各部分名称 及简单描述。
子、解剖针、石炭酸复红或美蓝染液。
三 实验步骤
• 1 菌落形态及菌苔特征： 观察菌落的表面形状、大小、颜色（菌丝
、孢子）和边缘、在基质上着生紧密与 否
2 个体形态观察--Plan I
Plan II
（菌丝直径孢子丝形状）
注意事项
• 印片过程中，用力适中，不要错动，水 洗时水流应缓慢，以免破坏孢子丝形态 。
处取小量带有孢子的菌丝置于液体中， 再小心地把菌丝放开，去掉培养基，然 后用盖玻片盖上，注意不要产生气泡。 （省略酒精和水浸润，洗涤）
（2）镜检：
• 菌丝体经制片后可用低倍或高倍镜观察 。在观察时要注意菌丝直径的大小，菌 丝体有无隔膜，营养菌丝有无假根，无 性繁殖或有性繁殖时形成的孢子种类及 着生方式。各种霉菌都有其特征性的特 化结构。
（二）用显微镜观察霉菌装片 。
• 1）毛霉和黑根霉的孢子的形状、大小、 孢子囊、中轴体的形状，有无假根和匍 匐菌丝。
• 2）曲霉的分生孢子的形状、大小、顶囊 的形状、小梗排列、隔膜。
• 3）青霉的分生孢子的形状、大小、小梗 的排列方式，菌丝的隔膜。
（三）制作霉菌装片并观察其 个体形态。
• 1.直接制片法观察 （1）制片：在干净的载玻片上加一滴乳 酸石炭酸棉蓝染液，用解剖针从菌落边缘
放线菌的形态观察
放线菌的形态观察一．实验目的1.学习并掌握放线菌的形态观察法。
2.初步了解放线菌的形态特征。
二．实验原理放线菌菌丝体由基内菌丝、气生菌丝和孢子丝组成，且孢子丝形态、孢子排列及形状是放线菌重要的分类学指标。
制片时不采取涂片法，以免破坏细胞和菌丝体形态。
通常采用插片法或玻璃纸法并结合菌丝体简单染色进行观察。
在插片法中，首先将灭菌盖玻片插入接种有放线菌的平板，使放线菌沿盖玻片和培养基交接处生长而附着在盖玻片上，取出盖玻片可直接在显微镜下观察放线菌在自然生长状态下的形态特征，而且有利于对不同生长时期的放线菌形态进行观察。
三．实验器材1. 菌种青色链霉菌、弗氏链霉菌2. 培养基高氏1号培养基3. 仪器及其他用品培养皿、镊子、盖玻片、载玻片、显微镜、双层瓶、擦镜纸、酒精灯、火柴、接种针、玻璃棒、烧杯等四．实验步骤（一）实验前准备1. 配置200ml高氏1号培养液于锥形瓶中。
2. 将培养皿1包（10个/包）、盖玻片3包（10片/包）、镊子2把、高氏一号培养液放在密闭的高压蒸汽灭菌锅内进行灭菌。
3. 倒平板无菌操作将灭菌高氏一号培养液倒10皿。
（二）放线菌制片----插片法1. 划线接种无菌操作分别由青色链霉菌和弗氏链霉菌高氏1号培养基平板培养物挑取菌种在高氏1号培养基平板上密集划线接种，5板/菌。
2.插片无菌操作用镊子取灭菌盖玻片以约45度角插入平板琼脂接种线上，盖玻片垂直接种线，3片/皿。
3.培养将平板于28°C培养一周。
（三）放线菌形态观察1.用镊子小心取出盖玻片，用纸擦去背面培养物，将有菌面朝下放在载玻片上。
2. 气生菌丝与营养菌丝的比较观察直接用显微镜的低倍镜和高倍镜观察，一般情况是营养菌丝颜色透明，气生菌丝颜色较暗，并比营养菌丝粗二倍左右。
3. 孢子丝的观察用显微镜的油镜观察。
五．实验结果和分析1.放线菌孢子丝照片青色链霉菌 （10x100oil) 弗氏链霉菌(10x100oil) 2. 放线菌形态描述菌名 孢子丝形态 菌落描述 孢子形态 青色链霉菌 螺旋形 青色，表面干燥起皱，圆形，边缘整齐短柱形弗氏链霉菌 直线形 白色，表面干燥起皱，圆形，边缘整齐卵圆形附录高氏1号培养基（培养放线菌用）可溶性淀粉 20gNaCl 0．5gKNO 3 1gK 2HPO 4 0．5gMgSO 4 0．5gFeSO 4 0．01g琼脂 20g水 1000mlpH 7．2—7．4配制时，先用少量冷水，将淀粉调成糊状，倒入煮沸的水中，在火上加热，边搅拌边加入其它成分，溶化后，补足水分至1000mL 。
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3.接种：按照无菌操作的要求用接种针挑取菌种培养物在平板上密集划线接种。
4.插片：以无菌操作用酒精泡过并在酒精灯上灼烧的镊子将灭菌的盖玻片以大约与培养基成45°角插入平板内，并与划线垂直，每个平板插入3个盖玻片。
5.培养：将平板倒置，28℃培养7d。
本实验采用合成培养基进行培养，采用插片法取菌观察，不仅可观察到放线菌自然生长状态下的特征，而且便于观察不同生长期的放线菌形态，除此之外还可以采用玻璃纸法、印片法进行观察。链霉菌属（Streptomyces）共约1，000多种，它们具有发育良好的菌丝体，也是实验中选取它们观察的重要原因。
在显微镜下直接观察时，气丝在上层、基丝在下层，气丝色暗，基丝较透明。孢子丝依种类的不同，有直、波曲、各种螺旋形或轮生。在油镜下观察，放线菌的孢子有球形、椭圆、杆状或柱状。能否产生菌丝体及由菌丝体分化产生的各种形态特征是放线菌分类鉴定的重要依据。
实验七放线菌的形态观察
13生物基地 201300140059 刘洋2014-11-23
同组者：吕赞 刘沛余 马华峥
一、实验器材
1.菌种
青色链霉菌、弗氏链霉菌3-5 d高氏I号培养基平板培养物
2.仪器和其他用品
酒精灯，载玻片，盖玻片，载玻片夹子，镊子，显微镜，接种环，平皿，试管，烧杯，滴管，无菌水，酒精等
4)材料灭菌：将所配溶液装在三角烧瓶中并加棉塞，棉塞外包一层牛皮纸，并用麻绳捆好，用记号笔标记组号。取十个培养基，用牛皮纸包好，用记号笔标记大小面。同理盖玻片也用牛皮纸包好，再在盖玻片上加盖一层牛皮纸纸，用牛皮纸包好后，用记号笔标记，镊子也包好一起灭菌。将上述物品放入密封的加压灭菌锅中进行高压蒸汽灭菌121℃、20分钟。
六、实验结果
各种菌丝形态特征
菌种
基内菌丝形态
气生菌丝形态
孢子丝形态
青色链霉菌
较长，疏松，多分枝
毛状
紧密螺旋形
弗氏链霉菌
略短，较密，多分枝
厚絮状
直条状
青色链霉菌
弗氏链霉菌
七、思考题
1.镜检时如何区分放线菌基内菌丝、气生菌丝及孢子丝？
答：气生菌丝直生或分枝丝状，较基内菌丝粗，是指从基质伸向空气中的菌丝体。菌类的菌丝体多是匍匐在基质上，或是贯通基质而伸长的，为了孢子的形成而生长气生菌丝。在一定条件下，水生菌类也可以生长气生菌丝。真菌和放线菌的营养菌丝发育到一定时期，长出培养基外并伸向空间的菌丝称为气生菌丝。它叠生于营养菌丝上，以致可以覆盖整个菌落表面。在光学显微镜下，颜色较深，直径比营养菌丝粗，直形或弯曲，有的产生色素。在固体培养基上霉菌的菌丝分化为营养菌丝和气生菌丝。营养菌丝深入到培养基内吸收养料；气生菌丝向空中生长，有些气生菌丝发育到一定阶段分化成繁殖菌丝，产生孢子。
3．插片法观察放线菌
将放线菌接种在琼脂平板上，扦上灭菌盖玻片后培养，使放线菌菌丝沿着培养基表面与盖玻片的交接处生长而附着在盖玻上。观察时，轻轻取出盖玻片，置于载玻片上直接镜检。这种方法可观察到放线菌自然生长状态下的特征，而且便于观察不同生长期的形态。
4、放线菌的菌落特征
干燥、不透明，表面呈紧密的丝绒状，上有一层色彩鲜艳的干粉；菌落与培养基的连接紧密，难以挑取。其孢子的表面结构、形状及颜色在一定条件下比较稳定，是鉴定菌种的重要依据。放线菌在自然界分布很广，绝大多数为腐生，少数寄生。
3.培养基
高氏I号培养基（配方见附录）
二、实验目的
1.学习并掌握放线菌的形态、观察方法——插片法。
2.了解放线菌的基本形态。
3.巩固显微镜操作技术及无菌操作技术。
三、实验原理
1．高氏I号培养基
高氏 I 号培养基是用来培养和观察放线菌形态特征的合成培养基。此合成培养基的主要特点是含有多种化学成分已知的无机盐，这些无机盐可能相互作用而产生沉淀。因此，在混合培养基成分时，一般是按配方的顺序依次溶解各成分，甚至有时还需要将二种或多种成分分别灭菌，使用时再按比例混合。此外，合成培养基有的还要补加微量元素，如Fe元素。
6.镜检：用酒精泡过并在酒精灯上灼烧的镊子小心拔出盖玻片，擦去一面培养物，然后将有菌的一面朝下放在载玻片上，直接用低倍镜和高倍镜镜检，必要时可用油镜观察。
五、注意事项
在插片法操作过程中，注意在移动附着有菌体的盖玻片时勿碰动菌丝体，必须菌体朝上，以免破坏菌丝体形态。如果用0.1%美蓝对培养后的盖玻片进行染色后观察，效果会更好。
四、实验步骤
1.配制高氏I号培养基（200mL）：
1)按配方先称取可溶性溶粉、放入小烧杯中，并用少量冷水将淀粉尽量溶解，再加入沸水中，继续加热，使可溶性淀粉完全溶解。
2)称取其他各成分依次溶解。由于条件限制，对于微量成分FeSO4·7H2O，直接用分析天平称量，加入即可。
3)待所有药品完全溶解后，补充水分到所需的总体积，进行pH 调节到7.2～7.4。
2．放线菌
放线菌（actinomycetes）是指能形成分枝丝状体或菌丝体的一类革兰氏阳性细菌。广泛存在于自然界中，土壤中最多，主要以孢子繁殖，至今发现的共有五六十属，它与人类的关系极为密切，根据1978年的统计，在当时已发现的5128种抗生素中，有3165种为各种放线菌所产生，链霉菌属又占放线菌中的首位（占放线菌产生的抗生素中的87.5％）；有的放线菌还可用于生产维生素、酶制剂等；少数会引起人类、动物、植物的疾病。链霉菌属是放线菌中种类最多、分布最广、形态特征最典型的类群，其孢子丝的形态多样，而且性状较稳定，是对它们进行分类、鉴定的重要指示。因此学习如何培养和观察它们不仅对科学研究有很大的意义，对实际生活应用也有很大的帮助。
2.弗氏链霉菌和青色链霉菌的孢子丝有何区别?
答：青色链霉菌的孢子丝为螺旋形，而弗氏链霉菌的孢子丝为直线形。
八、附录
高氏I号培பைடு நூலகம்基
可溶性淀粉
20g
KNO3
1g
NaCl
0.5g
K2HPO4
0.5g
MgSO4
0.5g
FeSO4
0.01g
琼脂
20g
水
1000mL
pH
自然